Analisis Kualitatif Dan Kuantitatif Protein Serta Nitrat Dalam Sarang

Burung Walet Putih (Collocolia fuciphaga)

Zara Syafitri Solihat

Fakultas Matematikan dan Ilmu Pengetahuan Alam
Program Studi Farmasi
Universitas Islam Bandung

Abstract

Swallow nest contains various useful chemical content. Protein is the most chemical content
in swallow nest. Beside useful chemical content, swallow nest contains nitrates that can harm
human body. This research was conducted to find out the levels of protein and nitrate in
white swallow nest. Qualitative determination of protein and nitrate were carried out by spot
test method. Whereas the determination of total protein levels was carried out using Kjeldahl
method by process destruction, distillation and titration. Then determination of nitrates used
UV-Vis spectrophotometer. Results showed that the average levels of protein in the white
swallow nest is 36% and nitrate 9.031 ppm and 1.525 ppm.
Keywords: White swallow nest, protein, nitrate, Kjeldahl method, UV-Vis spectrophotometer

PENDAHULUAN

Sarang burung walet dibangun dari air liur
burung walet yang kemudian mengeras
dan berwarna putih. Sarang burung walet
ini dipercaya mempunyai khasiat sebagai
obat kuat, obat penurun panas dan obat
penyakit paru-paru, namun hingga kini
belum dapat dibuktikan secara ilmiah.
Menurut Direktorat Gizi, Departemen
Kesehatan RI, 1979, Komposisi 100 gram
sarang burung putih adalah kalori 281;
kadar air 24,8 g; protein 37,5 g; kalsium
18,285 mg; karbohidrat 32,1 g; fospor 18,0
mg; lemak 0,3 g; besi 3,0 mg. Kandungan
kimia yang paling besar adalah protein,
yaitu sekitar 37,5%. Dengan demikian
sarang burung walet dianjurkan sebagai
makanan sumber protein (zat pembangun)
yang baik (Koswara, 2009).
Protein merupakan komponen penting atau
komponen utama sel hewan atau manusia.
Oleh karena sel itu merupakan pembentuk
tubuh kita, maka protein yang terdapat
dalam makanan berfungsi sebagai zat
utama dalam pembentukan dan
pertumbuhan tubuh. Disamping digunakan
untuk pembentukan sel-sel tubuh, protein
juga dapat digunakan sebagai sumber
energi apabila tubuh kita kekurangan
karbohidrat dan lemak (Poedjiadi,
1994:82).
Selain mengandung beberapa senyawa
kimia bermanfaat, ternyata dalam sarang
burung walet yang diimpor ke luar negeri
sering ditemukan senyawa nitrat yang
kadarnya melebihi dari batas normal.
dimana WHO mentolelir kandungan nitrat
dalam makanan berjumlah 44 ppm
(Powlson, 2008).
Nitrat dibentuk dari asam nitrit yang
berasal dari amonia melalui proses
oksidasi katalitik. Sumber nitrat dalam
sarang burung walet tersebut dapat
disebabkan oleh kotoran feses dan urin
dari burung walet itu sendiri yang
mencemari sarang walet. Di dalam kotoran
walet tersebut terdapat mikroba dimana
mikroba dapat menguraikan nitrogen
organik menjadi amonia, kemudian
dioksidasikan menjadi nitrat dan nitrit.
Oleh karena nitrit dapat mudah
dioksidasikan menjadi nitrat, maka
kandungan nitrat dalam sarang walet akan
tinggi (Trawang, 2011).
Apabila nitrat dan nitrit yang masuk
bersamaan dengan makanan, maka
banyaknya zat makanan akan menghambat
absorbsi dari kedua zat. Hal ini akan
mengakibatkan mikroba usus mengubah
nitrat menjadi nitrit sebagai senyawa yang
lebih berbahaya. Nitrit dapat bereaksi
dengan amina dan amida membentuk
senyawa N-nitroso yang kebanyakan
bersifat karsinogenik. Nitrat dalam jumlah
besar dapat menyebabkan gangguan diare
campur darah disusul oleh konvulsi, koma
dan bila tidak tertolong akan meninggal.
Keracunan kronis dapat menyebabkan
depresi, sakit kepala. Metemoglobin
adalah hemoglobin yang di dalamnya ion
Fe2+ diubah menjadi ion Fe3+ dan
kemampuannya untuk mengangkut
oksigen telah berkurang dan menyebabkan
darah menjadi coklat. Metemoglobin dapat
terjadi apabila hemoglobin terpapar
oksidator termasuk nitrat (Ompusunggu,
2009).
Berdasarkan hal diatas, untuk mengetahui
ada atau tidaknya kandungan nitrat dalam
sarang burung walet tersebut maka akan
dilakukan uji kualitatif menggunakan
beberapa pereaksi dan uji kuantitatif
menggunakan spektrofotometer. Selain itu,
kandungan protein dalam sarang burung
walet dapat kemungkinan dijadikan suatu
sediaan farmasi, namun sebelumnya
diperlukan penentuan kadar yang lebih
akurat dan presisi menggunakan metode
Kjeldahl dan uji kualitatif menggunakan
metode Biuret.
METODOLOGI PENELITIAN
Tahap prosedur yang dilakukan meliputi
pengumpulan bahan sarang burung walet
putih, penanganan sampel sarang burung
walet, uji kualitatif dan kuantitatif protein,
uji kualitatif dan kuantitatif nitrat pada
sarang burung walet putih.
ALAT
Pipet volume, pipet tetes, tabung reaksi,
timbangan, spatula, spektrofotometer UV-
Vis (Shimadzu UV-1800), gelas kimia,
labu ukur, Erlenmeyer, pipet ukur,
mikropipet, kertas saring, plat tetes, labu
Kjeldahl, buret, klem, seperangkat alat
destilasi.
BAHAN
Sarang burung walet putih, akuadestilata,
asam klorida, fenol, asam sulfat, besi (II)
sulfat, difenilamin, natrium hidroksida,
asam borat, tembaga (II) sulfat, kalium
sulfat, indikator Tashiro (campuran 0,2%
metil merah dalam alkohol dan 0,1%
metilen biru dalam alkohol), natrium
karbonat, metil oranye.
PROSEDUR KERJA
Pengumpulan bahan
Sarang burung walet putih yang digunakan
diperoleh dari peternakan burung walet
yang berada di daerah Jawa Barat, yaitu
Bogor, Cianjur dan Sukabumi.
Penanganan sampel
Sarang dibersihkan terlebih dahulu dari
bulu dan kotoran burung yang menempel
pada sarang. Kemudian sampel
dimasukkan ke dalam air panas sampai
sampel berbentuk kenyal dan tidak keras.
Penetapan kadar protein pada sarang
burung walet putih
1. Analisis kualitatif (metode Biuret)
Larutan protein dibuat alkalis dengan
NaOH 40% kemudian ditambahkan
larutan CuSO4 0,1%. Uji ini
memberikan reaksi positif apabila
timbul warna merah violet atau biru
violet.
2. Analisis kuantitatif (metode Kjeldahl)
Sampel sebanyak 1 g didekstruksi
dengan menambahkan 1 g garam
Kjeldahl yang berupa campuran CuSO4
dan K2SO4 (1:10) yang berperan
sebagai katalis. Kemudian ditambahkan
7 mL H2SO4 pekat dan 1 mL H2O2
30%. Panaskan labu dengan
menggunakan pemanas elektrik atau
heating mantel sampai larutan dalam
labu tersebut berubah warna sampai
warna hijau bening. Setelah larutan
hasil dekstruksi berubah warna,
dinginkan labu sampai asap yang timbul
dari larutan hasil dektruksi telah hilang.
Kemudian larutan hasil dekstruksi
tersebut diencerkan dengan akuades
sebanyak 70 mL. NH3 yang sudah
terikat dengan asam borat dititrasi oleh
HCl, menggunakan indikator Tashiro
sampai berubah warna dari hijau
menjadi ungu. Hasil pengenceran dari
tahap dekstruksi dimasukan ke dalam
labu destilasi dan ditambah NaOH 30%
untuk membebaskan NH3, kemudian
ditampung dalam 10 mL H3BO3 3%
sampai kurang lebih 75-80 mL.
Penetapan kadar nitrat pada sarang
burung walet putih
1. Uji kualitatif
Sampel direaksikan dengan difenilamin
dalam H2SO4 pekat. Jika sampel positif
mengandung nitrat maka akan terbentuk
warna biru tua. Selain itu, sampel
direaksikan dengan H2SO4 encer dan
FeSO4 padat dalam tabung reaksi,
kemudian campuran tersebut dikocok.
Setelah itu tabung reaksi disimpan
dalam keadaan miring lalu ditambahkan
H2SO4 pekat, kemudian larutan tersebut
diamati, jika positif mengandung nitrat,
maka akan terbentuk lapisan cincin
berwarna cokelat.
2. Uji kuantitatif (spektrofotometer UV-
Vis)
a. Penetapan λ maksimal
Panjang gelombang maksimum
ditentukan dari larutan standar
KNO3 500 ppm yang diencerkan
menjadi 20 ppm. Larutan KNO3 20
ppm dimasukkan ke dalam tabung
reaksi sebanyak 2 mL kemudian
ditambah 100 µL HCl 12 N dan 50
µL larutan fenol 2%, kemudian
larutan tersebut dikocok dan
ditambahkan 2,4 mL H2SO4 33,5 N
kemudian dikocok diamkan 10
menit, kocok lagi dan ukur
absorbansinya pada rentang 300-
600 nm.
b. Pembuatan kurva kalibrasi KNO3
Kurva kalibrasi dibuat dari larutan
standar KNO3 500 ppm yang
diencerkan menjadi 6; 8; 10; 12; 14;
16; 18 dan 20 ppm. Masing-masing
konsentrasi diambil 2 mL dan
dimasukkan ke dalam tabung reaksi
kemudian ditambah 100 µL HCl 12
N dan 50 µL larutan fenol 2%,
kemudian larutan tersebut dikocok
dan ditambahkan 2,4 mL H2SO4
33,5 N kemudian dikocok diamkan
10 menit, kocok lagi dan ukur
absorbansinya pada panjang
gelombang maksimal yaitu 386,20
nm. Kemudian dibuat kurva
hubungan antara absorbansi (Y)
dengan konsentrasi KNO3.
c. Penetapan kadar
Kadar nitrat dalam sarang burung
walet putih ditentukan dengan cara
menimbang sarang burung walet
putih sebanyak 0,5 g dalam 100 mL
akuades dan diaduk hingga larut.
Dari larutan tersebut dipipet
sebanyak 2 ml kemudian masukan
dalam tabung reaksi dan tambahkan
100 µL HCl 12 N dan 50 µL larutan
fenol 2%, kemudian larutan tersebut
dikocok. Tambahkan 2,4 mL H2SO4
33,5 N kemudian kocok dan
diamkan selama 10 menit, kocok
lagi dan ukur absorbannya pada
panjang gelombang 386,20 nm.
Sebagai larutan blangko digunakan
2 mL akuades ditambah dengan 100
 µL HCl 12 N, 50 µL larutan fenol
2% dan 2,4 mL H2SO4 33,5 N yang
dicampur sama dengan larutan
sampel. Kemudian konsentrasi
nitrat dalam sampel dihitung dari
kurva kalibrasi. Selanjutnya
ditentukan kadar nitrat dalam sarang
burung walet putih.
Kinerja analitik
1. Linieritas
Penentuan liniearitas suatu metoda
dilakukan dengan cara membuat 8 buah
larutan standar KNO3 dengan
konsentrasi 6; 8; 10; 12; 14; 16; 18 dan
20 ppm. Selanjutnya dilakukan
pengukuran absorbansi untuk setiap
konsentrasi standar pada kondisi
optimum dan dibuat persamaan
garisnya dengan metoda regresi liniear
(y = bx + a).
2. LOD dan LOQ
LOD dan LOQ ditentukan berdasarkan
persamaan linier yang diperoleh pada
uji liniearitas. LOD dan LOQ dihitung
dari rerata kemiringan garis dan standar
deviasi kurva standar yang diperoleh,
selanjutnya limit deteksi ditentukan dari
hasil bagi antara 3 simpangan baku
standar deviasi dengan kemiringan garis
kurva standar. Sedangkan limit
kuantitasi ditentukan dari hasil bagi
antara 10 standar deviasi dengan
kemiringan garis kurva standar.
3. Presisi
Larutan standar dan sampel yang telah
disiapkan sesuai dengan prosedur
pembuatan larutan sampel kemudian
diukur dengan spektrofotometer UV-Vis
sebanyak 6 kali ulangan.
4. Akurasi
Penentuan ketepatan (akurasi)
dilakukan dengan membuat larutan
standar dan sampel masing masing
sebanyak 6 buah pada konsentrasi yang
sama, kemudian mengukur masing-
masing larutan dengan spektrofotometer
UV-Vis.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Hasil penentuan kadar protein
1. Analisis kualitatif (metode Biuret)
Dari hasil uji Biuret pada ketiga sampel,
terbentuk warna biru violet pada ketiga
sampel tersebut. Warna biru violet
terjadi karena terbentuknya senyawa
komplek Cu pada gugus –CO dan –NH
pada asam amino dalam protein.
2. Analisis kuantitatif (metode Kjeldahl)
Penetapan kadar protein dalam sampel
sarang burung walet dengan
menggunakan metoda Kjeldahl, yang
terdiri dari tiga tahap. Tahap yang
pertama adalah tahap dekstruksi. Tahap
ini merupakan proses untuk memecah
ikatan kimia yang terdapat dalam
sampel sarang burung walet menjadi
senyawa yang lebih sederhana. Hasil
akhir dari proses ini terbentuknya
amonium sulfat (NH4)2SO4. Dimana
reaksi yang terjadi adalah:
N organik + H2SO4  (NH4)2SO4 +
H2O + CO2
Kemudian masuk ke tahap kedua yaitu
proses destilasi. Proses ini merupakan
proses pemisahan amonia dari digestat
yang dilakukan melalui peningkatan pH
dengan penambahan NaOH yang
mengubah ion amonium NH4+ menjadi
gas NH3. Nitrogen dipisahkan dengan
mendestilasi gas amonia yang terbentuk
dan mengumpulkannya di medium
penerima yaitu asam borat.
(NH4)2SO4 + 2NaOH  2NH3 ↑ +
Na2SO4 + 2H2O
2NH3 + 2H2O  2NH4OH
2NH4OH + 4H3BO3  (NH4)2B4O7 +
7H2O
Tahap yang terakhir adalah proses
titrasi. Tahap ini dilakukan untuk
menentukan jumlah nitrogen dengan
cara mentitrasi kompleks amonium
borat dengan asam hidroklorida (HCl)
dengan adanya indikator Tashiro
 (campuran metil merah dan metilen Sedangkan sampel ketiga tidak
biru). menunjukkan adanya cincin cokelat.
(NH4)2B4O7 + 2HCl + 5H2O → 2NH4Cl Adanya cincin cokelat dalam sampel
+ 4H3BO3 pertama dan kedua tidak terlalu jelas
NH3 + 2H3BO3 + HCl → NH4Cl + terlihat. Hal ini dikarenakan oleh
2H3BO3 keberadaan nitrat yang sangat sedikit
Hasil pengukuran protein pada sarang dalam sampel sarang burung walet.
burung walet putih dapat dilihat pada Cincin cokelat yang timbul disebabkan
tabel 1 berikut: karena terbentuknya [Fe(NO)]2+ seperti
yang terlihat dalam reaksi berikut:
Tabel 1 Hasil penentuan kadar protein dengan
metoda Kjeldahl
2NO3- + 4H2SO4 + 6Fe2+ → 6Fe3+ +
Kadar
2NO↑ + 4SO42- + 4H2O
Sampel
Berat sampel
Kadar
protein
protein
Kadar total
protein rata-
Fe2+ + NO↑ → [Fe(NO)]2+
(g) rata-rata
(% ) rata (% )
(% )

34,08
2. Uji kuantitatif nitrat
1 1,07 32,62 33,33 Hasil scanning dari larutan standar
33,29 KNO3 pada konsentrasi 6, 8, 10, 12,
43,08
2 1,05 37,58 39,20 36
14, 16, 18, 20 ppm didapatkan bahwa
36,95 panjang gelombang maksimum terjadi
34,91
pada panjang gelombang 386,2 nm.
3 1,06 36,18 35,47
35,32
Dari konsentrasi tersebut diperoleh
absorbansi seperti yang terdapat dalam
tabel 2.
Hasil penentuan kadar nitrat Tabel 2 Hasil absorbansi dari standar KNO3
pada λ 386,2 nm
1. Uji kualitatif nitrat
Analisis kualitatif nitrat dilakukan No
Konsentrasi Absorbansi
(x) (y)
dengan mereaksikan masing-masing
sampel dengan difenilamin dalam 1 6 0,235
2 8 0,363
H2SO4 pekat. Hasil positif ditunjukkan 3 10 0,407
dengan terbentuknya warna biru tua. 4 12 0,542
5 14 0,61
Namun dari hasil reaksi yang terjadi 6 16 0,778
antara ketiga sampel sarang burung 7 18 0,882

walet dengan difenilamin, hasil 8 20 0,975

reaksinya tidak menunjukkan

perubahan warna seperti yang terjadi
Dari tabel 2, dapat dibuat kurva
antara standar (KNO3) dengan
kalibrasi standar seperti pada Gambar 1
difenilamin.
dibawah ini:
Kemudian sampel sarang burung walet
direaksikan dengan H2SO4 encer dan y = 0,0533x - 0,094
FeSO4 padat dalam tabung reaksi, 1,5
R² = 0,9907
absorbansi

kemudian dikocok dan disimpan dalam 1

keadaan miring, setelah itu ditetesi
0,5
H2SO4 pekat. Hasil positif akan
keberadaan nitrat ditunjukkan dengan 0
terbentuknya cincin cokelat dalam 0 10 20 30
konsentrasi (ppm)
larutan tersebut. Dari ketiga sampel
Gambar 1 Kurva kalibrasi standar
sarang burung walet yang diuji, hanya
sampel pertama dan kedua yang Dari persamaan linier yang didapat dari
terdapat cincin cokelat dalam larutan. kurva kalibrasi, dapat ditentukan kadar
 nitrat dalam sampel sarang burung UV-1800) untuk penentuan kadar
walet dengan terlebih dahulu KNO3 sebesar 1,542 ppm. Nilai ini
mengkonversikan kadar KNO3 menjadi menunjukkan bahwa sinyal antara nitrat
NO3-. Kadar nitrat dapat dilihat pada dan blangko dapat dibedakan pada
tabel 3 berikut: konsentrasi terendah 1,542 ppm.
Instrumen tidak dapat membedakan
Tabel 3 Hasil kadar nitrat dalam sarang burung
walet putih
sinyal antara blangko dan nitrat pada
konsentrasi dibawah nilai ini. Limit
Konsentrasi kuantitasi ditentukan untuk mengetahui
Konsentrasi Konsentrasi
Sampel Absorbansi rata-rata
KNOɜ (ppm) NOɜ (ppm) konsentrasi terendah yang dapat
(ppm)
ditentukan oleh suatu instrumen pada
0,686 14,634 8,983 tingkat ketelitian dan ketepatan yang
1 8,908
0,673 14,39 8,833 yang baik. Nilai limit kuantitasi
0,73 15,459 9,489 berdasarkan hasil penelitian adalah
2 9,155 5,142 ppm. Konsentrasi analit yang
0,672 14,371 8,822
0,038 2,477 1,52
terukur di bawah nilai ini memberikan
3
0,039 2,495 1,531
1,525 ketelitian dan ketepatan yang kurang
baik.

Dari hasil yang terdapat dari Tabel 3, 3. Presisi

dapat diketahui bahwa pada sampel Hasil perhitungan presisi dan akurasi
pertama dan kedua mengandung nitrat dapat dilihat pada tabel 4 berikut:
sebanyak 8,908 ppm dan 9,155 ppm.
Tabel 4 Hasil % RSD dan % perolehan kembali
Sedangkan pada sampel ketiga, hanya
mengandung nitrat sebanyak 1,525 % Perolehan
% RSD % RSD
ppm. Hasil ini berada pada rentang kembali rata-
Standar (% ) Sampel (% )
aman keberadaan nitrat dalam makanan. rata (% )
Dimana WHO mentolerir keberadaan
nitrat pada makanan dalam konsentrasi 0,3 1,7 103,8
44 ppm.
Dari hasil penelitian menunjukkan
Kinerja analitik
bahwa RSD (%) bernilai kurang dari
1. Linieritas 2%, yaitu 0,3% untuk nilai RSD larutan
Linearitas dinyatakan dengan koefisien standar KNO3 dan 1,7% untuk nilai
korelasi (r). Berdasarkan hasil RSD larutan sampel. Nilai RSD (%)
pengujian, diperoleh koefisien korelasi dibawah 2% menunjukkan bahwa galat
0,9907. Nilai koefisien korelasi yang acak yang berasal dari penyiapan
tinggi menunjukkan hubungan yang larutan tidak mempengaruhi hasil
linear antara sinyal detektor yang analisis secara nyata. Oleh sebab itu,
terukur dengan kandungan nitrat dalam spektrofotometer UV-Vis Shimadzu
sampel. Persamaan regresi linear untuk UV-1800 mempunyai keterulangan
kurva standar ialah y = 0,0533x – 0,094 yang baik.
(Gambar 1).
4. Akurasi
2. LOD dan LOQ Hasil perhitungan akurasi dapat dilihat
Limit deteksi dan limit kuantitasi pada tabel 4 diatas. Penentuan
ditentukan dari persamaan regresi linear ketepatan dilakukan dengan
kurva standar rata-rata hasil penentuan menambahkan larutan standar KNO3
linieritas. . Limit deteksi kinerja dengan konsentrasi 16 ppm pada larutan
spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu sampel sarang burung walet masing-
 masing sebanyak 6 buah. Perolehan
kembali yang diperoleh berkisar antara
103-104%, dengan nilai rata-rata
perolehan kembali adalah 103,81%.
Rentang umum nilai perolehan kembali
yang dapat diterima adalah 90-107%.
Sehingga, dari hasil nilai rata-rata
perolehan kembali yang didapat yaitu
103,81%, menunjukan bahwa instrumen
spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu
UV-1800) mempunyai ketepatan yang
cukup baik.
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian, diperoleh
bahwa rata-rata kadar protein pada sarang
burung walet putih sebanyak 36%, hasil ini
mendekati dengan hasil yang telah
ditetapkan oleh BPOM yaitu 37,5%. Dan
hasil kadar nitrat dalam sarang burung
walet, diperoleh dari sampel pertama dan
kedua rata-rata adalah 9,031 ppm dan
sampel ketiga adalah 1,525 ppm. Hasil
tersebut masih dalam batas
diperbolehkannya nitrat dalam makanan
yaitu ≤ 44 ppm. Persamaan regresi linier
dari kurva standar KNO3 adalah y =
0,0533x – 0,094 dengan koefisien korelasi
0,9907. Limit deteksi kinerja
spektrofotometer ultraviolet Shimadzu
UV-1800 untuk penentuan kadar nitrat
sebesar 1,542 ppm. Dan nilai limit
kuantitasi berdasarkan hasil penelitian
adalah 5,142 ppm. Hasil presisi % RSD
untuk larutan standar KNO3 adalah 0,3%
dan % RSD untuk larutan sampel adalah
1,7%, hasil ini memenuhi persyaratan
karena % RSD kurang dari 2%. Hasil
persen perolehan kembali pada sampel
sarang burung walet putih rata-rata yaitu
103,81%, hasil tersebut memenuhi
persyaratan karena nilai yang diperoleh
berada pada rentang nilai umum yaitu 90-
107%.
DAFTAR PUSTAKA
Budiman, Arief. (2008). Budidaya dan
Bisnis Sarang Walet, Penebar
Swadaya, Jakarta.
Darmawan, Petrus. Ekstraksi Protein dari
Buah Mengkudu dengan Pelarut
Asam, Jurnal Kimia dan Teknologi,
Surakarta.
Gandjar, I. B, dan Abdul Rohman.(2007).
Kimia Farmasi Analisis, Pustaka
Belajar, Yogyakarta.
Harmita. (2004). ‘Petunjuk Pelaksanaan
Validasi Metode dan Cara
Perhitungannya’, Majalah Ilmu
Kefarmasian, Vol. I, No. 3,
Desember.
Harvey, David. (2000). Modern Analytical
Chemistry, McGraw-Hill, New
York.
Husni, E dkk. (2007). ‘Analisa Zat
Pengawet dan Protein dalam
Makanan Siap Saji Sosis‘, Jurnal
Sains dan Teknologi Farmasi, Vol.
12, No. 2.
JECFA. (1974). WHO Food Additive
Series No.5: Nitrate, Potassium and
Sodium Salts.
(http://www.inchem.org/documents/j
ecfa/jecmono/v05je14.html) diunduh
pada tanggal 14 Juli 2012.
Koswara, Sutrisno. (2009). Sarang Burung
Walet: Pengolahan dan Khasiatnya.
eBookpangan, Jakarta.
Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia.
(1987). ‘Metode Cepat Penentuan
Nitrat Di Dalam Air’, Warta Kimia
Analitik, No.4 Th II Juli.
Muliarty, L.S. (2010). Penentuan Kadar
Protein dalam Ampas Kecap dan
Tepung Ampas Kecap Menggunakan
Metode Kjehdahl, [Skripsi], Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan
Alam, Universitas Islam Bandung,
Bandung.
Ompusunggu, Henni. (2009). Analisa
Kandungan Nitrat Air Sumur Gali
Masyarakat di Sekitar Tempat
Pembuangan Akhir (TPA) Sampah di
 Desa Namo Bintang Kecamatan Thompson B. (2004). Nitrates And Nitrites
Pancur Batu Kabupaten Deli Dietary Exposure and Risk
Serdang Tahun 2009, [Skripsi], Assessment, Institute of
Fakultas Kesehatan Masyarakat Environmental Science & Research
Universitas Sumatera Utara, Medan. Limited. Christchurch Science
Poedjiadi, Anna. (1994). Dasar-Dasar Centre, New Zealand.
Biokimia. Universitas Indonesia Trawang. (2011). Sarang Walet.
Press, Jakarta. (http://www.trawang.com/2011/08/s
Powlson, David. S, dkk. (2008). When arang-walet.html) diunduh pada
Does Nitrate Become a Risk for
tanggal 11 Desember 2011.
Human?, University of Nebraska,
Lincoln. Underwood, A. L and Day, R. A. (1999).
Sudarmadji, (1989). Analisa Bahan Analisis Kimia Kuantitatif, Edisi 6,
Makanan dan Pertanian, Liberty, Erlangga, Jakarta.
Yogyakarta Vogel. (1985). Analisis Anorganik
Kualitatif makro dan semimikro, PT.
Kalman Media Pustaka, Jakarta.