MODUL IV.

PROTEIN

PRAKTIKUM BIOKIMIA 2023

 PROTEIN:

Makromolekul organik
yang tersusun atas asam
amino dengan susunan
kompleks
CIRI-CIRI Tersusun atas atom C,
H, N, O dan S (pada

PROTEIN protein tertentu)

Tersusun atas satu

atau lebih rantai
polipeptida

Terdiri atas ≥ 50 asam

amino

Rantai asam amino

dihubungkan oleh
ikatan peptida
IKATAN PEPTIDA
Ekstraksi
Alat & Bahan

Mortar
Seperangkat alat gelas

Protein 25 g daging ikan

150 mL aquades
Kertas filter

1. Lumatkan 25 g 2. Kocok campuran 3. Saring endapannya

daging ikan dengan tersebut dengan kuat dan filtrat yang
150 ml aquades sehingga diperoleh diperoleh siap
koloid yang baik digunakan untuk uji
kadar protein
Denaturasi
Alat & Bahan

Tabung reaksi
Pipet kaca

Protein Hotplate
5 mL larutan protein
Asam asetat 10 %

1. Masukkan 5 mL 2. Tambahkan 10 tetes 3. . Panaskan tabung

larutan protein ke asam asetat 10% dan menggunakan hotplate
dalam tabung reaksi kocok campuran selama 5 menit
tersebut sehingga
diperoleh koloid yang
baik
 Total Pengguna

Kualitatif

Uji Biuret & Uji

Uji Kadar Ninhidrin
Protein Kuantitatif

Metode Biuret
Uji Kualitatif
Alat & Bahan

Tabung reaksi
Pipet kaca

Biuret 5 mL hasil ekstraksi

2 tetes reagen Biuret

1. Sebanyak 5 mL 2. Campuran sampel

filtrat hasil ekstraksi dan reagen dikocok
daging ikan
ditambah dengan 2
tetes reagen biuret
Uji Kualitatif
Alat & Bahan

Tabung reaksi
Pipet kaca

Ninhidrin Hotplate
5 mL hasil ekstraksi
5 tetes reagen Ninhidrin 0,1%

1. Sebanyak 5 mL 2. Campuran tersebut

filtrat hasil ekstraksi dipanaskan hingga
daging ikan mendidih
ditambah dengan 5
tetes ninhidrin 0,1%
Uji Kuantitatif
Alat & Bahan

Tabung reaksi
Kuvet

Biuret Spektrofotometer UV-Vis

Larutan protein standar
Aquades
Reagen biuret
(Pembuatan kurva standar)

1. Masukkan ke dalam 2. Tambahkan air 3. Tambahkan 6 mL 4. Diamkan tabung

tabung reaksi sampai volume total pereaksi biuret ke reaksi pada suhu
masing-masing 0; masing-masing 4 mL dalam masing-masing ruang selama 30 menit
0,1; 0,2; 0,4; 0,6; 0,8; tabung reaksi dan sampai membentuk
dan 1 mL larutan campur merata warna ungu sempurna
protein standar

5. Ukur absorbansinya 6. Buat kurva standar

(OD) pada 540 nm hubungan antara
konsentrasi protein dan
OD
Uji Kuantitatif
Alat & Bahan

Tabung reaksi
Spektrofotometer

Biuret Larutan protein standar

Aquades
Reagen biuret
(Penetapan kadar protein)

1. Masukkan ke dalam 2. Tambahkan 6 mL 3. Diamkan tabung 4. Ukur absorbansinya

tabung reaksi 1 mL pereaksi biuret ke reaksi pada suhu ruang pada 520 nm
larutan sampel dan dalam masing-masing selama 30 menit
tambahkan air tabung reaksi dan sampai membentuk
sampai volume total campur merata warna ungu sempurna
4 mL

Kadar protein dapat ditentukan berdasarkan kurva standar

Penetapan Kadar Protein
Thank You!
Pembahasan
BERDASARKAN HASIL PERCOBAAN, SEBUTKAN
SIFAT-SIFAT PROTEIN YANG BISA ANDA AMATI!

JELASKAN PRINSIP ANALISIS PROTEIN

MENGGUNAKAN METODE BIURET DAN
NINHIDRIN!

APA FUNGSI BSA DALAM PERCOBAAN INI?

DAPATKAH BSA DIGANTI DENGAN PROTEIN JENIS
LAIN? JELASKAN!