FLUOROMETRi

Kelompok 3
- Suhadi (20614025)
- Sayyid Ahyar (20614030)
- Yosefa Sintia M (20614026)
- Nurul Fadillah (20614031)
- Vanadis Badai F (20614027)
- Halimah Istiqomah (20614032)
- Deddy Oktafiansyah R (20614028)
- Malinda Agustin (20614041)
- Michael Ardhika P (20614029)
 1.

Definisi Sperktrofluorometri
Metode spektrofluorometri adalah suatu metode pengukuran berdasarkan sinar
yang berfluorosensi yang dipancarkan oleh zat uji dibandingkan dengan yang
dipancarkan oleh suatu baku tertentu. Pada umumnya cahaya yang
diemisikan oleh larutan berfluorsensi mempunyai intensitas maksimum pada
panjang gelombang yang biasanya 20nm hingga 30nm lebih panjang dari
panjang gelombang radiasi eksitasi.
 Flourometri
Fluorometri adalah suatu metode analisis kimia berdasarkan
kemampuan suatu senyawa kimia untuk memendarkan cahaya
yang diserap (sifat fotoluminesen).
 “
Pada metode ini yang diukur adalah intensitas fluoresensi yang terjadi pada
panjang gelombang tertentu setelah analit tereksitasi pada panjang gelombang
tertentu. Sehingga pengukuran dilakukan pada cahaya yang diemisikan, yaitu
saat elektron yang tereksitasi kembali ke ke tingkat dasar, bukan yang
ditransmisikan. Molekul akan kehilangan sebagian energi pada saat kembali ke
tingkat dasar disebabkan oleh adanya tumbukan antar sesama molekul analit
atau dengan molekul pelarut dan energi yang dilepas berupa cahaya (de-
eksitasi). Sensitivitas metode fluoresensi lebih baik dibandingkan dengan
metode absorpsi, karena batas noise-nya lebih rendah.
Fluorometri berdasarkan asal atau sumber  pendar (luminesen)
dibedakan menjadi 3
✘ Bioluminesensi yang berasal dari makhluk hidup seperti kunang kunang
✘ Kemiluminesensi yaitu berasal dari reaksi kimia
✘ Fotoluminesensi yaitu berasal dari cahaya seperti radar elektromagnetik

6
 terdapat 2 sifat luminesen senyawa kimia

Fluoresensi yang pendar cahayanya akan Fosforesensi yang pendar cahayanya masih
hilang saat radiasi dihentikan seperti pada  berlangsung beberapa saat walau radiasi telah
rambu lalu lintas, pasta gigi, dan banyak dihentikan (menyimpan energi lebih lama)
digunakan untuk analisis kimia karena banyak seperti pendar cahaya pada kunang-kunang.
senyawa yang memiliki sifat luminesen

7
 Syarat zat yang dapat di analisis dengan fluorometri

Molekul analit dapat menyerap

Transisi energi hingga ke tingkat
cahaya dengan kuat sehingga
kondisi eksitasi terendah
analit harus mengandung gugus
pasangan elektron singlet adalah
kromofor. Seperti senyawa
transisi π-π*
aromatik, heterosiklik dan sistem
konjugasi Molekul yang tereksitasi kembali
ke kondisi dasra dengan
Struktur molekulnya planar dan melepaskan energi radiatif
kaku, mampu menyerap secara dengan waktu relaksasi pada
kuat di daerah 200-800 nm pada fluorometri 10-9 - 10-7 detik  dan
radiasi elektromagnetik. pada fosforimetri 10-4 detik      
Daerah fluoresensi senyawa
Kation dan anion anorganik yg dapat dianalisis secara fluorometri
adalah golongan lantanida dan aktinida. Sedangkan Gugus fungsi
yang mampu menghasilkan cahaya fluoresensi adalah gugus-gugus
yang memberikan elektron (elektron donating groups) seperti gugus
hidroksil, amino atau metoksi yang terikat secara langsung pada
sistem ikatan п dapat memfasilitasi terjadinya proses fluoresensi.
Gugus-gugus yang menarik elektron (elektron withdrawing groups)
seperti nitro, bromo, iodo, siano, atau karboksil cenderung
mengurangi intensitas fluoresensi. Pada  senyawa fenol, ionisasi
menjadi anion fenolat biasanya mendorong fluoresensi; sementara
itu perubahan amin aromatis menjadi kation amonium aromatis
menghambat proses fluoresensi. Zat yang tidak dapat berpendar
dapat diubah menjadi senyawa berpendar dengan cara
menambahkan pereaksi.
Faktor-faktor yang mempengaruhi fluoresensi dan fosforesensi
yaitu
✘ Hasil kuantum (efisiensi kuantum, quantum yield)
Merupakan bilangan yang menyatakan perbandingan antara jumlah molekul yang berfluoresensi terhadap
jumlah total molekul yang tereksitasi. Besarnya quantum (ɸ) adalah : 0 ≤ ɸ ≤ 1. Nilai ɸ diharapkan adlah
mendekati 1, yang berarti efisiensi fluoresensi sangat tinggi.
✘ Pengaruh kekakuan struktur
Fluoresensi dapat terjadi dengan baik jika molekul-molekul memiliki struktur yang kaku (rigid).
✘ Pengaruh suhu
Bila suhu makin tinggi maka efisiensi kuantum fluoresensi makin berkurang. Hal ini disebabkan pada suhu
yang lebih tinggi, tabrakan-tabrakan antar molekul atau tabrakan molekul dengan pelarut menjadi lebih sering,
yang mana pada peristiwa tabrakan, kelebihan energy molekul yang tereksitasi dilepaskan ke molekup
pelarut.jadi semakin tinggi suhu maka terjadinya konversi ke luar besar, akibatnya efisiensi kuantum
berkurang.

10
✘ Pengaruh pelarut
Ada 2 hal yang perlu diperhatikan terkait dengan pengaruh pelarut pada fluoresensi, yaitu:
a.       Jika pelarut makin polar maka intensitas fluoresensi makin besar.
b.      Jika pelarut mengandung logam berat (Br, I atau senyawa lain), maka interaksi antara gerakan spin
dengan gerakan orbital elektron-elektron ikatan lebih banyak terjadi dan hal tersebut dapat memperbesar laju
lintasan antara sistem atau mempermudah pembentukan triplet sehinga kebolehjadian fluorosensi lebih kecil,
sedangkan kebolehjadian fosforesensi menjadi lebih besar
✘ Pengaruh pH
pH berpengaruh pada letak keseimbangan antar bentuk terionisasi dan bentuk tak terionisasi. Sifat fluorosensi
dari kedua bentuk itu berbeda. Sebagai contoh, fenol dalam suasana asam akan berada dalam bentuk molekul
utuh dengan panjang gelombang antara 285-365 nm dan nilai ε = 18 M-1 cm-1 , sementara jika dalam suasana
basa maka fenol akan terionisasi membentuk ion fenolat yang mempunyai panjang gelombang antara 310-400
nm dan ε = 10 M-1 cm-1 .
✘ Pengaruh oksigen terlarut
Adanya oksigen akan memperkecil intensitas fluoresensi. Hal ini disebabkan oleh terjadinya oksidasi senyawa
karena pengaruh cahaya (fotochemically induced oxidation). Pengurangan intensitas fluorosensi disebut
pemadaman sendiri atau quenching. Molekul oksigen bersifat paramagnetik, dan molekul yang bersifat seperti
ini dapat mempengaruhi dan mempermudah lintasan antara sistem sehingga memperkecil kemungkinan
fluorosensi, sebaliknya memperbesar kebolehjadian fosforesensi.
✘ Pemadaman sendiri dan penyerapan sendiri
Pemadaman sendiri di sebabkan oleh tabrakan-tabrakan antar molekul zat itu sendiri. Tabrakan-
tabrakan itu menyebabkan energi yang tadinya akan dilepaskan sebagai sinar fluorosensi
ditransfer ke molekul lain, akibatnya intensitas berkurang. Salah satu proses pemadaman sendiri
dapat ditulis sebagai berikut:

Molekul analit tereksitas + pemadaman menjadi molekul analit berkeadaan dasar +

pemadam+ energi

12
Bidang-bidang yang memanfaatkan analisis dengan metode Fluorometri
Bidang/Zat Jenis Senyawa
Corticosteron, cortisol, estron, testosterone,
Biokimia, Farmasi, Steroid
progresteron, endrogen
Globulin, albumin, tryptophan, tyramine,
Protein, asam-asam amino metilkatekolamin, serotonin, histamin, leusin,
fenilalanin
Bahan obat Aspirin, tetrasiklin, morfin, barbiturat
Vitamin Tiamin, riboflavin, C, D, E
Lipase, protease, fosfatase, peroksikade,
Enzim
dehidrogenase
Pertanian Beberapa jenis pestisida, aflatoksin
Industri Senyawa-senyawa aromatis, detergen

13
 In two or three columns

Yellow Blue Red

Is the color of gold, butter and Is the colour of the clear sky and Is the color of blood, and because
ripe lemons. In the spectrum of the deep sea. It is located between of this it has historically been
visible light, yellow is found violet and green on the optical associated with sacrifice, danger
between green and orange. spectrum. and courage.

14
Want big
impact?
Use big
image.

15
Use charts to explain your ideas

White Gray Black

16
 Maps

our office

17
89,526,124
Whoa! That’s a big number, aren’t you proud?

18
89,526,124$
That’s a lot of money

185,244 users
And a lot of users

100%
Total success!
19
 Our process is easy

first second last

20
You can copy&paste graphs from Google Sheets
21
Place your screenshot here

Android project
Show and explain your web, app
or software projects using these
gadget templates.

22
Place your screenshot here

iPhone project
Show and explain your web, app
or software projects using these
gadget templates.

23
Place your screenshot here

Tablet project
Show and explain your web, app
or software projects using these
gadget templates.

24
Place your screenshot here

Desktop project
Show and explain your
web, app or software
projects using these
gadget templates.

25
 thanks!
Any questions?
You can find me at
@username
user@mailme

26
 Presentation design

This presentation uses the following typographies:

✘ Titles: Walter Turncoat
✘ Body copy: Sniglet
You can download the fonts on these pages:
https://www.fontsquirrel.com/fonts/walter-turncoat
https://www.fontsquirrel.com/fonts/sniglet

You don’t need to keep this slide in your presentation. It’s only here to serve you as a design guide if you need to create new slides or
download the fonts to edit the presentation in PowerPoint®

27
Extra graphics

28
 SlidesCarnival icons are editable shapes.

This means that you can:

● Resize them without losing quality.
● Change fill color and opacity.

Isn’t that nice? :)

Examples:

29
Diagrams and infographics

30
� Now you can use any emoji as an icon!
And of course it resizes without losing quality and you can change the color.

�
How? Follow Google instructions
https://twitter.com/googledocs/status/730087240156643328

✋👆👉👍👤👦👧👨👩👪💃🏃💑❤😂😉😋
😒😭😸💣
👶😸 🐟🍒🍔💣 📌📖🔨🎃🎈🎨🏈🏰🌏🔌🔑
and
many more...

31
 Free templates for all your presentation needs

For PowerPoint and 100% free for personal or Ready to use, professional Blow your audience away
Google Slides commercial use and customizable with attractive visuals