Analisis Kuantitatif FE dalam Serum

I. Serum

 Mengambil Sel darah merah, dimasukkan kedalam tabung

 Tabung tidak diberikan Antikoagulan
 Tunggu sampai menjendal
 Sentrifuse dengan kecepatan 3.000 rpm selama kurang lebih 15 menit
 Sampai terpisah antara cairan serum dan sel-sel darah

II. Bahan dan Alat

 HCL 0,35 N
 Larutan Trikloroasetat acid (TCA) 20% : untuk mendaturasi protein dalam serum
 Larutan Kalium asetat 50% : 50g dilarutkan dalam 100ml aquabidestilata
 Larutan Hidroquinon 1& : 50g dalam 5 mL aquabidestilata)
 Orthophenantrolin 0,1 % : 100mg orthophenantroline-HCL dilarutkan dalam 100 mL
aquabidestilata
 Larutan Standar Fe 1 mg

III. Cara Kerja

 Masukkan 1 mL serum kedalam tabung sentrifuse

 Tambahkan 1 mL aquabides dan 1 mL HCL 0,35 N
 Vortex kurleb 10 detik
 Diamkan pada suhu kamar kurleb 1 jam (inkubasi)
 Tambahkan 1 mL Trichloroasetat Acid (TCA) 20%, lalu vortex kurleb 10 detik
 Diamkan pada suhu kamar selama 15 menit
 Sentrifuge dengan kecepatan 2000 rpm selama 15 menit
 Siapkan 7 tabung reaksi dan tambahkan zat seperti pada tabel

Blanko (mL) Sampel (mL) Standar (mL)

Reagen
1 2 3 4 5 6 7
Aquabidestilata 5 3 4,5 4 3,5 3 2,5
Larutan Standar -   - 0,5 1 1,5 2 2,5
Supernatan  - 2  -  - -  -  - 
Kalium asetat 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25 0,25
Hidroquinon 1% 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15 0,15
Orthophenantrolin 1% 1 1 1 1 1 1 1

 Campur/vortex semua larutan dalam tabung reaksi tersebut selama 10 detik

 Diamkan selama 20 menit pada suhu kamar
 Dimasukkan kedalam cuvet
 Baca absorbansi menggunakan spektrofotometer dengan panjang gelombang 500nm
IV. Perhitungan

Tabung Absorbansi (A) Kadar (mg) Kadar © A.C C.C

2 0,146
1 0,073 0 0 0 0
3 0,081 0,5 0,078125 0,008328 0,006104
4 0,105 1 0,15625 0,016406 0,024414
5 0,119 1,5 0,234375 0,027691 0,054932
6 0,14 2 0,3125 0,04375 0,097656
7 0,15 2,5 0,390625 0,058594 0,152588
Menggunakan Ms. Excel

Pindahkan menggunakan curva regresi