AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL 70% KULIT SINGKONG (Manihot

esculenta Crantz) SEBAGAI INHIBITOR TIROSINASE SECARA IN

VITRO

Skripsi
Untuk melengkapi syarat-syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi

Disusun Oleh:
Nur Faidah
1404015257

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS FARMASI DAN SAINS
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PROF. DR. HAMKA
JAKARTA
2018
 Skripsi
AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL 70% KULIT SINGKONG (Manihot
esculenta Crantz) SEBAGAI INHIBITOR TIROSINASE SECARA IN
VITRO

Yang diajukan oleh :

Nur Faidah
1404015257

Telah disetujui

Pembimbing I:

Drs. H. Sediarso, M.Si., Apt. Tanggal:

Pembimbing II:

Hanifah Rahmi, M.Biomed. Tanggal:

Mengetahui:
Ketua Program Studi Farmasi

Kori Yati, M.Farm., Apt. Tanggal:

2
 ABSTRAK

AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL 70% KULIT SINGKONG (Manihot

esculenta Crantz) SEBAGAI INHIBITOR TIROSINASE SECARA IN
VITRO

Nur Faidah
1404015257

Tirosinase memainkan peran penting dalam sintesis pigmen melanin pada

kulit. Melanin bertanggung jawab untuk perlindungan terhadap radiasi ultraviolet
yang berbahaya namun, dapat juga menciptakan masalah estetika ketika
terakumulasi sebagai bintik hiperpigmentasi. Penelitian ini bertujuan untuk
menguji aktivitas inhibitor tirosinase ekstrak etanol 70% kulit singkong (Manihot
esculenta Crantz) secara in vitro. Ekstrak etanol 70% kulit singkong diperkirakan
memiliki aktivitas inhibitor tirosinase karena mengandung senyawa kumarin,
terpenoid dan glikosida sianogenik. Pengujian dilakukan dengan L-DOPA sebagai
substrat, ekstrak etanol 70% kulit singkong dengan konsentrasi 9000, 2400, 600,
160, dan 40 µg/mL serta kontrol positif kuersetin. Aktivitas inhibitor tirosinase
diukur dengan membandingkan serapan reaksi enzim normal dengan serapan
reaksi enzim sampel yang dibaca menggunakan microplate reader pada panjang
gelombang 490 nm. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit
singkong memiliki aktivitas inhibitor tirosinase dengan nilai IC50 sebesar
471,6602 µg/mL, dengan potensi relatif 0,166 kali kuersetin.

Kata Kunci : inhibitor tirosinase, kulit singkong, kuersetin

3
 KATA PENGANTAR

Bismillahirrahmanirrahim
Alhamdulillahirabbil’alamin, penulis memanjatkan puji syukur kepada
Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya, shalawat serta
salam kepada Nabi Muhammad SAW beserta keluarga, sahabat, dan para
pengikutnya hingga akhir zaman sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian
dan penulisan skripsi dengan judul “AKTIVITAS EKSTRAK ETANOL 70%
KULIT SINGKONG (Manihot esculenta Crantz) SEBAGAI INHIBITOR
TIROSINASE SECARA IN VITRO”.
Penulisan skripsi ini dimaksudkan untuk memenuhi tugas akhir sebagai
salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Program
Studi Farmasi Fakultas Farmasi dan Sains Universitas Muhammadiyah Prof. DR.
Hamka, Jakarta.
Pada kesempatan yang baik ini penulis ingin menyampaikan terima kasih
yang sebesar-besarnya kepada:
1. Bapak Dr. Hadi Sunaryo, M.Si., Apt., selaku Dekan FFS
UHAMKA,Jakarta.
2. Bapak Drs. Inding Gusmayadi, M.Si., Apt., selaku Wakil Dekan I FFS
UHAMKA, Jakarta.
3. Ibu Dra. Sri Nevi Gantini, M.Si., selaku Wakil Dekan II FFS UHAMKA,
Jakarta.
4. Ibu Ari Widayanti, M.Farm., Apt., selaku Wakil Dekan III FFS
UHAMKA.
5. Ibu Kori Yati, M.Farm., Apt., selaku Ketua Program Studi FFS
UHAMKA.
6. Ibu Hanifah Rahmi, S.Si., M.Biomed., selaku Pembimbing Akademik
selama penulis mengikuti perkuliahan di kampus FFS UHAMKA dan para
dosen yang telah memberikan ilmu dan masukan-masukan yang berguna
selama kuliah dan selama penulisan skripsi ini.
7. Bapak Drs. H. Sediarso, M.Farm., Apt., dan Ibu Hanifah Rahmi, S.Si.,
M.Biomed., selaku pembimbing I dan pembimbing II yang senantiasa
membantu dalam memberikan bimbingan, waktu, arahan, saran, serta
berbagai dukungan yang sangat berarti selama pengerjaan penelitian dan
penyusunan skripsi ini.
8. Kedua orang tua tercinta Bapak Tukiman dan Ibu Siti Barkah, kakak-
kakak tersayang Nur Soliha, Nur Alim, Rahmawati, Umar, Siti Fajar, dan Lila
Supiyah terima kasih untuk do’a, kasih sayang, cinta, dan semangat yang tak
pernah putus serta dukungan moril maupun materi yang telah diberikan.
9. Teman penelitian seperjuangan saya Nurul Atikah yang telah berjuang
bersama, saling memberikan semangat dan bantuan atas penyelesaian skripsi
ini. Terima kasih atas kerjasamanya selama penelitian berlangsung. Suka dan
duka dilewati bersama hingga kita dapat menyelesaikan skripsi ini.
10. Teman-teman FFS UHAMKA angkatan 2014 yang tidak bisa
disebutkan satu persatu, terima kasih atas bantuan, dukungan, semangat dan
do’anya.

4
 11.Teman-teman Queen, Ratih, Sindi, Shofi, Saf, Dwi, Novi, Desi, Netty, dan
Reza Komarulloh terima kasih atas semangat, do’a dan kebersamaannya
sampai akhir semester.
12. Teman-teman Cimits, Aya, Wanda, Time, Towo, Hasnah, Dita,
Viana, Siwi, Yessika, Yuna dan teman-teman Fotherthans terima kasih atas
semangat dan do’anya.
13. Faulani Aji Subekti M.Farm., Apt., teman-teman Curut, tim
farmasi rawat jalan dan teman-teman RSIA Restu Kasih terima kasih atas
semangat, bantuan dan do’anya.
14. Pimpinan dan seluruh staf kesekretariatan yang telah membantu
segala administrasi yang berkaitan dengan skripsi ini dan telah banyak
membantu dalam penelitian.
Penulis menyadari bahwa dalam penulisan ini masih memiliki banyak
kekurangan karena keterbatasan ilmu dan kemampuan penulis. Untuk itu saran
dan kritik dari pembaca sangat penulis harapkan. Penulis berharap skripsi ini
dapat berguna bagi semua pihak yang memerlukan.

Jakarta, Agustus 2018

Penulis

5
 DAFTAR ISI

Halaman
HALAMAN JUDUL i
LEMBAR PENGESAHAN ii
ABSTRAK iii
KATA PENGANTAR iv
DAFTAR ISI vi
DAFTAR TABEL viii
DAFTAR GAMBAR ix
DAFTAR LAMPIRAN x
BAB I PENDAHULUAN 1
A. Latar Belakang
1
B. Permasalahan Penelitian
3
C. Tujuan Penelitian
3
D. Manfaat Penelitian
3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA 4
A. Landasan Teori
4
1. Tanaman Singkong
4
2. Simplisia
5
3. Ekstraksi
5
4. Maserasi
5
5. Pigmentasi Kulit
6
6. Enzim Tiroinase
7
7. Kuersetin
8
8. Pengujian Aktivitas Inhibitor Tirosinase
9
9. Microplate Reader
10

6
 B. Hipotesis
10
BAB III METODOLOGI PENELITIAN 11
A. Tempat dan Jadwal Penelitian
11
1. Tempat Penelitian
11
2. Jadwal Penelitian
11
B. Metode Penelitian
11
1. Alat Penelitian
11
2. Bahan Penelitian
11
C. Prosedur Penelitian
12
1. Determinasi Tanaman
12
2. Penyiapan Simplisia
12
3. Ekstraksi Kulit Singkong
12
4. Pemeriksaan Organoleptis dan Susut Pengeringan
12
5. Penapisan Fitokimia
13
6. Pembuatan Bahan Kimia
14
7. Uji Aktivitas Inhibitor Tirosinase
15
D. Analisis Data
18
1. Persentase Inhibisi Enzim Tirosinase
18
2. Nilai IC50
18
3. Potensi Relatif
19
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN 20
A. Determinasi Kulit Singkong
20
B. Penyiapan Simplisia dan Ekstraksi Kulit Singkong
20
C. Hasil Pemeriksaan Karakteristik Mutu Ekstrak
22
D. Hasil Uji Penapisan Fitokimia
23
E. Uji Aktivitas Inhibitor Tirosinase
24
BAB V SIMPULAN DAN SARAN 29

7
 A. Simpulan
29
B. Saran
29
DAFTAR PUSTAKA 30
LAMPIRAN 33

8
 DAFTAR TABEL

Halaman
Tabel 1. Prosedur Pengujian Aktivitas Kuersetin sebagai Inhibitor 16
Tirosinase
Tabel 2. Prosedur Pengujian Aktivitas Ekstrak Etanol 70% Kulit 18
Singkong sebagai Inhibitor Tirosinase
Tabel 3. Hasil Ekstraksi Kulit Singkong 22
Tabel 4. Uji Organoleptik 22
Tabel 5. Hasil Susut Pengeringan dan Rendemen Ekstrak 23
Tabel 6. Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol 70% Kulit Singkong 23
Tabel 7. Hasil Aktivitas Inhibitor Tirosinase Kuersetin 25
Tabel 8. Hasil Aktivitas Inhibitor Tirosinase Ekstrak Etanol 70% Kulit 26
Singkong
Tabel 9. Penentuan Nilai IC50 Kuersetin 54
Tabel 10. Penentuan Nilai IC50 Ekstrak Etanol 70% Kulit Singkong 56

9
 DAFTAR GAMBAR

Halaman
Gambar 1. Tanaman Singkong (Manihot esculenta Crantz) 4
(Dokumen pribadi)
Gambar 2. Jalur Biosintesis Melanin (Chang 2009) 7
Gambar 3. Kuersetin (David et al. 2016) 9
Gambar 4. Kurva Aktivitas Inhibitor Tirosinase Kuersetin 25
Gambar 5. Kurva Aktivitas Inhibitor Tirosinase Ekstrak Etanol 70% 27
Kulit Singkong

10
 DAFTAR LAMPIRAN

Halaman
Lampiran 1. Skema Prosedur Penelitian 33
Lampiran 2. Skema Pembuatan Ekstrak Etanol 70% Kulit Singkong 34
Lampiran 3. Skema Uji Aktivitas Inhibitor Tirosinase Kuersetin dan 35
Ekstrak Etanol 70% Kulit Singkong
Lampiran 4. Hasil Determinasi Tanaman 36
Lampiran 5. Sertifikat Analisis Enzim Tirosinase 37
Lampiran 6. Sertifikat Analisis L-DOPA 39
Lampiran 7. Sertifikat Analisis Kuersetin 40
Lampiran 8. Hasil Pengamatan Uji Flavonoid pada Residu (Ampas 41
Serbuk Simplisia) dalam Proses Maserasi
Lampiran 9. Perhitungan Rendemen dan Susut Pengeringan 42
Lampiran 10. Hasil Penapisan Fitokimia Ekstrak Etanol 70% Kulit 43
Singkong
Lampiran 11. Perhitungan Larutan Substrat L-DOPA 2,5 Mm 44
Lampiran 12. Perhitungan Larutan Enzim Tirosimase 333 U/mL 45
Lampiran 13. Perhitungan Orientasi Seri Konsentrasi Larutan 46
Ekstrak Etanol 70% Kulit Singkong
Lampiran 14. Hasil Pengujian Aktivitas Inhibitor Tirosinase Orientasi 47
Konsentrasi Ekstrak Etanol 70% Kulit Singkong
Lampiran 15. Perhitungan Orientasi Konsentrasi Ekstrak Etanol 70% 48
Kulit Singkong
Lampiran 16. Perhitungan Seri Konsentrasi Larutan Kuersetin 49
Lampiran 17. Perhitungan Seri Konsentrasi Larutan Ekstrak Etanol 50
70% Kulit Singkong
Lampiran 18. Pemetaan Sumuran saat Uji Aktivitas Inhibitor 51
Tirosinase Kuersetin
Lampiran 19. Pemetaan Sumuran saat Uji Aktivitas Inhibitor 52
Tirosinase Ekstrak Etanol 70% Kulit Singkong
Lampiran 20. Hasil Perhitungan Persen Inhibisi Kuersetin 53
Lampiran 21. Hasil Perhitungan IC50 Kuersetin 54
Lampiran 22. Hasil Perhitungan Persen Inhibisi Ekstrak Etanol 70% 55
Kulit Singkong
Lampiran 23. Hasil Perhitungan IC50 Ekstrak Etanol 70% Kulit 56
Singkong
Lampiran 24. Perhitungan Perbandingan Potensi Relatif Ekstrak 57
Etanol 70% Kulit Singkong terhadap Kuersetin
Lampiran 25. Alat dan Bahan Penelitian 58

11