Makalah TOK

MAKALAH TEKNOLOGI OBAT DAN KOSMETIK
TEKNOLOGI OBAT
TERAPI GEN DAN TERAPI KANKER DENGAN APOPTIN
Kelompok : 3
Alfiani Guntari Mahadewi

Risya Utaviani
Hanifia Wulandari
Kianti Kasya K
Wisnu Ardyanto
DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA

FAKULTAS TEKNIK UNIVERSITAS INDONESIA
DEPOK 2016
MAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT karena atas berkat dan
rahmat-Nya, penulis dapat menyelesaikan makalah teknologi obat mengenai terapi protein
dan terapi gen dengan apoptin.
Dalam kesempatan ini, kami mengucapkan terimakasih kepada pihak-pihak yang
telah memberikan bantuan dalam menyelesaikan makalah. Pihak-pihak yang turut
membantu penulisan antara lain:
1. Pak Sahlan slaku dosen mata kuliah Teknologi Obat dan Kosmetik,
2. Kak Lucia selaku asisten dosen mata kuliah Teknologi Obat dan Kosmetik,
3. Teman teman yang telah mendukung pembuatan makalah ini.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam penyusunan makalah ini,
oleh sebab itu saya memohon maaf apabila terjadi kesalahan teknis maupun non teknis
didalam makalah ini.
Akhir kata, saya berharap agar laporan ini dapat bermanfaat bagi banyak pihak.
Terimakasih
Depok, April 2016
Tim Penulis
ii
MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR ............................................................................................................. 1
DAFTAR ISI ......................................................................................................................... iii
BAB 1 PENDAHULUAN ....................................................................................................... 1
1.1.
LATAR BELAKANG .............................................................................................. 1
1.2
DEFINISI MASALAH ............................................................................................. 1
BAB 2 DASAR TEORI .......................................................................................................... 2
2.1.1 FUNGSI APOPTIN ................................................................................................ 2
2.1.2 KARAKTERISTIK APOPTIN ................................................................................ 2
2.1.2.1 SIFAT KIMIA .................................................................................................. 2
2.1.2.2 SIFAT FISIKA ................................................................................................ 3
2.1.3
SUMBER ........................................................................................................ 3
2.2.1 DEFINISI ............................................................................................................... 3
2.2.2 FUNGSI ................................................................................................................ 4
2.2.3 JENIS DAN CONTOH ........................................................................................... 4
2.2.4 CARA PEMILIHAN ............................................................................................... 4
2.2.5 PENGUJIAN ......................................................................................................... 4
2.3 SEDIAAN ..................................................................................................................... 5
2.3.1. Bentuk Sediaan Solida (Padat) .......................................................................... 5
2.3.2. Bentuk Sediaan Semi Solid (Semi Padat) ......................................................... 9
2.3.3. Bentuk Sediaan Liquida (Cair)......................................................................... 11
2.4
FARMAKOKINETIK ............................................................................................. 14
2.5 BIOAVAILABILITAS ................................................................................................. 17
BAB 3 PEMBAHASAN ....................................................................................................... 20
3.1 TERAPI GEN ............................................................................................................. 20
3.1.1 PENGERTIAN ..................................................................................................... 20
3.1.2 KEKURANGAN DAN KELEBIHAN ................................................................. 22
3.1.3 PROSES .......................................................................................................... 23
3.1.4 BENTUK SEDIAAN YANG POTENSIAL ......................................................... 26
3.2 TERAPI PROTEIN ..................................................................................................... 28
3.2.1 PENGERTIAN ..................................................................................................... 28
3.2.2 KEKURANGAN DAN KELEBIHAN .................................................................... 29
3.2.3 BENTUK SEDIAAN YANG POTENSIAL ............................................................ 30
3.3 PEMILIHAN TERAPI KANKER ................................................................................. 33
3.3.1 TERAPI PROTEIN SEDIAAN LIQUID ................................................................ 33
3.3.1.1 EKSIPIEN .................................................................................................... 33
3.3.1.2 BIOAVAILABILITAS .................................................................................... 41
3.3.1.3 FARMAKOKINETIK ..................................................................................... 44
3.3.2 TERAPI GEN ORAL ........................................................................................... 47
3.3.2.1 EKSIPIEN .................................................................................................... 47
3.3.2.2 BIOAVAILABILITAS .................................................................................... 50
3.3.2.3 FARMAKOKINETIK ..................................................................................... 51
3.3.2.4 MEKANISME ............................................................................................... 53
3.4 REGULASI ................................................................................................................ 56
3.4.1 TERAPI GEN ...................................................................................................... 56
3.4.2 TERAPI PROTEIN .............................................................................................. 57
3.5 PEMASARAN ............................................................................................................ 58
BAB 4 KESIMPULAN ......................................................................................................... 60
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................................ 61
iii

BAB 1
PENDAHULUAN
1.1.
LATAR BELAKANG
Dewasa ini, seiring dengan kemajaun teknologi, semakin banyak penelitian
yang dilakukan untuk menemukan obat obat yang mampu menyembuhkan
beragam penyakit berat atau penyakit mematikan, seperti kanker.
Dalam membuat dan memformulasi sebuah obat, ada beberapa hal yang
harus diperhatikan. Bentuk sediaan yang cocok, tempat pelepasan obat yang
diinginkan, eksipien yang akan dipakai, tujuan pemakaian eksipien, dan lainnya.
Dalam pemilihan eksipien juga harus diperhatikan kembali faktor bioavailabilitas obat
dan farmakokinetiknya. Kedua faktor tersebut akan menentukan apakah obat
terformulasi dengan baik atau tidak.
Dalam penerapannya, kanker diteliti dalam dua (2) macam pengobatan, yaitu
terapi gen dan terapi kanker. Selain itu ditemukan pula protein yang memungkinkan
untuk menyembuhkan kaner, yakni apoptin.
1.2
DEFINISI MASALAH
Apakah apoptin itu? Mengapa dapat melawan kanker?
Apa definisi terapi protein dan gen? Bagaimana kedua terapi tersebut dapat
melawan kanker?
Bagaimanakah sediaan yang baik untuk kedua terapi tersebut?
Apa eksipien yang baik untuk kedua terapi tersebut?
Bagaimana pemasarannya?

BAB 2
DASAR TEORI
2.1 APOPTIN
2.1.1 FUNGSI APOPTIN
Apoptin adalah protein yang mampu menginduksi kematian sel spesifik pada
sel tumor. Gen apoptin dikodekan oleh Chicken Anemia Virus (CAV). Apoptin
memiliki kemampuan untuk menginduksi terjadinya apoptosis pada sel kanker
manusia namun tidak pada sel normal.
2.1.2 KARAKTERISTIK APOPTIN

2.1.2.1 SIFAT KIMIA
Apoptin tersusun dari 121 asam amino, dan tidak menunjukkan
homologi sekuens yang signifikan dengan protein sel yang diketahui
Terminal C apoptin mengandung bipartite nuclear localization seequence

(NLS): NLS 1 merupakan rentang 82-88 asam amino dan residu NLS 2
sepanjang 111-121
2, 3
. Apoptin diduga mengandung nuclear export sequence
(NES) pada residu 97-105 seperti pada Gambar 1.
Gambar 1. Struktur primer apoptin

(Sumber: Los, et al. 2009 4)
Apoptin juga sebagai tempat lewatnya hidrofobik pendek yang kaya
leusin yang meregang (aa 33-46) yang diperlukan dalam asosiasi sendiri
selayaknya ikatan dari protein leukimia promyelocytic dan interaksi
pasangan lain
5, 6
. Sangat menarik untuk dicatat bahwa bentuk biologis aktif
apoptin rekombinan dapat membentuk multimer globular yang terpasang

nonkovalen, terdiri dari 30-40 monomer 7. Pembentukan dari kompleks
multimer ini tampaknya difasilitasi melalui interaksi region hidrofobik yang
kaya akan prolin pada terminal N (aa 1-69) dari masing- masing monomer 8.

2.1.2.2 SIFAT FISIKA
Sekuens di wilayah 5'- nontranskripsi dari genom CAV berfungsi
sebagai promotor / enhancer 9. Genom CAV berisi tiga frame pembacaan
terbuka yang sebagian tumpang tindih yang menghasilkan polisistronik
unspliced RNA yang mengkode tiga protein yang berbeda. Semua protein
diekspresikan dalam sel yang terinfeksi CAV
10, 11
. VP1 merupakan 51-kDa
protein kapsid dan VP2 merupakan 24-kDa spesifisitas ganda fosfatase.

Hal yang penting, induksi apoptosis oleh CAV telah dikaitkan terhadap
VP3, 14-kDa protein non-struktural, yang karena itu juga disebut sebagai
apoptin
12, 13, 14
. Salah satu dari mRNA CAV diduga mengkodekan protein
apoptin terpotong terdiri dari 58 asam amino pertama saja. Signifikansi dari
dugaan tambahan produk gen untuk kematian sel dan manifestasi lain dari
CAV masih belum jelas.
Densitas bouyant CAV sebesar 1,33- 1,34 g/mL. Partikel CAV tahan
terhadap acetone, chloroform, ether, dan pH 3,0. CAV terinaktivasi setelah
pemanasan 80C selama 30 menit dan total terinaktivasi setelah 10 menit
pada suhu 100C 16.
2.1.3
SUMBER
Gen apoptin dikodekan oleh Chicken Anemia Virus (CAV) yang
termasuk Famili Gyrovirus. Untuk
didapatkan
dari
isolasi
dari
mendapatkan
virus
CAV
gen
apoptin
bisa
yang menginfeksi ayam atau
embrio atau sel yang dikulturkan.

2.2 EKSIPIEN
2.2.1 DEFINISI
Dalam suatu sediaan farmasi, selain zat aktif juga dibutuhkan eksipien/bahan
penolong. Eksipien merupakan bahan selain zat aktif yang ditambahkan dalam
formulasi suatu sediaan untuk berbagai tujuan atau fungsi. Walaupun eksipien
bukan merupakan zat aktif, eksipien sangat penting untuk kesuksesan produksi
sediaan yang dapat diterima. Eksipien merupakan senyawa inaktif yang juga
diformulasikan dengan tujuan untuk mem-bulk-up formulasi yang mengandung
bahan aktif potensial32.
Pemilihan eksipien didasarkan pada beberapa kriteria yaitu:
a. Sifat inert secara fisiologis
b. Stabil secara fisika dan kimia
c. Sesuai dengan regulasi yang ada
d. Tidak menurunkan bioavailabilitas obat
e. Tidak terdapat mikroorganisme patogen

Harganya murah34
f.
2.2.2 FUNGSI
memudahkan dispensasi dari senyawa obat dalam pembuatan sediaan.
membantu proses absorpsi obat atau meingkatkan kelarutan.
mengubah potensial pelarut dari barrier tersebut
menurunkan viskositasnya.7
Mempengaruhi transport obat dalam tubuh
Mencegah kerusakan obat sebelum sampai ke sasaran
Meningkatkan kelarutan dan bioavailabilitas
Meningkatkan stabilitas obat
Menjaga pH dan osmolaritas
Menstabilkan emulsi
Mencegah disosiasi zat aktif
Memperbaiki penampilan sediaan33,34
2.2.3 JENIS DAN CONTOH

Eksipien digolongkan dalam beberapa kategori, yakni sebagai bagian
penting dalam bentuk sediaan (emulsifiers dan gelling agent), mencegah
degradasi dari suatu formulasi (antioksidan, anti bakteria, pengawet), sebagai
peningkat penetrasi, dan sebagai peningkat hidrasi.
2.2.4 CARA PEMILIHAN

Kriteria dari eksipien yakni:
netral secara fisiologis, stabil,
tidak
mempengaruhi bioavailabilitas obat, bebas dari mikroba patogen, dan tersedia

dalam jumlah yang cukup. Untuk menentukan eksipien maka perlu diketahui
terlebih dahulu sediaan/ bentuk dari material obatnya. Pemilihan eksipien juga
tidak menimbulkan interaksi dengan bahan obat, mempertimbangkan sifat fisika
dan kimia zat aktif, metode pembuatan, cara pemakaian, dosis, dan sebagainya.
2.2.5 PENGUJIAN
Pengujian eksipien dilakukan dengan menggunakan DSC (Differential
Scanning Calorimetry) dan TLC (Thin Layer Chromatography)
15
. DSC merupakan
teknik termoanalisis di mana perbedaan dalam jumlah panas yang dibutuhkan

untuk meningkatkan suhu dari sampel dan referensi diukur sebagai fungsi
temperatur. Sampel dan referensi dipertahankan pada temperatur yang sama
selama percobaan.

Contoh sketsa alat DSC ditunjukkan oleh Gambar 2. TLC memiliki prinsip
kerja yakni memisahkan sampel berdasarkan perbedaan kepolaran antara sampel
dengan pelarut yang digunakan. Teknik ini biasanya menggunakan fase diam dari
bentuk plat silika dan fase geraknya disesuaikan dengan jenis sampel yang ingin
dipisahkan. Gambar 3 merupakan contoh pengujian sampel dengan TLC.
Gambar 2. Differential Scanning Calorimetry (DSC)

(Sumber: itc.tu-bs.de)
Gambar 3. Thin Layer Chromatography (TLC)

(Sumber: sorbeadindia.com)
2.3 SEDIAAN
2.3.1. Bentuk Sediaan Solida (Padat)
Ada beberapa bentuk sediaan:
1. Tablet
Tablet merupakan bahan obat dalam bentuk sediaan padat yang biasanya
dibuat dengan penambahan bahan tambahan yang sesuai. Tablet dapat berbedabeda dalam ukuran, bentuk, berat, kekerasan, ketebalan, daya hancurnya, dan
dalam aspek lainya tergantung pada cara pemakaian dan metode pembuatan
tablet tersebut. Kebanyakan tablet digunakan pada pemberian obat secara oral.
1.1.
a.
Jenis-jenis Tablet
Tablet Kompresi, yaitu tablet kompresi yang dibuat dengan mencetak
pada punch dan die dengan sekali tekanan menjadi berbagai bentuk

tablet dan ukuran, biasanya ke dalam bahan obatnya, diberi tambahan
sejumlah bahan pembantu antara lain.
b.
Tablet
Kompresi
Ganda,
yaitu
tablet
kompresi
berlapis,
dalam
pembuatannya memerlukan lebih dari satu kali tekanan. Tablet berlapis

dibuat dengan cara memasukkan satu campuran obat ke dalam cetakan
dan ditekan, demikian pula campuran obat sebagai lapisan berikutnya
dimasukkan ke dalam cetakan yang sama dan ditekan lagi, untuk
membentuk dua atau tiga lapisan tergantung pada jumlah obat yang
ditambahkan secara terpisah dalam satu tablet berlapis.
1.2.
Cara Penggunaan Tablet

Tablet Oral
a. Tablet biasa yaitu tablet yang dicetak, tidak disalut diabsorpsi disaluran
cerna dan pelepasan obatnya cepat untuk segera memberikan efek
terapi. Contoh: tablet parasetamol
b. Tablet Kunyah, dikunyah dulu baru ditelan. Contoh: Antasida.
Tablet penggunaannya melalui rongga mulut
a. Tablet Bukal, disisipkan diantara gusi dan pipi. Contoh: Tablet
Progesteron
b. Tablet Sublingual, diletakkan di bawah lidah. Tablet ini cepat melarut
dan bahan obatnya cepat diabsorpsi. Contoh: Tablet Isosorbit dinitrat
c. Tablet Hisap = Troches = LozengsTablet dihisap dan obatnya terlarut
sedikit demi sedikit dan diserap di rongga mulut. Contoh: Antiseptika
dan Local anestesi.
Tablet penggunaannya di bawah kulit
a. Tablet Implantasi, ditanamkan didalam jaringan di bawah kulit.
Tujuannya untuk pemakaian tempo lama. Contoh: Tablet Hormon KB
b. Tablet Hipodermik, tablet ini sebelum digunakan dilarutkan dulu dalam
pelarutnya.Contoh: Atropin Sulfat
c. Tablet Everfessen, tablet ini dilarutkan dulu dalam air kemudian
diminum. Contoh: Tablet Ca Sandoz
d. Tablet Vagina, pemakaiannya melalui vagina. Bentuknya pipih oval
ujungnya lebih kecil. Tablet ini mengandung antibiotika dan antibakteri.
1.3.
Kelebihan dan Kekurangan

a. Kelebihan jenis obat tablet adalah :
Berupa unit dose system
Praktis (mudah dibawa dan disimpan)
Mudah memberikan bahan khasiatnya sehingga memberikan efek

terapi yang diinginkan.
Stabil secara kimia dan fisika selama penyimpanan, transportasi

dan terkendali (yaitu tetap utuh dan tidak pecah atau cacat
bentuknya sampai waktu pemakaian.
Tidak mengandung bahan penambah yang tidak diperlukan atau

berlebihan.
Usia obat yang lebih panjang dibanding jenis sediaan lain
b. Kekurangan jenis obat tablet adalah:
Menyulitkan terapi individual
Sasaran kadar obat dalam plasma lebih sulit tercapai27
2. Pil/ Pillula
Suatu sediaan yang bulat (biasanya berbentuk bola kecil) mengandung satu
atau lebih bahan obat terdiri dari remedia dan bahan tambahan.
Bahan
tambahan mempunyai lima komponen antara lain : zat pengisi, zat pengikat, zat
pembasah, zat penabur dan zat penyalut. Pillula bentuknya kecil, bulat dan juga
dapat berupa oval berisi 100-300mg. Penampangnya kurang dari 5mm.
2.1.
Jenis Sediaan Pil Macam-macam jenis pil menurut beratnya:

a. Bolus : pil dengan massa > 300 mg
b. Pil : 60-300 mg
c. Granul : 1/3 1 grain (1 grain =64,8 mg)
d. Parvul : 1/3 grain
2.2.
Formula sediaan pil Syarat sediaan pil yang baik :

a. Homogen (ukuran, bentuk, warna, dosis)
b. Mempunyai kekenyalan, daya rekat, dan kekerasan tertentu
c. Mempunyai waktu hancur tertentu.
Pil secara umum terdiri dari bahan obat dan bahan tambahan. Bahan obat
biasanya berwujud padat, setengah padat ataupun cair. Sementara bahan
tambahan seperti bahan pengisi, pengikat, pembasah, penabur, pemecah, dan
penyalut (coating).
Bahan Pengisi Bahan pengisi berfungsi memperbesar massa pil seperti

liquritiae radix, saccharum album, dan bolus alba. Bahan pengisi dipakai
apabila jumlah bahan obat yang dipakai terlau kecil untuk dibuat sebagai
pil.
Bahan Pengikat Bahan pengikat berfungsi untuk jenis bahan obat yang
tidak dapat bercampur atau non kohesif. Jenis yang dipakai antara lain :
a. Succus liquiritiae
b. Succus dan Sacch. album aa
c. Gliserin cum tragacantha
d. Adeps lanae atau vaselin album
Bahan Pembasah seperti air, aqua gliserinaat, madu, adeps lanae
Bahan Pemecah Pil dengan bahan pengikat adeps lance atau vas album
sulit dipecah atau larut dalam lambung sehingga ditambahakan zat
pemecah seperti NaHCO3
Bahan Penabur berfungsi agar pil tidak lengket dengan kemasan atau
dengan pil lainnya. Bahan yang ditambahkan seperti likopodium, talk,
amylum oryzae, MgCO3, Liquiritiae radix.
Bahan Penyalut (coating) berfungsi untuk menjaga stabilitas bahan obat

dan menutupi rasa atau bau dari bahan obat yang tidak enak. Selain itu
bahan penyalut juga berfungsi memperbaiki bentuk pil serta untuk jenis
tertentu mencegah pil pecah atau larut di lambung. Jenis-jenis bahan
penyalut
a. Penyalut gula: Sacch. Album
b. Penyalut selaput : CMC-Na, Balsamum tolutanum, PEG,
Carbowax 6000, Perak
c. Penyalut enterik : salol, schellak, C.A.P
2.3.
Kelebihan dan Kekurangan

a. Kelebihan pil:
Mudah digunakan atau di telan.
Rasa obat dapat ditutupi dengan zat penyalut (coating).
Lebih stabil.
Baik untuk sediaan yang penyerapannya dikehendaki secara lambat.
b. Kekurangan Pil
Tidak dapat digunakan pada obat yang dikehendaki bereaksi cepat.
Bahan Obat padat/serbuk yang voluminous dan Bahan Obat cair

dalam jumlah besar
Penyimpanan lama sering menjadi keras
Ada kemungkinan ditumbuhi jamur (dapat diatasi dengan bahan

pengawet)28
3. Kapsul
Sediaan berupa serbuk obat yang diisikan dalam cangkang kapsul atau
sediaan cairan setengah padat yang dibungkus dengan kapsul dasar.
Tujuan Pembuatan Kapsul:
3.1.
Menghindari rasa pahit /tidak enak dari bahan obat
Dapat membagi obat dalam dosis yang tepat
Melindungi obat dari pengaruh luar (pengaruh oksidasi dar O2)
Kapsul Keras
Cangkang dibuat dari gelatin dengan isi serbuk, butiran, granul, tablet
kecil, bahan semi padat/cairan.
3.2.
Kapsul Lunak
Cangkang dibuat dari campuran gelatin, gliserol, sorbitol/ metilselulosa
dengan isi cairan, suspensi, bahan bentuk pasta.
4. Pulvis (Serbuk)
Campuran obat dan atau bahan kimia dalam bentuk kering halus dan
homogen . Contoh: Caladine powder, enbatic serbuk tabor
4.1.
Penggunaan Pulvis
Sebagai Obat Luar digunakan sebagai anti septik, anti fungal
Sebagai obat Dalam digunakan melalui mulut, kerongkongan, alat

pencernaan. Contoh: Pemakaian antasida
5. Pulveres
Merupakan suatu campuran yang terdiri dari 1 atau lebih bahan obat yang
dibuat dalam bentuk terbagi-bagi , yang kering , halus dan homogen.
Tujuan Dibuat dalam bentuk Pulveres:
Diinginkan dosis tertentu
Diinginkan beberapa macam obat pada
satu sediaan sesuai dengan kepentingan pengobatan
5.1.
Kekurangan Sediaan Pulveres
Rasa obat yang pahit / tidak enak
Kesulitan dalam menahan terurainya bahan yang higroskopis
Mudah menguap dan mencair28,29
2.3.2. Bentuk Sediaan Semi Solid (Semi Padat)

Sediaaan obat semisolid dapat didefinisikan sebagai produk topikal yang
ditujukan untuk aplikasi pada kuliat atau membran mukosa yang terjangkau untuk

memberikan efek hanya pada daerah tersebut (terlokalisasi) dan kadangkala sistemik
pada tempat pengaplikasiannya.
Formulasi sediaan obat semisolid biasanya kompleks dan memiliki elemen
struktural yang kompleks pula. Sediaan obat semisolid biasanya terdiri atas dua fasa
(minyak dan air), dimana salah satunya merupakan fasa kontinyu (eksternal) dan
fasa lainnya merupakan fasa terdispersi. Bahan aktif biasanya dilarutkan dalam salah
satu atau kedua fasa tersebut, sehingga menciptakan sistem tiga fasa. Sifat fisis dari
sediaan obat bergantung pada bermacam-macam faktor, termasuk ukuran dari
partikel yang terdispersi, tegangan interfasial diantara fasa-fasa, koefisien partisi dari
bahan aktif diantara fasa-fasa, dan reologi obat. Meskipun sebagan besar sediaan
semisolid mengandung agen medisinal untuk efek terapeutik, ada juga sediaan
semisolid yang tidak mengandung agen medisinal yang dimanfaatkan sebagai
proteksi dan pelumas.
Sediaan semisolid idealnya memiliki sifat-sifat seperti permukaan yang halus,
wujud yang elegan, tidak mendehidrasi, tidak terasa seperti berpasir, tidak berminyak
dan todak menimbulkan noda, serta tidak higroskopis. Selain itu, sifat fisiologis dari
sediaan semisolid yang ideal yakni tidak mengiritasi, tidak merusak fungsi
membran/kulit, larut dengan hasil sekresi kulit, serta memiliki efek sentisasi yang
rendah. Sediaan semisolid dapat diklasifikasikan sebagai salep, krim, pasta, dan gel.
1. Unguenta (Salep)
Salep merupakan sediaan semisolid yang terdiri atas fatty substance yang
dicampurkan dengan bahan aktif. Salep digunakan untuk pemakaian topikal pada
kulit atau selaput lendir. Karena memiliki bahan dasar minyak, sediaan berupa
salep dapat mengotori pakaian, biasanya ridak dapat melarutkan obat dengan
baik, serta biasanya menurunkan kemampuan drug delivery dari sistem.
2. Krim
Krim merupakan sistem emulsi semisolid dengan penampakan yang tidak
tembus cahaya jika dibandingkan dengan transluscent ointments. Krim dapat
mengandung satu atau lebih bahan obat dan berbentuk emulsi minyak dalam air
atau dispersi mikrokristal asam-asam lemak atau alkohol berantai panjang dalam
air. Konsistensi dan karakter reologinya bergantung apakah krim tersebut
merupakan jenis W/O (water dispersed in oil) atau O/W (oil dispersed in water).
Krim O/W merupakan sistem penghantaran obat yang baik, karena memiliki
penampilan yang baik serta menimbulkan rasa yang lebih nyaman setelah
pemakaian (tidak lengket).
10

3. Pasta
Pasta mirip dengan sediaan salep, hanya saja padatan yang tidak terlarut yang
terandung dalam sediaa ini jauh lebih banyak. Karenanya, sediaan ini bersifat
kaku. Pasta dapat menjadi lapisan pelindung yang baik ketika dioleskan pada
kulit. Hal ini disebabkan karena lapisan yang terbentuk pada kulit tidak mudah
rusak dan zat padat yang terdapat di dalamnya dapat menyerap dan menetralkan
berbagai bahan kimia berbahaya sebelum mencapai kulit.
4. Gel
Gel merupakan sistem semisolid koheren dimana fasa liquid tertahan di dalam
matriks polimerik yang terdiri atas gum natural atau sinteis yang memiliki derajat
keterikatan silang secara kimia maupun fisika yang tinggi. Gel atau jelly memiliki
sifat lebih encer dari salep, serta jernih dan tembus cahaya. Gel digunakan pada
membran mukosa dan untuk tujuan pelicin atau bahan obat dan umumnya
merupakan campuran sederhana dari minyak
Kelebihan dari sediaan setengah padat bila dibandingkan dengan sediaan
setengah cair adalah:
Dapat diatur daya penetrasi dengan memodifikasi basisnya
Kontak sediaan dengan kulit lebih lama
Lebih sedikit mengandung air sehingga bakteri sulit tumbuh
Lebih mudah digunakan tanpa alat bantu30
2.3.3. Bentuk Sediaan Liquida (Cair)

Sediaan obat berbentuk cair ada lima jenis yaitu sirup, eliksir, suspensi, emulsi,
dan tingtur.
1. Sirup
Sirup adalah sediaan cair berupa larutan yang mengandung sakarosa. Kadar
sakarosa dalam sirup umumnya 64% hingga 66%. Sirup sendiri dibagi lagi
menjadi 2 macam yaitu non medicated syrup/flavored vehicle syrup contohnya
seperti sirup cherry, sirup coklat dan sirup jeruk. Jenis lainnya adalah medicated
syrup atau sirup untuk obat. Di kesempatan ini akan dijelaskan tentang sirup
untuk obat. Komponen yang terdapat pada sirup umumnya adalah gula atau
pengganti gula, pengawet antimikroba, pembau, pewarna, pelarut khusus,
pengental dan stabilisator.
2. Eliksir
Jenis sediaan cair selanjutnya adalah elikisir. Eliksir adalah cairan jernih yang
mempunyai rasa manis dan mengandung larutan hidroalkohol. Eliksir bersifat
hidro alkohol sehingga dapat menjaga stabilitas obat baik yang larut dalam air
11

maupun alkohol. Biasanya digunakan untuk melarutkan obat yang tidak larut
dalam air. Eliksir memiliki tingkat kemanisan dan kekentalan yang lebih rendah
dari pada sirup serta kurang efektif dalam menutupi rasa. Eliksir mengandung
bahan pelarut lain sebagai ko-solven misalnya air, gliserin, sorbitol, propilen glikol
dan poliethilen glikol. Proporsi jumlah alkohol bergantung pada hal-hal berikut.
Zat aktif yang sukar larut dalam air, namun larut dalam alkohol maka memerlukan
kadar alkohol yang lebih besar.
Kadar alkoholnya berkisar antara 10-12% dan umumnya konsentrasinya
mencapai 44%. pemanis yang biasa digunakan adalah gula/sirup gula, sorbitol,
gliserium, dan saccharinum. Eliksir dibagi menjadi medicated elixirs dan non
medicated elixirs. Medicated elixirs adalah eliksir yang mengandung bahan
berkhasiat
obat.
Pemilihan
cairan
pembawa
zat
aktif
obat
harus
mempertimbangkan kelarutan dan kestabilan dalam air dan alkohol.

Kelebihan eliksir adalah mudah ditelan dibanding kapsul dan tablet, rasanya
enak,larutan jernih dan tidak perlu dikocok lagi sedangkan kekurangan eliksir
adalah alkohol kurang baik untuk kesehatan terutama anak-anak dan obat ini
mudah menguap sehingga harus dijauhkan dari sumber api.
Kekurangan jika dibandingkan dengan sirup leiksir biasanya kurang manis
dan kurang kental karena mengandung gula lebih sedikit maka kurang efektif
dibanding sirup dalam menutupi rasa obat yang kurang menyebangkan. Akan
tetapi eliksir mudah dibuat larutan jadi lebih disukai dibandung sirup.
3. Suspensi
Suspensi merupakan sediaan cair yang mengandung partikel padat tidak larut
yang terdispersi dalam fase cair. Beberapa suspensi dalat langsung digunakan,
sedangkan yang lain berupa campuran padat yang harus dikonstktusikan terlebih
ahulu dengan pembawa yang sesuai segera sebelum digunakan.
a.
Suspensi Oral ditujukan untuk penggunaan oral.
b.
Suspensi Topikal ditujukan untuk penggunaan pada kulit.
c.
Suspensi Tetes Telinga ditujukan untuk diteteskan pada telinga

bagian luar.
d.
Suspensi Optalmik ditujukkan untuk penggunaan pada mata.
e.
Suspensi untuk injeksi sediaan berupa suspensi serbuk dalam

medium cair yang sesuai dan tidak disuntikan secara intravena atau
kedalam saluran spinal.
f.
Suspensi untuk injeksi terkontinyusediaan padat kering dengan

bahan pembawa yang sesuai untuk membentuk larutan yang
memenuhi
semua
persyaratan
untuk
suspensi
steril
setelah
penambahan bahan pembawa yang sesuai.
12

Keuntungan suspensi adalah bahan obat tidak larut dapat bekerja sebagai
depo, yang dapat memperlambat terlepasnya obat. Beberapa bahan obat tidak
stabil jika tersedia dalam bentuk larutan. Obat dalam sediaan suspensi rasanya
lebih enak dibandingkan dalam larutan, karena rasa obat yang tergantung
kelarutannya.
Kekurangan suspensi adalah rasa obat dalam larutan lebih jelas. Tidak praktis
bila dibandingkan dalam bentuk sediaan lain, misalnya pulveres, tablet, dan
kapsul. Rentan terhadap degradasi dan kemungkinan terjadinya reaksi kimia
antar kandungan dalam larutan di mana terdapat air sebagai katalisator .
4. Emulsi
Emulsi adalah sediaan yang mengandung bahan obat cair atau cairan obat
terdispersi dalam cairan pembawa distabilkan dengan zat pengemulsi atau
surfaktan yang cocok. Suatu sistem heterogen yang tidak stabil secara
termodinamika, yang terdiri dari paling sedikit dua fase cairan yang tidak
bercampur, dimana salah satunya terdispersi dalam cairan lainnya dalam bentuk
tetesantetesan kecil, yang berukuran 0,1-100 mm, yang distabilkan dengan
emulgator/surfaktan yang cocok. Komponen dasar emulsi yaitu:
a. Fase dispers / fase internal / fase diskontinyu
zat cair yang terbagi-bagi menjadi butiran kecil kedalam zat cair lain
b. Fase kontinyu / fase eksternal / fase luar
zat cair dalam emulsi yang berfungsi sebagai bahan dasar
(pendukung) dari emulsi tersebut.
c. Emulgator
zat yang berfungsi untuk menstabilkan emulsi. Terdiri dari dua yairu
emulgator alam yang terdiri dari tumbuh-tumbuhan contohnya gom arab,
tragacant, agar-agar,chondrus. Hewani contohnya gelatin, kuning telur,
kasein,
dan
adeps
lanae.
Tanah
dan
mineral
contohnya
Veegum/Magnesium Aluminium Silikat. Jenis lainnya adalah emulgator

buatan contohnya sabun, tween, dan span.
Bahan tambahan yang sering ditambahkan pada emulsi untuk memperoleh
hasil yang lebih baik, misalnya colouris, preservatif (pengawet), antioksidant.
Preservatif adalah metil dan propil paraben, asam benzoat, asam sorbat, fenol,
kresol, dan klorbutanol, benzalkonium klorida, fenil merkuri asetat, dll. Antioksidan
adalah asam askorbat, L.tocoperol, asam sitrat, propil gallat dan asam gallat.
Terdapat dua tipe emulsi yaitu Tipe O/W (Minyak dalam Air) yaitu emulsi yang
terdiri dari butiran minyak yang tersebar kedalam air. Minyak sebagai fase internal
dan air fase eksternal. Tipe W/O (Air dalam Minyak) yaitu emulsi yang terdiri dari
13

butiran air yang tersebar kedalam minyak. Air sebagai fase internal sedangkan
fase minyak sebagai fase eksternal.
Pemakaian Emulsi ada dua yaitu dipergunakan sebagai obat dalam/peroal
umumnya emulsi tipe O/W. Dipergunakan sebagai obat luar, bisa tipe O/W
maupun W/O tergantung banyak faktor misalnya sifat zat atau jenis efek terapi
yang dikehendaki.
5. Tincture
Jenis sediaan cair selanjutnya adalah tincture yaitu larutan mengandung
etanol atau hidroalkohol dibuat dari bahan tumbuhan atau senyawa kimia.
Contohnya tingtur iodium, tingtur opium, tingtur pennyroyal, tingtur benzoin dll.
Keuntungannya etanol dapat melarutkan zat yg kurang larut dalam air. Pelarut
dapat juga bertindak sebagai pengawet (etanol antimikroba).
Keuntungan Sediaan Cair
a. Cocok untuk penderita yang sukar menelan
b. Absorpsinya lebih cepat dibandingkan sediaan oral lain
c. Homogenitas lebih terjamin
d. Dosis/takaran dapat disesuaikan
e. Dosis lebih seragam
f.
Cocok untuk obat yang mengiritasi mukosa lambung atau dirusak cairan
lambung
Kekurangan Sediaan Cair

a. Tidak untuk obat yang tidak stabil dalam air
b. Obat pahit atau baunya tidak enak sukar ditutupi
c. Sediaan tidak praktis dibawa-bawa
d. Takaran obat tidak dalam dosis terbagi kecuali sediaan dosis tunggal dan
harus menggunakan alat khusus
e. Air merupakan media pertumbuhan bakteri dan merupakan katalis reaksi
f.
2.4
Pemberian obat menggunakan alat khusu/sumber daya manusia khusus31
FARMAKOKINETIK
Farmakokinetika merupakan aspek farmakologi yang mencakup nasib obat
dalam tubuh yaitu absorbsi, distribusi, metabolisme, dan ekskresinya (ADME) 35.
Obat yang masuk ke dalam tubuh melalui berbagai cara pemberian umunya
mengalami absorpsi, distribusi, dan pengikatan untuk sampai di tempat kerja dan
menimbulkan efek. Kemudian dengan atau tanpa biotransformasi, obat diekskresi
dari dalam tubuh. Seluruh proses ini disebut dengan proses farmakokinetika dan
berjalan serentak seperti yang terlihat pada Gambar 436.
14
Gambar 4. Proses Farmakokinetika

(Sumber: Sanjoyo, Raden. et al)
Faktor faktor yang mempengaruhi farmakokinetika suatu obat ialah:
1. Absorpsi dan Bioavailabilitas
Kedua istilah tersebut tidak sama artinya. Absorpsi, yang merupakan
proses penyerapan obat dari tempat pemberian, menyangkut kelengkapan
dan kecepatan proses tersebut. Kelengkapan dinyatakan dalam persen dari
jumlah obat yang diberikan. Tetapi secara klinik, yang lebih penting ialah
bioavailabilitas. Istilah ini menyatakan jumlah obat, dalam persen terhadap
dosis, yang mencapai sirkulasi sistemik dalam bentuk utuh/aktif. Ini terjadi
karena untuk obat-obat tertentu, tidak semua yang diabsorpsi dari tempat
pemberian akan mencapai sirkulasi sestemik. Sebagian akan dimetabolisme
oleh enzim di dinding ususpada pemberian oral dan/atau di hati pada lintasan
pertamanya melalui organ-organ tersebut.
Metabolisme ini disebut metabolisme atau eliminasi lintas pertama
(first pass metabolism or elimination) atau eliminasi prasistemik. Obat
demikian mempunyai bioavailabilitas oral yang tidak begitu tinggi meskipun
absorpsi oralnya mungkin hampir sempurna. Jadi istilah bioavailabilitas
menggambarkan
kecepatan
dan
kelengkapan
absorpsi
sekaligus
metabolisme obat sebelum mencapai sirkulasi sistemik. Eliminasi lintas

pertama ini dapat dihindari atau dikurangi dengan cara pemberian parenteral
(misalnya
lidokain),
sublingual
(misalnya
nitrogliserin),
rektal,
atau
memberikannya bersama makanan36,35.

2. Distribusi
Setelah diabsorpsi, obat akan didistribusi ke seluruh tubuh melalui
sirkulasi darah. Selain tergantung dari aliran darah, distribusi obat juga
15

ditentukan oleh sifat fisikokimianya. Distribusi obat dibedakan atas 2 fase
berdasarkan penyebarannya di dalam tubuh. Distribusi fase pertama terjadi
segera setelah penyerapan, yaitu ke organ yang perfusinya sangat baik
misalnya jantung, hati, ginjal, dan otak. Selanjutnya, distribusi fase kedua jauh
lebih luas yaitu mencakup jaringan yang perfusinya tidak sebaik organ di atas
misalnya otot, visera, kulit, dan jaringan lemak. Distribusi ini baru mencapai
keseimbangan setelah waktu yang lebih lama.
Difusi ke ruang interstisial jaringan terjadi karena celah antarsel
endotel kapiler mampu melewatkan semua molekul obat bebas, kecuali di
otak. Obat yang mudah larut dalam lemak akan melintasi membran sel dan
terdistribusi ke dalam otak, sedangkan obat yang tidak larut dalam lemak
akan sulit menembus membran sel sehingga distribusinya terbatas terurama
di cairan ekstrasel. Distribusi juga dibatasi oleh ikatan obat pada protein
plasma, hanya obat bebas yang dapat berdifusi dan mencapai keseimbangan.
Derajat ikatan obat dengan protein plasma ditentukan oleh afinitas obat
terhadap protein, kadar obat, dan kadar proteinnya sendiri. Pengikatan obat
oleh protein akan berkurang pada malnutrisi berat karena adanya defisiensi
protein36,13.
3. Biotransformasi / Metabolisme
Biotransformasi atau metabolisme obat ialah proses perubahan
struktur kimia obat yang terjadi dalam tubuh dan dikatalis oleh enzim. Pada
proses ini molekul obat diubah menjadi lebih polar, artinya lebih mudah larut
dalam air dan kurang larut dalam lemak sehingga lebih mudah diekskresi
melalui ginjal. Selain itu, pada umumnya obat menjadi inaktif, sehingga
biotransformasi sangat berperan dalam mengakhiri kerja obat. Tetapi, ada
obat yang metabolitnya sama aktif, lebih aktif, atau tidak toksik.
Ada obat yang merupakan calon obat (prodrug) justru diaktifkan oleh
enzim biotransformasi ini. Metabolit aktif akan mengalami biotransformasi
lebih lanjut dan/atau diekskresi sehingga kerjanya berakhir.Enzim yang
berperan dalam biotransformasi obat dapat dibedakan berdasarkan letaknya
dalam sel, yakni enzim mikrosom yang terdapat dalam retikulum endoplasma
halus (yang pada isolasi in vitro membentuk mikrosom), dan enzim nonmikrosom. Kedua macam enzim metabolisme ini terutama terdapat dalam sel
hati, tetapi juga terdapat di sel jaringan lain misalnya ginjal, paru, epitel,
saluran cerna, dan plasma36,35.
4. Ekskresi atau Eliminasi
Obat dikeluarkan dari tubuh melalui berbagai organ ekskresi dalam
16

bentuk metabolit hasil biotransformasi atau dalam bentuk asalnya. Obat atau
metabolit polar diekskresi lebih cepat daripada obat larut lemak, kecuali pada
ekskresi melalui paru. Ginjal merupakan organ ekskresi yang terpenting.
Ekskresi disini merupakan resultante dari 3 proses, yakni filtrasi di
glomerulus, sekresi aktif di tubuli proksimal, dan rearbsorpsi pasif di tubuli
proksimal dan distal.Ekskresi obat melalui ginjal menurun pada gangguan
fungsi ginjal sehingga dosis perlu diturunkan atau intercal pemberian
diperpanjang.
Bersihan
kreatinin
dapat
dijadikan
patokan
dalam
menyesuaikan dosis atau interval pemberian obat.

Ekskresi obat juga terjadi melalui keringat, liur, air mata, air susu, dan
rambut, tetapi dalam jumlah yang relatif kecil sekali sehingga tidak berarti
dalam pengakhiran efek obat. Liur dapat digunakan sebagai pengganti darah
untuk menentukan kadar obat tertentu. Rambut pun dapat digunakan untuk
menemukan logam toksik, misalnya arsen, pada kedokteran forensik36,35.
Hal-hal lain terkait Farmakokinetik:
a. Waktu Paruh
Waktu paruh adalah waktu yang dibutuhkan sehingga setengah dari obat
dibuang dari tubuh. Faktor yang mempengaruhi waktu paruh adalah absorpsi,
metabolism dan ekskresi. Waktu paruh penting diketahui untuk menetapkan
berapa sering obat harus diberikan.
b. Onset, puncak, and durasi
Onset adalah Waktu dari saat obat diberikan hingga obat terasa kerjanya.
Sangat tergantung rute pemberian dan farmakokinetik obat Puncak, Setelah tubuh
menyerap semakin banyak obat maka konsentrasinya di dalam tubuh semakin
meningkat,
Namun konsentrasi puncak~
puncak
respon.
Durasi,
Durasi
kerjaadalah lama obat menghasilkan suatu efek terapi
2.5 BIOAVAILABILITAS
Bioavailability atau bioavailabilitas adalah jumlah seberapa banyak obat yang dapat
di absorb atau diserap oleh tubuh dari dosis yang diberikan, dan merupakan jumlah zat
aktif yag dapat masuk, diserap, dan diedarkan oleh jaringan tubuh seperti darah dan
menghasilkan efek teurapiknya, dinyatakan dalam mg%40. Bioavailabilitas oral mutlak (%
F) adalah ukuran dari paparan sistemik obat relatif oral tertutup untuk dosis intravena. %
F ditentukan dengan mengukur konsentrasi darah dari obat aktif pada interval waktu
banyak menyusul intravena dan dosis oral. Daerah di bawah waktu konsentrasi kurva
(AUC) ditentukan dari darah atau plasma konsentrasi dan bioavailabilitas oral mutlak
dihitung menggunakan persamaan berikut:
17
Ketika obat diberikan secara oral itu dapat dikenakan faktor tambahan yang tidak
terlihat dengan pemberian intravena. Ini termasuk transit gastrointestinal, sekresi
transporter dimediasi, ketidakstabilan kimia dalam saluran pencernaan dan metabolisme
lintas pertama di usus dan / atau hati. Salah satu atau semua proses ini dapat berfungsi
untuk menipiskan jumlah obat yang mencapai sirkulasi sistemik untuk dosis oral yang
diberikan. bioavailabilitas tinggi menjamin bahwa dosis efektif terendah dapat digunakan,
dan juga membatasi antar variabilitas40.
Bioavailabilitas obat dari suatu bentuk sediaan obat dapat digambarkan dengan suatu
kurva konsentrasi obat versus waktu yang sampai ke cairan biologis seperti darah,
plasma atau urine. Kajian tentang khasiat obat atau efek farmakologis suatu obat dapat
dimanifestasikan sebagai onset (kerja awal), durasi (lamanya obat berefek), dan
intensitas efek.
Untuk menentukan bioavailabilitas obat, hal yang harus diperhatikan ialah:
1. Sollubilitas (kelarutan)
Kelarutan suatu obat tergantung pada struktur komponen kimia, sifat
fisikokimia, dll, yang secara langsung akan mempengaruhi bioavailabilitas oral
obat. Kelarutan adalah variabel pembatas, dan masalah kelarutan ditangani
dengan berbagai cara, termasuk pemilihan bentuk amorf, pengurangan ukuran
partikel, dan penggunaan cosolvents37.
Istilah kelarutan obat dalam ekspresi Noyes-Whitney dapat digambarkan
sebagai:
Obat dengan tingkat kelarutan tinggi lebih cepat dilepaskan, sedangkan obat
dengan kelarutan yang buruk sering menunjukkan peepasan yang tidak lengkap
sebagai akibat atau dampak dari kelarutan pada laju disolusi dari matriks
formulasi37.
Kelarutan obat dapat diperkirakan di silico berdasarkan struktur, dan
ditentukan in vitro menggunakan standar Farmakope Amerika (USP) buffer seluruh
relevan dalam kisaran vivo pH untuk membuat profil kelarutan pH. Secara khusus,
cairan usus manusia simulasi yang berisi in vivo garam empedu yang relevan dan
surfaktan dan cairan usus nyata manusia telah dievaluasi. Sebuah basa lemah
termasuk bentuk garam berpotensi memicu atas entri di usus kecil menyebabkan
penyerapan lengkap37.
2. Permeabilitas
18

Faktor ini adalah salah satu parameter yang paling penting terutama
Penyanyi pemberian obat oral. Dalam proses penyerapan lisan, obat harus
permeabel setelah melarutkan dalam lumen GI untuk diserap ke dalam aliran
darah. Untuk formulasi CR, obat tidak hanya perlu melepaskan seluruh saluran
pencernaan tetapi juga perlu diserap seluruh saluran pencernaan. bioavailabilitas
dan kelayakan farmasi bergantung pada kedua mekanisme penyerapan dan
permeabilitas kolon dari calon obat37.
Perbedaan
situs-dependen
permeabilitas
obat
tidak
hanya
akan
menyebabkan perbedaan dalam profil penyerapan dari usus kecil bagian atas ke
usus besar dalam satu subjek, tetapi juga menyebabkan tingkat tinggi variabilitas
dalam data penyerapan karena variasi waktu transit antara subjek 37,38.
3. Disolusi
CR formulasi dirancang sedemikian rupa sehingga tingkat penyerapan obat
yang dikontrol oleh laju pelepasan obat dari formulasi, sehingga pembubaran
sebagai rate-limiting step untuk absorbsi. Untuk obat yang harus larut dalam
saluran pencernaan akan diserap ke dalam aliran darah untuk efek farmakologis
sistemik, penyerapan dapat dibatasi oleh kelarutan dan / atau laju disolusi39.
4. Difusivitas
Difusi adalah mekanisme perpindahan massa, dan Gagasan dasarnya
adalah zat terlarut berdifusi dari daerah konsentrasi tinggi ke daerah yang
berdekatan konsentrasi yang lebih rendah. Mengingat difusi dalam satu arah, x,
Hukum Pertama Fick (FFL) berhubungan fluks difusi, J (aliran massa per satuan
luas) untuk gradien konsentrasi zat terlarut, c, sehingga rumus39:
Difusi memainkan peran utama dalam sistem pengiriman obat terkontrol.

Seringkali, laju pelepasan keseluruhan dipengaruhi oleh beberapa fenomena fisik
dan kimia, misalnya, kombinasi difusi air, pembubaran obat, dan lainnya39.
19

BAB 3
PEMBAHASAN
3.1 TERAPI GEN
3.1.1 PENGERTIAN
Terapi gen adalah transfer salinan gen normal kepada sesorang, dengan
harapan ia akan mampu mensintesis salinan protein normal. Metode dari ilmu
rekayasa genetika ini untuk memproduksi fragmen DNA yang digunakan untuk
memperbanyak suatu gen atau protein menggunakan sel sebagai inang yang
nantinya akan mereplikasikan diri agar dapat menghasilkan gen atau protein dalam
jumlah banyak (tidak terbatas) dalam waktu relative lebih singkat dan efisiensi yang
lebih besar.
Terapi gen dapat menggabungkan dua jenis sel (sel hewan dengan sel
manusia) untuk menghasilkan antibodi tertentu untuk melawan penyakit. Antibodi ini
saat disuntikkan ke dalam darah yang selanjutnya dapat mencari dan menyerang sel
penyakit yang berada dalam tubuh kita, bahkan dengan ditempelkannya unsur
pelacak antibodi ini dapat menyerang sel kanker yang tersembunyi sekalipun.
Ilustrasi gambar dari terapi gen dapat dilihat dari Gambar 5
Gambar 5. Deskripsi terapi gen

(sumber : National Human Genome Research Institute's Talking Glossary http://www.genome.gov/glossary/1)
Terapi gen merupakan terapi yang sempurna dan dapat menjadi

penyembuhan untuk penyakit turunan. Indentifikasi dan kloning gen saat ini lebih
20

mudah dilakukan, namun menemukan vektor yang tepat menjadi salah satu
kesulitan dalam metode terapi gen. Walupun demikian, di masa depan akan lebih
banyak lagi penyakit yang akan ditangani dengan terapi gen. Beberapa penyakit
yang dapat diobati dengan terapi gen adalah kanker, hemofilia, Parkinson, HIV,
dll.
Secara garis besar ada dua macam cara yang biasa digunakan untuk
memasukkan gen baru ke dalam sel.
1
Terapi Gen Ex Vivo5

Sel dari sejumlah organ atau jaringan (misal kulit, sistem hemopoietik,
hati) atau jaringan tumor dapat diambil dari pasien dan kemudian dibiakkan dalam
laboratorium. Selama pembiakkan, sel itu dimasuki suatu gen tertentu untu
kterapi penyakit itu. Kemudian diikuti dengan reinfusi atau reimplementasi dari sel
tertransduksi itu ke pasien. Penggunaan sel penderita untuk diperlakukan adalah
untuk meyakinkan tidak ada respon imun yang merugikan setelah infuse atau
transplantasi.
Terapi gen ex vivo saat ini banyak digunakan pada uji klinis, kebanyakan
menggunakan vector retrovirus untuk memasukkan suatu gen ke dalam sel
penerima. Secara general, terapi gen ex vivo dijalankan seperti diagram alir
berikut:
sel diambil dari orang
penderita penyakit (pasien)
perbaiki cacat genetik

dengan cara transfer gen
seleksi dan tumbuhkan selsel yang telah dikoreksi

secara genetik (remedial cell)
infuskan atau
transplantasikan kembali ke
pasien
Gambar 6. Diagram alir proses ex vivo gen terapi

(sumber : BIOTEK.Modul 2 Bioteknologi Farmasi UI.pdf2)
Terapi Gen In Vivo5

Organ seperti paru paru, otak, jantung tidak cocok untuk terapi gen ex
vivo, sebab pembiakan sel target dan retransplantasi tidak mungkin dilakukan.
21

Oleh karena itu terapi gen somatic, dilakukan dengan pemindahan gen in vivo.
Dengan kata lain dengan memberikan gen tertentu baik secara local maupun
sistemik. Penggunaan vector retrovirus memerlukan kondisi sel target yang
sedang membelah supaya dapat terinfeksi. Akan tetapi, banyak jaringan yang
merupakan target terapi gen, sebagian besar selnya dalam keadaan tidak
membelah.
Akibatnya, sejumlah strategi diperlukan baik penggunaan system vector
virus maupun non-virus untuk menghantarkan gen terapetik ke sel target yang
sangat bervariasi seperti kulit, otot, usus, liver dan sel darah. System penghantar
gen in vivo yang ideal adalah efisiensi tinggi masuknya gen terapetik dalam sel
target. Gen itu dapat masuk ke inti sel dengan sedikit mungkin terdegradasi, dan
gen itu tetap terekspresi walaupun ada perubahan kondisi.
Penerapan terapi gen dapat dilakukan dengan dua cara, yaitu ex vivo dan
in vivo. Ex vivo (bahasa latin : keluar dari hidup) adalah proses yang terjadii di
luar organisme. Ex vivo mengacu pada proses yang dilakukan di dalam atau pada
jaringan dalam suatu lingkungan buatan luar organisme dengan perubahan
minimum kondisi alam.
Untuk perbandingan ex vivo dan in vivo dapat dilihat pada Gambar 7
Gambar 7. Proses in vivo dan ex vivo pada terapi gen

(sumber : SAFE & EFFECTIVE LONG-TERM
GENE THERAPY TECHNOLOGY - http://global-biotherapeutics.com/ry.php3 )
3.1.2
KEKURANGAN DAN KELEBIHAN

Terapi gen memiliki kelebihan dan kekurangan yang menjadikan adanya pro
dan kontra pengobatan penyakit dengan terapi gen ini. Berikut adalah kelebihan
dan kekurangan terapi gen4 :
22

3.1.2.1
Kelebihan
1. Terapi gen berpotensi untuk menghilangkan dan mencegah penyakit turunan

2. Tepat sasaran, yaitu spesifik pada jaringan yang rusak tanpa harus ke sel-sel
sehat sehingga lebih efektif dan toksisitasnya lebih rendah
3. Secara keseluruhan, biaya yang dibutuhkan lebih rendah
3.1.2.2
Kekurangan
1. Waktu hidup terapi gen yang singkat membuat pasien memerlukan terapi
lanjutan
2. Virus vektor berpotensi menyebabkan infeksi atau resksi sistem kekebalan
tubuh
3. Mutasi genetik dapat merusak DNA atau tidak sengaja diperkenalkan ke dalam
sel-sel reporudksi pasien
4. Diagnosis penyakit pada cabang bayi yang menyebabkan masalah kode etik
3.1.3
PROSES
Proses pada terapi gen memiliki tahapan pengisolasian gen, perancangan
plasmid dan primer, hingga metode yang digunakan untuk memasukkan terapi
gen ke dalam tubuh.
3.1.3.1
Isolasi
Teknik isolasi gen yang digunakan adalah metode pemisahan ekstraksi fenol
kloroform. Tahapan isolasi gen dari apoptin adalah melakukan pemisahan dari
DNA CAV dari komponen virus lain. DNA CAV memiliki ukuran sekitar 2,3 kb.
Langkah pertama yang harus dilakukan adalah mengambil virus CAV yang ingin
di kultur, dengan cara menginjeksi hati ayam broiler yang terinfeksi oleh virus
CAV menggunakan injector. Sampel dari jaringan hati kemudian dipanaskan
untuk mengurai jaringan-jaringan yang kompleks pada suhu 650C selama 20
menit.
Selanjutnya, dilakukan penambahan buffer phenol jenuh dengan volume yang
sama seperti sampel dan dikocok selama 3 menit, sebelum akhirnya
disentrifugasi pada 14000 RPM selama 5 menit. Penambahan fenol berfungsi
untuk memisahkan fasa-fasa pada virus. Fasa organik akan terikat pada fenol
dan kloroform. Fasa organik akan lebih berat dan mengikat protein-protein berat
seperti kapsid yang menyusun virus. Kemudian komponen DNA akan terikat
pada fasa cair yang lebih ringan. Fenol dipilih karena memiliki kelarutan yang
buruk sehingga protein yang larut dalam fenol akan terpisah dari cairan.
Sampel tersebut merupakan hasil isolasi gen yang mengandung DNA
Chicken Anemia Virus murni untuk kemudian dilakukan tahapan selanjutnya
dalam melakukan teknik kloning apoptin.
23

3.1.3.2
Perancangan Plasmid dan Primer
Gen apoptin yang ada pada DNA CAV kemudian di sekuens menggunakan
metode sanger. Setelah mengetahui sekuens dari apoptin, kita bisa membuat
primer yang sesuai untuk selanjutnya dilakukan metode PCR. Ada dua jenis
primer yang akan didesain, yaitu forward primer (5-end) dan reverse primer (3end).
Forward Primer
Forward primer overlap dengan 5-end dari gen of interest. Primer harus
mengandung elemen situs restriksi (yang menyediakan sticky end/ujung lengket
yang sama pada enzim restriksi pada Multiple Clonning Site dari vektor yang
dipilih), Ekstensi 5 hingga situs restriksi (dapat mempengaruhi efisiensi
pemutusan oleh enzim restriksi), Kodon start ATG (harus dimasukan ketika gen
yang ingin disisipi, tidak diberi tag pada N-Terminal atau fusion protein) dan
Overlap dengan gen of interest (Banyaknya basa pada primer yang saling
tumpang tindih dengan gen of interest hingga memberikan Tm = 60C atau
lebih). Berikut adalah prosedur proses desain dari forward primer pada gen
apoptin.
1. Ekstensi 5' (8 Arg Tag)
2. Situs restriksi BamHI (GGATCC)
Gambar 8. Situs Restriksi BamHI

Sumber: Ilustrasi Penulis
3. Kodon Start (ATG)

4. Overlap primer dengan ujung 5' dari gen apoptin mulai dari
ATG kodon start.
Berikut adalah sequence hasil dari desain forward primer:
5 AAGCTT ATG AGG AGA AGG AGA AGG AGA AGG AGA AAC GCT
CTC CAA GAA GAT ACT CCA 3
Reverse Primer
Reverse primer (3-end) overlap dengan rantai DNA komplemen sampai 3end dari gen of interest. Reverse primer harus mengandung, yakni situs restriksi
(menyediakan sticky end/ujung lengket, yang sama pada enzim restriksi pada
Multiple Clonning Site), Ekstensi 5 hingga situs restriksi, Kodon stop TAA, TAG,
dan TGA (harus ada ketika tidak ada tag pada C-Terminal),
dan
Overlap
24

dengan rantai DNA komplemen hingga ujung 3 dari gene of interest (banyaknya
basa yang tumpang tindih antara primer dengan rantai DNA komplemen juga
dihitung hingga Tm = 60C atau lebih). Berikut adalah prosedur proses desain
dari reverse primer pada gen apoptin.
1. Ekstensi 5' (12 His Tag)
Ada dua cara dalam menyisipkan histidine, yakni sebelum kodon start dan
setelah kodon start. Pada kasus ini, sebanyak 12 His tag disisipkan tepat
sebelum kodon start, dikarenakan bagian forward primer akan disambungkan di
C-Terminal gen apoptin.
2. Situs restriksi HindIII (AAGCTT)
Gambar 8. Situs Restriksi HindIII

Sumber: Ilustrasi Penulis
3. Komplemen kodon stop (TTA)

4. Overlap primer dengan rantai komplemen hingga ujung 3 gen
apoptin.
Berikut adalah sequence hasil dari desain reverse primer:
3 - GCG TTC TTC CGC TAT TCT GAC ATT GTG GTC GTG GTC GTG GTC
GTG GTC GTG GTC GTG GTC ATT CCTAGG 5
Susunan harus dibalik karena susunan primer harus dari 5 ke 3 maka
penulisan primer akhirnya menjadi :
5 - GGATCC - TTA CTG GTG CTG GTG CTG GTG CGT GTG CTG GTG
CTG GTG TTA CAG TCT TAT CGC CTT CTT GCG 3
Dengan demikian, berakhirlah proses modifikasi atau desain primer yang ada
dengan sudah melakukan penambahan 8 arginin pada N Terminal dan 12
histidine pada C Terminal. Selanjutnya, tinggal melakukan proses PCR biasa.
Namun, kita harus mengecek pada Tm (Melting temperature) dari primer, dengan
ketentuan Tm untuk kedua primer sama atau selisih 2-4 C dan diatas 60C.
Selain Tm, kandungan GC dalam primer harus berjumlah antara 40 60%.
3.1.3.3
Proses Memasukkan ke dalam Tubuh
Setelah melewati beberapa tahap persiapan terapi gen, terapi gen

dapat dimasukkan ke dalam tubuh dengan beberapa cara, seperti injeksi atau
penghirupan. Pada kasus fibrosis kistik, digunakan adenovirus yang diinaktivasi
karena virus ini menginfeksi saluran pernapasan manusia. Pasien menghirup
25

suspensi vektor, kemudian virus akan memasuki sel epitel dan mengekspresikan
gen yang normal. Namun, terapi gen apoptin untuk penyakit kanker lebih cocok
dilakukan dengan cara injeksi, dengan virus ataupun sel induk sebagai vektor
(pembawa)5.
3.1.4
BENTUK SEDIAAN YANG POTENSIAL

Seperti yang telah dituliskan diatas, didapati bahwa obat untuk terapi gen
dimasukkan ke dalam tubuh melalui mulut (oral), injeksi, dan dihirup. Dengan
demikian, sediaan yang terdapat bagi jenis obat tersebut ialah padatan, cairan,
cairan yang diuapkan atau padatan yang dibakar.
Untuk memilihin sediaan obat, ada beberapa faktor yang perlu
diperhatikan:
1. Faktor obat6
a. Rasa obat Bila pahit bias mengambil bentuk sediaan kapsul
atau emulsi6
b. Bila obat dapat dirusak oleh asam lambung Injeksi6
2. Faktor penderita6
a. Umur dan berat badan6
b. Kesadaran emergensi6
3. Faktor penyakit6
a. Area penyakit6
b. Emergensi pemakaian obat6
(a)
(b)
(c)
Gambar 9. Sediaan obat (a) Padat (b) Cair (sirop) (c) Injeksi
(Sumber: obatindonesia.info)
Untuk obat yang akan masuk ke tubuh melalui mulut atau secara oral
umumnya memiliki bentuk padat (misal pulvis, tablet, kapsul, pil, dll) atau dapat
berupa cairan (misal sirup, larutan, dll)6. Sediaan obat untuk terapi gen yang
dimasukkan ke dalam tubuh melalui injeksi memiliki bentuk sediaan cair, dimana
26

injeksi ini merupakan suatu sediaan steril yang disuntikkan ke dalam tubuh
dengan cara merobek jaringan kulit, atau melalui selaput lendir6.
Untuk obat yang dimasukkan melalui inhalasi (dihirup), penggunaannya
dengan cara disemprot (ke mulut). Misal obat asma. Keuntungannya yaitu
absorpsi terjadi cepat dan homogen, kadar obat dapat dikontrol, terhindar dari
efek lintas pertama, dapat diberikan langsung pada bronkus. Kerugiannya yaitu,
diperlukan alat dan metoda khusus, sukar mengatur dosis, sering mengiritasi
epitel paru sekresi saluran nafas, toksisitas pada jantung. Dalam inhalasi, obat
dalam keadaan gas atau uap yang akan diabsorpsi sangat cepat melalui alveoli
paru-paru dan membran mukosa pada perjalanan pernafasan9.
Bentuk bentuk sediaan ini juga akan menentukan metode pengiriman Gen
yang akan menyerap sel sel kanker. Gen-gen baru membutuhkan cara untuk
masuk ke dalam sel-sel target. Ilmuwan menggunakan berbagai wahana
pengiriman yang disebut vektor. Gen-gen umumnya dikirimkan secara in vivo,
yaitu gen-gen dimasukkan ke dalam sel-sel yang ada di dalam tubuh. Kadangkadang gen-gen dimasukkan ke dalam sel di luar tubuh (ex vivo) dan kemudian
dikembalikan kepada pasien. Beberapa metode pengiriman melibatkan7:
Virus, seperti virus penyebab flu atau penyakit infeksi lainnya. Ilmuwan
akan mengaitkan virus pada gen yang dimaksud di dalam sel. Virus
yang digunakan sudah dimodifikasi sehingga tidak akan menyebabkan
penyakit7.
Liposom, suatu globul lemak dan air yang digunakan untuk membawa
gen-gen ke dalam sel. Nanosphere adalah partikel sintetik yang juga
dapat digunakan untuk pengiriman gen. Gen-gen yang dimaksud dibawa
oleh plasmid (DNA pendek berbentuk sirkular). Liposom dan
nanosphere dapat larut ke dalam sel dan melepaskan gen-gen7.
Penyuntikan DNA secara langsung ke dalam jaringan seperti otot atau

kelenjar yang disebut mengirimkan DNA telanjang karena DNA yang
mengandung gen tidak dibungkus oleh apapun seperti plasmid atau
vektor lainnya. Metode ini cukup menjanjikan, tetapi ada ke- kurangannya
yaitu bahwa sistem imun dapat melihat DNA telanjang sebagai materi
asing dan melawannya, sehingga gen-gen biasanya hanya dapat bekerja
untuk waktu yang singkat7.
Gene gun adalah teknik dengan menggunakan butiran emas kecil

dibungkus dengan DNA yang disuntikkan secara langsung ke dalam selsel. Penggunaan gene gun dapat menghindari beberapa masalah yang
berkaitan dengan penggunaan virus untuk mengirimkan gen-gen, tetapi
27

efeknya tidak lama7.
3.2 TERAPI PROTEIN

3.2.1 PENGERTIAN
Terapi protein atau rekayasa protein sudah dikenal sejak 1980an. Terapi
protein yang pertama adalah versi rekombinan dari protein natural. Protein kemudian
dimodifikasi untuk menambah potensi klinis yang diikuti dengan peningkatan dari
protein atau glycoengineering, Fc fusion, atau konjugasi ke polietilen glikol. Obat
yang dengan basis antibody hadir sebagai terapi protein yang paling besar dan
cepat. Obat yang mengandung protein di masa depan akan direkayasa secara lebih
luas untuk memperbarui performanya, seperti antibodi dan Fc fusion yang memiliki
peningkatan fungsi yang lebih efektif atau memiliki jangka waktu keefektifan yang
panjang.
Konsep lama dari peningkatan antibodi, yaitu antibody-drug conjugates dan
bispesific antibodies telah menunjukan kemajuan hingga titik puncak kesuksesan
secara klinis. Terapi protein terbaru terus dikembangkan untuk menghasilkan
manfaat yang lebih baik dibandingkan antibodi.
Terapi protein dapat diklasifikasikan berdasarkan aktivitas farmakologi sebagai
obat dengan fungsi sebagai berikut 44:
1. Menggantikan protein yang kurang baik atau abnormal
2. Menambah jalan yang sudah ada
3. Menyediakan fungsi atau aktivitas baru
4. Mempengaruhi molekul atau organisme
5. Mengirim payload, seperti radionuklida, obat sitotoksik, atau efektor protein.
Sebagai alternative, terapi protein dapat dikelompokan menjadi beberapa tipe
molekular dengan kandungan berupa 45,46:
1. Obat berbasis antibodi
2. Koagulan
3. Factor darah
4. Protein bone morphogenetic
5. Engineered protein scaffold
6. Enzim
7. Protein Fc fusion
8. Faktor pertumbuhan
9. Hormone
10. Interferon
11. Interleukin
28

12. Trombolitik
Terapi protein pertama untuk manusia yang merupakan penurunan teknologi
rekombinan DNA adalah Human Insulin (Humulin) yang dibuat di Genentech47.
Protein dapat dikelompokan berdasarkan fungsi dan aplikasi terapinya. Sejumlah
terapi dalam satu grup mencerminkan tingkat kesulitan relative yang berhubungan
dengan pengembangan obat diberbagai kelas terapi protein. Grup I dan II
berhubungan dengan US Food and Drug Administration (FDA), serta grup III dan IV
berhubungan dengan penggunaan protein pada vaksin dan agen diagnostic 48.
Grup I : Terapi Protein dengan Aktivitas Enzimatik atau Regulasi.

o
I a : Menggantikan protein yang abnormal
I b : Menambah jalur yang sudah ada
I c : Menyediakan fungsi atau aktivitas baru
Grup II : Terapi protein dengan aktivitas target spesial

o
II a : Pencampuran dengan molekul atau organisme
II b : Menyampaikan komponen lain atau protein
Grup III : Vaksin Protein

o
III a : Melindungi dari agen asing yang dapat merusak
III b : Mengobati penyakit autoimun
III c : Mengobati kanker
Group IV : Diagnosa Protein
Mempengaruhi pembuatan keputusan klinis menggunakan teknologi dan terapi di

kelas lain untuk menjawab pertanyaan klinis
3.2.2 KEKURANGAN DAN KELEBIHAN
Terapi Protein mempunyai beberapa keuntungan, diantaranya :
1. Protein menyediakan beberapa fungsi dengan spesifikasi tinggi dan kompleks
yang tidak dapat ditiru oleh senyawa kimia sederhana
2. Karena aksi protein mempunyai spesifikasi tinggi, sedikit potensi terapi protein
untuk bercampur dengan proses biologi normal dan menyebabkan efek yang
merugikan.
3. Karena tubuh memproduksi protein yang dapat digunakan sebagai terapi secara
alami, agen tersebut dapat bertoleransi dengan baik dan sedikit kemungkinannya
untuk mendapatkan respon imun.
4. Terapi protein dapat menyediakan pengganti pengobatan yang efektif tanpa
terapi gen untuk penyakit dimana gen mengalami mutasi atau terhapus, namun
tidak dapat digunakan untuk banyak kelainan gen.
29

5. Pengembangan klinis dan waktu pengesahan FDA untuk terapi protein akan lebih
cepat dari obat dengan molekul kecil.
6. Karena protein mempunyai bentuk dan fungsi yang unik, perusahaan dapat
memperoleh proteksi paten susah untuk dicapai untuk terapi protein sehingga
protein menarik dari segi perspektif finansial jika dibandingkan dengan obat
bermolekul kecil.
7. Mempunyai potensi kemudahan dalam menghasilkan afinitas dan spesifitas
antibody manusia untuk hamper semua target kepentingan terapi, seperti
menggunakan tikus transgenic maupun phage display.
Kekurangan terapi protein adalah sebagai berikut:

1. Harganya relatif mahal karena biaya produksi tinggi sehingga dapat membatasi
akses pasien dan aplikasi klinis.
2. Pengiriman yang ditargetkan secara farmasi dari protein untuk mencapai target
instraseluler berada pada saat muda, sehingga terapi protein terbatas untuk
permukaan sel atau target ekstraselular
3. Terapi protein dapat terdenaturasi atau terproteolisasi pada usus dan tidak
bioavailable secara oral.
4. Protein, termasuk antibodi, menunjukan menunjukan kemampuan yang buruk
dalam penetrasi struktur endothelial yang terspesialisasi dari neurovaskulatur
yang dikenal sebagai blood-brain barrier.
5. Teknologi yang ada saat ini masih kurang baik untuk pengobatan penyakit
neurodegenerative kronis atau tumot yang berasal dari otak atau telah menjalar
ke otak.
3.2.3 BENTUK SEDIAAN YANG POTENSIAL
Protein secara spontan akan melipat untuk menganggap struktur asli mereka
agar sesuai dengan lingkungan di mana mereka secara alami ditemukan, misalnya,
memperlihatkan residu hidrofilik dan menyembunyikannya residu hidrofobik di dalam
core dalam lingkungan berair. Ketika protein dimurnikan dan disimpan dalam
lingkungan non-fisiologis dan terkena tekanan fisikokimia khususnya, protein
mengalami perubahan struktural untuk beradaptasi dengan perubahan lingkungan
mereka. Perubahan struktural dapat menghasilkan kombinasi varian struktural
selama penanganan dan pengolahan molekul-molekul (Santucci et al., 2008, Ferreira
et al., 2006).
Obat protein biasanya terdegradasi di saluran pencernaan oleh enzim dan
asam lambung. Protein dan peptida menjadi sasaran degradasi oleh protease dan
peptidases saat melewati membran mukosa, pada hidung atau administrasi
30

pulmonalis, e. g., oksitosin, tiroliberin (TRH). Selain itu, bioavailabilitas dan akurasi
dosis bisa menjadi masalah yang signifikan dengan rute administrasi tesebut. Oleh
karena itu, sebagian besar produk obat protein diberikan melalui suntikan untuk
memastikan bahwa molekul obat aktif mencapai aliran darah.
Sediaan dalam bentuk cair dirancang untuk menyediakan respon terapi yang
maksimum dalam populasi target yang sulit untuk menelan tablet /kapsul serta
menghasilkan efek terapik yang cepat.
Bentuk fisik dari sediaan cair menunjukkan perilaku aliran Newtonian atau
pseudoplastik dan mengikkuti bentuk wadahnya dalam suhu ruang. Sebaliknya,
semisolid tidak dapat dituang dan tidak mengalir pada shear stress yang rendah.
Berdasarkan karakteristik fisiknya, bentuk sediaan cair dapat berupa sistem dispersi
atau larutan
Degradasi protein secara kimia dan fisika dalam larutan adalah masalah yang
signifikan. Kebanyakan protein kehilangan aktivitas mereka ketika disimpan untuk
waktu yang lama dalam larutan air pada suhu kamar. Ada beberapa produk protein
cair stabil yang dapat mencapai masa simpan dua tahun, seperti pelarut seng insulin
dan albumin serum manusia, tetapi kebanyakan produk pelarut protein tidak memiliki
masa simpan di kisaran dua tahun bahkan pada suhu lemari es. Sementara
umumnya orang berpikir bahwa protein dalam keadaan padat lebih stabil daripada
dalam keadaan cair, hal ini tidak selalu benar. Tergantung pada suhu penyimpanan,
kelembaban residual dan komposisi formulasi, stabilitas protein dalam keadaan padat
bisa lebih buruk daripada, bahwa dalam keadaan cair.
Sediaan Liquid secara Parenteral (Injeksi)
Bentuk sediaan liquid parenteral dan system pengantarannya berupa obat yang
diinjeksi meliputi larutan, suspensi, dan emulsi.
a. Larutan
Larutan untuk injeksi terdiri atas campuran 2 atau lebih komponen yang
membentuk fase homogen hingga level molekular. Sebagian besar formulasi pelarut
untuk system parenteral adalah air. Namun, pelarut non-aqueous atau system
campuran aqueous dan non aqueous diperlukan untuk menstabilkan obat yang telah
terhidrolisis oleh air dan untuk menambah kelarutan. Eksipien yang termasuk dalam
system parenteral ini meliputi antioksidan, anti microbial, larutan buffer serta
substansi yang diperlukan dalam meregulasi tonisitas.
b. Suspensi
Suspensi untuk injeksi terdiri atas partikel tak larut yang terdispersi dalam media
cair dengan presentase partikel padat 0.5-30% dari total suspensi. Terjadinya
pembentukan cake dari larutan suspensi dapat diminimalkan dengan produksi sistem
terflokulasi yang terdiri atas flok atau partikel yang terkluster dan tergandeng
31

bersama-sama
dalam
struktur
terbuka.
Eksipien
dalam
suspensi
meliputi
antimicrobial, surfaktan, agen pengsuspensi dan buffer.

Namun kekurangan jika dibandingkan dengan larutan injeksi, laju absorsi obat dalam
bentuk suspensi lebih berkepanjangan karena dibutuhkan waktu lebih lama untuk
proses disintergrasi dari partikel yang tersuspensi.
c. Emulsi
Emulsi untuk injeksi berupa cairan yang tidak dapat larut antara satu sama lain,
sehingga mengandalkan agen emulsifier untuk meraih stabilitas. Namun, emulsi
parenteral jarang ditemukan untuk system administrasi obat. Formulasi emulsi yang
diinjeksi juga terbatas karena stabilizer dan emulsifier yang cocok sulit ditemukan.
Dari ketiga bentuk tersebut, maka yang yang paling sesuai dengan strategi
pemecahan yang dicanangkan adalah suspensi, dimana suspensi yang diberikan
secara injeksi ini terdiri atas protein apoptin yang terenkapsulasi dalam nanopartikel
PLGA beserta eksipien atau bahan tambahan yang mendukung kinerja system
penghantaran obat.
Enkapsulasi adalah proses atau teknik untuk menyalut inti yang berupa suatu
senyawa aktif baik itu padat, cair, gas,ataupun sel dengan suatu bahan pelindung
tertentu yang dapat mengurangikerusakan senyawa aktif tersebut. Enkapsulasi
membantu memisahkan material inti dengan lingkungannya hingga material tersebut
terlepas (release) ke lingkungan. Material inti yang dilindungi disebut core dan
struktur yang dibentuk oleh bahan pelindung yang menyelimuti inti disebut sebagai
dinding,membran, atau kapsul (Kailasapathy 2002, Krasaekoopt et al. 2003).
Protein yang ter-enkapulasi dalam nanopartikel PLGA

Poli(lactic-co-glycolic acid) atau PLGA merupakan suatu kopolimer biodegradable
yang terdiri dari asama lactat dan asam glycolic yang tersambung oleh ikatan ester.
PLGA berfungsi sebagai vehicle/pembawa dalam pengantaran obat karena memiliki
biokompatibel dan tingkat keamanannya yang tinggi serta telah mendapatkan izin
dari FA sebagai system pengantar obat. Saat masuk ke dalam tubuh, ikatan ester
akan terhidrolisis oleh esterase dalam darah dan melepaskan obat dari polimer
sehingga memungkinkan asam polimerik dimetabolisme oleh tubuh dan dibuang.
Komposisi PLGA yang paling banyak digunakan terdiri dari asam laktat dan asam
glykolik dengan rasio 50:50 yang menunjukkan laju biodegradasi terbaik
Kekurangan
FDA (Food and Drug Administration) menyatakan bahwa masalah utama dalam
sediaan jenis larutan adalah kemungkinan terjadinya kontaminasi akibat kesalahan
dalam perancangan dan control system air yang telah dipurifikasi.
32

3.3 PEMILIHAN TERAPI KANKER
3.3.1 TERAPI PROTEIN SEDIAAN LIQUID
3.3.1.1 EKSIPIEN
Berbagai macam eksipien digunakan untuk menstabilkan protein,
menekan
agregasi
protein,
mengurangi
adsorpsi
permukaan,
dan
menyediakan osmolalitas fisiologis. Stabilizer mencakup berbagai macam

molekul, termasuk gula, garam 26, polimer, surfaktan, dan asam amino pada
arginine khususnya. Efek dari eksipien tersebut pada kestabilan protein di
larutan, sebagian besar disebabkan oleh interaksinya dengan protein,
permukaan wadah, dan yang terpenting adalah air. Beberapa eksipien
menstabilkan protein di larutan dengan pengikatan langsung, sementara
eksipien lain menggunakan mekanisme berbeda yang melibatkan interaksi
tidak langsung. Pada keadaan kering, efek yang disebabkan oleh eksipien
kepada protein dapat melalui pengikatan secara langsung dan efek-efeknya
pada sifat kimia dari bubuk kering.
Jenis-jenis eksipien untuk terapi protein diantaranya sebagai berikut.
1. Protein Stabilizer
a. Larutan
Kebanyakan protein menjadi tidak aktif saat terisolasi
dari lingkungan normalnya. Gula terbukti memiliki konsentrasi
yang
tinggi
aktivitasnya
saat
dan
purifikasi
dapat
dan
efektif
menggantikan
untuk
peran
menjaga
komponen
pelindung yang biasanya terdapat pada lingkunan selular. Gula

juga preserving dapat meningkatkan titik lebur dari berbagai
model protein. Sebuah hubungan terbentuk antara aditif yang
dapat menstabilkan protein terhadap tegangan terma dan aditif
yang menstabilkan fungsi protein yang tidak stabil selama
isolasi dan penyimpanan.
b. Keadaan kering
Lyophilization
merupakan
eksipien
yang
sering
digunakan pada pembentukan produk protein yang kurang

stabil di larutan encer. Faktanya, hidrolisis yang diinduksi pH
maupun suhu, serta reaksi deamidasi harus dikurangi ketika
protein berada pada keadaan kering. Sebagai tambahan,
produk liofilisasi tidak cenderung untuk mengalami denaturasi
yang
diinduksi
oleh
geseran,
serta
preipitasi
selama
pengiriman.
33

Liofilisasi melibatkan dua vector tegangan orthogonal,
pembekuan
dan
menyebabkan
berbagai
digunakan
pengeringan.
kerusakan
macam
harus
pada
struktur
mekanisme
dapat
Kedua
proses
protein
sehingga
menstabilkan
dapat
dengan
ekspien
yang
efektivitas
protein
terhadap kedua vector tegangan. Eksipien juga harus dapat

melindungi protein dari berbagai macam tegangan yang ada
saat penyimpanan. Sebagian besar, eksipien menjadi efektif
saat
pembekuan,
bukan
saat
pengeringan,
penghilangan
mengganggu
strukturnya
pengeringan.
air
dan
dari
protein
mengarah
Selama
terkadang
pada
agregasi
irreversible sesuai dengan rekonstitusi. Perubahan struktural

protein mengarah kepada degradasi kimia. Terdapat beberapa
laporan yang menyarankan keuntungan dari meninggalkan
sejumlah kecil air pada struktur yang kering dan membuktikan
konsekuensi yang merugikan dari pengeringan yang berlebihan
karena beberapa residu polar yang tinggi yang ditemukan pada
permukaan protein harus dijaga pada kondisi hidrat untuk
mencegah denaturasi saat pengeringan.
c. Mekanisme
Mekanisme dibagi menjadi 4, dimana keempatnya
melibatkan interaksi dengan air dengan perlakuan berbeda dan
dapat menjelaskan efek stabilisasi dari eksipien, yaitu :
i. Gaya Kohesif
Eksipien
yang
meningkatkan
dapat
menstabilkan
tegangan
menggunakan gaya pada air.
protein
permukaan
akan
dengan
Ketertarikan tekanan
dengan pelarut pada garam dengan berbagai sifat

protein dapat menyebabkan garam untuk tidak masuk
ke dalam permukaan protein.
ii. Efek volume yang diabaikan

Mekanisme ini digunakan untuk menjelaskan efek dari
polimer pada kestabilan dan kelarutan protein. Molekul
yang lebih besar dari air tidak termasuk dari sekitar
permukaan protein, seperti pada gambar dibawah.
34
Gambar 10. Ilustrasi skematis

dari
efek
volume
yang
diabaikan.
Protein digambarkan dengan lingkaran hitam dan

eksipien digambarkan dengan lingkaran putiih. Garis
pada lingkaran diatas menggambarkan lapisan air
bebas dari eksipien yang diabaikan. Pengabaian secara
temodinamika
tidak
baik
dan
mempunyai
kecenderungan untuk menjadi lebih besar ketika area

permukaan mengalami kenaikan. Dengan kata lain,
eksipien memicu protein untuk mengasumsikan struktur
ekuilibrium
dan
memiliki
pelarut
yang
sedikit
mengekspos area permukaan. Oleh karena itu, volume

yang diabaikan dapat menstabilkan struktur padat asli
dari protein.
iii. Interaksi yang tidak baik dengan ikatan peptide

Permukaan protein bersifat heterogen atau bermacammacam dan mempunyai afinitas untuk ekspien protein
spesifik yang bersifat sebagai penstabil. Afinitas untuk
struktur
kimia
partikulat
dapat
ditentukan
pengukuran solubilitas. Interaksi yang
dari
tidak baik
terdapat antara eksipien penstabil dan ikatan peptide

merupakan penentu utama untuk kestabilan protein.
Interaksi tersebut berhubungan dengan gaya kohesif
dan tidak termasuk efek volume. Pada kenyataannya,
kedua mekanisme harus mendukung eksipien penstabil
untuk tinggal di
sejumlah besar air dan membenruk
kondisi tidak stabil secara entropik. Karena mekanisme

diatas menyebabkan interaksi yang tidak baik antara
35

eksipien dan protein, mekanisme tersebut bukan
sebagai protein stabilizer.
iv. Interaksi special

Berbagai macam interaksi, yang lemah maupun
yang kuat akan berkontribusi untuk interaksi secara
keseluruhan dari eksipien dengan protein. Interaksi
tersebut dapat ditentukan dari eksperimen dialysis
kesetimbangan dan dapat dikelompokan ke dalam dua
metode berbeda, yang digambarkan sebagai berikut..
Gambar 11. Skema pengikatan spesial (kiri) dan

pengecualian spesial (kanan) pada percobaan dialisis tipikal 7
Protein digambarkan dengan lingkaran putih,

molekul air dengan lingkaran biru, dan aditif dengan
lingkaran hitam. Pada metode pertama, eksipien dalam
jumlah berlebih pada permukaan di sekitar protein
dibandindingkan dengan konsentrasi pada fasa bulk
seperti pada gambar di sebelah kiri. Kasus ini
menggambarkan
interaksi
istimewa
yang
mengindikasikan bahwa konsentrasi ekspien pada

permukaan protein lebih besar daripada saat di fasa
bulk. Pada metode kedua di gambar sebelah kanan,
terdapat kelebihan air yang digambarkan dengan
lingkaran putih pada permukaan protein yang disebut
hidrasi istimewa yang mengindikasikan defisiensi dari
molekul
ekspien
di
sekitar
protein.
Osmolit
36

mendemonstrasikan hidrasi istimewa dari protein, atau
dengan kata lain osmolit secara eksklusif tidak
termasuk dari permukaan protein. Pada gula, poliol, dan
beberapa garam yang diketahui dapat menstabilkan
protein dan menurunkan solubilitas, tidak termasuk di
sekitar protein.
2. Polimer
a. Larutan
Polimer hidrofilik sering digunakan untuk menstabilkan
protein
dan
meningkatkan
rangkaian
protein,
terutama
terhadap perlakuan panas yang meningkat melalui inkorporasi

dari dextran. Manning et al mempelajari efek dari eksipien
polimer pada agregasi yang terinduksi secara termal dari
molekular
urokinase
dengan
berat
yang
rendah
dan
menemukan bahwa pati hidroksil etil (HETA) dan gelatin yang

efektif untuk menstabilkan enzim, dimana agregasi ditekan. DI
sisi lain, polivinilpirolidon (PVP) dan PEG dengan berat molekul
yang rendah ditemukan pada keadaan tidak efektif sebagai
bagian dari kondisi hidrofobik tidak selalu menstabilkan protein.
Polimer bermuatan dapat menstabilkan protein melalui
interaksi elektrostatik melalui beberapa ikatan bermuatan . Efek
ini telah didemonstrasi untuk fibroblast acidic growth factor
(aFGF)
dibandingkan
dengan
protein
spesifik,
dimana
mempunyai sekumpulan muatan positif pada permukaan.
b. Keadaan kering
Polimer telah didemonstrasi untuk menjadi aditif yang
sukses dalam menekan agregasi protein selama liofilisasi dan
untuk
mencegah
penurunan
rekonstitusi.Sebagai contoh,
dan PEG
solubilitas
selama
Dextran, CMC, DEAE-dextran,
dapat mengurangi agregasi liofilisasi BSA secara
signifikan selama penyimpanan pada 37oC. Turunan pati,

hidroksipropil -siklodekstrin (HPCD) telah digunakan untuk
menambah solubilitas dan mencegah formasi agregat yang
terinduksi
liofiliasi
yang
tidak
larut
untuk pertumbuhan
hormone, interleukin-2 (II-2) dan insulin.
37

Polimer tidak selalu menstabilkan protein pada keadaan
solid dan pada kasus tertentu mempunyai efek lain. Sebagai
contoh, dextran dengan berat molekul tertentu tidak dapat
menyediakan stabilitas untuk protein selama liofilisasi yang
disebabkan oleh halangan sterik yang mencegah ikatan
hidrogen secara efisien dengan protein. Beberapa polimer juga
dapat menyebabkan pemisahan fasa selama pembekuan yang
mempengaruhi stabilitas protein.
c. Mekanisme
Pada larutan, polimer menyediakan kestabilan bagi
protein dengan kedua mekanisme protein spesifik dan tidak
spesifik. Polimer bermuatan sebagian besar bekerja dengan
cara protein spesifik, sedangkan polar, polimer hidrofilik
mensabilkan protein dan tidak bergantung pada sifat kimia
alaminya.
Polimer
hidrofilik,
seperti
polietilen
glikol,
polisakarida, dan protein inert dapat menstabilkan protein

dengan sejumlah mekanisme. Faktor dominan diantara mereka
adalah efek crowding molekuler seperti yang telah diobservasi
untuk transportasi protein pada gel polimer dan larutan protein
terkonsentrasi.
Gambar 12. Efek crowding molekular
Pada gambar diatas, terlihat larutan encer diisi dengan

polimer .Molekul protein digambarkan dengan garis dan
lingkaran
putus-putus
yang
mengelilingi
garis
menggambarkan volume yang ditempati oleh protein folded di

sebelah kiri dan unfolded di sebelah kanan, sedangkan
polimer digambarkan dengan lingkaran hitam. Ketika molekul
38

protein yang digambarkan oleh garis tebal berada pada
kesetimbangan diantara yang asli, struktur padat yang
digambarkan dengan lingkaran penuh yang kecil dan
unfolded, struktur yang melebar, yaitu lingkaran penuh yang
besar. Hal tersebut secara termodinamika akan lebih baik
untuk menjaga struktur asli, karena memiliki radius yang kecil
sehingga area permukaan merupakan pengecualian.
3. Surfaktan
a. Larutan
Surfaktan banyak digunakan sebagai penstabil protein,
mensuppress agregasim dan membantu pelipatan protein.
Plysorbat
80
plysorbate
(plyoxyethylene
20
sorbitan
(polyoxyethylene
monooleate)
sorbitan
dan
monolaurate)
merupakan dua surfaktan yang banyak dijual untuk protein

farmasi. dan digunakan pada rentan 0.0003-0.3%. Saat
sespresi dari agregasi hamper secara universal ditelitipada
larutan, efek dari surfaktan pada tekanan termal bervariasi,
tergantung dari protein itu sendiri dan kondisi tekanannya.
Surfaktan juga telah dilaporkan sebagai penstabil efektif untuk
melindungi protein melawan denaturasi permukaan pada
larutan encer yang tidak beku.
4. Arginin
a. Larutan
Arginine bukan merupakan eksipien penstabil protein,
tetapi sangat efektif dalam menekan agregasi protein. Karena
efek tersebut dan karena aman bagi manusia, arginin sering
digunakan untuk menambah umur protein. Inklusi arginin
secara
kelipatan
kembali
menyebabkan
penambahan
perbaikan protein dengan menekan agregasi dari intermediet

yang melipat, tanpa melibatkan efek penstabil apapun dari
stgruktur itu sendiri. Arginin tidak meningkatkan stabilitas
protein, dan tidak digunakan oleh organisme osmo-toleran, dan
tidak termasuk kelas osmolit. Namun, ini tidak meningkatkan
kelarutan protein dan menekan agregasi. Arginine telah
ditunjukkan untuk menghambat agregasi dari lisozim selama
pelipatan kembali bersama denaturasi panas, meskipun tidak
39

meningkatkan kestabilan termal. Arginin dilaporkan dapat
mengurangi agregasi dari panas atau lisozim denaturasi urea,
interleukin-6, dan antibodi. Kegunaan yang menarik dari
arginine adalah stabilitasnya untuk mencegah agregasi insulin
secara sinergis. Kegunaan arginine pada suspresi protein
berkembang pesat.
Formulasi antibody dengan konsentrasi tinggi sering
menyebabkan terlalu kental untuk di suntikkan. Tambahan
arginine pada >0.15M mengurangi viskositas, dan inklusinya
dapat mempersingkat waktu. Efek arginin pada protein
konsentrasi tinggi dapat menjadi cara untuk mengurangi
formulasi viskositas.
b. Keadaan kering
Keadaan fisik dari beberapa asam amino termasuk
arginin membentuk padatan amorf, sedangkan yang lainnya
adalah padatan kristalin. Untuk L-arginin, 1.2 wt% kandungan
air residu dan Tg 42OC telah dituliskan. penambahan HCl,
H3PO4, atau H2SO4 pada arginin, cukup untuk membentuk
garam, memproduksi padatan amorf dengan vacuum drying,
namun, garam mengandung air residu yang banyak dan
menyebabkan Tg yang relatif rendah.
Laju pengurangan air memiliki efek pada struktur fisik dari
argiin kering. L-arginin pada dasarnya merupakan kristalin,
meskipun ditemukan dalam bentuk amorf melalui liofilisasi.
Kandungan air residu dari arginine kristalin lebih tinggi
dibanding bentuk amorfnya. Penambahan HCl dan H3PO4
menekan
kristalisasi
arginin
selama
vacuum
drying.
Kecenderungan kristalisasi dari arginine sebagian disebabkan

oleh jumlah interaksi yang terjasi antara asam amino dan
protein.
c. Mekanisme
Arginin akan lebih efektif pada konsentrasi tinggi diatas
0.1 M meskipun efektivitasnya pada konsentrasi rendah,
sekitar 15-50 mM. Meskipun arginin merupakan asam amino
alami, namun bukan merupakan osmolit. Interaksi dengan
protein bergantung pada konsentrasi eksipien, konsentrasi
40

buffer, pH, dan protein itu sendiri. Arginin mempunya afinitas
yang lemah untuk protein. Pengikatan arginin ke komponen
aromatic kecil digambarkan sebagai berikut.
Gambar 13. Berbagai macam interaksi eksipien dengan

protein
3.3.1.2 BIOAVAILABILITAS
Bioavailabilitas yang diakibatkan oleh faktor pengguna seperti umur
berat badan dan luas permukaan tubuh ditentukan oleh dosis apoptin dalam
tubuh. Pada anak-anak akan dibutuhkan dosis obat apoptin yang lebih sedikit
daripada orang dewasa berkaitan dengan metabolism anak yang lebih cepat.
Sebagian besar obat disediakan dalam berbagai bentuk sediaan oral.
Sifat yang paling penting dari bentuk sediaan adalah kemanjurannya
melepaskan zat aktif dalam jumlah yang cukup agar dapat menimbulkan efek
farmakologis seperti yang diharapkan. Sifat sediaan obat ini dikenal sebagai
bioavailabilitas (ketersediaan hayati). Pada perkembangan lebih lanjut,
bioavailabilitas didefinisikan sebagai kecepatan dan jumlah relatif obat yang
dapat diabsorpsi ke sirkulasi sistemik (Blanchard &Sawchuck,1979).
Arti definisi tersebut sangat penting nilai bioavailabilitas suatu sediaan
obat, karena bagi obat yang diberikan secara ekstravaskular (termasuk oral),
absorpsi merupakan tahap permulaan yang sangat menentukan ada tidaknya
khasiat obat tersebut (Ritchel, 1980).Efek terapetik suatu obat sangat
tergantung
pada kadar
obat
dalam
darah/plasma,
oleh
karena
itu
bioavailabilitas obat dari bentuk sediaannya akan mempengaruhi respon

penderita terhadap obat. Perbedaan respon penderita dapat terjadi kegagalan
pengobatan bagi penderita.
Bioavailabilitas
obat
dari
suatu
bentuk
sediaan
obat
dapat
digambarkan dengan suatu kurva konsentrasi obat versus waktu yang sampai
ke cairan biologis seperti darah, plasma atau urine. Kajian tentang khasiat
41

obat atau efek farmakologis suatu obat dapat dimanifestasikan sebagai onset
(kerja awal), durasi (lamanya obat berefek), dan intensitas efek.
Durasi dan intensitas efek farmakologis suatu obat dianggap
merupakan fungsi kadar obat pada tempat aksi atau reseptornya. Akan tetapi
menetapkan kadar obat di tempat aksinya pada manusia tidak mungkin
dilakukan, maka durasi dan intensitas efek farmakologi suatu obat merupakan
fungsi kadar obat di dalam darah (Levy, 1972) Kadar efektif minimum suatu
obat di dalam darah (KEM), dapat menggambarkan kadar minimum pada
reseptor yang diperlukan untuk dapat menimbulkan efek farmakologinya.
Padahal tersedianya obat di dalam darah dipengaruhi oleh kecepatan
absorpsi obat. Oleh karena itu dapat dikatakan kecepatan dan jumlah relatif
obat yang diabsorpsi dari bentuk sediaannya kesirkulasi sistemik, bersama
dengan kecepatan eliminasinya akan mempengaruhi durasi dan intensitas
farmakologisnya. Maka nilai bioavailabilitas suatu bentuk sediaan obat, dapat
dipergunakan
untuk
meramalkan
efek
farmakologinya.
Mutu suatu produk atau sediaan obat ditentukan oleh persyaratan

keamanan,
kemanjuran,
dan
akseptabilitas
yang
dipenuhi
ketika
dipergunakan.Oleh karena itu walaupun tidak mutlak, dengan mengetahui

nilai bioavailabilitas suatu sediaan obat kemungkinan persyaratan keamanan
dan kemanjuran secara dini dapat diramalkan Oleh karena itu, nilai
bioavailabilitas dapat dipergunakan sebagai salah satu dasar penilaian mutu
sediaan obat.
Paramater Bioavaibilitas :
Untuk menaksir atau membandingkan bioavailabilitas suatu obat
setelah pemberian oral dari suatau dosis tunggal suatu sediaan farmasi
dengan zat aktif sama digunakan parameter :
1. Konsentrasi puncak maksimum (Ctp)
2. Waktu untuk mencapai kadar puncak (tp)
3. Luas Daerah Bawah Kurva (AUC: Area Under Curva) dalam darah, serum
atau plasma
Faktor-Faktor yang Memengaruhi Bioavaibilitas :
a. Sifat fisika-kimia obat (ukuran partikel, kristal/amorf, garam, hidrasi,
kelarutan dalam
air/lemak, pH dan pK)
42

b. Bahan farmasetik dan karakteristik bentuk sediaan
- bahan farmasetik
- poses fabrikasi
- waktu disolusi obat dalam bentuk sediaan
- umur produk dan kondisi penyimpanan
c. Faktor fisiologis dan karakteristik pasien
umur pasien dan berat badan
jenis kelamin
waktu pengosongan lambung
keadaan fisik pasien
Isi lambung
pH lambung-usus
metabolisme obat ( di usus dan selama melewati hati)
ketidakpatuhan penderita: obat tidak diminum sesuai anjuran
Pemberian
beberapa
obat
secara
bersamaan
dapat
mengakibatkan interaksi in vivo
1. EKIVALENSI OBAT
a. Ekivalensi Obat Secara Kimiawi (Ekivalensi farmasetik)
Dua produk obat dinyatakan ekivalensi bila kedua produk obat terscbut
mengandung zat
aktif dan jumlah yang sama dalam bentuk sediaan obat yang sama,
serta memenuhi
syaratsyarat standart dalam Farmakope Indonesia
b.
Ekivalensi Secara Biologis (Bioekivalensi)

Dua produk obat yang ekivalensi farmasetik, diberikan dalam dosis
yang sama akan
menghasilkan bioavailabilitas yang sebanding sehingga efeknya
diharapkan akan sama.
Jika bioavailabilitasnya berbeda bermakna secara statistik, maka
kedua produk obat
tersebut disebut bioinekivalen
c.
Ekivalensi terapetik
Dua produk yang bioekivalen akan memberikan efek terapetik yang
sama pula, apabila
diberikan dengan kondisi dan dosis yang sama kepada penderita akan
menghasilkan
43

efektifitas klinik dan keamanan sebanding. Jika terdapat perbedaan
yang bermakna
secara klinik dalam bioavailabilitasnya, maka kedua produk obat
tersebut dinyatakan
inekivalen secara terapetik
d.
Ekivalensi secara klinis

Dua produk obat yang ekivalen farmasetik diberikan dalam dosis yang
sama,
memberikan efek klinis yang sama dengan melihat gejala penyakit
penderita
3.3.1.3 FARMAKOKINETIK
Farmakokinetik atau kinetika obat adalah nasib obat dalam tubuh atau
efek tubuh terhadap obat. Farmakokinetik mencakup 4 proses, yaitu proses
absorpsi (A), distribusi (D), metabolisme (M), dan ekskresi (E). Metabolisme
atau biotransformasi dan ekskresi bentuk utuh atau bentuk aktif merupakan
proses eliminasi obat. 43
Absorpsi
Absorpsi merupakan proses masuknya obat dari tempat pemberian ke
dalam darah. Bergantung pada cara pemberiannya, tempat pemberian obat
adalah saluran cerna (mulut sampai rektum), kulit, paru, otot, dan lain-lain.
Yang terpenting adalah cara pemberian obat per oral, dengan cara ini tempat
absorpsi utama adalah usus halus karena memiliki permukaan absorpsi yang
sangat luas, yakni 200 meter persegi (panjang 280 cm, diameter 4 cm,
disertai dengan vili dan mikrovili).43
Absorpsi obat meliputi proses obat dari saat dimasukkan ke dalam
tubuh, melalui jalurnya hingga masuk ke dalam sirkulasi sistemik. Pada level
seluler, obat diabsorpsi melalui beberapa metode, terutama transport aktif dan
transport pasif.
a.
Metode Absorpsi
Transport Pasif
Transport pasif tidak memerlukan energi, sebab hanya dengan proses
difusi obat dapat berpindah dari daerah dengan kadar konsentrasi tinggi ke
daerah dengan konsentrasi rendah. Transport aktif terjadi selama molekulmolekul kecil dapat berdifusi sepanjang membrane dan berhenti bila
konsentrasi pada kedua sisi membrane seimbang.
Transport Aktif
44

Transport aktif membutuhkan energy untuk menggerakkan obat dari
daerah dengan konsentrasi obat rendah ke daerah dengan konsentrasi obat
tinggi
b.
Kecepatan Absorpsi
Apabila pembatas antara obat aktif dan sirkulasi sitemik hanya sedikit
sel. Absorpsi terjadi cepat dan obat segera mencapai level pengobatan dalam
tubuh.
Detik s/d menit: SL, IV, inhalasi
Lebih lambat: oral, IM, topical kulit, lapisan intestinal, otot
Lambat sekali, berjam-jam / berhari-hari: per rektal/ sustained frelease.
c.
Faktor yang mempengaruhi penyerapan
Aliran darah ke tempat absorpsI
Total luas permukaan yang tersedia sebagai tempat absorpsi
Waktu kontak permukaan absorpsi
d.
Kecepatan Absorpsi
Diperlambat oleh nyeri dan stress. Nyeri dan stress mengurangi aliran
darah, mengurangi pergerakan saluran cerna, retensi gaster
Makanan tinggi lemak. Makanan tinggi lemak dan padat akan

menghambat pengosongan lambung dan memperlambat waktu
absorpsi obat
Faktor bentuk obat. Absorpsi dipengaruhi formulasi obat: tablet,

kapsul, cairan, sustained release, dll)
Kombinasi dengan obat lain. Interaksi satu obat dengan obat lain
dapat meningkatkan atau memperlambat tergantung jenis obat
Obat yang diserap oleh usus halus ditransport ke hepar sebelum
beredar ke seluruh tubuh. Hepar memetabolisme banyak obat sebelum

masuk ke sirkulasi. Hal ini yang disebut dengan efek first-pass. Metabolisme
hepar dapat menyebabkan obat menjadi inaktif sehingga menurunkan jumlah
obat yang sampai ke sirkulasi sistemik, jadi dosis obat yang diberikan harus
banyak.
Distribusi
Distribusi obat adalah proses obat dihantarkan dari sirkulasi sistemik
ke jaringan dan cairan tubuh. Distribusi obat yang telah diabsorpsi tergantung
beberapa faktor:
a.
Aliran darah
Setelah obat sampai ke aliran darah, segera terdistribusi ke organ
berdasarkan jumlah aliran darahnya. Organ dengan aliran darah terbesar
45

adalah Jantung, Hepar, Ginjal. Sedangkan distribusi ke organ lain seperti
kulit, lemak dan otot lebih lambat
b.
Permeabilitas kapiler
Tergantung pada struktur kapiler dan struktur obat

c.
Ikatan protein
Obat yang beredar di seluruh tubuh dan berkontak dengan protein
dapat terikat atau bebas. Obat yang terikat protein tidak aktif dan tidak dapat
bekerja. Hanya obat bebas yang dapat memberikan efek. Obat dikatakan
berikatan protein tinggi bila >80% obat terikat protein
Metabolisme
Metabolisme/biotransformasi obat adalah proses tubuh merubah
komposisi obat sehingga menjadi lebih larut air untuk dapat dibuang keluar
tubuh. Obat dapat dimetabolisme melalui beberapa cara:
a.
Menjadi metabolit inaktif kemudian diekskresikan;
b.
Metabolit aktif, memiliki kerja farmakologi tersendiri dan bisa
dimetabolisme lanjutan.
Beberapa obat diberikan dalam bentuk tidak aktif kemudian setelah
dimetabolisme baru menjadi aktif (prodrugs). Metabolisme obat terutama
terjadi di hati, yakni di membran endoplasmic reticulum (mikrosom) dan di
cytosol. Tempat metabolisme yang lain (ekstrahepatik) adalah dinding usus,
ginjal, paru, darah, otak, dan kulit, juga di lumen kolon (oleh flora usus).
Tujuan metabolisme obat adalah mengubah obat yang nonpolar (larut
lemak) menjadi polar (larut air) agar dapat diekskresi melalui ginjal atau
empedu. Dengan perubahan ini obat aktif umunya diubah menjadi inaktif, tapi
sebagian berubah menjadi lebih aktif, kurang aktif, atau menjadi toksik.
Faktor-faktor yang mempengaruhi metabolisme:
1.
Kondisi Khusus
Beberapa penyakit tertentu dapat mengurangi metabolisme, seperti
penyakit hepar seperti sirosis.

2.
Pengaruh Gen
Perbedaan gen individual menyebabkan beberapa orang dapat
memetabolisme obat dengan cepat, sementara yang lain lambat.

3.
Pengaruh Lingkungan
Lingkungan juga dapat mempengaruhi metabolisme, contohnya:
Rokok, Keadaan stress, Penyakit lama, Operasi, Cedera

4.
Usia
Perubahan umur dapat mempengaruhi metabolisme, bayi vs dewasa
vs orang tua.
46

Ekskresi
Ekskresi obat artinya eliminasi/pembuangan obat dari tubuh. Sebagian
besar obat dibuang dari tubuh oleh ginjal dan melalui urin. Obat jugadapat
dibuang melalui paru-paru, eksokrin (keringat, ludah, payudara), kulit dan
taraktusintestinal.
Organ terpenting untuk ekskresi obat adalah ginjal. Obat diekskresi
melalui ginjal dalam bentuk utuh maupun bentuk metabolitnya. Ekskresi
dalam bentuk utuh atau bentuk aktif merupakan cara eliminasi obat melui
ginjal. Ekskresi melalui ginjal melibatkan 3 proses, yakni filtrasi glomerulus,
sekresi aktif di tubulus. Fungsi ginjal mengalami kematangan pada usia 6-12
bulan, dan setelah dewasa menurun 1% per tahun. Ekskresi obat yang kedua
penting adalah melalui empedu ke dalam usus dan keluar bersama feses.
Ekskresi melalui paru terutama untuk eliminasi gas anastetik umum.43
Hal-hal lain terkait Farmakokinetik:
a.
Waktu Paruh
Waktu paruh adalah waktu yang dibutuhkan sehingga setengah dari
obat dibuang dari tubuh. Faktor yang mempengaruhi waktu paruh adalah
absorpsi, metabolism dan ekskresi. Waktu paruh penting diketahui untuk
menetapkan berapa sering obat harus diberikan.
b.
Onset, puncak, and durasi

Onset adalah Waktu dari saat obat diberikan hingga obat terasa
kerjanya. Sangat tergantung rute pemberian dan farmakokinetik obat.

Puncak, Setelah tubuh menyerap semakin banyak obat maka
konsentrasinya di dalam tubuh semakin meningkat, Namun konsentrasi
puncak-puncak respon.
Durasi, Durasi kerja adalah lama obat menghasilkan suatu efek
terapi.
41,42,423
3.3.2 TERAPI GEN ORAL

3.3.2.1 EKSIPIEN
Penambahan suatu eksipien ke dalam obat biasanya dilakukan untuk
menambah kinerja dari obat, namun eksipien ini memiliki banyak fungsi, ada yang
sebagai pengisi atau pengencer, pengikat, desintegran, lubrikan, absorben, dan
lainnya. Karena fungsinya yang beragam, maka tujuan penambahan eksipien akan
mempengaruhi jenis sediaan yang digunakan
Sediaan emulsi selain dikenal sebagai sediaan cair, juga dapat berupa
sediaan setengah padat. Penggunaan sediaan ini pada saat ini makin populer karena
dapat digunakan untuk pemakaian dalam maupun untuk pemakaian luar.
47

Emulsi merupakan suatu sistem dua fase yang terdiri dari dua cairan yang
tidak mau bercampur, dimana cairan yang satu terbagi rata dalam cairan yang lain
dalam bentuk butir-butir halus karena distabilkan oleh komponen yang ketiga yaitu
emulgator (eksipien).
Dalam pembuatan suatu emulsi, pemilihan emulgator merupakan faktor yang
penting untuk diperhatikan karena mutu dan kestabilan suatu emulsi banyak
dipengaruhi oleh emulgator yang digunakan.
Dalam pembuatan suatu emulsi digunakan suatu emulgator atau surfaktan
yang bertujuan untuk menurunkan tegangan antar muka air dan minyak serta
membentuk lapisan film pada permukaan fase terdispersi.
Secara kimia molekul surfaktan terdiri atas gugus polar dan nonpolar. Apabila
surfaktan dimasukkan ke dalam suatu sistem yang terdiri dari air dan minyak, maka
gugus polar akan terarah ke fasa air sedangkan gugus non polar terarah ke gugus ke
fasa minyak. Surfaktan yang memiliki gugus polar lebih kuat akan cenderung
membentuk emulsi minyak dalam air, sedangkan bila gugus nonpolar yang lebih kuat
maka akan membentuk emulsi air dalam minyak.
Syarat agar surfaktan dapat digunakan untuk produk pangan yaitu bahwa
surfaktan tersebut mempunyai nilai Hydrophyle Lypophyle Balance (HLB) antara 216, tidak beracun, serta tidak menimbulkan iritasi44.
Terdapat berbagai jenis macam surfaktan, salah satunya non-ionik surfakatan
yaitu merupakan jenis surfaktan yang tidak bermuatan atau tak terionisasi dalam
larutan. Surfaktan jenis ini telah digunakan sebagai eksipien pada obat kanker
payudara sebelumnya, seperti Tween 20 dan Pluronic P8545.
a) Tween 20
Tween 20 adalah jenis surfaktan non ionik yang terbentuk dari etosilasi
sorbitan yang selanjutnya ditambahkan asam lauric (C12H24O2). Tween 20
memiliki nama IUPAC Polyoxyethyllene sorbitan monooleate dengan rumus
molekul C58H114O26 dan bentuk molekul seperti dibawah :
Gambar 14. Bentuk molekul Tween 20
Sebagai eksipien, Tween 20 memiliki sifat kimia:

Tabel 1. Sifat kimia Tween 20
Densitas (g/mL)
1,1
48

Massa molar (g/mol)
1,227
Bentuk
cairan kental seperti minyak
Warna
kuning jernih
Bau
seperti asam lemak
Titik didih (C)
>100
HLB
12-16
Rantai hidrokarbon dari molekul tween berada dalam

bola minyak antara rantai-rantai span dan penyusun ini
menghasilkan atraksi Van der Walls yang efektif. Dengan ini,
lapisan antarmuka diperkuat dan kestabilan emulsi ditingkatkan
melawan pengelompokan partikel.
b) Pluronic P85
Pluronic P85 merupakan HLB surfaktan tinggi atau
polimer yang bertindak sebagai pengemulsi sekunder O/W.
Pluronic P85 merupakan kopolimer blok yang dikenal sebagai
eksipien farmasi yang dibuat di US dan British Pharmocopoeia.
Jenis surfaktan ini telah digunakan secara luas dalam formulasi
farmasi, termasuk pada penghantaran obat terapi gen dan
polipeptida. Molekul ini dapat memodifikasi respon biologi
selama terapi gen pada otot skeletasl yang menghasilkan
peningkatan ekspresi transgen dan efek terapi pada trans
genetik. Pluronic juga menjadi senyawa serbaguna yang dapat
digunakan pada elemen strututal pada sistem penghantaran
obat3. Pluronic P85 juga efisien dalam penghantaran obat
dengan
efek
ganda,
meningkatkan
kelarutan,
stabilitas
metabolisme, dan waktu sirkulasi terhadap obat. Selain itu,

Pluronic 85 juga dapat meningkatkan bioavabilitas oral dan
telah menjadi kopolimer di beberapa penghantar obat dan
sistem penghantaran gen47.
Sifat kimia Pluronic P85 berdasarkan data BASF adalah
sebegai berikut:
Tabel 2. Sifat kimia Pluronic P8548
Specific gravity
1,04
Massa molar (g/mol)
4600
Bentuk
Pasta
Warna, APHA
Max 100
49

pH
6-7,4
Viskositas (cps)
310
HLB
12-18
Kelarutan pada air 25 C
>10%
3.3.2.2 BIOAVAILABILITAS
Eksipien yang digunakan pada terapi gen ialah Tween 20 dan
Pluronic P85. Penambahan eksipien ini masih harus diuji terlebih
dahulu dari segi baik bioavailabilitas ataupun farmakokinetiknya,
sebab meskipun penambahan eksipien bertujuan untuk meningkatkan
kinerja dari senyawa aktif obat, namun belum tentu eksipien tersebut
baik dan / atau cocok dengan senyawa aktif yang digunakan. Oleh
sebab itu, setelah pemilihan suatu eksipien, makan harus diuji terlebih
dahulu. Cara uji yang paling umum ialah dengan menggunakan pohon
keputusan (decision tree), yaitu:
Gambar 15. Decision Tree
Ada 4 faktor yang menentukan bioavailabilitas seperti yang

telah disebutkan pada dasar teori, yakni solubilitas, permeabilitas,
difusivitas, dan disolusi. Karena senyawa aktifnya ialah apoptin, maka
eksipien harus kompatibel atau sesuai dengan apoptin tersebut.
a. Tween 20
Uji
yang
pernah
dilakukan
adalah
uji kelarutan
Furosemid, dimana dari uji ini didapatkan bahwa Nilai

hidroksil tween 20 lebih tinggi dibandingkan dengan tween
80 yakni 96-108 mg KOH/g, dan memiliki kelarutan dalam
50

minyak (larutan non polar) ialah 202,527 mg/mL, dimana
angka ini cukup tinggi dibandingkan eksipien lainnya26
sehingga cocok dengan protein (apoptin). Semakin besar
nilai hidroksil maka daya keelektronegatifan suatu atom
oksigen untuk menarik elektron akan semakin besar
Selain itu, tween 20 juga memiliki titik didih yang cukup
tinggi, sehingga tidak mudah terdegradasi akibat suhu,
yang akan membantu menaikkan ketahanan senyawa aktif
(apoptin) terhadap suhu.
Bentuk yang dimiliki oleh eksipien ini juga sudah
menyerupai asam lemak, atau menyerupai sebuah protein,
sehingga saat digabungkan dengan senyawa aktif, dapat
membentuk komples protein konjugasi dengan lebih
mudah. Berdasarkan hal - hal demikian, maka dari segi
bioavailabilitas eksipien dengan senyawa aktif apoptin baik
dan kompatibel.
b. Pluronic P85
Pluronic P85 memiliki kecenderungan untuk larut di air
(larutan polar), dimana hal ini mengindikasikan bahwa
eksipien Pluronic P85 ini tidak larut dalam lemak. Hal ini
dapat menjadi baik ataupun buruk bila digabungkan
dengan senyawa aktif apoptin dimana senyawa ini larut
dalam lemak. Apabila ditujukan untuk meningkatkan larutan
obat terhadap air, maka eksipien ini baik, namun bila
ditujukan untuk meningkatkan sifat kelarutan senyawa aktif,
maka eksipien ini kurang cocok.
Ketahanan pH yang dimiliki oleh eksipien ini ialah 6
hingga 7,4 (Tabel X), sehingga eksipien ini hanya baik bagi
lingkungan dengan pH sedikit asam hingga netral, dimana
baik bagi apoptin tahan hingga pH 3.
Eksipien ini cenderung digunakan dalam sediaan oral
(dimakan
langsung)
25
sehingga
dalam
konteks
permasalahan ini eksipen juga sesuai untuk apoptin bila

tujuan penambahan eksipien sesuai.
3.3.2.3 FARMAKOKINETIK
Farmakogenetik
dan
faramkogenomik
merupakan ilmu yeng mempelajari peran genetik dalam
51

mempengaruhi timbulnya variasi di antara individu
terkait respons obat yang tampak sebagai fenotip,
seperti
adanya
pengobatan
perbedaan
dan
toksisitas
tingkat
obat.
keberhasilan
Farmakogenetik
merupakan ilmu yang mempelajari pengaruh sebuah

gen terhadap respons obat dan toksisitas pada individu,
sedangkan
farmakogenomik
merupakan
pengembangan farmakogenetik yang lebih modern

dengan penerapan teknologi molekular canggih untuk
menentukan keterkaitan antara gen dengan respon obat
dalam cakupan yang lebih luas.
Dalam farmakogenetik, terdapat penggolongan
obat
yang
bereda
beda
prinsip
kerjanya.
Penggolongan tersebut yakni: tiopurin, 5- fluorourasil,

dan irinotekan. Deskripsi dari masing- masing golongan
tersebut dijelaskan seperti di bawah:
1) Tiopurin
Tiopurin merupakan golongan obat yang
terdiri dari 6-merkaptopurin (pemeliharaan accute
lymphocytic leukemia, acute myeloblastic leukemia).
2) 5-Fluorourasil
Obat ini merupakan analog urasil yang
dipakai secara luas sebagai terapi tumor solid,
meliputi kanker kolorektal dan payudara
merupakan
prodrug,
sekitar
5%
19
. Obat ini
5-FU
yang
diberikan akan mengalami aktivasi (anabolisme)

menjadi
FdUMP),
5-fluoro-2-deoksiuridin
nukleotida
sitotoksik
monofosfat
yang
(5-
berperan
sebagai anti tumor. Replikasi sel tumor dihambat

melalui penghambatan aktivitas enzim timidilat
sintase (TS/TYMS) yang diperlukan untuk sintesis
pirimidin de novo. 80- 95% 5-FU akan mengalami
katabolisme
menjadi
bentuk
metabolit
inaktif
(dihidro 5-FU) yang akan disekresikan melalui urin

dan cairan empedu. Inaktivasi ini dikatalisis oleh
enzim dihidropirimidin dehidrogenase (DPD) 20,21.
3) Irinotekan
52

Irinotekan merupakan inhibitor topoisomerase I,
yang telah diterima FDA sebagai terapi kanker
kolorektal stadium lanjut. Irinotekan merupakan
prodrug yang memerlukan aktivasi oleh enzim
karboksilesterase
menjadi
hidroksikamptoesin
(SN-38)
7-etil-10-
yang
merupakan
metabolit aktifnya. Detoksifikasi SN-38 terjadi di

hepar oleh enzim UDP-glukuronosil-transferase 1A1
(UGT1A1) menjadi SN-38 glukuronid (SN38G) yang
merupakan glukuronid inaktif yang lebih polar
sehingga mudah dieliminasi melalui empedu dan
urin 22,23,24.
3.3.2.4 MEKANISME
Terapi Gen Kanker Payudara tanpa melalui Virus
Perkembangan terapi gen secara viral (melalui virus) menjadi
terbatas untuk pasien dengan penyakit kanker payudara, dengan
percobaan secara luas yang fokus pada prinsip tingginya akses
pada tumor yang berhubungan pada kulit. Dua kesulitan terapi
gen viral yang harus diperhatikan adalah:
1. Memastikan virus dapat ditargetkan dengan teruji in vivo dan
klinis, dan
2. Ketika virus sampai ke target yang dituju, laju infeksitivitas
cukup tinggi sehingga menghasilkan efek terapi yang
signifikan, walaupun kurang akan imunogenetik49.
Biasanya, penyampaian materi genetik melibatkan metode
fisik seperti injeksi atau melakui metode pengiriman kimia.
Beberapa metode fisik transfer gen telah diuji secara klinis untuk
kanker
payudara.
Plasmid
DNA
(pDNA)
(lacZ)
berhasil
disampaikan oleh injeksi jarum-bebas untuk metastasis kulit dari

kanker payudara primer dalam tiga pasien, dan juga untuk lesi
melanoma pada 14 pasien; transgen itu detectableat messenger
RNA (mRNA). Electrotransfection digunakan untuk membantu
dalam pengiriman pDNA untuk BJMC3879 tikus susu karsinoma;
misalnya Metode yang digunakan untuk menyampaikan IL12pDNA signifikan tertunda perkembangan tumor pada tikus,
mengurangi kejadian getah bening simpul metastasis oleh lebih
dari 50% dibandingkan dengan pengendalian vektor, dan
53

mengakibatkan metastasis paru-paru yang lebih kecil. Meskipun
mengesankan
hasil
yang
telah
dihasilkan
dengan
electrotransfection, kepraktisan dan perkembangan isu yang

beredar dalam teknik ini dapat menyebabkan keengganan pasien
untuk menggunakan metode ini. Selain itu, penggunaan DNA dan
teknik seperti jet injeksi yang terbatas pada kondisi penyakit
tertentu.
Pada sebagian besar negara, sistemik pengiriman terapi
diperlukan,
memerlukan
penggunaan
penghantar
untuk
melindungi asam nukleat dari serangan nuklease. Keselamatan

dan masalah imunogenisitas terkait dengan pengiriman melalui
terapi gen virus dan keterbatasan metode pengiriman fisik telah
menyebabkan perkembangan dari berbagai pengiriman terapi gen
nonviral,
termasuk
polimer,
liposom,
atau
peptida,
atau
kombinasinya, untuk melindungi DNA dari kerusakan dan

memastikan bahwa mencapai inti DNA.
Dari berbagai banyak pilihan pengiriman nonviral yang
telah ada, telah jelas bahwa meskipun masalah keamanan jauh
lebih signifikan daripada kasus-kasus terapi gen viral, khasiat non
viral tetap menjadi tantangan terbesar yang harus terus
dikembangkan.
Strategi terapi gen nonviral berinovasi untuk meningkatkan
pengiriman asam nukleat untuk bersaing dengan kinerja terapi
gen secara viral.
Gambar 16 merupakan rincian beberapa agen yang
memiliki andil sebagai kendaraan untuk nonviral pengiriman asam
nukleat dan beberapa strategi yang telah dikembangkan untuk
meningkatkan pengiriman. Selain perbaikan dalam strategi terapi
gen nonviral, telah ada hasil mengesankan laboratorium tentang
pengaturan klinis untuk penargetan kanker payudara.
54
Gambar 16. Skema pembawa non virus terapi gen49
tgDCC-E1A
adalah
terapi
nonviral
yang
memiliki
keberhasilan secara klinis pada sembilan pasien dengan kanker

payudara metastatik. Terapi asam nukleat, pE1A-K2, yang
mengkode E1A, protein dengan aktivitas antitumor dikomplekskan
menggunakan 3 [N- (N ', N'-dimethylaminoethane) - carbamoyl]
kolesterol
(DCChol)
dan
dioleoylphosphatidylethanolamine
(DOPE). E1A DNA detectablein 14 dari 15 sampel diuji berikut

injeksi intratumoral. Dalam uji coba terpisah, terapi yang sama
disampaikan ke rongga pleura enam pasien kanker payudara.
Terapi mengatur ekspresi HER-2 dalam spesimen payudara yang
diuji, dan meningkatnya jumlah sel apoptosis terdeteksi diasites
atau pleura cairan, dibandingkan dengan mereka yang terdeteksi
awal dengan terapi gen.
ZYC300 adalah pDNA pengkodean bentuk tidak aktif dari
karsinogen
aktivator
sitokrom
P450
1B1
(CYP1B1)
yang
dikomplekskan di mikropartikel poli-DL-laktida-coglycolide. Terapi

nonviral ditujukan untuk memvaksinasi pasien terhadap CYP1B1,
yang diekspresikan pada jaringan yang paling berubah, tapi tidak
ada dari sebagian besar jaringan normal. Sebuah Tahap I klinis
percobaan yang dilakukan untuk menilai keamanan, ketahanan,
dan kelayakan, serta respon kekebalan dan aktivitas klinis
pengobatan ZYC300 terdiri 17 pasien dengan kanker stadium
lanjut, salah satunya menderita kanker payudara metastatik.
Penyakit pasien kanker payudara, yang penyakit telah menyebar
55

ke tulang dan hati, menjadi stabil setelah pengobatan ZYC300,
sebelum akhirnya mengalami kemajuan. ZYC300 terbukti sangat
bermanfaat bagi pasien tunggal.
Perkembangan kendaraan penghantaran obat yang tepat
merupakan hambatan besar yang perlu diatasi untuk terapi
berbasis genetik agar diterima dan mendapatkan persetujuan
peraturan. Meskipun kemajuan yang telah dibuat lebih dari 40
tahun penelitian menggunakan asam nukleat sebagai obat, masih
ada kekhawatiran terhadap vektor digunakan untuk memberikan
terapi ini. kekhawatiran imunologis yang mengelilingi pengiriman
virus, pengiriman kurang kuat oleh metodologi non virus, dan
kekhawatiran atas pembuatan rekombinan vektor semua harus
diatasi untuk menenangkan badan pengawas. Itu dorongan
terakhir untuk obat pribadi menawarkan kesempatan untuk peneliti
terapi gen, dengan menargetkan strategi yang disorot di sini
matang untuk eksploitasi. Terapi gen klinis untuk pasien kanker
payudara (baik virus dan nonviral) umumnya ditoleransi dengan
baik, dengan beberapa efek samping yang serius yang perlu
diperhatikan.
3.4 REGULASI
3.4.1 TERAPI GEN
Sebelum dipasarkan kepada masyarakat dan industry yang
membutuhkan, obat terlebih dahulu harus di ujikan. Pengujian
dapat
dilakukan secara in vitro maupun in vivo,
dengan
menggunakkan subjek langsung ataupun secara simulasi. Uji ini

harus bersifat transparan, sehingga hasil hasil uji tersebut setelah
selesai pengujian harus di publikasikan, dan disetujui oleh pihak
yang berwenang.
Apabila terdapat keanehan, ketidak-sesuaian data, maupun
ketidak-konsistensian data uji dan hasilnya, maka obat tidak boleh
dipasarkan. Apabila tetap dipasarkan, maka perusahaan yang
memasarkan akan ditindak oleh pihak berwenang, baik dikenakan
denda, hukuman kurungan maupun penjara, penyitaan hak, atau
gabungan ketiganya.
Namun, bila uji sesuai dan telah disetujui, maka obat
tersebut dapat dipasarkan. Cara memasarkannya akan dibahas
pada bagian berikutnya.
56

3.4.2 TERAPI PROTEIN
Pengawasan pemasukan obat dan makanan ke dalam
wilayah Indonesia diatur oleh peraturan kepala badan pengawas
obat dan makanan Republik Indonesia No 27 Tahun 2013. Yang
dimaksud obat menurut bab 1 pasal 1, obat adalah obat jadi
termasuk produk biologi, yang merupakan bahan atau paduan
bahan digunakan untuk mempengaruhi/menyelidiki sistem fisiologi
atau keadaan patologi dalam rangka penetapan diagnosis,
pencegahan, penyembuhan, pemulihan dan peningkatan kesehatan
dan kontrasepsi untuk manusia. Sedangkan produk biologi adalah
vaksin, imunosera, antigen, hormon, enzim, produk darah dan
produk hasil fermentasi lainnya (termasuk antibodi monoklonal dan
produk yang berasal dari teknologi rekombinan DNA) yang
digunakan untuk mempengaruhi / menyelidiki sistem fisiologi atau
keadaan
Persyaratan obat dan makanan yang dapat dimasukkan ke
dalam wilayah Indonesia untuk diedarkan adalah :
1. Obat dan makanan yang telah memiliki izin edar

2. Memenuhi ketentuan peraturan perundang-undangan di bidang
impor.
3. a. 1/3 (satu per tiga) dari masa simpan, untuk Obat, Obat
Tradisional, Obat Kuasi, Suplemen Kesehatan, dan Kosmetika;
b. 9 (sembilan) bulan sebelum Batas Kedaluwarsa, untuk
Produk Biologi; dan
c. 2/3 (dua per tiga) dari masa simpan, untuk Pangan Olahan.
4. Pemasukan Obat
dan
Makanan
juga
harus
mendapat
persetujuan dari Kepala Badan berupa SKI.

Prosedur Pendaftaran Obat Jadi
Ada dua tahapan Registrasi Obat, yaitu:
PraRegistrasi
Untuk pertimbangan jalur evaluasi dan kelengkapan dokumen
registrasi
Konsultasi kelengkapan dan persyaratan dokumen registrasi
Registrasi
Penyerahan dokumen registrasi
57
Gambar 17. Alur registrasi AeRO
3.5 PEMASARAN
Belakangan ini telah ditargetkan terapi yang diakui oleh FDA (Food and Drug
Administration),
data Januari 2011 .
Angka tersebut
tumbuh pesat
dengan
berkembangya penelitian mengenai genomik. Semua pengobatan yang ditargetkan

dengan terapi gen telah disediakan di Klinik Burzynski. Kobinasi dari pengobatan yang
ditargetkan ke setiap pasien berbedabeda dan ditentukan oleh onkogen yang terlibat
pada kanker yang diderita pasien. Terapi kanker payudara yang sudah diterima oleh
pihak
FDA
yakni:
Everolimus
(Fareston), Trastuzumab
(Arimidex), exemestane
(Afinitor), tamoxifen
(Herceptin), fulvestrant
(Aromasin), lapatinib
(Nolvadex), toremifene
(Faslodex), anastrozole
(Tykerb), letrozole
(Femara), pertuzumab (Perjeta), ado-trastuzumab emtansine (Kadcyla),palbociclib

(Ibrance) 17,18.
Produk terapi gen yang kami usulkan rencananya akan dipasarkan ke klinik
pengobatan yang sudah memiliki uji klinis. Deskripsi dari trial klinik dapat diakses secara
langsung dengan mencari daftar NCI dari trial klinik kanker (termasuk dana trial klinik
seperti pada studi yang dilakukan investigator pada rumah sakit dan pusat medis di
Amerika dan seluruh dunia).
Kegiatan pemasarannya biasanya melakukan beberapa hal sebagai berikut:
1. Menggunakan jasa PBF dalam mendistribusikan dan memasarkan produknya ke
rumah sakit, termasuk Rumah Sakit Khusus Kanker, apotek dan toko obat
2. Membuat acara launching/peluncuran produk baru baik dengan seminar maupun
acara simposium.
3. Menggunakan jasa detailer untuk memperkenalkan produknya kepada para
dokter.
58
59

BAB 4
KESIMPULAN
Obat merupakan zat kimia aktif atau zat yang berfungsi utama untuk menyembuhkan
penyakit. Sediaan obat terbagi menjadi tiga berdasarkan bentuknya padat, setengah
padat dan cair.
Secara umum bahan penyusun sediaan obat terbagi menajadi dua yaitu bahan obat (zat
kimia aktif) dan bahan penambah atau eksipien.
Eksipien atau bahan penolong didefinisikan sebagai zat tambahan yang digunakan
untuk merubah zat aktif menjadi bentuk sediaan farmasi yang sesuai.
Eksipien pada setiap sediaan obat berbeda-beda jenisnya, tergantung kegunaanya.
Bahan-bahan eksipien secara umum terbagi atas bahan pengisi, pengikat, pemecah,
penabur, dan penyalut.
Eksipien yang digunakan dalam terapi baik gen ataupun protein bertujuan untuk
meningkatkan kinerja apoptin
Untuk terapi gen, umumnya berbentuk oral
Untuk terapi protein umunya berbentuk injeksi
Eksipien yang baik untuk terapi gen ialah Tween 20 dan Pluronic P85
60

DAFTAR PUSTAKA
1. Noteborn, M.H., G.F. de Boer, D.J. van Roozelaar, and C. Karreman. "Characterization
of cloned chicken anemia virus DNA that contains all elements for the infectious
replication cycle." J. Virol., 1991: 3131-3139.
2. Danen, A.A., Y.H. Zhang, S.R. Leliveld, M.C. Seelen, M.W. Bolk, and et al. "Importance
of nuclear localization of apoptin for tumor-specific induction of apoptosis." J. Biol.
Chem., 2003: 27729-27736.
3. Kuusisto, H.V., K.M. Wagstaff, G. Alvisi, and et al. "The C-terminus of apoptin represents
a unique tumor cell-enhanced nuclear targetting module." Int. J. Cancer, 2008: 29652969.
4. Los, Marek, Soumya Panigrahi, Iran Rashedi, and et al. "Apoptin, a tumor-selective
killer." Biochimia et Biophysica Acta, 2009: 1336.
5. Heilman, D.W., J.G. Teodoro, M.R. Green, and et al. "Apoptin nucleocytoplasmic
shuttling is required for cell type-specific localization, apoptosis, and recruitment of the
anaphase-promoting complex/cyclosome to PML bodies." J. Virol., 2006: 7535-7545.
6. Backendrof, C., A.E. Visser, A.G. de Boer, and et al. "Apoptin: therapeutic potential of an
early sensor of carcinogenic transformation." Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol., 2008:
143-169.
7. Leliveld, S.R., Y.H. Zhang, J.L. Rohn, and et al. "Apoptin induces tumor-specific
apoptosis as a globular multimer." J. Biol. Chem., 2003: 9042-9051.
8. Leliveld, S.R., R.T. Dame, M.A. Mommaas, and et al. "Apoptin protein multimers form
distinct higher-order nucleoprotein complexes with DNA, Nucleic Acids." Res, 2003:
4805-4813.
9. Noteborn, M.H., C.A. Verschueren, A. Zantema, and et al. "Identification of the promoter
region of chicken anemia virus (CAV) containing a novel enhancer-like element." Gene,
1994: 313-318.
10. Noteborn, M.H., D. Todd, C.A. Veschueren, and et al. "A single chicken anemia virus
protein induces apoptosis." J. Virol., 1994: 346-351.
11. Phenix, K.V., B.M. Meehan, D. Todd, and et al. "Transcrtptional analysis and genome
expression of chicken anemia virus." J. Gen. Virol. , 1994: 905-909.
12. Noteborn, M.H., D. Todd, C.A. Veschueren, and et al. "A single chicken anemia virus
protein induces apoptosis." J. Virol., 1994: 346-351.
13. Maddika, S., F.J. Mendiza, K. Hauff, and et al. "Cancer-selective therapy of the future:
apoptin and its mechanism of action." Cancer Biol. Ther., 2006: 10-19.
14. Noteborn, N.H. "Chicken anemia virus induced apoptosis: underlying molecular
mechanisms." Vet. Microbiol., 2004: 89-94.
61

15. Anonim. [http://www.dexa-medica.com/news-media/newsupdate/0%2B185/Pengaruh%20Eksipien%20
Terhadap%20Keamanan%20Terapi%20Obat. Diakses tanggal 12 April 2016 (13.00
WIB)].
16. Noteborn, N.H. "Chicken anemia virus infection: Molecular basis of pathogenicity ."
Avian Pathology, 2007: 12.
17. Anonim. https://www.sciencebasedmedicine.org/stanislaw-burzynskis-personalizedgene-targeted-cancer-therapy/. Diakses tanggal 20 April 2016 (11.32 WIB).
18. Anonim. https://www.sciencebasedmedicine.org/stanislaw-burzynskis-personalizedgene-targeted-cancer-therapy/. Diakses tanggal 20 April 2016 (11.32 WIB).
19. J.W., Watters H.L, McLeod. "Cancer pharmacogenomics: current and future application".
Biochimica et Biophysica Acta, 2003: 99-111.
21. W. Lee, C. Lockhart, R.B., Khim M.L., Rothenberg. "Cancer pharmacogenomics:
powerful tool in cancer chemotheraphy and drug development". The Oncol Clin Phar,
2005: 104-110.
23. W. Lee, C. Lockhart, R.B., Khim M.L., Rothenberg. "Cancer pharmacogenomics:
powerful tool in cancer chemotheraphy and drug development". The Oncol Clin Phar,
2005: 104-110.
24. C.R., Miller H.L., McLeod. "Pharmacogenomics of cancer chemotheraphy-induced
toxicity". J Support Oncol, 2007: 009-14
25. Zhou, Yue, dkk. 2014. Improved oral bioavailability of breviscapine via a Pluronic P85modified liposomal delivery system. PubMed.
26. Wahyuningsih, Iis, dkk. 2015. UJI KELARUTAN UNTUK SELEKSI FASE MINYAK,
SURFAKTAN DAN KOSURFAKTAN DALAM PREPARASI SELF-NANO EMULSIFYING
DRUG DELIVERY SYSTEM (SNEDDS) FUROSEMID. ISBMN. Indonesia
27. Ansel,H.C. (1989). Pengatar Bentuk sediaan Farmasi. Edisi 4. Jakarta. UI Press.
96,147.
28. Ditjen POM Depkes RI. (1995). Farmakope Indonesia. ed. IV. Departemen Kesehatan
RI. Jakarta., 1024.
29. Loke, E. and Wee A. (1996). Indonesia Index of Medical Specialities. MIMS Asia.
Hongkong.
30. Betageri, G., dan Prabhu, S. (2006). Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Third
Edition.
[onlilne].
Tersedia
di
62

http://informahealthcare.com/doi/abs/10.3109/9780849393983.236. Diakses tanggal 10
April 2016.
31. Gunawan, Gan Sulistia. (2009). Farmakologi dan Terapi edisi 5. Jakarta. Departemen
Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
32. Anonim. http://kamuskesehatan.com/arti/eksipien/. Diakses tanggal 10 April 2016.
33. Srivastava, P. (2006). Excipient Development for Pharmaceutical, Biotechnology,
and
Drug
Delivery
Systems,
First
Edition.
[online].
Tersedia
di:
http://informahealthcare.com/doi/abs/10.3109/9781420004137.013. Diakses tanggal 10

April 2016.
34. Capsule Gel Library. Excipient requirements in the formulation of solid oral drug forms.
[online]. Tersedia di http://capsugel.com/media/library/excipient-requirements-in-theformulation-of-solid-oral-drugforms.pdf. Diakses tanggal 10 April 2016.
35. W. Mark Saltzman. 2001. Engineering Principles for Drug Therapy. Oxford University
Press, Inc: New York, USA
36. Sanjoyo, Raden. Obat (Biomedik Farmakologi). FMIPA Universitas Gajah Mada.
37. Zhang, Hua., Jean M. Surian. 2010. Oral Controlled Release Formulation Design and
Drug Delivery. John Wiley &Sons, Inc; United States
38. Siepmann, Juergen. Siegel, Ronald A. 2012. Fundamentals and Applications of
Controlled Release Drug Delivery. Springer: New York, USA
39. G. Ahmadi. Mass Difussion. [Literature read on http://web2.clarkson.edu, accessed at
Wednesday, April 6, 2016]. Clarkson University.
40. Chen, M. L., Shah, V., Patniak, R., Adams, W., Hussain, A., Conner, D., Mehta, M.,
Malinowski, H., Lazor, J., Huang, S. M., Hare, D., Lesko, L., Sporn, D., Williams, R.,
Bioavailability and bioequivalence: an FDA regulatory overview, Pharm. Res. 2001, 18,
16451648.
41. Hakim, Lukman. 2002. Farmakokinetika. Bursa Buku. Yogyakarta
42. Gilbadi, Milo et all. 2007. Pharmacokinetics Second Edition. Informa Healthcare,
Newyork.
43. Gunawan, Gan Sulistia. 2009. Farmakologi dan Terapi edisi 5. Jakarta: Departemen
Farmakologi dan Terapeutik Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia.
44. B. Leader, Q.J. Baca, D.E. Golan, Protein therapeutics: a summary and pharmacological
classification, Nat. Rev. Drug Discov. 7 (2008) 2139
45. G. Walsh, Biopharmaceutical benchmarks 2010, Nat. Biotechnol. 28 (2010) 917924
46. N.C. Nicolaides, P.M. Sass, L. Grasso, Advances in targeted therapeutic agents, Expert
Opin. Drug Discov. 5 (2010) 11231140.
47. D.V. Goeddel, D.G. Kleid, F. Bolivar, H.L. Heyneker, D.G. Yansura, R. Crea, T. Hirose,
A. Kraszewski, K. Itakura, A.D. Riggs, Expression in Escherichia coli of chemically
synthesized genes for human insulin, Proc. Natl Acad. Sci. USA 76 (1979) 106110.
63

Makalah TOK

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Makalah TOK

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

MAKALAH TEKNOLOGI OBAT DAN KOSMETIK

TERAPI GEN DAN TERAPI KANKER DENGAN APOPTIN

Alfiani Guntari Mahadewi

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA

MAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

Apakah apoptin itu? Mengapa dapat melawan kanker?

Bagaimanakah sediaan yang baik untuk kedua terapi tersebut?

Apa eksipien yang baik untuk kedua terapi tersebut?

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

2.1.2 KARAKTERISTIK APOPTIN

Terminal C apoptin mengandung bipartite nuclear localization seequence

. Apoptin diduga mengandung nuclear export sequence

(NES) pada residu 97-105 seperti pada Gambar 1.

Gambar 1. Struktur primer apoptin

. Sangat menarik untuk dicatat bahwa bentuk biologis aktif

apoptin rekombinan dapat membentuk multimer globular yang terpasang

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

. VP1 merupakan 51-kDa

protein kapsid dan VP2 merupakan 24-kDa spesifisitas ganda fosfatase.

. Salah satu dari mRNA CAV diduga mengkodekan protein

yang menginfeksi ayam atau

embrio atau sel yang dikulturkan.

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

memudahkan dispensasi dari senyawa obat dalam pembuatan sediaan.

membantu proses absorpsi obat atau meingkatkan kelarutan.

mengubah potensial pelarut dari barrier tersebut

Mempengaruhi transport obat dalam tubuh

Mencegah kerusakan obat sebelum sampai ke sasaran

Meningkatkan kelarutan dan bioavailabilitas

Meningkatkan stabilitas obat

Menjaga pH dan osmolaritas

Mencegah disosiasi zat aktif

Memperbaiki penampilan sediaan33,34

2.2.3 JENIS DAN CONTOH

2.2.4 CARA PEMILIHAN

netral secara fisiologis, stabil,

mempengaruhi bioavailabilitas obat, bebas dari mikroba patogen, dan tersedia

teknik termoanalisis di mana perbedaan dalam jumlah panas yang dibutuhkan

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

Gambar 2. Differential Scanning Calorimetry (DSC)

Gambar 3. Thin Layer Chromatography (TLC)

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

pembuatannya memerlukan lebih dari satu kali tekanan. Tablet berlapis

Cara Penggunaan Tablet

Kelebihan dan Kekurangan

Berupa unit dose system

Praktis (mudah dibawa dan disimpan)

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

Mudah memberikan bahan khasiatnya sehingga memberikan efek

Stabil secara kimia dan fisika selama penyimpanan, transportasi

Tidak mengandung bahan penambah yang tidak diperlukan atau

Usia obat yang lebih panjang dibanding jenis sediaan lain

b. Kekurangan jenis obat tablet adalah:

Menyulitkan terapi individual

Sasaran kadar obat dalam plasma lebih sulit tercapai27

Jenis Sediaan Pil Macam-macam jenis pil menurut beratnya:

Formula sediaan pil Syarat sediaan pil yang baik :

Bahan Pengisi Bahan pengisi berfungsi memperbesar massa pil seperti

MMAKALAH OBAT TERAPI GEN TERAPI PROTEIN DENGAN APOPTIN

Bahan Pembasah seperti air, aqua gliserinaat, madu, adeps lanae

Bahan Penyalut (coating) berfungsi untuk menjaga stabilitas bahan obat

Kelebihan dan Kekurangan