METODE BSLT( Brine Shrimp Lethality Test) PADA

TOKSISITAS ETANOL DAUN SUNGKAI ( Peronema canescens

jack)TERHADAP LARVA UDANG( Artemia salina Leach)

PROPOSAL KARYA TULIS ILMIAH

OLEH:

KHAIRUNNISA
NIM:2113453017

PROGRAM STUDI DIII ANALIS KESEHATAN

FAKULTAS FARMASI DAN ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ABDURRAB
PEKANBARU
2023
 LEMBAR PERSETUJUAN

Proposal Karya Tulis Ilmiah ini telah diperiksa, disetujui, dan siap untuk
dipertahankan dihadapan Tim Penguji Proposal Karya Tulis Ilmiah Program Studi
D-III Analis Kesehatan Fakultas Farmasi dan Ilmu Kesehatan Universitas
Abdurrab
Nama : KHAIRUNNISA
NIM : 2113453017
Judul KTI : Metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test) Pada Toksisitas
Etanol Daun Sungkai (Peronema Canescens Jack)Terhadap Larva
Udang ( Arthemia salina Leach)

Pekanbaru,Oktober 2023
Menyetujui
Pembimbing

(Alfin Surya M.Si)

NIDN.1010087103
 LEMBAR KONSULTASI BIMBINGAN PROPOSAL KARYA TULIS
ILMIAH

Nama Mahasiswa : Khairunnisa

NIM : 2113453017
Program Studi : D-III Analis kesehatan
Nama Pembimbing : Alfin surya, M.Si
Judul KTI : Metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test) Pada
Toksisitas Etanol Daun Sungkai (Peronema Canescens
Jack)Terhadap Larva Udang ( Arthemia salina Leach)

Judul Bimbingan Proposal Karya Paraf

NO Tanggal
Tulis Ilmiah pembimbing
1 27/09/2023 Diskusi Judul KTI
2 10/10/2023 Penetapan Judul KTI
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
 KATA PENGANTAR

Puji dan Syukur penulis ucapan Kehadirat Allah SWT atas rahmat dan serta
petunjuk-Nya sehingga penulis dapat menyusun dan menyelesaikan Proposal
Karya Tulis Ilmiah ini, adapun tujuan dari penulisan Proposal Karya Tulis Ilmiah
ini adalah untuk memenuhi syarat guna untuk memperoleh gelar Diploma III
Analis Kesehatan dengan judul, “Metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test)
Pada Toksisitas Etanol Daun Sungkai (Peronema Canescens Jack)Terhadap
Larva Udang ( Artemia salina Leach)”
Dalam penulisan Proposal Karya Tulis Ilmiah ini, penulis banyak
mengalami hambatan dan kesulitan. Berkat arahan, bimbingan dan bantuan dari
berbagai pihak, Karya Tulis Ilmiah ini dapat diselesaikan, maka pada kesempatan
ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Bapak Prof. Dr. H. Tabrani Rab Selaku Pendiri Universitas Abdurrab.
2. Ibu Prof. Susi Endriani, S.Si., M.Sc., Ph. D Selaku Rektor Universitas
Abdurrab.
3. Ibu Apt. Azlaini Yus Nasution, M.Farm., Selaku Dekan Fakultas Farmasi dan
Ilmu Kesehatan.
4. Bapak Alfin Surya, S.Si., M.Si Selaku Ketua Program Diploma III Analis
Kesehatan Universitas Abdurrab.
5. Bapak Alfin Surya, S.Si., M.si Selaku Pembimbing yang telah banyak
memberikan bimbingan dan arahan kepada penulis dalam menulis Karya Tulis
Ilmiah ini.
6. Seluruh Staf Dosen dan Tenaga Kependidikan di Prodi D-III Analis Kesehatan.
7. Ayahanda Dodi subali dan Ibunda Herniyanti yang tercinta serta Adik-adik dan
keluarga besar yang sudah banyak memberikan dukungan dan motivasi baik
dalam bentuk moral maupun material dengan tulus dan ikhlas sehingga penulis
dapat menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah ini.
8. Teman-teman seperjuangan yang banyak membantu dalam menyusun dan
menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah. Serta semua pihak yang secara langsung
maupun tidak langsung telah membantu penulis dalam menyelesaikan Karya
Tulis Ilmiah ini.
 Penulis menyadari bahwa dalam penyusunan Proposal Karya Tulis Ilmiah
ini masih jauh dari kesempurnaan, maka dari itu penulis mengharapkan kritik dan
saran dari pembaca untuk perbaikan dalam penyempurnaan Karya Tulis Ilmiah
ini. Demikian Karya Tulis Ilmiah ini penulis persembahkan dan besar harapan
penulis semoga Karya Tulis Ilmiah ini dapat memberikan manfaat dan
pengetahuan bagi pembaca. Amiin.

Pekanbaru, Oktober 2023

Penulis
 DAFTAR ISI
Halaman
LEMBAR PERSETUJUAN PEMBIMBING
LEMBAR KONSULTASI BIMBINGAN
KATA PENGANTAR .....................................................................................
DAFTAR ISI ...................................................................................................
DAFTAR TABEL ...........................................................................................
DAFTAR GAMBAR ......................................................................................
DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................
BAB 1 PENDAHULUAN .............................................................................
1.1 Latar Belakang .......................................................................................
1.2 Rumusan Masalah ..................................................................................
1.3 Tujuan Penelitian ....................................................................................
1.3.1 Tujuan umum ..............................................................................
1.3.2 Tujuan Khusus ............................................................................
1.4 Manfaat Penelitian ..................................................................................
1.4.1 Bagi Peneliti ...............................................................................
1.4.2 Bagi Akademi .............................................................................
1.4.3 Bagi Masyarakat .........................................................................
1.5 Keaslian Penelitian .................................................................................
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ....................................................................
1.1 Daun Sungkai (Peronema canescens jack...............................................
1.1.1 Klasifikasi daun sungkai (Peronema canescens jack) ................
1.1.2 Morfologi daunsungkai (Peronema canescens jack) ..................
1.1.3 Kandungan dan Kimia daun sungkai (Peronema canescens jack)
1.1.4 Manfaat daun sungkai (Peronema canescens jack) ....................
2.2 Uji toksisitas.............................................................................................
2.2.1 Uji toksisitas akut........................................................................
2.2.2 Uji toksisitas subakut atau subkronis..........................................
2.2.3 Uji toksisitas kronis.....................................................................
2.3 Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT) ..........................................
 2.4 Larva Artemia salina L ...........................................................................
2.4.1 Klasifikasi Artemia salina L ................................................................
2.4.2 Morfologi Artemia salina L .................................................................
2.4.3 Siklus hidup Artemia salina L .............................................................
2.4.4 Penggunaaan Artemia salina L ............................................................
BAB III METODE PENELITIAN ...............................................................
3.1. Jenis Penelitian .......................................................................................
3.2. Tempat dan Waktu Penelitian .................................................................
3.2.1. Tempat Penelitian .......................................................................
3.2.2. Waktu Penelitian .........................................................................
3.3. Populasi dan Sampel ..............................................................................
3.3.1. Populasi ......................................................................................
3.3.2. Sampel ........................................................................................
3.4. Teknik Sampling .....................................................................................
3.5. Alat dan Bahan .......................................................................................
3.5.1. Alat .............................................................................................
3.5.2. Bahan ..........................................................................................
3.6. Prosedur Kerja ........................................................................................
3.6.1. Proses Pembuatan Simplisia (Peronema canescens jack)...........
3.6.2. Ekstraksi Daun Sungkai (Peronema canescens jack) .................
3.6.3. Penetasan Larva Artemia salina Leach .......................................
3.6.4. Pembuatan Konsentrasi Ekstrak yang Akan Diuji ......................
3.6.5. Uji Toksisitas dengan Metode BSLT ..........................................
3.6.6. Analisis Data ..............................................................................
DAFTAR PUSTAKA .........................................................................................
 DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.1. Keaslian Penelitian ......................................................................12
 DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 2.1. Tanaman Daun Sungkai ....................................................... 6
 DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1 pembuatan konsentrasi 1000,100,10 ppm ..................................
Lampiran 2 pempuatan konsentrasi 1000,100,10 ppm ................................
 BAB 1
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Saat ini masyarakat banyak sekali menggunakan tanaman sebagai obat-
obatan tradisional yang dapat menyembuhkan penyakit yang memiliki risiko efek
samping dan lebih baik dari obat-obatan kimia (muhaimin, 2022). Obat tradisional
ialah ramuan herbal yang berasal dari tumbuh-tumbuhan dan campuran bahan
yang telah digunakan secara turun menurun karena meningkatnya kebutuhan
masyarakat untuk obat-obatan maka dilakukanlah penelitian untuk mengetahui
komponen aktif yang ada pada tumbuhan tersebut serta untuk mengetahui
toksisitasnya sebagai obat (surya dkk., t.t., 2022)

Tanaman sungkai (peronema canescencs jack) termasuk tumbuhan yang

mudah dijangkau oleh masyarakat karena termasuk tumbuhan liar, namun
masyarakat banyak membudidayakan tanaman tersebut sebagai obat tradisional,
(fransisca dkk., t.t.) Tu
dan
berasal dari suku verbenacea, hasil uji skrining fitokimia daun sungkai terdapat
senyawa metabolit yaitu terpenoid, flavonoid, dan fenol
(istiqomah & fatikasari, 2023)
tanaman ini sering dimanfaatkan sebagai obat pilek, obat cacingan
(fransisca dkk., t.t.) Dan sebagian masyarakat juga memanfaatkan sebagai
antimalaria demam dan sakit gigi (melisa dkk., 2022) upaya pembentukan daun
sungkai agar menjadi obat maka harus membuat rancangan obat, rancangan obat
ialah suatu langkah yang digunakan agar mendapatkan obat baru menggunakan
struktur ikatan senyawa obat oleh protein target,tujuannya mencari senyawa yang
dapat digunakan sebagai obat dengan daya toksisitas yang rendah
(istiqomah & fatikasari, 2023)

Metode yang sering digunakan untuk pengujian toksisitas ialah metode

brine shrimp lethality test (bslt) karena metode ini untuk menentukan seberapa
bahayanya suatu bahan alam atau tumbuhan, Larva Artemia salina leach adalah
hewan percobaan yang digunakan untuk menentukan LC50 dari bahan alam.
Metode ini sering digunakan karena cepat, murah, dipercaya dan mudah untuk di
lakukan (surya dkk., 2022) metode bslt digunakan secara luas dalam penelitian
dikarenakan cukup akurat dan hanya menggunakan sejumlah kecil bahan uji dan
terbukti memiliki kolerasi dan anti kanker (surya 2018)

Berdasarkan uraian latar belakang di atas peneliti tertarik untuk melakukan

penelitian “metode bslt (brine shrimp lethality test) pada toksisitas etanol daun
sungkai. (peronema canescens jack) terhadap larva udang(artemia salina leach)
penelitian ini dilakukan untuk melihat potensi toksisitas daun sungkai (peronema
canescens jack) agar dapat dipastikan keamanannya jika digunakan oleh manusia,
selain itu uji toksisitas yang dilakukan dengan metode bslt menjadi tahapan awal
5untuk mencari sumber obat baru anti kanker dan tidak memerlukan kode etik,
seperti apabila menggunakan mencit yang memerlukan kode etik
1.2. Rumusan Masalah
1. Bagaimana Aktivitas Toksisitas Ekstrak Etanol 70% Daun Sungkai
(Peronema Canescens Jack) Terhadap Larva Artemia Salina Leach Dengan
Metode Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)?
2. Berapa Data Persentase Kematian Larva Artemia Salina Leach Setelah
Pemberian Ekstrak Etanol 70% Daun Sungkai (Peronema Canescens
Jack)
3.Berapa Nilai Lc50 Ekstrak Etanol 70% Daun Sungkai (Paronema
Canescens Jack) Terhadap Larva Artemia Salina Leach Dengan Metode
Brine Shrimp Lethality Test (BSLT)
1.3. Tujuan Penelitian
1.3.1. Tujuan Umum
Mengetahui aktivitas toksisitas ekstrak etanol 70% daun
sungkai(peronema canescens jack) terhadap larva artemia salina leach
dengan metode brine shrimp lethality test(BSLT)
1.3.2. Tujuan khusus
1.mendapatkan data persentase kematian larva artemia salina leach
setelah pemberian ekstrak etanol 70% daun sungkai (peronema
canescens jack)
2.Mengetahui nilai LC50 Ekstrak etanol 70% daun sungkai
(peronema canescens jack) terhadap larva artemia salina leach
dengan metode Brine shrimp lethality Test (BSLT)
1.4. Manfaat penelitian
1.4.1. Bagi penulis
Hasil penelitian ini untuk mengetahui nilai toksisitas pada ekstrak
daun sungkai dengan menggunakan metode BSLT dan menambah
pengalaman peneliti dalam penelitian.
1.4.2. Bagi institut
 Hasil penelitian ini dijadikan bahan rujukan penelitian dan
menambah referensi mahasiswa jurusan Teknologi Labotarorium Medik
yang akan melakukan penelitian khusus terhadap penelitian ini.

1.4.3. Bagi masyarakat

Hasil penelitian ini dapat memberikan informasi kepada
masyarakat mengenai potensi daun sungkai (Peronema canescens jack)
sebagai tumbuhan obat, serta informasi mengenai aktifitas toksisitas daun
sungkai (Peronema canescens jack) sehingga dapat digunakan dengan kadar
yang sesuai dan seharusnya.
1.5 keaslian Penelitian
Judul KTI : “Metode BSLT (Brine Shrimp Lethality Test) Pada Toksisitas
Etanol Daun Sungkai (Peronema canescens jack) Terhadap Larva Udang
(Artemia salina Leach)
Tabel 1.1 Keaslian Penelitian
Penulis Judul penelitian Hasil Persamaan Perbedaan
penelitian
Muhaimin M Uji Toksistas Uji toksisitas Persamaann Perbedaan
(2022) Akut Ekstrak ekstrak daun terletak pada terletak pada
Etanol Daun sungkai sampel yang hewan uji
Sungkai diperoleh nilai sama-sama coba, peneliti
(Peronema LD50. Hal ini menggunakan menggunakan
Cenescens Jack) menyebabkan ekstrak daun hewan uji coba
Terhadap Fungsi sampel pada sungkai, dan terhadap larva
Ginjal Mencit hewan uji sama-sama uji udang
Putih Betina penurunan toksisitas (artemia
(Mus Musculus aktivitas gerak salina leach)
Linn.) dan lebih
banyak tidur.
Mega pratiwi Toksisitas Uji toksisitas Persamaan Perbedaan
irawan, Ekstrak Etanol ekstak kulit terletak pada terletak pada
alfin surya, Kulit Jengkol jengkol larutan yang sampel
yolanda, (Pithecelleobium diperoleh nilai sama-sama ekstrak,
zaiyar Jiringa) LC50 251 ppm. menggunakan peneliti
(2022) Terhadap Larva Hal ini pelarut etanol menggunakan
Udang (Artemia menunjukkan dan sama-sama sampel ekstrak
Salinia Leach) bahwa sampel menggunakan daun sungkai
Dengan Metode sangat metode BSLT (peronema
Brine Shrimp toksisitas canescens
 Lethality Test terhadap uji jack)
(BSLT) kematian
larva.

BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1. DAUN SUNGKAI (peronema canescens jack)

Tumbuhan daun sungkai (Peronema canescans jack) adalah tumbuhan
berkayu di daerah tropis yang termasuk familia verbenaceae. Tanaman sungkai juga
dapat tumbuh subur di daerah yang tidak tergenang air seperti,tepian sungai, bekas
lahan tebangan, tepi jalan dan lahan terbuka. Tanaman sungkai juga banyak di
didapatkan di wilayah Sumatera, Kepulauan Riau, Jambi, bengkulu, Kalimantan
tengah, Kalimantan selatan, Kalimantan barat, Sulawesi tengah, Sulawesi selatan
(Gendro Sari & Aulya, 2022)

Tumbuhan sungkai pertama kali banyak di ketahui masyarakat pada masa

pandemi covid-19 yang di yakini dapat meningkatkan kekebalan tubuh dalam
menghadapi virus corona ,dan di daerah Sumatra selatan seperti lubuk daun sungkai
muda banyak digunakan untuk sebagai penambah stamina, penurun demam,obat
cacar, obat sakit gigi, obat malaria, serta penyakit kulit berupa kurap, memperlancar
haid, dan mampu meningkatkan kesuburan rahim, masyarakat mengkonsumsinya
dengan cara meminum rebusan daun sungkai, masyarakat Banyuasin memanfaatkan
daun sungkai sebagai obat hipertensi (Emilia dkk., 2023)

2.1.1 KLASIFIKASI DAUN SUNGKAI (peronema canescens jack)

Daun sungkai diklasifikasikan sebagai berikut (Pramudia, t.t.)

Kingdom : Plantae
Subkingdom : Tracheobionta
Super divisi : Spermatophyta
Divisi : Magnoliophyta
Kelas : Magnoliopsida
Subkelas : Asteridae
Ordo : Lamiales
Famili : Verbenaceae
Genus : peronema
Spesies : peronema canescens jack.

Bentuk daun sungkai dapat dilihat pada gambar 2.1 berikut:

Gambar 2.1 Daun sungkai (peronema canescens jack) (pramudia, t.t.)

2.1.2 morfologi daun sungkai (peronema canescens jack)

Tumbuhan sungkai (peronema canescens jack)memiliki morfologi yang
tergolong sebagai tanaman kayu-kayuan yang diameternya mencapai 60 cm yang
mampu tumbuh setinggi 20-30 m dan memiliki batang bebas cabang sekitar 15 m,
batang sungkai berwarna abu-abu atau sawo matang bentuk luruh berlekuk kecil,
kulit luar batangnya memiliki warna merah muda, kekuningan, hingga coklat,
terdapat bulu-bulu halus pada ranting dan anak daun bagian bawah, daun bersirip
ganjil dan majemuk yang letaknya berpasangan atau berselang serta lancip pada
ujung daunnya. Letak bunga berpasangan dan buahnya kecil-kecil. Akar nya
menyebar dangkal dan tidak tahan terhadap kekurangan zat asam lebih dari
sepuluh hari (fransisca dkk., 2020)
2.1.3 kandungan kimia daun sungkai (peronema canescens jack)
Menurut (latief dkk., 2021) dari penelitian sebelumnya memiliki
kandungan senyawa bioaktif dari ekstrak p.canescens jack golongan flavonoid,
alkaloid, tanin, steroid, fenolik, saponin, senyawa flavonoid pada daun sungkai
dapat menurunkan kadar asam lemak dengan menghambat enzim.
2.1.4 Manfaat daun sungkai (peronema canescens jack)

Daun sungkai (peronema canescens jack) mempunyai beberapa khasiat

sebagai obat. Menurut (emilia dkk., 2023) daun sungkai (peronema canescens
jack) berfungsi sebagai obat tradisional untuk mengobati hipertensi, asam urat,
masyarakat dayak juga menggunakan rebusan daun sungkai untuk pengobatan
penyakit kulit, sedangkan untuk luka bakar menggunakan daun sungkai yang di
haluskan kemudian di oleskan kepada luka bakar, rebusan daun muda sungkai
juga dipercaya untuk memperlancar haid dan membantu meningkatkan kesuburan
rahim, dan di beberapa daerah sumatera selatan daun sungkai muda sering
digunakan sebagai penambah stamina. Obat tradisional lainnya seperti penurun
panas/demam, obat cacar, sakit gigi, malaria.

2.2 uji toksisitas

Toksisitas adalah kemampuan suatu Toksikan untuk menimbulkan

kerusakan Atau kelainan terhadap fungsi suatu sistem Biologis. Uji toksikan juga
digunakan untuk memberikan zat kimia yang akan di uji kepada hewan coba yang
bertujuan untuk mengukur derajat efek toksikan suatu senyawa,Apakah obat atau
bahan yang diteliti Dapat menimbulkan lesi atau cedera pada Tubuh, organ apa
saja yang rentan dan Mudah terkena, bagaimana sifat lesi dan mulai Dosis berapa
efek toksik tersebut mulai Tampak. (Sastyarina, 2013)
2.2.1 uji toksisitas akut

Uji toksisitas akut merupakan salah satu uji praklinik yang bertujuan untuk
mengukur derajat efek toksik suatu senyawa dalam waktu tertentu uji ini
digunakan dengan memberikan zat kimia yang akan diuji sebanyak satu kali atau
bisa dalam waktu 24 jam. (Arif dkk.2021)
 2.2.2 Uji toksisitas subakut atau subkronis

Uji toksisitas subakut sebagai bagian dari uji toksisitas jangka panjang
bertujuan untuk mendapatkan data tentang keracunan obat atau bahan (kimia)
yang digunakan secara sengaja atau secara tidak sengaja masuk ke dalam tubuh
berulang kali, dalam jangka waktu yang lama. Pada pengujian ini, tidak jauh
berbeda dengan pengujian toksisitas akut, yang menjadi perbedaan pada lama
pemberian ekstrak. (Sastyarina, 2013).

2.2.3 Uji toksisitas kronis

Uji ini dilakukan pada ekstrak yang dilakukan secara berulang atau jangka
waktu selama masa hidup hewan uji. Uji toksisitas ini gambaran mengenai efek
toksis ekstrak uji pada penggunaan dosis selama hidup hewan uji.
(Arif dkk., 2021)

2.3 Metode (brine shrimp lethality test) BSLT

metode BSLT bertujuan untuk mengetahui kadar kandungan senyawa yang

berpotensi sebagai racun pada pertumbuhan sel. BSLT merupakan salah satu
metode pengujian toksisitas menggunakan larva udang Artemia salina Leach
sebagai hewan uji. Prinsip metode pengujian menggunakan BSLT berdasarkan
senyawa aktif dan sifat toksiknya yang dapat membunuh larva udang Artemia
salina Leach sebagai hewan uji. Metode ini dilakukan untuk melihat tingkat
mortalitas larva udang Artemia salina Leach yang disebabkan oleh bahan uji.
Hasil yang diperoleh dihitung sebagai LC50 (letal concentration) bahan uji, yaitu
jumlah dosis atau konsentrasi bahan uji yang dapat menyebabkan kematian larva
udang sejumlah 50% setelah masa inkubasi 24 jam.
(santoso agus subchan bilal & fatimah rosa, 2020)
.
2.4 Larva Artemia salina L

Artemia salina L merupakan hewan uji yang biasa digunakan dengan

metode BSLT, Artemia salina L ialah salah satu organisme yang digunakan untuk
mengetahui bioaktifitas senyawa melalui uji toksisitas. Artemia salina juga
merupakan spesies perairan sejenis udang primitif yang ditemukan pertama kali di
Lymington , England pada tahun 1775 Artemia biasa ditemukan di pedalaman
danau air asin di seluruh dunia. Telur Artemia dapat mengadsorbsi air, jika
tersinari oleh sinar matahari atau pada suhu sekitar 26-28 ºC maka akan menetas
setelah 24-48 jam tergantung pada kondisi lingkungan. Artemia salina L yang
baru menetas disebut dengan naupli

2.4.1 klasifikasi Artemia salina L

Klasifikasi Artemia salina L adalah sebagai berikut: (surya alfin, 2018)

Kingdom : Animalia
Filum : Arthrophoda
Subfilum : Crustacea
Kelas : Branchiopoda
Subkelas : Sarsostraca
Ordo : Anostraca
Family : Artemiidae
Genus : Artemia
Spesies : Artemia salina Leach
 Gambar 2.2 Artemia salina L (surya alfin, 2018)

2.4.2 Morfologi Artemia salina L