Prosedur Kerja A) Pemeriksaan Urea 1. Reaksi Biuret Pada tabung, tambah sedikit ureum, panaskan.

Ureum melebur lalu lepaskan amonia. Panaskan sampai benda yang melebur memadat lagi. Dinginkan, sisanya larutkan dengan NaOH encer, tambah CuSO4 encer 2. Pemecahan urea oleh enzim urease Adanya urea dalam urin dapat pula diketahui dengan reaksi urease menurut Van Slyke. Reaksi ini dapat mengukur jumlah urea di air seni. B) Pemeriksaan Asam Urat 1. Reaksi Folin 3 cc urin ditambah 2 cc reagen folin (asam fosfotungstat) ditambah 2 cc Na2CO3 20% akan menghasilkan warna biru 2. Reaksi Reduksi Perak (Schiff) Larutkan sedikit asam urat dalam Na2CO3. Kertas saring dibasahi dengan larutan AgNO3 dan ditetesi dengan larutan Asam urat, akan berubah menjadi warna kuning coklat/hitam karena Ag. Percobaan diganggu dengan ion klorida. C) Pemeriksaan Kreatinin 1. Reaksi Jaffe 1 cc larutan asam pikrat jenuh + 0,5 cc NaOH 10%, bagi ke 2 tabung. Tabung 1 ditambah 3 cc urin. Tabung 2 ditambah 3 cc akuades.

Tabung 1 berubah menjadi jingga karena terjadi kreatinin pikrat. Dasar kolorimetris untuk penetapan kretainin. 2. Reaksi nitroprussid dari Weyl 5 cc urin ditambah beberapa tetes Na nitroprussid. Lautan dibuat alkalis dengan NaOH. Terjadi warna merah yang cepat jadi kuning. D) Pemeriksaan garam amonium

1. Reaksi pembentukan NH3 2 cc urin ditambah 1 tetes fenolftalein (PP) ditambah larutan Na2CO3 2%, warna menjadi merah muda. Masak. Kaca yang dicelup PP masukkan ke mulut tabung. Lapisan PP akan menjadi merah muda karena keluarnya amoniak dari penguraian garam.

E) Pemeriksaan mineral-mineral 1. Reaksi Pembuktian Klorida Masukkan urin lalu diasamkan dengan HNO3. Lalu tambahkan larutan AgNO3, warna akan berubah menjadi merah atau muncul endapan, jika ditambah dengan NH4OH berlebih maka endapan akan hilang. 2. Reaksi Pembuktian Fosfat Urin setengah tahun ditambah NH4OH akan menjadi alkalis. Tambahkan MgSO4, masak, dan terjadi endapan Ca Mg Fosfat. Di saring, dengan akuades. Lalu dilarutkan dengan 1 cc asam cuka panas 2% di atas kertas saring. Larutan bagi menjadi 2 tabung. Tabung 1 ditambah 1 tetes HNO3 pekat dan amonium molibdat, panaskan dan akan terbentuk endapan kuning jeruk. Tabung 2 untuk percobaan Ca.

3. Reaksi Pembuktian Ca Tabung 2 ditambah Ca-oksalat jenuh akan menjadi keruh karena Caoksalat tidak larut.

4. Reaksi Pembuktian Sulfat 2 cc urin diasamkan dengan asam asetat encer. Tambahkan larutan BaCl2. Jika urin mengandung sulfat terjadi kekeruhan dari BaSO4.

Analisis Hasil Praktikum dan Reaksi Kimia A) Pemeriksaan Urea 1. Reaksi Biuret Didapatkan warna ungu, ini menunjukkan ureum membentuk ikatan peptida. Ureum + basa kuat (NaOH) agar suasana basa Rumus Ureum : NH2CO NH2CO ditambah CuSO4 timbul warna ungu Cu akan mengikat N CuN Rumus biuret (CONH2 NH CONH2) kondensasi 2 molekul yang sama 2. Pemecahan urea oleh enzim urease Tabung 1

Dalam tabung dimasukkan urin 5 cc + 5 tetes fenol merah + 5 tetes Na2CO3 + 5 tetes asam cuka dipanasi + tepung kedelai campur & gojog.

Fungsi tepung kedelai untuk menggantikan peran enzim urease dalam menguraikan urea di urin.

Tabung yang berisi urin, ketika dipanasi kuning + kedelai merah. (di urin terdapat urea)

Warna merah menunjukkan bercampurnya urea dalam urin + enzim urease (tepung kedelai) amonium karbonat yang setelah digojog menjadi pink.

Tabung 2 Tabung kedua, urea diganti aquades Ketika aquades dipanasi kuning + tepung kedelai tetap kuning.

Hal ini menunjukkan dalam aquades tidak ada urea, sehingga enzum urease tidak bekerja.

Kandungan urea di tubuh meningkat saat: demam, diabetes melitus.

B) Pemeriksaan Asam Urat 1. Reaksi Follin Ketika urin + asam fosfotungstat + Na2CO3 asam + basa akan berikatan dan menyisakan fosfotungstat.

Asam

urat

di

urin

akan

mereduksi

fosfotungstat

asam

fosfomolibdat biru gelap. 2. Reaksi Reduksi Perak (Schiff) Ketika asam urat ditambah Na2CO3 akan terbentuk larutan eno reaktif. Kertas saring + AgNo3 + larutan enol reaktif kuning coklat. Asam urat dalam urin mereduksi AgNO3 Ag+ + NO3-. Warna kuning coklat buktikan adanya Ag. C) Pemeriksaan Kreatinin 1. Reaksi Jaffe Asam pikrat jenuh + NaOH Na pikrat (kuning). Jika ditambah urin jingga, menunjukkan adanya kreatinin. Jika ditambah aquades tetap kuning (kontrol negatif). 2. Reaksi Nitroprussid dari Weyl Urin + Na nitroprussid + NaOH merah kuning Na nitroprussid memudahkan pelepasan ikatan pada urin setelah terbentuk lalu terpecah-pecah. Na nitroprussid + NaOH ikatannya terpecah merah (karena adanya Fe32+) berubah menjadi kuning (karena Fe32+ di alam tidak stabil, jika berikatan dengan udara / teroksidai menjadi Fe33+) warna kuning Fe33+. D) Pemeriksaan Garam Ammonium

1.

Reaksi Pembentukan NH3 Urin + PP + larutan Na2CO3 2% merah muda dimasak Sebatang kaca yang dicelup larutan PP dimasukkan ke dalam mulut tabung lapisan PP di kaca menjadi merah muda karena keluarnya amoniak dari penguraian garam amonium urin. NH4OH dalam urin + Na2CO3 (NH4)2CO3 + 2NaOH dipanasi CNH CO3 menjadi pecah CO2 + H2O + 2NH3 menguap pink.

E) Pemeriksaan mineral-mineral 1. Reaksi Pembuktian Klorida Urin + HNO3 pekat + AgNO3 merah / endapan + NH4OH hilang Urin + HNO3 pekat + AgNO3 AgCl + NH4OH endapan hilang HNO3 berfungsi memutus ikatan Cl di urin, ada Cl yang bebas dan ada yang berikatan. Cl memiliki afinitas yang tinggi dengan Ag di dalam AgNO3, sehingga ikat Ag AgCl (endapan). Kemudian karena NH4 ikat Cl lebih kuat sehingga endapan hilang. 2. Reaksi Pembuktian Fosfat Urin di tabung reaksi + NH4OH + MgSO4 panaskan endapan putih CaMg fosfat. Disaring dengan kertas saring, endapan dicuci dengan aquades untuk hilangkan zat-zat yang tidak berguna. Asam cuka dialirkan ke endapan. Larutan dibagi dalam 2 tabung reaksi, tabung pertama ditambah HNO3 pekat dan amonium molibdat. Fungsi HNO3 untuk mengubah zat organik menjadi anorganik yang tidak stabil. Ikatan menjadi

bebas,

fosfat

bebas

amonium

molibdat

kuning

jeruk

(menunjukkan adanya fosfat di urin). 3. Reaksi Pembuktian adanya Kalsium Tabung kedua dari percobaan no. 1 ditambah K-oksalat jenuh kekeruah karena terbentuk Ca oksalat yang tidak larut. Ca Mg fosfat + K oksalat kekeruhan Ca miliki afinitas yang tinggi dengan oksalat Ca oksalat (keruh).

4.

Reaksi Pembuktian Sulfat Urin + asam asetat + BaCl2 endapat (kekeruhan) Ba di BaCl2 miliki afinitas tinggi dengan sulfat dalam urin, sehingga terbentuk BaSO4.

Pembahasan Dari beberapa percobaan diatas (kandungan zat di utin dan mineral di urin) didapat hasil, bahwa urin sampel yang diambil dari seorang yang sehat mengandung urea, asam urat, kreatinin & garam amonium. Sedangkan mineral-mineralnya meliputi klorida, fosfat, kalsium dan sulfat. Hal ini diperoleh dari keseluruhan data yang menunjukkan reaksi positif. Selain itu dalam urin tersebut juga tidak ditemukan adanya zat-zat abnormal, sehingga hal ini menunjukkan fungsi ginjal masih baik.