ANTIBODI MONOKLONAL

OBAT ANTIKANKER
PAYUDARA

KELOMPOK 3 :
Nur Annisa
(10060313085)
Hermawan
(10060313087)
Deistyani Indrianti
(10060313090)
Bella Rukmana
(10060313115)
Hilman Maulana
(10060313117)
Antibodi

Antibodi, dikenal juga

sebagaiimunoglobulin, protein
besar berbentuk Y
yangdigunakanoleh
sistemkekebalan tubuh untuk
mengidentifikasidan
menetralisirzat asingsepertivirus,
bakteri,fungus, dll yang seharusnya
tidak ada dalam tubuh.
 Antibodi Monoklonal
Definisi
Antibodi Monoklonal adalah Antibodi
antibodi monospesifik yang Monoklonal
hanya mengikat satu epitop
saja, epitop merupakan
komponen penting dari
imunitas tubuh. Antibodi Antibodi Antibodi
monoklonal dapat mengenali Monoklona Monoklonal
dan mengikat antigen yang lMurni Kombinasi
spesifik.
 Antibodi Monoklonal Murni
Antibodi monoklonal
Murni adalah antibodi
yang penggunaanya
tanpa dikombinasikan
dengan obat lain atau
material radioaktif.
Antibodi ini akan
mengikatkan pada
antigen spesifik yang
dimiliki sel-sel kanker
dengan berbagai cara.
Contoh : trastuzumab,
Antibodi Monoklonal Kombinasi
Jenis antibodi ini
dikombinasikan dengan
berbagai jenis obat,
toksin dan materi-materi
radioaktif. Obat ini
hanya berperan sebagai
pengantar molekul
obat langsung menuju
sel kanker. Pada 2002,
FDA menyetujui
radiolabeled untuk
terapi kanker yakni
Ibritumomab tiuxetan
Pembuatan Antibodi monoklonal
Imunisasi tikus :
Pengembangan sel
hybridoma.
Penyaringan produksi
antibodi tikus.
Persiapan sel myeloma.
Fusi sel myeloma + sel
imun limfa.
Pengembangan kloning
sel hybridoma.
Antibodi Monoklonal inhibitor HER2-
2/neu
HER2/neu (c-erbB-2) adalah sebuah onkogen yang bekerja
mengenkode glikoprotein transmembran melalui aktivitas
tirosin kinase yaitu p185. Melalui pemeriksaan
imunohistokimia, FISH (flourencence In Situ Hybridization)
dan CISH (Chromogenic In Situ Hybridization) dapat
mengetahui ekspresi HER2/neu. Banyaknya onkogen
HER2/neu yang telah mengalami amplifikasi pada sel-sel
payudara menandakan prognosis yang buruk.
Reseptor HER2
Reseptor HER2 mampu untuk
membentuk heterodimer. Bentuk
heterodimer tersebut merupakan
hasil dari kombinasi antara reseptor
HER2 dengan berbagai reseptor lain
dalam family HER, sehingga
membentuk kompleks reseptor
heterodimer dan mengirimkan sinyal
Growth Factor yang akan melewati
membrane sel menuju bagian
intraseluler dari nucleus, sehingga
mengaktifkan gen HER2(Brennan
PJet al.,2000).
 Transtuzumab
Kerja Trastuzumab meliputi 3 hal, yaitu menghambat transmisi sinyal
growth factor menuju nukleus, keberadaan Transtuzumab menginduksi
sel imun untuk segera melakukan apoptosis pada sel kanker, dan
memaksimalkan pengobatan secara kemoterapi (Nahtaet al.,2003).
Trastuzumab dapat berikatan dengan HER2 protein pada bagian
ekstraseluler yang mengakibatkan HER2 protein menjadi inaktif
sehingga pertumbuhan tidak terkontrol dari sel payudara terhenti.
Trastuzumab bekerja dengan cara mengurangi sinyal yang dimediasi
HER2 melalui PI3K (phosphatidylinositol 3-kinase) dan MAPK (mitogen-
activated protein kinase) (Kuteet al.,2004).
 Trastuzumab juga memiliki kemampuan
untuk menginduksi respon imun melalui
mekanisme antibody-dependent cellular
cytotoxicity (ADCC). Mekanisme ini dapat
menyebabkan peristiwa apoptosis sel kanker.
Keunggulan mekanisme seperti inilah yang
diharapkan terjadi, karena selama ini obat
kanker yang ada, menstimulasi apoptosis
tidak hanya pada sel yang terkena kanker
namun juga sel normal. (Clyneset al., 2000 ).
 Ertumaxomab
Ertumaxomab merupakan obat yang secara teori sangat
aktif karena merupakan obat yang bersifat trifungsional
dan merupakan antibodi bispesifik. Obat ini dapat
berikatan dengan HER-2/neu dan CD3 sehingga akan
membentuk kompleks dari 3 sel diantaranya adalah sel
tumor, sel T dan sel dendritik yang dapat merangsang
respon imun yang kuat sehingga mengakibatkan adanya
peningkatan aktivitas anti tumor.
 Penentuan sel
kuantitatif
antigen
Antobodi, sel permukaan sel
efektor dan sel HER2/neu
Fish Analisis
target

Analisis
Pengukuran persaingan
sitokin Metode pengikatan sel
fluoresensi
teraktivasi

Analisis
sitoksisitas
Uji Sitoksisitas
sitokin
terstimulasi
 Hasil
Kuantifikasi HER2 ekspresi / neu pada sel target. Tujuannya Untukmengevaluasi pengaruh tingkat ekspresi / neu HER2
pada ertumaxomab- dan trastuzumab-dimediasi sitotoksisitas, membandingkan keefektifan antara ertumaxomab dengan
trastuzumab dalam menghambat sel kanker yang berasal dari karsinoma yang berbeda yaitu (SK-BR-3 / payudara, BT20 /
payudara, HCT-8 / usus, dan SK-LU-1 / paru). garis sel target HCT-8, BT-20, dan SK-LU-1 menunjukkan rendahnya tingkat
HER2 / neu ekspresi (1 +), sedangkan SK-BR-3 sel mencetak 3+ untuk HER2 / neu, dalam perjanjian dengan klasifikasi
DAKO HercepTest.
Sitotoksisitas ertumaxomab dan trastuzumab terhadap sel tumor dengan profil ekspresi / neu HER2 tinggi. Trastuzumab
terbukti dapat menyebabkan kematian sel tumor di HER2 / neu baris sel-overexpressing seperti SK-BR-3 (17, 18), sehingga
dilakukan perbandingan kemampuan antara ertumaxomab dengan trastuzomab untuk menghambat pertumbuhan SK-BR-3
di efektor (PBMC) menargetkan rasio (E / T) 20: 1 dan 5: 1. konsentrasi trastuzumab yang digunakan yaitu (5,000-0.001 ng /
mL) dan ertumaxomab (100-0,001 ng / mL)yang kemudian ditambahkan ke sampel sel alogenik.
Hasilnya SK-BR-3 benar-benar segaris dengan baik ertumaxomab dan trastuzumab dirasio E / T dari 20: 1. Namun, pada
suboptimal E / kondisi T (5: 1), daya bunuh trastuzumab ketika diinduksikan sel SK-BR-3 menolak bahkan dengan dosis
tinggi seklaipun yaitu 5,000-0.001 ng / mL sedangkan pada ertumaxomab menunjukkan daya bunuh yang maksimal dengan
konsentrasi serendah 25 ng/ml. Hasil ini menunjukkan kemampuan superior dari ertumaxomab untuk melisiskan sel yang
mengekspresikan tingkat tinggi HER2 / neu. Sehingga untuk membunuh SK-BR-3 lebih efektif dari ertomaxomab .
bahkan pada jumlah sel efektor rendah, menyebabkan hipotesis bahwa ertumaxomab mungkin juga dapat menghilangkan
sel-sel tumor yang mengekspresikan HER2 / neu pada tingkat (1 +) yang rendah.
 Menariknya, potensi sitotoksik antitumor dari
ertumaxomab tetap sebanding dalam percobaan ini,
bahkan pada E tidak menguntungkan / rasio T dari 7: 1
Sitokin disebabkan oleh ertumaxomab di hadapan sel
target HCT8 dan PBMC Karena kedua sel CD3 + sel T dan
aksesori yang diarahkan oleh ertumaxomab ke sel target,
jenis interaksi kekebalan sel tubuh ini dapat dinilai
dengan mendeteksi sitokin yang relevan disekresi ke
dalam supernatan dari media pertumbuhan sel masing-
masing. Dosis ertumaxomab mulai dari 1 sampai 100 ng /
mL mampu merangsang sitokin dengan proinflamasi
tingkat tinggi [yaitu, IL-6; IFN-g; TNF-a (data tidak
ditampilkan)] setelah24 jam waktu inkubasi.
 Penjelasan grafik
Dari catatan, di hadapan sel aksesori, sel T, dan sel-sel tumor, ertumaxomab juga
disebabkan produksi IL-2 (Gambar. 4C). Sebuah respon Th1 yang kuat disarankan oleh
tinggi IFN-g dan IL-2 tingkat yang hadir dalam sampel diobati dengan ertumaxomab.
Selanjutnya, IL-6 sekresi meningkat, menunjukkan respon proinflamasi dengan
kontribusi dari sel aksesori (19). Sebaliknya, trastuzumab hanya dirangsang IL-
6secretion, dan pada tingkat signifikan lebih rendah (Gambar. 4 Hasil kami
menunjukkan bahwa pelepasan sitokin proinflamasi dan IL-2, yang dirangsang oleh
ertumaxomab, mencerminkan keterlibatan kedua FCG reseptor + aksesori sel imun dan
CD3 + T-sel. trastuzumab kurang jelas IL-6secretion yang diinduksi mungkin
ditimbulkan oleh ikatan FcgR pada sel aksesori saja.
Ketergantungan lisis ertumaxomab-dimediasi pada HER2 / neu mengikat. untuk
menjawab pertanyaan tentang apakah efek sitotoksik diprovokasi dari ertumaxomab
pada HCT-8 sel target tergantung pada ekspresi antigen / neu HER2, kami memulai
menghalangi percobaan dengan antibodi HER2 / neu. Kami preinkubasi sampel
sitotoksisitas dengan jumlah kelebihan anti-HER2 / neu 2502A antibodi. Dalam tiga
percobaan dengan sel efektor dari donor yang berbeda, kami mengamati penurunan
yang signifikan pembunuhan sel tumor pada konsentrasi 2502A dapat memblok antara
200 dan 2.000 ng / mL (Gambar. 4D). Hasil ini menunjukkan bahwa ertumaxomab
mengikat langsung HER2 / neu dalam penghancuran sel target. Penghambatan
ertumaxomab mengikat HER2 / neu oleh antibody520C9.
Untuk menentukan anti-HER2 / neu mengikat wilayah ertumaxomab, analisis mengikat
kompetitif trastuzumab dengan mAb 520C9 dilakukan pada SK-BR-3 sel. MAb 520C9
 situs pengikatan HER2 / neu mAb 520C9 sebelumnya dipetakan ke domain ekstraselular
HER2 / neu (posisi asam amino 243-370), yang meliputi bagian dari subdomain II dan III
(20). Situs 520C9 ini berbeda dari situs pengikatan trastuzumab, yang terletak di
wilayah IV (21). Kami menyimpulkan bahwa trastuzumab dan ertumaxomab memiliki
epitop mengikat berbeda pada HER2 / neu, yang tidak saling mengganggu. Setelah
menunjukkan bahwa ertumaxomab dan trastuzumab mengenali epitop HER2 / neu yang
berbeda (Gambar. 5A), kita lanjut ditanya apakah ertumaxomab mampu menginduksi
pembunuhan sel target yang mengekspresikan rendahnya tingkat HER2 / neu (misalnya,
HCT-8) di hadapan trastuzumab. Kedua antibodi, ertumaxomab dan trastuzumab, yang
digunakan dalam kombinasi di sitotoksisitas tes kompetitif (Gambar. 5B).
Efektor dan Target sel HCT-8 dipreinkubasi dengan konsentrasi konstan trastuzumab
(5.000 ng / mL), diikuti dengan penambahan ertumaxomab (50 ng / mL). Dalam
pengaturan ini, trastuzumab saja (5.000 ng / mL) gagal lagi untuk melisiskan HCT-8 sel
target. Sel Ertumaxomab- mampu melisiskan pada konsentrasi serendah 50 ng / mL.
Tidak ada perbedaan yang diamati dalam keberhasilan pembunuhan ertumaxomab
dengan atau tanpa melebihkan 100 kali lipat sampel trastuzumab. Pengamatan
disimpulkan bahwa jumlah kelebihan trastuzumab tidak menghambat sel target dan
menjadikannya lisis di bandingkan dengan ertumaxomab karena ditegaskan bahwa dua
antibodi tersebut mengenali epitop HER2 / neu yang berbeda
 Kesimpulan
Ertumaxomab lebih efektif dalam menghambat sel kanker
(SK-BR-3 / payudara, BT20 / payudara, HCT-8 / usus, dan SK-
LU-1 / paru) dengan dosis kecil sekalipun yaitu 20 mg
ditandai dengan bener-benar terbunuhnya sel kanker
tersebut sedangkan trastuzomab seluruhnya gagal
mengerahkan efek sitotoksik pada HCT-8, BT-20, dan SK-LU-1
sel kanker, bahkan pada konsentrasi tinggi hingga 5.000 ng /
mL, dan dengan rasio E / T dari 20: 1. karena kedua antibodi
tersebut mengenali epitop HER2 / neu yang berbeda.
Terimakasih :
)