ISOLASI FLAVONOID DARI DAUN PANDAN WANGI

SEBAGAI BAHAN BAKU INDUSTRI FARMASI

MENGGUNAKAN METODE MASERASI

Disusun oleh:

ALIYUDIN RAFSANZANI (432186050420003)

M. AMAR RAFLI (432186050420006)

JURUSAN TEKNIK KIMIA

SEKOLAH TINGGI TEKNOLOGI FATAHILLAH
CILEGON-BANTEN
2022-2023
 KATA PENGANTAR

Bismillahirrohmanirrohim

Puji syukur khadirat Allah SWT, yang telah memberikan rahmat dan hidayah-NYA
kepada kita sekalian, khususnya kepada penulis, sehingga pembuatan Makalah Teknik
Pengembangan Produk yang “ISOLASI FLAVONOID DARI DAUN PANDAN SEBAGAI
BAHAN BAKU INDUSTRI FARMASI” dapat terselesaikan dengan baik.
Penyusun menyadari bahwa pembuatan Makalah Teknik Pengembangan Produk ini
masih kurang sempurna. Oleh karenanya saran dan kritik yang sifatnya membangun sangatlah
penulis harapkan. Sehingga kesalahan dan kekurangan tersebut dapat diperbaiki pada
penyusunan berikutnya. Penyusun mengharapkan semoga laporan ini dapat bermanfaat bagi
semua pihak.

Cilegon, 8 Februari 2024

Penulis,
Aliyudin Rafsanzani M. Amar Rafli

NIM. 432186050420003 NIM. 432186050420006

I
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ........................................................................................................ 2

DAFTAR ISI ....................................................................................................................... 2
BAB I PENDAHULUAN .............................................................................................................. 1
1.1 Latar Belakang .............................................................................................................. 1
1.2 Rumusan Masalah ......................................................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................................................... 3
1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................................................ 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA .................................................................................................. 5
2.1 State of The Art ............................................................................................................. 5
2.2 Uraian Tanaman Pandan ............................................................................................... 6
2.2.1 Sistematika Tanaman .............................................................................................. 6
2.2.2 Morfologi Tanaman ................................................................................................ 7
2.2.3 Kandungan kimia .................................................................................................... 7
2.2.4 Manfaat Daun Pandan Wangi ................................................................................. 8
2.2.5 Senyawa Flavonoid ................................................................................................. 8
2.3 Metode Analisa yang Digunakan untuk Pengambilan Flavonoid............................... 11
2.3.1 Ekstraksi ................................................................................................................ 11
2.3.2 Maserasi ................................................................................................................ 11
2.3.3 Spektrofotometri ................................................................................................... 12
2.3.4 Spektrofotometri UV-Vis...................................................................................... 12
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................................................ 16
3.1 Alat dan Bahan ............................................................................................................ 16
3.1.1 Alat Percobaan ...................................................................................................... 16
3.1.2 Bahan .................................................................................................................... 16
Bahan : Fungsi : .............................................................................................................. 16
3.2 Variabel Penelitian ...................................................................................................... 17
3.3 Diagram Alir Penelitian .............................................................................................. 18
3.3.1 Persiapan Bahan Baku .......................................................................................... 19
3.3.2 Analisis Bahan Baku ............................................................................................. 19
3.3.3 Pembuatan Ekstrak Daun Pandan ......................................................................... 19
3.3.4 Analisis Kuantitatif Flavonoid Hasil Penelitian ................................................... 20

II
 3.4 Rangkaian Alat............................................................................................................ 21
3.5 Hipotesa ...................................................................................................................... 22
BAB IV ......................................................................................................................................... 23
HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................................................................... 23
4.1 Preparasi Sampel ......................................................................................................... 23
4.2 Ekstraksi Sampel ......................................................................................................... 23
4.3 Hasil Uji Total Flavonoid ........................................................................................... 23
BAB V .......................................................................................................................................... 28
KESIMPULAN DAN SARAN ................................................................................................... 28
5.1 Kesimpulan ................................................................................................................. 28
5.2 Saran ........................................................................................................................... 28

III
 DAFTAR TABEL

Tabel 2.1 Spektrum Cahaya Tampak dan Warna-warna Komplementer ......................... 15

Tabel 3.1 Variasi Penelitian .............................................................................................. 17
Tabel 4.1 Baku Standar Kuersetin pada Panjang Gelombang 420 nm ............................. 24
Tabel 4.2 Flavonoid total ekstrak ethanol daun Pandan muda ......................................... 25
Tabel 4.3 Flavonoid total ekstrak ethanol daun Pandan tua ............................................. 25
Tabel 4.4 Flavonoid total ekstrak aseton daun Pandan muda ........................................... 25
Tabel 4.5 Flavonoid total ekstrak aseton daun Pandan tua ............................................... 26

IV
 DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1 Struktur Dasar Senyawa Flavonoid ............................................................. 10

Gambar 3.1 Diagram Alir Penelitian ............................................................................... 18
Gambar 3.2 Rangkaian alat ekstraksi daun pandan ........................................................ 21
Gambar 3.3 Rangkaian alat destilasi daun pandan ......................................................... 21
Gambar 4.1 Kurva Standar Kuarsetin .............................................................................. 24

V
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Indonesia merupakan negara yang memiliki potensi sumber daya alam

yang melimpah. Khususnya daun pandan yang mengandung senyawa
metabolit sekunder seperti polifenol, tanin, flavonoid, alkaloid dan saponin
yang dapat berfungsi untuk meningkatkan efektivitas vitamin c, melindungi
struktur sel, antiinflamasi dan sebagai antibiotik. Daun pandan hasil ekstraksi
digunakan sebagai bahan aktif untuk menunjang berbagai kepentingan
industi, terutama pada industri makanan.

Pandan wangi merupakan tanaman yang sering dimanfaatkan daunnya

sebagai bahan tambahan makanan, umumnya sebagai bahan pewarna hijau
dan pemberi aroma. Aroma khas dari pandan wangi diduga karena adanya
senyawa turunan asam amino fenil alanin yaitu 2-acetyl-1-pyrroline (Faras et
al., 2014). Bagi masyarakat Indonesia pandan merupakan tanaman yang dapat
dimanfaatkan untuk memenuhi kebutuhan ekonomi, sosial dan budaya. Daun
pandan memiliki banyak manfaat antara lain sebagai pewarna dan pemberi
aroma pada makanan, untuk kerajinan tangan, sebagai pengawet alami pada
makanan bahkan pengobatan luka dalam dan luka luar karena memiliki
kandungan flavonoid.

Flavonoid merupakan salah satu golongan metabolit sekunder yang

dihasilkan oleh tanaman dan termasuk dalam kelompok polifenol
(Banjarnahor dkk, 2014). Flavonoid merupakan kandungan khas tumbuhan
hijau dan merupakan salah satu senyawa aktif yang menjadi bahan obat.
Senyawa flavonoid memiliki aktivitas sebagai antioksidan, anti aging
(Vanessa dkk.,

1
2014 ; Zuraida dkk, 2017), antiinflamasi, antivirus (Qinghu wang dkk, 2016),
antikanker, antidiabetes (Arifin dkk, 2018 ; Marzouk dkk, 2016), antibakteri
(Sriningsih dkk, 2008 ; Arifin dkk, 2018), mencengah keropos tulang dan
sebagai antibiotik (Waji dan Sugrani, 2009).

Senyawa flavonoid umumnya diisolasi dengan metode ekstraksi yakni

dengan cara maserasi menggunakan pelarut yang dapat melarutkan flavonoid,
umumnya larut dalam pelarut polar (Monache, 1996). Flavonoid merupakan
senyawa polar maka flavonoid akan larut dalam pelarut polar seperti etanol,
metanol, butanol, dimetilformamida (Arifin dkk., 2018).

Metode pengambilan senyawa flavonoid dari suatu tanaman dapat

dilakukan dengan cara ekstraksi. Ekstraksi dapat dilakukan dengan 3 metode
yaitu metode soxletasi, metode perkolasi dan metode maserasi. Dari ketiga
metode tersebut metode maserasi adalah metode yang paling banyak
digunakan dalam berbagai jenis ekstraksi. Maserasi merupakan proses
ekstraksi simplisia dengan menggunakan pelarut yang bertujuan untuk
mendapatkan zat-zat yang terkandung di dalam bahan. Kelebihan dari metode
maserasi adalah biayanya yang murah, mudah untuk dilakukan, peralatannya
sederhana, dan tanpa pemanasan sehingga tidak merusak senyawa flavonoid.

Pada penelitian yang telah dilakukan sebelumnya oleh Damar dkk

(2014) didapatkan hasil total flavonoid yang lebih besar pada maserasi
dikarenakan pada proses pemanasan sokletasi dapat menurunkan kadar total
flavonoid, sedangkan maserasi tidak dipanaskan sehingga bahan alam tidak
menjadi terurai dan memungkinkan banyak senyawa terekstraksi, meskipun
beberapa senyawa memiliki kelarutan terbatas dalam pelarut ekstraksi pada
suhu kamar (27-30 ᵒC).

2
 Lalu, pada hasil pemeriksaan total flavonoid oleh Hatam dkk (2013)
mendapatkan hasil perbedaan total flavonoid ekstrak kulit nanas lebih tinggi
pada metode sokletasi 5,115%, sedangkan maserasi 3,514%. Total flavonoid
lebih banyak pada sokletasi dikarenakan perlakuan panas dengan alat khusus,
sehingga terjadi ekstraksi secara continue dengan jumlah pelarut yang
digunakan lebih sedikit (efisiensi bahan), waktu yang digunakan lebih cepat
dan sampel yang diekstraksi secara sempurna karena dilakukan berulang kali.
Aktivitas biologis tidak hilang saat dipanaskan dengan penyesuaian suhu,
sehingga kedua teknik ini memiliki masing-masing keunggulan yang dapat
digunakan dalam pencarian kandungan senyawa dari ekstrak daun ramania.

1.2 Rumusan Masalah

Berdasarkan uraian di atas, maka perumusan masalah penelitian adalah :

1. Bagaimana pengaruh jenis daun muda terhadap kuantitas senyawa
flavonoid yang dihasilkan?
2. Bagaimana pengaruh jenis pelarut terhadap kualitas senyawa flavonoid
yang dihasilkan?
3. Bagaimana pengaruh waktu pengadukan terhadap kuantitas senyawa
flavonoid yang dihasilkan?

1.3 Tujuan Penelitian

1. Mengetahui jenis daun pandan yang dapat menghasilkan senyawa

flavonoid lebih banyak.
2. Mengetahui pelarut yang cocok yang dapat menghasilkan senyawa
flavonoid dalam jumlah lebih banyak.
3. Mengetahui pengaruh waktu maserasi terhadap kuantitas senyawa
flavonoid yang dihasilkan.

3
1.4 Manfaat Penelitian

1. Mengetahui bahwa daun pandan memliki kandungan flavonoid yang

berguna dalam bidan pengobatan.
2. Mengetahui pelarut yang cocok yang dapat menghasilkan senyawa
flavonoid dalam jumlah lebih banyak.
3. Mengetahui bahwa daun pandan tidak hanya berguna untuk pewarna
dan pewangi alami saja, melainkan dapat menjdai pengawet alami
untuk industri makanan.

4
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 State of The Art

Penelitian sebelumnya berfungsi untuk menganalisa dan memperkaya
pembahasan penelitian, serta membedakannya dengan penelitian yang sedang
dilakukan. Dalam penelitian ini disertakan tiga jurnal penelitian sebelumnya
yang berhubungan dengan isolasi flavonoid.
Penelitian berjudul optimasi volume pelarut dan waktu maserasi
pengambilan flavonoid daun belimbing wuluh (Averrhoa Bilimbi L) oleh
Aning Yulianingtyas, Bambang Kusmartono (2016) dengan Menentukan
pengaruh waktu dan volume pelarut terhadap berat flavonoid terestrak dengan
variasi waktu maserasi yaitu 6 jam, 18 jam, 24 jam, 30 jam, 48 jam, 66 jam
dan 78 jam dan dilakukan dengan variasi volume pelarut yaitu 100 ml, 150
ml, 200 ml, 250 ml dan 300 ml dengan hasil Semakin banyak volume pelarut
yang ditambahkan dan semakin lama waktu maserasi yang dilakukan maka
flavonoid yang terekstrak semakin banyak. Kondisi optimal proses
pengambilan flavonoid dicapai saat digunakan volume pelarut 250 ml dan
waktu dimaserasi selama 48 jam sehingga diperoleh flavonoid tersekstrak
sebanyak 72.31 mg.

Penelitian berjudul penetapan kadar flavonoid total ekstrak etanol kulit

buah alpukat dengan metode spektrofotometri UV-VIS oleh Aminah
Nurhayati dan Tomayahu dan Zainal Abidin (2015) dengan menentukan kadar
flavonoid total ekstrak etanol kulit buah alpukat dengan deret konsentrasi
6,8,10,12 dan 14 ppm dengan hasil Pengukuran serapan panjang gelombang
maksimum standar baku kuerstretin berada pada panjang gelombang 435nm
yang digunakan untuk mengukur serapan dari ekstrak etanol kulit buah
alpukat, semakin tinggi konsentrasi maka semakin tinggi pula absorban yang
diperoleh. Penelitian berjudul penentuan kadar flavonoid ekstrak etanol 70%

5
 Kulit bawang merah dengan metode maserasi dan Microwave Assisted
Extraction dengan menentukan dan membandingkan kadar flavonoid ekstrak
etanol 70% kulit bawang merah menggunakan metode maserasi dan
microwafe assisted extraction. Maserasi dilakukan pada suhu 80C. Hasil dari
penelitian kadar flavonoid yang didaptakan dengan metode maserasi adalah
sebesar 14,92% dan kadar yang didapatkan dengan metode MAE adalah
sebesar 17.18% sehingga metode MAE lebih efektif digunakan untuk
mengekstrak flavonoid daun bawang merah dibandingkan dengan metode
maserasi.

2.2 Uraian Tanaman Pandan

2.2.1 Sistematika Tanaman

Indonesia negara tropis memiliki beraneka tanaman yang dapat

dimanfaatkan untuk kepentingan manusia. Masyarakat indonesia sejak
jaman dahulu telah mengenal dan memanfaatkan tanaman yang
mempunyai khasiat obat atau menyembuhkan penyakit. Tanaman
tersebut dikenal dengan sebutan tanaman obat tradisional atau obat
herbal. Salah satu tanaman tersebut adalah daun pandan wangi
(pandanus ammaryllifolius) (Dalimarta, 2008)

Menurut Rohmawati (1995) klasifikasi tata nama (sistematika) dari tanaman

pandan wangi (pandanus amaryllifolius) sebagi berikut :

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Liliopsida

Sub Kelas : Arecidae

Bangsa : Pandanales

Suku : Pandanacea

Marga : Pandanus

Spesies : Pandanus amaryllifolius

6
2.2.2 Morfologi Tanaman

Pandan wangi (pandanus ammaryllifolius) atau biasa disebut

pandan saja adalah jenis tanaman monokotil dari famili pandanaceae.
Daunnya merupakan komponen penting dalam tradisi masakan
Indonesia di negara-negara asia tenggara lainnya. Di beberapa daerah
tanaman ini dikenal dengan berbagai nama antara lain: Pandan Rampe,
Pandan Wangi (Jawa), Seuke Bangu, Pandan Jau, Pandan Bebau,
Pandan Rempai (Sumatra), Pondang, Ponda, Pondago (Sulawesi),
Kelamoni, Haomoni, Kekermoni, Ormon, Foni, Pondak, Pondaki,
Pudaka (Maluku), Pandan arrum (Bali), Bonak (Nusa Tenggara)
(Rohmawati, 1995).

Pandan wangi merupakan tanaman perdu, tingginya sekitar 1-2 m.

Tanaman ini mudah dijumpai di pekarangan atau tumbuh liar di tepi-tepi
selokan yang teduh. Batangnya bercabang, menjalar, pada pangkal
keluar akar tunjang. Daun pandan wangi berwarna hijau, di ujung daun
berduri kecil, kalau diremas daun ini berbau wangi. Daun tunggal
dengan pangkal memeluk batang, tersusun berbaris tiga dalam garis
spiral. Helai daun tipios, licin, ujung runcing, tepi rata, bertulang sejajar.
Panjang 40-80 cm, lebar 3-5 cm dan berduri tempel pada ibu tulang
daun permukaan bawah bagian ujung-ujungnya. Beberapa varietas
memiliki tepi daun yang bergigi (Dalimarta, 2008).

2.2.3 Kandungan kimia

Kandungan daun pandan wangi yang meliputi flavonoid, alkaloid,

saponin, tanin, polifenol, dan zat warna, diduga memiliki kontribusi
terhadap aktivitas antibakteri (Arisandi dan Andriani, 2008).

7
2.2.4 Manfaat Daun Pandan Wangi

Daun pandan wangi banyak memiliki manfaat, sebagai rempah-rempah

dalam pengolahan makanan, pemberi warna hijau pada masakan, dan
juga sebagai bahan baku pembuatan minyak wangi. Daunnya harum jika
diremas atau diirisiris. Selain itu daun pandan wangi juga memiliki
banyak manfaat dalam bidang pengobatan antara lain:

1. Pengobatan lemah saraf

2. Pengobatan rematik dan pegel linu
3. Menghitamkan rambut dan mengurangi rambut rontok
4. Menghilangkan ketombe
5. Penambah nafsu makan
6. Mengatasi hipertensi

2.2.5 Senyawa Flavonoid

Flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol terbesar yang

ditemukan di alam dan yang memiliki potensial sebagai antioksidan
serta bioaktifitas sebagai obat. Senyawa flavonoid sebenarnya terdapat
pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu, kulit, tepung
sari, bunga, buah, dan biji. Kebanyakan flavonoid ini berada di dalam
tumbuh- tumbuhan, kecuali alga. Namun ada juga yang terdapat pada
hewan, misalnya dalam kelenjar berang-berang dan sekresi lebah, dalam
sayap kupu - kupu dengan anggapan bahwa flavonoid berasal dari
tumbuh- tumbuhan yang menjadi makanan hewan tersebut dan tidak
dibiosintesis di dalam tubuh mereka. Penyebaran jenis flavonoid pada
golongan tumbuhan yang tersebar yaitu angiospermae, chlorophyta,
fungi, bryophyte (Markham, 1988).
Senyawa flavonoid terdapat dalam semua tumbuhan hijau sehingga
dapat ditemukan pada setiap ekstrak tumbuhan. Flavonoid adalah kelas
senyawa yang tersebar secara luas di alam. Hingga saat ini, lebih dari

8
9000 senyawa flavonoid telah dilaporkan, dan jumlah kebutuhan
flavonoid bervariasi antara 20 mg dan 500 mg, terutama terdapat dalam
suplemen makanan termasuk teh, anggur merah, apel, bawang dan
tomat. Flavonoid ditemukan pada tanaman, yang berkontribusi
memproduksi pigmen berwarna kuning, merah, orange, biru, dan warna
ungu dari buah, bunga, dan daun (Hui Cao dkk., 2015).
Sebagian besar flavonoid yang terdapat pada tumbuhan terikat pada
molekul gula sebagai glikosida dan dalam bentuk campuran, jarang
sekali dijumpai berupa senyawa flavonoid tunggal. Disamping itu sering
ditemukan campuran yangterdiri dari flavonoid yang berbeda kelas.
Misalnya antosianin dalam mahkota bunga yang berwarna merah, ungu
dan biru. Pigmen ini juga terdapat di berbagaibagian tumbuhan lain,
misalnya buah tertentu, batang, daun, dan bahkan akar. Sering flavonoid
terikat di sel epidermis. Flavonoid dalam tumbuhan mempunyaifungsi
sebagai pigmen warna. Fungsi senyawa flavonoid dalam tubuh manusia
sebagai antioksidan, antibakteri, dan anti inflamasi sehingga baik untuk
pencegahan kanker. Manfaat lain dari flavonoida ini adalah untuk
meningkatkan efektivitas vitamin C, antiinflamasi, antibakteri,
antidiabetes, diuretik dan sebagaiantibiotik (Markham, 1988).

Flavonoid dalam bentuk terglikosilasi atau metilasi pada tanaman,

struktur- strukturnya lebih stabil, mudah didapatkan serta mudah dalam
bioaktivitasnya. Flavonoid terglikosilasi telah didapatkan dengan
peralatan biologi, glycosyltransferase, di mana enzim mengkatalisis
untuk menempelkan molekul gula ke dalam aglycon yang menghasilkan
glikosida (Gantt dkk., 2011; Thuan dkk., 2013).

Flavonoid merupakan senyawa polar karena memiliki sejumlah

gugus hidroksil yang tidak tersubstitusi. Pelarut polar seperti etanol,
metanol, etil asetat, atau campuran dari pelarut tersebut dapat digunakan
untuk mengekstraksi flavonoid dari jaringan tumbuhan (Rijke, 2005).

9
 Flavonoid umumnya terdapat dalam tumbuhan, terikat pada gula
sebagai glikosida. Aglikon flavonoid mungkin saja terdapat dalam
beberapa bentuk kombinasi glikosida dalam satu tumbuhan, sehingga
dalam menganalisis flavonoid biasanya lebih baik bila kita memeriksa
aglikon yang terdapat dalam ekstrak tumbuhan yang telah dihidrolisis
daripada mengamati bentuk glikosidanya yang rumit (Harborne, 1987).
Flavonoid merupakan golongan terbesar senyawa fenol alam dan
merupakan senyawa polar karena mempunyai sejumlah gugus hidroksil
yang tak tersulih atau suatu gula, sehingga akan larut dalam pelarut
polar seperti etanol, metanol, butanol, aseton, dimetilsulfoksida,
dimetilformamida, dan air. Adanya gula yang terikat pada flavonoid
cenderung menyebabkan flavonoid lebih mudah larut dalam air dan
dengan demikian campuran pelarut di atas dengan air merupakan
pelarut yang lebih baik untuk glikosida. Sebaliknya, aglikon yang
kurang polar seperti isoflavon, flavanon, dan flavon serta flavonol yang
termetoksilasi cenderung lebih mudah larut dalam pelarut seperti eter
dan kloroform (Markham, 1988). Analisa flavonoid lebih baik dengan
memeriksa aglikon yang terdapat dalam ekstrak tumbuhan yang telah
dihidrolisis sebelum memperhatikan kerumitan glikosida yang ada
dalam ekstrak asal (Harborne, 1987).

Gambar 2.1 Struktur Dasar Senyawa Flavonoid

(Sumber: Juariyah, 2019)

10
2.3 Metode Analisa yang Digunakan untuk Pengambilan Flavonoid

2.3.1 Ekstraksi

Ekstraksi adalah pemisahan bagian-bagian jaringan tanaman dan

hewan yang aktif menggunakan pelarut yang sesuai. Teknik ekstraksi
ini digunakan untuk memisahkan kandungan kimia yang terdapat dalam
tanaman. Ekstraksi istilah yang digunakan secara farmasi, melibatkan
pemisahan bagian aktif tumbuhan atau jaringan hewan dari komponen
aktif dengan menggunakan pelarut sesuai dalam standar prosedur
ekstraksi. Pada proses ekstraksi dilakukan pengeringan bahanbahan
terlebih dahulu kemudian dihaluskan pada derajat kehalusan tertentu
(Handa dkk., 2008).

Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat

larut sehingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan
menggunakan suatu pelarut cair. Senyawa aktif yang terdapat dalam
berbagai simplisia dapat digolongkan kedalam golongan minyak atsiri,
alkaloid, flavonoid, dan lain-lain.

Senyawa aktif yang dikandung simplisia akan mempermudah

dalam pemilihan pelarut dengan cara ekstraksi yang tepat. Tujuan utama
ekstraksi ini adalah untuk mendapatkan atau memisahkan sebanyak
mungkin zat-zat yang memiliki khasiat pengobatan (Depkes, 2000).

2.3.2 Maserasi

Maserasi merupakan salah satu metode ekstraksi yang paling umum

dilakukan dengan cara memasukkan serbuk tanaman dan pelarut
yangsesuai ke dalam suatu wadah inert yang ditutup rapat pada suhu
kamar. Akantetapi, ada pula kerugian utama dari metode maserasi ini,
yaitu dapatmemakan banyak waktu, pelarut yang digunakan cukup
banyak, dan besar kemungkinan beberapa senyawa dapat hilang. Selain

11
 itu, beberapa senyawa mungkin saja akan sulit diekstraksi pada suhu
kamar. Namun di sisi lain, metode maserasi dapat juga menghindari
resiko rusaknya senyawa-senyawa dalam tanaman yang bersifat
termolabil (Tetti, 2014).

2.3.3 Spektrofotometri

Spektrofotometri adalah ilmu yang mempelajari tentang

penggunaan spektrofotometer. Spektrofotometri merupakan pengukuran
suatu interaksi antara radiasi elektromagnetik dan molekul atau atom
dari suatu zat kimia. Spektrofotometer adalah alat yang digunakan untuk
mengukur energi secara relatif jika energi tersebut ditransmisikan,
direfleksikan atau diemisikan sebagai fungsi dari panjang gelombang
(Sastrohamidjojo, 1985).

2.3.4 Spektrofotometri UV-Vis

Spektrum UV adalah suatu gambaran yang menyatakan hubungan

antara panjang gelombang atau frekuensi serapan terhadap intensitas
serapan (transmitansi atau adsorbansi). Sinar UV mempunyai panjang
gelombang antara 200-400 nm. Serapan cahaya oleh molekul dalam
daerah spektrum UV tergantung pada struktur elektronik dari molekul
yang bersangkutan. Spektrum UV dan sinar tampak dari senyawa-
senyawa organik berkaitan erat dengan transisi-transisi antara dua
tingkat energi elektronik molekul tersebut (Sastrohamidjojo, 1985).
Prinsip spektrofotometri UV adalah interaksi terjadi antara energi
yang berupa sinar monokromatis dari sumber sinar dengan materi yang
berupa molekul. Prinsip kerja spektrofotometri UV berdasarkan hukum
Lambert Beer, bila cahaya/sinar monokromatis melalui suatu media
(larutan), maka sebagian cahaya tersebut diserap, sebagian dipantulkan
dan sebagian lagi dipancarkan (Dachriyanus, 2004).

12
 Penyerapan radiasi UV terjadi melalui eksitasi elektron dalam suatu
molekul ke level energi yang lebih tinggi. Transisi ini terjadi dari
keadaan vibrasional bawah dalam keadaan elektronik dasar suatu
molekul ke salah satu level vibrasional apapun dalam keadaan
elektronik tereksitasi. Transisi dari energi keadaan dasar tunggal ke
salah satu dari sejumlah keadaan tereksitasi memberikan spektrum UV
yang lebar (Gandjar dan Rohman, 2012).
Pelarut yang banyak digunakan untuk spektrofotometri sinar UV
adalah etanol 95% karena kebanyakan golongan senyawa larut dalam
pelarut tersebut. Alkohol absolut komersial harus dihindari karena
mengandung benzena yang dapat menyerap di daerah sinar UV pendek.
Pelarut yang sering digunakan ialah air, etanol, metanol, n-heksana, eter
minyak bumi dan eter (Harborne, 1987).
Prinsip kerja dari spektroskopi UV-Vis adalah ketika ada sumber
sinar berupa cahaya uv-vis (monokromatik) diteruskan melalui suatu
media (larutan bewarna) yang merupakan suatu sampel, maka Sebagian
cahaya tersebut ada yang diserap, dipantulkan dan ada yang diteruskan.
Cahaya yang diserap tersebut akan menyebabkan elektron terekstasi dari
keadaan dasar ke keadaan yang memiliki energi yang lebih tinggi.
Serapan sinar ini tidak terjadi pada semua struktur. Tetapi, hanya terjadi
pada system terkonjugasi yang memiliki ikatan phi atau gugus
kromofor, gugus ausokrom (gugus yang memiliki vibrasi yang besar
karena adanya pasangan elektron bebas) contohnya adalah -OH, -NH2, -
SH, dan lain- lain. Karena memiliki vibrasi yang besar, maka jika terikat
dengan gugus kromofor, dia akan menyebakan pergeseran serapan
kearah panjang gelombang yang lebih besar dan meningkatkan
intensitas puncak serapan. Sedangkan, cahaya yang tidak diserap atau
diteruskan akan muncul sebagai nilai transmitansi. Sehingga, hasil
pengukuran spektroskopi UV- Vis akan disajikan dalam bentuk spektra
serapan atau transmitansi. Bentuk spektra pita serapan UV-Vis suatu
molekul cenderung berbentuk
13
bukit atau parabola terbalik, berbeda dengan bentuk spektra atom yang
berbentuk garis-garis. Hal ini dikarenakan transisi elektronik yang
terjadi memiliki perbedaan energi yang tidak terlalu besar.
Sampel yang dinyatakan positif mengandung flavonoid selanjutnya
dilakukan uji kuantitatif penetapan kadar dengan metode
spektrofotometri UV-Vis karena metode ini memberikan cara sederhana
untuk menetapkan kuantitas zat yang sangat kecil. Selain itu, hasil yang
diperoleh cukup akurat, dimana angka yang terbaca langsung dicatat
oleh detkctor dan tercetak dalam bentuk angka digital ataupun grafik
yang sudah diregresikan. Analisis flavonoid ini dapat dilakukan dengan
menggunakan spektrofotometri UV-Vis karena flavonoid memiliki
sistem aromatik yang terkonjugasi sehingga menunjukkan pita serapan
kuat pada daerah spektrum sinar ultraviolet dan spektrum sinar tampak.
Absorbansi maksimum dari larutan berwarna terjadi pada daerah
warnayang berlawanan dengan warna yang diamati, misalnya larutan
berwarna merah akan menyerap radiasi maksimum pada daerah warna
hijau. Dengan kata lain warna yang diserap adalah warna
komplementer dari warna yang diamati.
Daftar spektrum cahaya tampak dipresentasikan pada tabel di bawah ini.

14
Tabel 2.1 Spektrum Cahaya Tampak dan Warna-warna Komplementer

Panjang Gelombang Warna Warna Komplementer

400 – 435 Violet Kuning – Hijau

435 – 480 Biru Kuning
480 – 490 Hijau – Biru Oranye
490 – 500 Biru – Hijau Merah
500 – 560 Hijau Ungu
560 – 580 Kuning – Hijau Violet
580 – 595 Kuning Biru
595 – 610 Oranye Hijau – Biru
610 – 750 Merah Biru – Hijau
(Day dan Underwood, 2002)

15
 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1 Alat dan Bahan

3.1.1 Alat Percobaan
Alat – alat yang digunakan dalam penelitian adalah sebagai berikut:
1. timbangan digital 1 11. Pemanas listrik
pcs
12. kaca arloji 1 pcs
2. magnetic stirrer 1 pcs
13. corong kaca 1 pcs
3. blender 1 pcs
14. pipet tetes 1 pcs
4. ayakan 30 mess 1 pcs
15. batang pengaduk 1 pcs
5. gelas ukur 2 pcs
16. oven 1 pcs
6. beaker gelas 2 pcs
17. cawan penguap 1 pcs
7. Erlenmeyer 2 pcs
18. buchner funnel 1 pcs
8. labu ukur 1 pcs
19. timer 1 pcs
9. Labu leher 2 1 pcs
20. pektrofotometer UV-Vis 1 pcs
10. Termometer

3.1.2 Bahan
Daftar bahan yang digunakan pada penelitian ini dapat dilihat di bawah ini.

Bahan : Fungsi :

Ekstrak daun pandan wangi muda 10 gram Zat aktif

Ekstrak daun pandan wangi tua 10 gram Zat aktif

Methanol 99.9% 250 ml Pelarut polar

Aseton 80% 250 ml Pelarut semi-polar

Quersetin p.a Kurva standar pengukuran

16
3.2 Variabel Penelitian
Penelitian ini meliputi 1 variabel waktu yaitu menggunakan waktu 30 menit
dan menggunakan 2 jenis pelarut berupa Methanol dan Aseton masing – masing
sebanyak 250 ml.
Tabel 3.1 Variasi Penelitian

Percobaan Daun pandan Pelarut Waktu

1 Muda Metanol 30 menit
2 Muda Aseton 30 menit
3 Tua Metanol 30 menit
4 Tua Aseton 30 menit

17
3.3 Diagram Alir Penelitian
Diagram alir penelitian dapat dilihat pada Gambar 3.1

Pengumpulan
bahan baku

Daun pandan muda, tua (masing

– masing 2 potong daun),
methanol dan aseton 250ml
Preparasi bahan

Daun pandan yang sudah di

keringkan selama 5 hari di
hancurkan sampai menjadi
Analisa kadar bubuk
airdan analisa
kuantitatif

Gunakan 2gr bubuk daun

pandan kemudian keringkan di
dalam oven dengan suhu 100 –
Pembuatan 105OC
sampel penelitian

10gr sampel di maserasi dengan

methanol dan aseton selama 30
Analisa menit
kuantitatif
flavonoid hasil
Menimbang 15gr quercetin dan
di encerkan sampai kons.
100ppm lalu dibuat larutan
Pengolahan data dalam beberapa kons.

Gambar 3.1 Diagram Alir Penelitian

Kesimpulan

18
3.3.1 Persiapan Bahan Baku
Persiapan Bahan Baku meliputi, penyiapan daun pandan, setelah itu
dilakukan pencucian yang berfungsi untuk menghilangkan padatan pengotor
dari daun pandan. Pencucian daun pandan ini diutamakan untuk memakai air
panas dibandingkan dengan pemakaian air dingin karena kelarutan selulosa
dalam air panas sebesar 2.5% (Roganda et al., 2015) sehingga pada saat
pengotor disisihkan dari daun pandan, selulosa tidak akan ikut terbuang.
Setelah dilakukan pencucian, daun pandan dijemur atau dikeringkan di
angin- anginkan selama 5 hari sampai kering sempurna untuk menguapkan
kadar air dalam selulosa sehingga serat dapat lebih mudah untuk mengalami
pencacahan. Dilanjutkan dengan menghaluskan dengan blender sampai
menjadi serbuk. Daun yang telah kering dihaluskan dengan blender,
kemudian diayak menggunakan ayakan 30 mess agar diperoleh derajat
kehalusan yang sama sehingga ekstraksi dapat berjalan lebih optimal.

3.3.2 Analisis Bahan Baku

Analisis kadar air dilakukan dengan cara menimbang bahan yang telah
dihaluskan sebanyak 2 gram dalam botol timbang yang telah diketahui
beratnya. Kemudian dikeringkan dalam oven pada suhu 100-105 oC selama 3
jam. Kemudian didinginkan dalam eksikator dan ditimbang. Panaskan lagi
dalam oven selama 30 menit, dinginkan dalam eksikator dan ditimbang,
perlakuan ini diulang sampai tercapai berat konstan (selisih penimbangan
berturut-turut kurang dari 0,2 mg). Pengurangan berat merupakan banyaknya
air dalam bahan pengulangan dilakukan hingga diperoleh berat konstan.

3.3.3 Pembuatan Ekstrak Daun Pandan

Tahap pembuatan sampel yaitu ekstraksi dengan metode maserasi atau
perendaman, dimana 10 gram serbuk dimaserasi menggunakan larutan etanol
99.95% dan aseton 80%, sebanyak 250 ml selama T menit dalam
erlenmeyer. T menit mewakili variabel waktu maserasi. Penelitian
dilakukan
19
 menggunakan metode optimasi pada varibel pertama yaitu volume pelarut
kemudian hasil terbaik dari variabel pertama digunakan untuk menentukan
optimasi pada variabel kedua yaitu waktu maserasi. Sebelum waktu maserasi
mulai dihitung, dilakukan pengadukan menggunakan pengaduk merkuri
berkecepatan 200 rpm. Hasil maserasi disaring menggunakan kertas saring
dan ditampung di labu alas bulat, pekatkan ekstrak dengan rotary evaporator,
atur suhu waterbath pada suhu titik didih pelarut, pelarut akan teruapkan dan
tertampung di labu penampung, uapkan pelarut hingga volume ekstrak
sekitar 20 ml, setelah itu pindahkan ekstrak yang sudah dipekatkan ke dalam
cawan porselen (yang sudah ditimbang berat kosongnya) setelah itu
masukkan cawan porselen berisi ekstrak ke dalam oven (Suhu 50o C) hingga
diperoleh ekstrak kering.

3.3.4 Analisis Kuantitatif Flavonoid Hasil Penelitian

Langkah awal yaitu pembuatan larutan standar flavonoid quercetin
sebagai kurva standar, yaitu menimbang 15 mg quercetin diencerkan
menjadi konsentrasi 100 ppm, lalu dibuat larutan dalam beberapa
konsentrasi yaitu 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15, 20 ppm dan diukur absorbansinya pada
panjang gelombang yang sesuai (sebelumnya menentukan lamda max). Hasil
dari pengukuran absorbansi inilah yang kemudian digunakan untuk
membuat kurva standar flavonoid. Analisis hasil dilakukan dengan
menimbang 50 mg sampel, larutkan dalam 50 ml etanol 99.9%, larutan
dipipet 10 ml ke dalam labu ukur 50 ml lalu ditambahkan 1 ml AlCl3 10%, 1
ml Kalium Asetat 1M dan encerkan hingga tanda batas. Diukur serapannya
dengan spektrofotometer UV-Vispada panjang gelombang yang sesuai.
Dilakukan hal yang sama dengan pelarut aseton 80%.

20
3.4 Rangkaian Alat
Berikut ini adalah rangkaian alat Ekstraksi dan destilasi
Keterangan:
1. Kondensor
Buble
2. Thermometer
3. Labu Leher 2
4. Pemanas
Listrik

Gambar 3.2 Rangkaian alat ekstraksi daun pandan

Keterangan:
1. Termometer
2. Termometer
3. Labu leher 2
4. Pemanas
listrik
5. Statif
6. Kondensor
double pipe
7. Gelas ukur

Gambar 3.3 Rangkaian alat destilasi daun pandan

21
3.5 Hipotesa
Dari tinjauan pustaka diatas, menghasilkan hipotesis sebagai berikut:
Terdapat kadar flavonoid yang tinggi pada daun pandan wangi yang sudah tua di
karenakan semakin hijau daun maka semakiantinggi pula kandungan flavonoid
nya.
Teh yang terbuat dari daun tua memiliki nilai rata-rata total flavonoid lebih
tinggi dibandingkan dengan daun muda yaitu 54,08 mg QE/g bk bahan dan 33,54
mg QE/g bk bahan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa daun alpukat tua
mengandung kadar flavonoid yang lebih tinggi. Hal ini didukung oleh penelitian
Mu’nisa et al. (2011).

22
 BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Preparasi Sampel
Pada penelitian ini menggunakan sampel yaitu daun Pandan tua dan daun Pandan
muda yang diperoleh dari daerah Pagebangan, Kecamatan Ciwandan, Kota Cilegon. Daun
Pandan Tua yang sudah dikeringkan selama ± 3 hari mengalami penurunan berat dari 24,24
g menjadi 23,78 g dengan kadar air yang didapatkan sebesar 0,02 % (Lampiran 1)
Sedangkan Daun Pandan Muda mengalami penurunan berat dari 22,68 g menjadi 22,07
g dengan kadar air yang didapatkan sebesar 0,03 % (Lampiran 1). Pengeringan dilakukan
tanpa menggunakan suhu yang tinggi untuk mencegah terjadinya perubahan kimia.
Pemotongan sampel dilakukan dengan tujuan untuk memperluas permukaan dan
menghancurkan dinding sel, sehingga pelarut dapat menembus dinding sel dan menarik
senyawa- senyawa kimia yang terkandung dalam sampel. Selanjutnya sampel diekstraksi
dengan menggunakan metode maserasi. Adapun tujuan dari proses ekstraksi ini adalah
untuk menarik komponen kimia yang terdapat dalam simplisia.

4.2 Ekstraksi Sampel

Sebanyak 10 gram simplisia diekstraksi dengan menggunkan metode maserasi
pelarut metanol dan aseton. Pemilihan metode maserasi karena mudah dilakukan dan tidak
perlu pemanasan, sehingga senyawa-senyawa kimia yang terkandung dalam sampel tidak
rusak atau terurai. Perendaman yang dilakukan terhadap sampel tumbuhan mengakibatkan
terjadinya pemecahan dinding dan membran sel karena adanya perbedaan tekanan antara di
dalam dan di luar sel sehingga metabolit sekunder yang terdapat dalam sampel akan terlarut
dalam pelarut organik. Pengunaan pelarut aseton bertujuan untuk menarik senyawa-
senyawa yang bersifat semi polar, dan pelarut metanol bertujuan untuk menarik senyawa-
senyawa yang bersifat polar.

4.3 Hasil Uji Total Flavonoid

Penentuan kadar flavonoid dengan menggunakan metode Chang (2002) dan sebagai
pembanding digunakan baku standar kuersetin. Pengukuran panjang gelombang maksimum
dilakukan untuk menentukan panjang gelombang maksimum yang akan digunakan dalam

23
pengukuran pada spektrofotometri UV- Vis. Hasil pengukuran diperoleh panjang
gelombang maksimum yaitu 420 nm. Pengukuran absorbansi larutan standar kuersetin
dilakukan pada konsentrasi 1, 2, 3, 4, 5, 10, 15 dan 20 ppm. Diperoleh hubungan yang
linear antara absorbansi dengan konsentrasi yaitu sebesar 0,9989. Dari hasil perhitungan,
diperoleh nilai intersep sebesar 0,004 dan nilai slope sebesar 0,0005 sehingga persamaan
kurva baku adalah y = 0,004x + 0,0005. Persamaan tersebut digunakan sebagai
pembanding dalam analisis kuantitatif pada pengukuran kandungan senyawa flavonoid
kuersetin terhadap ekstrak metanol dan aseton daun Pandan tua dan muda.

Tabel 4.1 baku Standar Kuersetin pada Panjang Gelombang 420 nm

Konsentrasi Absorbansi
0 0.000
1 0.006
2 0,011
3 0.017
4 0.020
5 0.027
10 0.053
15 0.084
20 0.111

Gambar 4.1 Kurva Standar Kuarsetin

24
 Flavonoid total pada ekstrak metanol diperoleh dengan cara memasukkan nilai
absorbansi pada kurva standar kuersetin sehingga hasil dari besar flavonoid total ekstrak
metanol daun Pandan muda dan tua yaitu sebesar 23.136 % dan 27.933 %.

Tabel 4.2 Flavonoid total ekstrak ethanol daun Pandan muda

Kandungan Flavonoid Kandungan % Kadar

Waktu Absorbansi
Total Flavonoid Total Flavonoid

60 Menit 0,143 39,81 199,05

120 Menit 0,285 52,732 263,66 23,136%

Rata-rata 0,214 46,271 231,355

Tabel 4.3 Flavonoid total ekstrak ethanol daun Pandan tua

Kandungan Flavonoid Kandungan % Kadar

Waktu Absorbansi
Total Flavonoid Total Flavonoid

60 Menit 0,236 46,398 231,99

120 Menit 0,416 65,334 326,67 27,933%

Rata-rata 0,326 55,866 279,33

Flavonoid total pada ekstrak Aseton diperoleh dengan cara memasukkan nilai
absorbansi pada kurva standar kuersetin sehingga hasil dari besar flavonoid total ekstrak
aseton daun Pandan muda dan tua yaitu sebesar 7.76 % dan 13.151 %.

Tabel 4.4 Flavonoid total ekstrak aseton daun Pandan muda

Kandungan Flavonoid Kandungan % Kadar

Waktu Absorbansi
Total Flavonoid Total Flavonoid

60 Menit 0,039 10,248 51,24

120 Menit 0,082 20,79 103,95 7,760%
Rata-rata 0,0605 15,519 77,595

25
 Tabel 4.5 Flavonoid total ekstrak aseton daun Pandan tua

Kandungan Flavonoid Kandungan % Kadar

Waktu Absorbansi
Total Flavonoid Total Flavonoid

60 Menit 0,107 18,392 91,96

120 Menit 0,292 34,212 171,06 13,151%
Rata-rata 0,1995 26,302 131,51

Dari pengukuran tersebut, dapat disimpulkan bahwa semakin tinggi konsentrasi

yang digunakan maka semakin tinggi pula absorban yang diperoleh. Pengujian analisis
kuantitatif dengan spektrofotometri UV-Vis digunakan larutan blanko sebagai kontrol yang
berfungsi sebagai pemblank (mengkali nol-kan) senyawa yang tidak perlu dianalisis
(Basset.1994). Pada pengukuran senyawa flavonoid total. larutan sampel ditambahkan
AlCl3 yang dapat membentuk kompleks. sehingga terjadi pergeseran panjang gelombang
ke arah visible (tampak) yang ditandai dengan larutan menghasilkan warna yang lebih
kuning. Dan penambahan kalium asetat yang bertujuan untuk mempertahankan panjang
gelombang pada daerah visible (tampak) (Chang et al. 2002). Perlakuan inkubasi selama 1
jam sebelum pengukuran dimaksudkan agar reaksi berjalan sempurna. sehingga intensitas
warna yang dihasilkan lebih maksimal (Azizah dkk. 2014). Sehingga dari hasil penelitian
ini diperoleh kadar flavonoid total ekstrak metanol daun Pandan tua lebih besar daripada
daun Pandan muda begitupun sama dengan ekstrak aseton daun Pandan tua lebih besar
daripada daun Pandan muda dan dapat dilihat pada tabel. Kadar flavonoid terbesar
diperoleh dari jenis pelarut metanol. hal ini dikarenakan metanol memiliki tingkat
kepolaran yang lebih tinggi dibandingkan aseton. Flavonoid merupakan senyawa polar
yang yang memiliki gugus hidroksil yng tidak tersubstitusi dalam bentuk glikosida yang
mempunya sejumlah gula yang terikat. Maka dari itu flavonoid cenderung larut dalam
pelarut polar. Menurut Farhoosh et al. (2007) faktor yang mempengaruhi kadar total
flavonoid dalam daun adalah morfologi dan bertambahnya usia daun. yang akan
mempengaruhi metabolit sekunder dan senyawa bioaktifyang dihasilkan. Bhakta dan
Ganjewala (2009) menambahkan bahwa variasi kandungan flavonoid disebabkan karena
perbedaan usia perkembangan daun yang terjadi pada lokasi daun yang berbeda. Pada
penelitian kali ini. dipilih metode Spektrofotometri untuk menentukan besarnya kadar

26
flavonoid yang terkandung dalam daun Pandan. Hal ini dikarenakan terdapat adanya
kemungkinan pengecekan dengan menggunakan Spektrofotometri. Selain itu. pada metode
ini preparasi sampel lebih mudah. harga operasional yang lebih murah jika dibandingkan
dengan HPLC (High Performance Liquid Chromatography). Hasil analisa dari
Spektrofotmetri ini juga memiliki akurasi yang cukup tinggi.

27
 BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan. maka dapat disimpulkan bahwa:
1. Kadar flavonoid total dari ekstrak metanol daun kelapa muda sebesar 231.355
mgQE/g. daun kelapa tua 279.33 mgQE/g dan ekstrak aseton daun kelapa muda
77.595 mgQE/g. daun kelapa tua 131.51 mgQE/g.
2. Kadar flavonoid terbesar didapatkan dari daun kelapa tua dengan pelarut metanol
maupun aseton.
3. Kadar flavonoid terbesar didapatkan dari waktu pengadukan terlama yaitu 120
menit.
4. Kadar flavonoid terbesar didapatkan dari jenis pelarut metanol. hal ini dikarenakan
pelarut metanol memiliki tingkat kepolaran yang lebih tinggi dibandingkan dengan
pelarut aseton.
5.2 Saran
1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui kandungan lain yang ada
di dalam daun kelapa.
2. Perlu dilakukan penelitian menggunakan isolasi berbeda serta pelarut yang berbeda
dengan sampel yang sama.

28
 DAFTAR PUSTAKA
Aminah. Nurhayati. T.. dan Zainal. A. 2017. Penetapan Kadar Flavonoid Total Ekstrak
Etanol Kulit Buah Alpukat (Persea americana Mill.) dengan Metode
Spektrofotometri UV – Vis. Jurnal Fitofarmaka Indonesia. 4(2): 227 – 228
Anyanji.V.U.. Mohamed. S.. Zokti. J.A.. dan Ado. M.A. 2013. Anti Inflammatory
Properties Of Oil Palm Leaf (Elaeis guineensis Jacq.) Extract in Aged Rats.
International Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences. 5: 135-137
Arifin Bustal.. Sanusi Ibrahim. 2018. Struktur Bioaktivitas Dan Antioksidan Flavonoid.
Jurnah Zarah. Vol 6 No. 1. Universitas Andalas : Padang. Halaman 21-29
Balai Uji Terap Teknik dan Metode Karantina Pertanian. 2021. “Kelapa”.
http://buttmkp.karantina.pertanian.go.id/?page_id=1825 (diakses 01 Oktober 2021)
Banjarnahor. S.. Artanti. N. 2014. Antioxidant Propertiest Of Flavonoid. Medical Journal
Of Indonesia. 23(4). Halaman 239-244
Bate’e. E. 2013. Karakterisasi dan Isolasi Senyawa Triterpenoid/Steroid Daun Kelapa
Sawit (Elaeis guineensis Jacq.). Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi Universitas
Sumatera Utara.
Chong. K.H.. Zuraini. Z.. Sasidharan. S.. Kalnisha. Devi. P.V.. Yoga. L.. and Ramanathan.
S. 2008. Antimicrobial Activity of Elaeis guineensis Leaf. Journal of
Pharmacologyonline 3; 379-386
Dachriyanus.. 2004. Analisis Struktur Senyawa Organik Secara Spektrofotometri. hal 1-
37. Andalas University Press. Padang
Damar.A.C.. Max.R.J.R.. dan Defny.S.W.. 2014. “Kandungan Flavonoid dan Aktivitas
Antioksi dan Total Ekstrak Etanol Daun Kayu Kapur (Melanolepsis
multiglandulosa Reinchf)”. Pharmacon Jurnal Ilmiah Farmasi. Vol.3 (4). Hal:12;
15-16; 18
Departemen Kesehatan RI. 2000. Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat.
Cetakan Pertama. 3-11. 17-19. Dikjen POM. Direktorat Pengawasan Obat
Tradisional
G. Dewa. dkk. 2008. Analisis Kandungan Fitokimia dan Aktivitas PenstabilOksigen
Singlet dari Daun Kelapa. Manado: Universitas Sam Ratulangi
Gandjar. I.G.. dan Rohman. A.. 2012. Analisis Obat Secara Spektrofotometri dan

29
 Kromatografi. Yogyakarta : Pustaka Pelajar
Gantt. R.W.. Peltier-Pain. P.. Thorson. J.S. 2011. Enzymatic Methods For Glyco
(Diversification/Randomization) Of Drugs And Small Molecules. Natural Product
Reports. 28. 1811–1853
Handa S.S.. Khanuja S.P.S.. Longo G.. Rakesh D.D. 2008. Extraction Technologies for
Medicine and Aromatic Plants. ICS UNIDO. Trieste.pp.21-22
Hardjono Sastrohamidjojo. (1985). Kromatografi. Yogyakarta: Liberty
Harjono. 1997. Teknik Pengembangan Kelapa Kapyor. Solo : CV Penebar Swadaya
Hatam. Sri Febriani. Edi Suryanto. Jemmy Abidjulu (2013). Aktivitas Antioksidan dari
Ekstrak Kulit Nanas (Ananas comosus .L. Merr). Program Studi Farmasi Unstrat
Manado. Jurnal Ilmiah Farmasi-Unstrat. Vol. 2. No.01. Hlm.8-12
Harborne. J. B.. 1987. Metode Fitokimia Penuntun Cara Modern Menganalisis Tumbuhan.
Diterjemahkan oleh Kosasih Padmawinata dan Imam Sudiro. Edisi-I. 9-10. ITB.
Bandung
Hui Cao. Xiaoqing Chen. Amir. R. J.. Jianbo. Xiao. 2015. Microbial biotransformation of
bioactive flavonoids. 33. (1). 214-223
Jaffri. J. M.. Suhaila. M.. Rohimi. N.. Intan. N.. Ahmad. M.. Musthapa. N.. dan Yazid. A.
M. 2010. Antihypertensive and Cardiovascular Effects of Catechin-Rich Oil Palm
(Elaeis guineensis) Leaf Extract in Nitric Oxide Deficient Rats. Journal Of
Medicinal Food. 14(8): 775-783
Juliana. M. 2011. Antihypertensi and Cardivascular Effect of Catechin-Rich Oil Palm
(Elaeis guineensis Jacq.) Leaf Extract in Nitric Oxide-Deficient Rats. Journal of
Medicinal Food.. 14(7): 775-783
Kimia. 2017. Spektrofotometri Sinar Tampak (Visible).
http://kimia.fmipa.unej.ac.id/?p=472 (diakses 01 Oktober 2021)
Markham. K.R. 1988. Cara mengidentifikasi flavonoida. Terjemahan Kokasih
Padmawinata. ITB Press : Bandung
Marzouk. M.M. 2016. Flavonoids Constituens And Cytotoxic Of Eucaria Hispanica (L)
Druce Growing Wild in Egypt. Arabian Jurnal Chemistry. 9. 415
Nainggolan. M. 2014. Prosiding Seminar Nasional Kimia. Halaman 206-209
Palungkun. R. 2001. Aneka Produk Olahan Kelapa. Jakarta: Penebar Swadaya

30
Lampiran 1 Perhitungan Kadar Air

- Uji Kadar Air Daun Pandan Tua

Kadar air = (𝐴−𝐵)/𝐴 x 100 %

Keterangan:
A = Berat sampel sebelum dikeringkan (g)
B = Berat sampel setelah dikeringkan (g)

Kadar air = (24,24-23,78)/24,24 x 100%

= 0,018976898 x 100%
= 1,898%

- Uji Kadar Air Daun Pandan Muda

Kadar air = (𝐴−𝐵)/𝐴 x 100 %

Keterangan:
A = Berat sampel sebelum dikeringkan (g)
B = Berat sampel setelah dikeringkan (g)

Kadar air = (22,68-22,07)/22,68 x 100%

= 0,026895944 x 100%
= 2,690%

Lampiran 2 Perhitungan uji total flavonoid fraksi ethanol Daun Pandan Muda

Kandungan Kandungan % Kadar

Waktu Absorbansi
Flavonoid Total Flavonoid Total Flavonoid
60 Menit 0,143 39,81 199,05
120 Menit 0,285 52,732 263,66 23,136%
Rata-rata 0,214 46,271 231,355

Diketahui :
persamaan regresi linier kuersetin :y = bx + a
y = 0.004 x + 0.0005
R2 = 0.9996

- Kandungan Flavonoid Total Awal (mg/L)

Diketahui :
V = 50 mL = 0.05 L
m = 50 mg = 0.05 g

Keterangan :
C = Total flavonoid (mgQE/g sampel esktrak)
Cx = konsentrasi kuersetin (mg/L) v = Volume esktrak
m = berat ekstrak
Fp = faktor pengencer
 Rumus :
C = Cx x v/m x FP

- Ekstrak Etanol Daun Kelapa Muda

199,05 = X x 0,05/0,05 x 5
X = 39,81 mg/L

263,66 = X x 0,05/0,05 x 5
X= 52,732 mg/L

Lampiran 3 Perhitungan uji total flavonoid fraksi ethanol Daun Pandan Tua

Kandungan Kandungan % Kadar

Waktu Absorbansi
Flavonoid Total Flavonoid Total Flavonoid
60 Menit 0,236 46,398 231,99
120 Menit 0,416 65,334 326,67 27,933%
Rata-rata 0,326 55,866 279,33

Diketahui :
persamaan regresi linier kuersetin :y = bx + a
y = 0.004 x + 0.0005
R2 = 0.9996

- Kandungan Flavonoid Total Awal (mg/L)

Diketahui :
V = 50 mL = 0.05 L
m = 50 mg = 0.05 g

Keterangan :
C = Total flavonoid (mgQE/g sampel esktrak)
Cx = konsentrasi kuersetin (mg/L) v = Volume esktrak
m = berat ekstrak
Fp = faktor pengencer

Rumus :
C = Cx x v/m x FP

- Ekstrak Etanol Daun Kelapa Muda

231,99 = X x 0,05/0,05 x 5
X = 46,398 mg/L

326,67 = X x 0,05/0,05 x 5
X= 65,334 mg/L
Lampiran 4 Perhitungan uji total flavonoid fraksi aseton Daun Pandan Muda

Kandungan Kandungan % Kadar

Waktu Absorbansi
Flavonoid Total Flavonoid Total Flavonoid
60 Menit 0,039 10,248 51,24
120 Menit 0,082 20,79 103,95 7,760%
Rata-rata 0,0605 15,519 77,595

Diketahui :
persamaan regresi linier kuersetin :y = bx + a
y = 0.004 x + 0.0005
R2 = 0.9996

- Kandungan Flavonoid Total Awal (mg/L)

Diketahui :
V = 50 mL = 0.05 L
m = 50 mg = 0.05 g

Keterangan :
C = Total flavonoid (mgQE/g sampel esktrak)
Cx = konsentrasi kuersetin (mg/L) v = Volume esktrak
m = berat ekstrak
Fp = faktor pengencer

Rumus :
C = Cx x v/m x FP

- Ekstrak Etanol Daun Kelapa Muda

51,24 = X x 0,05/0,05 x 5
X = 10,248 mg/L

103,95 = X x 0,05/0,05 x 5
X= 20,79 mg/L
Lampiran 5 Perhitungan uji total flavonoid fraksi aseton Daun Pandan Tua

Kandungan Kandungan % Kadar

Waktu Absorbansi
Flavonoid Total Flavonoid Total Flavonoid
60 Menit 0,107 18,392 91,96
120 Menit 0,292 34,212 171,06 13,151%
Rata-rata 0,1995 26,302 131,51

Diketahui :
persamaan regresi linier kuersetin :y = bx + a
y = 0.004 x + 0.0005
R2 = 0.9996

- Kandungan Flavonoid Total Awal (mg/L)

Diketahui :
V = 50 mL = 0.05 L
m = 50 mg = 0.05 g

Keterangan :
C = Total flavonoid (mgQE/g sampel esktrak)
Cx = konsentrasi kuersetin (mg/L) v = Volume esktrak
m = berat ekstrak
Fp = faktor pengencer

Rumus :
C = Cx x v/m x FP

- Ekstrak Etanol Daun Kelapa Muda

91,96 = X x 0,05/0,05 x 5
X = 18,392 mg/L

171,06 = X x 0,05/0,05 x 5
X= 34,212 mg/L

Lampiran 6 Perhitungan Pembuatan Larutan AlCl3 10%

AlCl3 2% dibuat dengan melarutan 0.5 gram AlCl3 dengan aquadest hingga volume 25 mL.

10/100 x 25 = 2.5 gram

Lampiran 7 Perhitungan Pembuatan Kalium Asetat 1 M

1M = x/ 1 Liter

X = 1 mol -> 0,12

mMg = M x BM x V
= 0,12 x 176,8 x 0,025
= 0,5304
Kalium asetat diambil sebanyak 0.5304 g dan dilarutkan pada labu ukur
25 mL menggunakan aquadest sampai tanda batas.
Lampiran 8 Dokumentasi Penelitian