PRAKTIKUM V

I. Judul : Uji Bial ( Uji Fehling)

II. Tujuan : Membuktikan adanya pentosa
III. Dasar Teori
Uji Bial, uji untuk mengetahui adanya pentosa. Furtural yang terbentuk dari
pentosa akan membentuk warna biru hijau ketika bereaksi dengan reagen bial.
Hidroksimefuktural yang terbentuk dari heksosa akan bereaksi dengan orsinol
membentuk warna kuning kecoklatan.
Uji bial merupakan uji yang didasari oleh konversi pada gula pentosa seperti
ribose di dalam keadaan asam dan panas menjadi senyawa furfural, yang kemudian
bereaksi dengan orsinol (3,5-hidroksi toluena) dan mengeluarkan warna hijau. Reagen
yang digunakan pada pengujian bial ini adalah pereaksi bial 0,3% larutan orsinol dan
FeCl3 di dalam HCL pekat. HCL yang terdapat pada reagen pada akan mendehidrasi
gula menjadi furfural. Jika dalam sampel terdapat gula pentosa larutan akan berwarna
hijau dalam kurun waktu 10 menit. Seperti misalnya pada RNA yang memiliki ribose
yang adalah gula pentosa sehingga akan bereaksi dengan orsinol dalam kondisi
mendidih akan berwarna hijau dan membentuk struktur yang kompleks dengan
adsorbansi maksimum 665 mm. sedangkan golongan heksosa ditandai keberadaannya
jika hasil uji larutan berwarna coklat sampai keabu-abuan. Pada umumnya uji Bial
dipakai untuk membedakan adanya pentosa dan heksosa dalam suatu sampel larutan
(Sumardjo,2008).
Namun, dalam hal ini karena pereaksi Bial tersebut tidak tersedia sehingga digantikan
menggunakan pereaksi berupa Fehling A dan Fehling B.
Pereaksi Fehling adalah oksidator lemah yang merupakan pereaksi khusus
untuk mengenali aldehida.
Pereaksi Fehling terdiri dari dua bagian, yaitu Fehling A dan Fehling B.
Fehling A adalah larutan CuSO4, sedangkan Fehling B merupakan campuran larutan
NaOH dan kalium natrium tartrat. Pereksi Fehling dibuat dengan mencampurkan kedua
larutan tersebut, sehingga diperoleh suatu larutan yang berwarna biru tua. Dalam
pereaksi Fehling, ion Cu2+ terdapat sebagai ion kompleks. Pereaksi Fehling dapat
dianggap sebagai larutan CuO. Dalam pereaksi ini ion Cu2+ direduksi menjadi ion Cu+
yang dalam suasana basa akan diendapkan sebagai Cu2O. Dengan larutan glukosa 1%,
 pereaksi Fehling menghasilkan endapan berwarna merah bata, sedangkan apabila
digunakan larutan yang lebih encer misalnya larutan glukosa 0,1%, endapan yang
terjadi berwarna hijau kekuningan. (www.gudangmateri.com/2010).

IV. Bahan dan Alat

1. Amilum, sukrosa, dextosa, maltosa, lerulosa, dan laktosa masing-masing dalam
larutan 1%
2. Pereaksi Fehling A dan B
3. Tabung reaksi
4. Pipet tetes
5. Lampu Bunsen/pembakar spiritus
6. Penjepit tabung

IV. Prosedur kerja

a. Masukkan 2 mL pereaksi Fehling ke dalam tabung reaksi.
b. Panaskan campuran tersebut pada pembakar spiritus/lampu Bunsen.
c. Ulangi langkah a – b untuk, sukrosa, amilum, dextosa, maltosa, lerulosa, dan
laktosa.
d. Pemanasan dalam reaksi ini bertujuan agar gugus aldehida pada sampel terbongkar
ikatannya dan dapat bereaksi dengan ion OH- membentuk asam karboksilat. Cu2O
(endapan merah bata) yang terbentuk merupakan hasil sampingan dari reaksi
pembentukan asam karboksilat.

V. Hasil percobaan
No. Zat Uji Hasil Uji Fehling A dan B Pentosa (+/-)
1 Amilum 1% Biru tua -
2 Sukrosa 1% Biru tua -
3 Dextosa 1% Merah bata ++
4 Maltosa 1% Cokelat +
5 Laktosa 1% Merah bata ++
6 Lerulosa 1% Merah bata ++
 Gambar 1 Uji Fehling

VI. Pembahasan
Dalam percobaan Uji Fehling, sampel Dextosa, Sukrosa, Amilum, Laktosa,
Maltosa dan Lerulosa yang diuji dengan pereaksi Fehling (Fehling A + Fehling B)
pada masing-masing tabung dan kemudian dipanaskan , maka Laktosa, Dextosa, dan
Lerulosa akan menghasilkan endapan merah bata. Hal yang menyebabkan
dihasilkannya endapan merah bata ini karena ini berasal dari Fehling yang memiliki
ion Cu2+ direduksi menjadi ion Cu+ yang dalam suasana basa akan diendapkan
berwarna merah bata (Cu2O). Sedangkan pada sampel amilum, dan sukrosa yang diuji
dengan pereaksi Fehling (Fehling A + Fehling B) dan kemudian dipanaskan ternyata
larutan berwarna biru dengan sedikit endapan merah bata. Sedangkan Maltosa yang
diuji dengan pereaksi Fehling (Fehling A + Fehling B) menghasilkan warna coklat.
Hal ini disebabkan karena amilum merupakan polisakarida yang tidak dapat
bereaksi positif dengan Fehling. Amilum bukan gula pereduksi yang tidak mempunyai
gugus aldehid dan keton bebas, sehingga tidak terjadi oksidasi antara amilum +
larutan Fehling, maka tidak terbentuk endapan dan larutan tetap berwarna biru setelah
dipanaskan. Begitupula dengan zat uji lain yang merupakan polisakarida yang tidak
dapat bereaksi positif dengan Fehling.
VII. Kesimpulan
1. Semua gula sederhana (monosakarida dan disakarida) merupakan gula
pereduksi. Sedangkan polisakarida bukan merupakan gula pereduksi. Kandungan
gula pereduksi dapat ditunjukkan dengan pereaksi Fehling.
2. Monosakarida dapat mereduksi pereaksi Fehling karena pada monosakarida
terdapat gugus aldehid, yang akan dioksidasi oleh pereaksi Fehling menjadi
karboksilat.
3. Pereaksi Fehling dapat dipakai untuk identifikasi adanya gula reduksi (seperti
glukosa) dalam air kemih pada penderita penyakit diabetes.

VII. Pertanyaan
1. Jenis uji lain untuk menunjukkan adanya pentose :
- Uji Bial
- Uji Fehling
2. Prosedur Uji Bial :
a. Masukkan 5 tetes larutan uji ke dalam tabung reaksi
b. Tambahkan 10 tetes pereaksi Bial dan 2 tetes HCL pekat.
c. Campurlah dengan baik, lalu panaskan di atas api kecil sampai timbul
gelembung gas ke permukaan larutan.
3. Contoh aldosa : glukosa dan galaktosa
Contoh ketosa : fruktosa

Daftar Pustaka
(www.gudangmateri.com/2010 diakses tanggal 20 September 2012).
Estein, Yasid dan Nursanti, Lisda. 2006. Penuntun Praktikum BIOKIMIA Untuk
Mahasiswa Analis. Yogyakarta : ANDI.