PRAKTIKUM IMUNOLOGI

PERCOBAAN 1
ISOLASI MAKROFAG

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS WAHID HASYIM
SEMARANG
2020
TUJUAN
Mempelajari cara isolasi
makrofag pada mencit
RESPON IMUN
■ Respon imun terbagi menjadi dua yaitu respon
imun alamiah (non adaptif atau non spesifik)
adalah respon imun yang dibawa sejak lahir dan
respon imunitas adaptif (didapat atau spesifik)
(Baratawidjaja dan Rengganis, 2012).
■ Mekanisme ilmiah sudah ada didalam tubuh
manusia sejak lahir. Apabila sistem imun terpapar
oleh senyawa asing (antigen), maka jenis respon
imun alami yang pertama kali menghadapinya
(Subowo, 2009). Salah satu contoh sistem imun
ini yaitu makrofag (Baratawidjaja dan Rengganis,
2012).
 MAKROFAG
Sumsum tulang menghasilkan sel induk mieloid yang
kemudian berkembang menjadi sel fagosit mononuklear dan sel
polimononuklear. Makrofag termasuk dalam keluarga fagosit
mononuklear yang dapat ditemukan dalam banyak jaringan
(Abbas et al, 2007).
Sel fagosit mononuklear mempunyai 2 fungsi, yaitu:
■ Sebagai fagosit profesional dengan fungsi utama
menghancurkan antigen.
■ Sebagai antigen presenting cells (APC) yang fungsinya
menyajikan antigen kepada limfosit.
Aliran darah

Jaringan
 Tahapan – tahapan Pematangan
Fagosit

Makrofag diproduksi di sumsum tulang dari sel induk mieloid

melalui stadium promonosit. Sel yang matang kemudian masuk ke
dalam aliran darah sebagai monosit dan apabila sel itu
meninggalkan sirkulasi dan sampai di jaringan ia mengalami
berbagai perubahan tambahan kemudian menetap di jaringan
sebagai makrofag (Abbas et al, 2007).
Alat dan Bahan
Alat Bahan
• Mencit galur balb/c usia 2 bulan
■ Seperangkat alat bedah (gunting & pinset) steril • Medium RPMI (Rosewell Park
Memorial Institude)
■ Spuit injeksi 10 ml • FBS (Fetal Bovine serum) 10%
■ • Alkohol 70%
Alas untuk tempat membedah
■ Aluminium foil
■ Tabung sentrifugasi
■ Alat sentrifugasi
■ Pipet pasteur
■ Petri dist 50 mm
■ Vortex
■ LAF (laminar air flow)
■ Mikroskop
■ Hemositometer
■ Objek glass
■ Desk glass
■ Mikropipet ukuran 10, 100, & 200 l
CARA KERJA : ISOLASI MAKROFAG

Di korbankan Desinfektan Kulit bagian

menggunakan etanol 70% perut dibuka
eter/ kloroform

Injeksi 10 ml RPMI
LANJUTAN . Resuspensi
dengan 3 ml

... RPMI

Ambil 100 µl +
pellet 100 µl Tripan
blue, ambil 20
µl  hitung
makrofag
Sentrifuse 1200 rpm
Diperoleh aspirat 4oC selama 10 menit
Hemositomete
r

Sel Hidup

Sel Mati
TUGAS !

■ 1. Sebutkan jenis-jenis sel imun non spesifik dalam darah dan lama
waktu menetapnya dalam darah !
■ 2. sebutkan jenis jenis makrofag berdasarkan jaringa yang
ditempati