Prosiding Farmasi http://dx.doi.org/10.29313/.v0i0.

28939

Kajian Pustaka Metode Uji Aktivitas Hipolipidemik secara In Vitro

Intan Prameswari & Fetri Lestari & Bertha Rusdi

Prodi Farmasi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Islam Bandung,
Bandung, Indonesia
email: intanprameswari24@gmail.com, fetrilestari@gmail.com, bertha.rusdi78@gmail.com

ABSTRACT: Hypercholesterolemia is one of the risk factors of various cardiovascular diseases. The high-risk factor needs treatment
interventions such as dietary and use of natural bioactive substances, aimed at reducing lipid levels (hypolipidemic activity). The
hypolipidemic activity is determined by in vitro test method. This literature study aims to determine the media, parameter, and
instrument used for in vitro test of hypolipidemic activity of plant extract. The method used is the systematic literature review, which
18 articles as data sources are obtained from national and international publisher. The articles used were published in the last 10
years. The results of study revealed that cells (3T3-L1 adipocytes, Caco-2, HepG2, and HuH7), cholesterol, and enzymes (cholesterol
esterase, pancreatic lipase, and HMG-CoA reductase) can be used for this test. In addition, several instruments used for in vitro test
are UV-Vis spectrophotometer, HPLC, GC-FID-MS, microplate reader, luminescence spectroscopy, and GC-MS. Furthermore, the
parameters of this test, namely LDL-C, HDL-C, TG, TC, % lipid accumulation, % cell inhibition, sterol concentration, increased
LDL-C uptake, turbidity (OD), % LDL concentration, reduction of total cholesterol levels, % anti-cholesterol activity, % inhibition of
enzymes and IC50.
Keywords: In Vitro, Media, Instruments

ABSTRAK: Hiperkolesterolemia merupakan salah satu faktor utama terjadinya penyakit kardiovaskuler. Karena tingginya faktor
resiko tersebut maka diperlukan pengobatan seperti diet dan zat bioaktif alami yang bisa menurunkan kadar lemak (hipolipidemik).
Untuk melihat dan memastikan aktivitas hipolipidemik ini maka diperlukan pengujian. Salah satu metode yang digunakan yaitu
metode in vitro. Kajian pustaka ini bertujuan untuk mengetahui media, parameter, dan instrumen yang digunakan. Metode yang
dilakukan pada penelitian ini adalah studi literatur dengan sumber data yang digunakan sebanyak 18 artikel, baik artikel nasional
maupun internasional dengan terbitan 10 tahun terakhir. Hasil kajian memperlihatkan tiga media yang dapat digunakan, yaitu sel
(adiposit 3T3-L1, Caco-2, HepG2, dah HuH7), kolesterol, dan enzim (kolesterol esterase, pankreas lipase, dan HMG-KoA
reduktase). Selain itu terdapat enam instrumen yang digunakan, yaitu spektrofotometer UV-Vis, HPLC, GC-FID-MS, microplate
reader, spektroskopi luminesensi, dan GC-MS. Selain media dan instrumen, terdapat beberapa parameter senyawa yang digunakan
yaitu, LDL-C, HDL-C, TG, TC, % akumulasi lipid, % penghambatan sel, konsentrasi sterol, peningkatan serapan LDL-C, kekeruhan
(OD), % konsentrasi LDL, penurunan kadar kolesterol total, % aktivitas anti kolesterol, % penghambatan enzim dan IC50.
Kata Kunci: In Vitro, Media, Instrumen

1 PENDAHULUAN lipoprotein (HDL) <40 mg/dL, dan 11,9%

Menurut American Heart Association
hiperlipidemia adalah suatu kondisi saat seseorang
memiliki kadar lemak yang tinggi dalam darah.
Hiperlipidemia menunjukkan suatu kondisi
kelebihan substansi lemak yaitu lipid, sebagian
besar kolesterol dan trigliserida dalam darah.
Hiperlipidemia dibagi menjadi dua subkategori
yaitu hiperkolesterolemia dan hipertrigliserida
(Harikumar et al., 2013).
Hiperkolesterolemia merupakan salah satu
akibat dari gaya hidup yang tidak sehat. Di
Indonesia sendiri menurut Riset Kesehatan Dasar
(RISKESDAS) pada tahun 2013, menyebut bahwa
35,9% penduduk usia ≥15 tahun memiliki kadar
kolesterol total diatas 200 mg/dL, 15,9% memiliki
kadar low density lipoprotein (LDL) diatas 160
mg/dL, 22,9% memiliki kadar high density
225
memiliki kadar trigliserida kategori tinggi-sangat
tinggi yaitu 200 mg/dL (Badan Penelitian dan
Pengembangan Kesehatan, 2013).
Hiperkolesterolemia adalah keadaan pada saat
seseorang memiliki kadar kolesterol plasma yang
tinggi (Guyton dan Hall, 2007). Tingginya kadar
kolesterol dalam plasma merupakan faktor utama
terjadinya penyakit kardiovaskular.
Berdasarkan data The World Health Organization
(WHO), diperkirakan sebanyak 17,9 juta orang di
tahun 2016 meninggal karena penyakit
kardiovaskuler (WHO, 2020).
Tingginya resiko yang diakibatkan oleh
hiperkolesterolemia menyebabkan diperlukannya
pengobatan anti hiperkolesterolemia. Salah satu
pengobatan anti hiperkolesterolemia yang
226 | Intan Prameswari, et al.
dilakukan yaitu menggunakan bahan alam. Untuk
mengetahui aktivitas bahan alam sebagai anti
hiperkolesterolemia maka diperlukan adanya
pengujian. Terdapat beberapa metode yang
digunakan untuk menguji aktivitas hipolipidemik
yaitu secara in-silico, in-vitro, dan in-vivo
(Dechakhamphu et al., 2015; Ramachandran et al.,
2013; Thirumalai et al., 2014).
Diantara kedua metode tersebut, pengujian
aktivitas hipolipidemik secara in vitro lebih sering
dilakukan karena waktu yang dibutuhkan untuk
pengujian relatif lebih singkat dan menunjukan
hasil yang lebih spesifik (Widowati et al., 2009).
Pengujian dengan metode in vitro dapat dilakukan
dengan menggunakan media sel, enzim, dan
kolesterol (Carrasco et al., 2015; Hetta et al.,
2017; Rahman et al., 2014). Selain itu dibutuhkan
metode analisis yang baik untuk melihat aktivitas
melihat aktivitas bahan alam sebagai agen
hipolipidemik.
Berdasarkan latar belakang di atas maka
didapatkan rumusan masalah yaitu, apa saja
media, parameter, dan instrumen yang digunakan
pada metode in vitro untuk pengujian aktivitas
hipolipidemik, serta apa saja kelebihan serta
kekurangan dari setiap media pada metode in vitro
yang digunakan untuk menguji aktivitas
hipolipidemik ekstrak tanaman.
Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui
media, parameter, dan instrumen yang digunakan
pada metode in vitro untuk pengujian aktivitas
hipolipidemik, serta kelebihan dan kekurangan
dari setiap media pada metode in vitro yang
digunakan untuk aktivitas hipolipidemik ekstrak
tanaman.
Manfaat dari penelitian ini diharapkan dapat
memberikan informasi ilmiah tentang media,
parameter, dan instrumen yang digunakan pada
metode in vitro untuk pengujian aktivitas
hipolipidemik, serta kelebihan dan kekurangan
dari setiap media pada metode in vitro yang
digunakan untuk menguji aktivitas hipolipidemik
ekstrak tanaman.
2 METODOLOGI
Metodologi penelitian yang digunakan pada
penelitian ini yaitu literature review. Penelitian ini
diawali dengan pencarian artikel ilmiah
terakreditasi terindeks (Scopus/Shinta) seperti
ScienceDirect, Google Scholar, serta Pubmed.
Volume 7, No. 2, Tahun 2021
Pada penelusuran digunakan kata kunci
diantaranya yaitu in vitro, hypolipidemic, dan
extract, kata kunci tersebut digunakan dengan cara
masing-masing kata atau kombinasinya. Artikel
yang dipilih adalah yang diterbitkan dalam kurun
waktu 2010–2020. Dalam penelitian ini jumlah
artikel yang dikumpulkan sebanyak 788.
Berikutnya, artikel yang telah didapat sesuai kata
kunci dipilah dengan melihat abstrak dan isi
artikel lengkap berdasarkan kriteria inklusi:
1. research journal
2. uji in vitro aktivitas hipolipidemik yang
menguji ekstrak dari tanaman,
3. artikel berbahasa inggris dan Indonesia dengan
tanggal publikasi terakhir dimulai dari tahun
2010 sampai tahun 2020 dalam bentuk full teks)
Setelah artikel-artikel diseleksi, maka akan
didapatkan artikel yang akan digunakan untuk
studi literatur. Setelah dilakukan kesesuaian
kriteria inklusi terhadap artikel, maka didapatkan
18 artikel yang sesuai dengan kriteria inklusi dan
akan diulas (direview). Selanjutnya dilakukan
pengambilan data dari artikel yang meliputi media
dan instrumen apa saja yang digunakan pada
pengujian aktivitas hipolipidemik secara in vitro,
serta kelebihan serta kekurangan dari setiap
media.Panjang maksimum pembahasan 15% dari
total kata artikel, menjelaskan tentang bahan atau
data yang digunakan serta penjelasan metode yang
dipilih, teknik dan cakupan metode penelitian jelas
dan lengkap.
3 PEMBAHASAN DAN DISKUSI
Metode In Vitro dengan Media Sel
Sel Adiposit 3T3-L1
Metode in vitro dengan menggunakan media sel
adiposit 3T3-L1 ini dapat menunjukan mekanisme
spesifik dari ekstrak yaitu dengan bekerja terhadap
sel adiposit (sel adiposa tempat menyimpan lipid).
Pada metode ini suhu dan kadar CO2 dikendalikan
dengan tujuan agar pertumbuhan sel sesuai dengan
yang diinginkan (Khumairoh, 2016). Kekurangan
metode in vitro dengan menggunakan media sel
adalah dapat terjadi adanya kontaminasi dari
mikroorganisme pada saat proses
penumbuhan/kultur sel (Khumairoh, 2016), sert
waktu pengujian yang dibutuhkan dengan
menggunakan media sel ini cukup lama yaitu 14-
15 hari (Chen et al., 2020).
Pada metode in vitro dengan menggunakan
ISSN: 2460-6472
 Kajian Pustaka Metode Uji Aktivitas Hipolipidemik secara In Vitro | 227
media sel adiposit 3T3-L1 terdapat beberapa
instrumen yang digunakan untuk mendapatkan
hasil dari pengujian. Terdapat 2 instrumen yang
digunakan, yaitu spektrofotometer UV-Vis dan
HPLC. Untuk pengukuran hasil uji aktivitas
hipolipidemik dengan media sel adiposit 3T3-L1
ini panjang gelombang yang digunakan pada
setiap artikelnya berbeda hal ini terjadi karena
parameter yang diukur berbeda. Spektrofotometer
UV-Vis dapat digunakan sebagai instrumen dalam
analisis uji aktivitas hipolipidemik ini karena
panjang gelombang yang dipakai pada artikel yang
diulas yaitu yaitu 492 nm dan 540 nm, dimana
spektrofotometer UV-Vis adalah instrumen yang
dapat mengukur serapan cahaya di daerah
ultraviolet (200-400 nm) dan sinar tampak (400-
750 nm) oleh suatu senyawa (Rohman, 2007).
Dari 5 artikel yang diulas instrumen yang paling
banyak digunakan yaitu spektrofotometer UV-Vis,
instrumen ini banyak digunakan karena lebih
efisien dari segi biaya dan waktu yang dibutuhkan
(Sabrina et al., 2012).
Instrumen kedua yaitu HPLC, dalam
pengukuran akumulasi lipid pada metode dengan
media sel adiposit 3T3-L1 ini hasil dari analisis
HPLC ditunjukan dalam bentuk % akumulasi
kolesterol (Carrasco et al., 2015). Penggunaan
instrumen HPLC ini menghasilkan analisis
kromatogram senyawa murni kolesterol sehingga
lebih akurat (Sabrina et al., 2012).
Sel Caco-2
Metode in vitro dengan menggunakan media sel
Caco-2 ini dapat menunjukan mekanisme spesifik
yaitu dengan bekerja melalui penghambatan
absorbsi kolesterol di kolon. Sama seperti sel
adiposit 3T3-L1 dalam metode in vitro dengan
menggunakan media sel ini dapat terjadi
kontaminasi mikroorganisme saat proses
penumbuhan/kultur sel (Khumairoh, 2016). Selain
itu waktu pengujian yang dibutuhkan dengan
media sel ini juga lama yaitu 22-23 hari (Gil-
Ramírez et al., 2014).
Pada metode in vitro dengan menggunakan
media sel Caco-2 instrumen yang digunakan
adalah GC-FID-MS. Penggunaan instrumen GC-
FID-MS ini memakan waktu analisis yang singkat
dan menunjukan hasil dengan ketajaman
pemisahan yang tinggi (Air Product, 2021). Dalam
pengukuran pada metode dengan media sel Caco2
ini hasil dari analisis dengan GC-FID-MS ini
ditunjukan dalam bentuk konsentrasi sterol (Gil-
Ramírez et al., 2014).
Sel HepG2
Metode in vitro dengan sel HepG2 ini dapat
menunjukan mekanisme spesifik dari ekstrak yaitu
dengan bekerja terhadap sel HepG2 (tempat
terjadinya sekresi apolipoprotein B). Pada metode
in vitro dengan media sel ini juga digunakan
komponen-komponen seperti suhu dan kadar CO2
dimana komponen tersebut digunakan untuk
pertumbuhan dari sel dan dapat dimanipulasi
(Khumairoh, 2016). Selain itu waktu yang
pengujian yang dibutuhkan dengan menggunakan
media sel ini cukup lama yaitu 4-6 hari (Hui et al.,
2020).
Pada metode in vitro dengan menggunakan
media sel HepG2 terdapat beberapa instrumen
yang digunakan untuk mendapatkan hasil dari
pengujian. Terdapat 2 instrumen yang digunakan,
yaitu microplate reader dan spektroskopi
luminesensi. Microplate reader dapat digunakan
sebagai instrumen dalam analisis uji aktivitas
hipolipidemik ini karena panjang gelombang yang
dipakai pada artikel yang diulas yaitu 358 nm, 490
nm, dan 515 nm, dimana beberapa microplate
reader dapat mengukur serapan cahaya di daerah
dengan panjang gelombang 340-700 nm. Dari 3
artikel yang diulas instrumen yang paling banyak
digunakan dalam metode dengan media sel HepG2
yaitu microplate reader, instrumen ini lebih
banyak digunakan karena hasil yang didapatkan
memiliki tingkat sensitivitas yang cukup tinggi
(Rantam, 2003).
Instrumen kedua yaitu spektrofotometri
fluoresensi, dimana spektrofotometri fluoresensi
memiliki yaitu suatu instrumen yang
menggunakan intensitas cahaya fluoresensi yang
dipancarkan oleh kolesterol dibandingkan dengan
suatu baku tertentu. Dalam pengukuran pada
metode dengan media sel HepG2 ini hasil dari
analisis dengan spektrofotometri fluoresensi ini
ditunjukan dalam bentuk % konsentrasi LDL
(Tenore et al., 2013). Instrumen spektrofotometri
fluoresensi ini memiliki sensitivitas yang tinggi
(Rohman, 2007).
Sel HuH7
Metode in vitro dengan menggunakan sel HuH7
ini dapat menunjukan mekanisme spesifik dari
ekstrak sebagai anti kolesterol yaitu dengan
bekerja terhadap sel HuH7. Pada metode dengan
media sel ini digunakan komponen-komponen
seperti suhu dan kadar CO2 dimana komponen
Farmasi
228 | Intan Prameswari, et al.
tersebut digunakan untuk pertumbuhan dari sel Pada metode in vitro dengan menggunakan
dan dapat dimanipulasi (Khumairoh, 2016). Selain media sel HuH7 instrumen yang digunakan adalah
itu waktu pengujian yang dibutuhkan dengan GC-MS. Dalam pengukuran pada metode dengan
menggunakan media sel ini cukup lama yaitu 5-6 media sel HuH7 ini hasil dari analisis dengan GC-
hari (Sommella et al., 2019). MS ditunjukan dalam bentuk penurunan kadar.
Tabel 1. Resume artikel kajian pustaka metode uji aktivitas hipolipidemik secara in vitro
Waktu
No Referensi Metode Media Instrumen Parameter Hasil
Pengamatan

LDL-C = 0,225 mmol/L

Spektrofotometer UV- LDL-C, HDL-C, TG, dan HDL-C = 0,250 mmol/L
1 Chen et al., 2020
Vis TC TG = 0,350 mmol/L
TC = 0,350 mmol/L

12,8 μM = 70%
Muramatsu et Spektrofotometer UV- 25,5 μM = 80%
2 % akumulasi lipid
al., 2020 Vis 51,3 μM = 48%
102,5 μM = 10%

In vitro Sel adiposit 3T3-L1 14-15 hari

50 μg/mL = 16,02% 100
Rathore et al., Spektrofotometer UV-
3 % penghambatan sel μg/mL = 25,02%
2014 Vis
200 μg/mL = 30,03%

50 μg/mL = 15,34% 100

Kumar et al., Spektrofotometer UV-
4 % penghambatan sel μg/mL = 24,01% 200 μg/mL
2016 Vis
= 29,18%

400 μg/mL = 73,548%

Carrasco et al.,
5 HPLC % akumulasi lipid 500 μg/mL = 68,521%
2015
600 μg/mL = 60,729%

Gil-Ramírez et kolesterol = 29,83 μg/mL

6 Sel Caco2 22-23 hari GC-FID-MS Konsentrasi sterol
al., 2014 ergosterol = 3,37 μg/mL

Peningkatan serapan MCL = 1,11 x lipat

7 Hui et al., 2020 Microplate reader
LDL-C CG = 1,37 x lipat

senyawa 1 = 0,2165 ±
0,0038
senyawa 3 = 0,2653 ±
0,0023
8 Wei et al., 2019 Microplate reader Kekeruhan (OD)
senyawa 7 = 0,2012 ±
Sel HepG2 4-6 hari 0,0074
 senyawa 9 = 0,1997 ±
0,0054

Kontrol = 100%
Tenore et al., Spektrofotometer teh putih = 60%
9 % konsentrasi LDL
2013 luminesensi teh hijau = 80%
teh hitam = 100%

 Atorvatatin = 0,55 ± 0,09

Sommella et al., Penurunan kadar
10 Sel HuH7 5-6 hari GC-MS Simvastatin = 0,52 ± 0,06
2019 kolesterol total
AAE = 0,48± 0,05

% aktivitas anti sinvastatin = 94%

11 Microplate reader
kolesterol ekstrak P. perlata = 48%

Rahman et al.,
Kolesterol 2-3 hari
2014
sinvastatin = 94%
% aktivitas anti
12 Microplate reader ekstrak P. rubra = 60%
kolesterol
ekstrak P. alba = 52%

Volume 7, No. 2, Tahun 2021 ISSN: 2460-6472

 Kajian Pustaka Metode Uji Aktivitas Hipolipidemik secara In Vitro | 229

Waktu
No Referensi Metode Media Instrumen Parameter Hasil
Pengamatan

100 μg/mL = 40%

Zhang et al., Enzim Kolesterol Spektrofotometer % penghambatan 200 μg/mL = 50%
13 2-3 hari
2020 esterase UV-Vis enzim KE 300 μg/mL = 60%
400 μg/mL = 65%

Inagaki et al., Spektrofotometer % penghambatan 6,67 mg/mL = 40%

14
2016 UV-Vis enzim PL 13,3 mg/mL = 60%
Enzim pankreas
2-3 hari
lipase
Supkamonsen IC50 ekstrak C. asiatica =
15 Microplate reader IC50 ( μg/mL)
i et al., 2014 759,14±3,63

ekstrak akar = 78,19%

% penghambatan
Hetta et al., Spektrofotometer ekstrak bunga =
16 enzim HMG-
2017 UV-Vis 72,68%
KoA reduktase
 fenofibrat = 90,75%

Ekstrak n-Heksana =
22.27%
Ekstrak diklorometana =
In vitro 64.78%
% penghambatan Ekstrak etil asetat =
Hafidz et al.,
17 Microplate reader enzim HMG- 57.86%
2017
KoA reduktase Ekstrak metanol =
41.85% Ekstrak air =
25.64 %
Trans-resveratrol =
Enzim HMG-KoA 94.61%
2-3 hari
reduktase

Fluvastatin = 90.58%
ekstrak Dictyopteris
membranacea = 70.00%
ekstrak Padina
pavonia = 19.97%
ekstrak Kolpomenia
% penghambatan sinuosa = 80.02%
Matloub et Spektrofotometer
18 enzim HMG- ekstrak Enteromorpha
al., 2015 UV-Vis
KoA reduktase intestinalis = 79,96%
ekstrak Corallina
officinalis = 10.02%
ekstrak Pterocladia
capillaceae = 59,98%
ekstrak Jania rubens =
80.02%

Keterangan:
CG: catechin gallate KE: kolesterol esterase

GC-FID-MS: gas chromatography-flame ionization detector-mass spectroscopy LDL-C: cholesterol LDL

GC-MS: gas chromatography and mass spectroscopy MCL: Morinda citrifolia leaf

HDL-C: cholesterol HDL OD: optical density

Farmasi
230 | Intan Prameswari, et al.
HPLC : high performance liquid chromatography
IC50: inhibition concentration 50%
kolesterol total (Sommella et al., 2019).
Penggunaan instrumen GC-MS ini memakan
waktu analisis yang singkat, menunjukan hasil
dengan sensitivitas tinggi, dan spesifik (Balai
Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan Umbi,
2021).
Metode in vitro dengan menggunakan media
kolesterol
Berbeda dengan metode in vitro menggunakan
media sel dan enzim, metode dengan media
kolesterol tidak dapat menunjukan mekanisme
spesifik dari ekstrak. Hal ini terjadi karena di
dalam metode kolesterol tidak terjadi metabolisme
seperti pada sel. Dengan metode ini waktu
pengujian yang dibutuhkan relatif singkat yaitu 2-
3 hari (Rahman et al., 2014).
Pada metode in vitro dengan menggunakan
media kolesterol instrumen yang digunakan adalah
microplate reader. Microplate reader digunakan
sebagai instrumen dalam analisis uji aktivitas
hipolipidemik dengan media kolesterol ini karena
panjang gelombang yang dipakai pada artikel yang
diulas yaitu 500 nm, dimana microplate reader
mengukur serapan cahaya di daerah dengan
panjang gelombang 400-750 nm. Dalam
pengukuran pada metode dengan media kolesterol
ini hasil dari analisis dengan microplate reader
ditunjukan dalam bentuk % aktivitas anti
kolesterol (Rahman et al., 2014). Instrumen ini
digunakan karena hasil yang didapatkan memiliki
tingkat sensitivitas yang cukup tinggi (Rantam,
2003).
Metode in vitro menggunakan media enzim
Enzim kolesterol esterase
Metode in vitro dengan media enzim kolesterol
esterase ini dapat menunjukan mekanisme spesifik
dari ekstrak yaitu bekerja dengan menghambat
enzim kolesterol esterase. Waktu pengujian yang
dibutuhkan metode in vitro dengan media enzim
ini relatif singkat (2-3 hari) (Zhang et al., 2020).
Pada metode in vitro dengan menggunakan
media enzim kolesterol esterase instrumen yang
digunakan adalah spektrofotometer UV-Vis.
Spektrofotometer UV-Vis digunakan sebagai
instrumen dalam analisis uji aktivitas
hipolipidemik ini karena panjang gelombang yang
dipakai pada artikel yang diulas yaitu 405 nm,
Volume 7, No. 2, Tahun 2021
PL: pankreas lipase
TC: cholesterol total
TG: trigliserida
dimana spektrofotometer UV-Vis adalah
instrumen yang dapat mengukur serapan cahaya di
daerah ultraviolet (200-400 nm) dan sinar tampak
(400-750 nm) oleh suatu senyawa (Rohman,
2007). Dalam pengukuran pada metode dengan
media enzim kolesterol esterase ini hasil dari
analisis dengan spektrofotometer UV-Vis
ditunjukan dalam bentuk % penghambatan enzim
kolesterol esterase (Zhang et al., 2020). Instrumen
ini digunakan karena lebih efisien dari segi biaya
dan waktu yang dibutuhkan (Sabrina et al., 2012).
Enzim pankreas lipase
Metode in vitro dengan media enzim pankreas
lipase ini dapat menunjukan mekanisme spesifik
dari ekstrak yaitu bekerja dengan menghambat
enzim pankreas lipase. Waktu pengujian yang
dibutuhkan metode dengan media enzim ini relatif
singkat (2-3 hari) (Inagaki et al., 2016;
Supkamonseni et al., 2014).
Pada metode in vitro dengan menggunakan
media enzim pankreas lipase terdapat beberapa
instrumen yang digunakan untuk mendapatkan
hasil dari pengujian. Terdapat 2 instrumen yang
digunakan, yaitu spektrofotometer UV-Vis dan
microplate reader. Spektrofotometer UV-Vis
digunakan sebagai instrumen dalam analisis uji
aktivitas hipolipidemik ini karena panjang
gelombang yang dipakai pada artikel yang diulas
yaitu 405 nm, dimana spektrofotometer UV-Vis
adalah instrumen yang dapat mengukur serapan
cahaya di daerah ultraviolet (200-400 nm) dan
sinar tampak (400-750 nm) oleh suatu senyawa
(Rohman, 2007). Dalam pengukuran pada metode
dengan media enzim pankreas lipase ini hasil dari
analisis dengan spektrofotometer UV-Vis
ditunjukan dalam bentuk % penghambatan enzim
pankreas lipase (Inagaki et al., 2016). Instrumen
ini digunakan karena lebih efisien dari segi biaya
dan waktu yang dibutuhkan (Sabrina et al., 2012).
Instrumen kedua yaitu microplate reader,
instrumen ini digunakan sebagai instrumen dalam
analisis uji aktivitas hipolipidemik dengan media
enzim pankreas lipase ini karena panjang
gelombang yang dipakai pada artikel yang diulas
yaitu 405 nm, dimana microplate reader
mengukur serapan cahaya di daerah dengan
panjang gelombang 400-750 nm. Dalam
ISSN: 2460-6472
 Kajian Pustaka Metode Uji Aktivitas Hipolipidemik secara In Vitro | 231
pengukuran pada metode dengan media enzim
pankreas lipase ini hasil dari analisis dengan
microplate reader ditunjukan dalam bentuk IC50
(Rahman et al., 2014). Instrumen ini digunakan
karena hasil yang didapatkan memiliki tingkat
sensitivitas yang cukup tinggi (Rantam, 2003).
Enzim HMG-CoA reduktase
Metode in vitro dengan media enzim ini dapat
menunjukan mekanisme spesifik dari ekstrak
sebagai anti kolesterol yaitu bekerja dengan
menghambat enzim HMG-CoA reduktase. Waktu
pengujian yang dibutuhkan metode dengan media
enzim ini relatif singkat (2-3 hari) (Hetta et al.,
2017; Hafidz et al., 2017; Matloub et al., 2015).
Pada metode in vitro dengan menggunakan
media enzim HMG-KoA reduktase terdapat
beberapa instrumen yang digunakan untuk
mendapatkan hasil dari pengujian. Terdapat 2
instrumen yang digunakan, yaitu spektrofotometer
UV-Vis dan microplate reader. Dalam
pengukuran pada metode dengan media enzim
HMG-KoA reduktase ini hasil dari analisis dengan
spektrofotometer UV-Vis ditunjukan dalam
bentuk % penghambatan enzim HMG-KoA
reduktase (Hetta et al., 2017; Matloub et al.,
2015). Instrumen ini digunakan karena lebih
efisien dari segi biaya dan waktu yang dibutuhkan
(Sabrina et al., 2012).
Instrumen kedua yaitu microplate reader,
dalam pengukuran pada metode dengan media
enzim HMG-KoA reduktase ini hasil dari analisis
dengan microplate reader ditunjukan dalam
bentuk % penghambatan enzim HMG-KoA
reduktase (Hafidz et al., 2017). Instrumen ini
digunakan karena hasil yang didapatkan memiliki
tingkat sensitivitas yang cukup tinggi (Rantam,
2003).
4 KESIMPULAN
Metode in vitro uji aktivitas hipolipidemik
dilakukan dengan menggunakan tiga media, yaitu
media sel (adiposit 3T3-L1, Caco-2, HepG2, dan
HuH7), kolesterol, dan enzim (kolesterol esterase,
pankreas lipase, dan HMG-CoA reduktase). Dari
ketiga media tersebut terdapat beberapa instrumen
yang dapat digunakan untuk menganalisis hasil
dari uji aktivitas hipolipidemik ini, yaitu
spektrofotometer UV-Vis, HPLC, GC-FID-MS,
microplate reader, spektroskopi luminesensi, dan
GC-MS. Selain media dan instrumen, terdapat
beberapa parameter-parameter yang digunakan
yaitu untuk media sel LDL-C, HDL-C, TG, TC, %
akumulasi lipid, % penghambatan sel, konsentrasi
sterol, peningkatan serapan LDL-C, kekeruhan
(OD), % konsentrasi LDL, dan penurunan kadar
kolesterol total. Untuk media kolesterol
parameternya adalah % aktivitas anti kolesterol,
dan untuk media enzim parameter yang dipakai
yaitu % penghambatan enzim dan IC50.
Kemudian masing-masing media memiliki
kelebihan dan kekurangan. Kelebihan media sel
yaitu menunjukan hasil yang didapat lebih spesifik
dan dapat dilakukannya manipulasi fisikokimia
(seperti suhu dan kadar CO2). Kemudian
kelebihan media kolesterol yaitu waktu yang
dibutuhkan singkat, untuk kelebihan media enzim
yaitu menunjukan hasil yang didapat lebih
spesifik, serta waktu yang dibutuhkan lebih
singkat.
Selain itu terdapat kekurangan media sel yaitu
kesalahan identifikasi cell line, adanya
kontaminasi dari mikroorganisme, ketidakstabilan
genotip serta fenotip dari sel, dan waktu yang
dibutuhkan lama. Lalu kekurangan media
kolesterol yaitu hasil yang muncul tidak spesifik
(tidak menunjukan salah satu metabolisme dari
ekstrak). Selanjutnya kekurangan metode enzim
yaitu biaya yang dibutuhkan besar.
ACKNOWLEDGE
Penulis mengucapkan terimakasih kepada Ibu
apt. Fetri Lestari, M.Si. dan Ibu apt. Bertha Rusdi,
Ph.D. sebagai dosen pembimbing yang telah
memberikan bimbingan serta saran kepada penulis
selama waktu penyusunan dan penulisan artikel
ini. Penulis juga mengucapkan terimakasih kepada
teman-teman dan pihak yang membantu dan
mendukung dalam proses penulisan.
DAFTAR PUSTAKA
Air Product. (2021). Aplikasi Laboratorium
Analitis, GC dengan Flame Ionization
Detector (GC-FID). (GC dengan Flame
Ionization Detector (GC-FID)
(airproducts.co.id)), diunduh Juli 2021.
Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan.
(2013). Riset Kesehatan Dasar
(RISKESDAS), Departemen Kesehatan
Republik Indonesia, Jakarta.
Balai Penelitian Tanaman Aneka Kacang dan
Umbi. (2021). GC MS Terpasang,
Farmasi
232 | Intan Prameswari, et al.
Penelitian Harus Lebih Maju. (GCMS Kumar et al. (2016). Biological Evaluation of
Terpasang, Penelitian harus Lebih Maju – Pupalia lappacea for Antidiabetic,
Balitkabi (pertanian.go.id)), diunduh pada Antiadipogenic, and Hypolipidemic
Juli 2021. Activity Both In Vitro and In Vivo.
Carrasco, et al. (2015). In vitro Hypolipidemic and Scientifica, 1-10.
Antioxidant Effects of Leaf and Root Khumairoh et al. (2016). Kultur sel. Farmaka
Extracts of Taraxacum Officinale. Medical (Suplemen), Vol. 14, No. 2. Matloub et al.
science 2015, Vol. 3: 38-54. (2015). In vitro Antiviral, Cytotoxic,
Chen et al. (2020). Hypoglycemic and Antioxidant and Hypolipidemic Activites of
Hypolipidemic Effects of Moringa oleifera Polysaccharide Isolated From Marine
Leaves And Their Functional Chemical Algae. International Journal of
Constituents. Journal Pre-proofs (Food Pharmacognosy and Phytochemical
Chemistry), 1-29. Research, Vol. 5, No. 7: 1099-1111.
Matloub et al. (2015). In vitro Antiviral, Cytotoxic,
Dechakhamphu, et al. (2015). Screening for Anti- Antioxidant and Hypolipidemic Activites of
pancreatic Lipase Properties of 28 Polysaccharide Isolated From Marine
Taditional Thai Medicinal Herbs. Asian Algae. International Journal of
Pacific Journal of Tropical Biomedicine, Pharmacognosy and Phytochemical
No. 5, Vol. 12: 1042-145. Research, Vol. 5, No. 7: 1099-1111.
Gil-Ramírez et al. (2014). Effect of Ergosterol- Muramatsu et al. (2020). In Vitro Anti-
Enriched Extracts Obtained from Agaricus Inflammatory and Anti-Lipid Accumulation
bisporus on Cholesterol Absorption Using Properties of Taxifolin-Rich Extract from
an In Vitro Digestion Model. Journal of The Japanese Larch, Larix kaempferi.
Functional Foods, No. 11: 589-594. Heliyon, No. 6: 1-11.
Guyton; Hall. (2007). Buku Ajar Fisiologi Perkumpulan Endokrinologi Indonesia. (2019).
Kedokteran, Edisi 9, EGC, Jakarta. Pedoman Pengelolaan Dislipidemia Di
Hafidz et al. (2017). HMG-CoA Reductase Indonesia 2019, PB Perkeni, Indonesia.
Inhibitory Activity of Gnetum gnemon Seed Rahman et al. (2014). In Vitro Studies on
Extract and Identification of Potential Antioxidant, Hypolipidemic and Cytotoxic
Inhibitors for Lowering Cholesterol Level. Potential of Parmelia perlata. American
J Young Pharm, Vol. 4, No. 9: 559-565. Journal of Life Sciences, Vol. 6-1, No. 2: 7-
Harikumar et al. (2013). A Review on 10.
Hyperlipidemic. International Journal Of Rahman et al. (2014). Antioxidant, Cytotoxic and
Novel Trends In Pharmaceutical Sciences. Hypolipidemic Activities of Plumeria alba
Hartono A. (2006). Terapi Gizi dan Diet Rumah L. and Plumeria rubra L. American Journal
Sakit. Jakarta, Penerbit Buku Kedokteran of Life Sciences, Vol. 4, No. 2: 11-15.
EGC. Ramachandran et al. (2013). Antidiabetic and
Hetta et al. (2017). In-vitro and In-vivo Antihyperlipidemic Activity of Asiatic Acid
Hypolipidemic Activity of Spinach Roots in Diabetic Rats, Role of HMG CoA: In
and Flowers. Iranian Journal of Vivo and In Silico Approaches.
Pharmaceutical Research, Vol. 4, No. 16: Phytomedicine, 1-9.
1509-1519. Rantam. (2003). Methods Immunology. Surabaya,
Hui et al. (2020). Catechin Profile and Airlangga University Press.
Hypolipidemic Activity of Morinda Rathore et al. (2014). In-Vitro and In-Vivo
citrifolia Leaf Water Extract. Heliyon, No. Antiadipogenic, Hypolipidemic and
6: 1-8. Antidiabetic Activity of Diospyros
Inagaki et al. (2016). Hypolipidemic Effect of The melanoxylon (Roxb). Journal of
Autoclaved Extract Prepared from Pea Ethnopharmacology, No. 155: 1171-1176.
(Pisum sativum L.) Pods In Vivo and In Rohman A. (2007). Kimia Farmasi Analisis.
Vitro. Journal Nutr Sci Vitaminol, No. 62: Yogyakarta: Pustaka Pelajar.
322-329. Sabrina et al. (2012). Perbandingan Metode
Volume 7, No. 2, Tahun 2021 ISSN: 2460-6472
 Kajian Pustaka Metode Uji Aktivitas Hipolipidemik secara In Vitro | 233
Spektrofotometri UV-Vis dan KCKT
(Kromatografi Cair Kinerja Tinggi) pada
Analisis Kadar Asam Benzoate dan Kafein
dalam Teh Kemasan. Jurnal Kimia
Universitas Negeri Malang, Vol. 2, No.
2:1-12.
Nuraeni Anisa Dwi, Lukmayani Yani, Kodir Reza
Abdul. (2021). Uji Aktivitas Antibakteri
Propionibacterium acnes Ekstrak Etanol
dan Fraksi Daun Karuk (Piper sarmetosum
Roxb. Ex. Hunter) serta Analisis KLT
Bioautografi. Jurnal Riset Farmasi, 1(1), 9-
15.

Farmasi