Penurunan titik beku.

Ini adalah sifat koligatif paling sering digunakan dalam perhitungan larutan isotonik karena dapat diukur dengan mudah dan akurat. Titik beku larutan juga dipengaruhi oleh jumlah partikel dalam larutan. Pada titik beku air, keadaan cair dan padat yang ada dalam kesetimbangan dan memiliki tekanan uap yang sama. Ketika suatu zat terlarut ditambahkan ke sistem dalam kesetimbangan pada cetak pembekuan, yang pelarut zat terlarut dalam cairan, sehingga menurunkan tekanan uap dan, gilirannya mencair atau menurunkan titik beku dalam keadaan padat. Dalam kasus larutan encer, penurunan titik beku adalah sekitar sebanding dengan tekanan osmotik, tekanan penurunan uap, dan elevasi titik didih, dengan asumsi keadaan ionik atau molekul konstan zat terlarut dan pelarut pada suhu di mana sifat ini diukur (Glenn, 1957). Penurunan titik beku sering digunakan karena metode paling teliti dan mudah, penurunan titik beku darah 0,52 C, penurunan titik beku suatu larutan tergantung dari jumlah bagian dalam larutan tersebut, untuk larutan encer penurunan titik beku sebanding dengan tekanan osmosa. Jadi penurunan titik beku larutan dapat digunakan untuk mengukur kepekatan larutan, makin pekat larutan makin rendah titik bekunya. Maka penurunan titik beku yang digunakan untuk perhitungan isotonis berdasarkan anggapan bahwa larutan isotonis mempunyai titik beku yang sama dengan titik beku cairan tubuh. Untuk zat zat bukan elektrolit larutan yang sama molaritasnya adalah isotonis, misalnya larutan glukosa 1 molar isotonis dengan larutan fruktosa 1 molar. Akan tetapi tidak isotonis dengan larutan natrium klorida 1 molar , karena dalam air terionisasi menjadi 2 ion. Jadi tekanan osmosa dan penurunan titik beku adalah fungsi jumlah bagian zat dalam larutan ( Glenn, 1957).