3.

PEWARNAAN NEGATIF

3.1. Uraian

Pewarnaan negatif merupakan salah satu metode pewarnaan yang digunakan untuk
bakteri. Berbeda dengan metode pewarnaan bakteri lainnya, pewarnaan ini tidak
memberikan warna pada bakteri, melainkan hanya mewarnai lingkungan sekitar
bakteri. Metode ini berguna untuk menentukan morfologi dan ukuran sel bakteri. Pada
metode ini, preparat yang diwarnai tidak dipanaskan di atas api, melainkan dikeringkan
di udara. Zat pewarna yang biasa digunakan adalah cat nigrosin atau tinta cina
(Hadiutomo 1990).

Pewarnaan ini tidak akan menembus atau berikatan dengan sel bakteri karena adanya
daya tolak menolak antara muatan negatif dan muatan positif dinding sel bakteri.
Pewarnaan ini akan membentuk deposit di sekitar bakteri atau menghasilkan latar
belakang hitam, sehingga bakteri tampak tidak berwarna, sementara latar belakangnya
berwarna gelap (Harley 2002).

3.2. Hasil Pengamatan

Perbesaran = 40*100 cm

3.3. Pembahasan

Metode ini dilakukan untuk megamati bakteri yang terdapat pada kotoran gigi. Saat
dilakukan pengamatan menggunakan mikroskop berlensa okuler 40*100, bakteri yang
terdapat pada preparat terlihat jelas. Bakteri berbentuk spirilium dengan posisi saling
berdekatan satu sama lain.
Dalam melakukan pewarnaan dengan metode ini, hal penting yang harus diperhatikan
adalah teknik mengulas atau menggesekkan kaca objek dengan tinta cina atau nigrosin.
Kesalahan yang sering dilakukan dalam proses ini adalah terlalu tebal atau tipisnya
preparat ulas. Jika preparat ulas terlalu tebal, maka mikroorganisme tidak dapat
dibedakan dengan lingkungan di sekelilingnya. Sebaliknya jika preparat ulas terlalu
tipis, maka perbedaan antara bakteri dan lingkungan di sekitarnya tidak terlihat jelas.
Hal di atas merupakan salah satu kesalahan yang praktikan lakukan, karena jika
penggesekan kaca objek dilakukan dengan sempurna, maka bakteri yang terlihat akan
semakin banyak jumlahnya dan semakin jelas bentuknya.

3.4. Kepustakaan

Hadiutomo. 1990. Mikrobiologi Dasar Jilid I. Jakarta (ID): Erlangga.

Harley. 2002. Laboratory Exercise in Microbiology. USA: Mc Graw – Hill Publisher.