ISOLASI DNA

Nama : Perdi Adji Hamidin

Nim : 190104092
Kelas : VII/D
 Isolasi DNA

• Tehnik untuk mendapatkan DNA dari makhluk hidup

• Tujuan : memisahkan DNA dalam suatu sel darizat-zat lain selain DNA,
seperti protein, lemak, dan karbohidrat
• Sediaan isolasi DNA : whole blood, rambutm, saliva, kuku, jaringan,
tulang, sel epitel, urin, buccal swab
 Prinsip Isolasi DNA

Ada 4:
1. Lisis
2. Ekstraksi
3. Presipitasi
4. Rehidrasi
 1. Lisis

• Untuk menghancurkan dinding sel atau membran sel

• Ada beberapa cara:
- Fisik: menggerus sampel dengan mortar dan pestle dalam nitrogen
cair, metode freezing thawing, radiasi
- Kimiawi: menggunakan detergen atau sodium dodecyl sulphate
- Enzimatik : lysozyme
 2. Ekstraksi

• Memisahkan DNA dari kontaminan-kontaminan lainnya yaitu komponen-

komponen penyusun yang lain seperti polisakarida, protein melalui proses
sentrifugasi
• Akan dihasilkan 2 fase: fase organik pada bagian bawah dan fase aquoeus (air)
pada bagian atas
DNA dan RNA →pada fase aquoeus
Protein yang terdenaturasi → pada interfase
Lipid → pada fase organik
• RNA dapat dihilangkan menggunakan RNAse (enzim yang dapat merusak RNA)
 3. Presipitasi

• DNA dipekatkan melalui presipitasi menggunakan etanol atau

isopropanol
• Isopropanol dan etanol akan mengendapkan DNA pada fase aquoeus
→DNA menggumpal membentuk struktur fiber→sentrifugasi
→berbentuk pellet
 4. Rehidrasi

• Pemurnian DNA → mengeringkan atau menguapkan

Terimakasih