Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

IJIE Int. J.Indust. Entomol. 35(1) 58-62 (2017)

ISSN 1598-3579, http://dx.doi.org/10.7852/ijie.2017.35.1.58
[ Catatan ]

Evaluasi Komparatif Filtrat Konidia, Blastospora dan Kultur dari Jamur

Entomopatogen terhadapTetranychus urticae
Hwi-Geon Yun, Dong-Jun Kim, Ji-Hoon Lee, Ji-In Ma, Won-Seok Gwak, and Soo-Dong Woo*
Departemen Biologi Pertanian, Fakultas Pertanian, Ilmu Kehidupan & Lingkungan, Universitas Nasional Chungbuk, Cheongju 28644, Republik
Korea

Abstrak

Tungau laba-laba berbintik dua (Tetranychus urticae) telah mengalami kerusakan pada lebih dari 200
tanaman inang di seluruh dunia. Banyak petani mengandalkan acaricides kimia untuk mengendalikan
tungau, tetapi penyalahgunaan acaricides telah menyebabkan resistensi yang serius terhadap tungau.
Untuk mengatasi masalah tersebut, telah dipelajari pengendalian mikroba menggunakan jamur
entomopatogen. Cendawan entomopatogen berperan penting dalam pengendalian hama, dan sebagian
besar produk kulturnya telah terbukti memiliki virulensi terhadap populasi hama. Dalam penelitian ini,
kami mengevaluasi dan membandingkan virulensi filtrat kultur, konidia udara, dan blastospora dari
Metarhizium anisopliae4-2 danBeauveria bassiana2R-3-3-1, masing-masing, di antara jamur patogen
tungau laba-laba berbintik dua. Hasilnya, virulensi dikonfirmasi pada semua perlakuan, dan akumulasi
angka kematian antara 77 dan 100% dalam 7 hari. Terutama, pengobatan dengan filtrat biakan jamur
Diterima:12 September 2017
saja menunjukkan virulensi yang cukup tinggi, dan pengobatan kombinasi dengan konidia udara atau Diperbaiki:14 September 2017
blastospora meningkatkan aktivitas. Namun, waktu rata-rata mematikan perawatan tidak berbeda secara Diterima:15 September 2017
signifikan. Ketika dua isolat dibandingkan,M. anisopliae4-2 menunjukkan virulensi lebih tinggi dariB.
Kata kunci:
bassiana2R-3-3-1. Hasil ini menunjukkan bahwa dua isolat jamur terpilih dan produk kulturnya dapat
blastospora,
digunakan secara efektif untuk mengendalikan tungau laba-laba berbintik dua.
Konidia,
Filtrat kultur,
© 2017 Perhimpunan Ilmu Serikultur Korea Int. Jamur entomopatogen,
J.Indust. Entomol. 35(1), 58-62 (2017) Tetranychus urticae

Perkenalan perlu mencari strategi alternatif untuk mengendalikan populasi tungau laba-

laba berbintik dua.

Tungau laba-laba berbintik dua,Tetranychus urticaeKoch, telah mengalami Cendawan entomopatogen berperan penting dalam pengendalian

kerusakan lebih dari 200 tanaman inang, termasuk sayuran, tanaman buah, populasi hama. Jamur ini umumnya tidak berbahaya bagi manusia dan

tanaman pangan dan tanaman hias (Gatarayiha et al., 2010). Untuk diketahui tidak berdampak negatif terhadap lingkungan. Juga, jamur ini

mengendalikan tungau ini, metode yang paling umum digunakan adalah dapat secara efektif mengendalikan hama pengisap karena menginfeksi

acaricides kimia, tetapi penggunaan acaricides yang berlebihan dalam jangka dengan penetrasi ke dalam kutikula serangga (Laceyet al., 2001). Sejak

panjang telah mengakibatkan resistensi dan telah menjadi masalah serius penggunaan jamur entomopatogen, lebih dari 170 produk pengendalian

(Shinet al., 2017). Dengan demikian, ada sebuah hama telah dieksploitasi berdasarkan setidaknya dua belas spesies.

*Penulis yang sesuai.

Soo Dong Woo
Departemen Biologi Pertanian, Fakultas Pertanian, Ilmu Kehidupan & Lingkungan, Universitas Nasional Chungbuk,
Cheongju 28644, Republik Korea.
Telp: +82-43-261-2553 / FAKS: +82-43-271-4414 E-
mail: sdwoo@cbnu.ac.kr © 2017 Masyarakat Ilmu Serikultur Korea

58
 Int. J.Indust. Entomol.
Vol. 35, No. (1), hlm. 58-62 (2017)

jamur. Misalnya berbagai jamur entomopatogen seperti Beauveriasp., agar (PDA, Difco, USA) selama 2 minggu pada suhu 25 °C. Kemudian,

Lecanicilliumsp.,Metarhiziumsp., danPaecilomyces sp., telah digunakan biakan berumur dua minggu digunakan untuk setiap percobaan dan

untuk mengendalikan beragam hama (de Faria dan Wright, 2007). Cara biakan stok dari masing-masing isolat disimpan pada suhu -70 °C

pembuatan fungi ini terbagi menjadi dua cara yaitu aerial conidia dalam sampai digunakan lebih lanjut. Konidia jamur berumur 14 hari

medium padat dan blastospora dalam medium cair. Konidia udara lebih dikumpulkan dengan mengikis jamur dari pelat PDA dan

stabil terhadap kondisi lingkungan yang tidak sesuai daripada menangguhkan bahan dalam larutan Tween-80 0, 02% (Difco, USA).

blastospora, tetapi produksi blastospora melalui kultur cair diperlukan Suspensi konidia diaduk dengan kuat dan melalui lapisan keempat

untuk mendapatkan produk dalam jumlah besar dalam waktu singkat. kain keju yang steril untuk menghilangkan kotoran miselium.

Selain itu, cendawan entomopatogen menghasilkan berbagai senyawa Konsentrasi konidia disesuaikan menggunakan hemositometer, dan

dan metabolit, dan produk tersebut umumnya memiliki aktivitas dan viabilitas ditentukan pada PDA dengan 0,05% benomyl (bahan aktif

fungsi yang beragam. Terutama, enzim hidrolisis kutikula ekstraseluler 95%, Sigma, USA). Kemudian, 50 μL suspensi konidial (9 × 105

(protease dan kitinase) dan toksin (destruxin ofM. anisopliaedan konidia/mL) dengan viabilitas lebih dari 90% diinokulasi dalam 300

beauvericin dariB. bassiana) yang dihasilkan oleh jamur entomopatogen mL PDB (pH 5,6) dalam labu 1000 mL. Sampel dikultur pada suhu 25

sangat terkait dengan aktivitas insektisida dan enzim serta racun ini °C dalam gelap dengan pengocokan 150 rpm selama dua minggu.

dapat dipasok oleh kultur cair (St. Legeret al., 1986; Petlamul dan Setelah dua minggu, sampel disentrifugasi pada 10.000 × g selama

Prasertsan, 2012). 20 menit pada suhu 4 °C, dan kemudian sel yang diendapkan dan

Baru-baru ini, kami melaporkan beberapa isolat jamur tungau supernatan dipisahkan. Sel-sel yang diendapkan dicuci dua kali

laba-laba berbintik dua (Shinet al., 2017). Dalam penelitian ini, di dengan air suling steril dan melalui lapisan ganda kain keju steril

antaranya, kami mengevaluasi virulensi dua isolat jamur terpilih untuk menghilangkan puing-puing miselium. Supernatan disaring

untuk berbagai produk kultur (filtrat kultur jamur, blastospora melalui kertas saring membran (Advantec No. 2, Advantec, Tokyo,

dan konidia) terhadap tungau laba-laba berbintik dua. Studi ini Jepang) untuk memisahkan massa miselium dan spora, dan Filtrat

mengusulkan kemungkinan produk kultur oleh jamur kultur disaring kembali melalui saringan membran 0,2 μm (filter

entomopatogen sebagai agen biologis terhadap tungau laba- jarum suntik 28 mm, Corning, New York, AS). Semua filtrat kultur

laba berbintik dua. jamur disimpan pada suhu -70 °C hingga digunakan lebih lanjut.

Bioassay
Bahan dan metode
Bioassay dilakukan untuk mengkonfirmasi kemanjuran kontrol tungau

Tungau laba-laba berbintik dua di antara filtrat kultur jamur, blastospora, dan konidia. Suspensi konidia

dalam 0,02% Tween-80 atau filtrat kultur jamur disesuaikan dengan 1 ×

Tungau laba-laba berbintik dua dikumpulkan dari koloni biakan 108konidia/mL menggunakan hemocytometer. Suspensi blastospora juga

berkelanjutan di Laboratorium Ekotoksikologi Serangga, Universitas disesuaikan dengan metode yang sama. Bioassay dilakukan dalam cawan

Nasional Chungbuk, Korea. Populasi tungau berbintik dua dibesarkan petri 60 mm yang berisi kapas lembab, dan potongan daun 25 mm

dan dipertahankan pada kacang polong (Pisum sativumL.) pada suhu berbentuk lingkaran dari kacang polong diletakkan di atas piring. Dua

25±1 °C dengan kelembapan relatif 70% dan fotoperiode 12:12 (L:D). puluh dua nimfa tungau laba-laba ditempatkan pada piringan daun

Untuk mendapatkan betina dengan usia tetap untuk bioassay, menggunakan sikat rambut, dan kemudian 1 mL suspensi yang

deutonymph yang diam dikumpulkan dan diletakkan di atas cakram mengandung masing-masing filtrat kultur jamur, blastospora, konidia

daun. Tungau yang baru muncul digunakan untuk percobaan 2 hari dan campurannya disemprotkan ke setiap cawan dengan SD tower

kemudian (Shinet al., 2017). sprayer (Shinet al., 2011). Perlakuan dipertahankan pada kelembaban

relatif lebih dari 70% dalam ruang pada suhu 25±1 °C dan fotoperiode

Pertumbuhan jamur dan produksi filtrat kultur 12:12 (L:D) selama 7 hari. Tungau laba-laba berbintik dua diperiksa setiap

hari untuk kematian, dan bioassay diulang tiga kali.

Jamur entompatogen dengan virulensi tinggi terhadap tungau

laba-laba bintik dua (Shinet al., 2017) dikultur pada dextrose kentang

59
 Hwi-Geon Yunet al.
Aktivitas insektisida produk kultur jamur

Analisis statistik Hasil

Data mortalitas dianalisis dengan statistik SPSS 24 (IBM, USA). Median
lethal time untuk perawatan menggunakan analisis probit. Data menjadi
sasaran analisis varians satu arah (ANOVA) dan perbandingan antar
kelompok dilakukan dengan analisis uji jarak berganda Duncan. Data
dinyatakan sebagai rata-rata ± kesalahan standar (SE) dan signifikansi
statistik ditetapkan pada tingkat α <0,05 konvensional.
Virulensi dariM. anisopliae4-2 danB. bassiana2R-3- 3-1
terhadap tungau laba-laba berbintik dua dievaluasi untuk
aktivitas spesifik pada filtrat kultur jamur, konidia udara, dan
blastospora. Virulensi dikonfirmasi pada semua perlakuan (Gbr.
1), dan akumulasi angka kematian berbeda secara signifikan
pada semua perlakuan kecuali filtrat kultur jamur saja.

Gambar 1.Kontrol kemanjuran tungau laba-laba berbintik dua dengan filtrat kultur jamur, blastospora, dan konidia udara. Kontrol, 0,02% tween-80;
FCF, filtrat kultur jamur; AC, konidia udara; BS, blastospora. Nilai yang diikuti oleh huruf yang berbeda berbeda secara signifikan antara perlakuan
berdasarkan tanggal (uji Duncan, P <0,05). Bilah vertikal sesuai dengan kesalahan standar.

Tabel 1.Evaluasi mortalitas dan waktu mematikan rata-rata terhadap tungau laba-laba berbintik dua

Kematian ± SE (%) LT50

4 hari 7 hari (hari)

Kontrol 41 ± 2,1a 57,4 ± 4,3a 5.97

FCF 39.3 ± 4.3a 77 ± 1,5 b 4.79
AC 67,4 ± 8,1 SM 96,7 ± 3,3 de 2.85
4-2 BS 78,1 ± 4,1 c 98,3 ± 1,7 e 2.69
AC + FFC 70,6 ± 2,2 SM 98,2 ± 1,8 e 3.01
BS + FCF 70,2 ± 4,8 SM 100 ± 0 e 3.02
FCF 45,8 ± 2,1a 83,3 ± 2,7 b 3.96
AC 60 ± 2,3 b 89,3 ± 1,3 cd 3.52
2R-3-3-1 BS 71,6 ± 1,9 SM 96,7 ± 1,6 de 2.78
AC + FFC 72,2 ± 2,9 SM 94,3 ± 3,1 de 2.49
BS + FCF 61,4 ± 6,2 b 98 ± 2 e 3.35
Nilai disajikan sebagai rata-rata ± SE. Berarti dalam kolom yang sama diikuti huruf yang sama tidak berbeda nyata dengan menggunakan uji jarak berganda Duncan.

60

Gambar 2.Tungau laba-laba bercak dua menginfeksi masing-masing isolat
pada 7 hari setelah kematian. A, mayat terinfeksi olehMetarhizium anisopliae
4-2; B, mayat terinfeksi olehBeauveria bassiana2R-3-3-1.
dalam waktu 4 hari. Pada hari ke-7, akumulasi angka kematian
berbeda nyata pada semua perlakuan dan antara 77 dan 100%
(Tabel 1). Menariknya, pengobatan filtrat kultur jamur saja
menunjukkan virulensi yang cukup tinggi dengan 77 dan 83% untuk
M. anisopliae4-2 danB. bassiana2R-3-3-1, masing-masing. Perlakuan
blastospora saja menunjukkan virulensi tertinggi pada kedua fungi
dengan 97 dan 98%.M. anisopliae4-2 danB. bassiana2R-3-3-1,
masing-masing. Perlakuan kombinasi dengan filtrat kultur jamur
meningkatkan mortalitas oleh konidia udara dan blastospora pada 7
hari pasca perawatan bila dibandingkan dengan semua perlakuan
saja. Namun, median waktu mematikan tidak berbeda nyata antara
perlakuan gabungan dan tunggal (Tabel 1). Ketika dua isolat
dibandingkan,M. anisopliae4-2 menunjukkan virulensi lebih tinggi
dariB. bassiana2R-3-3- 1 pada semua perlakuan kecuali filtrat biakan
jamur saja. Mayat dari semua perlakuan, kecuali filtrat biakan jamur
saja, menunjukkan miselia yang terlihat pada permukaan tubuh
(Gbr. 2).
Diskusi
Secara umum, pengendalian tungau bintik sulit dilakukan karena
reproduksinya yang cepat dan perkembangan resistensinya. Terutama,
pestisida kimia telah menyebabkan banyak masalah seperti
perkembangan resistensi tungau dan pencemaran lingkungan. Untuk
mengatasi permasalahan insektisida kimia tersebut, telah dikembangkan
pengembangan pestisida hayati menggunakan jamur entomopatogen.
Untuk menghasilkan agen hayati yang sukses dan komersial, diperlukan
virulensi yang tinggi terhadap hama sasaran, produksi massal dengan
pertumbuhan yang cepat, dan sporulasi yang melimpah (Fenget al.,
1994). Kebutuhan ini dimungkinkan dengan produksi blastospora dalam
kultur cair. Blastospora yang dikembangkan
Int. J.Indust. Entomol.
Vol. 35, No. (1), hlm. 58-62 (2017)
dari hifa dalam kultur cair dapat diperoleh dalam 3-4 hari.
Blastospora ini dikenal berkecambah lebih cepat daripada konidia
udara, dan ini bisa efektif untuk mengendalikan hama (Jacksonet al.,
1997; Vegaet al., 1999). Filtrat kultur jamur entomopatogen dalam
kultur cair memiliki efek insektisida atau pencegahan makan hama
(Kimet al., 2013). Filtrat ini memiliki berbagai aktivitas enzim, seperti
kitinase, lipase, dan protease, serta berguna sebagai agen pestisida
(Yoonet al., 2013). Dalam penelitian ini, virulensi tinggi ditunjukkan
pada blastospora serta filtrat kultur, dan campuran blastospora dan
filtrat kultur, yang merupakan produk dari kultur cair, menunjukkan
efek sinergis (Gbr. 1, Tabel 1). Dalam hasil ini, akumulasi mortalitas
dari kelompok kontrol cenderung sedikit tinggi. Kami menduga
bahwa kondisi lembab menyebabkan kematian yang tinggi pada
kelompok kontrol karena serangga percobaan, tungau laba-laba
berbintik dua, sangat sensitif terhadap kondisi lembab. Namun,
pengobatan isolat jamur dan produk kulturnya meningkatkan
mortalitas dengan jelas membandingkan kontrol (Tabel 1, Gambar
1) dan kematiannya, kecuali filtrat kultur jamur, dikonfirmasi oleh
jamur dari mikosis (Gbr. 2).
Selain itu, baru-baru ini telah dikomunikasikan bahwa jamur
entomopatogen dapat memainkan peran yang tidak terduga di alam
seperti endofit jamur, antagonis fitopatogen, mikroorganisme
rizosfer yang bermanfaat, dan promotor pertumbuhan tanaman.
Efek jamur entomopatogen ini dihasilkan dari produksi berbagai
metabolit, seperti antibiotik, senyawa, dan enzim (Vegaet al., 2008).
Metabolit sekunder jamur entomopatogen diketahui memiliki sifat
insektisida, antikanker, antimikroba, dan antioksidan yang bervariasi
(Shinet al., 2017).
Studi ini menunjukkan bahwa produk kultur cair, termasuk
blastospora dan filtrat kultur oleh dua isolat jamur,M. anisopliae4-2
danB. bassiana2R-3-3-1, akan menjadi agen biologis yang kuat
melawan tungau laba-laba berbintik dua, dan kemudian kami
berharap menjadi agen perlindungan tanaman yang sangat baik jika
aktivitas insektisida yang tinggi dari produk kultur cair dan peran tak
terduga dari jamur entomopatogen diterapkan bersama.
Terima kasih
Pekerjaan ini didukung oleh Korea Institute of Planning and
Evaluation for Technology in Food, Agriculture, Forestry and
Fisheries (IPET) melalui Program Pengembangan Teknologi
Industri Agri-Bio, didanai oleh Kementerian Pertanian, Pangan
dan Pedesaan (MAFRA) (115086-2).
61
 Hwi-Geon Yunet al.
Aktivitas insektisida produk kultur jamur
Referensi
de Faria MR, Wrightt SP (2007) Mycoinsektisida dan Mycoacaricides:
Daftar lengkap dengan cakupan seluruh dunia dan klasifikasi jenis
formulasi internasional. Kontrol Bio 43, 237-256.
Feng MG, Poprawski TJ, Khachatourians GG (1994) Produksi,
formulasi dan aplikasi jamur entomopatogen Beauveria bassiana
untuk pengendalian serangga: status saat ini. Biocontrol Sci
Technol 4, 3-34.
Gatarayiha MC, Laing MD, Miller RM (2010) Efek in vitro dari
flutriafol dan azoxystrobinBeauvaria bassianadan khasiatnya
terhadapTetranychus urticae. Pest Manag Sci 66, 773-778. Jackson
MA, Mcguire MR, Lacey LA, Wrightt SP (1997) cair
kultur produksi blastospora toleran pengeringan dari jamur
bioinsektisidaPaecilomyces fumosoroseus. Mycol Res 101,
35-41.
Kim JJ, Jeong GY, Han JH, Lee SY (2013) Pengendalian Biologis Aphid
Menggunakan Kultur Jamur dan Filtrat Kultur dariBeauveria bassiana.
Mikobiologi 41, 221-224.
Lacey LA, Frutos R, Kaya HK, Vail P (2001) Patogen Serangga as
Agen Pengendalian Hayati: Apakah Mereka Memiliki Masa Depan? Kontrol Bio 21,
230-248.
Petlamul W, Prasertsan P (2012) Evaluasi StrainMetarhizium
anisopliaeDanBeauveria bassianamelawanSpodoptera liturapada
62
Dasar Virulensinya, Kecepatan Perkecambahan, Produksi Konidia,
Pertumbuhan Radial dan Aktivitas Enzim. Mikobiologi 40, 111-116.
Shin TY, Lee WW, Ko SH, Ji Z, Shin DH, Son KHet al. (2011)
Evaluasi Awal dariPaecilomyces lilacinusHY-4 untuk Mengontrol
Tetranychus urticae. Int J Indust Entomol 22, 25-28.
Shin TY, Bae SM, Kim DJ, Yun HG, Woo SD (2017) Evaluasi
virulensi, toleransi terhadap faktor lingkungan dan aktivitas
antimikroba jamur entomopatogen terhadap tungau laba-laba bintik
dua, Tetranychus urticae. Mycoscience 58, 204-212.
St. Leger RJ, Charnley AK, Cooper RM (1986) Penurunan kutikula
enzim jamur entomopatogen: Mekanisme interaksi antara
enzim patogen dan kutikula serangga. J Invertebr Pathol 47,
295-302.
Vega FE, Jackson MA, McGuire MR (1999) Perkecambahan konidia
dan blastospora dariPaecilomyces fumosoroseuspada kutikula
kutu kebul silverleaf,Bemisia argentifolii. Mikopatologi 147, 33-35.
Vega FE, Posada F, Catherine Aime M, Pava-Ripoll M, Infante F,
Rehner SA (2008) endofit jamur entomopatogen. Kontrol
Bio 46, 72-82.
Yoon HG, Shin TY, Yu MR, Lee WW, Ko SH, Bae SMet al. (2013)
Karakterisasi Jamur Entomopatogen dariTrialeurodes
vaporariorumdan Evaluasi sebagai Insektisida. Mikrobiol J Korea
49, 64-70.