Kelompok 1 - Stifa A 019

MAKALAH ANALISIS MAKANAN, MINUMAN & KOSMETIK
“ANALISIS MAKANAN, MINUMAN DAN KOSMETIK YANG

MENGANDUNG VITAMIN”
OLEH :
KELOMPOK I :
NUR JIHAN AULIA 19013002

EMY SUGYATMI 19013001
FITRI NINGSI RAMADHAN 19013036
NURLAELA 19013021
NELSYANTI ESRA S 19013015
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

SEKOLAH TINGGI ILMU FARMASI MAKASAR
MAKASSAR
2021
1
KATA PENGANTAR
Puji syukur kehadirat Allah SWT yang telah memberikan rahmat dan
hidayah-Nya sehingga kami dapat menyelesaikan tugas makalah yang
berjudul “Analisis Makanan, Minuman dan Kosmetik yang Mengandung
Vitamin” ini tepat pada waktunya.
Adapun tujuan dari penulisan dari makalah ini adalah untuk
memenuhi tugas dosen pada bidang studi/mata kuliah Analisis Makanan,
Minuman dan Kosmetik. Selain itu, makalah ini juga bertujuan untuk
menambah wawasan tentang mikroobiologi bagi para pembaca dan juga
bagi penulis.
Kami mengucapkan terima kasih kepada bapak Fhahri Mubarak S. Farm.,
M.Si selaku dosen bidang studi/mata kuliah Analisis Makanan, Minuman
dan Kosmetik yang telah memberikan tugas ini sehinggan dapat
menambah pengetahuan dan wawasan sesuai dengan bidang studi yang
saya tekuni.
Kami juga mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang
telah membagi sebagian pengetahuannya sehingga saya dapat
menyelesaikan makalah ini.
Kami menyadari, makalah yang kami tulis ini masih jauh dari kata
sempurna. Oleh karena itu, kritik dan saran yang membangun akan kami
nantikan demi kesempurnaan makalah ini.
i
DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR......................................................................................i
DAFTAR ISI...................................................................................................ii
BAB I PENDAHULUAN.................................................................................1
I.1 Latar Belakang..................................................................................1
I.2 Rumusan Masalah............................................................................2
I.3 Tujuan...............................................................................................3
BAB II PEMBAHASAN..................................................................................3
II.1 Sejarah Vitamin...............................................................................3
II.2 Pengertian Vitamin..........................................................................5
II.3 Jenis-Jenis Vitamin..........................................................................6
II.3. 1 Vitamin A......................................................................................6
II.3. 2 Vitamin B1...................................................................................7
II.3. 3 Vitamin B2...................................................................................8
II.3. 4 Vitamin B3...................................................................................8
II.3. 5 Vitamin B5...................................................................................9
II.3. 6 Vitamin B6...................................................................................10
II.3. 7 Vitamin B7...................................................................................11
II.3. 8 Vitamin B9...................................................................................11
II.3. 9 Vitamin B12.................................................................................12
II.3. 10 Vitamin C...................................................................................13
II.3. 11 Vitamin D...................................................................................14
II.3. 12 Vitamin E...................................................................................15
II.3. 13 Vitamin K...................................................................................16
II.4 Fungsi Vitamin.................................................................................16
II.4. 1 Fungsi Vitamin A..........................................................................16
II.4. 2 Fungsi Vitamin B1........................................................................17
........................................................................................................................
ii
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................
........................................................................................................................V
II.4. 9 Fungsi Vitamin B12......................................................................24
II.4. 10 Fungsi Vitamin C.......................................................................24
II.4. 11 Fungsi Vitamin D.......................................................................24
II.4. 12 Fungsi Vitamin E........................................................................24
II.4. 13 Fungsi Vitamin K........................................................................24
II.5 Defisiensi atau Kekurangan Vitamin................................................24
II.5. 1 Defisiensi atau Kekurangan Vitamin A........................................24
II.5. 2 Defisiensi atau Kekurangan Vitamin B1......................................25
II.5. 9 Defisiensi atau Kekurangan Vitamin B12....................................28
iii
II.5. 10 Defisiensi atau Kekurangan Vitamin C......................................28
II.5. 11 Defisiensi atau Kekurangan Vitamin D......................................29
II.5. 12 Defisiensi atau Kekurangan Vitamin E......................................30
II.5. 13 Defisiensi atau Kekurangan Vitamin K......................................30
II.6 Analisis Vitamin...............................................................................30
II.6. 1 Analisis Vitamin Vitamin A...........................................................30
II.6. 1.1 Prinsip.......................................................................................30
II.6. 1.2 Metode dan Tahap Analisis......................................................32
II.6. 1.3 Perhitungan kadar....................................................................32
II.6. 2 Analisis Vitamin Vitamin B1.........................................................32
II.6. 2.1 Prinsip.......................................................................................32
II.6. 3.1 Prinsip.......................................................................................40
II.6. 4.1 Prinsip.......................................................................................42
II.6. 5.1 Prinsip.......................................................................................43
II.6. 6.1 Prinsip.......................................................................................45
II.6. 7.1 Prinsip.......................................................................................46
iv
II.6. 8 Analisis Vitamin Vitamin B9 ........................................................49
II.6. 8.1 Prinsip.......................................................................................49
II.6. 9 Analisis Vitamin Vitamin B12.......................................................50
II.6. 9.1 Prinsip.......................................................................................50
II.6. 10 Analisis Vitamin Vitamin C.........................................................51
II.6. 10.1 Prinsip.....................................................................................51
II.6. 10.2 Metode dan Tahap Analisis....................................................52
II.6. 10.3 Perhitungan kadar..................................................................52
II.6. 11 Analisis Vitamin Vitamin D.........................................................52
II.6. 11.1 Prinsip.....................................................................................52
II.6. 12 Analisis Vitamin Vitamin E.........................................................53
II.6. 12.1 Prinsip.....................................................................................53
II.6. 13 Analisis Vitamin Vitamin K.........................................................55
II.6. 13.1 Prinsip.....................................................................................55
........................................................................................................................
BAB III............................................................................................................55
PENUTUP......................................................................................................55
III.1 Kesimpulan.....................................................................................55
III.2 Saran..............................................................................................55
v
DAFTAR PUSTAKA......................................................................................56
vi
BAB I
PENDAHULUAN
I.1 Latar Belakang
Di Indonesia pada umunya orang-orangnya berkulit sawo matang,
adapun bagian-bagian Indonesia yang memiliki warna kulit sawo matang
yaitu di Indonesia bagian barat dan tengah, antara lain Sumatera, Jawa,
Kalimantan, Bali, Nusa Tenggara, bahkan Maluku dan Irian. Namun
banyak orang yang tidak percaya diri dengan warna kulit sawo matang
tersebut karena warna kulit putih cenderung di sukai oleh orang-orang
khususnya kaum hawa. Karena kulit putih cerah menjadikan percaya diri
dan terlihat cantik, sehingga tidak heran jika kebanyakan wanita untuk
mendapatkan kulit putih untuk menunjang kecantikan dengan melakukan
perawatan di salon atau klinik kecantiakan, menggunakan krim pencerah
kulit, bahkan obat untuk menjadikan kulit menjadi putih dan cerah. Banyak
berbagai macam produk kosmetik yang ditawarkan baik secara langsung
ataupun melalui online (Tim Naviri, 2011).
Kosmetik adalah produk kecantikan salah yang ditawarkan untuk
memenuhi kebutuhan dan keinginan para kaum hawa, supaya tampil lebih
cantik dan menarik. Setiap kosmetik mempunyai kandungan ynag
berbeda- beda jadi harus lebih waspada dan berhati-hati dalam memilah
memilih produk kosmestik. Karena ada beberapa produk kosmetik dalam
beberapa pemakaia langsung menampak hasil yang di inginkan, seperti
penggunaan crem pemutih hanya dengan hitungan hari kulit pada wajah
langsung menjadi putih, namun kulit menjadi tipis dan jika tidak memakai
kembali kulit menjadi berubah seperti semulaVitamin adalah suatu zat
senyawa kompleks yang sangat dibutuhkan oleh tubuh kita yang berfungsi
untuk mambantu pengaturan atau proses kegiatan tubuh. Tanpa vitamin
manusia, hewan dan makhluk hidup lainnya tidak akan dapatmelakukan
aktifitas hidup dan kekurangan vitamin dapat menyebabkan memperbesar
peluang terkena penyakit pada tubuh kita.Vitamin merupakan mikonutrien
yang terdapat pada makanan, dan merupakan komponen penting yang
1
memiliki dampak besar pada kesehatan. Ketika asupan vitamin yang tidak
mencukupi pada saat balita maka dapat menyebabkan penyakit kronis di
saat dewasa. Kekurangan mikonutrien merupakan pemasalahan utama di
dunia dan lebih dari 2 miliar orang didunia diperkirakan mengalami
kekurangan vitamin dan mineral (WHO, 2010). Menurut Riskesdas, 2018
status gizi buruk di Indonesia masih cukup tinggi yaitu 30,8%
dibandingkan dengan standar WHO yaitu < 20%. Salah satu faktor
penyebab gizi buruk adalah kurangnya asupan vitamin B1 yang tidak
mencukupi. Dalam sehari dibutuhkan vitamin B1 sebanyak 0,8 mg untuk
balita dan 1,4 mg untuk dewasa (Permenkes, 2019).
Vitamin B1 yang biasa dikenal dengan nama tiamin, merupakan vitamin
larut dalam air dan memiliki fungsi dapat mengatasi gangguan saraf otot
disertai nyeri, rematik, mengobati defisiensi beri-beri, lesu, jantung
berdebar-debar, mengatasi ganguan metabolisme (Widodo, 2004).
Vitamin B1 dibutuhkan untuk menimbulkan nafsu makan dan membantu
penggunaan karbohidrat dalam tubuh dan sangat berperan dalam sistem
syaraf (Almatsier, 2005).
I.2 Rumusan Masalah
Adapun rumusan masalah dari makalah ini yaitu :
1. Apa pengertian vitamin ?
2. Apa saja jenis-jenis vitamin ?
3. Apa fungsi dari jenis-jenis vitamin ?
4. Apa defisiensi atau Kekurangan dari mengkonsumsi vitamin ?
I.3 Tujuan
Adapun tujuan dari makalah ini yaitu :
1. Untuk mengetahui pengertian vitamin
2. Untuk mengetahui jenis-jenis vitamin
3. Untuk mengetahui fungsi dari jenis-jenis vitamin
4. Untuk mengetahui defisiensi atau Kekurangan dari mengkonsumsi
vitamin
2
BAB II
PEMBAHASAN
II.1 Sejarah Vitamin
Penemuan vitamin A berawal dari penelitian dari Francois Magendie
(1816) yang mengamati anjing kehilangan nutrisi berdampak terjadinya
mengembangkan ulkus komea dan memiliki tingkat kematian yang tinggi.
Tahun 1912 Frederick Gowland Hopsin melaporkan bahwa faktor-faktor
yang tidak diketahui ditemukan dalam susu, selain dari karbohidrat,
protein dan lemak yang telah diketahui. Faktor terscbut diperlukan pada
pertumbuhan tikus yang iuji cobanya. Tahun 1917. Elmer McCollum, dan
Lafayette Mendel dan Thomas Osbome Burr secara terpisah menemukan
apa yang dimaksud dengan faktor tersebut yang dalam penelitiannya
tentang peran lemak dalam makanan pada tahun 1917. Penemuan
tersebut selanjutnya pada tahunn 1920 dinyatakan sebagai vitamin A.
Tahun 1931, Paul Karrer seorang kimiawan Swiss menggambarkan
struktur kimia vitamin A. Vitamin A pertama kali disintesis pada tahun
1947 oleh dua ahli kimia Belanda yakni Andriaanvan Dorp David dan
Jozef Ferdinand Arens (Aung, 2016).
Vitamin BI (tiamin) merupakan vitamin yang larut dalam air yang
pertama kali ditemukan. Penemuan vitamin Bl diawali dari Kanchiro
Takaki pada tahun 1884 berhasil mengungkap kasus penyakit beri-beri
yang diderita oleh para prajurit angkatan laut Jepang. Hasil penyelidikan
Kanehiro Takaki menunjukkan adanya suatu zat tertentu pada dedak
padi.Penyelidikan serupa dilakukan oleh Christian Eijkman pada tahun
1897 yang menyelidiki pemberian pakan unggas dengan beras tanpa
dipoles (digiling). Hasil penyelidikan menyimpulkan bahwa beras tanpa
dipoles dapat mencegah kelumpuhan. Isolasi senyawa dalam dedak yang
berfungsi pencegah beri-beri dilakukan oleh Casimir Funk tahun 1911,
dan selanjutnya Casimir Funk menamakan senyawa tersebut dengan
nama 'vitamin". Pengisolasian vitamin BI dan pengkrisalannya dilakukan
oleh Barend Coenraad Petrus Jansen dan Willem Frederik Donath pada
3
tahun 1926. Struk kimia vitamin Bl ditentukan oleh Robert Runnels
Williams pada tahun 1934 sekalis mensintesis senyawa vitamin B1.
Lohman dan Schuster (1937) menunjukkan bahwa difosforilasi turunan
tiamin (tiamin difosfat/THDP) adalah kofaktor yang dibutuhkan untuk
dekarboksilasi oksidatif piruvat dan pada akhimya reaksi terscbut
diketahui sebagai katalisasi oleh piruvat dehidrogenase. Penemuan
Lohman dan Schuster dapat menjelaskan tentang mekanisme kerja tiamin
dalam metabolisme sel. Selain itu, turunan fosfat tiamin lainnya telah juga
ditemukan. Pada tahun 1958 Ronald Breslow menjelaskan mekanisme
dimana bagian tiamin dari THDP. Lohman dan Schuster (1937)
menunjukkan bahwa difosforilasi turunan tiamin (tiamin difosfat, THDP)
adalah kofaktor yang dibutuhkan untuk dekarboksilasi oksidatif piruvat.
Selanjutnya, reaksi tersebut diketahui sebagai katalisasi oleh pirvat
dehidrogenase. Penemuan Lohman dan Schuster dapat menjelaskan
tentang mekanisme kerja tiamin dalam metabolisme sel. Turunan fosfat
iamin lainnya juga ditemukan. Turunan fosfat tiamin lainnya juga dapat
menyehabkan gejala yang diamati selama defisiensi tiamin (Aung, 2016).
Vitamin B3 atau niacin pertama kali dijelaskan oleh Hugo Weidel
pada tahun 1873 dalam studinya tentang nikotin. Casimir Funk pertama
kali mengekstrak vitamin B3. pada tahun 1937 Conrad Elvehjem
mengekstraksi vitamin B3 dari hati dan mengiidentifikasi zat aktifnya serta
menyebutnya sebagai faktor pencegah pellagra, dan faktor anti-
blacktongue. Dr Tom Spies menemukan bahwa asam nikotinat
disembuhkan dengan penderita pellagra. Niacin disebut sebagai vitamin
B3 karena itu ketiga vitamin B yang ditemukan. Pada tahun 1955, Altschul
dan rekan menjelaskan vitamin sebagai bertindak sebagai penurun lipid.
Pada tanggal 22 April 2014, peneliti Pennsylvania State University yang
bekerja sama dengan NASA di Goddard Astrobiology Laboratorium
Analitik melaporkan penemuan vitamin dalam meteorit chondrite karbon.
Kadar vitamin B3 meteorit berkisar 30-600 bagian per miliar. Molekul yang
4
ditemukan dalam meteorit termasuk asam piridin karboksilat dan asam
piridin dikarboksilat (Aung, 2016).
II.2 Pengertian Vitamin
Vitamin atau vitamine mul a-mula diutarakan oleh sang ahli kimia
pola, dia yang bernama Funk, yang percaya bahwa zat penangkal beri-
beri yang larut dalam amina itu adalah suatu amina yang sangat vital. Dan
dari kata tersebut lahirlah istilah vitamine atau vitamin. Kini vitamin dikenal
sebagai suatu kelompok senyawa organik yang tidak termasuk dalam
golongan protein, karbohidrat, maupun lemak dan terdapat dalam jumlah
kecil dalam bahan makanan tapi sangat penting bagi beberapa fungsi
tubuh untuk menjaga kelangsungan kehidupan serta pertumbuhan
(Revan, 2011).
Vitamin adalah bahan esensial yang diperlukan untuk membantu
kelancaran penyerapan zat gizi dan proses metabolisme tubuh.
Kekurangan vitamin dapat berpengaruh bagi kesehatan, karena itu
diperlukan asupan harian dalam jumlah tertentu yang idealnya bisa
diperoleh dari makanan. Jumlah kecukupan asupan vitamin per hari untuk
perawatan kesehatan tersebut ditetapkan sebagai RDA (Recommended
Daily Allowance). Beberapa vitamin tertentu bila diberikan dalam dosis
tinggi mempunyai efek, antioksidan yang membantu system imunitas
tubuh dalam menetralkan benda asing yang berasal dari radikal bebas
dan kuman penyakit. Dan beberapa vitamin lain mempunyai efek
penyembuhan, sebagai kebalikan dari defisiensi yang terjadi akibat
kekurangan vitamin tersebut (Kim, 2002).
Dalam penentuan ada tidaknya vitamin alat yang dapat digunakan
untuk mengukur kandungan asam amino yaitu dengan menggunakan
High Performance Liquid Chromatography (HPLC). Alat HPLC dapat
digunakan juga untuk analisis asam lemak sebagai komponen penyusun
lemak dan vitamin. Mengingat metode analisis sangat bervariasi baik
bahan yang digunakan maupun tingkat ketelitiannya, maka pemilihan dan
5
penetapan metode analisis merupakan suatu keharusan (hernawati,
2013).
II. 3 Jenis-Jenis Vitamin
Menurut Kim (2002), jenis vitamin ada beberapa macam seperti
berikut lengkap dengan informasinya, yaitu:
II. 3. 1 Vitamin A
Gambar Rumus Struktur Vitamin A
Pada tahun 1930, T. Moore mengungkapkan kemampuan karoten,

pigmen kuning pada wortel (Daucus carota), yang juga dapat mencegah
rabun senja. Rupanya karoten diubah oleh tubuh menjadi vitamin A,
sehingga disebut sebagai provitamin A. Jadi, untuk menjaga kornea mata
agar tetap sehat, asupan vitamin A (yang berperan pada proses sistem
visual) bisa didapatkan dari sumber hewani (retinol) maupun nabati
(karoten). Dari penelitian lebih lanjut diketahui banyak fungsi penting
lainnya dari vitamin A, selain untuk kesehatan mata. Untuk kesehatan
jaringan tubuh, vitamin A mempercepat proses penyembuhan luka. Fungsi
tubuh lain yang dibantu oleh vitamin A antara lain adalah system
reproduksi, pembuatan dan aktivitas hormon adrenalin, pembuatan dan
aktivitas hormon tiroid, mempertahankan struktur dan fungsi sel‐sel saraf,
menjaga kekebalan tubuh pada umumnya, serta memperbarui sel jaringan
tubuh (Rinda, 2018).
a. Sumber dari makanan: Pangan sumber hewani (mengandung retinol),
adalah hati (ayam/sapi), ikan, susu, dan produk olahannya. Sedangkan
dari pangan nabati (mengandung karoten), adalah sayuransayuran
hijau gelap (bayam, katuk), sayur‐sayuran kuning atau oranye (wortel,
kentang, tomat, labu kuning), serta buah‐buahan.
b. Penggunaan : Untuk membantu daya penglihatan (malam dan warna),
dan mempertahankan kesehatan kulit dan rambut.
6
c. Dosis : RDA untuk pria 1.000 IU, dan wanita 800 IU sehari. Untuk
mengatasi gangguan penyakit tertentu, misalnya infeksi atau
peradangan, digunakan dalam dosis tinggi 5.000 IU sehari selama
infeksi, tetapi tidak lebih dari satu bulan pemakaian.
II. 3. 2 Vitamin B1
Gambar Rumus Struktur Vitamin B1
Tiamin merupakan senyawa organosulfur berwarna dengan rumus

kimia CızH;N,OS. Strukturnya terdiri dari aminopirimidin dan cincin tiazol
yang dikaitkan oleh ametilen. Tiazol yang digantikan dengan metil dan
rantai samping hidroksietil. Tiamin larut dalam air, metanol, dan gliserol,
tetapi tidak larut dalam pelarut organik kurang polar. Tiamin stabil pada pH
asam, tetapi tidak stabil dalam larutan basa. Tiamin tidak stabil terhadap
panas, tapi stabil pada suhu rendah. Tiamin tidak stabil bila terkena sinar
ultraviolet dan iradiasi gamma Struktur. Tiamin larut dalam alkohol 70 9%
dan air, dapat rusak oleh panas, terutama dengan adanya alkali. Pada
kondisi kering. tiamin stabil pada suhu l00 C selama beberapa jam.
Kelembaban akan mempercepat kerusakannya. Hal ini menunjukkan
bahwa pada makanan segar, tiamin kurang stabil terhadap panas jika
dibandingkan dengan makanan kering (Aung, 2016).
VitaminB1 yang di kenal pula sebagai morale vitamine karena
mempunyai efek yang menguntungkan pada sistem saraf pusat serta
sikap mental, juga membantu. fungsi normal saraf pinggir, otot, dan
jantung. Kekurangan vitamin B1 sering terjadi pada usia lanjut, dengan
gejala munculnya gangguan sistem pencernaan yang berupa penyerapan
buruk, sembelit (konstipasi), peka atau tak tahan bahan makanan tertentu,
dan hilangnya nafsu makan. Juga muncul sebagai gejala gangguan saraf
berupa penurunan daya ingat, gelisah, dan mati rasa pada tangan dan
7
kaki. Selain itu, menjadi sangat peka terhadap rasa nyeri, koordinasi tubuh
memburuk, dan lemah.
a. Sumber dari makanan: Paling banyak ditemukan pada beras dan
gandum utuh(terutama beras merah), kuning telur, ikan, kacang‐
kacangan, dan polong-polongan.
b. Penggunaan: Untuk memelihara fungsi saraf, mengoptima?.’
c. lkan aktivitas kognitif dan fungsi otak, membantu proses metabolisme
karbohidrat, lemak, protein, dan mengatur sirkulasi serta fungsi darah.
d. Dosis RDA: 1‐13 mg sehari, terapi 30‐100 mg sehari.
II. 3. 3 Vitamin B2
Vitamin B2 adalah komponen penting dari dua enzim utama dalam

produksi energi pada metabolisme karbohidrat, lemak, dan protein.
Sumber dari makanan: Pangan hewani adalah hati, ginjal, dan jantung
(ayam/sapi), sedangkan dari pangan nabati adalah sayur‐sayuran hijau.
a. Penggunaan: Untuk katarak, gangguan pencernaan, kulit, dan depresi.
b. Dosis RDA: 1,7 mg sehari. Dosis terapi 25 mg sehari.
II. 3. 4 Niasin (B3)
Vitamin B3 yang berbentuk padat merupakan turunan piridin dengan

gugus karboksil (COOH) . Bentuk lain dari vitamin B3 yakni meliputi
8
bentuk amida seperti nikotinamida dimana gugus karboksil diganti dengan
karboksamida (CONH,). Serta serta amida yang lebih kompleks dan
berbagai ester. Asam nikotamida dapat dikonversi menjadi niasinamida
atau sebaliknya (Aung, 2016).
Niasin berhubungan dengan kinerja saraf, ditemukan oleh C.A.
Elvehjem dan rekan‐rekannya pada tahun 1937. Kekurangan niasin akan
menyebabkan gejala yang dikenal sebagai pellagra, ditandai dengan
terjadinya kulit pecah-pecah dan bersisik (dermatitis), otak berfungsi tidak
sempurna sehingga sering bingung (demensia), dan diare akibat
melemahnya produksi lendir pada sistem pencernaan. Sebagai koenzim
dari NAD dan NADP, niasin berperan dalam reaksi metabolisme
karbohidrat, lemak, dan protein. Dengan enzim yang berbeda, niasin
terlibat dalam 50 reaksi kimia yang berbeda untuk menghasilkan energi,
metabolisme lemak, kolesterol, dan karbohidrat, serta pembuatan
beberapa senyawa tubuh penting, seperti hormon seks dan adrenalin.
Dalam fungsinya tersebut, niasin adalah vitamin penurun lemak yang
mencegah penyakit jantung dengan menurunkan kadar kolesterol, dan
memperbaiki aliran darah pada kasus terjadinya penyumbatan pembuluh
darah perifer (Aung, 2016).
a. Sumber dari makanan: Paling banyak terdapat pada hati, daging
(ayam/sapi),telur, ikan, kacang‐kacangan, susu, dan avokad.
b. Penggunaan: Untuk membantu melepaskan energi dari makanan,
mempertahankan kesehatan sistemsusunan saraf dan rambut.
c. Dosis RDA: 20 mg sehari.
II. 3. 5 Asam Pantotenat (Vitamin B5)
a. Sumber dari makanan: Sumber hewani adalah ikan, telur, susu, hati,
ginjal (ayam/sapi), semua buah yang dibuat selai (kurma, kismis,
9
pisang selai), dan khamir (yeast). Sedangkan sumber nabatinya adalah
ubi jalar, brokoli, kembang kol, jeruk, stroberi, kacang‐kacangan, dan
gandum.
b. Penggunaan: Untuk membantu melepaskan energi dari makanan,
mempertahankan kesehatan jaringan dan rambut.
c. Dosis RDA: 10 mg sehari.
II. 3. 6 Vitamin B6
Vitamin B6, ditemukan P. Gyorgy pada tahun 1938, berperan dalam

pembentukan protein tubuh, sel‐sel darah merah, prostaglandin, dan
senyawa struktural yang berfungsi sebagai transmiter kimia pada sistem
saraf. Vitamin B6 juga penting dalam mempertahankan keseimbangan
hormon dan fungsi kekebalan tubuh. Selain itu, vitamin B6 berperan
sebagai koenzim dan terlibat dalam metabolisme asam amino.
Kekurangan vitamin B6 ini ditandai dengan gejala depresi, kejangkejang
(terutama pada anak‐anak), tak tahan gula (glucose intolerance),
melemahnya saraf yang berhubungan dengan daya ingat, anemia, dan
gangguan kulit (dermatitis) (Aung, 2016).
a. Sumber dari makanan: Paling banyak ditemukan pada khamir (ragi
kering), daging, hati, ginjal, dan jantung (ayam/sapi), susu, telur,
unggas, ikan, kentang, ubi jalar, sayur‐sayuran, sereal, gandum dan
beras tumbuk, kacang‐kacangan, pisang, kubis, dan kembang kol.
b. Penggunaan: Berperan dalam metabolisme karbohidrat, protein dan
lemak, menguatkan kekebalan tubuh, membantu transmisi impuls saraf,
menjaga keseimbangan elektrolit tubuh (natrium dan kalium),
merangsang pertumbuhan sel darah merah, dan membantu sintesa
DNA dan RNA.
c. Dosis RDA: 2 mg sehari, terapi 25‐ 100 mg sehari.
10
II. 3. 7 Biotin (Vitamin B7)
Biotin yang berperan dalam produksi antibodi, disebut juga sebagai

vitamin H, ditemukan oleh M.A. Boas pada tahun 1927. Defisiensi biotin
dapat menimbulkan gangguan jantung, kurang nafsu makan, anoreksia,
mual, depresi, sakit otot, lemah, kulit kering bersisik, dermatitis, dan
rambut rontok. Pada wanita hamil dengan usia kehamilan di bawah 6
bulan dapat muncul gejala bisul, ketombe (seborrheic dermatitis), dan
rambut rontok. Dalam sistem pencernaan, biotin berperan sebagai
koenzim (bagian enzim) dari berbagai enzim metabolisme yang mengatur
penggunaan lemak dan asam amino. Tanpa biotin, metabolisme lemak
dan asam amino dapat menjadi terganggu. Biotin termasuk vitamin
nonesensial yang disintesis oleh tubuh di saluran pencernaan.
a. Sumber dari makanan: Banyak terdapat pada keju, hati, kedele,
kembang kol, daging, susu, kacang tanah, sayuran, pisang, tomat,
jeroan, telur (terutama bagian kuningnya), jamur, kacang‐kacangan,
dan gandum lengkap. Namun, perlu diperhatikan bahwa putih telur
mentah mengandung avidin, yaitu suatu protein yang mengikat biotin,
sehingga akan mencegah penyerapan biotin oleh tubuh.
b. Penggunaan: Untuk mempertahankan kesehatan kulit dan rambut.
c. Dosis RDA: 300 mcg sehari.
II. 3. 8 Asam Folat (Vitamin B9)
11
Asam folat berperan dalam pencegahan penyakit jantung dan stroke

dengan memecah homo‐sistein, substansi dalam darah yang
meningkatkan risiko penyakit tersebut. Dari perannya dalam membantu
sintesa DNA, asam folat mencegah kanker dengan memperbaiki
kerusakan pada DNA yang menjadi awal dari perkembangan penyakit ini.
Sumber dari makanan : Banyak terdapat pada hati, daging, ginjal, sayuran
hijau, gandum, telur, ikan, kacang hijau, khamir. Sumber lain adalah jeruk,
stroberi, wheat germ, dan kacang‐kacangan (Aung, 2016).
a. Penggunaan: Untuk membantu pembentukan sel darah merah, dan
mempertahankan kesehatan sistem pencernaan.
b. Dosis RDA: Untuk pria 170 mcg dan untuk wanita 150 mcg sehari. Ibu
hamil disarankan untuk mendapatkan tambahan 400 mcg asam folat
sehari, karena dari penelitian terungkap bahwa asam folat dapat
mengurangi risiko cacat bawaan pada bayi.
II. 3. 9 Vitamin B12
12
Vitamin B12 (kobalamin) mempunyai struktur cincin yang kompleks

(cincin corrin) dan serupa dengan cincin porfirin, yang pada cincin ini
ditambahkan ion kobalt di bagian tengahnya. Vitamin B12 disintesis
secara eksklusif oleh mikroorganisme. Dengan demikian, vitamin B12
tidak terdapat dalam tanaman kecuali bila tanaman tersebut
terkontaminasi vitamin B12 tetapi tersimpan pada binatang di dalam hati
temapat vitamin B12 ditemukan dalam bentuk metilkobalamin,
adenosilkobalamin, dan hidrok- sikobalamin
Vitamin B12 bekerja sama dengan asam folat untuk proses‐proses
tubuh, termasuk sintesa DNA. Karena vitamin B12 bekerja mengaktifkan
kembali asam folat, maka kekurangan vitamin B12 juga akan berakibat
terjadinya kekurangan asam folat (Aung, 2016).
a. Sumber dari makanan: Hati (ayam atau sapi), daging, susu serta
produk olahan, telur, ikan, sayur-sayuran, kedelai serta produk olahan
(tahu, tempe, tauco, kecap), bekatul, dan rumput laut.
b. Penggunaan: Untuk mengatur pembentukan sel darah merah,
mencegah kerusakan dinding saraf, sintesa DNA, mengubah
karbohidrat, lemak dan protein menjadi energi.
c. Dosis RDA : 6 mcg sehari, terapi 5‐50 mcg sehari.
II. 3. 10 Vitamin C
Gambar Rumus Struktur Vitamin C
Vitamin ini mempunyai rasa asam, enak untuk dikonsumsi sehari ‐

hari, dan fungsinya banyak sekali untuk kesehatan. Kadarnya yang tinggi
di dalam sel darah putih (10 sampai 80 kali lebih tinggi dari kadar plasma),
terutama limfosit, dengan cepat habis selama infeksi. Kondisi tersebut
mirip dengan kasus gusi berdarah bila kekurangan vitamin C. Vitamin C
13
membantu mencegah infeksi yang diakibatkan beberapa jenis virus dan
bakteri, menambah masa hidup, serta mengurangi terjadinya katarak.
Fungsi lain dari vitamin C adalah sebagai antioksidan, penghasil senyawa
transmiter saraf dan hormon tertentu, membantu memperbaiki sel tubuh
dan meningkatkan kerja enzim sebagai faktor penyerap dan pengguna zat
gizi lainnya. Vitamin C juga mengurangi risiko kanker dengan mengurangi
kerusakan akibat radikal bebas pada DNA yang dapat memicu kanker.
Vitamin C adalah vitamin esensial, karena manusia tidak dapat
menghasilkan vitamin C sendiri, sehingga diperlukan asupan dari
makanan. Pada saat kita mengalami infeksi, dibutuhkan vitamin C dalam
jumlah sangat besar untuk membantu darah putih menghancurkan kuman
penyerang.
a. Sumber dari makanan: Paling banyak ditemukan pada buah‐buahan,
seperti jambu biji, nenas, jeruk, tomat, mangga, dan sirsak. Sayuran
ada juga yang mengandung banyak vitamin C, yaitu bayam, brokoli,
cabai, dan kentang.
b. Penggunaan: Untuk membantu penyembuhan luka, penyerapan zat
besi' dan kalsium, dan mempertahankan kesehatan kulit dan jaringan.
c. Dosis RDA: untuk pria 60 mg, wanita: 60 mg sehari. Untuk terapi
sebagai antioksidan digunakan dalam dosis tinggi 500 ‐ 2.000 mg
sehari.
II. 3. 11 Vitamin D
Gambar Rumus Struktur Vitamin D
14
vitamin ini juga bisa didapatkan dari makanan. Namun, gaya hidup yang
kurang terpapar sinar matahari dan diet lanjut usia dapat mengakibatkan
defisiensi Vitamin D dengan gejala gelisah, sulit tidur, dan risiko rapuh
tulang (osteoporosis). Untuk perawatan tulang umumnya, dalam banyak
kasus vitamin D diberikan bersama dengan kalsium (Aung, 2016).
a. Sumber dari makanan: Banyak ditemukan pada minyak ikan dan
minyak nabati.
b. Penggunaan: Untuk membantu pembentukan gigi dan tulang dan
pembekuan darah.
c. Dosis RDA: 400 UI.
II. 3. 12 Vitamin E
Gambar Rumus Struktur Vitamin E
Vitamin E diasosiasikan dengan kesuburan dan awet muda. Sebagai

antioksidan intraselular yang kuat, vitamin E melindungi limfosit dan
monosit dari gangguan radikal bebas pada DNA, karena itu vitamin ini
bermanfaat dalam memperlambat proses penuaan. Juga dikenal sebagai
anti oksidan dengan efek protektif terhadap penyakit jantung dan
perawatan kulit. Sebenarnya peranan vitamin E jauh lebih penting lagi,
karena terlibat dalam total sistem imun, sehingga defisiensi vitamin E
dapat menurunkan kemampuan daya tahan tubuh secara menyeluruh.
Vitamin E meningkatkan reaksi hiper‐sensitivitas lambat dari sistem imun,
suatu respons imunologis untuk melawan kanker, parasit (cacing), dan
infeksi kronis. Selain itu, sebagai anti oksidan vitamin E memberikan efek
perlindungan terhadap vitamin A dari oksidasi di dalam saluran
pencernaan. Dari penelitian para ahli terungkap bahwa untuk mencegah
kanker, vitamin E alami sebagai senyawa d‐alfa tokoferol suks inat adalah
yang terbaik dari pada bentuk vitamin E lainnya (Aung, 2016).
15
a. Penggunaan: Untuk mempertahankan kesehatan umum, kulit, dan
rambut.
b. Dosis RDA: 30 IU. Untuk terapi digunakan dosis 400 IU per hari. Untuk
mendapatkan efek yang lebih baik, konsumsilah makanan berlemak
yang membantu meningkatkan penyerapan vitamin E oleh tubuh.
II. 3. 13 Vitamin K
Gambar Rumus Struktur Vitamin K
Tubuh cukup mempunyai persediaan vitamin K, misalnya vitamin K1

atau phylloquinone dari makanan (misalnya Alfalfa), dan vitamin K2 atau
menaquinone yang diproduksi oleh bakteri usus. Ada pula vitamin K3 atau
menadione, vitamin K sintetis (Aung, 2016).
a. Sumber dari makanan: Kuning telur, minyak sayur, minyak hati ikan,
sayuran berdaun hijau, brokoli, lettuce, teh hijau, asparagus, havermut,
gandum, hati, bayam, kubis, kembang kol, dan kacang polong hijau
segar
II. 4 Fungsi Vitamin
II. 4. 1 Fungsi Vitamin A
Vitamin A memiliki beberapa fungsi yakni penting untuk pertumbuhan
dan pengembangan, untuk pemeliharaan sistem kekebalan tubuh (sistem
imun) dan indera penglihatan (visi) yang baik. Vitamin A sangat
dibutuhkan oleh retina mata dalam bentuk retinal, yang bergabung dengan
protein membentuk suatu molekul yang menyerap cahaya dan
penglihatan tampilan warna. Vitamin A (seperti asam retinoat) juga dalam
peran penting sebagai hormon seperti faktor pertumbuhan epitel dan sel-
sel lain (Aung, 2016).
Vitamin A berperan dalam berbagai fungsi seluruh tubuh, seperti :
Penglihatan, Gen transkripsi, Fungsi kekebalan tubuh, Perkembangan
16
embrio dan reproduksi, Metabolisme tulang. Hematopieses, Kulit dan
kesehatan selular serta Aktivitas antioksidan. Fungsi vitamin pada
penglihatan (visi) yakni terkait dengan retina. Retinal dalam bentuk cis
terikat pada protein opsin membentuk rhodopsin dan iodopsin. Ketika
cahaya masuk dalam mata maka bentuk cis semua diubah menjadi
bentuk trans berdisosiasi dari retina opsin dalam serangkaian langkah-
langkah. Langkah-langkah perubahan bentuk cis kebentuk trans dari
retinal discbut photo-bleaching. Berubahan bentuk ini merupakan
perubahan bentuk isomer. Perubahan bentuk ini menginduksi sinyal saraf
sepanjang saaf optic ke visual otak. Retinal berbentuk rans mengalami
perubahan kembali menjadi bentuk cis oleh serangkaian reaksi enzimatik
(Aung, 2016).
II. 4. 2 Fungsi Vitamin B1
Tiamin diperlukan dalam metabolisme semua spesies hewan dan
tumbuh-tumbuhan. Pada manusia, tiamin diperoleh dari makanannya.
kecuali bila zat tersebut disintesis oleh mikroorganisme di dalam tractus
digestivus (saluran pencernaan) hewan ruminansia Fungsi metabolik
tiamin antara lain pada reaksi oksidasi piruvat Asetil- KoA, rekasi oksidasi
a- keto glutarat dan reaksi transketolasi - HMP (Heksosa Monofosfat). Di
dalam otak dan hati, segera diubah menjadi TPP (thiamin pyrohosphat)
oleh enzim thiamin difosfotransferase, dimana reaksinya membutuhkan
ATP. Berperan penting sebagai koensim dekarboksilasi senyawa asam-
keto. Beberapa enzim yang menggunakan TPP sebagai koensim adalah
pyruvate decarborlase, pyruvatedehidrogenase, dan transketolase. Tiamin
penting sebagai koensim piruvat dan a-ketoglutarate dehidrogenase,
sehingga jika terjadi defisiensi, maka kapasitas sel dalam menghasilkan
energi menjadi sangat berkurang Juga diperlukan untuk reaksi fermentasi
glukosa menjadi etanol, di dalam yeast (Aung, 2016).
17
Fungsinya yang lain adalah membantu pertumbuhan dan reproduksi,
menjaga kesehatan mata, serta menjaga kesehatan kulit, kuku, rambut,
mulut, bibir, dan tenggorokan (Aung, 2016).
Fungsi vitamin B3 (niasin) yakni reaksi redoks dan reaksi non redoks
dalam tubuh. Niacin juga membantu sistem pencernaan, kulit, dan fungsi
saraf. Niacin juga penting untuk mengubah makanan menjadi energi.
Niacin memainkan peran penting dalam metabolisme lemak, karbohidrat
dan asam amino. Fungsi niasin dalam tubuh terutama dalam bentuk dua
koenzim : NAD dan NADPH. NAD digunakan dalam pemecahan gula dan
oksidasi asam lemak untuk produksi energi sementara NADPH digunakan
dalam metabolisme folat dan sintesis asam lemak, kolesterol, hormon
steroid dan prekursor penting dari DNA. Di luar fungsinya sebagai
koenzim, niacin juga terlibat dalam perbaikan DNA dan stabilitas gen
(Aung, 2016).
- Reaksi oksidasi-reduksi (redoks)
Organisme hidup berasal sebagian besar energi mereka dari reaksi
oksidasi reduksi (redoks), yang prosesnya memerlukan transfer elektron.
Lebih dari 400 enzim memerlukan koenzim niacin, NAD dan NADP,
terutama untuk menerima atau menyumbangkan elektron untuk reaksi
redoks. Fungsi NAD adalah penghasil energi untuk degradasi
(katabolisme) karbohidrat, lemak, protein, dan alkohol. Fungsi NADP lebih
sering di reaksi biosintesis (anabolik), seperti dalam sintesis semua
makromolekul, termasuk asam lemak dan kolestero (Aung, 2016).
- Reaksi non-redoks
Koenzim niacin, NAD, adalah substrat (reaktan) untuk empat kelas enzim
yang memisahkan bagian nikotinamida dari NAD dan mentransfer ADP
ribosa untuk akseptor (Aung, 2016).
18
Ada beberapa manfaat penting yang bisa kita dapatkan bila asupan
vitamin B5 tercukupi. Manfaat-manfaatnya adalah sebagai berikut
(Truswell, A. Stewart, 2012) :
1. Mengatur Kadar Kolesterol dan Trigliserida Dalam Darah
Kebiasaan pola hidup yang tidak sehat seperti mengonsumsi makanan
berlemak yang berlebihan serta kurangnya berolahraga bisa menjadi
pemicu tingginya kadar kolesterol serta trigliserida dalam darah. Untuk
menurunkan kadar keduanya tersebut, dianjurkan memperbanyak
mengonsumsi makanan, sayur dan buah yang mengandung kadar vitamin
B5 yang cukup tinggi seperti alpukat, kubis, bawang merah, kunyit, dan
seledri.
2. Merangsang Pertumbuhan Rambut
Para pakar gizi dan vitamin telah membuktikan keunggulan vitamin B5
dalam merangsang pertumbuhan rambut. Dengan asupan vitamin B5
yang tercukupi, Anda bisa mencegah terjadinya penuaan dini pada rambut
(beruban) dan merangsang pertumbuhan rambut menjadi lebih kuat dan
lebih cepat panjang.
3. Penyembuhan dan Pencegahan Luka dari Infeksi
Bersama dengan vitamin C diketahui bahwa vitamin B5 bekerja lebih
cepat dalam proses penyembuhan luka. Selain itu, vitamin B5 juga
berkhasiat dalam mencegah terjadinya peradangan atau inflamasi pada
area sekitar luka.
4. Kesehatan Mata
Secara khusus peranan vitamin B5 untuk kesehatan mata memang tidak
sebaik peranan vitamin A. Tapi, vitamin B kompleks termasuk di dalamnya
vitamin B5 ini membantu vitamin A untuk proses sintesis biokimia dalam
tubuh dan pengoptimalisasian vitamin A dalam aliran darah menuju mata.
5. Kesehatan Kulit
Kesehatan kulit bukan hanya bisa diperoleh dari vitamin E. Kombinasi
antara vitamin E, vitamin C dan vitamin B5 ternyata memberi hasil yang
lebih baik untuk kesehatan kulit ketimbang asupan vitamin E saja. Itu
19
sebabnya mengapa sabun dan lotion yang baik sebenarnya adalah sabun
dan lotion yang mengandung madu. Sebab madu mengandung vitamin
B5, vitamin E, dan vitamin C yang mencukupi untuk kesehatan kulit.
6. Mencegah dan Mengobati Jerawat
Asupan vitamin B5 yang tercukupi akan membantu mencegah dan
mengobati jerawat dari dalam tubuh. Bukan hanya itu, penggunaan
bahan-bahan yang banyak mengandung vitamin B5 untuk masker wajah
alami seperti papaya, kunyit dan air kelapa bisa membantu
menghilangkan bekas-bekas jerawat.
Vitamin B6 berperan dalam metabolism asam amino dan asam
lemak.Vitamin B6 membantu tubuh untuk bersintetis asam amino
nonesensial. Selain itu juga berperan dalam produksi sel dalam darah
merah (Truswell, A. Stewart, 2012).
Banyak kimia tubuh tergantung pada enzim. Enzim adalah protein
yang membantu reaksi kimia terjadi. Because vitamin. Karena vitamin B6
yang terlibat dengan lebih dari 100 reaksi enzimatik, fungsinya dalam
tubuh adalah beragam dan luas (Truswell, A. Stewart, 2012).
1. Sintesis molekul penting.
Sulit untuk menemukan kategori kimia dari molekul-molekul dalam tubuh
yang tidak bergantung dalam beberapa cara pada vitamin B6 untuk
produksi mereka. Banyak blok bangunan protein, yang disebut asam
amino, memerlukan pasokan yang cukup B6 untuk sintesis.. asam nukleat
yang digunakan dalam pembuatan DNA dalam gen kita juga
membutuhkan vitamin ini. Karena asam amino dan asam nukleat adalah
bagian penting seperti pembentukan sel baru, vitamin B6 dapat dianggap
sebagai bagian penting dari pembentukan hampir semua sel-sel baru di
dalam tubuh.. Heme (pusat protein sel darah merah kami) dan fosfolipid
(komponen sel membran kami yang memungkinkan pesan antara sel-sel)
juga tergantung pada vitamin B6 untuk penciptaan mereka.
2. Pengolahan karbohidrat
20
Pengolahan karbohidrat (gula dan pati) di tubuh kita tergantung pada
ketersediaan vitamin B6. Vitamin ini sangat penting dalam memfasilitasi
pemecahan glikogen (suatu bentuk khusus dari pati) yang tersimpan
dalam sel-sel otot kita dan untuk tingkat yang lebih rendah di dalam hati
kita.. Karena pengolahan karbohidrat memainkan peran kunci dalam
beberapa jenis acara atletik, peneliti telah dengan seksama memainkan
peran vitamin B6 dalam pengolahan karbohidrat selama kinerja fisik.
3. Dukungan aktivitas sistem saraf
Peran vitamin B6 dalam sistem saraf kita sangat luas, dan melibatkan
banyak aspek kegiatan neurologis.. Salah satu aspek berfokus pada
penciptaan kelompok penting pesan molekul yang disebut amina.. Sistem
saraf bergantung pada pembentukan molekul-molekul untuk transmisi
pesan dari satu syaraf ke yang berikutnya. ((Molekul-molekul dapat
digolongkan sebagai "neurotransmitter" untuk alasan ini.) Amines adalah
salah satu jenis neurotransmitter di sistem saraf. Mereka sering dibuat dari
bagian-bagian protein yang disebut asam amino, dan nutrisi penting untuk
membuat proses ini terjadi adalah vitamin B6. Beberapa neurotransmiter
amina yang diturunkan yang memerlukan vitamin B6 untuk produksi
mereka termasuk serotonin, melatonin, epinefrin, norepinefrin, dan GABA.
4. Mendukung metabolisme sulfur dan metil
Pergerakan molekul yang mengandung sulfur ke seluruh tubuh sangat
penting untuk keseimbangan hormon dan penghapusan zat beracun
melalui hati.. Karena vitamin B6 dapat menghapus kelompok belerang dari
molekul lain, ini membantu tubuh mempertahankan fleksibilitas dalam
menangani sufur-mengandung senyawa.
Kelompok metil" mengacu pada struktur kimia yang hanya memiliki satu
atom karbon dan tiga atom hidrogen. Banyak peristiwa kimiawi penting
dalam tubuh dimungkinkan oleh transfer kelompok metil dari satu tempat
ke tempat lain.. Sebagai contoh, gen dalam tubuh dapat diaktifkan dan
dinonaktifkan dengan cara ini, dan sel-sel dapat menggunakan proses
untuk mengirim pesan kembali dan sebagainya.
21
Lampiran kelompok metil terhadap zat beracun adalah salah satu cara
membuat mereka kurang beracun dan mendorong eliminasi mereka dari
tubuh. Ini juga merupakan cara untuk memastikan bahwa zat seperti
homosistein, yang dapat membangun berlebihan dalam darah dan
menyebabkan risiko penyakit kardiovaskuler, disimpan dalam rentang
yang sehat.
5. Pencegahan Radang yang Diinginkan
Para peneliti belum jelas tentang mekanisme yang terlibat, namun
penelitian ulang menunjukkan bahwa vitamin B6 diperlukan untuk
meminimalkan risiko peradangan yang tidak diinginkan dalam tubuh. Ini
bukan hanya kasus yang cukup asupan vitamin B6 dikaitkan dengan
penurunan risiko peradangan berlebihan, itu juga fakta bahwa individu
dengan kronis, peradangan perlu berlebihan meningkatkan jumlah vitamin
B6 dalam makanan mereka. Kecuali asupan makanan kita cukup untuk
menjaga darah kita tingkat B6 aktif (pyridoxal 5'-fosfat) optimal, kita
meninggalkan diri kita beresiko untuk masalah kesehatan kronis seperti
diabetes tipe 2, penyakit jantung, dan obesitas, yang semuanya berbagi
komponen peradangan kronis, yang tidak diinginkan
Manfaat Vitamin B7 Menurut Office of Dietary Supplements
(ODS), biotin memiliki manfaat :
1. Menjaga kehamilan yang sehatKekurangan biotin ringan sering
terlihat selama kehamilan. Ini dapat menyebabkan perkembangan
abnormal pada janin.
2. Kuku, rambut, dan kulitAda beberapa bukti bahwa biotin dapat
meningkatkan kekuatan dan daya tahan kuku dan meningkatkan
kesehatan rambut dan kulit.
3. Menurunkan glukosa darahKemampuan biotin untuk menurunkan
glukosa darah pada orang dengan diabetes tipe 1 dan tipe 2 .
22
4. Mengontrol neuropatiBiotin dapat membantu mengurangi
kerusakan saraf pada orang yang menderita diabetes atau yang
sedang menjalani cuci darah untuk penyakit ginjal.
5. Penyakit ganglia basal responsif biotinPenyakit ganglia basal
adalah kelainan bawaan yang jarangterjadi. Ini
mempengaruhi bagian dari sistem saraf yang
mengontrol gerakan. Dapat menyebabkan ketegangan otot,
kekakuan otot, kelemahan otot, dan masalah lainnya. Otoritas
Keamanan Pangan Eropa (EFSA), yang menyediakan saran
ilmiah untuk membantu pembuat kebijakan, memiliki
menegaskan bahwa manfaat kesehatan yang jelas telah
ditetapkan untuk asupan biotindalam makanandi Indonesia
bermanfaat untuk:
a. Metabolisme makronutrien normal
b. Metabolisme yang menghasilkan energi normal
c. Pemeliharaan kulit normal dan selaput lendir
d. Fungsi normal sistem saraf
e. Perawatan rambut normal
f. Pengurangan Risiko Penyaki
Salah satu fungsi asam folat adalah sebagai bahan pembentuk
senyawa THF (tetrahidro‐folat), koenzim yang diperlukan dalam sintesa
DNA, dan pematangan sel darah merah (Aung, 2016).
Vitamin B12 berperan dalam menjaga agar sel‐sel berfungsi normal,
terutama sel‐sel saluran pencernaan, sistem saraf, dan sumsum tulang,
serta memecah homo‐sistein (substansi dalam darah yang meningkatkan
risiko stroke dan penyakit Alzheimer) (Aung, 2016).
II. 4. 10 Fungsi Vitamin C
Bentuk aktif vitamin C adalah asam askorbat itu sendiri dimana
fungsinya sebagai donor ekuivalenpereduksi dalam sejumlah reaksi
23
penting tertentu. Asam askorbat dioksidasi menjadi asam dehidroaskorbat
,yang dengan sendirinya dapat bertindak sebagai sumber vitamin
tersebut. Asam askorbat merupakan zat pereduksi dengan potensial
hydrogen sebesar +0,008 V, sehingga membuatnya mampu untuk
mereduksi senyawa-senyawa seperti oksigen molekuler, nitrat, dan
sitokrom a serta c (Vivi, 2016)
II. 4. 11 Fungsi Vitamin D
Fungsi vitamin D adalah untuk perawatan tulang dan gigi, dengan
membantu penyerapan kalsium dan fosfor sebagai unsur pembentuk
struktur tulang tersebut. Seharusnya suplementasi Vitamin D tidak
diperlukan, karena selain diproduksi oleh tubuh dan diaktifkan oleh sinar
matahari (Aung, 2016).
II. 4. 12 Fungsi Vitamin E
Vitamin E (tokoferol) bertindak sebagai antioksidan dengan
memutuskan berbagai reaksi rantai radikal bebas sebagai akibat
kemampuannya untuk memindahkan hydrogen fenolat kepada radikal
bebas perksil dari asam lemak tak jenuh ganda yang telah mengalami
peroksidasi . Radikal bebas fenoksi yang terbentuk kemudian bereaksi
dengan radikal bebas peroksil selanjutnya. Dengan demikian á – tokoferol
tidak mudah terikat dalam reaksi oksidasi yang reversible, cincin kromana
dan rantai samping akan teroksidasi menjadi produk non radikal bebas
(Vivi, 2016).
II. 4. 13 Fungsi Vitamin K
Vitamin K membantu terbentuknya senyawa‐senyawa pembeku
darah yang disebut sebagai protrombin untuk menjadi trombin. Fungsi lain
dari vitamin K adalah membantu mengaktifkan osteokalsin, protein
pembangun tulang, untuk menjaga tulang dari kerapuhan (osteoporosis)
yang terjadi pada usia tua. Namun, penggunaan vitamin K sebagai
suplemen hanya digunakan dengan pengawasan dokter (Aung, 2016).
II. 5 Defisiensi Atau Kekurangan Vitamin
II. 5. 1 Defisiensi Atau Kekurangan Vitamin A
24
Gejala defisiensi Vitamin A akan nampak bila cadangan Vitamin A
dalam hati telah berkurang. Defesiensi protein dan Zn akan menghambat
pelepasan Vitamin A dari hati, sehingga dapat menimbulkan gejala-gejala
seperti defisiensi Vitamin A. Defisiensi Vitamin A dapat disebabkan oleh
beberapa faktor, misalnya konsumsi Vitamin A yang rendah, gangguan
dalam proses penyerapan didalam usus halus, gangguan dalam proses
penyimpananan di hati, dan gangguan dalam proses konversi provitamin
A menjadi Vitamin A (Rinda, 2016).
II. 5. 2 Defisiensi Atau Kekurangan Vitamin B1
Kekurangan tiamin akan mempengaruhi semua sistem organ karena
derivatif tiamin dan enzim tergantung pada keberadaan dari tiamin di sel
tubuh. Bagian tubuh yang paling sensitif terhadap pengaruh dari vitamin
Bl yakni sistem saraf. Hal ini akibat dari metabolisme oksidatif yang ada di
sistem saraf. Kekurangan vitamin Bl pada umumnya dapat menimbulkan
subacutely, koma metabolik, bahkan kematian (Aung, 2016).
Penyakit akibat kekurangan vitamin Bl yakni beri-beri, sindrom
wernicke-Korsakof dan neutopati optik, neuropati perifer (kesemutan atau
mati rasa di kaki) dan neuropati aksonal (kelumpuhan parsial atau
hilangnya sensasi). Beri-beri adalah penyakit neurologis dan
kardiovaskular. Tiga bentuk utama dari gangguan ini adalah beri-beri
kering. beri-beri basah dan beri-beri kekanak-kanakan. Beri-beri kering
dengan gejala klinis yakni neuropati perifer terdiri dari gangguan simetris
sensorik, motorik, dan fungsi refleks yang mempengaruhi lebih dari
proksimal segmen ekstremitas distal dan menyebabkan nyeri otot betis.
Beri-beri basah dengan gejala kebingungan mental, atrofi otot, edema,
takikardia, kardiomegali, dan gagal jantung kongestif di samping neuropati
perifer. Sedangkan beri-beri infantil terjadi pada bayi yang diberi ASI oleh
ibu kekurangan kekurangan vitamin B1. Dampak yang timbul pada bayi
yakni bentuk jantung. aphonic, atau pseudommeningitic dari gangguan.
Bayi dengan beri-beri menyerang jantung sering menunjukkan keras
25
menusuk menangis, muntah, dan takikardia. Kejang yang tidak biasa, dan
kematian (Aung, 2016).
Kekurangan vitamin B2 sering terjadi pada usia lanjut,
mengakibatkan terjadinya gejala penurunan daya penglihatan, katarak,
depresi, gangguan kulit, pening, rambut rontok, radang mata, lesi mulut,
gelisah dan gejala neurologis (mati rasa, hilang sensasi, seperti kena syok
listrik). Gejala lainnya adalah kejang, sensitif terhadap cahaya,
mengantuk, dan lemah (Aung, 2016).
Gejala kekurangan niacin ringan meliputi: gangguan pencernaan,
kelelahan, sariawan, muntah, depresi. Kekurangan parah, disebut
pellagra, dapat menyebabkan gejala yang berhubungan dengan kulit,
system pencernaan , dan sistem saraf. Mereka termasuk: kulit tebal,
bersisik, berpigmen ruam pada kulit terkena sinar matahari, bengkak
mulut dan merah lidah, muntah dan diare, sakit kepala, apati, kelelahan,
depresi, disorientasi, hilang ingatan, Jika tidak diobati, pellagra dapat
menyebabkan kematian. Kekurangan niasin lebih mungkin disebabkan
oleh masalah yang
mempengaruhi penyerapan niacin atau triptofan. Penyebab paling umum
adalah alkoholisme. Niacin mengambil bagian dalam lebih dari 50 proses
metabolisme dalam tubuh, kekurangan yang mungkin memiliki efek serius
pada kesehatan Anda. Berikut rinci beberapa tanda-tanda yang dapat
terjadi ketika niasin, juga dikenal sebagai vitamin B3, habis dari tubuh.
Beberapa gejala kekurangan niasin yakni (Aung, 2016) :
- Tanda Kulit
Jika Anda memiliki kekurangan vitamin B3, lesi akan mulai muncul di
kedua sisi tubuh Anda, simetris. Lesi akan menjadi terlihat pada daerah
yang biasanya di bawah tekanan. Lebih dari itu, kulit yang terkena sinar
matahari juga memiliki risiko lebih besar terkena lesi tersebut.
- Gejala Membran Mukosa
26
Dalam sebagian besar kasus, selaput lendir mulut akan terganggu.
Namun, ada keadaan dimana uretra dan vagina terpengaruh. Kekurangan
vitamin B3 akut menyebabkan kondisi kesehatan, seperti glositis dan
stomatitis. Ketika kekurangan niasin makin parah maka lidah dan selaput
lendir mulut menjadi merah. Gejala yang mungkin dialami pada saat
kondisi seperti itu meliputi: Edema lidah, Peningkatan air liur, nyeri di
mulut, dan ulserasi. Ulserasi mungkin muncul di lokasi berikut: Di bagian
dalam pipi, Pada membran mukosa bibir bawah, dan di bawah lidah.
- Gejala Gastrointestinal
Jika kekurangan vitamin B3, mungkin mengalami sensasi terbakar di
tenggorokan dan kerongkongan. Selain itu, tanda-tanda berikut mungkin
terjadi: ketidaknyamanan perut, sembelit, diare, proses menggelembung,
mual, muntah dan darah dalam tinja. Darah dalam tinja terjadi karena
ulserasi usus.
Defisiensi asam pantotenat menyebabkan gejala nyeri otot, depresi,
eksema, kelelahan, kerontokan rambut, insomnia (sulit tidur), tekanan
darah rendah, dan koordinasi buruk. Hal tersebut banyak terjadi pada usia
lanjut karena diet dan penyerapan yang buruk, sehingga asupan asam
pantetonat hanya mencapai tingkat 60% dari kebutuhan yang dianjurkan
(RDA). Kekurangan asam pantotenat dapat berakibat muntah, gangguan
saluran cerna, susah tidur, dan lelah. Walaupun banyak terdapat pada
makanan, suplemen asam pantotenat diperlukan untuk kasus tertentu,
untuk membantu memperkuat sistem imun dengan meningkatkan
produksi antibody (Vivi, 2016)
Kekurangan vitamin B6 jarang terjadi dan setiap defisiensi yang terjadi
merupakan bagian dari defisiensi menyeluruh vitamin B kompleks. Namun
defisiensi vitamin B6 dapat terjadi selama masa laktasi, pada alkoholik
dan juga selama terapi isoniazid (Vivi, 2016).
27
Gejala defisiensi biotin adalah depresi, halusinasi, nyeri otot dan
dermatitis. Putih telur mengandung suatu protein yang labil terhadap
panas yakni avidin. Protein ini akan bergabung kuat dengan biotin
sehingga mencegah penyerapannya dan menimbulkan defisiensi biotin.
Komsumsi telur mentah dapat menyebabkan defisiensi biotin.Tidak
adanya enzim holokarboksilase sintase yang melekatkan biotin pada
residu lisin apoenzim karboksilat, juga menyebabkan gejala defisiensi
biotin, termasuk akumulasi substrat dari enzim-enzim yang tergantung
pada biotin (piruvat karboksilase, asetyl ko A karboksilase, propionil ko A
karboksilase dan ß – metilkrotonil ko A ). Pada sebagian kasus, anak-
anak dengan defisiensi ini juga menderita penyakit defisiesi kekebalan
(Vivi, 2016).
Defisiensi asam folat dapat berakibat anemia makrositik, diare,
mudah terkena infeksi, lidah merah dan licin, depresi, gangguan mental,
lelah, dan pingsan. Seharusnya defisiensi ini tidak perlu terjadi, karena
asam folat termasuk vitamin yang non‐esensial yang disintesis di dalam
saluran cerna, dan juga terdapat dalam jumlah cukup pada bahan
makanan sehari‐hari (Vivi, 2016).
Kekurangan atau defisiensi vitamin B12 menyebabkan anemia
megaloblastik. Karena defisiensi vitamin B12 akan mengganggu reaksi
metionin sintase. Anemia terjadi akibat terganggunya sintesis DNA yang
disebabkan oleh gangguan sintesis purin dan pirimidin yang terjadi akibat
defisiensi tetrahidrofolat. Homosistinuria dan metilmalonat asiduria juga
terjadi. Kelainan neurologik yang berhubungan dengan defisiensi vitamin
B12 dapat terjadi sekunder akibat defisiensi relatif metionin (Vivi, 2016)
II. 5. 10 Defisiensi Atau Kekurangan Vitamin C
kekurangan asam askorbat menyebabkan penyakit skorbut, penyakit ini
berhubungan dengan gangguan sintesis kolagen yang diperlihatkan dalam
bentuk perdarahan subkutan serta perdarahan lainnya , kelemahan otot,
28
gusi yang bengkak dan menjadi lunak dan tanggalnya gigi,penyakit
skorbut dapat disembuhkan dengan memakan buah dan sayur-sayuran
yang segar. Cadangan normal vitamin C cukup untuk 34 bulan sebelum
tanda-tanda penyakit skorbut (Vivi, 2016).
II. 5. 11 Defisiensi Atau Kekurangan Vitamin D
Faktor penyebab defisiensi vitamin D yaitu kurangnya paparan sinar
matahari (UVB) dan rendahnya asupan vitamin D. Paparan sinar matahari
yang kurang disebabkan oleh kurangnya aktivitas di luar ruangan atau
bekerja di dalam ruangan dalam jangka waktu yang panjang, gaya hidup
yang cenderung menghindari sinar matahari, penggunaan bahan pakaian
yang sulit menyerap sinar matahari atau kebiasaan berpakaian panjang,
penggunaan pelindung tubuh seperti topi, payung, sunscreen/sunblock.
Selain itu, rendahnya asupan makanan yang mengandung banyak vitamin
D seperti ikan berlemak, susu dan makanan yang difortifikasi, adanya
kecenderungan mengurangi bahan makanan tinggi lemak yang pada
akhirnya mengakibatkan defisiensi vitamin D (Rosita dkk, 2017).
II. 5. 12 Defisiensi Atau Kekurangan Vitamin E
Kekurangan vitamin E dapat menimbulkan anemia pada bayi yang
baru lahir. Kebutuhan akan vitamin E meningkat bersamaan dengan
semakin besarnya masukan lemak tak- jenuh ganda. Asupan minyak
mineral, keterpaparanterhadap oksigen (seperti dalam tenda oksigen )
atau berbagai penyakit yang menyebabkan tidak efisiennya penyerapan
lemak akan menimbulkan defisiensi vitamin E yang menimbulkan gejala
neurology. (Vivi, 2016).
Vitamin E dirusak oleh pemasakan dan pengolahan makanan yang
bersifat komersial,termasuk pembekuan. Benih gandum, minyak biji bunga
matahari serta biji softlower, dan minyak jagung serta kedelai, semuanya
merupakan sumber vitamin E yang baik (Vivi, 2016)
II. 5. 13 Defisiensi Atau Kekurangan Vitamin K
Kekurangan vitamin K dapat juga disebabkan oleh penggunaan obat
kolestiramin yang efek kerjanya mengikat garam empedu sehingga akan
29
megurangi absorpsi vitamin K yang memerlukan garam empedu pada
proses absorpsinya. Faktor risiko lain adalah kurangnya sintesis vitamin K
oleh bakteri usus karena pemakaian antibiotika secara berlebihan,
gangguan fungsi hati (kolestasis), malabsorpsi vitamin K akibat kelainan
usus maupun akibat diare (Jufitriani, 2017).
II. 6 Analisis Vitamin
II.6.1 Vitamin A (Retinol)
II.6.1.1 Prinsip
Sampel disaponofikasi, vitamin A akan terekstrak ke dalam larutan
organik dan terkonsentrasi. Semua trans-retinol dan 13-cis-retinol
ditentukan dengan HPLC dengan kolom silika.
HPLC : metode yang dapat diterima dalam pengukuran Vitamin A (karena
akurat).
II.6.1.2 Metode dan Tahapan Analisis
1. Metode Kolorimetri
Metode ini berdasarkan atas reaksi akseroftol dengan antimon
triklorida anhidrat dalam kloroform yang menghasilkan warna biru-ungu.
Reaksi ini terjadi antar antimon triklorid dengan rantai tidak jenuh dari
akseroftol. Karoten, asam poliena dan beberapa senyawa dalam minyak
ikan mengahasilkan warna biru juga. Warna yang terjadi intensitasnya
cepat maksimun tetapi juga cepat pucat.
- Minyak hati ikan cod memberikan warna biru-ungu dengan agensia
dehidrator semi-sal asam sulfat
- Rosenheim dan Drummond menemukan bahwa AsCl3 memberikan
warna biru intensif yang tidak cepat hilang.
- Antimon-trikhlorida (SbCl3) meski memberi warna kurang intensif tetapi
lebih stabil, dengan serapan maximum pada 620 nm
a. Garis besar untuk analisa:
1) Untuk sampel dengan kadar vitamin A rendah dilakukan saponifikasi
sbb:
30
- 10 + 0,1 g sampel ditambah 75ml alkohol 95% dan 25 ml KOH 50% dan
dididihkan dengan memakai pendingin balik
- Campuran dipindah ke labu pemisah dan dilakukan ekstraksi dengan
ditambah dietil eter
- Ekstrak eter dicuci dengan H2O, kemudian ditambah Na-sulfat anhidrat
(untuk membebaskan air)
2) Untuk sampel yang kaya vitamin A : dilarut-kan sampel dalam
khloroform (konsentrasi akhir = 20% w/v)
- 4 ml reagen Carr-Price ditambah 1ml khloroform (sebagai blanko)
- 0,5ml larutan sampel dalam khloroform ditambah 2ml reagen Carr-
Price, dicampur merata
- Absorbansi campuran ditera pada 620 nm
- Dibuat kurva standar (kisaran konsentrasi vitamin A = 0 – 15 IU/ml)
1. Metode Kromatografi (HPLC)
a) Preparasi Sampel
Transfer sampel sebanyak 40 mL (makanan formula atau susu cair)
ke dalam tabung digesti 100 ml, tambahkan 10 ml etanolik pirogallol (2%
pirogallol dalam 95% etanol) dan sabunkan dengan etanolik KOH (10%
KOH dalam 90% etanol) pada suhu ruang selama 18 jam atau pada suhu
70 C dengan menggunakan reflux vessel.
b) Ekstraksi
Pipet 3 ml sampel yang telah terdigesti ke dalam tabung sentrifus 15 ml
dan tambahkan 2 ml air. Ekstrak dengan 7 ml heksan-dietileter (85:15).
Ulangi ekstraksi sebanyak 2 x. Masukkan sampel terekstrak ke dalam
tabung volumetrik 25 ml. Tambahkan 1 ml heksadekan (heksadekan (1) +
hexan (100)) dan encerkan sampai 25 ml dengan heksan. Pipet 15 ml
ekstrak yang sudah diencerkan ke dalam tabung sentrifus dan uapkan
dengan nitrogen. Larutkan residu dalam 0,5 ml heptan.
c) Parameter Kromatografi
 Kolom = 5 cm x 4.5 mm dipadati dengan 3 mm silika (Apex µm silika)
 Fase mobil = Isokratik, heptane dan isopropanol (1-5%)
31
 Deteksi = UV , 340 nm  Flow rate  1-2 ml/menit
II.6.1.3 Perhitungan Kadar
Kadar vitamin A =
area puncak sampel
× [ standar vit . A ] × volume akhir ( mL ) × fp
area puncak standar
bobot sampel (g)
II.6.2 Vitamin B (Tiamin)
II.6.2.1 Prinsip
Ekstraksi dan hidrolisis enzimatis dari ester-ester tiamin fosfat dan
pembersihan. Metode ini didasarkan pada pengukuran fluoresensi dari
bentuk oksidasi tiamin (tiokrom).
1. Metode Spektrofluorometri
a). Bahan-bahan yang digunakan untuk analisis vitamin B1 dalam susu
adalah sebagai berikut:
- Resin untuk kromatografi, disiapkan dengan menambah 50 gram Bio-
Rex dengan 300 mL HCl 2 N, diaduk selama 15 menit, disaring, dan
diulangi lagi dengan menambahkan 300 mL H2O, diaduk selama 1
menit, disaring, dan diulangi lagi sampai diperoleh pH H2O antara 4,5–
7,0. Akuades (H2O) harus bebas dari suspensi resin ketika didiamkan
selama 15 detik. Jika terbentuk suspensi resin, pencucian diulang
hingga diperoleh H2O jernih.
- Larutan natrium asetat 2 N, disiapkan dengan melarutkan 272 gram
natrium asetat trihidrat dalam air secukupnya hingga 1 L.
- Indikator pH brom kresol hijau dibuat dengan melarutkan 100 mg
indikator dalam 2,8 mL NaOH 0,05 N dengan penghangatan. Larutan
indikator diencerkan dengan H2O sampai 200 mL. Kisaran warna
indikator: hijau (4,0) – biru (5,8).
- Indikator pH bromofenol biru dibuat dengan melarutkan 100 mg
indikator dalam 3,0 mL NaOH 0,05 N dengan penghangatan. Larutan
32
indikator diencerkan dengan H2O sampai 250 mL. Kisaran warna
indikator: kuning (3,0) – biru (4,6).
- Larutan enzim 10% dibuat dengan melarutkan 10 gram enzim diastase
dalam akuades dan mengencerkannya sampai 100 mL.
- Larutan kalium klorida netral 25%, dibuat dengan melarutkan 250 gram
KCl dalam air secukupnya hingga 1 L.
- Larutan kalium klorida-asam, dibuat dengan menambahkan 8,5 mL HCl
pada 1 L larutan kalium klorida di atas
- Larutan kalium ferisianida 1%, dibuat dengan melarutkan 1 gram
K3Fe(CN)6 dalam air secukupnya lalu mengencerkannya sampai 100
mL. Larutan ini dibuat baru tiap hari.
- Pereaksi pengoksidasi disiapkan dengan mencampur 4,0 mL larutan
kalium ferisianida 1% dengan NaOH 15% secukupnya hingga 100 mL.
Pereaksi ini digunakan dalam waktu 4 jam setelah pembuatan.
- Isobutil alkohol.
- Larutan stok kinin sulfat, dibuat dengan melarutkan 10 mg kinin sulfat
dalam asam sulfat 0,1 N secukupnya hingga 1 L. Larutan stok ini
disimpan dalam labu berwarna merah atau kuning.
- Larutan baku kinin sulfat dibuat dengan mengencerkan 5,0 mL larutan
stok kinin sulfat di atas dengan H 2SO4 0,1 N sampai 200 mL. Larutan
baku ini disimpan dalam labu berwarna merah atau kuning.
- Alkohol yang diasamkan dibuat dengan mengencerkan 250 mL alkohol
dengan H2O sampai 1 L. Larutan ini ditambah HCl tetes demi tetes
untuk mengatur pH-nya antara 3,5–4,3.
- Larutan asam asetat 3%, dibuat dengan mengencerkan 3 mL asam
asetat glasial dengan H2O sampai 100 mL. 2.
b). Penyiapan kolom Kromatografi
Kolom kromatografi disiapkan dengan cara memasukkan glass wool
dari atas kolom sampai ujung kolom. Dengan hati-hati, suspensi resin
dimasukkan dalam H2O sampai ketinggian 10 cm. Cairan dijaga untuk
tidak berada di bawah permukaan resin selama proses adsorbsi.
33
c). Penyiapan larutan baku Tiamin HCl
- Larutan baku stok (induk)- 100 µg/mL, dibuat dengan menimbang
secara seksama 50,0 mg baku tiamin HCl yang telah dikeringkan
dalam desikator. Tiamin HCl dilarutkan dalam larutan alkohol 20%
yang telah diasamkan dengan HCl untuk mengatur pH larutan 3,5–
4,3 lalu mengencerkannya sampai batas tanda dengan alkohol
yang telah diasamkan.
- Larutan antara 10 µg/mL, dibuat dengan mengencerkan 100,0 mL
larutan stok (induk) 100 µg/mL diatas sampai 1 L dengan alkohol
20% yang telah diasamkan dengan HCl untuk mengatur pH antara
3,5–4,3.
- Larutan baku kerja- 1 µg/mL, dibuat dengan mengambil 10,0 mL
larutan baku antara lalu ditambah 50 mL HCl 0,1 N. Larutan
selanjutnya didigesti selama 30 menit pada penangas uap pada
suhu 95–100 oC atau dalam penangas air mendidih selama 30
menit dengan sesekali diaduk.
- Larutan baku kerja untuk sampel-sampel yang mengandung tiamin
bebas, dibuat dengan mengencerkan 20,0 mL larutan kerja (iii)
sampai 100 mL dengan HCl 0,1 N. Larutan ini ditandai sebagai
larutan baku uji dan dilanjutkan secara langsung dengan proses
oksidasi.
- Larutan baku kerja untuk sampel-sampel yang mengandung tiamin
pirofosfat, dibuat dengan cara: mengambil 20,0 mL larutan baku
kerja lalu dilanjutkan dengan proses hidrolisis enzim dimulai
dengan “larutan diencerkan dengan 65 mL”. Setelah selesai
dilanjutkan dengan pemurnian hingga diperoleh larutan 25,0 mL.
Larutan ini ditandai sebagai larutan baku uji (mengandung tiamin
HCl 5 µg) dan dilanjutkan dengan proses oksidasi.
d). Penyiapan sampel (ekstraksi)
- Untuk sampel-sampel yang mengandung tiamin bebas (tidak digunakan
untuk sampel yang mengandung tiamin pirofosfat).
34
- Untuk sampel kering atau setengah kering yang mengandung senyawa
basa dalam jumlah kecil, penyiapan sampelnya: ditimbang sejumlah
sampel secara seksama yang setara dengan 15 µg tiamin HCl lalu
dimasukkan dalam labu yang berukuran sesuai dan ditambah sejumlah
mL HCl 0,1 N sebanyak 10 kali berat sampel kering dalam gram.
Campuran diaduk hingga sampel terdispersi dalam cairan. Jika terjadi
gumpalan, larutan digojog kuat hingga semua partikel padat
bersentuhan dengan cairan. Tepi labu dicuci dengan HCl 0,1 N. Larutan
selanjutnya didigesti selama 30 menit pada penangas uap pada suhu
95–100 oC dengan seringkali diaduk lalu didinginkan. Jika gumpalan
masih terjadi, campuran digojog hingga partikel terdispersi. Larutan
selanjutnya diencerkan dalam labu takar dengan HCl 0,1 N hingga
mengandung ± 0,2 µg/mL. Larutan ini ditandai sebagai larutan sampel
uji.
- Untuk sampel kering atau setengah kering yang mengandung senyawa
basa dalam jumlah cukup tinggi, penyiapan sampel dilakukan dengan
cara: ditimbang sejumlah sampel secara seksama yang setara dengan
15 µg tiamin HCl, dimasukkan dalam labu yang berukuran sesuai,
ditambah HCl encer dalam sampel hingga pH-nya ± 4, ditambah
sejumlah volume H2O hingga volumenya 10 kali berat sampel kering
dalam gram. Campuran ditambah 1 mL HCl 10 N tiap 100 mL cairan.
Jika terjadi gumpalan, larutan digojog kuat hingga semua partikel padat
selanjutnya didigesti selama 30 menit pada penangas uap pada suhu
95–100 oC dengan seringkali diaduk lalu didinginkan. Jika gumpalan
masih terjadi, campuran digojog hingga semua partikel terdispersi.
Larutan selanjutnya diencerkan dalam labu takar dengan HCl 0,1 N
hingga mengandung ± 0,2 µg/mL. Larutan ini ditandai sebagai larutan
sampel uji.
- Untuk sampel cair, penyiapan sampel dilakukan dengan cara: diambil
sejumlah tertentu sampel secara seksama yang setara dengan 15 µg
35
tiamin HCl, dimasukkan dalam labu yang berukuran sesuai. pH larutan
diatur dengan penambahan HCl atau NaOH hingga pH ± 4. Larutan
selanjutnya ditambah sejumlah volume H2O hingga volumenya 10 kali
berat sampel dalam gram. Larutan ditambah 1 mL HCl 10 N tiap 100
mL cairan lalu diaduk hingga sampel terdispersi dalam cairan. Jika
terjadi gumpalan, larutan digojog kuat. Tepi labu dicuci dengan HCl 0,1
N. Larutan selanjutnya didigesti selama 30 menit pada penangas uap
pada suhu 95–100 oC dengan seringkali diaduk lalu didinginkan, dan
jika gumpalan masih terjadi campuran digojog. Larutan diencerkan
dalam labu takar hingga mengandung ± 0,2 µg/mL. Larutan ini ditandai
sebagai larutan sampel uji
- Untuk sampel-sampel yang mengandung tiamin pirofosfat, penyiapan
sampelnya dilakukan dengan cara.
- penyiapan sampelnya dilakukan dengan cara: ditimbang sejumlah
sampel secara seksama yang setara dengan 15 µg tiamin HCl,
dimasukkan ke dalam labu yang berukuran sesuai lalu ditambah
sejumlah mL HCl 0,1 N sebanyak 10 kali berat sampel kering dalam
gram. Larutan diaduk hingga sampel terdispersi dalam cairan. Jika
terjadi gumpalan, larutan digojog kuat hingga semua partikel padat
didigesti selama 30 menit pada penangas uap pada suhu 95–100 oC
dengan seringkali diaduk lalu didinginkan. Jika gumpalan masih terjadi,
campuran digojog hingga partikel terdipersi. Larutan diencerkan dalam
labu takar dengan HCl 0,1 N hingga mengandung ± 0,2–0,5 µg/mL.
Larutan ini ditandai sebagai larutan sampel uji. Proses selanjutnya
adalah dengan hidrolisis enzim dan dengan pemurnian .
e). Hidrolisis dengan Enzim
Sejumlah tertentu aliquot yang mengandung 10–25 µg tiamin diambil
dan diencerkan dengan 65 mL HCl 0,1 N. pH masing-masing larutan
diatur 4,0-4,5 dengan penambahan larutan natrium asetat 2 N
menggunakan indikator bromkresol hijau. Titik akhir ditandai dengan
36
perubahan warna biru yang tetap. Larutan selanjutnya ditambah 5 mL
larutan enzim, dicampur, diinkubasikan pada suhu 45–50 oC selama 3
jam, lalu didinginkan, dan pH-nya diatur ± 3,5 menggunakan indikator
bromofenol biru. Larutan diencerkan dengan HCl 0,1 N sampai 100 mL
dan disaring melalui kertas saring yang tidak menyerap tiamin. 5.
f). Pemurnian
Sejumlah aliquot larutan sampel yang telah disaring yang
mengandung ± 5 µg tiamin dilewatkan pada kolom kromatografi yang telah
dipersiapkan. Kolom kromatografi dicuci 3 kali masing-masing dengan 5
mL H2O yag hampir mendidih. Permukaan cairan jangan dibiarkan berada
di bawah permukaan resin. Tiamin dielusi dari resin dengan melewatkan 5
kali masing-masing 4,0–4,5 mL larutan KCl-asam yang hampir mendidih
(>60 oC) melalui kolom. Permukaan cairan jangan dibiarkan berada di
bawah permukaan resin. Eluat yang diperoleh dari hasil hidrolisis dan
pemurnian larutan baku dikumpulkan dalam labu takar 25 mL, didinginkan,
dan diencerkan dengan larutan KCl-asam sampai batas volume. Larutan
ini ditandai sebagai larutan sampel uji.
2. Metode Kolorimetri
Dasar metode ini adalah reaksi antara tiamin dengan 6-aminotimol
yang telah didiazotasi. Hasil peruraian tiamin tidak menghasilkan warna
dengan pereaksi ini. Dekstrosa, laktosa, maltosa, sukrosa, tepung, kasein,
gelatin, pepton, urea, gliserofosfat dan logam berat, dengan kadar 100 kali
lebih besar dari kadar tiamin tetap tidak mengganggu. Riboflavin, asam
nikotinat, nikotinamid, piridoksin, asam pantotenat, guanin, adenin,
triptopan, tirosin dan histidin yang terdapat dengan kadar 20 kali lebih
besar daripada kadar tiamin juga tidak mengganggu. Pereaksi 6-
aminotimol dibuat dengan melarutkan 50 mg 6-aminotimol dalam 50 mL
asam klorida 0,35% dan mengencerkannya dengan air secukupnya
hingga 200 mL. Prosedur penetapan kadar tiamin murni dengan pereaksi
6-aminotimol: Sejumlah 5,0 pereaksi 6-aminotimol didinginkan dengan es,
ditambah 2,0 mL natrium nitrit 0,1%, lalu dicampur dan didiamkan selama
37
1 menit. Larutan selanjutnya ditambah 5,0 mL natrium hidroksida 20% dan
diencerkan dengan air secukupnya sampai 20,9 mL. Sejumlah 1,0
pereaksi ini ditambah 1,0 larutan sampel. Setelah 5 menit larutan
diencerkan dengan air untuk mendapatkan absorbansi yang sesuai.
Digunakan larutan blanko. Jika larutan sampel telah berwarna atau keruh,
dilakukan penetapan seperti diatas kemudian warna yang terjadi disari
dengan campuran pelarut yang terdiri atas 90 mL toluen yang telah
didestilasi ulang (redestilasi) dan 10 mL n-butanol. Lapisan pelarut organik
dipisahkan dan ditambah ± 1 gram natrium sulfat anhidrat untuk
mengeringkan pelarut lalu diukur absorbansinya.
2. Metode Alkalimetri
Adanya hidroklorida pada tiamin hidroklorida dapat dititrasi dengan
natrium hidroksida 0,1 N menggunakan indikator brom timol biru. Prosedur
penetapan kadar tiamin hidroklorida dengan metode alkalimetri:
- Lebih kurang 500 mg tiamin hidroklorida yang ditimbang seksama,
dilarutkan dalam 75 mL air bebas CO2 lalu dititrasi dengan NaOH 0,1 N
menggunakan indikator brom timol biru. Tiap mL NaOH 0,1 N setara
dengan 33,70 gram tiamin hidroklorida.
- Berat ekivalen (BE) tiamin hidroklorida pada penetapan secara
alkalimetri adalah sama dengan berat molekulnya (BM). Hali ini
disebabkan karena tiap 1 mol tiamin hidroklorida bereaksi dengan 1 mol
NaOH.
3. Metode Titrasi Bebas Air (TBA)
Tiamin hidroklorida dalam asam asetat glasial dapat dititrasi dengan
asam perklorat dengan sebelumnya ditambah raksa (II) asetat berlebihan.
Kedua atom nitrogen dalam tiamin hidroklorida tertitrasi sehingga berat
ekivalennya setengah dari berat molekulnya. Sebagai indikator dapat
digunakan p-naftol benzen, merah kuinaldin, atau dengan kristal violet.
Prosedur penetapan kadar tiamin dengan metode TBA:
- Lebih kurang 250 mg tiamin hidroklorida yang ditimbang seksama
ditambah 10 mL asam asetat glasial, 10 mL raksa (II) asetat 5% dalam
38
asam asetat glasial, dan ditambah 20 mL dioksan. Selanjutnya larutan
dititrasi dengan asam perklorat 0,1 N menggunakan indikator 3 tetes
kristal violet sampai warna biru. Tiap mL asam perklorat 0,1 N setara
dengan 16,86 mg tiamin hidroklorida.
- Berat ekivalen (BE) tiamin hidroklorida pada penetapan secara titrasi
bebas air adalah setengah dari berat molekulnya (BM/2). Hali ini
disebabkan karena tiap 1 mol tiamin hidroklorida bereaksi dengan 2 mol
HClO4.
4. Metode Argentometri
Adanya klorida dalam tiamin hidroklorida dapat ditetapkan secara
argentometri dengan menggunakan metode Volhard. Pada penetapan
dengan metode Volhard suasananya harus asam sebab jika suasananya
basa maka akan terjadi reaksi antara perak nitrat dengan basa
membentuk Ag(OH) yang pada tahap selanjutnya akan membentuk
endapan putih Ag2O, akibatnya perak nitrat tidak hanya bereaksi dengan
sampel tetapi juga bereaksi dengan basa. Prosedur penetapan kadar
vitamin B1 secara argentometri:
- Lebih kurang 100 mg tiamin hidroklorida yang ditimbang secara seksama
dilarutkan dalam 20 mL air. Larutan diasamkan dengan asam nitrat
encer dan ditambah 10 mL perak nitrat 0,1 N. Endapan yang terjadi
disaring dan dicuci dengan air sampai tidak mengandung klorida. Filtrat
selanjutnya dititrasi dengan larutan baku ammonium tiosianat 0,1 N
menggunakan indikator besi (III) amonium sulfat. Tiap mL perak nitra
0,1 N setara dengan 16,86 mg tiamin hidorklorida.
- Berat ekivalen (BE) tiamin hidroklorida pada penetapan secara
argentometri adalah setengah dari berat molekulnya (BM/2). Ini
disebabkan karena tiap 1 mol tiamin hidroklorida(yang mengandung 2
Cl -) bereaksi dengan 2 mol AgNO3.
5. Metode Gravimetri
Tiamin dalam tablet vitamin B1 dan dalam injeksi dapat ditetapkan
secara gravimetri dengan cara mengendapkan larutan tiamin menggunakn
39
asam silikowolframat. Prosedur penetapan kadar tiamin dengan metode
gravimetri: Sejumlah tertentu tablet yang telah ditimbang secara seksama
dan setara dengan lebih kurang 50 mg tiamin hidroksida, diencerkan
dengan air secukupnya hingga 50 mL lalu ditambah 2 mL asam klorida
pekat dan dipanaskan hingga mendidih. Pada larutan yang telah mendidih
ini selanjutnya ditambah dengan cepat tetes demi tetes 4 mL asam
silikowolframat yang baru disaring lalu dididihkan selama 4 menit. Larutan
disaring melalui penyaring kaca masir lalu dicuci dengan 50 mL campuran
mendidih yang terdiri atas 1 bagian volume asam klorida pekat dan 19
bagian air yang mengandung asam silikowolframat 0,2% (b/v), kemudian
dicuci 2 kali tiap kali dengan 5 mL aseton. Sisa dikeringkan pada suhu 105
oC selama satu jam lalu didinginkan selama 10 menit dan dibiarkan dalam
eksikator di atas larutan asam sulfat 38% dan ditimbang. Tiap gram sisa
setara dengan 192,9 mg tiamin hidroklorida.
Perhitungan kadar vitamin B1 dapat dihitung dengan rumus :
( V × N ) AgNO 3 × mgkesetaraan
Kadar vitamin B1 =
N Kesetaraan ×berat penimbangan( mg)
Dimana volume AgNO3 adalah volume hasil titrasi dan untuk
Normalitas AgNO3 adalahhasil standarisasi larutan AgNO3 dengan NaCl
kemudian dikalikan dengan mg kesetaraan vitamin B1 dan hasilnya dibagi
dengan Normalitas kesetaraan AgNO3 yang dikalikan dnegan berat
penimbangan NaCl lalu dikalikan 100%. Dimana Tiap ml larutan AgNO3
0,1 N setara dengan 16,86 vitamin B1.
II.6.3 Vitamin B2 (Riboflavin)
II.6.3.1 Prinsip
Ektraksi, pembersihan dan kompensasi adanya substansi
pengganggu dan ditentukan dengan fluorometer
1. Metode spektrofluorometri
40
Cara penetapan langsung dapat digunakan terhadap campuran yang
bebas dari senyawa berwarna yang mengganggu atau senyawa
pengganggu lain yang mengandung riboflavin lebih besar dari 0,1 %.
Cara penetapan langsung dapat digunakan terhadap campuran yang
tidak mengandung senyawa berfluorosensi atau senyawa berwarna yang
larut dalam air atau dalam asam encer. Pengukuran harus dilakukan
secepat mungkin karena riboflavin terurai oleh sinar ultraviolet.
Larutan sampel: Sejumlah serbuk yang ditimbang seksama dan
setara dengan lebih kurang 2,5 mg riboflavin dimasukkan ke dalam labu
250 mL lalu ditambah 1 mL asam asetat 32,5% dan air secukupnya
hingga 200 mL. Lalu dipanaskan di atas penangas air sambil sering
dikocok hingga riboflavin larut lalu didinginkan hingga suhu 20ºC. Larutan
ditambah air secukupnya hingga 250 mL dan dicampur baik-baik.
Larutan riboflavin baku persediaan I, dibuat dengan melarutkan 50
mg riboflavin yang telah dikeringkan pada suhu 105 ºC selama 2 jam
dalam asetat 0,02 N secukupnya hingga 500 mL. Larutan riboflavin baku
persediaan II, dibuat dengan cara menambah 10,0 mL larutan riboflavin
baku persediaan I dengan asam asetat 0,02 N secukupnya hingga 100
mL. Larutan riboflavin baku, dibuat dengan mengencerkan 10,0 mL
larutan riboflavin baku persediaan II dengan air secukupnya hingga 100
mL. Kadar dalam mg riboflavin dihitung dengan menggunakan rumus:
2,5 x B – C / A – B
2. Metode spektrometri
Larutan riboflavin dalam pH 4,0 menunjukkan absorbs maksimum (λ
maks) pada 444 nm. Cara ini digunakan untuk menetapkan kemurnian
riboflavin atau untuk penetapan riboflavin dilakukan dengan cara
terlindung dari cahaya. Prosedur penetapan kadar riboflavin tunggal
secara spektrofotometri. Sekitar 100 mg riboflavin yang ditimbang
seksama dilarutkan dengan pemanasan dalam campuran 2 mL asam
asetat glacial dan 150 mL air. Larutan selanjutnya diencerkan dengan air,
didinginkan, ditambah air secukupnya hingga 1000 mL. pada 10,0 mL
41
larutan ditambah 3,5 mL natrium asetat 0,1 M kemudian ditambah air
secukupnya hingga 100 mL. kadarnya dihitung dengan menggunakan
riboflavin baku sebagai pembanding.
( I −b)
µg Tiamin HCl tiap 5mL larutan uji =
s−d
II.6.4 Vitamin B3 (Niasin)

II.6.4.1 Prinsip
Prinsip penentuan analisis didasarkan pada tingkat kemampuan
larutan vitamin B3 untuk mengabsorbsi beberapa jenis panjang
gelombang.
1. Metode Spektrofotometer
- Preparasi Sampel, Timbang sampel (kira-kira mengandung 0,1 mg
niasin) dan tambahkan NH2SO4, autoklaf selama 1 jam dan dinginkan.
Atur pH sampai 6,8 dan encerkan sampai volume konsentrasi 0,1 g
niasin/mL. campur dan saring.
- Preparasi tabung pengujian, Pengulangan sedikitnya menggunakan
0,5, 1,0, 2,0, 3,0, 4,0 dan 5,0 mL sampel kemudian tambahkan air
sampai mencapai 5 mL. tambahkan 5 mL Difco Basal medium untuk
niasin ke dalam masing- masing tabung, autoklaf selama 10 menit pada
suhu 121ºC dan dinginkan
- Preparasi standar Sama dengan preparasi pengujian Standar larutan
yang mengandung 0,1 μL/mL niasin inokulasi dan inkubasi (37ºC, 16-
18 jam). Tambahkan 1 tetes inokulum ke masing-masing tabung, tutup
tabung dan inkubasi pada suhu 37 ºC selama 16-18 jam sampai
kekeruhan maksimum pada tabung dengan konsentrasi niasin paling
tinggi.
- Pengukuran Absorbansi diukur pada panjang gelombang 540-660 nm.
42
Penentuan kadar Vitamin B3 dilakukan dengan mengukur tingkat
kemampuan absorbansi larutan vitamin dengan berbagai panjang
gelombang dan konsentrasi berbeda-beda sehingga dapat dibuat kurva
linear dengan menggunakan nilai hubungan antara panjang gelombang
dengan absorbansi larutan.
II.6.5 Vitamin B5 (Asam Pantotenat)

II.6.5.1 Prinsip
Prinsip yang digunakan dalam analisis vitamin B6 yaitu pembebasan
pirodoksin dengan cara hidrolisis dengan HCl, pemanasan, pengasaman,
pencucian, dan elusi serta penjernihan eluat yang membentuk supernatan
yag mendapatkan tiga perlakuan berbeda kemudian ditambahkan reagen
Gibb untuk mengahasilkan kompleks berwarna biru.
a. Pembutan Reagen Gibb ( larutan A)
Sebanyak 100 mg 2,6-dikhloroquinonkhloroimida dilarutkan dalam 250
mL isopropanol, dimasukkan dalam botol dan disimpan di lemari
pendingin. Bila selama penyimpanan timbul warna merah muda, reagen
harus dibuang (tidak murni).
b. Larutan ammonia-HCl (larutan B)
Sebanyak 160 gram NH4Cl + 700 mL akuades + 16 mLl NH4OH jenuh,
kemudian diencerkan sampai 1000 mL.
c. Pemurnian 2,6-dikhloroquinonkhloroimida
Larutkan 1 gram dalam 50 mL aseton kemudian diendapkan dengan
penambahan sedikit air setetes demi tetes sambil diaduk. Saring
kristalnya dalam corong Buchner, dikeringkan dengan pompa vakum,
simpan dalam botol tertutup di dalam refrigerator.
d. Larutan piridoksin-HCl (Larutan C)
43
Sebanyak 100 mg kristal piridoksin dilarutkan dalam 1 L HCl 0,1N dan
disimpan di lemari pendingin (stabil hingga 3 bulan) merupakan larutan
induk untuk membuat larutan standar.
e. Larutan Buffer
Sebanyak 73 gram Na2HPO4.2H2O + 167g asam sitrat + akuades
sampai 1000 mL pada 3.0.
f. Preparasi Ekstrak Uji

- 3 gram sampel (mengandung 30-200 µg pantotenat, lebih baik + 100µg)
+ 10ml HCl 4N, dipanaskan dalam gelas kimia mendidih selama 1 jam.
- Larutan didinginkan dan pH-nya dibuat 3.0 dengan HCl 1N dan NaOH
1N
- Ditambah 3 mL larutan buffer + 2,5 gram reagen absorben Lloyd,
hemegenkan selama 5 menit.
- Setrifugasi dan supernatan dibuang
- Residu dicuci dengan 5 mL HCl 0,001 N: sentrifugasi dan supernatan
dibuang.
- Ditambah 5 mL NaOH 2 N, diencerkan sampai 20 mL, dikocok selama
3 menit, lalu disentrifugasi (elusi pantotenat).
- Diambil 10 mL eluat, ditambah 50 mL isopropil alkohol, dan
disentrifugasi.
- Supernatan (ekstrak uji) yang jernih dipindah dan pHnya diatur menjadi
5,0 sampai 7,0 dengan HCl 12 N g.
g. Pengembangan Warna
- Disiapkan 3 tabung reaksi dan diisi dengan :
1) 6 mL ekstrak + 2 mL larutan B + 1 mL asam borat jenuh (blanko)
2) 6 mL ekstrak + 2 mL larutan B + 1 mL air
3) 6 mL ekstrak + 2 mL larutan B + 1 mL larutan standar (10 µg
pantotenat)
44
- Ditambah 1 mL larutan A (reagen Gibb) dan setelah 60 detik,
transmisinya dibaca pada 620 nm.
Perhitungan penetapan kadar vitamin B7 menggunakan rumus:
µg pantotenat = [ L1
]×
10
×
[
60
L 3−L 2 6 mL 10 ]
×18,5 ×
1
W
Keterangan:
L2 = densitas fotometrik (2-log G); G = % transmisi
L3-L2 = peningkatan densitas fotometrik karena penambahan
10 µg pantotenat
W = bobot sampel (gram)
(60/10) x 18,5 = faktor pengenceran (koreksi dilakukan untuk volume
1,5ml diserap oleh 2,5g adsorben dalam volume total
20 mL)
II.6.6 Vitamin B7 (Biotin)
II.6.6.1 Prinsip
Ektraksi, pembersihan dan kompensasi adanya substansi
pengganggu dan ditentukan dengan fluorometer
1. Metode spektrometri
Larutan riboflavin dalam pH 4,0 menunjukkan absorbs maksimum (λ
maks) pada 444 nm. Cara ini digunakan untuk menetapkan kemurnian
riboflavin atau untuk penetapan riboflavin dilakukan dengan cara
terlindung dari cahaya. Prosedur penetapan kadar riboflavin tunggal
secara spektrofotometri: Sekitar 100 mg riboflavin yang ditimbang
seksama dilarutkan dengan pemanasan dalam campuran 2 mL asam
asetat glacial dan 150 mL air. Larutan selanjutnya diencerkan dengan air,
didinginkan, ditambah air secukupnya hingga 1000 mL. pada 10,0 mL
larutan ditambah 3,5 mL natrium asetat 0,1 M kemudian ditambah air
secukupnya hingga 100 mL. kadarnya dihitung dengan menggunakan
riboflavin baku sebagai pembanding.
45
µg Tiamin HCl tiap 5mL larutan uji ¿ ¿
II.6.7 Vitamin B9 (Asam Folat)

II.6.7.1 Prinsip
Prinsip yang digunakan dalam analisis vitamin B9 adalah
menggunakan beberapa larutan yaitu larutan sampel, larutan standar, dan
eluent dengan metode identifikasi dengan cara menginjeksi larutan
standar dan larutan sampel ke dalam sistem HPLC.

a. Pembuatan Fase Gerak
- Ditimbang seksama 1640 mg natrium asetat dengan menggunakan
neraca analitik (untuk volume 2 L larutan MPh).
- Dimasukan ke dalam beaker glass 2000 mL.
- Dilarutkan dengan 1800 mL purified water, kemudian diaduk dengan
magnetic stirer.
- Diatur pH dengan menambahkan asam asetat glasial hingga mencapai
pH 3,0.
- Ditambahkan purified water hingga volume mencapai 2000 mL.
Kemudian jadilah larutan 1.
- Diambil 1800 mL larutan 1 dengan menggunakan gelas ukur 2000 mL.
- Ditambahkan asetonitril sebanyak 200 mL, kemudian dikocok hingga
larutan homogen.
- Disaring ke dalam botol dengan menggunakan millipore 0,45 mm.
b. Membuat Media Disolusi (Buffer)
1. Membuat NaOH 1N
- Ditimbang seksama 40 g NaOH dengan menggunakan neraca analitik.
- Dimasukkan ke dalam labu ukur 1 L.
- Ditambahkan purified water ke dalam labu ukur sampai tepat batas.
46
- Dikocok hingga larutan homogen.
2. Membuat HCl 1N
- Diambil sebanyak 85,3 mL HCl 37% kemudian dimasukkan kedalam
labu ukur 1 L.
- Ditambahkan purified water ke dalam labu ukur sampai tepat batas.
- Dikocok hingga larutan homogen.
3. Membuat 3 L larutan Buffer Citrate 0.05M pH 6
- Ditimbang seksama 5,99 g asam sitrat dengan menggunakan neraca
analitik.
- Dimasukkan ke dalam beaker glass 3 L.
- Ditimbang seksama 35,73 g trinatrium dihidrat dengan menggunakan
neraca analitik.
- Dicampur ke dalam beaker glass 3 L.
- Ditambahkan dengan purified water sebanyak 3000 L.
- Diaduk dengan magnetic stirer.
- Diatur pH dengan menggunakan NaOH 1N atau HCl 1N yang telah
dibuat sebelumnya hingga mencapai pH 6.
c. Preparasi Standar
- Ditimbang seksama 100 mg standar folic acid dengan menggunakan
neraca analitik.
- Dimasukan kedalam labu ukur 250 mL.
- Diencerkan dengan larutan buf er citrate secukupnya, kemudian
dilarutkan dengan buf er citrate hingga tanda batas labu ukur. (Standar
1).
- Dipipet 5 mL dari standar 1 kedalam labu ukur 100 mL, kemudian
diencerkan dengan larutan buf er citrate hingga tanda batas labu ukur.
(Standar 2).
- Dipipet 2.5 mL dari standar 2 kedalam labu ukur 100 mL, kemudian
diencerkan dengan larutan buf er citrate hingga tanda batas labu ukur.
(Standar 3).
47
- Masing-masing standar disaring dengan filter 0,45 µm kedalam vial
HPLC untuk dianalisis.
d. Preparasi Sampel
- Ditimbang seksama 6 tablet sediaan obat yang akan dianalisis.
- Ditaruh pada cawan petri dan diberi nomor sesuai urutan saat
penimbangan.
- Dilakukan penghitungan rata-rata bobot dalam 1 tablet.
e. Pengkondisian HPLC
Dilakukan pencucian kolom HPLC sebagai berikut :
- Dicuci Kolom Utispher HDO C18 125×4,6 mm dengan Asetonitril 70%
selama 45 menit.
- Dicuci Kolom Utispher HDO C18 125×4,6 mm dengan Metil Alkohol
10% selama 45 menit.
- Dicuci Kolom Utispher HDO C18 125×4,6 mm dengan MPh selama 45
menit.
f. Uji Disolusi
- Siapkan alat disolusi, RPM diatur menjadi 75 rpm.
- Isi alat disolusi dengan air sampai batas, kemudian tunggu suhu
mencapai 37˚C.
- Setelah suhu mencapai 37˚C masukkan sampel sesuai nomor urutan,
dimulai dari nomor 1, kemudian beri selang 1 menit untuk sampel
berikutnya hingga sampel nomor 6.
- Setelah dimasukkan sampel terakhir kemudian nyalakan timer atur
waktu 60 menit.
- Setelah 60 menit ambil larutan dari basket 1 menggunakan syringe dan
masukkan ke dalam tabung nomor 1. Pada menit berikutnya ulangi
langkah tersebut pada basket nomor 2 dan masukkan pada tabung
nomor 2, lakukan sampai basket nomor 6.
- Pipet 2 mL larutan masing-masing dari tabung nomor 1 sampai 6
kemudian dimasukkan pada tabung nomor 7 dan dicampur.
48
- Saring masing-masing tabung dan masukkan ke dalam vial HPLC dan
beri sesuai nomor.
- Masukkan Buf er Citrate ke dalam vial HPLC sebagai larutan kontrol
(eluent).
- Kemudian Masukkan kedalam HPLC dengan urutan vial yaitu vial
eluent, vial standar 1, vial standar 2, vial standar 3, vial sampel 1, vial
sampel 2, vial sampel 3, vial sampel 4, vial sampel 5, vial sampel 6, vial
sampel 7, vial standar 1, vial standar 2, vial standar 3, dan vial eluent.
g. Identifikasi
- Diinjeksikan 20 µL larutan standar dan larutan sampel ke dalam sistem
HPLC (High Performance Liquid Chromatography).
Perhitungan penetapan kadar vitamin B9 menggunakan rumus :
1 5 2,5 900
DF = × × × ×1000=4,5 µg
250 100 100 1
mg disolusi
% disolusi = ×100 %
250 mg LC
A sampel
Kadar B9 = ×mg standar × DF
A standar
II.6.8 Vitamin B12 (Kobalamin)
II.6.8.1 Prinsip
Prinsip yang digunakan dalam analisis vitamin B12 adalah ekstraksi
vitamin kobalanin dengan asam asetat. Sampel dan standar perbandingan
yang mengandung vitamin kobalanin disuntik ke kolom HPLC pada
panjang gelombang yang telah ditentukan.
Ekstraksi vitamin B12 diawali dengan penimbangan sampel
sebanyak 2-5 g yang mangandung sekitar 40 mikrogram vitamin B12
dimasukkan ke dalam tabung reaksi tertutup. Buffer asetat sebanyak 20
mL dan 0,2 mL larutan kalium sianida ditambahkan pada tabung reaksi.
Tabung dimasukkan ke dalam penangas air mendidih selama 30 menit,
lalu ddinginkan dan diencerkan sampai 50 mL air suling dan disaring
49
dengan kertas Whatman 42. Homogenisasi selama 5 menit dengan
ultrasonic dan didiamkan pada suhu ruang sampai dingin. Penambahan
25 mL metanol, dan tepatkan sampai volume 50 mL dengan asam asetat
2 %. Sampel disentrifuse pada 4000 rpm selama 30 menit. Supernatan
dipisahkan untuk disuntikkan ke HPLC, dengan kondisi HPLC sebagai
berikut:
Fase gerak : H2O pH 2
Kolom : C18
Kecepatan aliran : 0,5 mL/menit
Pompa : 515 HPLC pump
Injektor : Cecil 1100 series
Program : Isokratik
Detektor : UV visibel
Panjang gelombang : 280 nm
Sensitivitas : 0,01 AUFS
Suhu : kamar
Tekanan : 6000 psi
Perhitungan penetapan kadar vitamin B12 menggunakan rumus:
area sampel
× [ standar vit B 12 ] × volume akhir ( mL ) × fp
Kadar vitamin B12 = area standar
bobot sampel (g)
II.6.9 Vitamin C (Asam Askorbat)
II.6.9.1 Prinsip
Prinsip yang digunakan dalam analisis vitamin C adalah dengan
oksidasi analat oleh I2 sehingga I - tereduksi menjadi ion iodida kemudian
ditambahkan C2 dan C3 dengan indikator amilum. Akhir titrasi ditandai
dengan warna biru (iod-amilum).
Sebanyak 5 mL vitamin C ditambahkan 25 mL akuades kemudian
ditambahan 2 mL larutan Pati 1 %. Setelah itu dititrasi dengan larutan
50
iodin standar 0,01 N. Akhir titrasi terbentuk warna biru yang tetap. Titrasi
harus dikerjakan cepat karena pada senyawa lain seperti glutathion dan
sistein akan teroksidasi perlahan-lahan oleh larutan iodin dan
menghasilkan hasil yang tidak akurat (error).
Perhitungan penetapan kadar vitamin C menggunakan rumus :
mL larutan Iodin ×0,88 mg askorbat
Kadar vitamin C =
mL Iodin
1 Ml 0,01 N iodin ekuivalen dengan 0,88 mg asam askorbat.
II.6.10 Vitamin D (Klasiferol)

II.6.10.1 Prinsip
Analisis vitamin D pada umumnya menggunakan analisis Bioassay
(analsis menggunakan hewan percobaan atau manusia), dimana analisis
kadarnya menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 550
nm. Perhitugan kadarnya menggunakan kurva standar.
Metoda utama analisis kadar vitamin D adalah secara bioassay.
Karena ada perbedaan nilai antirachitis vitamin D dari berbagai
sumbernya.
- Preparasi sampel →AOAC
- Periode deplesi (Penghabisan)
- pemberian diet Rachitogenic selama 18-25 hari. Tikus yang
digunakan berumur ≤ 30 hari dengan berat badan ≥ 44 g tetapi ≤ 60
g
- Pengujian → mulai hari terakhir deplesi sampai 8 atau 11 hari
setelah deplesi. Selama pengujian, tikus terdeplesi diberi vitamin D
dengan jumlah diketahui (standard) dan tidak diketahui (sampel)
- Jumlah vitamin dalam sampel ditentukan dari warna tulang tibia
(tulang kering) proximal paling akhir atau tulang radius atau ulna
distal paling akhir.
51
- Dimasukkan 2 ml larutan yang diuji dalam tabung spektrometer dan
ditambah 4 ml larutan jenuh Antimoni-trikhlorida dalam khloroform
bebas air
- Ditunggu 10-15 menit dan serapannya dibaca pada 500 nm
- Kadar vitamin D dapat dihitung dengan persamaan kurva standard.
I −b
µg Tiamin HCl tiap 5mL larutan uji =
s−d
II.6.11 Vitamin E (Tokoferol)
II.6.11.1 Prinsip
- Untuk produk makanan umumnya → sampel disabunkan dengan reflux,
diekstrak dengan heksan dan diinjeksi ke dalam fase normal kolom
HPLC yang disambungkan pada detektor fluoresensi
- Untuk Margarin dan Minyak nabati → sampel dilarutkan dalam heksan,
MgSO4 ditambahkan untuk mengganti air kemudian difilter dan diuji
dengan HPLC
- Untuk minyak dilarutkan dalam heksan dan diinjeksi secara langsung
ke dalam kolom HPLC
1) Metode Kromatografi (HPLC)
- Produk makanan umum
- Tambahkan 10 ml dari 6 % (w/v) pirogallol dalam etanol ke sampel ,
campur dan aliri dengan N 2. Panaskan pada suhu 70 C selama 10
menit dengan sonikasi. Tambahkan 2 ml 60 % KOH, campur dan aliri
dengan N2. Hancurkan selama 30 menit pada suhu 70 C. Sonikasi
selama 5 menit, dinginkan pada suhu ruang dan tambahkan NaCl dan
air. Ekstrak dengan heksan (0,1% BHT) 3 kali. Tambahkan 0,5 g
MgSO4 dan campur. Filter dan encerkan sampai volume dengan
heksan dan injeksi 20 µl.
- Margarin dan minyak nabati Tambahkan 40 ml heksan (0,1% BHT) ke
dalam 10 g sampel dan campur. Tambahkan 3 g MgSO4 dan campur,
52
biarkan > 2 jam. Filter dan encerkan sampai volume dengan heksan.
Injeksi 20 µl.
2) Parameter Kromatografi
- Kolom → Hibar RT, Lichrosorb Si60 5µm, 25 cmx4.6 mm
- Fase mobil → 0,9% isopropanol dalam heksan
- Flow → 1 ml/menit
- Detektor-fluoresensi, Ex = 290 nm, Em = 330 nm
area sampel
× [ standar vit E ] × volume akhir( mL)
Kadar Vitamin E = area standar
bobot sampel ( g)
II.6.12 Vitamin K (Menadion)

II.6.12.1 Prinsip
Prinsip yang digunakan dalam analisis vitamin K adalah ekstraksi
vitamin kobalamin dengan asam asetat. Sampel dan standar pembanding
yang mengandung vitamin kobalamin disuntik ke kolom HPLC pada
panjang gelombang yang telah ditentukan.
Ekstraksi vitamin K diawali dengan penimbangan sampel keong
macan, kerang salju, dan kerang tahu sebanyak 2-5 g yang mengandung
sekitar 40 mikrogram vitamin B12 dimasukkan ke dalam tabung reaksi
tertutup. Bufer asetat sebanyak 20 ml dan 0,2 ml larutan kalium-sianida
ditambahkan pada tabung reaksi. Tabung dimasukkan kedalam penangas
air mendidih selama 30 menit, lalu didinginkan dan diencerkan sampai 50
ml dengan air suling dan disaring dengan kertas whatman 42.
Homogenisasi selama 5 menit dengan ultrasonic dan didiamkan pada
suhu ruang sampai dingin. Penambahan 25 ml metanol dan ditepatkan
sampai volume 50 ml dengan asam asetat 2 %. Sampel disentrifuse pada
4000 rpm selama 30 menit. Supernatan dipisahkan untuk disuntikkan ke
HPLC, dengan kondisi HPLC sebagai berikut :
53
Fase gerak : H2O pH 2
Kolom : C18
Kecepatan aliran : 0,5 ml/menit
Pompa : 515 HPLC pump
Injector : Cecil 1100 series
Program : Isokratik
Detektor : UV visible
Panjang gelombang : 280 nm
Sensitivitas : 0,01 AUFS
Suhu : kamar
Tekanan : 6000 psi
area sampel
× [ standar vit K ] × volume akhir ( mL ) × fp
Kadar Vitamin K = area standar
bobot sampel (g)
54
BAB III
PENUTUP
III.1 Kesimpulan
Vitamin adalah bahan esensial yang diperlukan untuk membantu
kelancaran penyerapan zat gizi dan proses metabolisme tubuh. Adapun
berbagai jenis vitamin yaitu vitamin A, B1, B2, B3, B5, B6, B7, B9, B12, C,
D, E dan K. Vitamin dapat di kategorikan dalam 2 kategori yaitu vitamin
yang larut dalam lemak dan vitamin yang larut dalam air. Kekurangan
mengkonsumsi vitamin dapat berpengaruh bagi kesehatan, karena itu
diperlukan asupan harian dalam jumlah tertentu yang idealnya bisa
diperoleh dari makanan.
Metode analisis yang dapat dilakukan pada vitamin dengan
menggunakan metode komatografi (HPLC), kolorimetri, spektroftometer,
titrasi iodometri,microbiological assay, bioassay, gravimetri, dll.
III.2 Saran
Dengan adanya makalah ini kami serta teman-teman semua menjadi
lebih paham dan mendapat ilmu dari membaca makalah ini. Khususnya
pegetahuan yang lebih tetang analisis makanan dan kosmetik yang
mengandung vitamin, baik dalam tahap analisis maupun metode serta
perhitungan kadar.
55
Daftar Pustaka
Aung Sumbono. 2016. Biokimia Pangan Dasar. Jakarta: Deepublish
Almatsier, S, 2005. Prinsip Dasar Ilmu Gizi. Jakarta: Gramedia Pustaka
Utama
Fibri, D.L.N., 2012, Vitamin Larut Dam Air Dan Vitamin Larut Dalam
Lemak, Jurusan Teknologi Pangan Dan Hasil Pertanian.
Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada,
Hernawati, I. 2013. Pencegahan Dan Penanggulangan Gizi Buruk Dalam
Seminar Nasional Hari Pangan Sedunia Xxvii Dukungan
Teknologi Untuk Meningkatkan Produk Pangan Hewani Dalam
Rangka Pemenuhan Gizi Masyarakat
Kim D.O., Lee K.W., Lee H.J., Lee C.Y., 2002. Vitamin C Equivalent
Antioxidant Capacity (Vceac) Of Phenolic Phytochemicals. J
Agric Food Chem 50(13): 3713–17.
Jufitriani Ismy. 2017. Dua Kasus Acquired Prothrombin Complex
Deficiency Dengan Perdarahan Intrakranial. Jurnal Kedokteran
Syiah Kuala Volume 17, Number 3: Fakultas Kedokteran
Unsyiah
Permenkes Ri No. 07 Tahun 2019, Peraturan Kesehtan Ri Nomor 07
Tahun 2019 Tentang Kesehatan Lingkungan Rumah Sakit
Rosita Rimahardika, Hertanto Wahyu Subagio, Hartanti Sandi Wijayanti.
2017. Asupan Vitamin D Dan Paparan Sinar Matahari Pada
Orang Yang Bekerja Di Dalam Ruangan Dan Di Luar Ruangan.
Journal Of Nutrition College, Volume 6, Nomor 4, Fakultas
Kedokteran, Universitas Diponegoro
Rinda Fithriyana. 2018. Hubungan Pengetahuan Ibu Tentang Vitamin A
Dengan Pemberian Vitamin A Pada Balita Di Desa Kuantan
Sako Tahun 2016. Jurnal Doppler Universitas Pahlawan Tuanku
Tambusai
56
Tim Naviri. 2011 .Buku Pintar Ibu Hamil : 100 Tip Penting Untuk Ibu Hamil.
Jakarta: Gramedia. 387 Hal.
Truswell, A. Stewart. 2012. Buku Ajar Ilmu Gizi.. Jakarta. Perpustakaan
Nasional
Vivi Triana. 2016. Macam-Macam Vitamin Dan Fungsinya Dalam Tubuh
Manusia. Psikm Fk Unandjurnal Kesehatan Masyarakat
Widodo R, 2009. Pemberian Makanan, Suplemen, Dan Obat Pada Anak.
Jakarta: Egc.
Yulianti, I., 2011, Karakteristik Mineral Dan Vitamin B12 Kerang Hasil
Tangkapan Samping, Departemen Teknologi Hasil Perairan.
Bogor: Fakultas Perikanan Dan Ilmu Kelautan Institut Pertanian
Bogor
57

Kelompok 1 - Stifa A 019

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Kelompok 1 - Stifa A 019

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

MAKALAH ANALISIS MAKANAN, MINUMAN & KOSMETIK

“ANALISIS MAKANAN, MINUMAN DAN KOSMETIK YANG

NUR JIHAN AULIA 19013002

PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI

Gambar Rumus Struktur Vitamin A

Pada tahun 1930, T. Moore mengungkapkan kemampuan karoten,

Gambar Rumus Struktur Vitamin B1

Tiamin merupakan senyawa organosulfur berwarna dengan rumus

Gambar Rumus Struktur Vitamin B2

Vitamin B2 adalah komponen penting dari dua enzim utama dalam

Gambar Rumus Struktur Vitamin B3

Vitamin B3 yang berbentuk padat merupakan turunan piridin dengan

Gambar Rumus Struktur Vitamin B5

Gambar Rumus Struktur Vitamin B6

Vitamin B6, ditemukan P. Gyorgy pada tahun 1938, berperan dalam

Gambar Rumus Struktur Vitamin B7

Biotin yang berperan dalam produksi antibodi, disebut juga sebagai

Asam folat berperan dalam pencegahan penyakit jantung dan stroke

Vitamin B12 (kobalamin) mempunyai struktur cincin yang kompleks

Gambar Rumus Struktur Vitamin C

Vitamin ini mempunyai rasa asam, enak untuk dikonsumsi sehari ‐

Gambar Rumus Struktur Vitamin D

Gambar Rumus Struktur Vitamin E

Vitamin E diasosiasikan dengan kesuburan dan awet muda. Sebagai

Gambar Rumus Struktur Vitamin K

Tubuh cukup mempunyai persediaan vitamin K, misalnya vitamin K1

II.6.4 Vitamin B3 (Niasin)

II.6.5 Vitamin B5 (Asam Pantotenat)

f. Preparasi Ekstrak Uji

II.6.7 Vitamin B9 (Asam Folat)

II.6.7.2 Metode dan Tahapan Analisis

II.6.10 Vitamin D (Klasiferol)

II.6.12 Vitamin K (Menadion)

Anda mungkin juga menyukai