PRAKTIKUM ILMU REPRODUKSI DAN IB

THAWING & EVALUASI SEMEN BEKU

DEPARTEMEN REPRODUKSI DAN KEBIDANAN

FAKULTAS KEDOKTERAN HEWAN
UNIVERSITAS GADJAH MADA
 TUJUAN
11

1. Mengetahui prosedur thawing yang benar agar kualitas sperma tetap

terjaga
2. Mengetahui morfologi spermatozoa normal dan abnormalitasnya
3. Mampu melakukan pengecatan spermatozoa dan menentukan
persentase hidup-matinya
4. Mampu melakukan enumerasi spermatozoa
THAWING
EVALUASI SEMEN
BEKU
PTM
MORFOLOGI
ENUMERASI
PENGECATAN
SPERMATOZOA
 THAWING
PENGERTIAN Pencairan yang dilakukan pada semen beku sebelum digunakan

PROSEDUR Suhu thawing masing2 ?

PRINSIP Menaikkan suhu straw semen beku hingga suhu optimal

PELLET STRAW AMPUL

 EVALUASI SEMEN BEKU
A. PTM (post thawing motility)

TUJUAN??

PROSEDUR??

Perkirakan presentasi
Setetes semen pada Tutup dengan cover Amati dg mikroskop
gerakan massa dan
objek glass glass perbesaran 40x10
individu spermatozoa

Standar PTM % ??
JENIS-JENIS GERAKAN SPERMATOZOA

PROGRESIF ?
REVERSE ?
OSCILATORY ?
VIBRATORIS ?
NECROSPERMIA ?
 EVALUASI SEMEN BEKU
B. MORFOLOGI

NORMAL

A. HEAD
- Enzim2 yang ada apa saja?
- Fungsi enzim ? Fungsi??
B. NECK (MITOKONDRIA HELIX)
C. TAIL
Perbedaan morfologi spermatozoa masing-masing hewan
Proses spermatogenesis?
Fase spermatogenesis spermatositogenesis dan spermiogenesis
 EVALUASI SEMEN BEKU
B. MORFOLOGI

ABNORMAL

Primer: gangguan yang Mayor ?

terjadi pada testis

Sekunder: gangguan yang Minor ?

terjadi pada sistema
ductus hingga
dikeluarkan

Cari KRUGERS CLASSIFICATION apa saja?

Perbedaan abnormalitas mayor dan minor serta apa saja yang termasuk di dalamnya?
 EVALUASI SEMEN BEKU
C. PENGECATAN SPERMATOZOA

TUJUAN 1. Mengetahui persentase spermatozoa hidup dan mati

2. Pemeriksaan morfologi sederhana

ZAT WARNA ??

PRINSIP 1. Spermatozoa hidup membran sel stabil, mampu mencegah zat dari luar
memasuki nukleus
2. Spermatozoa mati membran sel tidak stabil, kadang ruptur, zat warna
dapat mewarnai head
 Sel hidup, warna sperma? Mengapa?
INTERPRETASI Sel mati, warna sperma ? Mengapa?

PROSEDUR
Satu tetes semen + satu tetes eosin-nigrosin.
(di atas gelas objek, diapus dgn objek glass lain)

Fiksasi di atas bunsen

Hitung 100 sel dgn counter untuk menentukan
persentase sperma

Tentukan persentase hidup dan mati
 RUMUS

Persentase hidup (dari jumlah terhitung 100)

Jumlah sel hidup x 100%

100

Persentase mati (dari jumlah terhitung 100)

Jumlah sel mati x 100%

100

Standar Presentase Hidup Sperma ??

 EVALUASI SEMEN BEKU
D. ENUMERASI SPERMATOZOA
TUJUAN Mengetahui estimasi jumlah spermatozoa

NaCl 3%
PROSEDUR Semen diisikan ke ditambahkan ke
dalam pipet eritrosit dalamnya hingga Kocok perlahan
hingga tanda 0,5 tanda 101 (200x
pengenceran)

Satu tetes, kamar

Amati dengan hitung Neubeuer,
perbesaran 40x10 tutup dengan gelas
penutup

STANDAR : Mini straw? medi straw ?