Pemeriksaan udang untuk

Enterocytozoon hepatopenaei (EHP)

Screening shrimp for
Enterocytozoon hepatopenaei (EHP)

Andy Shinn
a.shinn@inveaquaculture.com
Pengenalan singkat tentang Microsporidia: A quick introduction to Microsporidia

• Parasit protozoa intraselular obligat. Obligate intracellular protozoan parasites

• Mereka diklasifikasikan dalam Kerajaan Fungi. They are classified within the Kingdom Fungi.
• Semua Microsporidia membentuk spora. Spora adalah tahap infeksi tahan
terhadap lingkungan eksternal yang mampu bertahan hidup. Mereka tidak
memiliki mitokondria. All Microsporidia are spore-forming. Spores are the resistant infectious stages capable of
surviving external environmental conditions. They lack mitochondria.

xenoma: single hypertrophied cell

Glugea sp. infecting the 3-spine stickleback 5mm

Gasterosteus aculeatus aculeatus
© BMK INVE 2022. All rights reserved
Pengenalan singkat tentang Microsporidia: A quick introduction to Microsporidia

• Saat ini ada lebih dari 1.500 spesies yang termasuk dalam 150+ genus. At present more than
1,500 species belonging to 150+ genera

• Beberapa spesies mikrosporidia dapat menyebabkan kastrasi parasitik, gigantisme,

dan perubahan jenis kelamin inang. Some microsporidian species can cause parasitic castration, gigantism and
change of host sex.

Xenoma: sel tunggal yang mengalami hipertrofi

xenoma: single hypertrophied cell

Glugea sp. infecting the 3-spine stickleback 5mm

Gasterosteus aculeatus aculeatus
© BMK INVE 2022. All rights reserved
 Penyakit 'Cotton shrimp' pada udang penaeid budidaya
‘Cotton shrimp disease’ in cultured penaeid shrimp

Terinfeksi:
infected

Tidak terinfeksi:
uninfected

Agmasoma EHP
Terinfeksi pada otot dan jaringan ikat bukan pada hepatopankreas Enterocytozoon
Infects muscle and connective tissue not the hepatopancreas
hepatopenaei
Spora besar berukuran 2 × 3 um. Large spores at 2 × 3 um
Udang menjadi terinfeksi ketika mereka memakan ikan yang terinfeksi (siklus hidup
tidak langsung). Shrimp become infected when they eat infected fish (indirect life-cycle)

© BMK INVE 2022. All rights reserved

 Sejumlah besar spora di dalam usus udang vannamei
A mass of spores inside the intestine of a whiteleg shrimp

Polar filament injects a cell

Polar filament extruded

Turns inside out
Sporoplasm (the parasite) travels
down the tube into the cell

Taken from Keeling & Fast (2002) Annu. Rev. Microbiol. 56:93–116
1.1 × 0.7 μm
© BMK INVE 2022. All rights reserved
 Otoinfeksi sangat Proses infeksi eksperimental
mungkin terjadi Experimental infection
Autoinfection highly probable process

Fresh minced
Pengobatan di kolam yang hepato
terinfeksi harus dilakukan 2.56 x 107 spores
dengan pendekatan ganda (2.25 g fed to 30
DAN berkelanjutan shrimp av. 2.5 g)
Treatment in infected ponds needs to
be double-pronged AND continuous

7 days

1e4 ± 3.9e4
(n=15)

© BMK INVE 2022. All rights reserved

 Terdapat banyak faktor yang dapat mempengaruhi transmisi
There are many factors that may have an influence on the horizontal
horizontal spora dalam pembenihan dan kolam, termasuk:
transmission of spores within hatcheries and ponds, including:
•Produksi spora di kolam pada T0 (yaitu beban spora). • spore production in the pond at T0 (i.e., spore load);
•Jumlah hewan yang terinfeksi. • the number of animals infected;
•Ukuran dan kepadatan udang. • shrimp size and density;
•Substrat kolam - beban organik, TSS (Total Suspended Solids), • the pond substrate - organic load, TSS, condition on the bottom,
kondisi di dasar kolam, kecepatan pergantian/kebersihan. rate of flushing/cleaning;
•Waktu kontak spora dengan udang. • spore to shrimp contact time;
• water quality (pH, Ca2+), etc.
•Kualitas air (pH, Ca2+), dll.
• aerosols
•Aerosol.

Video © A. Shinn

© BMK INVE 2022. All rights reserved

© BMK INVE 2022. All rights reserved
 Membelah udang untuk memeriksa adanya EHP Periksa ekor, karena ujung yang bengkak dapat
Dissecting the shrimp to check for EHP mengindikasikan adanya infeksi bakteri sistemik
secara umum
Check the tail as swollen tips may allude to a general systemic
bacterial infection

Normal tail

Video © R. Wongwaradechkul & A. Shinn

Periksa kondisi tubuh - tetapi perlu

diingat bahwa udang dengan cangkang
yang lunak mungkin mengalami infeksi
dalam bentuk tertentu
Check body condition –
just be aware that shrimp with soft shells may
have an infection of some form
Swollen tail

© BMK INVE 2022. All rights reserved

 HP
Potong usus dan
ST Intestine
letakkan pada slide
Potongan lateral dari bersih
hepatopankreas (HP) Cut intestine and place on a
Lateral section of the HP clean slide
OE

ant
med ant post
post

ant post Usus ditempatkan pada slide. Feses diperas menggunakan coverslip dan kemudian usus
dipasang di dalam 1,5% NaCl. Titik-titik pigmen menunjukkan bahwa hewan ini sedang
mengalami stres dan mungkin menghadapi masalah kesehatan.
The gut is placed on a slide. The faeces squeezed out using a coverslip and then the gut mounted in 1.5% NaCl.
The pigmentation spots suggest that this animal is under stress and perhaps dealing with a health issue

Anda ingin
Potongan kecil dari tubulus-tubulus hepatopankreas persiapan yang
bagian anterior, median, dan posterior ditempatkan
pada slide terpisah dan diperiksa
rata dan bagus
Small pieces of the tubules from the anterior, median and posterior You want nice flat
hepatopancreas are placed on a separate slide and examined preparations

© BMK INVE 2022. All rights reserved

... dan dengan menggunakan mikroskop, mempersiapkan potongan-potongan
hepatopankreas dan usus.
… and by microscopy, preparing sections of the hepatopancreas and intestine

HP Tempat pertemuan antara usus dan

hepatopankreas adalah tempat
yang baik untuk menemukan EHP -
ant post jauh lebih mudah daripada di
dalam hepatopankreas
Where the intestine meets the HP is a good place
Usus to find EHP – much easier than in the HP

Di bawah perendaman minyak,

spora akan muncul dalam gugus-
gugus dan mungkin memiliki
warna biru-hijau yang samar
Under oil immersion, the spores will appear in
clusters and may have a faint blue green colour
Periksa adanya spora dengan
to them
menggunakan perendaman minyak x100
Spora matang pada mikroskop

© BMK INVE 2022. All rights reserved

Baik, mari kita coba membuatnya lebih mudah. Let’s try and make this easier
Dengan menambahkan tetes phloxine B pada persiapan
usus dan kemudian membiarkannya selama 5 - 10 menit
sebelum memeriksa slide di bawah minyak, akan sangat
mudah untuk menemukan spora (bahkan jika Anda
menderita buta warna!).
By adding a drop of phloxine B on the intestinal prep and then leaving it for
5 – 10 minutes before examining the slide under oil makes it very easy to
find spores (even if you are colourblind!)

© BMK INVE 2022. All rights reserved

 Mendeteksi EHP pada udang post-larva. Detecting EHP in shrimp post-larvae

Video © R. Wongwaradechkul

© BMK INVE 2022. All rights reserved

 Mengestimasi kerugian ekonomi akibat kehilangan akibat EHP
Estimating economic losses due to EHP losses

Pada tahun 2019, Thailand menghasilkan sebanyak 304.000 ton P. vannamei.

Harga rata-rata pada tahun 2017 adalah USD 4.948 per ton.
304,000 tonnes of P. vannamei produced in 2019 in Thailand. Average price in 2017 was USD 4,948 tonne

84,28% infeksi EHP di tiga provinsi Thailand.

84.28% EHP infection across three Thai provinces

Dari sebuah studi yang sedang berlangsung dengan 106 kolam dan 11 kali panen
berturut-turut,
Kolam yang tidak terinfeksi memiliki berat rata-rata 18,7 gram, sedangkan untuk
yang terinfeksi EHP adalah 13 gram *
FCR adalah 1,39 (tidak terinfeksi) dan 1,47 (terinfeksi EHP).
From an ongoing study of 106 ponds and 11 consecutive crops
Uninfected ponds had an av. wt of 18.7 g while for EHP it was 13 g *
FCRs were 1.39 (uninfected) and 1.47 (EHP infected)

Meskipun perbedaan beratnya sebesar 30,48%, biaya produksi meningkat

sebesar 23,2%*
Though the weight diff was 30.48%, prod. costs were 23.2% higher*

Kerugian berkisar antara 78.398 ton (pada tingkat 58,82%) hingga 112.332 ton
(pada tingkat 84,28%), Setara dengan kerugian antara USD 387,91 juta hingga
USD 555,82 juta.
Losses are 78,398 (at 58.82%) to 112,332 tonnes (at 84.28%)
Equates to losses of between USD 387.91 M to USD 555.82 M

*Poulain, Shinn et al. (in prep)

Images courtesy of Rayong Shrimp Club of a mortality event

© BMK INVE 2022. All rights reserved
 Apakah Anda ingin memiliki
poster EHP untuk peternakan
Anda? Silakan hubungi salah
satu tim INVE untuk
mendapatkan salinannya.
Would you like an EHP poster for your farm?
Then please contact one of the INVE team to
receive a copy

© BMK INVE 2022. All rights reserved

Terima kasih untuk perhatian anda Thank you for your kind attention
a.shinn@inveaquaculture.com

Salman Haris Fuadi Yulius Dewantoro Arfindee Abru

s.fuadi@inveaquaculture.com y.dewantoro@inveaquaculture.com a.abru@inveaquaculture.com

Ester Rumantiningsih Agus Subagyo

e.rumantiningsih@inveaquaculture.com a.subagyo@inveaquaculture.com

Technical Services INVE

© BMK INVE 2022. All rights reserved