wR.wB.
keLompoK 3 :
1958
Matthew Meselson
Franklin Stahl
menguji ketiga alternatif hipotesis replikasi DNA menggunakan DNA
bakteri E. coli. Hasilnya mendukung model replikasi semikonservatif
Model semi konservatif : dua rantai DNA lama terpisah dan rantai
baru disintesis dengan prinsip komplementasi pada masing-masing
rantai DNA lama, dihasilkan dua rantai DNA baru yang mengandung
satu rantai cetakan molekul DNA lama dan satu rantai baru hasil
sintesis.
• Replikasi DNA berlangsung dlm tahapan :
denaturasi (pemisahan) untaian DNA induk, peng”awal”an (inisiasi)
sintesis DNA, Pemanjangan untaian DNA, Ligasi fragmen DNA,
peng”akhir”an (terminasi) sintesis DNA
• Proses replikasi
1. Pemisahkan dua untai DNA heliks ganda,
2. Setiap untai DNA yang “lama” berfungsi sebagai cetakan yang
menentukan urutan nukleotida di sepanjang untai DNA
komplementer baru yang bersesuaian dengan cara mendeteksi basa
komplemennya.
3. Setelah mendapatkan pasangan yang sesuai, nukleotida yang baru
disambung satu sama lain membentuk tulang punggung gula-fosfat
untai DNA baru yang dikatalisis oleh enzim polimerse.
4. Didapat dua molekul DNA yang sama persis dengan satu molekul
DNA induk.
5. Enzim DNA polimerase memiliki fungsi lain, yaitu mengoreksi DNA
yang baru terbentuk, membetulkan setiap kesalahan replikasi, dan
memperbaiki DNA yang rusak, sehingga menjadikan rangkaian
nukleotida DNA sangat stabil dan mutasi jarang terjadi.
Mekanisme Kerja DNA Polimerase
dalam Mengkatalisis Replikasi DNA
• Pencarian enzim yang dapat mensintesis DNA dimulai dari
tahun 1955 oleh Arthur Kornberg pemurnian dan
pencirian DNA (Mr 103000) polimerase pada sel E. coli
• DNA polimerase membutuhkan Mg2+ untuk aktivitasnya
dan juga mengandung Zn2+ yang terikat kuat pada gugus
aktifnya
• DNA polimerase mengkatalisa pengikatan kovalen unit
deoksiribonukleotida baru melalui gugus α-fosfat dengan
ujung 3-hidroksil bebas suatu DNA yang telah dahulu
terbentuk.
• Arah sintesis untaian DNA dari ujung 5’ ke ujung 3’
• (dNMP)n + dNTP ↔d(NMP)n + PPi
DNA DNA yang bertambah panjang