UJI SILANG SERASI

(CROSS MATCH)

UNIMUS
2017
 PENDAHULUAN

 Reaksi silang sebelum transfusi darah  darah

penderita sesuai darah donor.
 Mayor crossmatch = serum penderita + sel donor.
 Minor crossmatch = serum donor + sel penderita.
 Mayor Crossmatch = melindungi keselamatan
penerima darah  complete / incomplete Antibodies
dapat ditemukan dng cara tabung.
 Reaksi silang pada suhu kamar saja tdk dpt deteksi
aglutinin Rh yg bereaksi pada 37oC.
 UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE TABUNG

 Prinsip : Sel donor + serum penerima (Mayor

Crossmatch) dan sel penerima + serum donor dalam
bovine albumin 20%  aglutinasi / gumpalan dan
hemolisis bila golda tidak cocok.
 Tujuan : menentukan cocok tidak darah donor
dengan penerima untuk persiapan transfusi darah
 Alat dan Reagensia :
1. Tabung reaksi 5. Bovine albumin 20%
2. Pipet tetes 6. Mikroskop
3. Sentrifuge 7. NaCl 0,9 %
4. Tabung sentrifuge 8. Serum Coombs
 UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE TABUNG

Bahan Pem : Serum dan Eryhtrosit 5 %

Teknik Kerja :
a. Pembuatan suspensi Eryhtrosit 5 %
1. Tabung diisi 5 ml NaCl 0,9 %.
2. + 5 tetes darah EDTA & campur.
3. Sentrifuge 1500 rpm selama 5 menit.
4. Cairan dibuang & endapan + 5 ml NaCl 0,9 %.
Campur & putar lagi, ulangi 3 x.
5. NaCl 0,9 % ke-4  suspensi eryhtrosit 5 %.
 UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE TABUNG

b. Fase I : (Medium Saline) = deteksi Ab IgM (Natural)

 1. Sedia 2 tabung rx, I mayor test & II minor test.
2. Tabung I = 2 tts serum pasien + 2 tetes suspensi
erythrosit donor 5 % + 2 tetes bovine albumin 20%.
3. Tabung II = 2 tts serum donor + 2 tetes suspensi
erythrosit penerima 5 % + 2 tetes bovine albumin 20%.
4. Campur & sentrifuge 1000 rpm selama 1 menit.
5. Goyang hati-hati & periksa aglutinasi & hemolisis.
6. Bila hasil Mayor & minor negatif, lanjut ke fase II
7. Hasil Mayor & minor positif, pem tidak dilanjutkan
 UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE TABUNG

c. Fase II (Fase Inkubasi 37oC) = deteksi Ab IgG.

 1. Tabung diinkubasi suhu 37oC selama 15 menit
2. Putar selama 1 menit 1000 rpm.
3. Baca ada aglutinasi & hemolisis, bila (-) lanjut fase III
 d. Fase III (Fase Antiglobulin) = deteksi Ab IgG yg
disensitisasi oleh Ab irregular.
1. Eritrosit dicuci dengan NaCl 0,9% 3-4 kali
2. + 2 tts serum Coombs pada ke2 tabung.
3. Putar 1000 rpm selama 1 menit.
4. Baca aglutinasi & hemolisis makroskopis.
  aglutinasi & hemolisis negatif (-) kompatibel
 aglutinasi & hemolisis positif (+)  tidak cocok
 UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE TABUNG

 Serum antiglobulin ↑ sensitivitas test in vitro. IgM

m’gumpalkan eritrosit yg ζ Ag, tapi Ab lemah sulit
dideteksi  >> IgG tak mampu m’gumpalkan
eritrosit.
 Sel & serum diinkubasi 15-30 menit  Ab melekat
pada sel, lalu + serum antiglobulin  gumpalan.
 Uji saring thdp Ab penting pd transfusi & ibu hamil
HDN.
 Pem crossmatch di UTD & BDRS  metode gel yg
lebih mudah & praktis. Metode tabung  beberapa
fase pem & medium pem  bovine albumin, serum
coombs & inkubasi  ↑sensitivitas pem.
UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE TABUNG
 UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE GEL
DEFINISI
 Uji cocok serasi metode gel test = pem silang
darah pasien & donor pada microtube yg berisi gel
sebagai media pembacaan reaksi.
PROSEDUR
 Siapkan reagen LISS Diluent biarkan pada suhu kamar
 Pada ID. Card ditulis: Nomor pem; Nama pasien; Golda
pasien; Jenis darah donor (WB, RRC, FTP, TC); Nama
petugas; Tgl pem.
 Pada kolom atas microtube diberi kode reaksi sbb:
 ‒1 : untuk tabung mayor 1
 ‒2 : untuk tabung mayor 2 dst
 UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE GEL

 =1 : untuk tabung minor 1

 =2 : untuk tabung minor 2 dst
 ≡1 : untuk tabung auto pool 1
 ≡2 : untuk tabung auto pool 2 dst
 I : untuk tabung antar pool I
 II : untuk tabung antar pool II
 Ket : Jumlah pooling maksimal 3 donor
 Sedia tabung untuk menampung sampel penerima = S.
 Sedia tabung untuk menampung sampel donor = D.
 Sampel darah pd tabung  diputar 3000 rpm 1-2 ‘
 Sediakan tabung, beri identitas seperti 6.3.1 & 6.3.2.
 UJI SILANG SERASI (CROSS MATCH)
METODE GEL

 Masing-masing tabung diisi dengan 500 µl ID Diluent.

 + 5 µl eritrosit pekat ke masing-masing tabung.
 Buka microtube dng menarik ujung tutup ke atas.
 + 50 µl suspensi sel pasien ke microtube minor (=) dan
50 µ suspensi sel donor ke microtube mayor (-)
 + 25 µl serum/plasma pasien ke microtube
mayor & 25 µl serum/plasma donor ke microtube minor.
 Test card diketuk-ketuk bagian samping supaya tercampur.
 Test Card dimasukkan ke incubator selama 15’ pd suhu 37° C.
 Setelah inkubasi selesai, card diputar 1030 rpm selama 10’.
 Hasil reaksi dibaca & ditulis di kolom bawah ID Card &
lembar kerja.