saTUGAS INSTRUMEN SPEKTROSKOPI

“PHOSPHORESCENCE”

OLEH:
KELOMPOK III
KIMIA B
AMRIL MA’SUM PRAMUDJA F1C116062
ANUGRAH F1C117004
MUH. AZMAN F1C117020
SRIWULAN F1C117028
DWI RATNA KARIM F1C117040
LINDA APRIANI F1C117048
REGITA DEWI CHAHYANI F1C117058
HARIS F1C117072
MUH. IVAN KURNIAWAN F1C117080
SATRIA MADANI F1C117088
HAFIS F1C117098

JURUSAN KIMIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS HALU OLEO
KENDARI
2019
 Kata Pengantar

Alhamdulillahirabbilalamin, puji syukur kami panjatkan atas kehadirat Allah swt

karena atas limpahan rahmat dan taufiknya jugalah sehingga makalah ini dapat
terselesaikan tepat pada waktunya. Makalah ini berjudul “Phosphorescence” merupakan
makalah dalam mengerjakan tugas Instrumen Spektroskopi.
Ucapan terima kasih kami sampaikan kepada seluruh pihak yang telah membantu
dalam proses penyelesaian makalah ini khususnya kepada dosen pembimbing, dan teman-
teman yang telah membantu.
Kami menyadari bahwa tulisan ini jauh dari kesempurnaan oleh karena itu saran
dan kritik dari pembaca sangat kami harapkan demi penyempurnaan makalah ini. Selamat
membaca, semoga makalah ini dapat bermanfaat dan memperkaya khazanah keilmuan
khususnya tentang materi instrumen.

Kendari, 01 Oktober 2019

Penyusun
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR
DAFTAR ISI
BAB I Pendahuluan
A. Latar Belakang 1
B. Rumusan Masalah 1
C. Tujuan 2
D. Manfaat 2
BAB II Pembahasan
A. Pengertian Fosforescence 3
B. Spektrum Molekul Fosforensensi 5
C. Spektrum Eksitasi vs Emisi Spektrum 7
D. Instrumentasi Molekular Fosforesensi 7
E. Prinsip Fosforesensi 9
F. Aplikasi Fosforesensi 9
G. Validasi Metode 10
BAB III Penutup
A. Kesimpulan 14
B. Saran 14
DAFTAR PUSTAKA 15
 BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang
Spektrofotometri merupakan salah satu metode analisis instrumental yang
menggunakan dasar interaksi energi dan materi. Spektrofotometri dapat dipakai untuk
menentukan konsentrasi suatu larutan melalui intensitas serapan pada panjang gelombang
tertentu. Panjang gelombang yang dipakai adalah panjang gelombang maksimum yang
memberikan absorbansi maksimum. Spektrofotometri dapat digunakan untuk
menganalisis konsentrasi suatu zat di dalam larutan berdasarkan absorbansi terhadap warna
dari larutan pada panjang gelombang tertentu.
Spektrofotometri merupakan metode analisis yang didasarkan pada absorpsi radiasi
elektromagnet. Cahaya terdiri dari radiasi terhadap mana mata manusia peka, gelombang
dengan panjang berlainan akan menim bulkan cahaya yang berlainan sedangkan campuran
cahaya dengan panjang-panjang ini akan menyusun cahaya putih. Cahaya putih meliputi
seluruh spektrum nampak 400-760 mm. Spektrofotometri ini hanya terjadi bila terjadi
perpindahan elektron dari tingkat energi yang rendah ke tingkat energi yang lebih tinggi.
Adapun jenis-jenis spektrofotometri yaitu, Spektrofotometri Infra Merah,
Spektrofotometri Raman, Spektrofotometri Resonansi Magnetik Inti, Spektrofotometri
Fluorescensi dan Fosforescensi.
Fosforesensi adalah Emisi foton saat dianalisis kembali ke keadaan energi lebih
rendah dengan putaran sebaliknya sebagai keadaan energi tinggi ( David, 2000). Umurnya
yang relatif panjang, proses tanpa radiasi dapat secara efektif bersaing dengan fosforensi.
Untuk alasan ini, fosforensi biasanya tidak diamati dari larutan karena tabrakan dengan
pelarut atau dengan oksigen. Pendar pengukuran dilakukan dengan mendinginkan sampel
ke suhu nitrogen cair (−196◦C) untuk membekukan mereka dan meminimalkan tabrakan
dengan molekul lain. Sampel padat akan juga fosfor, dan banyak mineral anorganik
menunjukkan fosfor yang berumur panjang. Studi telah dilakukan di mana molekul dalam
larutan diserap pada dukungan yang solid dari mana mereka dapat berfosfor. Fosforensi
dapat diamati dengan mineral (Christian dkk., 2014).
B. Rumusan Masalah
Rumusan masalah pada makalah ini yaitu sebagai berikut :
1. Bagaimana Pengertian fosforesensi?
2. Bagaimana spektrummolekul, instrumentasi, prinsip dan aplikasi fosforesensi?

1
C. Tujuan
Tujuan yang ingin dicapai pada makalah ini yaitu:
1. Untuk mengetahui pengertian fosforesensi.
2. Untuk mengetahui spectrum molekul, instrumentasi, prinsip dan aplikasi fosforesensi.
D. Manfaat
Tujuan yang ingin dicapai pada makalah ini yaitu:
1. Dapat mengetahui pengertian fosforesensi.
2. Dapat mengetahui spectrum molekul, instrumentasi, prinsip dan aplikasi fosforesensi.

2
 BAB II
PEMBAHASAN

A. Pengertian Fosforesensi

Photoluminescence dibagi menjadi dua kategori: fluoresensi dan fosforensi.

Fosforesensi adalah Emisi foton saat dianalisis kembali ke keadaan energi lebih rendah
dengan putaran sebaliknya sebagai keadaan energi tinggi ( David, 2000). Proses
terbentuknya kelipan cahaya terjadi melalui dua proses yaitu flouresensi dan fosforesensi.
Yang pertama apabila elektron menyerap tenaga dan tereksitasi lalu kembali lagi langsung
ke keadaan dasar atau bisa juga melalui keadaan metastabil. Deeksitasi ini terjadi dalam
waktu yang sangat singkat yaitu kecil dari 10 Detik dan disebut fluoresensi. Jenis pancaran
yang kedua dapat terjadi apabila suatu elektron yang berada dalam keadaan metastabil
mendapat tambahan tenaga dari luar akan pindah ke tingkat tenaga yang lebih tinggi, lalu
kembali ke keadaan dasar dengan memancarkan foton cahaya. Proses semacam ini disebut
fosforesensi dan terjadi dalam selang waktu 10-8 detik. (Susetyo,1988). Penyerapan foton
ultraviolet atau terlihat mempromosikan elektron valensi dari keadaan dasarnya ke keadaan
tereksitasi dengan konservasi putaran elektron.

Gambar 1. Perbedaan antara status singlet dan triplet.

Sebagai contoh, sepasang elektron yang menempati keadaan dasar elektronik yang sama
memiliki kebalikannya berputar (Gambar 1a) dan dikatakan dalam keadaan spin singlet.
Menyerap foton mempromosikan salah satu elektron ke keadaan tereksitasi singlet
(Gambar 1b). Emisi dari foton dari keadaan tereksitasi singlet ke keadaan tanah singlet,
atau di antara setiap dua tingkat energi dengan putaran yang sama, disebut fluoresensi.
Probabilitas a transisi fluoresen sangat tinggi, dan usia rata-rata elektron dalam tereksitasi
hanya 10–5–10–8 detik. Fluoresensi, oleh karena itu, meluruh dengan cepat setelah eksitasi
sumber dihapus. Dalam beberapa kasus, elektron dalam keadaan tereksitasi singlet diubah
ke kondisi tereksitasi triplet (Gambar 1c) di mana putarannya tidak lagi dipasangkan
dengan kondisi dasar. Emisi antara keadaan tereksitasi triplet dan a keadaan dasar singlet,

3
atau antara dua tingkat energi yang berbeda di masing-masing keadaan berputar, disebut
fosforensi. Karena masa hidup rata-rata untuk fosfor berkisar antara 10–4 hingga 104 detik,
fosforesensi dapat berlanjut untuk beberapa waktu setelahnya menghapus sumber eksitasi.
Penggunaan fluoresensi molekuler untuk analisis kualitatif dan semiquantitatif
analisis dapat ditelusuri ke awal hingga pertengahan 1800-an, dengan kuantitatif yang lebih
akurat metode yang muncul pada 1920-an. Instrumentasi untuk spektroskopi fluoresensi
menggunakan filter dan monokromator untuk pemilihan panjang gelombang muncul di,
masing-masing, 1930-an dan 1950-an. Meskipun penemuan fosforensi didahului bahwa
fluoresensi oleh hampir 200 tahun, aplikasi kualitatif dan kuantitatif fosforesensi molekuler
tidak menerima banyak perhatian sampai setelah pengembangan instrumentasi fluoresensi
(David, 2000). Menurut Christian(2014) Fosforensi lebih panjang umurnya dari
fluoresensi, dan itu mungkin lanjutkan setelah eksitasi sumber dimatikan.
Umur panjang fosforensi juga merupakan salah satu kelemahannya. Karena
keadaan tereksitasi relatif berumur panjang, proses nonradiasional punya waktu untuk
bersaing fosfororesensi untuk penonaktifan. Oleh karena itu, proses efisiensi fosforensi,
serta intensitas fosforensi yang sesuai, relatif rendah. Untuk meningkatkan efisiensi,
fosforensi biasanya diamati pada suhu rendah di media yang kaku, seperti kacamata.
Pendekatan lain adalah dengan menyerap analit pada permukaan yang solid atau
melampirkannya di rongga molekul (rongga misel atau siklodekstrin). Teknik ini dikenal
sebagai fosforensi suhu kamar. Dalam suhu kamar fosforesensi, keadaan triplet analit dapat
dilindungi dengan dimasukkan ke dalam sebuah agregat surfaktan yang disebut sebuah
misel. Dalam larutan air agregat memiliki inti nonpolar karena tolakan kepala kutub
kelompok. Kebalikannya terjadi pada pelarut nonpolar Siklodekstrin rongga juga
digunakan.

4
B. Spektrum Molekul Fosforensensi

Untuk menghargai asal-usul fosforensi, kita harus pertimbangkan apa yang terjadi
pada molekul setelah penyerapan foton. Mari kita asumsikan bahwa molekul awalnya
menempati tingkat energi getaran terendah keadaan dasar elektronik. Keadaan dasar, yang
ditunjukkan pada Gambar 2, adalah singlet negara berlabel S0. Penyerapan foton energi
yang benar, mengeksitasi molekul ke salah satu dari beberapa tingkat energi getaran dalam
keadaan elektronik tereksitasi pertama, S1, atau keadaan tereksitasi elektronik kedua, S2,
keduanya merupakan status singlet. Relaksasi untuk keadaan dasar dari keadaan tereksitasi
ini terjadi oleh sejumlah mekanisme itu entah tanpa radiasi, dalam hal tidak ada foton yang
dipancarkan, atau melibatkan emisi a foton. Mekanisme relaksasi ini ditunjukkan pada
Gambar 2. Kemungkinan besar jalur dimana molekul berelaksasi kembali ke keadaan
dasarnya adalah apa yang memberikan waktu hidup terpendek untuk keadaan tereksitasi.

Gambar 2. Diagram tingkat energi untuk menunjukkan molekul jalur untuk penonaktifan
yang bersemangat negara: vr adalah relaksasi getaran; ic internal konversi; ec adalah
konversi eksternal, dan isc adalah persimpangan silang. Paling rendah tingkat energi
getaran untuk setiap elektronik ditunjukkan oleh garis yang lebih tebal.

Deaktivasi Tanpa Radiasi, Salah satu bentuk penonaktifan tanpa radiasi adalah
getaran relaksasi, di mana molekul dalam tingkat energi getaran yang tereksitasi akan
kehilangan energi saat bergerak ke tingkat energi getaran yang lebih rendah dalam keadaan
elektronik yang sama. Relaksasi getaran sangat cepat, dengan usia rata-rata molekul dalam

5
suatu tingkat energi getaran yang terjadi adalah 10-12 s atau kurang. Sebagai akibatnya,
molekul tereksitasi pada tingkat energi getaran yang berbeda dari keadaan eksitasi
elektronik yang sama secara cepat kembali ke keadaan tingkat energi getaran terendah dari
keadaan eksitasi. Bentuk lain dari relaksasi tanpa radiasi adalah konversi internal, untuk
tingkat keadaan getaran energi sebuah molekul pada keadaan eksitasi elektronik secara
langsung melewati tingkat getaran energi yang tinggi dari keadaan elektronik energi
rendah dengan spin yang sama. Dengan kombinasi konversi internal dan relaksasi getaran,
sebuah molekul dalam keadaan elektronik tereksitasi dapat kembali ke keadaan elektronik
dasar tanpa memancarkan foton. Bentuk relaksasi tanpa radiasi yang terkait adalah
konversi eksternal di mana kelebihan energi ditransfer ke pelarut atau komponen lain
dalam sampel matrix. Bentuk akhir dari relaksasi tanpa radiasi adalah persimpangan
intersistem di mana sebuah molekul dalam tingkat energi getaran dasar dari keadaan
elektronik tereksitasi berlalu menjadi tingkat energi getaran tinggi dari keadaan energi
elektronik energi rendah dengan sebuah keadaan putaran berbeda. Sebagai contoh,
persimpangan intersistem ditunjukkan pada Gambar 2 antara keadaan tereksitasi singlet,
S1, dan keadaan tereksitasi triplet, T1.
Molekul dalam tingkat energi getaran terendah yang tereksitasi keadaan elektronik
triplet biasanya rileks ke keadaan dasar dengan persimpangan intersistem ke status singlet
atau dengan konversi eksternal. Fosforensi diamati ketika relaksasi terjadi dengan emisi
foton. Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 10.43, fosforesensi terjadi pada rentang
panjang gelombang, yang semuanya berada pada energi yang lebih rendah dari pita
serapan molekul. Intensitas fosforesensi, Ip, diberikan oleh persamaan yang mirip dengan
persamaan 1 untuk fluoresensi

(1)
di mana φp adalah hasil kuantum untuk fosfor.
Fosforensi paling baik untuk molekul yang memiliki transisi n→π *, yang memiliki
probabilitas lebih tinggi untuk lintas intersistem daripada transisi π → π *. Sebagai contoh,
fosforesensi diamati dengan molekul aromatik yang mengandung gugus karbonil atau
heteroatom. Senyawa aromatik yang mengandung atom halida juga memiliki efisiensi yang
lebih tinggi untuk fosfor. Secara umum, terjadi peningkatan fosfor sesuai dengan
penurunan fluoresensi. Karena masa hidup rata-rata untuk fosfor sangat lama, berkisar
antara 10–4 hingga 104 detik, hasil kuantum untuk fosfororesensi biasanya cukup kecil.
Perbaikan dalam φp diwujudkan dengan mengurangi efisiensi konversi eksternal. Ini

6
mungkin dicapai dengan beberapa cara, termasuk menurunkan suhu, menggunakan lebih
banyak pelarut kental, menyimpan sampel pada substrat padat, atau menjebak molekul
dalam larutan (David, 2000).
Karena intensitasnya yang lemah, fosforesensi jauh lebih sedikit diterapkan
daripada fluoresensi. Namun, fosforensi molekuler telah digunakan untuk penentuan dari
berbagai spesies organik dan biokimia, termasuk asam nukleat, asam amino, pyrine dan
pirimidin, enzim, hidrokarbon polycyclic, dan pestisida. Banyak obat-obatan Senyawa
menunjukkan sinyal fosforensi yang dapat diukur. Instrumentasi untuk fluoresensi juga
agak lebih kompleks daripada fluoresensi. Instrumen fosforensi biasanya membedakan
fosforensi dari fluoresensi dengan menunda pengukuran fluoresensi hingga fluoresensi
membusuk hampir nol. Banyak instrumen fluoresensi memiliki lampiran, yang disebut
fosforoscopes, yang memungkinkan instrumen yang sama digunakan untuk pengukuran
fosfor.

C. Spektrum Eksitasi vs Emisi Spektrum

Photoluminescence direkam untuk mengukur intensitas radiasi yang dipancarkan

sebagai fungsi dari eksitasi panjang gelombang atau panjang gelombang emisi. Spektrum
eksitasi diperoleh oleh memantau emisi pada panjang gelombang tetap sambil
memvariasikan panjang gelombang eksitasi.

Gambar 3. Contoh eksitasi molekuler dan spektrum emisi.

Gambar 3 menunjukkan spektrum eksitasi untuk sistem hipotetis yang dijelaskan oleh
diagram tingkat energi pada Gambar 2. Ketika dikoreksi untuk variasi sumber intensitas
dan respons detektor, spektrum eksitasi sampel hampir identik dengan spektrum
serapannya. Spektrum eksitasi menyediakan cara yang nyaman untuk memilih panjang

7
gelombang eksitasi terbaik untuk analisis kuantitatif atau kualitatif. Dalam spektrum emisi,
panjang gelombang tetap digunakan untuk merangsang molekul, dan intensitas radiasi
yang dipancarkan dipantau sebagai fungsi dari panjang gelombang. Meskipun sebuah
molekul hanya memiliki satu spektrum eksitasi, molekul itu memiliki dua spektrum emisi,
satu untuk fluoresensi dan satu untuk fosfor. Spektrum emisi yang sesuai untuk sistem
hipotetis di Gambar 2 ditunjukkan pada Gambar 3.

D. Instrumentasi Molekular Fosforesensi

Instrumentasi Fosfororesensi Molekul untuk fosfororesensi molekuler harus

membedakan antara fluoresensi dan fluoresensi. Sejak masa hidup untuk fluoresensi jauh
lebih pendek dari pada untuk fluoresensi, diskriminasi adalah mudah dicapai dengan
memasukkan penundaan antara menarik dan mengukur berpendar emisi. Desain
instrumental yang khas, ditunjukkan Seperti yang ditunjukkan pada Gambar 3

Gambar 4. Diagram blok untuk molekul spektrometer fosforensi dengan inset

menunjukkan bagaimana helikopter digunakan untuk mengisolasi eksitasi dan emisi

dalam inset, kedua chopper diputar keluar dari fase, sehingga emisi fluoresen diblokir dari
detektor ketika sumber eksitasi difokuskan pada sampel, dan sumber eksitasi diblokir dari
sampel saat mengukur fosfor emisi. Karena fosforensi adalah proses yang lambat,
ketentuan harus dibuat mencegah penonaktifan keadaan tereksitasi oleh konversi eksternal.

8
Secara tradisional, ini telah dilakukan dengan melarutkan sampel dalam pelarut organik
yang cocok, biasanya campuran etanol, isopentana, dan dietil eter. Larutan yang dihasilkan
adalah dibekukan pada suhu cair-N2, membentuk padatan yang jelas secara optik. Matriks
padat meminimalkan konversi eksternal karena tabrakan antara analit dan pelarut.
Konversi eksternal juga diminimalkan dengan melumpuhkan sampel pada padatan substrat,
memungkinkan pengukuran fosfor pada suhu kamar. Satu Pendekatannya adalah
menempatkan setetes larutan yang mengandung analit pada kertas saring kecil disk
terpasang pada probe sampel. Setelah mengeringkan sampel di bawah lampu panas, itu
probe sampel ditempatkan di spektrofluorometer untuk analisis. Permukaan padat lainnya
yang telah digunakan termasuk gel silika, alumina, natrium asetat, dan sukrosa. Ini
Pendekatan ini sangat berguna untuk analisis pelat kromatografi lapis tipis.

E. Prinsip Fosforesensi

Melibatkan penyerapan radiasi dan pengemisian radiasi yang umumnya lebih

panjang gelombangnya atau lebih rendah energinya. Energi radiasi yang tidak teremisikan
dalam bentuk radiasi kemudian diubah menjadi energi termal. Suatu senyawa yang
menyerap cahaya yang berada dalam rentang panjang gelombang cahaya tampak akan
terlihat berwarna. Bila senyawa yang sama memancarkan cahaya pada suatu panjang
gelombang yang berlainan, senyawa itu akan tampak berwarna dua atau berfluorosensi.
Cara Membedakannya Fluorosensi maupun fosforesensi, Fluorosensi maupun
fosforesensi berkaitan dengan perubahan energi vibrasi. Perbedaan antara kedua fenomena
tersebut ialah dalam selang waktu antara penyerapan dan emisi Pada fosforesensi, emisi
terjadi pada waktu sekitar 10-4 detik setelah penyerapan sementara fluorosensi lebih cepat
terjadi yaitu dalam waktu 10-6 – 10-9 detik setelah penyerapan. Fluoresensi terjadi dalam
selang waktu lebih pedek daripada fosforesensi. Selain itu kondisi yang menyebabkan
fluoresensi dan fosforesensi pun berbeda. Fluoresensi biasa terjadi pada suhu sedang dalam
larutan cair, sedangkan fosforesensi biasa terjadi pada suhu sangat rendah dan pada media
pekat. Pada fluoresensi dan fosforesensi terjadi perubahan energi vibrasi molekul sebagai
akibat dari penyerapan radiasi oleh molekul tersebut.

F. Aplikasi Fosforesensi

Contoh aplikasi fosforesensi adalah rompi yang terlihat menyala ini karena fosfor
yang terkandung dalam warna tersebut mengalami perpendaran akibat adanya eksitasi
elektron sebagai dampak rompi tersebut telah terpapar oleh cahaya. Dengan kata lain

9
terjadi fotolumenensi yaitu proses eksitasi elektron pada sebuah material yg dapat
menyerap photon, dan dengan energi photon, maka elektron dapat tereksitasi menjadi
elektron bebas atau menempati tingkat energi yg lebih tinggi. Oleh karena itu, rompi
tersebut terlihat berwarna dalam gelap.
G. Validasi Metode
Validasi metoda analisis adalah suatu tindakan penilaian terhadap parameter
tertentu, berdasarkan percobaan laboratorium, untuk membuktikan bahwa parameter
tersebut memenuhi persyaratan untuk penggunaannya (Harmita, 2004).
1. Kecermatan (accuracy)
Kecermatan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil analis
dengan kadar analit yang sebenarnya. Kecermatan dinyatakan sebagai persen perolehan
kembali (recovery) analit yang ditambahkan. Kecermatan hasil analis sangat tergantung
kepada sebaran galat sistematik di dalam keseluruhan tahapan analisis. Oleh karena itu
untuk mencapai kecermatan yang tinggi hanya dapat dilakukan dengan cara mengurangi
galat sistematik tersebut seperti menggunakan peralatan yang telah dikalibrasi,
menggunakan pereaksi dan pelarut yang baik, pengontrolan suhu, dan pelaksanaannya
yang cermat, taat asas sesuai prosedur. Cara penentuan: Kecermatan ditentukan dengan
dua cara yaitu metode simulasi (spiked-placebo recovery) atau metode penambahan baku
(standard addition method).
Dalam metode simulasi, sejumlah analit bahan murni (senyawa pembanding
kimia CRM atau SRM) ditambahkan ke dalam campuran bahan pembawa sediaan farmasi
(plasebo) lalu campuran tersebut dianalisis dan hasilnya dibandingkan dengan kadar analit
yang ditambahkan (kadar yang sebenarnya). Kriteria kecermatan sangat tergantung kepada
konsentrasi analit dalam matriks sampel dan pada keseksamaan metode (RSD).
Vanderwielen, dkk menyatakan bahwa selisih kadar pada berbagai penentuan (Xd) harus
5% atau kurang pada setiap konsentrasi analit pada mana prosedur dilakukan. Harga rata-
rata selisih secara statistik harus 1,5% atau kurang. Kriteria tersebut dinyatakan
secara matematik sebagai berikut:

10
Xi = hasil analisis
X0 = hasil yang sebenarnya
I = nilai t pada tabel t’ student pada atas 95%
S = simpangan baku relatif dari semua pengujian
n = jumlah sampel yang dianalisis
Kadar analit dalam metode penambahan baku dapat dihitung sebagai berikut:

C = kadar analit dalam sampel

S = kadar analit yang ditambahkan pada sampel
R1 = respon yang diberikan sampel
R2 = respon yang diberikan campuran sampel dengan tambahan analit
Perhitungan perolehan kembali dapat juga ditetapkan dengan rumus sebagai berikut:

CF = konsentrasi total sampel yang diperoleh dari pengukuran

CA = konsentrasi sampel sebenarnya
C*A = konsentrasi analit yang ditambahkan

2. Keseksamaan (precision)
Keseksamaan adalah ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian antara hasil uji
individual, diukur melalui penyebaran hasil individual dari rata-rata jika prosedur
diterapkan secara berulang pada sampel-sampel yang diambil dari campuran yang
homogen. Cara penentuan: Keseksamaan diukur sebagai simpangan baku atau simpangan
baku relatif (koefisien variasi). Keseksamaan dapat dinyatakan sebagai keterulangan
(repeatability) atau ketertiruan (reproducibility). Keterulangan adalah keseksamaan
metode jika dilakukan berulang kali oleh analis yang sama pada kondisi sama dan dalam
interval waktu yang pendek. Keterulangan dinilai melalui pelaksanaan penetapan terpisah
lengkap terhadap sampel-sampel identik yang terpisah dari batch yang sama, jadi
memberikan ukuran keseksamaan pada kondisi yang normal. Ketertiruan adalah
keseksamaan metode jika dikerjakan pada kondisi yang berbeda.
11
3. Selektivitas (Spesifisitas)
Selektivitas atau spesifisitas suatu metode adalah kemampuannya yang hanya
mengukur zat tertentu saja secara cermat dan seksama dengan adanya komponen lain yang
mungkin ada dalam matriks sampel. Selektivitas seringkali dapat dinyatakan sebagai
derajat penyimpangan (degree of bias) metode yang dilakukan terhadap sampel yang
mengandung bahan yang ditambahkan berupa cemaran, hasil urai, senyawa sejenis,
senyawa asing lainnya, dan dibandingkan terhadap hasil analisis sampel yang tidak
mengandung bahan lain yang ditambahkan. Cara penentuan: Selektivitas metode
ditentukan dengan membandingkan hasil analisis sampel yang mengandung cemaran, hasil
urai, senyawa sejenis, senyawa asing lainnya atau pembawaplasebo dengan hasil analisis
sampel tanpa penambahan bahan bahan tadi. Penyimpangan hasil jika ada merupakan
selisih dari hasil uji keduanya. Jika cemaran dan hasil urai tidak dapat diidentifikasi atau
tidak dapat diperoleh, maka selektivitas dapat ditunjukkan dengan cara menganalisis
sampel yang mengandung cemaran atau hasil uji urai dengan metode yang hendak diuji
lalu dibandingkandengan metode lain untuk
pengujian kemurnian seperti kromatografi, analisis kelarutan fase, dan Differential
Scanning Calorimetry. Derajat kesesuaian kedua hasil analisis tersebut merupakan ukuran
selektivitas. Pada metode analisis yang melibatkan kromatografi, selektivitas ditentukan
melalui perhitungan daya resolusinya (Rs).
4. Linearitas dan Rentang
Linearitas adalah kemampuan metode analisis yang memberikan respon yang
secara langsung atau dengan bantuan transformasi matematik yang baik, proporsional
terhadap konsentrasi analit dalam sampel. Rentang metode adalah pernyataan batas
terendah dan tertinggi analit yang sudah ditunjukkan dapat ditetapkan dengan kecermatan,
keseksamaan, dan linearitas yang dapat diterima. Cara penentuan: Linearitas biasanya
dinyatakan dalam istilah variansi sekitar arah garis regresi yang dihitung berdasarkan
persamaan matematik data yang diperoleh dari hasil uji analit dalam sampel dengan
berbagai konsentrasi analit. Perlakuan matematik dalam pengujian linearitas adalah melalui
persamaan garis lurus dengan metode kuadrat terkecil antara hasil analisis terhadap
konsentrasi analit. Dalam beberapa kasus, untuk memperoleh hubungan proporsional
antara hasil pengukuran dengan konsentrasi analit, data yang diperoleh diolah melalui
transformasi matematik dulu sebelum dibuat analisis regresinya. Sebagai parameter adanya
hubungan linier digunakan koefisien korelasi r pada analisis regresi linier Y = a + bX.
Hubungan linier yang ideal dicapai jika nilai b = 0 dan r = +1 atau –1 bergantung pada arah
garis. Sedangkan nilai a menunjukkan kepekaan analisis terutama instrumen yang
digunakan. Parameter lain yang harus dihitung adalah simpangan baku residual (Sy).

12
Dengan menggunakan kalkulator atau perangkat lunak komputer, semua perhitungan
matematik tersebut dapat diukur

BAB III
PENUTUP
13
A. Kesimpulan
Berdasarkan tujuan maka dapat disimpulkan bahwa :
1. Fosforesensi, pemancaran kembali sinar oleh molekul yang telah menyerap energi sinar
dalam waktu yang relatif lebih lama (10-4 detik). Jika penyinaran kemudian dihentikan,
pemancaran kembali masih dapat berlangsung. Fosforesensi berasal dari transisi antara
tingkat-tingkat energi elektronik triplet ke singlet dalam suatu molekul. Fosforesensi
biasa terjadi pada suhu sangat rendah dan pada media pekat.
2. Penyerapan foton energi yang benar, mengeksitasi molekul ke salah satu dari beberapa
tingkat energi getaran dalam keadaan elektronik tereksitasi pertama, S1, atau keadaan
tereksitasi elektronik kedua, S2, keduanya merupakan status singlet. Relaksasi untuk
keadaan dasar dari keadaan tereksitasi ini terjadi oleh sejumlah mekanisme itu entah
tanpa radiasi, dalam hal tidak ada foton yang dipancarkan, atau melibatkan emisi a
foton. Contoh aplikasinya pada rompi yang terlihat menyala ini karena fosfor yang
terkandung dalam warna tersebut mengalami perpendaran akibat adanya eksitasi
elektron sebagai dampak rompi tersebut telah terpapar oleh cahaya.
B. Saran

Saran dari penulis yaitu agar pembaca dapat memahami isi dari makalah ini dan
dapat memberikan saran yang bersifat membangun.

DAFTAR PUSTAKA

14
Harmita. 2004, Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode Dan Cara Perhitungannya, Majalah
Ilmu Kefarmasian, I(3).

Harvey, D., 2000, Modern Analytical Chemistry, Amerika Serikat: Depauw University.

Muntiq, A., 2016, Luminescence, http://sylvanachemistry.blogspot.html (Online), diakses

6 Oktuber 2019.

Skoog, D. A., Donald M. W., James H.,dan Stanley R. C., 2014 , Fundamental of
Analitical Chemistri. Analytical. US.

Susetyo, W., 1998, Spektrometri Gamma dan Penerapannyan Dalam Analisis Pengaktifan
Neutron, Gadjah Mada University Press, Bulaksumur, Yogyakarta.

15