1

Bakteriosin yang Diproduksi oleh Bakteri Asam Laktat

Artikel ulasan
M. P. Zacharof ª * dan R. W. Lovittb

ª Pusat Nanoteknologi Multidisipliner, Universitas Swansea, Swansea, SA2 8PP, Inggris

bCollege of Engineering, Pusat Nanoteknologi Multidisiplin, Universitas Swansea, Swansea, SA2 8PP,
Inggris

Abstrak

Sejumlah besar bakteri Gram (+) dan Gram negatif (-) menghasilkan selama pertumbuhannya, zat
struktur protein (baik protein atau polipeptida) yang memiliki aktivitas antimikroba, yang disebut
bakteriosin. Meskipun bakteriosin bisa dikategorikan sebagai antibiotik, mereka tidak. Perbedaan utama
antara bakteriosin dan antibiotik adalah bakteriosin membatasi aktivitasnya terhadap strain spesies
yang terkait dengan spesies penghasil dan terutama pada strain spesies yang sama, antibiotik di sisi lain
memiliki spektrum aktivitas yang lebih luas dan bahkan jika aktivitasnya dibatasi, hal ini dilakukan. tidak
menunjukkan efek preferensial pada strain yang terkait erat. Sebagai tambahan, bakteriosin disintesis
secara ribosom dan diproduksi selama fase pertumbuhan primer, walaupun antibiotik biasanya
merupakan metabolit sekunder. Diantara bakteri Gram (+), bakteri asam laktat (LAB) khususnya,
Lactobacilli mendapat perhatian khusus saat ini, karena produksi bakteriosin. Zat ini bisa diaplikasikan di
industri makanan sebagai pengawet alami. Penggunaan LAB dan produk metabolik mereka umumnya
dianggap aman (GRAS, Grade One). Penerapan senyawa antimikroba yang dihasilkan sebagai
penghalang alami terhadap patogen dan pembusukan makanan yang disebabkan oleh agen bakteri telah
terbukti efisien. Nisin adalah satu-satunya bakteriosin yang telah dipekerjakan secara resmi di industri
makanan dan penggunaannya telah disetujui di seluruh dunia. Bakterosin dapat dioleskan pada bentuk
yang dimurnikan atau dengan bentuk kasar atau melalui penggunaan produk yang sebelumnya
difermentasi dengan strain penghasil bakteriosin sebagai bahan dalam pengolahan makanan atau
dimasukkan melalui strain bakteriosin yang memproduksi (kultur starter).

Kata kunci: Bakteri asam laktat, Lactobacilli, Bacteriocins, Nisin, Plantaricins, Lantibiotics
 2

1. Perkenalan

Sejumlah besar bakteri Gram (+) dan bakteri Gram (-) menghasilkan selama pertumbuhannya,
zat struktur protein (baik protein atau polipeptida) yang memiliki aktivitas antimikroba, yang disebut
bakteriosin. Meskipun bakteriosin bisa dikategorikan sebagai antibiotik, mereka tidak. Perbedaan utama
antara bakteriosin dan antibiotik adalah bakteriosin membatasi aktivitasnya terhadap strain spesies
yang terkait dengan spesies penghasil dan terutama strain dari spesies yang sama. Antibiotik di sisi lain,
memiliki spektrum aktivitas yang lebih luas dan bahkan jika aktivitas mereka dibatasi, hal ini tidak
menunjukkan efek preferensial pada strain yang terkait erat. Selain itu, bakteriosin disintesis secara
ribosom dan diproduksi selama fase pertumbuhan primer, walaupun antibiotik biasanya merupakan
metabolit sekunder [1]. Bakteriosin biasanya memiliki berat molekul rendah (jarang di atas 10 kDa)
mereka mengalami modifikasi posttranslasional dan dapat dengan mudah terdegradasi oleh enzim
proteolitik terutama oleh protease saluran gastrointestinal mamalia, yang membuat mereka aman
untuk dikonsumsi manusia. Bakteriosin secara umum kationik, molekul amphipathic karena
mengandung residu lysyl dan arginil [3,4]. Mereka biasanya tidak terstruktur saat digabungkan dalam
larutan berair namun bila terkena struktur yang mempromosikan pelarut seperti triofluroethanol atau
dicampur dengan membran fosfolipida anion, mereka membentuk struktur heliks [5]. Diantara bakteri
Gram positif (+), bakteri asam laktat (LAB ) mendapat perhatian khusus saat ini, karena produksi
bakteriosin [10], [20,21,22]. Zat ini bisa diaplikasikan di industri makanan sebagai pengawet alami.
Penggunaan LAB dan produk metabolik mereka umumnya dianggap aman (GRAS, Grade One).
Penerapan senyawa antimikroba yang dihasilkan sebagai penghalang alami terhadap patogen dan
pembusukan makanan yang disebabkan oleh agen bakteri telah terbukti efisien [2].

1.1. Klasifikasi LAB Bacteriocins

Sebagian besar bakteriosin LAB bersifat kecil (<10 kDa) kationik, stabil panas, amphiphilic dan
membran permeabilizing peptides. Mereka dapat dibagi menjadi tiga kelas utama, klasifikasi mereka
terus-menerus direvisi selama dekade terakhir karena penelitian ekstensif menyadari [3, 4]. Banyak
bakteriosin ini tampaknya menunjukkan spesifisitas adsorpsi yang relatif kecil. Dinding sel bakteri Gram
positif (+) memungkinkan pelepasan molekul yang relatif besar. Polimer permukaan sel anionik seperti
asam teichoic dan lipoteichoic, yang merupakan bagian dari dinding seluler, penting dalam interaksi
awal bakteriosin anionik yang diproduksi oleh bakteri Gram positif (+). Bakterisin LAB memiliki aktivitas
antibakteri yang lebih besar pada nilai pH yang lebih rendah (di bawah 5) dengan cara adsorpsi mereka
ke permukaan sel bakteri Gram positif (+) termasuk sel penghasil bergantung pada pH. Dalam kelas
bakteriosin mana pun mungkin ada homologi urutan asam amino tidak hanya di dalam peptida matang,
tetapi juga di daerah pemimpin terminal N dan protein terkait dalam sekresi dan pemrosesan
bakteriosin [2].

1.1.1. Kelas I: Lantibiotik

Kelas I, lantibiotik, adalah golongan zat peptida yang mengandung asam amino thioether polio tipikal
lanthionine atau methyllanthionine, serta asam amino tak jenuh dehydroalanine dan asam 2-
aminoisobutyric. Mereka selanjutnya dibuat menjadi dua jenis berdasarkan kesamaan struktural. Tipe A
 3

terdiri dari molekul longgar, berantai, bermuatan positif, amphipatik, fleksibel. Massa molekuler mereka
bervariasi antara 2 sampai 4 kDa dan mereka umumnya bertindak melalui pembentukan pori, melalui
depolarisasi membran, membran sitoplasma dari spesies target sensitif, nisin dan laktisin 3147 adalah
perwakilan utama kelompok ini. Lantibiotik tipe B, berbentuk bulat dan mengganggu reaksi enzimatik
seluler. Massa molekuler mereka, terletak antara 2 sampai 3 kDa dan keduanya tidak memiliki muatan
bersih atau muatan negatif bersih [6], [7]

Bakteriokin LB Kelas I adalah peptida panas stabil kecil (<5kDa), yang banyak dimodifikasi setelah
translasi yang menghasilkan pembentukan asam amino thioether lanthionine (Lan) dan ȕ-
methyllanthionine (MeLan). Ini muncul setelah proses dua langkah. Gen pertama yang disandikan serin
dan treonin dapat mengalami dehidrasi enzimatik untuk menimbulkan dehidroalanin (Dha) dan
dehydrobutyrine (Dhb). Selanjutnya, kelompok tiol dari sistein tetangga menyerang ikatan rangkap Dha
dan Dhb yang menghasilkan keduanya Lan dan MeLan. Kondensasi antara dua residu tetangga
menghasilkan pembentukan cincin tertutup kovalen dalam peptida linier sebelumnya yang
menganugerahkan kedua struktur dan fungsionalitas. Juga anggota kelompok ini mengandung D-
alanine. Residu asam amino yang terakhir ini berasal dari dehidroalanin yang dihasilkan dari dehidrasi
residu serin [3, 4] [2].

1.1.2. Kelas II: Non-Lantibiotik

Bakterisin golongan II juga bersifat kecil (<10 kDa) peptida aktif membran yang relatif tidak stabil, non-
lantionine. Mereka dibagi menjadi dua subclass. Subkelas II a, pediocin-like atau listeria active
bacteriocins subclass memiliki rangkaian konsensus N-terminal Tyr-Gly-Asn-Gly-Val-Xaa-Cys. Mereka
menunjukkan tingkat homologi yang tinggi (40% -60%) bila urutan asam amino yang sesuai selaras dan
disintesis dengan peptida pemimpin yang dikeluarkan oleh pemrosesan proteolitik, biasanya setelah
residu glisin ganda misalnya seperti pediocin PA-1 , sakacin A [8]. Subkelas II b mengacu pada dua
komponen (dua peptida terpisah) bakteriosin dengan cara yang memerlukan dua peptida untuk bekerja
secara sinergis agar memiliki aktivitas antimikroba. Lactacin F dan lactococcin G adalah anggota
kelompok ini [9].

1.1.3. Kelas III: Bakteriosin

Kelompok ini terdiri dari protein labil panas yang secara umum memiliki berat molekul besar (> 30 kDa).
Kelompok ini belum banyak diselidiki. Bakteriosin yang mewakili kelompok ini adalah helveticin I oleh
Lactobacillus helveticus dan enterolysin yang diproduksi oleh Enterococcus faecium [10], [20, 21, 22].

2. Biosintesis dan Kekebalan Bakteriosin LAB

Seperti yang telah disebutkan sebelumnya, bakteriosin disterilisasi dengan ribosomisasi dan peptida
modifikasi posttranslasional [8], [2]. Gen yang mengkodekan produksi dan kekebalan bakteriosin
umumnya diatur dalam kelompok operon dan dapat ditemukan pada elemen yang mudah diakses
seperti kromosom yang berasosiasi dengan transpons atau pada plasmid [ 7]. Bakterisin terutama
disintesis sebagai prepeptida yang tidak aktif secara biologis yang mengandung pemimpin terminal N.
Prepeptida kemudian dimodifikasi oleh protein lain atau asam amino yang dikodekan oleh cluster gen
 4

bakteriosin sebelum diekspor. Sebagai contoh, ada hubungan silang titer dengan istilah lanthionines
(Lans) atau methyl lanthionines (MeLans) dan asam amino 2.3-didehydroalanine (Dha) dan (2) .- 2-3 -
didehydrobutyrine (Dhb). Asam amino ini diperkenalkan oleh dehidrasi residu serin dan treonin diikuti
oleh penambahan selektif intermolekul selektif sistein ke asam amino tak jenuh [6]. Strain penghasil
bakteri bakteri harus melindungi diri dari tindakan tersebut, efek toksik dari bakteriosin mereka sendiri
[7] Hal ini terjadi melalui produksi protein imunitas tertentu. Gen pengkodean untuk protein kekebalan
berada dalam kedekatan genetik dekat dengan gen struktural dan pemrosesan bakteriosin lainnya.
Seringkali gen bakteriologis struktural dan gen kekebalan dapat ditemukan pada operon yang sama [6].
Untuk bakteriosin LAB dua jenis sistem kekebalan telah dijelaskan. Salah satu sistem bergantung pada
kekebalan spesifik Lan I, meskipun sistem kedua bergantung pada transporter multikomponen ABC yang
terpisah secara khusus (Lan EFG) [7]. Protein Lan I paling mungkin menempel di bagian luar membran
sitoplasma. Ini memberi kekebalan kepada sel produsen dengan mencegah pembentukan pori oleh
molekul bakteriosin yang telah dimasukkan ke dalam membran, kembali ke medium sekitarnya dan
dengan demikian menjaga konsentrasi bakteriosin di dalam membran di bawah tingkat kritis [20, 21, 22,
23] .

3. Bakteriosin Paling Penting

3.1. Tumbuhan tanaman

L. plantarum telah dipertimbangkan untuk menghasilkan setidaknya 6 bakteriosin yang berbeda. Semua
peptida ini terutama diproduksi sebagai prekursor yang mengandung bagian glisin ganda. L. plantarum
mensintesis bakteriosin ini melalui gen PlnE dan PlnF. Peptida ini kemudian diekspor dan diproses oleh
protein PlnG dan PlnH. Feromon peptida untuk sistem ini dikodekan oleh gen terpisah (PlnA) dan
diekspor oleh PlnG dan PlnH dan dideteksi oleh protein histidin kinase PlnB yang akhirnya
memfosforilasi dua regulator respons PlnC dan PlnD. Plantaricins menghambat berbagai LAB termasuk
pesaing alami L. plantarum dan bakteri lainnya seperti Pediococcus, Carnobacteria, Clostiridia dan
Propionobacteria [7].

3.2. Plantaricins JK, EF

Bakterosin ini bertindak sebagai peptida sinergis. Panjangnya 30 atau 40 residu dan menunjukkan sedikit
kemiripan urutan tanaman plantaricin lainnya. Bakterosin ini bertindak dengan spesifisitas yang ketat
dan kombinasi lainnya, kecuali hasil JK atau EF dalam hilangnya sinergi total [10].

3.3. Plantaricin S dan Plantaricin W

Plantaricin S adalah sistem dua peptida yang diisolasi dari L. plantarum spp. digunakan untuk
memfermentasi buah zaitun hijau. Gen struktural (Į, ȕ) menunjukkan bahwa setiap peptida pada
awalnya diproduksi dengan pemimpin yang mengandung motif glisin ganda. Peptida ini terdiri dari 26
dan 27 residu amino panjangnya. Plantaricin S dianggap untuk mengendalikan proses fermentasi dan
melestarikan buah zaitun [10], [20, 21, 22, 23] Bakterisin dua peptida lainnya adalah plantaricin W yang
terdiri dari molekul protein Plwa dan Plwb. Komponen lantibiotik ini terdiri dari 29 dan
 5

32 residu asam amino masing-masing dan dipertimbangkan.

3.4. Nisin

Nisin adalah bakteriosin yang paling banyak dieksploitasi dan diterapkan. Ini aktif melawan bakteri Gram
(+) positif termasuk mikroorganisme pembusuk yang sangat patogen dan makanan termasuk S. aureus
dan L. monocytogernes. Di Amerika Serikat, penggunaannya telah disetujui sejak tahun 1988 oleh FDA
untuk digunakan dalam keju, roti panggang yang diberi perlakuan panas dan keju yang dipasteurisasi
yang disimpan dalam suhu dingin. Nisin termasuk dalam golongan lantibiotik Kelas I, terdiri dari tiga
puluh empat asam amino dan memiliki struktur pentacyclic dengan satu residu lanthionine (Cincin A)
dan empat residu ȕ-methyllantion (cincin B, C, D, E) nisin Z, alami varian nisin berbeda hanya karena
molekul histidin di tempat 27 digantikan oleh asparagin. Nisin dapat menjadi efektif pada konsentrasi
nano dibandingkan dengan strain target. Nisin disintesis secara ribosomis sebagai peptida prekursor
yang kemudian dimodifikasi secara enzimatik. Prepeptida ini secara biologis tidak aktif dan mengandung
domain prepeptida c-terminal, mengikuti berbagai reaksi modifikasi posttranslasional, dibelah dari
urutan pemimpin N-terminal untuk menghasilkan senyawa antimikroba dewasa. Ini adalah sistem dua
sistem pengatur otomatis yang dapat diaktifkan sepenuhnya oleh nisin dalam jumlah toksik sangat
rendah (ng / ml) [15]. Nisin stabil pada suhu 121ºC namun untuk pemanasan yang berkepanjangan,
menjadi kurang stabil terhadap panas, terutama antara pH 5 ke 7. Nisin sensitif terhadap Į-chimotrypsin
namun tahan terhadap trypsin, elastase, carboxyl peptidase, pepsin, dan erepsin. Nisin digunakan
sebagai aditif makanan, diproduksi secara komersial dan diberi nomor E234 (ECCU 1983

Petunjuk Komisi EEC 8314631EEC) [15, 16]. Sistem NICE adalah bagian dari sistem penginderaan kuorum
yang bergantung pheromone yang dipelajari secara mendalam yang didistribusikan secara luas pada
bakteri Gram positif (+) [20, 21, 22, 23].

3.4.1. Cara Aksi Penyisipan Membran Nisin & Model Formasi Pori

Bakteri Gram positif (+) ditandai dengan kandungan lipida anionik yang tinggi pada nisin membran yang
berikatan dengan cepat dengan liposom anionik dan interaksi ini kuat karena nisin telah mampu
menyebar perlahan ke liposom lainnya. Fragmen nisin telah digunakan untuk mengidentifikasi daerah
yang terlibat dalam interaksi membran [9]. Nisin memiliki kemampuan untuk berinteraksi dengan lipida
anionik berkorelasi dengan aktivitas antimikrobanya. Ini membentuk pori-pori di membran lipid dengan
berinteraksi dengan prekursor peptidoglikan lipid II. Kehadiran lipid II meningkatkan kemampuan nisin
untuk mendepolarisasi potensi listrik transmembran dan mengganggu organisasi lapis ganda lipid saat
mengikat membran [3, 4]. Nisin membentuk pori-pori melalui serangkaian langkah yang berbeda. Dalam
ekuilibrium, nisin nampaknya sejajar dengan permukaan selaput. Nisin menginduksi gerakan
transmembran fosfolipid neon yang menunjukkan bahwa penyisipan membran ujung-C dari nisin
menyebabkan kontak antarmolekul fosfolipid, membentuk pori-pori sesuai dengan baji seperti model
[1]. Model seperti baji dapat digambarkan sebagai berikut. Pembentukan pori induksi melibatkan gaya
motif proton yang didorong oleh penyisipan lipid dan domain nisin. Engsel pada molekul nisin
memungkinkan pengikatan bagian terminal-C dan dengan demikian sisipannya ke dalam membran.
Beberapa molekul nisin yang dimasukkan dapat menyebabkan gangguan lokal yang besar pada pori-pori
 6

protein lipida. Struktur seperti itu secara intrinsik tidak stabil karena kekuatan hidrofobik, yang
mendorong penataan ulang lipid ke dalam orbital orisinal aslinya [27].

4. Aplikasi Bacteriocins

Saat ini, bakteriosin telah banyak dimanfaatkan terutama di bidang pelestarian makanan. Penggunaan
bakteriosin dalam industri makanan terutama pada produk susu, telur, sayuran dan daging telah banyak
diteliti. Di antara bakteriosin LAB nisin A dan varian alami nisin Z telah terbukti sangat efektif melawan
agen mikroba yang menyebabkan keracunan makanan dan pembusukan. Selanjutnya nisin adalah satu-
satunya bakteriosin yang telah dipekerjakan secara resmi di industri makanan dan penggunaannya telah
disetujui di seluruh dunia [5], [7]. Banyak metode pelestarian, telah digunakan untuk mencegah
keracunan makanan dan pembusukan. Teknik ini meliputi perlakuan termal (pasteurisasi, sterilisasi
pemanasan), pH dan pengurangan aktivitas air (pengasaman, dehidrasi) dan penambahan bahan
pengawet (antibiotik, senyawa organik seperti propionat, sorbat, benzoat, laktat, dan asetat). Meskipun
metode ini telah terbukti sangat berhasil, ada peningkatan permintaan akan produk alami yang aman
secara mikrobiologi yang memberi konsumen manfaat kesehatan tinggi [7]. Bakteriosin dapat
diterapkan pada bentuk mentah atau dengan bentuk kasar atau melalui penggunaan produk yang
sebelumnya difermentasi dengan strain penghasil bakteriosin sebagai bahan dalam pengolahan
makanan atau dimasukkan melalui strain bakteriosin yang memproduksi (budidaya starter).
Penggabungan strain penghasil bakteriosin memiliki kelemahan karena kurangnya kesesuaian antara
strain penghasil bakteriosin dan kultur lain yang diperlukan untuk fermentasi [10]. Namun, telah terbukti
bahwa bakteriosin saja dalam makanan tidak mungkin menjamin keamanan sepenuhnya; terutama
dalam hal bakteri Gram negatif (-) ini telah terlihat. Kemudian penggunaan bakteriosin harus
dikombinasikan dengan teknologi lain yang mampu mengganggu membran seluler sehingga bakteriosin
bisa membunuh bakteri patogen [9]. Misalnya penggunaan perawatan non-termal seperti medan listrik
berdenyut (PEF) yang menguntungkan. karena tidak berpengaruh pada fungsionalitas makanan dan
kualitas gizi. Teknik ini mungkin tidak layak secara finansial bila digunakan sendiri, namun pada tingkat
yang lebih rendah dan dikombinasikan dengan perawatan lain seperti bakteriosin mungkin sangat
efektif. Selanjutnya bakteriosin dapat dikombinasikan dengan senyawa antimikroba lainnya seperti
natrium asetat dan natrium laktat sehingga meningkatkan inaktivasi bakteri. Bakteriosin juga dapat
digunakan untuk memperbaiki kualitas makanan dan sifat sensorik, misalnya meningkatkan laju
proteolisis atau dalam pencegahan defek penghembusan gas pada keju. Aplikasi lain dari bakteriosin
adalah kemasan bioaktif, suatu proses yang dapat melindungi makanan dari kontaminan eksternal.
Misalnya pembusukan makanan berpendingin biasanya dimulai dengan pertumbuhan mikroba di
permukaan yang memperkuat penggunaan bakteriosin yang menarik yang digunakan bersamaan
dengan kemasan untuk meningkatkan keamanan pangan dan kehidupan pribadi [10]. Kemasan bioaktif
dapat dibuat dengan cara langsung melumpuhkan bakteriosin ke kemasan makanan atau dengan
tambahan bungkus yang mengandung bakteriosin ke dalam makanan kemasan, yang akan dilepaskan
selama penyimpanan produk makanan. Pelepasan bakteriosin secara bertahap dari film kemasan di
permukaan makanan mungkin memiliki keuntungan saat mencelupkan dan menyemprot makanan
dengan bakteriosin, karena aktivitas antimikroba dapat hilang atau berkurang karena inaktivasi
bakteriosin oleh komponen makanan atau pengenceran di bawah konsentrasi aktif karena migrasi. ke
 7

dalam makanan [10]. Ada beberapa metode untuk menyiapkan film kemasan dengan bakteriosin. Salah
satu caranya adalah memasukkan bakteriosin secara langsung ke dalam polimer misalnya penggabungan
nisin ke dalam film protein biodegradable. Penggabungan nisin atau bakteriosin lainnya dapat dicapai
melalui media panas dan pengecoran ke dalam film yang terbuat dari protein kedelai atau zein jagung.
Cara lain adalah melapisi atau mengadsorbsi bakteriosin ke permukaan polimer; Contohnya meliputi
lapisan nisin metilselulosa untuk film polietilena untuk penggunaan pada daging unggas, adsorpsi nisin
pada polietilen, etilena, vinil asetat, polipropilena, poliamida, akrilat poliester dan polivinil klorida

References

[1] Beasley, S. S., Saris, P. E. J., Nisin-producing Lactococcus lactis strains isolated from human milk. Journal of Applied and
Environmental Microbiology 2004, 70, 5051-
5053.
[2] Chen H., Hoover D.G. Bacteriocins and their food applications. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety 2003,
2, 83-
97.
[3] Rodriguez E., Martinez M.I., Horn N., Dodd H.M. , Heterologous production of bacteriocins by Lactic Acid Bacteria.
International Journal of Food Microbiology 2003, 80, 101-116.
[4] Rodriguez E. G. B., Gaya P., Nanez M., Medina M., Diversity of bacteriocins produced by Lactic Acid Bacteria isolated from
raw milk. International Dairy Journal 2000, 10, 7-15.
[5] Moll G.N., Konings W. N., Driessen, A.J.M., Bacteriocins: mechanism of membrane insertion and pore formation Antonie van
Leeuwenhoek Journal 1999, 3, 185-
195.
 8

[6] Cleeveland J. Montville, T. J., Nes I.F. , Chikindas M.L, Bacteriocins : safe, natural antimicrobial for food preservation
International Journal of Food Microbiology 2001, 71, 1-20.
[7] Deegan L.H., Cotter P.D., Colin H., Ross P., Bacteriocins: biological tools for bio-preservation and shelf-life extension
International Dairy Journal 2006, 16, 1058-1071.
[8] Patton G., Don K. A., New developments in lantibiotic biosynthesis and mode of action. Current Opinion in Microbiology 2005,
8, 543-551.
[9] Daw M.A, Falkiner F. R., Bacteriocins: nature, function and structure Micron Journal 1996, 27, 467-479.
[10] Paul Ross R., Morgan, S., Hill S., Preservation and Fermentation : past , present and future. International Journal of Food
Microbiology 2002, 79, 3-16.
[11] Guillet A., Proteomic analysis of Lactococcus lactis , a Lactic Acid Bacterium. Journal of Proteomics 2003, 3, 337-354.
[12] Dimov S., I. P., Harizanova N., Genetics of Bacteriocins biosynthesis by Lactic Acid Bacteria. Biotechnology & Microbiology
Journal 2005, 3, 4-10.
[13] Oliveira P., Nielsen J., Forster J., Modelling Lactococcus lactis using a genome-scale flux model. BMC Microbiology Journal
2005, 5, 39-48.
[14] Storz G., Hengge-Arronis R., Bacterial Stress Responses. 1st ed., ASM Press: Washington D.C., 2000, p 162-298.
[15] Mierau I., Optimization of the Lactococcus lactis nisin-controlled gene expression system NICE for industrial applications.
Microbial Cell Factories 2005, 4, 16-28.
[16] Mierau I., Lei J. P., Industrial scale production and purification of an heterogenous protein in L.lactis using the Nisin-controlled
gene expression system NICE: The case of lysostaphin. Microbial Cell Factories 2005, 4, 1-9.
[17] Todorov S.D., Dicks L. M. T., Screening for bacteriocin -producing lactic acid bacteria from boza, a traditional cereal beverage
from Bulgaria. Comparison of bacteriocins. Process Biochemistry Journal 2006, 41, 11-19.
[18] Todorov, S. D., Van Reenen, C., Dicks, L.M., Optimization of bacteriocin production by Lactobacillus plantarum ST13BR, a
strain isolated from barley beer. Journal of General Applied Microbiology 2004, 50, 149-157.
[19] Todorov, S. D., Vaz-Velho, M., Gibbs, D. , Comparison of two methods for purification of Plantaricin ST31, a bacteriocin
produced by Lactobacillus plantarum ST31 Brazilian Journal of Microbiology 2004, 35, 157-160.
[20] Todorov, S. D., Dicks L.M.T., Lactobacillus plantarum isolated from molasses produces bacteriocins active against Gram-
negative bacteria. Enzyme and Microbial Technology Journal 2005, 36, 318-326.
[21] Todorov S. D., Dicks L. M. T., Influence of Growth conditions on the production of a bacteriocin by Lactococcus lactis subp.
lactis ST 34BR, a strain isolated from barley beer. Journal of Basic Microbiology 2004, 44, 305-316.
[22] Todorov S. D. D., Dicks L.M.T., Effect on Growth medium on bacteriocin production by Lactobacillus plantarum ST194BZ, a
strain isolated from boza. Journal of Food Technology and Biotechnology 2005, 43, 165-173.
[23] Garneau S., Martin N.I. , Vedras J.G., Two-peptide bacteriocins produced by Lactic Acid Bacteria. Journal of Biochimie 2002,
84, 577-592.
[24] Board R. G., A Modern Introduction to Food Microbiology. 1st ed., Blackwell Scientific Publications: 1983, p 1-50.
[25] Carr J. G., Cutting, C. V., Whiting, G. C., Lactic Acid Bacteria in Beverage and Food. 1st ed., Academic Press LTD.: 1975, p
17-28, 233-266.
[26] Daw M.A, Falkiner F. R., Bacteriocins: nature, function and structure Micron Journal 1996, 27, 467-479.