Cyclic Flow Injection Analysis with Spectrophotometric Detection for Assay of Acidity in

Fruit Juices and Soft Drinks

Abstrak
Sistem alir dengan jalur tunggal menggunakan carrier reagent dalam alir atau jalur siklik
disarankan untuk penentuan asam menggunakan spektrofotometri (dinyatakan sebagai kandungan
asam sitrat) dalam jus buah dan minuman ringan. Larutan carrier reagent terdiri dari indikator pH
(Methyl Orange, MO) dan gula (sukrosa) dalam larutan buffer asetat. Metode ini didasarkan pada
reaksi penetralan asam-basa yang ditandai dengan perubahan warna dari MO. Larutan yang telah
melewati aliran dalam set FIA siklik akan kembali ke reservoir dan digunakan kembali. Sukrosa
ditambahkan dalam larutan carrier reagent untuk mengkompensasi kedua perbedaan indeks bias
dan viskositas antara larutan carrier reagent dan larutan sampel. Hal ini menyebabkan proses injeksi
sampel tanpa melalui proses pengenceran. Beberapa parameter yang dioptimalkan diupayakan agar
sederhana, cepat, dan siap siap digunakan sebagai analisis asam. Buah dan minuman ringan dapat
dianalisis tanpa perlakuan kimia sebelumnya.
Kata kunci Keasaman, asam sitrat, analisis FIA siklik, jus buah dan minuman ringan.

1. Pendahuluan
Asam sitrat adalah asam organik yang umum ditemui dalam buah. Asam sitrat sering
ditambahkan dalam minuman Ini sering ditambahkan ke minuman untuk menjaga kualitas dan
aroma produk. Keasaman dalam minuman dijaga selama proses produksi yang dinyatakan sebagai
kandungan asam sitrat. Titrasi dengan larutan standar basa dapat digunakan sebagai metode untuk
menganalisis asam sitrat [1]. Umumnya titrasi batch mengalami kendala karena membutuhkan
volume tinggi, error, membutuhkan waktu yang cukup lama. Oleh karena itu alat analisis keasaman
secara online dengan dan tidak membutuhkan waktu yang lama sangat diharapkan. Analisis injeksi
sistem alir (FIA) diterima secara luas sebagai teknik analitik yang mampu melakukan analisis cepat,
dan menawarkan banyak keunggulan dibandingkan titrasi bets [2-4]. Uji keasaman pada buah
menggunakan prosedur [5-7] yang didasarkan pada metode FIA telah diusulkan dengan mixing
chamber atau variasi laju aliran reagen, spektrofotometri atau potensiometri digunakan sebagai
teknik pendeteksi. Imato dan Ishibashi menyatakan bahwa penentuan asam kuat dan basa dengan
FIA spektrofotometri, indikator pH, larutan buffer [8,9] menghasilkan data yang sangat baik karena
estimasi titik akhir tidak diperlukan. Grafik kalibrasi dapat ditentukan pada Grafik ketinggian
puncak (absorbansi) dari variasi larutan standar Metode ini dikembangkan menjadi FIA siklik.
Larutan carrier reagen dalam FIA siklik dialirkan dengan jalur yang terhubung kembali untuk
penggunaan yang berulang kali [10]. Penentuan asam sitrat dapat dilakukan dengan cara yang sama
(FIA siklik). Kontrol kualitas dalam metode ini diharapkan dapat mengurangi langkah-langkah
perlakuan sampel dan menghemat waktu. Oleh karena itu jurnal ini menjelaskan modifikasi dan
peningkatan dengan metode spektrofotometri FIA siklik dalam penentuan asam sitrat.

Gambar. 1 Skema Diagram sistem aliran injeksi siklik (FIA siklik). R: waduk, P: pompa, S: sampel injektor,
RC: reaksi coil, D: detektor, Rec: perekam, BC: backpressure coil, St: pengaduk.

2. Percobaan
2.1 Alat
Diagram skematik FIA siklik digunakan dalam percoban ini ditunjukkan pada Gambar. 1 [10-12]
yang terdiri dari jalur tunggal; satu-channel pompa peristaltik (CRP-01, Kurahashi Giken, Jepang),
injeksi rotary valve berbentuk lingkar dengan 5μl sampling loop (9725, Rheodyne, USA),
spektrofotometer visible (S-3250, Soma Kougaku, Jepang) dilengkapi dengan aliran melalui sel (10
mm cahaya lulus, 18 ml volume dalam), dan perekam grafik jalur (U-228, Nippon Denshi, Jepang).
jalur aliran terbuat dari PTFE tubing (0,5 mm id) dan konektor.
2.2 Reagent dan Sampel
Semua bahan kimia yang analitis reagen grade dan air de-terionisasi digunakan untuk preparasi
reagen. Metil Oranye (MO), asam sitrat, dan sukrosa yang dibeli dari Wako Pure Chemical
Industries (Osaka, Jepang). Rangkaian larutan asam sitrat standar disiapkan di 12% (w / v) larutan
sukrosa untuk mencocokkan matriks sampel. Tersedia secara komersial apel, anggur dan jeruk jus
dan minuman ringan disaring melalui filter membran (0,45 m) untuk menghilangkan padatan.
Sampel ini disuntikkan langsung tanpa pengenceran manual pada rangkaian FIA siklik.
2.3. Prosedur
Larutan reagen terdiri dari 100-ml mengandung 2,5 × 10 -4 M MO, sukrosa 12% (b / v) dalam 0,01
M buffer asetat (pH 4,5). larutan ini di reservoir dengan terus diaduk dengan bantuan pengaduk
magnet. larutan sampel diinjeksikan ke dalam aliran pembawa reagen dengan katup injeksi putar,
dan perubahan warna MO akan terjadi sekitar pada 543 nm. Konsentrasi asam sitrat dihitung dari
ketinggian puncaknya. Kemudian reagen aliran pembawa dibawa kembali ke reservoir melalui
tekanana coil (id 0,5 mm, panjang 5 m) yang digunakan kembali berulang kali. Aliran laju larutan
yang beredar pada 0,9 ml min -1 .

2.4. Prinsip sirkulasi

Ketika larutan sampel dimasukkan ke dalam sistem aliran, maka larutan itu akan bercampur dengan
dan sebagian menetralkan larutan pembawa reagen, sehingga menyebabkan perubahan warna
indikator (puncak Tinggi) yang sebanding dengan keasaman larutan sampel. Setelah melewati
aliran melalui sel, selanjutnya dispersi dan pencampuran terjadi pada koil tekanan balik. larutan
reagen asam asetat digunakan untuk menahan perubahan pH dan buffer. pada penambahan asam,
warna MO kembali ke aslinya, yang membuat sistem reversibel. Larutan yang dihasilkan
kemudian kembali ke reservoir dan digunakan kembali berkali-kali.

3. Hasil dan Pembahasan

3.1. Larutan pembawa reagen (carrier reagent) yang beredar
MO dalam buffer asetat (pH 4,5) lebih banyak digunakan untuk pereaksi spektrofotometri
menentukan asam sitrat sebagai asam dan basa kuat [10]. parameter eksperimental paling kritis dari
aliran adalah konsentrasi larutan buffer. konsentrasi yang Rendah mungkin tidak cukup untuk
menjaga garis dasar konstan untuk penentuan berulang, sedangkan konsentrasi yang tinggi
menyebabkan penurunan sensitivitas deteksi. konsentrasi buffer asetat yang optimal ialah 0,01 M
sebagai pembanding antara sensitivitas dan jumlah sampel injeksi. Biasanya, volume reservoir
dalam FIA siklik harus sama sekecil mungkin untuk menggunakan keambali pereaksi secara efektif
dan meminimalkan limbah. Pada saat yang sama, volume reservoir ditentukan oleh jumlah sampel
yang akan ditentukan dan perkiraan muatan . volume reservoir dikecilkan menjadi 100 ml, dengan
mempertimbangkan penggunaan kembali yang efektif reagen dan meminimalkan limbah.

3.2. Pengoptimalan FIA

Spektrum pH tergantung MO yang menunjukkan penyerapan yang luas Dengan panjang
maksimum 510 nm untuk mono-kation merah dan penyerapan maksimum sekitar 440 nm untuk
molekul kuning. Absorbansi pada 543 nm terbentuk mono-kation dimana sensitivitas dan
penyerapan yang rendah. Panjang koil menentukan waktu reaksi yang proses netralisasi dan
dispersinya berjalan. Sehingga, Sinyal berkurang

Tabel 1 Kondisi optimal untuk pengujian keasaman dalam jus buah dan minuman ringan
dengan memperpanjangpanjang koil reaksi outlet dari katup injeksi sampel akan langsung
terhubung ke inlet sel aliran. Panjang total antara kedua perangkat adalah 65 cm. Aliran
laju larutan pereaksi yang beredarsekitar 0,5 hingga 1,8 ml / menit. . Tidak ada perbedaan yang
diamati karena jarak dari injektor sampel untuk mengalir melalui sel sangat singkat sehingga
mempengaruhi dispersi dan pencampuran. Variabel FI lainnya dioptimalkan dengan
memaksimalkan ketinggian puncak yang diperoleh. Estimasi kondisi optimal dirangkum dalam
Tabel 1.

3.3. Matriks sampel

Jus buah biasanya mengandung berbagai bahan organik dan yang paling umum adalah gula dimana
secara alami ada dalam jus buah dan minuman ringan. sampel diinjeksi langsung
ke dalam aliran pembawa reagen, yang terdiri dari MO dan asetat buffer, sehuingga diamati satu set
sinyal latar belakang negatif dan positif. Hal Ini mungkin karena refraksi cahaya dari kepadatan
tinggi dan viskositas gula yang tinggi dalam larutan sampel. tercatatat konsentrasi gula di dalam
sampel dan aliran pembawa reagen dapat menghilangkan puncak. Serangkaian larutan asam sitrat
standar yang ditambahkan hingga 20% (b / v) sukrosa disiapkan dan efek gula pada reaksi warna
MO. gula tidak memiliki pengaruh yang signifikan terhadap intensitas sinyal MO untuk penentuan
asam sitrat. Karena kandungan gula dalam jus yang tersedia secara komersial adalah dari 10 hingga
15% [5-7], 12% . sukrosa ditambahkan ke larutan pembawa reagen untuk menghindari Gangguan
karena perbedaan dalam indeks bias pembawa sampel dan reagen. Dengan mencocokkan matriks
pembawa reagen dan sampel , memungkinkan untuk menginjeksi larutan sampel ke dalam. Sistem
FIA ldigunakan tanpa pengenceran. Oleh karena itu, pengoperasian sistem sangat sederhana, yang
dapat dianggap sebagai keuntungan tambahan. Sistem aliran siklik dirancang sedemikian rupa
untuk penggunaan sukrosa serta MO dan asetat diminimalkan, dengan demikian mengurangi
konsumsinya. Dengan cara ini, setiap isi ulang dari solusi pembawa reagen tidak diperlukan.

3.4. Karakteristik analitik

Grafik kalibrasi dibuat dengan asam sitrat standar solusi yang sukrosa (12% (b / v)) yang
ditambahkan dalam konsentrasi yang sama seperti pada jus. Hubungan linear yang diperoleh
antara absorbansi dan konsentrasi asam sitrat dalam kisaran

Tabel 2 Assay untuk keasaman (dinyatakan sebagai kandungan asam sitrat) dalam jus buah
yang tersedia secara komersial dan minuman ringan

dari 0-1,5% (w / v) dengan koefisien korelasi, r = 0,9964. Batas deteksi adalah 0,01% (w / v).
Untuk menyelidiki reproduktifitas dan pengulangan, analisis siklik dari 100 penentuan
berulang-ulang untuk asam sitrat 0,3% dilakukan di bawah kondisi optimal. Sinyal-sinyal
aliran ditunjukkan pada Gambar. 2. Ketepatan pengukuran ini (sebagai relatif standar deviasi)
juga diperiksa dan ditemukan untuk menjadi 1,5%. Hal ini menunjukkan bahwa metode yang
diusulkan memiliki presisi yang baik. Efek gangguan dari beberapa zat pada penentuan asam
sitrat diperiksa. Satu persen dari NaCl, 0,8% dari sorbitol dan 0,07% asam askorbat, dalam
jumlah yang cukup besar, tidak memiliki pengaruh signifikan terhadap intensitas sinyal,
sedangkan 0,05% malat dan 0,06% asam laktat mengganggu tekad.
Analisis sampel jus buah

Komersial jus buah yang tersedia dan minuman ringan dianalisis dengan metode yang
diusulkan. Perbandingan hasil yang diperoleh dengan metode ini dan dengan metode titrasi
standar ditunjukkan pada Tabel 2. Hasilnya kesepakatan yang baik dengan metode referensi
kecuali jus jeruk. jus jeruk biasanya berwarna, dan ikut campur, sampai batas tertentu, dengan
pengukuran.

Stabilitas respon dan reproduksibilitas tinggi puncak diuji oleh 50 suntikan berturut-turut dari
solusi sampel. Sinyal aliran diperoleh dengan apel dan anggur jus ditunjukkan pada Gambar. 3 (A)
dan (B). Meskipun meningkat secara bertahap sedikit dalam pergeseran dasar tidak bisa dihindari,
kekuatan puncak tidak berubah selama pengukuran, menunjukkan pengulangan baik dari metode
ini. Oleh karena itu memungkinkan pemantauan terus menerus dari keasaman dalam jus buah
dengan injeksi berkala larutan sampel ke dalam sistem aliran. Prosedur yang diusulkan bisa
menggantikan metode yang lebih kompleks dan memakan waktu untuk kontrol kualitas dalam
industri makanan.
2. Kesimpulan

Siklik FIA merupakan metode yang sederhana, cepat dan berulang-ulang untuk penentuan

keasaman dalam jus buah dan minuman ringan. Hal ini dapat secara praktis diterapkan pada
pemantauan terus menerus keasaman dalam jus buah dan minuman ringan dengan pengenalan

langsung dari larutan sampel ke sistem aliran.

Gambar. 2 sinyal Arus untuk 100 penentuan berulang larutan asam sitrat standar. konsentrasi
asam sitrat: 0,3% (b / v); reservoir volume: 100 ml; metil oranye: 1.0 × 10- 5 M; buffer asetat (pH
5.0): 0,01 M; frekuensi sampel: 30 (A)

Gambar. Sinyal 3 Arus dari jus buah yang diperoleh 50 suntikan berulang. (A): jus apel; (B): jus
anggur.
-7-