Buku Teks Bahan Ajar Bakterologi

BUKU TEKS BAHAN AJAR SISWA
BIDANG STUDI
PEMERIKSAAN LABORATORIUM (BAKTEROLOGI)
SEMESTER : IV
Kompetensi Dasar:
1. Membuatan Media Biakan
2. Inokulasi Mikroba (bakteri dan jamur)
4. Identifikasi Mikroba (Bakteri dan Jamur)
5. Menghitung Mikroba Pencemar Bahan Pangan
6. Memahami Virus
Oleh:
Tim Pusat Pendidikan, Standarisasi dan Sertifikasi Profesi Pertanian
BADAN PENYULUHAN DAN PENGEMBANGAN SDM PERTANIAN

JAKARTA
2014
Buku Teks Bahan Ajar Siswa ini menyanjikan informasi
tentang telaah teknik dasar-dasar mengenal jazad renik (bakteri,
jamur dan virus) yang menyerang pada hewan ternak secara
umum.
Mikrobiologi Dalam Kehidupan

Sejarah kehidupan telah terbukti bahwa ada suatu kehidupan yang
tidak dapat dilihat dengan mata manusia secara langsung, hanya aktifitas
dan hasilnya saja yang dapat diketahui dan dirasakan, ini membuktikan
bahwa keberadaan makluk mikrooraganisme atau jazat renik memang
nyata kenedarnnya. Kondisi ini disadari atau tidak bahwa sebenarnya
manusia bergantung pada kehidupan ini pula, sehingga kita perlu mengerti
dan memahami peran jazat renik bagi kesehatan manusia dan ternak.
Untuk bisa mengerti dan memahami adanya kehidupan jazat renik
disekitar kita, maka perlu mengenalnya, mulai dari bentuk, sifat, aktifitas
dan pengaruh-pengaruhnya dalam kehidupan. Oleh karena itu kita harus
membuat suatu perangkat untuk dapat mengetahuinya melalui pembiakan
bakteri yang dimulai dari membuat media biakan, membiakkan,
mengidentifikasi bentuk dan mempelajari sifatnya.
KATA PENGATAR
Puji syukur kami panjatkan kehadirad Tuhan Yang Maha Esa, atas berkah, rahmad dan
petunujuk-Nya, sehingga buku bahan ajar Pemeriksaan Laboratorium Bakterologi
untuk Sekolah Menengah Kejuruan-Pembangunan Pertanian (SMK-PP) Program Studi
Kesehatan Hewan dapat tersusun sesuai rencana.
Penyusunan buku bahan ajar siswa ini dilaksanakan atas dasar Surat Keputusan
Bersama antar Kementrian Pertanian dan Kementrian Pendidkan dan Kebudayaan
Nasional Nomor. yang ditanda-tangani pada 4 Desember 2013, dengan tujuan untuk
memenuhi kebutuhan proses pembelajaran di SMK-PP sehingga pelaksanaan
pendidikan dapat terlaksana dan terukur dengan jelas, bulat, utuh dan tuntas berdasar
standart kemampuan komptensi nasional Indonesia (SKKNI) paramedis kesehatan
hewan dari Kementrian tenaga kerja dan transmigrasi nomor: 43 tahun 2014.
Kami menyadari sepenuhnya bahwa buku bahan ajar siswa ini masih jauh sempurna,
sekalipun dalam menyusun kami telah berusaha untuk memenuhi standart isi yang
harus dipenuhi sebagai prasyarat mutlak bagi proses pembelajaran di SMK-PP.
Bertitik tolak dari kondisi ini, maka kami senantiasa mengharapkan kritik dan saran
dari semua pihak demi kesempurnaan modul/bahan ajar untuk masa-masa
mendatang.
April 2014
Tim Penyusun
DAFTAR ISI
i
KATA PENGANTAR. ………………………………………………………........... ii
DAFTAR ISI. ……………………………………………………………………….. iii
PETA KEDUDUKAN BAHAN AJAR. ……………………………………………. iv
GLOSARIUM. ………………………………………………………………………
I PENDAHULUAN 1
A. Deskrripsi.………………………………………………………………………………………………. 1
B. Prasyarat. ………………………………………………………………………………………………. 2
C. Petunjuk Penggunaan. …………………………………………………………………………… 3
D. Tujuan Akhir. …………………………………………………………………………………………. 4
E. Cek Kemampuan Awal. ………………………………………………………………………….. 5
II PEMEBALAJARAN
1. MEMBUAT MEDIA BIAKAN
A. Deskripsi. ………………………………………………………………………………………………. 6
B. Kegiatan Belajar. ……………………………………………………………………………………. 7
1. Tujuan Pembelajaran. ………………………………..……………………………………… 8
2. Uraian Materi. …………………………………………………………………………………… 9
3. Refleksi. …………………………………………………………………………………………….. 10
4. Tugas.
…………………………………………………………………………………………………
5. Tes Formatif. ………………………………………………………………………………………
C. Penilaian
1. Sikap.
…………………………………………………………………………………………………
2. Pengetahuan.
…………………………………………………………………………………….
3. Ketrampilan.
………………………………………………………………………………………
2. INOKULASI BAKTERI PADA MEDIA BIAKAN

A. Deskripsi. ……………………………………………………………………………………………….
B. Kegiatan Belajar. …………………………………………………………………………………….
1. Tujuan Pembelajaran. ………………………………………………………………………..
2. Uraian Materi. ……………………………………………………………………………………
3. Refleksi. ……………………………………………………………………………………………..
4. Tugas.
…………………………………………………………………………………………………
5. Tes Formatif. ………………………………………………………………………………………
C. Penilaian
1. Sikap. ……………………………………………………………………………………………….
2. Pengetahuan. …………………………………………………………………………………..
3. Ketrampilan. …………………………………………………………………………………….
3. PEMERIKSAAN BAKTERI PADA MEDIA BIAKAN

A. Deskripsi. ……………………………………………………………………………………………
B. Kegiatan Belajar. ………………………………………………………………………………..
1. Tujuan Pembelajaran. ………………………………………………………………..
2. Uraian Materi. ……………………………………………………………………………..
3. Refleksi. ……………………………………………………………………………………….
4. Tugas. …………………………………………………………………………………………..
5. Tes Formatif. ………………………………………………………………………………..
C. Penilaian
1. Sikap. ……………………………………………………………………………………………
2. Pengetahuan. ……………………………………………………………………………….
3. Ketrampilan. …………………………………………………………………………………
4. IDENTIFIKASI MORFOLOGI BAKTERI

A. Deskripsi. ……………………………………………………………………………………………
1. Tujuan Pembelajaran. …………………………………………………………………..
2. Uraian Materi. ………………………………………………………………………………
3. Refleksi. ………………………………………………………………………………………..
4. Tugas. …………………………………………………………………………………………..
5. Tes Formatif. ………………………………………………………………………………..
C. Penilaian
1. Sikap. …………………………………………………………………………………………..
2. Pengetahuan. ………………………………………………………………………………
3. Ketrampilan. ………………………………………………………………………………..
5. INOKULASI JAMUR
A. Deskripsi. ……………………………………………………………………………………………
1. Tujuan Pembelajaran. …………………………………………………………………..
2. Uraian Materi. ………………………………………………………………………………
3. Refleksi. ……………………….……………………………………………………………….
4. Tugas. …………………………………………………………………………………………
5. Tes Formatif. ………………………………………………………………………………
C. Penilaian
1. Sikap.…………………………………………………………………………………………
2. Pengetahuan. …………………………………………………………………………
3. Ketrampilan. …………………………………………………………………………
6. INOKULASI VIRUS
A. Deskripsi. ……………………………………………………………………………………………
B. Kegiatan Belajar. ……………………………………………………………………
1. Tujuan Pembelajaran. ………………………………..…………………………………

2. Uraian Materi. ………………………………………….….……………………………….
3. Refleksi. ………………………………………………………………………………………..
4. Tugas. …………………………………………………………………………………………..
5. Tes Formatif. ………………………………………………………………………………..
C. Penilaian
1. Sikap. ……………………………………………………………………………………………
2. Pengetahuan. ……………………………………………………………………………….
3. Ketrampilan. ………………………………………………………………………………..
III PENUTUP
DAFTAR PUSTAKA
PETA KEDUDUKAN BAHAN AJAR
BIDANG STUDI PEMERIKSAAN LABORATORIUM
RUANG LINGKUP LABORATORIUM

KESEHATAN HEWAN
PEMERIKSAAN PEMERIKSAAN PEMERIKSAAN

LABORATORIUM LABORATORIUM LABORATORIUM
PARASITOLOGI BAKTEROLOGI, SEROLOGI DAN
VIROLOGI, PATOLOGI ANATOMI
FUNGIOLOGI
PEMERIKSAAN KESEHATAN TERNAK/

KLINIK HEWAN
DIAGNOSA
PROGNOSA
PENGOBATAN/ PERAWATAN
KESEHATAN TERNAK
TERNAK SEHAT DAN
PENINGKATAN PRODUKTIFITAS
TERNAK
I. PENDAHULUAN
A. Deskrripsi
Organisme hidup yang hidup menumpang pada organisme lain dan
dengan segala aktifitasnya bersifat merugikan atau mengganggu kenyamanan
hidup organisme yang ditumpanginya lazim disebut parasit. Dalam
pembahasan selanjutnya yang dimaksud parasit dibatasi hanya untuk
organisme atau mikroorganisme yang tergolong dalam kelompok hewan sedag
mikroorganisme jenis lainnya seperti bakteri, richetsia, jamur, virus dan freon
dinamai penyakit.
B. Prasyarat:
Untuk kelancaran proses pembelajaran dalam mempelajari buku teks
ini, maka bagi siswa kelas XI program studi kesehatan hewan harus memeiliki
kemazmpuan yang disyaratkan, sebagai berikut:
1. Telah mengikuti pembelaharan anatomi dan fisiologi tubuh.
2. Telah mempelajari teknik menggunakan alat pemeriksaan sampel
(mikrometer, mikroskope, gelas ukur dan lain-lain.
3. Telah mengetahui teknik mengukur sampel secara morfometriks.
C. Petunjuk Penggunaan
1. Petunjuk Bagi Siswa
a. Umum.
Untuk membantu kelancaran belajar Saudara, disediakan modul
pembelajaran yang terdiri dari 2 penggalan atau bagian. Setiap penggalan
disajikan secara rinci dari materi pelajaran yang terdiri dari teori dan
praktek. Pada setiap akhir penggalan disediakan rangkuman dan soal-soal
latihan, kerjakan soal latihan dan hasilnya diserahkan kepada Bapak/Ibu
Guru.
b. Khusus
- Pelajaran paket keahlian ini berturut-turut mulai dari penggalan 1 dan 2,
Saudara tidak diperbolehkan melanjutkan modul berikutnya sebelum

mempelajari bagian secara berurutan dan telah dinyatakan berhasil oleh
Bapak/Ibu Guru, melalui tes formatif dengan nilai 80.
- Kerjakan soal test formatif pada lembar jawaban yang telah disedia kan.
- Cocokan jawaban Saudara dengan kunci jawaban yang disediakan dan
berilah skor.
1. Petunjuk Pemanfaatan Bahan Ajar Bagi Guru
Sebelum Pembelajaran:
1. Menyiapkan modul yang akan diberikan kepada siswa
2. Memberikan informasi tentang topik modul, sasaran modul, alokasi waktu,
tujuan intruksional, materi pelajaran, kegiatan guru, prosedur evaluasi.
3. Mempersiapkan lembar kerja,lembar test, peralatan dan bahan kerja
pengalaman serta sumber belajar
Pada saat berlangsungnya proses belajar:
1. Guru menjelaskan pada siswa tidak boleh mengerjakan soal yang ada pada
lembar kegiatan siswa sebelum mempelajari kegiatan dengan baik.
2. Guru menjelaskan bahwa selama mengerjakan modul, siswa boleh bertanya
baik kepada teman maupun guru.
3. Guru memeriksa kelas untuk mengatahui kesulitan yang dialami oleh siswa
dalam memahami petunjuk
4. Guru meberikan lembar test formatif kepada siswa yang telah selesai
belajar di setiap penggalan.
5. Guru memeriksa lembar kerja siswa, dengan ketentuan:
a. Bisa memberikan kunci jawaban kepada siswa yang telah mencapai
kebenaran 80 %.
b. Menyuruh siswa mengerjakan kembali soal test hingga siswa bisa
mencapai kebenaran 80 %.
Sesudah Pembelajaran Selesai

1. Guru memberikan lembar tes pada siswa yang sudah menyelesaikan
modulnya.
2. Guru menarik kembali lembar tes dan lembar jawaban siswa.
3. Guru mengintruksikan kepada siswa untuk melanjutkan ke penggalan
selanjutnya atau mengerjakan praktek sesuai petunjuk lembar kerja.
D. Tujuan Akhir
E. Cek Kemampuan Awal
Kerjakan soal dibawah ini secara mandiri, Dengan memberikan tanda silang
pada option jawaban diantara A, B, C dan D yang tersedia pada lembar soal.
1. Parasit obligat adalah parasit yang dalam hidupnya bersifat:
a. Selalu menetap pada induk semang.
b. Tidak selamanya hidupnya berada pada induk semang
c. Dalam hidupnya hanya menumpang sementara pada
II. PEMBELAJARAN
Kegiatan Pembelajaran I : Membuat Media Biakan
A. Deskripsi
Setiap mahluk hidup mulai tingkat rendah hingga mahluk hidup tingkat tinggi
memerlukan tempat hidup atau habitat yang sesuai dengan kebutuhan tubuhnya
untuk bisa tumbuh dan berkembang biak. Kebutuhan tersebut mencakup adanya
ketersediaan makanan cukup, suhu yang sesuai, tekanan udara dan lain-lain yang
semuanya merupakan satu kesatuan dalam interaksi antara lingkungan dan mahluk
hidup yang ada di dalamnya.
Mikroorganisme atau jasad renik seperti bakteri, jamur dan virus dalam
bentuk tunggal dan secara kasat mata memang tidak tampak terlebih jika
mikroorganisme ini sedang hidup di dalam tubuh organisme lain atau berada pada
bahan lainnya. Sehingga untuk mengetahui ada tidaknya jasad ini kita hanya bisa
melihat melalui fenomena-fenomena yang dimunculkan oleh oganisme atau tempat
dimana mikroorganisme ini berada, seperti pembusukan, peradangan, fermentasi, dan
fenomena lainnya.
Media biakan adalah suatu bahan yang dibuat secara sintetik untuk menumbuh
kembangkan mikroorganisme, sehingga media biakan merupakan jalan untuk kita
lewati agar dapat melihat aktifitas mikroorganisme terutama yang bersifat
menguntungkan atau yang merugikan kehidupan kita.
B. Kegiatan Belajar
1. Tujuan Pembelajaran:
Setelah belajar siswa haus mampu:
a. Meracik media biakan sesuai volumetri resep media biakan dengan benar
b. Melakukan sterilisasi media biakan dengan benar
c. Menuangkan media biakan secara aseptik dengan benar
2. Uraian Materi Pelajaran.

Media biakan adalah suatu sediaan atau campuran bahan nutrisi yang diracik
atau dibuat secara khusus dan ditempatkan pada tempat khusus untuk menumbuhkan
mikroorganisme (bakteri, jamur dan virus), sekalipun golongan bakteri dan jamur
mampu hidup pada bahan pangan dalam kondisi yang terbuka seperti pada
kehidupannya di alam bebas. Khusus untuk kepentingan pemeriksaan laboratorium
media biakan bakateri harus dibuat sesteril mungkin guna pengamatan/pemeriksaan,
sedang tempat khusus yang dimaksud adalah tabung reaksi, cawan petri, tabung
durham, tabung katalase atau tabung reduktase.
Syarat Media Biakan:
Media biakan sebagai tempat tumbuh bakteri/mikroorganisme harus

memenuhi persyaratan dasar sebagai tempat hidup dan berkembangnya
mikroorganisme (bakteri, jamur dan virus) diantaranya:
a. Memiliki kandungan air
b. Mengandung protein
c. Mengandung karbohidrat
d. pH yang cocok
e. Oksigen atau tanpa oksigen
f. Suhu yang cocok
g. Vitamin dan mineral.
h. Bahan penyubur/ penghambat tumbuh. (tergantung kebutuhan)
Bahan untuk media bikan biasanya dibuat sendiri sesuai resep media atau
dibeli dalam bentuk jadi, bahan-bahan tersebut kemudian ditimbang dan dicampur
sesuai resep media biakan yang telah ditentukan berdasar tujuan pembiakan
bakteri. proses pembuatan dimulai dari memasak atau merebus resep media pada
tabung erlenmeyer hingga masak, selanjutnya di sterilkan pada alat outoclaf
dengan suhu, tekanan udara dan waktu tertentu, kemudian bahan media biakan
dituangkan pada tempat/media secara aseptik agar bebas dari pencemaran.
Sebelum digunakan sebagai media penanaman bakteri, media biakan harus
dalam keadaan steril atau bebas dari mikroorganisme pencemar, Untuk itu media
harus diuji terlebih dahulu dengan cara diincubasikan atau dimasukkan dalam
incubator dengan suhu 37oC selama 24 jam.
Media Biakan ditinjau berdasar macam/jenisnya.
Berdasar jenisnya media biakan bakteri dibedakan menjadi:

a. Media biakan umum, yaitu suatu media biakan yang dibuat untuk
menumbuhkan semua jenis bakteri.
b. Media biakan selektif, yaitu media biakan yang dibuat dengan memberikan zat
atau bahan tertentu, sehingga bakteri yang dapat hidup hanya dari golongan
tertentu saja.
c. Media biakan penyubur, yaitu media biakan yang dibuat untuk penyuburkan
pertumbuhan bakteri dari golongan tertentu yang telah dikenal(diisolasi) agar
bakteri tersebut mampu tumbuh dengan sempurna (subur) untuk tujuan
tertentu.
d. Media Biakan biokimia atau gula-gula, yaitu media biakan khusus (biasanya
berisi aneka jenis karbohidrat) yang dibuat untuk mengetahui sifat biokimia
bakteri dalam memecahan/mencerna berbagai jenis zat gula.
Media Biakan ditinjau berdasar bentuk:
Media biakan berdasar bentuknya dapat dibedakan menjadi 3 bentuk, yaitu:

a. Media biakan cair, yaitu media biakan berbentuk cair dan berisi nuri yang larut
dalam air, media ini bisa berjenis media biakan umum, selektif, penyubur dan
media biokimia.
b. Media Biakan ½ Padat, yaitu media biakan cair yang ditambahkan zat pemadat
0,5 hingga 1 % dari resep media sehingga membentuk kekentalan tertentu
untuk membiakan bakteri yang memiliki sifat motil/bergerak dengan tanda
jika biakan menyebar ke sekitar inokulasi berarti bakteri tersebut memiliki
sifat motil tetapi jika tidak bermotil bakteri akan tumbuh disekitar tempat
dimana bakteri tersebut diinokulasikan.
c. Media biakan padat, yaitu suatu media biakan bakteri yang dibuat dari bahan
pokok media dan ditambahkan zat pemadat (agar-agar atau gelatin) agar
membentuk bahan padatan yang elastis, media ini dapat menumbuhkan
bakteri secara terpisah-pisah sehingga bakteri membentuk koloni (kumpulan
bakteri). Media padat berdasar bentuknya dibedakan lagi menjadi 3 bentuk,
yaitu: Media plat atau lempeng agar, Media biakan tegak dan Media biakan
miring, dari ketiga media biakan ini memiliki fungsi yang berbeda sesuai dari
tujuan penanaman atau inokulasi bakteri.
1. Membuat Media Biakan Cair.
Tujuan utama pembuatan media biakan cair adalah bahwa secara umum hampir
semua bakteri mampu tumbuh pada media biakan cair selama media tersebut
mengandung unsur-unsur nutrisi sesuai kebutuhan hidup mikroba. Teknik pembuatan
media biakan cair pada dasarnya mencampur bahan-bahan media biakan dengan
menimbang atau mengukur suatu bahan sesuai petunjuk atau resep media biakan,
bahan media biakan bisa dibuat sendiri atau membeli bahan yang sudah jadi, tinggal
mengencerkan kemudian disterilkan dan dibagi kedalam tabung reaksi.
Kelebihan media biakan cair:
a. Dapat menumbuhkan semua jenis bakteri (media umum)
b. Dapat dijadikan sebagai tempat kulture bakteri murni. (stock kulture)
c. Dapat dijadikan media umum dalam pengiriman spesimen (transport media)
d. Dapat digunakan untuk uji biokimia bakteri (media gula-gula)
Kekurangan
a. Tidak dapat menyeleksi/ memisahkan jenis-jenis bakteri.
b. Semua jenis bakteri tumbuh bercampur-campur.
c. Bakteri akan mati dengan sendirinya jika nutrisi dlam media telah habis.
Alat dan Bahan :

Bahan: Bahan disesuaikan dengan Resep Media Biakan, daging, air kaldu daging,
aquadestilata, alkohol 70 %. Dll.
A l a t: Neraca, tabung reaksi, tabung erlenmeyer, gelas piala, cawan petri, pipet ukur,
pipet tetes, Enkas, autoclaf, kompor, panci, Stang kaki tiga, lampu spirtus, kain
lap, Gelas ukur, dll.
Contoh: Resep Media Biakan Cair:

1. Nutrien Boylon:
- Kaldu daging 0,5 Liter. - Bacto Pepton 10-15 gram.
- Glucosa 5 gram. - Aquades 1 Lt.
- Sterilkan pada suhu 121oC selama 15 Menit.
2. Air Pepton
- Pepton (bacto) 1 gram - Garam dapur 0,5 gram
- Aquades 100 Ml - Sterilkan pada suhu 121oC, 15 Menit
3. Air Kaldu :
- Pepton 1 gram, - Garam dapur 0,5 gram.
- Kaldu daging 100 ml - Sterilkan pada suhu 121 oC, 15 Menit
Media biakan No. 1, 2 dan 3 digunakan untuk media biakan umum yaitu
menumbuhkan semua jenis bakteri dan juga digunakan untuk transport media
yaitu untuk mengirim spesimen bahan pemeriksaan laboratorium.
4. MRVP-Medium :
- Pepton dapar 77 gr,
- Dektrose 5 gr.
- Dikaliumdihidrogenfospat 5 gr
- Aquades 1000 ml,
- Sterilkan pada suhu 121oC selama 15 Menit
Media biakan ini digunakan untuk melakukan uji sifat bakteri terhadap gram
negatif.
5. Loewenstein-Jansen Medium
- Momokaliumfosfat 2,4 gram - Magnesiumsulfat 240 mg
- Manesiumsitrat 600 mg - Asparagin 3,6 gram
- Gliserol 12 ml - Aquades 600 ml
- Sterilkan pada suhu 121oC selama 15 Menit
6. Media Biakan gula-gula
Media biakan gula-gula yaitu merupakan media biakan umum berbentuk cair,
dimana pada setiap tabung pengujian ditambahkan unsur gula-gula atau bahan
karbohidrat dengan ukuran 5 gram hingga 20 gram bahan pada setiap 1 liter media
biakan. Bahan karbohidrat atau gula-gula yang digunakan berupa: glukosa,
sakarosa, dekstrosa, manitol, heksosa, pentosa, dll.
Tujuan pembuatan media biakan gula-gula untuk mengetahui reaksi biokimia
dari kemampuan bakteri jenis tertentu dalam menggunakan atau mencerna bahan
karbohidrat dan perubahan-perubahan yang terjadi melalui daya fermentasi atau
penguraian bahan dengan menghasilkan suatu senyawa atau gugus yang berbeda.
Contoh: Jamur Tape secara umum memiliki kemampuan mengubah karbohidrat
yang terkandung dalam beras ketan atau singkong menjadi etanol atau alkohol.
Tetapi untuk tujuan pemeriksaan laboratorium pengujian pada media biakan ini
lebih dikhususkan untuk karbohidrat jenis apa saja yang sanggup diubah oleh
bakteri menjadi bahan lain.
Pengujian biakan gula-gula hanya dilakukan pada laboratorium yang lengkap
dengan tujuan penelitian yang lebih mendalam.
Langkah Kerja Pembuatan Media Biakan.
1. Persiapan :
a. Lakukan sterilisasi tabung reaksi dengan panas kering.
b. Siapkan kaldu daging
c. Siapkan alat dan bahan
d. Timbang bahan sesuai resep media biakan dengan neraca atau timbangan
duduk.
2. Perebusan media biakan
a. Larutkan bahan media dengan aquades sesuai resep dan rebus media biakan
pada tabung erlenmeyer diatas penganas hingga mendidih sambil terus diaduk
agar tidak terjadi penggumpalan.
b. Turunkan media dan tunggu hingga suhu turun antara 40-50oC
c. Tutup mulut tabung dengan kapas yang dipintal padat hingga rapat.
3. Sterilisasi.
a. Siapkan autoclaf dan bersihkan
b. Isi autoclaf dengan aquades sebanyak 2-3 liter
c. Tempatkan media biakan pada panci steem dan masukan kedalam autoclaf
d. Tutup rapat autoclaf dan panaskan diatas kompor (jika menggunakan pemanas
api), atau langsung dikontakkan dengan listrik jika aotoclat elektrik.
e. Lakukan pemanasan hingga suhu autoclaf 121oC selama 15 menit atau hingga
kleep udara telah membuka 3 kali secara outomatis.
f. Turunkan/matikan sumber pemanas dan buka klep udara hingga autoclaf tidak
memiliki tekanan lagi.
g. Biarkan suhu turun hingga 45-50oC
h. Ambil media biakan dalam masukkan kedalam enkas dan nyalakan lampu ultra
violet.
Media Biakan
Langsangan dan panci Steem
Air aquades 2-3 liter.
Api Pamanas
Gambar: Skema Autoklaf
4. Penuangan Media Biakan.

Untuk menuangkan media biakan ke dalam tabung/tempat menumbuhkan bakteri,
dilakukan secara aseptik dan diusahakan seseteril mungkin agar media biakan
tidak tercemar oleh jazat-jazat renik disekitar kita, untuk usaha tersebut
penuangan media dilakukan di dalam Enkas atau almari steril. Teknik menuangkan
media disesuai dengan prosedur dan dilakukan secara teliti, seksama dan akurat.
Ikutilah prosedur penuangan media biakan sesuai langkah kerja
Posisikan tabung reaksi diatas bunsen Buka tutup media biakan dengan
buka tutup tabung reaksi dengan ibu jari dan jari telunjuk
jari kelingking tangan kanan
Tuangkan media biakan ke dalam Tutup tabung reaksi dan sterilkan

Tabung reaksi sebanyak 12-15 Ml kapas penutup diatas bunsen 1-2 x
Simpan media biakan Incubasikan pada incubator selama 18-24 jam
pada rak tabung reaksi. Jika steril, simpan tabung media dalam kulkas
2. Membuat Media Biakan Padat dan Setengah Padat
Media biakan padat adalah media biakan untuk menumbuhkan bakteri

yang ditambahkan bahan pemadat, dimana bahan tersebut harus mampu
menjendalkan larutan media (penggumpalan seperti jelly) hingga membentuk
masa padatan yang elastis. Bahan yang umum digunakan sebagai pemadat
adalah gelatin dan ektrak agar-agar dari rumput laut atau bahan organik lain
dengan syarat tidak menghambat pertumbuhan bakteri dan dapat digunakan
sebagai sumber makanan.
Secara struktural gelatin merupakan bahan makanan yang banyak
mengandung protein sedang agar-agar sebagai sumber karbohidrat meskipun
manusia tidak dapat memanfaatkannya, perbedaan mendasar dari kedua bahan
ini adalah bahwa gelatin hanya dapat digunakan dalam 1 kali proses pembuatan
media, sedang agar-agar dapat diencerkan kembali dengan pemanasan.
Bentuk Media Biakan Padat:
Berdasar bentuknya media biakan padat dibagi menjadi 3 bentuk, yaitu:

a. Media lempeng agar atau plat agar, yaitu media biakan padat yang ditempatkan
pada cawan petri dengan ukuran 15-20 Ml/ cawan. Media ini bertujuan untuk
menumbuhkan koloni bakteri, dari koloni bakteri bisa dikembangkan langkah-
langkah pemeriksaan bakteri lebih lanjut seperti: indentifikasi bakteri, sifat
bakteri, isolasi bakteri, petogesitas bakteri, dll.
b. Media biakan agar tegak, yaitu media biakan yang diletakkan pada tabung reaksi
dengan ukuran 12-15 Ml per tabung, media biakan ini bertujuan untuk
mengetahui sifat pertumbuhan bakteri anaerob (bakteri tidak memerlukan
oksigen/ O2), bakteri aerob (butuh oksigen) dan bakteri pembentuk gas yang
ditandai dengan terpencarnya media biakan dalam tabung.
c. Media Biakan Agar Miring, yaitu media biakan yang dibuat dari media biakan agar
yang dituangkan kedalam tabung reaksi sebanyak 12-15 Ml/ tabung, kemudia
tabung dimiringkan 30-45o tetapi dalam pemakaiannya tetap dalam posisi tegak,
media biakan ini bertujuan untuk mengetahui patogenesitas atau tingkat virulensi
dari bakteri, dimana bakteri yang mampu tumbuh pada media biakan berarti
bakteri tersebut mampu menginvensi organisme lain.
Resep Media Biakan Padat:
1. Kaldu Boylon Agar teridiri dari :

- Pepton (bacto): 1,0 gr, - Natrium Klorida: 0,5 gr,
- Kaldu daging: 100 ml, - Agar agar: 1,5 – 2,0 gram.
- Sterilkan pada suhu 121 C selamam 15 menit
o
- Untuk mendia penyubur tambahkan darah merah 5-10 % pada sehu 45 oC

setelah penuangan media pada media plat agar secara aseptik dan dikerjakan
tetap di dalam enkas.
2. Agar Sitrat terdiri dari :
- Agar (bacto): 20 gr, - NaCl: 5 gr,
- Amoniumdihidrigenfosfat: 1 gr, - Dikalsiumdihidrogenfosfat: 1 gr,
- Natrium sitrat: 2 gr, - Broomtimol biru: 0,08 gr (80 mg)
- Aquades QS: 1000 ml.
- Sterilkan pada suhu 121oC selamam 15 menit.
3. Eosis-Metilen biru Agar (EMB) Terdiri dari:
- Pepton (bacto): 10 gr, - Laktose: 5 gr,
- Sukrose: 5 gr, - Dikalium hidrogenfosfat: 2 gr,
- Agar-agar: 13,5 gr, - Eosin: 400 Mg,
- Metilrn biru: 65 Mg, - Aquades QS: 1000 ml.
- Sterilkan pada suhu 121 C selamam 15 menit.
o
4. TSI- Agar (tripel sugar iron agar) Terdiri dari :

- Pepton (bacto): 20 gr, - Nacl: 5 gr,
- Laktose: 10 gr, - Sukrose: 10 gr,
- Glucose: 1 gr, - Feroamoniumsulfat: 200 mg,
- Na. tiosulfat: 200 mg, - Fenol red: 25 Gr,
- Agar-agar: 13 gr, - Aquades QS 1.000 Ml.
- Sterilkan pada suhu 121oC selamam 15 menit
5. Agar Mc. Conkey:
- Pepton (bacto): 17 gr, - proteose pepton: 3 gr,
- laktose: 10 gr, - Garam empedu: 1,5 gr,
- NaCl: 5 gr, - Agar-agar: 13,5 gr,
- Netral merah: 30 mg, - Kristal violet: 1 mg,
- aquades QS 1000 Ml.
6. Media Biakan Setengah Padat:
- Pepton (bacto): 10 gr, - Natrium Klorida: 5 gr,
- ekstrak Kaldu daging: 20 gr, - Agar agar: 5–8 gram,
- Glucose: 5 gr, - sukrose: 10 gr,
- aquades QS 1.000 Ml.
Langkah Kerja Pembuatan Media Biakan.
1. Persiapan :
a. Lakukan sterilisasi tabung reaksi dengan panas kering.
b. Siapkan kaldu daging
c. Siapkan alat dan bahan
d. Timbang bahan sesuai resep media biakan dengan neraca atau timbangan
duduk.
2. Perebusan media biakan
a. Rebus media biakan pada tabung erlenmeyer diatas penganas hingga
mendidih sambil terus diaduk agar tidak terjadi penggumpalan.
b. Turunkan media dan tunggu hingga suhu turun antara 40-50oC
c. Tutup mulut tabung dengan kapas yang dipintal padat hingga rapat.
3. Sterilisasi.
a. Siapkan autoclaf dan bersihkan
b. Isi autoclaf dengan aquades sebanyak 2-3 liter
c. Tempatkan media biakan pada panci steem dan masukan kedalam autoclaf
d. Tutup rapat autoclaf dan panaskan diatas kompor (jika menggunakan
pemanas api), jika menggunakan autoclaf elektrik, maka langsung
kontakkan dengan listrik.
e. Lakukan pemanasan hingga suhu autoclaf 121 oC selama 15 menit atau
hingga kleep udara telah membuka 3 kali secara outomatis.
f. Turunkan/matikan sumber pemanas dan buka klep udara hingga autoclaf
tidak memiliki tekanan lagi.
g. Biarkan suhu turun hinga 45-50oC
h. Ambil media biakan dalam masukkan kedalam enkas dan nyalakan lampu
ultra violet.
4. Penuangan Media Biakan.

Teknik menuangkan media biakan padat dibedakan menjadi tiga bentuk sesuai
maksud dan tujuan pembuatan media biakan tersebut, cara penuangan sebagai
berikut.
a. Media Biakan Agar Tegak: Teknik penuangan media agar tegak secara urutan
kerja sama seperti teknik menuangkan media biakan cair. Kemudian meida biakan
diletakkan secara tegak lurus pada rak tabung reaksi dan dibiarkan hingga
membeku. Masukkan dalam inkubator pada suhu 37 oC selama 24 Jam untuk uji
sterilitas media dan pisahkan (afkir) media yang terkontaminasi bakteri atau
jamur.
b. Media Biakan Agar miring: Teknik penuangan media agar miring secara urutan
kerja sama seperti teknik menuangkan media biakan cair. Kemudian meida biakan
diletakkan secara miring dengan sudut antara 30-45 o pada tempat miring dan
biarkan hingga membeku. Masukkan dalam inkubator pada suhu 37 oC selama 24
Jam untuk uji sterilitas media dan pisahkan (afkir) media yang terkontaminasi
bakteri atau jamur.
c. Media biakan setengah Padat: secara teknik penuangan media biakan setengah
padat sama dengan penuangan media biakan agar tegak atau media biakan cair,
kemudian media diletakkan pada rak tabung reaksi dengan tegak lurus hingga
membeku. Masukkan dalam inkubator pada suhu 37 oC selama 24 Jam untuk uji
sterilitas media dan pisahkan (afkir) media yang terkontaminasi bakteri atau
jamur.
d. Media Biakan Agar plat: Teknik penuangan media biakan plat agar/lempeng
agar berbeda dengan mendia yang lain. Yaitu media dituangkan ke dalam cawan
petri sebanyak 15-20 Ml/ cawan, dimana cawan dipegang dengan tangan kiri atau
kanan, untuk membukan tutup cawan dilakukan dengan ibu jari dan jari telunjuk.
Kemudian media biakan dituangkan ke dalam cawan sesuai ukuran 15-20
ml/cawan (semua pekerjaan dilakukan diatas bunsen). Setelah membeku cawan
petri dibalik (tutup dibagian bawah agar embun/titik air akibat panas tidak
mengenai media).
Prosedur menuang media biakan plat/lempeng agar dapat dilakukan secara
manual dan dengan menggunakan buret pembagi.
Prosedur Menuang Media Biakan Plat/Lempeng Agar secara Manual
1. Letakkan cawan pada telapak tangan 2. Tuangkan media Biakan

Atur posisi cawan sedemikian rupa Sesuai ukuran 15-20 Ml
Sehingga jari telunjuk dan ibu jari
dapat membuka tutup cawan tsb.
Letakan cawan dengan posisi rata Balik cawan petri agar titik air
hingga membeku. tidak mengenai media.
Alumunium foil
Prosedur Menuang Media dengan Buret Pembagi
Langkah Kerja:
1. Semua Pekerjaan dilakukan di dalam Enkas.

2. Isi buret pembagi dengan media biakan dan tutup tabung dengan aluminium
Foil
3. Buka Cawan petri dengan tangan seperti prosedur langsung.
4. Buka kran buret pembagi, dan curahkan media ke dalam cawan sesuai ukuran
(15-20 ml)
5. Tutup kran buret dan tutup cawan petri.
6. Setelah membeku, cawan dibalik (tutup dibawah).
7. Masukkan incubator pada suhu 37oC selama 24 jam untuk ujir pencemaran.
8. Jika terdapat 3-4 koloni pencemar, maka cemaran dapat dibuang/diambil
secara aseptik.
9. Bungkus media biakan dengan kertas steril dan simpan di kulkas, hingga media
digunakan.
Refleksi:
1. Apa yang membedakan media biakan cair, padat dan setengah padat berdasar
kegunaan media tersebut.
2. Apa kesamaan dan perbedaan pokok yang terdapat pada macam-macam jenis
media biakan berdasar resep media.
3. Alat dan bahan apa saja yang harus anda siapkan sebelum membuat media
biakan baik media cair maupun padat.
4. Untuk menghindari pencemaran mikroba saat menuangkan media biakan
pada tempat media, hal-hal apa saja yang harus diperhatikan.
5. Penuangan media biakan dilakukan secara aseptik dan sebaiknya di dalam
Enkas. Apa yang dimaksud aseptik dan apa kekurangan dari almari enkas.
Tugas:
1. Lakukan pembuatan media biakan cair sesuai resep media biakan, dan kontrol
sterilitasnya.
2. Lakukan pembuatan media biakan padat sesuai resep media biakan untuk
bentuk media biakan tegak, media biakan miring dan media biakan plat atau
lempeng agar. dan kontrol sterilitasnya dan simpan dengan aman.
3. Lakukan pembuatan media biakan setengah padat sesuai resep media biakan,
dan kontrol sterilitasnya.
Test Formatif.
Jawab Pertanyaan ini dengan singkat dan jelas
1. Berapa suhu, tekanan dan waktu yang dibutuhkan untuk sterilisasi media biakan
2. Usaha menghindari pencemaran mikroba yang dilakukan dengan cara
mengusahakan dengan tindakan sebersih mungkin disebut..
3. Apa yang dimaksud dengan QS pada saat kita mencampur bahan dari suatu resep.
4. Pada suhu berapa sebaiknya kita membuka aotoclaf setelah sterilisasi bahan ?
5. Media biakan yang ditujukan untuk menumbuhkan jenis bakteri tertentu dengan
sifat tertentu pula disebut ?
6. Media biakan yang ditujukan untuk menumbuhkan semua jenis bakteri disebut ?
7. Jenis media biakan apa yang digunakan untuk menguji sifat atau kemampuan
bakteri dalam menguraikan zat makanan.
8. Media biakan yang digunakan untuk memacu pertumbuhan bakteri secara
maksimal disebut….
9. Berapa waktu dan suhu yang optimum untuk menguji sterilitas media biakan.
10. Apa behayanya sinar ultra violet yang ada pada almari enkas.
11. Untuk mengetahui daya virulesi bakteri disiapkan media biakan…….
12. Untuk mengetahui sifat bakteri anaerob atau aerob digunakan media biakan…
13. Untuk mengenal bentuk koloni bakteri disiapkan media biakan …..
14. Untuk mengetahui sifat motil bakteri digunakan media biakan………..
15. Untuk mengetahui kemampuan enzym bakteri digunakan media biakan.
A. Penilaian
1. Penilaia Sikap
No Ranah Penialain Nilai Keterangan
(40-80)
1 Keaktifan dalam praktek
2 Keaktifan bertanya dan menjawab
3 Ketepatan waktu saat mengumpulkan tugas
4 Minat saat mendapat tugas merawat alat
5 Motivasi belajar saat melakukan observasi
2. Penilaian Pengetahuan
No Nama Siswa Nilai yang diperoleh dari Jumlah Rata-rata
Refleksi Tugas Formatif
40-90 40-80 0-100
3. Penilaian Ketrampilan
No Ranah Penialain Nilai Ket.

1. Ketepatan saat menyiapkan alat
2. Ketepatan saat menyiapkan bahan
3. Ketepatan saat menimbang bahan
4. Ketepatan saat melakukan sterilisasi bahan
5. Ketepatan saat menuangkan media biakan
6. Sterilitas hasil media biakan yang diperoleh
7. Kerapian kerja saat menyimpan media biakan.
Kegiatan Pembelajaran II: Menanam/Inokulasi Bakteri
A. Deskripsi:
Pertumbuhan mahluk hidup bisa dimaknai sebagai pertambahan jumlah dan

ukuran sel yang ada pada tubuhnya, disisi lain pertumbuhan juga bisa dimaknai
sebagai penambahan jumlah nitrogen yang terikat sebagai protein dalam tubuh,
tetapi khusus untuk mikroorganisme ber sel tunggal di laboratorium yang
dimaksud pertumbuhan adalah pertambahan jumlah sel yang ada pada suatu
media biakan. Pertumbuhan ini akan nyata dapat dilihat pada peretumbuhan
bakteri yang membentuk koloni pada suatu media biakan plat agar-agar.
Upaya yang harus dilakukan untuk mengetahui adanya pertumbuhan bakteri
maka kita harus menanamnya dalam suatu media biakan, kemudian diincubasikan
pada suatu ruang yang sesuai dengan kebutuhan bakteri secara umum yaitu pada
suhu 37oC. kondisi ini disesuaikan dengan suhu umum yang ada pada suhu tubuh
hewan atau manusia.
B. Kegiatan Balejar
Setelah belajar siswa mampu:
a. Melakukan Inokulasi/menanam pada bakteri media biakan cair dengan

tingkat kebenar an 100 %.
b. Melakukan Inokulasi/menanam pada bakteri media biakan bentuk cair,
setengah padat dengan tingkat kebenaran 100 %.
c. Melakukan Inokulasi/menanam pada bakteri media biakan agar-agar tegak
dengan tingkat kebenaran 100 %.
d. Melakukan Inokulasi/menanam pada bakteri media biakan agar-agar miring
dengan tingkat kebenaran 100 %.
e. Melakukan Inokulasi/menanam pada bakteri media biakan plat agar-agar
dengan kebenaran 100 %.
2. Uraian Materi Pelajaran
2.1 Pertumbuhan Bakteri

Pertumbuhan dapat dipahami sebagai pertambahan jumlah sel dan
pertambahan ukuran (volume) sel. Secara umum semua bakteri berkembang
biak secara aseksual dengan melakukan pembelahan diri secara binner, yaitu 1
menjadi 2, menjadi empat, delapan, enam belas dan seterusnya dengan kelipatan
-2n
dua dengan demikian dapat dirumuskan 2 , hal ini berlaku untuk semua sel
anak selama nutrisi, pH, suhu cocok baginya, sebaliknya jika tak cocok maka
bakteri akan menyesuaikan diri menjadi bentuk lebih kecil, tidak membelah atau
hanya membentuk filamen panjang.
Fase pertumbuhan berdasar pembelahan sel pada bakteri sebrenarnya sama
seperti pembelahan pada sel somatik yang ada pada jaringan tubuh, yaitu
pembelahan Mitosis. Pada pembelahan sel secara mitosis dikenal beberapa
tahapan pembelahan sel, yang terdsiri dari:
1. Interfase adalah istilah yang digunakan untuk periode antara kegiatan
pembelahan sel, interfase yaitu saat sel tidak mengalami pembelahan secara
mitosis, tetapi terjadi replikasi DNA dalam nukleus, dimana pada DNA terjadi
penguraian dan pemisahan pita-pita DNA kromosome dalam nukleus sehingga
terbentuk pita-pita DNA baru yang telah terpisah.
2. Profase, adalah suatu peristiwa: (1) peningkatan daya bias, turgor dan
tegangan permukaan sel, (2) sitoplasma menjadi kental sedang nukleus
menurun kepekatannya. (3) Materi kromosome membentuk pilinan filamen
dan akhirnya pembungkus nukleus pecah dan nukleolus seakan-akan
menghilang, (4) kedua sentriol bergerak ke kutub, (5) mikrotubulus berbentuk
seperti kipas yang berpusat pada kutub sentriol dan membentuk equator.
3. Metafase, dimulai saat hilangnya bungkus nukleus dan nukleolus, kromatid
bergerak ke equator sel, dan mikrotubulus melekat pada sentromer dari
kromatid.
4. Anafase, fase ini dimulai dari pembelahan masing-masing sentromer,
terpisahnya dua kromatid, dengan demikian sel mengandung dua kromosome.
Separuh kromosome mulai tertarik ke arah masing-masing sentriol pada ujung
kumparan kutub.
5. Telofase, dimulai saat kromosome ditarik oleh mikrotubulus pada tiap ujung
sel, bungkus nukleus terbentuk kembali mengelilingi tiap set kromosome dan
nukleolus. Kromosome menghilang diganti dengan kromatin. Akhirnya terjadi
pembelahan sel menjadi dua sel anakan dan pembelahan sitoplasma
(sitokenesis) dan masing-masing sentriol mengalami replikasi yang masing-
masing anakan menjadi duplikat sel induk.
Gambar:
Fase-fase pembelahan sel secara Mitosis: A. Tahap istirahat, B. Profase dini, sentriol terbagi dan
kromosome timbul, C. Propase lanjut, sentriol di kutup, kromosom memendek dan ganda, D. Metafase,
Kromosom teratur pada ekuator gelendong, E. Anafase, kromosom bergerak ke kutup, F. Telofase,
membran nukleus terbentuk kromosom memanjang dan pembelahan sel dimulai, G. Sel-sel turunan
menjadi dua dalam keadaan istirahat.
Pertumbuhan bakteri pada media biakan dapat digambarkan seperti kurva

normal, sebagai contoh: Bakteri Eserechia Colli (E. Colli) setiap 20 menit membelah
diri sehingga selama 24 jam dapat dihitung: 272.272 = 22 x 270 atau lebih dari 4 x 1021
pertumbuhan kemudian menjadi konstan dan akhirnya menurun seiring umur bakteri
dan kematian akibat kehabisan bahan makanan.
Grafik Pertumbhan Bakteri pada Media Biakan:
A B C D E F G H
A – B : Pertumbuhan adaptasi 0-4 Jam Setelah inokulasi

B – C : Pertumbuhan cepat (fase logaritma)
C – F : Pertumbuhan konstan (antara yang mati dan tumbuhan sama banyaknya)
F – G : Pertumbuhan menurun sehubungan jumlah nutrisi yang menipis
G–H : Pertumbuhan negatif (fase kematian) sehubungan jumlah nutrisi dan faktor lain.
2.2 Faktor-faktor yang mempengaruhi pertumbuhan bakteri.
1. Suhu:
Suhu memegang peran penting untuk pertumbuhan semua mahkluk
hidup termasuk bakteri, hubungan suhu dan pertumbuhan pada setiap jenis
bakteri memilki perbedaan, perbedaan tersebut adalah: (a) kemampuan
terhadap suhu minimal, (b) suhu yang optimal dan (c) suhu kritis atau tinggi.
Contoh: Streptokokus aureus dan streptokokus laktit, kedua jenis bakteri ini
memiliki bentuk yang sama tetapi beda sifat terhadap toleransi suhu, dimana
S.aureus akan inaktif pada suhu 4oC dan masih aktif pada suhu 41oC,
sementara S.Laktit masih aktif pada suhu 4 oC tetapi inaktif pada suhu 41oC.
Berdasar toleransi terhadap suhu dalam pertumbuhannya, bakteri dapat
digolongkan menjadi tiga, yaitu:
a. Bakteri pikrofil, yaitu bakteri yang hidup pada suhu -2 s/d 10 oC, bakteri ini
rata-rata hidup pada titik beku, akan tetapi ada beberapa spesies yang
mampu hidup diatas suhu 4oC disebut psikrofil fakultatif, dan ada pula
yang mampu hidup beberapa menit pada suhu 30 oC disebut psikrofil
obligat.
b. Bakteri mesofil: yaitu bakteri yang hidup antara suhu 10-47 oC dengan suhu
optimum 30-45oC.
c. Bakteri termofil: yaitu jenis bakteri yang hidup pada suhu tinggi, antara 45-
65oC. bahkan beberapa spesies bakteri pada fase tertentu mampu hidup
diatas air mendidih selama beberapa menit.
Dari kondisi ini maka tindakan pasturisasi dilakukan pada suhu 65 oC
selama 30 menit, atau suhu 90oC selama 3 menit. Tindakan ini untuk
melemahkan atau membunuh bakteri patogen. Sedang untuk memusnahkan
nbakteri atau sterilisasi dilakukan pada suhu 121 oC selama 15 menit, suhu
106oC selama 30 menit.
2. Gas.
Jenis dan konsentrasi Gas yang penting bagi pertumbuhan mikroba
antara lian: oksigen, H2S, Nitrogen dan karbondioksida, sedang untuk gas
formadehide, etilenmonosida adalah gas bersifat racun bagi bakteri yang
digunakan untuk fumigasi ruang.
3. Efek Radiasi
Radiasi infra merah, sinar X, sinar Ultra Vioet dan sinar matahari. Dari
radiasi ini bisa berpengaruh terhadap pembuatan dan pemecahan gugus
hidrogen dari DNA jika berlebihan.
2.3 Inokulasi Bakteri

Inokulasi bakteri adalah teknik menumbuhkan bakteri dari spesimen pada media
biakan yang disesuaikan dengan bentuk media, sebab setiap bentuk media memerlu-
kan teknik berbeda. Inokulasi tersebut dibedakan menjadi:
a. Inokulasi pada media biakan cair.
b. Inokulasi pada media biakan ½ padat.
c. Inookulasi pada media biakan Padat.
Inokulasi bakteri harus dilakukan di dalam Enkas dan atau diatas bunsen/lampu
spirtus untuk menghindari kontaminasi dari luar, Teknik ini dilakukan secara aseptik
artinya bahwa prosedur kerja dilakukan secara seseteril mungkin.
Bibit bakteri yang ditanam bisa berasal dari kultur biakan bakteri yang telah
dimurnikan atau dari spesimen atau bahan yang diambil dalam jumlah tertentu dari
hasil ternak, misalnya: telur, darah, susu, sekresi dari selput lendir organ, daging yang
mengalami perubahan, air kencing, dll.
Jumlah spesimen yang ditanamkan pada media biakan berjumlah hanya sedikit,
yaitu satu kali sentuhan yang diambil dengan alat yang disebut OSE baik ose bentuk
lurus atau ose bentuk bulat (loop).
Teknik inokulasi dengan OSE dilakukan dengan langsung memasukkan ose
berbahan spesimen ke dalam media biakan dengan cara ditusukkan atau digoreskan
sesuai bentuk media (ikuti langkak kerja pada penugasan).
2.3.1 Inokulasi Bakteri pada media biakan Cair.
Berdasar jenis media biakan cair dibedakan menjadi 3 macam yaitu, media
biakan umum, media biakan selektif dan media biakan gula-gula, tetapi secara
umum teknik inokulasi pada media biakan adalah sama pada ketiga jenis media
tersebut dan yang membedakan adalah asal spesimen atau bahan bakterinya
saja.
Tujuan inokulasi pada media biakan cair adalah sebagai berikut:
1. Menumbuhkan semua jenis bakteri yang berasal dari spesimen.
2. Membiakkan bakteri yang telah dimurnikan untuk kultur jaringan (biakan
murni)
3. Merawat kelestarian kultur bakteri yang telah murni.
4. Media transport (bahan untuk mengirim spesimen agar tidak mati)
5. Mengetahui sifat biokimia bakteri terhadap bahan-bahan organis.
Alat dan Bahan

Alat : Ose, incubator, lampu spirtus, Enkas, kain lap, rak tabung reaksi,
Bahan : Media biakan cair umum, media biakan selektif cair dan media biakan gula-
gula. alkohol 70 %.
a. Langkah Kerja Inokulasi Bakteri pada Media Biakan Cair.
No Langkah Kerja Penjelasan/Gambar
1. Siapkan semua bahan dan peralatan Spesimen, media biakan, bunsen,

2. Nyalakan Bunsen atau Lampu Spirtus. Ose, Enkas, rak tabung dan
3. Pegang kultur biakan atau spesimen Incubator.
yang akan dibiakkan pada tabung
reaksi dengan tangan kiri atau jika dari
spesimen, maka langsung ke prosedur
berikut No. 6
4. Ambil Ose bulat dengan tangan kanan
dan bakar mulai ujung sampai pangkal
hingga membara.
5. Buka tutup tabung reaksi (kultur
biakan/ spesimen) dengan jari
kelingking.
6. Tempelkan ujung ose pada dinding
tabung dan ambil cairan kultur biakan
1 lop atau sentuhkan ujung ose pada
spesimen.
7. Tutup Tabung reaksi atau tempat
spesimen dan kembalikan ke
tempatnya.
8. Ambil Media biakan cair, dan fiksasi
tutupnya ditas bunsen.
9. Buka tutup tabung media biakan
dengan jari kelingking, masukkan ose
yang telah berisi bibit bakteri kedalam
tabung rekasi hingga masuk kedalam
media biakan dan aduk hingga rata.
10. Tutup Media biakan kembali.
11. Bakar ose hingga membara dari ujung
sampai pangkal.
12. Incubasikan media yang telah
diInokulasi bakteri pada incubator
dengan suhu 37oC
2.3.2 Inokulasi Bakteri Pada Media Biakan Padat.
Inokulasi pada mdia biakan padat dibedakan menjadi 3 macam, yaitu: Inokulasi
pada media lempeng agar, media agar tegak dan inokulasi pada media agar miring.
Inokulasi pada lempeng agar atau plat agar dibedakan menjadi 2 (dua) metode yaitu
metode gores dan metode tuang.
a. Inokulkasi Bakteri pada Lempeng atau Plat Agar

Tujuan inokulasi bakteri pada media biakan plat agar metode gores:
1. Pembiakan dasar dimana bakteri yang tumbuh akan membentuk koloni-koloni
(1koloni berasal dari 1 bakteri), jumlah jenis koloni = jenis-jenis dari bakteri
spesimen yang tumbuh dan membentuk koloni.
2. Mengetahui bentuk tepian, elepasi, warna koloni secara terpisah-pisah.
3. Mengisolasi bakteri berdasar bentuk koloni yang berbeda-beda.
4. Mengetahui sifat pertumbuhan bakteri (tenggelam, mengambang di
permukaan, atau diantara kedua sifat tersebut).
Teknik inokulasi metode gores dilakukan dengan menggoreskan ose yang telah
disentuhkan spesimen bakteri, kemudian secara perlahan digoreskan (tidak boleh
melukai media) pada seluruh permukaan media yang dibagi dari bidang 1 hingga
bidang 4 secara terus menerus, dimana pada bidang 1 goresan dilakukan secara
rapat, bidang 2 agak rapat, bidang 3 agak jarang dan bidang 4 sangat jarang atau 1
kali gores dengan bentuk zigzag.
Teknik inokulasi metode tuang dilakukan dengan cara menuangkan bahan atau
spesimen yang telah diencerkan pada konsentrasi tertentu, sebanyak 0,1–0,5 ml pada
media biakan plat agar, kemudian digoyang berputar diatas telapak tangan hingga
rata. Metode cawan tuang dilakukan untuk pemeriksaan Total Plat Count (TPC) yaitu
untuk mengetahui jumlah bakteri pencemar yang ada pada bahan pangan seperti air
minum, air susu, putih/kuining telur, kulit, dll. (dibahas pada Menentukan Bakteri
Pencemar)
Langkah Kerja Inokulasi Bakteri pada Media Biakan Plat Agar Metode Gores.
1. Siap semua bahan dan peralatan Spesimen, media biakan, bunsen,

Ose, Enkas, rak tabung dan
2. Nyalakan Bunsen atau Lampu Spirtus. Incubator.
3. Pegang kultur biakan atau spesimen
berikut No. 6
4. Ambil Ose bulat dengan tangan kanan
hingga membara.
kelingking.
atau sentuhkan ujung ose pada
spesimen.
tempatnya.
8. Ambil Media biakan Plat agar pada
cawan petri dengan tangan kiri beri
kode area goresan No.1-4 dan letakkan
pada telapak tangan.
9. Buka tutup cawan petri dengan jari
telunjuk dan ibu jari.
10. Goreskan ose secara merata pada
bidang 1 (satu), teruskan dari bi9dang
1 ke bidang 2 (dua), terus ke bidang 3
(tiga), dan berakhir ke bidang 4
(empat). Untuk bidang 3 dan 4 teknik
menggoresnya secara siksak agak
pertumbuhan bakteri jarang-jarang.
12 Bakar ose hingga membara dari ujung
sampai pangkal.
13 Incubasikan media yang telah
dengan suhu 37oC
b. Inokulasi Bakteri pada Media Biakan Agar Tegak.
Inokulasi bakteri pada media biakan tegak dilakukan dengan menusukkan ose
lurus atau ose bulat yang mengandung sampel bakteri secara tegak lurus tepat
ditengah media hingga ke dasar tabung reaksi.
Tujuan inokulasi pada media biakan agar tegak adalah:
1. Mengetahui sifat bakteri terhadap kebutuhan oksigen (aerob) atau tidak butuh
oksigen (anaerob) atau anaerob fakultif yaitu hidup dengan/tanpa oksigen.
2. Mengetahui sifat bakteri dalam membentuk gas.
Berdasar tujuan ini, makan teknik inokulasi harus dilakukan sebagai berikut:
 Untuk mengetahui sifat bakteri anaerob sejati:
- Setelah inokulasi, media disumbat dengan kapas secara rapat
- Sumbat kapas didorong turun hingga menempel pada media biakan.
- Diatas sumbat kapas diberi parafin cair sebanyak 10-15 tetes.
- Mulut tabung ditutup kembali dengan sumbat kapas, kemudian dimasukkan
incubator pada suhu 37oC.
 Untuk mengetahui sifat aerob dan anaerob fakultatif.
- Setelah inokulasi, media biakan cukup ditutup dengan kapas penyumbat pada
mulut tabung, kemudian di masukkan incubator pada suhu 37 oC.
 Untuk mengetahui sifat pembentuk gas,
- Langkah kerja secara prinsip sama dngan inokulasi untuk anaerob fakultatif.
c. Inokulasi pada Media Agar Miring

Inokulasi bakteri pada media biakan agar miring dilakukan dengan
menggoreskan ose bulat yang mengandung sampel bakteri secara zigzag mulai
dari bsagian bawah media hingga ujung media.
Tujuan inokulasi pada media biakan agar tegak adalah untu mengetahui daya
tumbuh bakteri pada bidang miring dengan asumsi bahwa bakteri bisa tumbuh
pada bidang miring maka bakteri tersebut bersifat patogen atau bisa
menyebabkan sakit pada organisme lain.
Langkah Kerja Inokulasi bakteri Pada media Agar Tegak

3. Pegang kultur biakan atau spesimen Incubator.
berikut No. 6
4. Ambil Ose lurus dengan tangan kanan
hingga membara.
kelingking.
spesimen atau salah satu koloni dari
biakan plat agar.
tempatnya.
8. Ambil Media biakan agar tegak, dan
fiksasi tutupnya ditas bunsen.
dengan jari kelingking, tusukkan ose
tabung rekasi tepat ditengah media
biakan hingga hampir di dasar media
biakan
10. Tutup dengan kapas dan masukkan ke
dalam tabung hingga media. Teteskan
lilin bakar atau parafin sampai lobang
tertutup parafin/ lilin agar benar-
benar tidak ada udara.
11. Tutup Media biakan dengan kapas
kembali.
sampai pangkal.
dengan suhu 37oC
d. Lengkah Kerja Inokulasi bakteri pada Media Biakan Agar Miring.

Incubator.
berikut No. 6
hingga membara.
kelingking.
spesimen.
tempatnya.
8. Ambil Media biakan agar miring, dan
dengan jari kelingking, masukkan ose
tabung rekasi, goreskan secara siksak
mulai dasar hingga ujung media biakan
sampai pangkal.
dengan suhu 37oC
5. Langkah Kerja Inokulasi Bakteri pada Media Setangah Padat.

2. Nyalakan Bunsen atau Lampu Spirtus. Ose,
reaksi dengan tangan kiri atau jika dari Enkas, rak tabung dan Incubator.
berikut No. 6
hingga membara.
kelingking.
spesimen atau salah satu koloni dari
biakan plat agar.
tempatnya.
8. Ambil Media biakan ½ padat, dan
dengan jari kelingking, tusukkan ose
yang telah berisi bibit bakteri ke dalam
tabung reaksi tepat ditengah media
biakan hingga hampir di dasar media
biakan.
sampai pangkal.
dengan suhu 37oC
Kegiatan Pembelajaran III. Pemeriksaan Bakteri pada Media Biakan
A. Deskripsi
Sedikit-sedikit lama-lama jadi bukit, pepatah ini dapat diananlogikan dengan
perkembang-biakan bakteri pada suatu media atau tempat tumbuh yang cocok
di alam bebas, kondisi ini sama dengan pendapat bahwa pembusukan yang
terjadi pada suatu bahan pangan dapat dipastikan oleh adanya peran
mikroorganisme yang semula kasad mata kemudian berkembang biak menjadi
suatu bentuk tertentu. Perkembang biakan bakteri berjalan secara
pembelahan biner yaitu dari 1 buah menjadi 2 buah, 2 menjadi 4 dan
seterusnya dengan kelipatan dua dengan rumus 2 x 2 n, sehingga dalam
beberapa saat telah membentuk satu kumpulan bakteri dengan ciri khusus
yang disebut koloni.
Pemeriksaan pertumbuhan bakteri pada media biakan dapat ditentukan
berdasar ada/tidaknya perubahan yang terjadi pada media biakan, seperti
adanya kekeruhan media, lendir, noktah,
B. Kegiatan Belajar
a. Mampu menentukan pertumbuhan Bakteri pada media biakan cair dengan

benar.
b. Mampu menentukan pertumbuhan Bakteri pada media biakan padat
dengan benar.
c. Mampu menentukan pertumbuhan Bakteri pada media biakan setengah
padat dengan benar.
2. Uraian Materi Pelajaran
Pemeriksan pertumbuhan bakteri pada media biakan disesuaikan dengan jenis

media biakan yang digunakan sebab setiap bakteri yang tumbuh pada media biakan
memiliki ciri-ciri tersendiri sesuai dengan jenis/spesies bakterinya.
Langkah Kerja Pemeriksaan untuk Media Biakan Cair:

1. Ambil biakan bakteri dari media
biakan cair.
2.
Lakukan pengamatan kondisi media
biakan secara indrawi atau
organoleptik tentang adanya
3. kekeruhan pada media biakan cair.
Tentukan di bagian mana yang

4. mengalami perubahan warna atau
kekeruhan. A B C D
A: Bakteri tumbuh pada dasar media yang
Catat dan lakukan interpetasi/ berarti tidak butuh oksigen.
B: Bakteri tumbuh menyebar berarti bisa hidup
panilaian hasil pengamatan tanpa atau dengan oksigen
C: Bakteri tumbuh di tengah-tengah media
berarti semi anaerob.
Catatan: untuk media biakan cair D: Bakteri hanya tumbuh di permukaan media
bakteri yang tumbuh pada media bisa berarti bakteri aerob.
bermacam-macam bakteri.
Langkah Kerja Pemeriksaan Pada Media Biakan Setengah Padat:


biakan cair.
2.

4. mengalami perubahan warna atau A B C D
kekeruhan. A: Bakteri tumbuh berserabut-serabut dan
menyebar hingga ke dasar media
B: Bakteri tumbuh bercincin dan menyebar
Catat dan lakukan keseluruh media
interpetasi/panilaian hasil C: Bakteri tumbuh berlapis seperti kulit atau
selaput pada permukaan dan tepian.
pengamatan D: Bakteri tumbuh berselaput tipis, transparan
Catatan: untuk media biakan ½ padat

bakteri yang tumbuh pada media bisa
Langkah Kerja Pemeriksaan untuk Media Biakan Agar Tegak


biakan agar tegak.
2. Lakukan pengamatan kondisi media

kekeruhan pada media biakan cair.
3.
mengalami perubahan warna berupa A B C D E
4. guratan titik tumbuh bakteri. A: Bakteri tumbuh mirip keris atau pedang
B: Bakteri tumbuh berbungkul kecil dan
berurutan seperti tasbih.
Catat dan lakukan C: Bakteri tumbuh dengan tonjolan-tonjolan
interpetasi/panilaian hasil mulai dari atas hingga ke bawah.
D: Bakteri tumbuh berjonjot/serat-serat
pengamatan E: Bakteri tumbuh menyerupai akar tunggang
F: Jika media retak-retak menandakan bakteri
tumbuh dengan membentuk gas.
Langkah Kerja Pemeriksaan untuk Media Biakan Agar Miring:


biakan cair.
2.

4. mengalami perubahan warna atau
A B C D E F
kekeruhan. A: Bakteri tumbuh sepeti keris
B: Barteri tumbuh berduri-duri
Catat dan lakukan interpetasi/ C: Bakteri tumbuh menyebar menyerupai
tasbih.
panilaian hasil pengamatan D: Bakteri tumbuh seperti titik-titik tipis
E: Bakteri tumbuh menyebar datar ke samping
F: Bentuk Menyebar tidak beraturan.
Catatan: untuk media biakan cair
bakteri yang tumbuh pada media bisa
Langkah Kerja Pemeriksaan Pertumbuhan Pada Media Biakan Plat Agar.

1. Ambil Biakan bakteri dari media plat/lempeng agar dan Ambil Loop pembesar.
Media Biakan Loope
2. Lakukan Pengamatan Koloni bakteri dari media plat agar, tentang:

a. Bentuk Koloni Utuh.
Lakukan pengamatan bentuk koloni yang tumbuh pada media biakan dari
pandangan atas dan samping, amati bentuk koloni dan sesuaikan dengan
bentuk standart (gambar dibawah ini), catat bentuk koloni tersebut.
Titik-titik bulat benag-benag tak teratur bercabang

kumparan.
b. Titik tumbuh dan bentuk elepasi koloni

- Amati titik tumbuh bakteri pada permukaan media biakan dengan
pandangan dari tepi/samping, perhatikan dasar pertumbuhan koloni
dengan permukaan media biakan, catat titik tumbuh koloni tersebut
sesuai gambar.
- Amati elepasi pertumbuhan koloni dari pandangan samping, catat
pertumbuhan tersebut.
Tenggelam Datar Rata Timbul Melengkung Seperti tetesan
Tombol Bel Kawah
c. Bentuk tepian koloni Bakteri.

Amati bentuk tepian koloni bakteri dari pandangan atas, catat bentuk
tepian koloni dan sesuaikan dengan gambar.
Bulat utuh Berombak terbelah bergerigi berbenang

keriting
d. Ukuran Koloni
Lakukan pengukuran besarnya koloni dengan menggunakan mikrometer.
Yang diukur dari tepi koloni ke tepi koloni secara lurus, tetntukan berapa
diameter koloni tersebut.
e. Warna Koloni.
Lakukan penentuan warna koloni dengan pengamatan indrawi, catat
hasilnya (merah, kuning muda, kehijauan, krem, keruh, putih/jernih, dll).
f. Bau koloni:
Lakukan penciuman koloni dengan membuka tutup cawan petri dan
sekilas lewatkan didepan hidung. Tentukan bau koloni tersebut (harum,
busuk, menyerupai bau benda lain atau tidak berbau)
g. Wujud koloni.
Tenjtukan wujud koloni dengan menyentuhkan ujung ose atau pengamatan
langsung, tentukan wujud koloni tersebut (jenih seperti tetes air, padat,
berlendir, seperti keju atau mentega, getas, dll).
h. Tengah koloni.
Lakukan pengamatan dari pandangan atas dan samping, tentukan bentuk
titik tengah koloni dan catat hasilnya (amorf, bergranula kasar/halus,
berlapis selaput keriput, berlapis selaput mulus berlendir, dll)
Pada pemeriksaan koloni dari media biakan penyubur yang diberi darah, koloni
bakteri dapat dibedakan menjadi 3 bentuk, yaitu:
a. Alfa-hemolisis: disekitar koloni terdapat daerah/zona melingkar ditepian
koloni berwarna kehijauan.
b. Beta-hemolisis: disekitar koloni terdapat daerah/zona melingkar ditepian
koloni berwarna bening/ transparan
c. An-hemolisis: jika disekitar koloni tidak terdapat daerah/zona warna/ tanpa
perubahan .
Pada pembiakan media diferensial koloni dari berbagai jenis bakteri dapat dibedakan
berdasar sifat pertumbuhan atas reaksi bakteri terhadap media, misalnya media EMB
dan Mc-Conkey, begitu pula media yang diberikan obat antibiotika dapat menyeleksi
pertumbuhan bakteri jenis tertentu.
Kegiatan Pembelajaran IV: Identifikasi Bentuk Bakteri
A. Deskripsi.
B. Kegiatan Belajar.
Mampu Melakukan pemeriksaan pertumbuhan Bakteri pada media biakan

bentuk cair, setengah padat dan padat dengan benar 100 %, berdasar
prosedur kerja, sebagai berikut:
a. Memahami bentuk-bentuk bakteri
b. Memahami organel sel bakteri
c. Mampu membuat preparat natif bakteri
d. Mampu membuat preparat ulas bakteri
e. Mampu mewarnai preparat bakteri
2. Uraian Materi Pelajaran:
2.1 Bantuk Bakteri:
Berdasar bentuknya, bakteri digolongkan menjadi 4 jenis bakteri yaitu:
a. Bulat /Bola (kokus). Bakteri berbentuk bola dibedakan mejadi beberpa
jenis berdasar rangkaian sel, diantaranya:
- Monokokus: bakteri bulat tunggal,Contoh: Neiseria gonorhooe penyebab
kencing nanah.
- Diplokokus: bakteri bulat bergandeng 2 buah, Contoh: D. pneumonia
penyebab radang paru-paru.
- Sarsina: bakteri bulan bergandeng 4 buah, sekilas menyerupai kubus.
- Heksakokus: bakteri bulat bergandeng delapan
- Streptokokus: bakteri bulat bergandeng memanjang membentuk rantai.
- Stafilokokus: bakteri bulat membentuk gerombolan menyerupai tandan
buah anggur.
b. Bentuk Batang atau Baksil, yaitu bakteri berbentuk bulat memanjang,
dibedakan:
- Basil tunggal: baksil batang tunggal atau sendiri-sendiri.
- Diplobasil: bakteri batang bergandeng 2 buah.
- Streptobaksil: bakteri batang bergandeng-gandeng memebentuk rantai
panjuang.
c. Bentuk Koma disebut kuman. Yaitu bakteri berbentuk seperti huruf koma
atau membengkok kecil.
d. Spiral disebut juga vibrio atau spirilium, yaitu bakteri yang benbentuk melilit
hingga berbentuk memutar seperti spiral, bakteri ini dibedakan menjadi:
- Spirilium atau spiral, yaitu bakteri yang berbentuk sepeeti per atau melilit
seperti spiral.
- Vibrio yaitu bakteri berbentuk koma memanjang atau spiral tak sempurna
- Spirochaeta, yaitu bakteri berbentuk spiral yang bersifat lentur, pada saat
bergerak tubuhnya bisa meanjang dan mengkerut.
2.2 Bulu Getar atau silia atau flagela.
Flagellum adalah sejenis bulu atau sulur kecil memanjang atau simpai
dari dinding sel bakteri yang berfungsi sebagai alat gerak bakteri, alat ini
disebut juga silia atau flagellum. Berdasar flagellumnya bakteri dibedakan
menjadi.
a. Bakteri tidak memliki Flagellum: disebut atrika
b. Flagella tunggal: disebut monotrik
c. Flagela dua buah: disebut diplotrik
d. Flagela 4 buah: disebut ampitrik
e. Falgella 4 buah hanya pada salah satu ujungnya: disebut lopotrik.
f. Flagella banyak dan menyebar pada seluruh dinding sel: disebut peritrik.
Bentuk-bentuk Bakteri
Monotrik
Basil
Kuman Diplotrik
Diplobasil
Ampitrik
Spirilium
Striptobasil Vibrio Lopotrik
Peritrik
Bakteri Coccus Bakteri Kuman, Vibrio, Flagella Bakteri

Basil/Batang Spriral
2.3 Organel Sel Bakteri:

Di dalam satu sel bakteri terdari atas beberapa organel dan disetiap
organel sel memiliki peran dan fungsi masing-masing, organel tersebut
adalah: membran sel, sitoplasma, mitokrondria, ribosom, aparatus golgi,
lisosom, nukleus, DNA dan RNA, dan struktur lain.
Gambar: Organel Sel Bakteri
No Gambar Fungsi/Peran Organel Sel

1 Dinding Sel. Tersusun serat-serat protein dan
gugus karbohidrat disebut peptidoglikan,
Berfungsi sebagai:
1. pelindung diri dari tekanan luar (suhu,
tekanan).
2. Tempat mengeluarkan enzym proteolitik
3. Tempat menyerap makanan dari luar
4. Temapt menyimpan cadangan makanan
(kapsul)
5. Menentukan bentuk bakteri.
2 Membran sel disebut juga membran plasma

adalah suatu lapisan tipis paling luar untuk sel
hewan (eucariot) sedang pada sel tanaman
(procariot) terdapat dinding sel. Membran sel
tersusun atas lipid dan protein, dimana protein
membran memiliki fungsi diantaranya:
a. sebagai pompa yaitu secara aktif
memindahkan ion ion untuk melintasi
membran sel.
b. sebagai pembawa yaitu membawa bahan
sesuai gradien elektrokimia secara difusi
fasilitasi.
c. saluran ion, yang memungkinkan lewatnya
ion-ion masuk dan keluar dari sel.
d. reseptor, yaitu meningkatkan neurotransfer
dan hormon yang mencetuskan perubahan
fisiologis dalam sel.
e. enzym yaitu mengkatalisis reaksi di
permukaan membran.
f. glikoprotein yang berfungsi untuk
pengelolaan anti body dan pembelahan diri.
g. Protein struktural yaitu gugus protein
sebagai bahan makanan.
3 Aparatus Golgi, organel ini besarnya

bervariasi, dan berfungsi :
- tempat terjadinya tahap akhir proses
sintesis hasil sekresi sel
- membungkus hasil sekresi dengan membran
untuk disimpan atau dibawa ke membran
plasma
- mensekresikan zat ke cairan ekstra sel
(CES) dalam proses eksositosis.
- Membentuk glikoprotein untuk dibawa ke
retikulum endoplasmik
4 Retikulum Endoplasmik (RE)

RE suatu organel yang menyerupai lipatan-
lipatan kantong (sisternae) dan sepanjang
dinding terdapat butiran kecil yang disebut
ribosom, RE demikian disebut RE kasar, sedang
RE halus jika tidak terdapat ribosom pada
dindingnya.
RE memiliki peran sebagai berikut:
- RE kasar berperan dalam sintesis protein
termasuk enzym karena adanya ribosom.
- RE halus berperan dalam sintesis dan
transportasi glikogen, lipid dan steroid.
- RE pada otot disebut juga R Sarkoplasma,
berperan sebagai media untuk implus saraf
dan transport ion Ca yang diperlukan dalam
kontraksi otot.
Ribosom
5 Merupakan organel yang berbentuk bulat kecil,
Ribosom ada yang melekat pada RE dan
Mitokondria, tetapi ada yang bebas didalam
sitoplasma dengan membentuk gugusan yang
disebut poliribosom atau polisom. 1 buah
ribosom terdiri dari dua unit besar dan kecil
dan memiliki RNA (rebonuclead acid) dan 1-3
gugus protein. Fungsi organel ini mensintesis
protein untuk sekresi sel (ribosom pada RE)
sedang ribosom bebas menghasilkan protein
struktural dan enzym yang digunakan untuk
metabolisme sel itu sendiri, sehingga ribosom
juga disebut granula ribonukleoprotein (RNP).
6 Mitokrodria.
Mimilki bentuk seperti kapsul yang mana di
bagaian dalamnya terdapat sekat-sekat sebagai
tempat perlekatan enzym yang berguna untuk
proses oksidasi bahan makanan menjadi CO 2,
ATP dan air pada proses siklus asam
sitrat/Krebs. Oksidasi dalam silus krebs
membebaskan CO2 dan H2, H2 kemudian masuk
ke dalam mitokondria untuk melakukan
reduksi dan puncaknya akan menghasilkan air
dan ATP (tenaga simpanan). Dengan demikian
mitokondria menghasilkan energi untuk sel,
mitokondria juga mengandung DNA dan RNA
untuk pembelahan sel serta mensintesis lipid
dan protein bersama ribosom.
7 Lisosom
Organel ini berasal dari RE dan Aparatus golgi,
merupakan organel yang dibungkus membran
dan berisi enzym digesti (hidrolitik = untuk
menghidrolisa makanan/ pencenakan). Enzym
tersebut berupa fosfatase yang dilepaskan bila
sel mati dan berguna untuk menghancurkan
sisa sisa sel
Vasikel lisosom berisi bahan hasil fagositosis
dan pinositosis, enzym ini berfungsi untuk
memecah protein, karbohidrat dan asam
nukleat seperti yang terdapat dalam sel darah
putih. Bila sel yang mengandung lisosom yang
tidak aktif maka akan timbul penyakit sebab
glikogen tidak tidak dicerna.
8 Nukleus
Organel sel berupa bulatan yang didalamnya
terdapat DNA, RNA, protein, lipid dan
komponen organik lainnya, dan didalam
nukleus terdapat juga nukleolus. Di dalam
nukleolus terdapat juga RNA, sedikit DNA dan
protein.
Fungsi utama nukleus adalah (1) mengatur
sintesis protein dalam sel yang juga mengatur
kegiatan biokimia sel, (2) menentukan
penurunan bahan genetik (kromoson dan gen)
ke genarasi selanjutnya melalui pembelahan sel
9 DNA dan RNA
DNA merupakan penyusun gen-gen dan
kromosom, kromosom adalah rantai DNA
menyerupai benang yang diselimuti protein
DNA dan RNA disusun atas unit-unit kecil dan
membentuk rantai panjang disebut nukleotid.
Nukleotid terdiri dari senyawa gula dan basa
purin atau pirimidin. Perbedaan DNA dan RNA
terdapat pada gugus menyusunya yaitu untuk
DNA terdiri dari Sitocin, arginin, guanin dan
timin. Sedang RNA gugus timin diganti dengan
urasil.
10 Peroksisom, mirip lisosom, Terdapat dalam

organ vital (hati hewan dan daun pada
tumbuhan) karena memiliki fungsi yangsangat
penting
Peroksisom memiliki enzym oksidase yang
berperan mereduksi H2O2 menjadi air dan H2
dan enzym katalase untuk memecah ion
hidrogen.
Peroksisom berfungsi sebagai penawar racun
dengan memindahkan atom oksigen dari
racung ke molekul air.
11 Mikrovilli: melakukkan/membengkokkan
membran plasma keluar yang berfungsi untuk
memperluas permukaan membrans yang
terkait dengan fungsinya yaitu: dalam
penyerapan zat.
Contoh: mikrovilli pada sel epithel usus
memperluas bidangnya untuk penyerapan zat
makanan.
12 Sentriol, berbentuk silindris, pendek yang
tersusun atas 9 filamen, organel ini berfungsi
membentuk dua kutub kumparan pada saat
terjadi pembelahan sel dari satu menjadi dua
buah.
Sitoskeleton: merupakan jaringan serat yang

13 melekat pada organ yang mengendalikan
gerakan organel, sehingga organel-organel pada
sel tidak mengambang pada sitosol.
Organel-organel dalam sitoplasma tenyata tidak
mengambang dalam sitosol, tetapi terdapat
jaringan serat yang disebut sitoskeleton yang
melekat pada organel dan mengendalikan
ferakan organel.
Terdapat 3 jenis, yaitu: (1) mikrofilamen, (2)
mikrotubulus, (3) filamen intermediet
Mikrotubulus, bentuk seperti tabung halus
dan tersebar di sitoplasma, organel ini
berperang membentuk ujung sel dan saat
pembelahan sel dimana berfungsi sebagai
organ kontraktil dan silia atau organ gerak, juga
membantu transportasi molekul pada sel
seperti axon sel syaraf.
Mikrofilamen, Bentuk batng langsing yang
berperan membantu pemanjangan mikrovili
pada tepi sel epithel dan melakukan
penyerapan makanan.
14 Flagellum:
Merupakan alat untuk lokomosi (berpindah
tempat) disebut juga siliam atau bulu getar dari
bakteri.
2.4 Preparat Pemeriksaan/ identifikasi Bakteri.

Untuk dapat mengidentifikasi/mengenal morfologi bakteri, maka langkah
awal yang hartus dilakukan adalah membuat preparat bakteri, secara umum
preparat bakteri dibedakan menjadi dua yaitu: (1) Preparat tetes gantung atau
natif dan (2) Preparat ulas bakteri.
(1) Preparat tetes gantung atau preparat natif: yaitu suatu preparat dari 1 tetes
kultur biakan bakteri yang diletakkan di cover glas secara tergantung atau
terbalik pada objek glass cekung, dengan maksud agar tetesan kultur bakteri
tidak bersentuhan dengan dinding objek glass dan sekaligus untuk
memberikan ruang gerak bakteri.
(2) Preparat ulas bakteri yaitu ulasan tipis dari biakan bakteri yang diletakkan
pada obyek glas dan telah dimatikan dengan jalan fiksasi diatas bunsen.
kemudian preparat bakteri diberi zat pewarna agar bakteri dapat
diidentifikasi dengan jelas. Teknik pewarnaan bakteri dari preparat ulas
bakteri yang umum dilakukan dalam praktek meliputi: (1) Pewarnaan Negatif,
(2) Pewarnaan sederhana, (3) Pewarnaan Deferensial dan (4) Pewarnaan
khusus.
Membuat Preparat Natif/Tetes gantung.

2.4.1
Tujuan utama pemeriksaan preparat tetes gantung adalah:
1. Untuk melihat morfologi bakteri tanpa zat warna
2. Untuk mengetahui ada/tidak alat gerak bakteri yang disebut flagella, dimana
flagella merupakan alat motilitas atau gerak dari bakteri.
3. Untuk mengetahui ukuran bakteri.
4. Untuk mentetahui proses dan tahapan pembelahan bakteri dari fase ke fase.
Cara membuat preparat tetes gantung

- Siapkan alat dan bahan, seperti : Ose lurus, Deck glass, obyek glass cekung,
bunsen, vaselin, biakan cair,
- Ambil deck glass dan beri setitik vaselin pada keempat sudutnya.
- Teteskan 1 tetes kecil dengan ose lurus biakan bakteri dari media biakan cair
atau suspensi bakteri dari biakan setengah padat.
- Ambil objek glass cekung. Tutupkan tepat tengah-tengah tetesan suspensi
bakteri pada deck glass.
- Baliklah objek glass sehingga deck glass berada diatas
- Periksa dibawah mikroskop dengan cahaya lemah dan pembesaran kuat
(1.200-2.000 kali).
- Amati motilitas bakteri dan bentuk-bentuk bakteri.
Bunsen Ose lurus dan ose bulat/loop
Vaselin
BiakanBakeri
Kultur 1 tetes kecil tutup dengan objek glass
Balik posisi deck glass diatas
1. Langkah Kerja Pembuatan Preparat Ulas Biakan Bakteri.

Media Biakan Cair Media Biakan Padat/Setengah Padat
1. Ambil 1 Loop Biakan bakteri dengan 1. Teteskan Aquades 2-3 Tetes pada
Ose. Obyek glass
2. Oleskan pada obyek glass hingga rata 2. Sentuhkan ujung Ose pada koloni yang
Dan setipis mungkin. dikehendaki.
3. Buat ulasan tipis dan merata pada objek
Glass yang telah dtetesi aquades (No.1)
Fiksasi/rekatkan Preparat diatas Api Bunsen 3 x.

(hanya dilewatkan diatas api secara perlahan)
3. Pewarnaan Sederhana
Pewarnaan sederhana adalah suatu teknik mewarnai bakteri pada preparat ulas
bakteri yang diletakkan di atas objek glass dengan satu macam zat warna. Tujuan
pewarnaan ini adalah agar bakteri dapat terlihat dengan jelas tentang bentuk,
ukuran dan untuk membedakan antara bakteri dengan benda-benda mati lainnya
yang bukan bakteri. larutan zat warna yang digunakan pada pewarnaan
sederhana dipilih zat warna yang dapat meresap masuk dinding sel hingga ke
sitoplasmanya seperti: Kristal violet, methylen blue, karbol fuchin, kemudian zat
warna dilarutkan pada pelarut berupa: aquades, alkohol atau methyl alkohol dan
biasa juga ditambahkan bahan pembantu lainnya agar hasil perwarnaan lebih
baik, bahan pembantu ini disebut pemantek (mordani) seperti: amonium oxalat,
fenol, krom, tembaga, garam-garam aluminium dan lain-lain.
Prosedur Pewarnaan Sederhana.
1 2
Teteskan zat warna 3-4 tetes pada Cuci dengan air bersih atau aquades
preparat ulas bakteri dan biarkan selama dengan menggunakan kran atau botol
1-2 Menit semprot
3 4.
Periksa dibawah mikroskop dengan

pembe-saran 1.000-2.000 Kali dan
gambar bentuk-bentuk bakteri yang ada.
Tiriskan preparat dan Isap dengan kertas
tissu
4. Pewarnaan Deferensial.
Pewarnaan deferensial adalah suatu teknik mewarnai preparat ulas bakteri

dengan menggunakan beberapa zat warna baik secara terpisah atau gabungan
dari beberapa zat warna, hasil pewarnaan ini akan menunjukkan beberapa
warna yang berbeda tergantung dari sifat bakteri. Pewarnaan deferensial yang
penting adalah pewarnaan Gram, pewarnaan Ziel Nelson dan pewarnaan Geimza
untuk parasit.
4.1 Pewarnaan Gram.
Teknik pewarnaan ini ditemukan oleh Cristian Gram (1884) dan kini
teknik ini telah mengalami modifikasi walau secara prinsip semua prosedurnya
hyampir sama dengan hasil yang diperoleh sama pula selama persyaratan
pokoknya terpenuhi, yaitu umur biakan bakteri kurang dari 36 jam sebab ada
beberapa jenis prinsip tet bakteri yang bersifat gram fakultatif.
Prinsip pewarnaan Gram adalah untuk mengetahui/membedakan sifat
bakteri tahan alkohol dan tidak tahan alkohol. Prosedur pewarnaan diawali dari
preparat ulas bakteri diberi warna kristal violet atau gentian violet selama
beberapa saat kemudian digenangi larutan lugol dan dibiarkan dalam waktu yang
sama, dari hasil pewarnaan ini preparat akan berwarna ungu.
Langkah kerja selanjutnya preparat dilunturkan (dekolorisasi) dengan
alkohol 70 % atau campuran alkohol-aceton hingga semua zat warna luntur.
Setelah dicuci dengan air kemudian preparat digenangi lagi dengan zat warna
kontras seperti: larutan safranin, larutan karbol fuchin, larutan tengguli bismak
atau larutan pirosin B. lalu dicuci kembali untuk diperiksa dibawah mikroskope.
Bakteri yang mempertahankan zat warna pertama atau tetap berwarna
unggu disebut Bakteri Gram positif, sedang bakteri yang luntur dengan alkohol
dan mengambil zat warna kontras disebut Bakteri Gram Negatif. Atas dasar hasil
pewarnaan gram ini dunia bakteri digolongkan menjadi 2 glongan besar yaitu
Gram Positif dan Gram Negatif.
Prosedur Pewarnaan Gram (Cara I)
1.a 1.b
Teteskan Kristal Violet 5-6 tetes biarkan Cuci dengan aquades menggunakan botol
selama 60-90 detik semprot
2.a 2.b
Teteskan larutan Lugol 5-6 tetes pada prepa- Cuci dengan aquades menggunakan botol
rat dan biarkan selama 60-90 detik” semprot
3.a 3.b
Teteskan aceton-alkohol hingga warna Cuci dengan aquades menggunakan botol
larut/ luntur selama 30” semprot
4.a 4.b
Teteskan larutan Safranin 3-4 tetes pada Cuci dengan aquades menggunakan botol
preparat ulas bakteri dan biarkan 1-2 mnt semprot
Tiriskan preparat dan hisap dengan kertas tissu Periksa dibawah mikroskope, 1.000-2.000 X.
Prosedur Pewarnaan Gram modifikasi (cara II)
1.a 1.b
Teteskan Kristal Violet 5-6 tetes biarkan Teteskan lugol 6-8 tetes dan biarkan selama
selama 30-60 detik 30-60 detik
2.a 2.b
Lunturkan zat warna dengan alkohol-aceton Cuci dengan aquades menggunakan botol
hingga bersih, selama 20-30 detik” semprot
3.a 3.b
Teteskan zat warna kontras (safranin Cuci dengan aquades menggunakan botol
atau karbolfuchin) selama 30-60 detik semprot
Tiriskan preparat dan hisap dengan kertas Periksa dibawah mikroskope, 1.000-2.000 X.
tissu
Tugas:
Lakukan pewarnaan gram sesuai cara I dan Cara II masing-masing dua buah preparat
bandingkan hasilnya, dan buat laporan
Berdasar hasil pewarnaan menunjukkan bahwa bakteri gram positif adalah
bakteri yang tahan terhadap alkohol atau alkohol-aceton, kekuatan ini dipengaruhi
oleh adanya dinding sel bakteri yang tersusun atas gugus heteropolimer yang disebut
peptidoglikan atau mukopeptida tetapi ada juga yang menyebut sebagai glikopeptida,
maropeptida, glikosamino-peptida, mukokompleks atau murein. Gugus heteropolimer
ini pada dasarnya bukan struktur yang solid (padat) sehingga tidak menghalangi
bahan molekul organik masuk atau keluar dari tubuh bakteri.
Berdasar analisis tentang susunan dinding sel bakteri gram positif dan gram
negatif memang terdapat perbedaan yang nyata, perbedaan tersebut diantaranya:
No Gram Positif Gram Negatif
1. Komponen sebagian besar Terdiri atas 3 bagian
terdiri atas mukopeptida - Lapisan dalam adalah
mukopeptida
- Lapisan luar terdiri atas 2
lapisan
2. Beberapa jenis bakteri terdapat a. Lipopisakarida
asam teikhoik b. Lipoprotein.
3. Mukopeptida mengalami lisis Tidak terdapat asam teikhoik
jika kena enzym lizozim
Lisozym melunakkan dinding sel,
deterjen mengadakan disorganisasi
4. Tebal dinding sel 25-30 nm dinding itu dengan merusak lapisan
liptida.
5. Sangat sensitif terhadap zat
warna trifenilmetan Dinding sel tipis: 10-15 nm
6. Sensitif terhadap Antibiotika Tidak sensitif terhada zat warna
trifenilmetan
penicilin Sensitif terhadap Antibiotika
7. Resisten atau tahan terhadap Streptomicin
larutan KOH 1 % Sensitif terhadap larutan KOH 1 %
8. Biasanya berbentuk batang
bersepora, kokus Biasanya berbentuk batang tidak
9. Dapat bersifat tahan asam bersepora
Tidak tahan asam
5. Pewarnaan Ziel Nelson (Tahan Asam).
Pewarnaan Ziel Nelson disebut juga pewarnaan tahan asam, hal ini didasarkan
pada kenyataan bahwa ada beberapa jenis bakteri yang dinding selnya sulit
diberi zat warna, akan tetapi jika zat warna telah menyatu dengan sel tersebut
maka akan sulit untuk dilunturkan dengan zat peluntur yang bersifat asam,
yaitu larutan asam-alkohol. Bakteri demikian disebut bakteri tahan asam,
jenis bakteri tahan asam antara lain: golongan mycobakterium tubercolosis,
mycobakterium lepra dan micobakterium smegmatis.
Berbagai teori menjelaskan bahwa sifat tahan asam pada bakteri
disebabkan oleh:
(1) adanya daya permiabilitas selektif dari membran sitoplasma
(2) adanya lipida dan asam lemak seperti asam mikolat di dalam sel bakteri.
(3) ikatan fenol dalam larutan karbul-fuchin dengan lipida dalam sel bakteri
lebih kuat dibanding ikatan fenol dengan asam alkohol atau air.
Dari ketiga alasan tersebut dapat dijelaskan sebagai berikut:
- Saat pewarnaan zat warna merah dari karbol fuchin akan bereaksi dengan
lipida atau asam lemak yang terdapat dalam sel bakteri, dengan demikian
warna merah akan tampak dominan pada badan sel bakteri.
- Saat pelunturan zat warna dengan asam alkohol, bakteri yang mengandung
lipida akan tetap mengikat zat warna merah akibat adanya fenol dari
larutan karbol fuchin yang mudah larut dengan lipit dibanding dengan asam
alkohol
- Peran membran sitoplasma yang mempertahankan zat warna merah larut
pada zat peluntur.
- Jika membran sitoplasma pecah oleh asam alkohol maka lipida akan keluar
dari sel sehingga akan kehilangan daya tahan asamnya, dengan demikian
bakteri akan mengambil zat warna kedua yaitu methylen blue.
- Hasil pewarnaan bakteri tahan asam berwarna merah sedang tidak tahan
asam berwarna biru.
Prosedur Pewarnaan Ziel Nelson (Tahan Asam).
1.a 1.b
Teteskan Lart. Karbol Fuchsin 6-8 tetes pada Cuci dengan air bersih atau aquades dengan
preparat ulas bakteri dan hangatkan dengan menggunakan kran atau botol semprot
Bunsen, jangan mendidih biarkan 6 menit
2.a 2.b
Teteskan Lart. Asam Alkohol hingga zat Cuci dengan air bersih atau aquades dengan
warna luntur selama 30-60” menggunakan kran atau botol semprot
3.a 3.b
Cuci dengan air bersih atau aquades dengan

Teteskan larutan Methylen Biru 4-5 tetes, menggunakan kran atau botol semprot
selama 3 menit.
Periksa dibawah mikroskope, dengan

pembesaran 1.000-2.000 Kali,
Bakteri Tahan Asam : Berwarna
Merah,
Tiriskan preparat dan hisap dengan Bakteri Tidak Tahan Asam: Berwarna
kertas tissu Biru.
6. Pewarnaan Spora Bakteri
Spora bakteri disebut endospora, adalah suatu bentuk/fase kehidupan dari

bakteri golongan bacillus atau clotridium dan golongan kokus. Pada media biakan
bakteri akan membentuk spora setelah beberapa hari (4-7 hari), dimana spora
ini berfungsi untuk perkembang-biakan generasi berikutnya selain dengan
perbanyakan diri secara pembelahan sel. Dikenal ada tiga spesies bakteri yang
mampu membentuk spora yaitu:
a. Genus bacillus atau sporolactobacillus yang hidup secara aerob.
b. Genus clostridium yang hidup secara anaerob.
c. Genus sporosarcina dari golongan kokus yang hidup secara aerob.
Dari ketiga genus ini hampir semuanya adalah bakteri patogen bagi ternak
maupun manusia, selain bisa menginfeksi tubuh secara langsung, bakteri ini juga
bisa mencemari makanan sehingga mampu mengubah sifat fisik makanan dan
mengeluarkan toksin yang bisa meracuni tubuh yang mengkonsumsinya.
Bahan spora di mikroskope sebenarnya mudah terlihat dari tubuh bakteri
sebagai benda intrasel yang refraktif dalam suspensi sel yang tidak diberi zat
warna atau terlihat sebagai daerah kosong dalam sel bakteri yang diberi pewar-
naan konvensional, sehingga untuk mewarnai diperlukan pewarnaan khusus.
Pada pemeriksaan laboratorium bakteri spora bisa menunjukkan ketidak-
mampuanya dalam membentuk spora yang bersifat tetap, tetapi ada kalanya
hanya sementara tergantung lingkungan. Pada media biakan untuk
mengembalikan kemampuan berspora dari bakteri diperlukan media biakan
yang mengandung ekstrak tanah.
Telak spora pada tubuh bakteri ada 3 jenis yaitu: tengah tubuh (centrale), ¾
ujung tubuh (subterminal) dan di ujung tubuh (terminale)
Contoh Bakteri pembentuk spora yang patogen
- Bacillus Anthraxis penyebab Penyakit Anthrax atau radang limpa
- Bacillus stearotermopil racun makanan yang hidup pada suhu tinggi
- Clotridium covei penyebab penyakit boutvuur atau radang paha
- Clostridium tetani penyabab penyakit tetenus
- Clotridium perfringens penyebab keracunan makanan dan radang bernanah
- Clos. Botulimun Clos. Botulimunpencemar makanan dalam kaleng
Prosedur Pewarnaan Spora Bakteri
1 2
atau
Buat suspensi bakteri dari 1 sentuhan Koloni Goreskan pencil lilin pada tepi Obyek glas
biakan padat umur 48-72 jam + 1 Ml NaCl 0,9 %. dengan ketebatan merata. Buat preparat ulas
Masukkan wather bath 80oC selama 10 Menit dan bakteri dari suspensi bakteri seperti langkah 1,
tambahkan larutan Karbol Fuchsin 0,5 Ml. sebelum dimasukkan water bath. Sebanyak 3-4
Kemudian buat preparat ulas bakteri dan fiksasi tetes ratakan setipis mungkin. Ikuti prosedur
diatas bunsen.Ikuti prosedur ke 4-8 ke3-8
3. 4.
Teteskan Lart. Karbol Fuchsin 6-8 tetes pada Celupkan beberapa kali pada larutan
preparat ulas bakteri dan hangatkan dengan H2SO4 1 % hingga warna luntur.
Bunsen, jangan mendidih selama 10 menit
5 6
Cuci dengan air bersih atau aquades dengan Teteskan Larutan Methylen Blue selama 3 mt
menggunakan kran atau botol semprot
7 8.
Cuci dengan air bersih atau aquades Tiris preparat dan hisap sisa air dengan
dengan menggunakan kran atau botol kertas tissu. Periksa di mikroskope.
6. Pewarnaan Kapsul Bakteri.
Beberapa spesies bakteri memiliki kemampuan untuk membentuk lapisan lendir

di luar sel atau diluar tubuhnya, lapisan lendir ini terkadang memadat sehingga
menjadi lapisan yang permanen, lapisan ini disebut kapsul. Tebal-tipisnya lapisan
kapsul tergantung pada jenis bakteri dan kondisi nutrisi di temapat hidupnya.
Beberapa teori menyatakan bahwa kapsul bakteri merupakan bahan makanan
cadangan yang dibetuk oleh bakteri disaat lingkungan disekitar hidupnya
kecukupan gizi. Kegunaan kapsul selain sebagai cadangan makanan juga sebagai
bahan pelindung terhadap perubahan lingkungan, mempertahankan kekeringan
tubuh dan mempertahankan diri terhadap tekanan osmose.
Kapsul bakteri tidak memiliki daya ikat (afinitas) yang kuat terhadap zat
warna biasa, sebab beberapa jenis kapsul akan mudah rusak oleh tekanan mekanis
atau akan larut dengan pencucian air, kondisi ini lebih disebabkan dari tiap jenis
bakteri memiliki susunan zat-zat pembentuk kapsul yang berbeda, sehingga tidak
semua kapsul dapat terlihat dengan proses pewarnaan yang sama.
Teknik pewarnaan kapsul dibedakan menjadi dua yaitu: (a) pewarnaan negatif
kapsul dan (b) pewarnaan kapsul.
Pewarnaan kapsul secara negatif sebenarnya telah ditunjukkan oleh
pewarnaan Gram, yaitu hasil pewarnaan gram memperlihatkan bakteri berwarna
unggu (violet) atau merah dengan dikelilingi daerah kosong atau transparant
disekitar tubuh bakteri, sedang latar belakang media berwarna ungu kemerahan.
Pewarnaan negatif juga ditunjukkan oleh pewarnaan Burri dan Gins, yaitu dengan
hasil bakteri akan berwarna merah, kapsul tampak sebagai daerah kosong atau
transparant disekitar badan bakteri sedang latar belakang preparat akan berwarna
gelap.
Pewarnaan kapsul, cara ini ditemukan oleh Tyler dan masih ada beberapa cara lain
yang umum dilakukan. Hasil pewarnaan Tyler menunjukkan badan bakteri akan
berwarna biru tua, sedang kapsul akan berarna biru keunguan yang mengelilingi
badan bakteri.
Prosedur Pewarnaan Kapsul Bakteri Metode Tyler
Letakkan preparat ulas bakteri pada Teteskan larutan Tembaga Sulfat 20 %,

stang kaki 3. Teteskan Lart. Tyler (kristal secara cepat dan hati-hati, hingga semua
violet 180 Mg + Asam Cuka pekat 0,25 Ml warna luntur atau larut menjadi agak
+ Aquades 100 Ml). gelap.
Hangatkan dengan diatas bunsen 3 kali
hingga muncul uap air, biarkan selama 6
menit.
Cuci dengan air bersih atau aquades Tiris preparat dan hisap sisa air dengan
dengan menggunakan kran atau botol kertas tissu. Periksa dibawah
semprot secara perlahan-lahan. mikroskope.
Periksa dibawah mikroskope Warna kapsul biru keunguan agak
pembesaran 1.000-2.000 kali terang, sedang warna bakteri biru gelap.
Cara Burri dan Gins:

1. Letakkan 1 ose suspensi bakteri pada ujung ¼ ujung objek glass
2. Letakkan 1 tetes tinta cina disamping suspensi bakteri.
3. Campur suspensi bakteri dan tinta cina dengan ujung ose lurus hingga rata
4. Bakar ujung ose yang telah digunakan.
5. Tempelkan ujung objek glass lain dengan sudut 45 derajad pada campuran
suspensi bakteri dan dorong kedepan hingga membentu preparat ulas tipis.
6. Biarkan nkering dan fiksasi diatas bunsen.
7. Tetskan larutan karbol funchsin encer dan biarkan selama 10 menit.
8. Buang larutan yang berlebihan dan keringkan preparat dengan kertas tissu.
A. MENGHITUNG BAKTERI PENCEMAR BAHAN PANGAN.

Untuk dapat menghitung jumlah bakteri yang terdapat dalam bahan pangan
atau disebut bakteri pencemar, harus dimulai dulu dengan mengencerkan bahan
pangan tersebut kemudian dibiakkan dalam media biakan plat agar. Suatu contoh, kita
ingin mengetahui:
1. Berapa jumlah bakteri pencemar dalam tiap 1 Ml air susu dari suatu
peternakan
2. Berapa jumlah bakteri yang terdapat pada kulit telur tiap 1 cm2
3. Berapa jumlah bakteri setiap 1 cm3 daging yang ada dipasar.
Langkah kerja dan Penugasan.
1. Siapkan alat dan bahan yang telah disterilkan.
2. Siapkan enam tabung reaksi dan letakkan pada rak berjejer berurutan.
3. Isi tiap-tiap tabung reaksi dengan aquades sebanyak 9 ml.
Masukan 1 ml susu
Pindahkan 1 ml larutan dari tabung no.1 ke no.2, dan seterusnya hingga tabung No.6
1 ml 1 ml 1ml 1 ml 1 ml
9 ml 9 ml 9 ml 9 ml 9 ml 9 ml
0,1 Ml 0,5 Ml
Tabel Perhitungan Pengencean Bahan

Uraian Tabung 1 Tabung 2 Tabung 3 Tabung 4 Tabung 5 Tabung 6
Jumlah air susu 1 ml 0,1 ml 0,01 ml 0,001 ml 0,0001 ml 0,00001 ml
Jumlah Aquades 9 ml 9,9 ml 9,99 ml 9,999 ml 9,9999 ml 9,99999 ml
Perbandingan 1:9 1:99 1: 999 1 : 9.999 1 : 99.999 1 : 999.999
Pengenceran 10 x 100 x 1000 x 10.000 x 100.000 x 1.000.000 x
Penulisan 10-1 10 -2
10 -3
10-4 10-5 10-6
4. Tuangkan/isi tabung reaksi nomor 1 dengan 1 ml spesimen (susu, air

rendaman kulit telur,dll) dan kocok atau aduk hingga homogen.
5. Pindahkan 1 ml larutan dari tabung No. 1 ke tabung No. 2, kocok hingga
homogen.
6. Pindahkan 1 ml larutan dari tabung No. 2 ke tabung No.3, kocok hingga
homogen dan seterusnya hingga tabung reaksi ke enam.
7. Ambil larutan sebanyak 0,1 ml dari tabung No. 5. Inokulasikan pada media plat
agar.
8. Ambil larutan sebanyak 0,5 ml dari tabung No. 6. Inokulasikan pada media plat
agar.
9. Letakkan plat agar pada telapak tangan dan buatlah gerakan mumutar hingga
larutan merata pada media biakan.
10. Inokulasikan pada incubator dengan suhu 37oC selama 24 jam.
11. Hitung koloni yang tumbuh pada kedua media plat agar dan lakukan
interpretasi hasilnya.
Cara Menghitung:
Cawan pertama = 1/0,1 x 100.000 x jumlah koloni = bakteri pencemar/ Ml susu.
Cawan ke dua = 1/0,5 x 1.000.000 x jumlah koloni = Bakteri pencemar/ Ml susu.
Jml bakteri cawan 1 + Jml bakteri Cawan 2

Hasil hitungan = = Jumlah Bakteri Pencemar
2
B. KLASIFIKASI BAKTERI PENYEBAB PENYAKIT HEWAN
Banyak literatur menyatakan bahwa bakteri digolongkan dalam kelompok tumbuhan,

akan tetapi ada yang menyatakan bahwa bakteri masuk dalam golongan Protesta,
yaitu suatu makluk hidup yang memiliki dua sifat antara hewan dan tumbuhan. Ada
pula yang menggolongkan bakteri ke dalam golongan Moneira, yaitu makluk hidup
yang dalam perkembang-biakannya menumpang pada makluk hidup lain (inang).
Pemberian nama suatu bakteri digunakan dua nama, yaitu nama Genus diikuti nama
Spesiesnya dimana genus ditulis dengan huruf besar sedang spesies ditulis huruf
kecil, Contoh: Streptococcus laktit, bakteri ini terkenal sebagai pengasam susu dalam
pembuatan Yoghurt dan diklasifikasikan kedalam kelompok tumbuhan.
Kidom : Tumbuhan (plantae)
Devisio : Protophyta
Kelas : Schizomycetes
Ordo : Eubacteriales
Famili : Lactobacteriaceae
Genus : Streptococcus
Spesies : Streptococcus laktit.
Berdasar klasifikasi Bergey, devisio protophyta dibagi menjadi 3 kelas, yaitu

Schizophyceae (ganggang biru), Schizomycetes (bakteri dan bentuk serupa),
Microtatobiotes (Richesia dan virus). Selanjuutnya Schizomycetes dibagi menjadi 10
ordo dan dalam ilmu kesehatan hewan ordo-ordo tersebut perlu dikenal sebagai
penyebab penyakit ternak, dengan kunci dekotomi sebagai berikut:
Sifat schizomycetes:
Terdiri dari satu sel, berukuran kecil hingga tak dapat dilihat dengan mikroskope
beiasa, ada bergerak dan ada yang tidak, inti sel tidak jelas tetapi mengandung sel
kromatin sebagai bahan kromosome yang disebut prokarion tidak berpasangan
sehinga dikatakan haploid. Bentuk sel bulat kecil, bengkok/koma, ada yang batang dan
spiral. Sel ada yang hidup sendiri ada yang bergerombol, ada yang hidup dalam kista
aa yang tidak. Ada yang bergandengan, ada yang lurus, beraturan dan ada yang tidak
beraturan. Ada spesies yang memiliki filamen/flagellum ada yang tidak. Dari uraian
tersebut dalam kunci dekotomi diuraikan sebagai berikut:
1. Sel kaku, bola, batang lurus atau bengkok, atau spiral, kadang bergerak dengan
flagel yang terminal atau tidak bergerak.
a. Sel serupa bola, batang lurus atau bengkok atau spiral, kadang
bergandengan, berfilamen merah atau hijau, tidak berbentuk benang. Ordo
1: Pseudomonadales
b. Tidak seperti diatas: (point a)
1. Sel dalam trikoma (untai benang), kadang menghasilkan spora kembar
atau spora diam, selubung berisi hidrogen-besi, trikoma dapat melekat
pada substrat
Ordo 2. Clamydobacteriales.
2. Sel berbiak dengan tunas, dapat melekat pada substar dengan tangkai,
satu genus mempunyai pigem untuk fotosintesis. Ordo 3.
Hipomicrobales.
2. Tidak seperti diatas (point 1)

a. Sel kaku serupa bola atau batang lurus, tunggal atau bergandengan dalam
trikoma, bergerak dengan flagellun peritrik atau diam, tidak tahan asam.
1. Sel serupa bola atau batang, tidak dalam trikoma meskipun bisa
bergandengan. Ordo 4. Eubactriales
2. Sel dalam trikoma (pintalan benang-benang) Ordo 5: Caryophanales
b. Tidak seperti diatas (point 1 dan 2a)
1. Sel kaku dan bisa tumbuh seperti myselium jamur dengan konidia
diudara. Dua genera memiliki spora yang vterbentuk dalam
sporagonium, dan sepora dari salah satu jenis ini dapat bergerak, sel-
selnya tunggal atau bercabang sederhana, tahan asam. Ordo 6:
Actinomycetes.
2. Tidak seperti point 1
a. Sel kaku, biasanya besar serupa bola atau trikoma. Mengandung
butir-butir belerang pada permukaan selnya, bergerak dengan
menjulur, bergelombang atau berguling-guling, gerakan outus-putus
seperti pada ganggang biru, tidak ada flagel. Ordo 7. Baggiatoales.
b. Sel lebih besar atau kecil, tetapi tidak kaku, tidak bergerak, sangat
pleomorfik dan sangat halus/kecil : Ordo 8: Mycoplasmatales.
c. Sel lemas, sering bentuk runcing, bergerak dengan menjalar, tumbuh
pada koloni menyebar seperti plasmodium, berlendir. Ordo 10.
Myxobacteriales.
cc. Sel berbentuk spiral panjang atau pendek, bergerak bebas
dengan membelok-belokkan tubuh. Ordo 9: Spirochaetales.
Jenis Bakteri berdasar Ordo:
1. Ordo Pseudomonadales.
No Famili Genus Spesies Akitifitas Bakteri

1 Thiorhodaceae Thiocystis 2 spesies Penghasil belerang
Thiospirilium 5 spesies Penghasil butir-butir
belerang
2 Athiorhodaceae Rhodopseudomonas 4 spesies Bentuk kokus dan basil
Rhodospirilium 4 spesies Tahan sinar UV
3 Chorobacteriaceae Chorobium 2 spesies Anaerob, penghasil
belerang
4 Nitrobacteriaceae Nitrosomonas Pembentuk nitrit (bersifat
toxin)
Nitrococcus Bentuk bulat pembentuk nitrit, Hidup
bebas ditanah
Nitrosocystik Sel Pembentuk nitrit
berkelompok
Nitrosogloea Sel berkelompok dalam
lendir
Nitrosospira Pembentuk nitrit, hidup
bebas
Nitrobacter Pembentuk nitrat
Nitrocystic Pembentuk nitrat
4 Methanobacteriace Methanomonas Batang, gram -, Mengoksidasi gas methan
Hidrogenomonas Mengoksidasi hidrogen
5 Thiobactericeae Thiospira Spiral panjang Bakteri denitrifikan
Thiobactericeae Bakteri denitrifikan
T. thioxidans Hidup pada pH 2-3
6 Pseudomonadace Pseudomonas 160 spesies Penyakit tanaman dan
nanah luka
Xanthomonas 63 spesies Parasit tanaman
Acetobacter 7 spesies Penghasil asam cuka
Photobacterium 4 spesies Pembusuk daging,
penghasil cahaya
Halobacterium Tumbuh pada kadar
garam tinggi
7 Caulobacteriaceae Caulobacter Hidup pada tanaman air
Galionella 5 spesies Penimbun oksida –besi,
hidup di air
8 Sidrocapsaceae Siderocapsa Penghuni air tawar
Siderococcus
Siderobacter
9 Spirilaceae Vibrio 37 spesies Penykit kolera, vibriosis
pada sapi
Desuflovibrio 3 spesies Bakteri denitrifikasi
Methanobacterium Anaeronm, Penghasil gas Methan
autotrof
Cellvibrio 4 spesies Pengurasi selulosa
Cellfalcicula 3 spesies Pengurai selulosa
Spirilium 9 spesies Penyakit leptospirosis.
2. Ordo Chlamydobacteriaceae

1 Chlamydobakteri Sphaerotilus 3 spesies Penghuni air tawar
Leptothrix 12 spesies Penghuni air tawar
2 Crenotrichacea Crenotrix Sel Bulat Penghuni persediaan air
panjang
Clonotrik Sel ujung Penghasil konidia
runcing
3. Ordo Hipomikrobilaes

1 Hipomikrobiales Hypomikrobium Penghuni air dan tanah
Rhodomikrobium Koloni berwarna jingga
2 Pasteuriceae Pasteuria Mutosida Parasit pada ikan dan udang-
udangan
4. Ordo Eubacteriales

1 Azotobakteriaceae Azotobakter 3 spesies Penyubur tanah,
pengikat Nitrogen
2 Rhizobacterium Rhizobium 6 spesies Bitil akar leguninosa,
pengikat N
Agrobacterium 7 Spesies Penykit bintil-bintil
pada tanaman
Chromobacterium 4 Spesies Penghuni air tawar
berwarna ungu
3 Achromobactericea Alcaligenes 6 spesies Saprofit dalam usus
Flavobacterium 26 Spesies Penghuni tanah dan air,
pigmen kuning
Aarbacterium 2 Spesies Pembusuk agar-agar
(ganggang)
Bneckea 6 spesies Pencerna kitin
4 Enterobacterium Escericia Colli 4 Spesies Infeksi oportunis pada
usus besar
Aerobacter 2 Spesies Saprofit pada usus
aerogens hewan/manusia
Klebsiella 3 Spesies Penyakit radang paru-
pneumoni paru/batuk
Erwina amylovora 17 Spesies Penyebab busuk pada
buah-buahan
Serratia 5 spesies Terdapat di alam bebas
marcescent
Proteus vulgaris 5 spesies Terdapat pada makanan
basi/busuk
Salmonella 10 Spesies Penyakit polorum pada
Pollurum ayam
Shigella sonnel 8 spesies Penyakit disentri perut
manusia/hewan
5 Brucellaceae Pasturella 9 Spesies Peny. SE, Kolera ayam,
sampar hewan
Brucellosis bank 3 spesies Penyakit brucellosis
sapi/manusia
Haemophilus 15 Spesies Peny. Snot ayam,
Influenza manusia
Bordetella Batuk merjan manusia
partussis
Actinobacsillus 5 spesies Patogen
manusia/hewan
Nogocia 3 spesies Peny. Pink eye
(mata merah)
6 Bacteroidaceae Bacteroides 30 Spesies Patogen pada hewan/
Manusia
Streptobaccillus Patogen pada manusia
dan rodetia
7 Micrococcaceae Micrococcus 16 Spesies Bakteri sosis,
jarang patogen.
Stafillococcus 2 Spesies Nanah pada luka kulit,
bisul, lendir
Gaffkya 2 Spesies Patogen pada hewan/
manusia
Sarcina 10 Spesies Saprofir oportunis pada
usus
8 Neisseraceae Neiseseria 10 Spesies Penyakit
Gonorhue/sipilis,
maningitis
Veillonella 6 Spesies Parasit patogen pada
hewan/manusia
9 Brevibacteriaceae Brevibacterium 23 Spesies Pembusuk sampah,
Saprofit
10 Lactobacillaceae Diplococcus Pneumoni Radang paru-paru
Streptococcus 19 Spesies Prebiotik, saprofit dan
Patogen
S. Lactit, Pembuatan Keju,
S.Cremoris Youghurt, mentega
Leuconostoc=3 L. citrovorum Memberikan cita rasa
Jenis (aroma) pada
L. dexitranicum Olahan keju, mentega,
yoghurt, dll
Lactobacillus 11 L. Bulgarikus, laktit Pembuatan keju,
Jenis mentega, yoghur
L. casei, Memfermentasikan
acidophilus gula jadi asam
Eubacterium 20 Jenis Saprofit hingga patogen
pada usus
Catena bacterium Bakteri penghuni organ
pencernaan
Cillobacterium Pada manusia dan
hewan
Ramibacterium
11 Propinobacteriace Propinobacterium 11 Spesies Pengahsil asm Propionat
pada lambung
12 Corynebacteriaceae Corynebacterium 33 Spesies Patogen (mastitis,
dipteri, borok)
13 Bacillaceae Bacillus 25 Spesies Penyebab aneaka
penyakit:
B. Anthraxis Penyakit Antraks
B. Subtilis Antibiotik bacitrasim,
subtilin
B. megaterium Radang bernanah, toxin
makanan
B. cereus Potogen oportunis
B. stearotermopil Toxin makanan, hidup
pada suhu tinggi
Clostridium 93 spesies Saprofit – parasit
patogen
Clos. Covei Penyakit radang paha
(boutvour sapi)
Clos. botulimun Toxin makanan kaleng
Clos. Tetani Penyakit tetanus
Clos.perfringens Penyakit busuk pada
luka
Clos.pasteurianum Pengikat Nitrogen pada
tanah.
5. Ordo Actinomycetales

1 Mycobacteriaceae Mycobacterium 13 spesies Patogen pada hewan dan
manusia
M. tubercolisis Penykit TBC pada
hewan/manusia
M. leprae Penyakit lepra manusia
M. bovis Penyakit pada sapi
M. Avium Panyakit ayam
Mycococcus 6 Spesies Bakteri penghuni tanah
2 Actinomycetaeae Nocardia 45 Spesies Patogen, borok pada kaki
Actinomyces 2 Spesies Radang rahang sapi, patogen
u/ orang
3 Streptomycetacea Streptomyetes 150 spesies Penghasil Obat Antibiotika
S. griseus Obat Streptomicin
S. Aureofaciens Obat Aeromicin
S.Venezuelae Obat Klorampenikol
4 Actijnoplanaceae Atinoplanes 2 spesies Saprofit dalam tanah
6. Ordo Caryophalanes

1 Caryophalanes 3 genus 6 spesies Tidak begitu berarti/penting
7. Ordo Beggiatoles

1 Caryophalanes 3 genus 6 spesies Tidak begitu berarti/penting
8. Ordo Mycoplasmatales

1 Mycoplamataceae 1 genus 15 spesies Kolini kecil pada media biakan
M. galiseptikum Penyakit CRD pada ayam
M. hominis Patogen pada manusia
M. mycoides Pleuropneumonitis pada
hewan
9. Ordo Spirochaetales

1 Spirochaetaceae Spirocheta Beberapa Parasit pada usus manusia/
spesies hewan
2 Treponemataceae Borrelia 28 Spesies Penyakit deman berulang-
ulang
B.recurentis, Penyakit asam dan
vinceti tenggorokan
Treponema 8 T.pallidum Penyakit Sipilis,
jenis
T. partenue Penyakit aptek/ fambusia
Leptospira L. Penyakit kuning pada hati
icterohaemoragik
Leptospira Peny. leptospirosis pada
hewan/orang
10 . Ordo Myxobacteriales:
Ordo ini memiliki 5 faili dan 12 genus yang mencakup 71 spesies, ciri utama bakteri
ini adalah mengandung lendir dan dapat bergerak secara perlahan-lahan, selalu hidup
bergerombol membentuk lapisan peptidoglikan yang kuat sebagai bahan pembentuk
kista, yaitu suatu lapisan liat yang kuat terhadap perubahan kondisi lingkungan.
C. KALSIFIKASI VIRUS PENYEBAB PENYAKIT HEWAN
Virus dalam klasifikasi kehidupan digolongkan dalam microtatobiotes, atau monera

yaitu suatu mikroorganisme yang tidak dapat berdiri sendiri sehingga memerlkan sel
inang dalam hidupnya, golongan microtatobiotes mencakup organisme: Clamedia,
Rhichetsia, Virus dan Prion. Dari golongan ini hidup sebagai parasit pada sel induk
semang.
Virus adalah mikroorganisme yang hidup terkecil, memiliki bentuk memanjang
(batang), oval, bulat dan seperti huruf T. Ukuran virus 20-300 milimikron (1
milimikrom = 1 x 10-6 mm atau 1/1.000.000 mm, sedang 1 mikron = 1 x 10 -3 mm atau
1/1.000. mm). Struktur tubuh virus sangat sederhana yaitu hanya terdiri dari salah
satu asam inti Rebonucleid Acid (RNA) atau Dioxyribonucleid acid (DNA) saja.
RNA atau DNA diselubungi oleh selaput protein yang disebut capsid, ada beberapa
jenis virus yang memiliki mimbran sel yang terdiri atas protein dan lemak serta virion
mengandung beberapa enzym.
Prion adalah gugus protein asing (belum diketahui) merupakan jasad hidup
penyebab sapi gila yang 100 x lebih kecil dibanding virus. Diluar tubuh organisme
(bakteri hingga manusia) virus biasanya berbentuk kristal tanpa ada tanda-tanda
hidup, tahan asam dan basa, resisten terhadap suhu panas dan dingin, tetapi jika
berada dalam lingkungan yang cocok kristal-kristal virus akan bersenyawa lagi
dengan zat-zat gizi dari induk semangnya dan akhirnya kerkembang untuk
memperbanyak diri.
Virus dan Prion adalah jazat biologis, bukan hewan atau tanaman, tanpa struktur
sel, tidak mampu hidup secara mandiri sehingga harus menggunakan sistem enzym
dari tuan rumahnya untuk sintesis asam nukleat, protein dan perkembang-biakanya.
Perkembang-biakan Virus atau Infeksi Virus:

Perkembang-biakan virus atau Sistem Penularan/Infeksi virus, dibedakan menjadi 2
golongan, yaitu: Daur Litik dan Daur Lisogenik.
a. Daur Litik. Perkembang-biakan secara daur litik, dimulai dari:
(1) Pelekatan atau adsorpsi: untuk bisa menginfeksi inang, sel virus harus mampu
merekatkan diri pada dinding sel atau membran sel hospest (inang). Dari kondisi
ini virus harus memiliki kesamaan atau kecocokan enzym dan mampu bertahan
terhadap sel-sel antibody induk semang. Fase perekatan ini seperti kunci dan
gembok jika salah satu tidak cocok maka virus tidak berhasil menginfeksi tetapi
jika cocok maka virus melakukan kegiatan dengan mengeluarkan enzym lysosim
untuk menghancurkan dinding sel atau membran sel..
(2) Penetrasi atau Injeksi, jika telah mampu bertahan dalam perekatan dan
membentuk lobang pada dinding atau membrans sel, maka virus melakukan
penetrasi atau penekanan terhadap dinding atau membran sel dengan
mempompakan asam nukleatnya (DNA atau RNA) untuk bisa masuk kedalam
sitoplasma sel, pada saat ini virus menanggalkan capsit proteinnya.
(3) Asimilasi dan Sintesis, setalah memasuki sitoplasma sel, virus kemudian
mengikuti proses metabolisme kehidupan sel inangnya untuk mendapatkan
makanan, sehingga pada saat ini virus tersebut hidup secara mandiri untuk
membentuk virion-virion baru dengan melepaskan bahan-bahan genetiknya (gen-
gen). Asam inti virus menyalah-gunakan enzym-enzym dan bahan bangun sel inang
dengan menghancurkan DNA atau RNAnya kemudian DNA atau RNA virus
menyambungkan diri dengan DNA atau RNA inang, dengan demikian sel induk
semang tidak berdaya lagi untuk berkembang biak dan diganti oleh DNA atau RNA
virus..
(4) Replikasi atau Perakitan, partikel-partikel (virion-virion) virus baru akan terus
memperbanyak/menggandakan diri pada membran sel inang atau sitoplasma sel
dengan membentuk capsid-capsid baru, setelah kapsid terbentuk sempurna
kemudian DNA atau RNA virus akan memasuki capsid tersebut jumlah virus/sel
antara 100-200 virus.
(5) Fase Litik, setelah virus terbentuk sempurna dalam sel kemudian virus tersebut
mengeluarkan enzym lysosim untuk menghancurkan dinding atau membrans sel
inang, maka terjadilan lisis pada sel inang, virus yang baru keluar dari sel yang
mati untuk melakukan invasi ke sel-sel baru untuk perbanyakan diri lagi.
b. Daur Lisogenik
Daur lisogenik sedikit berbeda dengan daur litik, yaitu: daur lisogenik terjadi pada sel-
sel mandiri seperti infeksi virus pada bakteri, pada fase adsorpsi dan penetrasi/injkesi
sama dengan daur litik.
(1) Pelekatan atau adsorpsi: sama dengan daur litik

(2) Penetrasi atau Injeksi, sama dengan daur litik.
(3) Penggambungan dalam replikasi, DNA atau RNA virus setelah memasuki sel
inang akan menyisipkan diri kedalam DNA sel inang, DNA virus akan membentuk
untaian DNA melingkar seperti kalung (berbenang ganda dan berpilin). Jika
untaian DNA sel inang putus saat akan menggandakan diri maka DNA virus akan
segera mengabungkan diri dengan utaian yang putus tersebut, DNA virus ini tidak
aktif disebut Profag. Dengan demikian pada sel inang terdapat materi genetik
dari virus.
(4) Fase Pembelahan Sel: Pada saat sel inang melakukan pembelahan diri yang
dimulai dari asam inti maka sel virus ikut membelah diri pula. Dengan demikian
terjadilah pembelahan biner dan hingga saat ini DNA atau RNA virus tetap tidak
aktif.
(5) Fase Sintesis: Oleh karena sebab lain (Zat kimia, Sinar UV, radiasi, dll) tiba-tiba
profag menjadi aktif dan memisahkan ndiri dari DNA inang, kemudian DNA virus
membentuk enzym lysozym untuk membunuh DNA atau RNA Inang.
(6) Fase selanjutnya sama denga Daur Litik.
Penggolongan Virus:
Berdasar sifat hidupnya virus digolongan menjadi 2 golongan besar, yaitu virus yang
asam intinya hanya mengandung DNA dan RNA saja. Jenis virus yang menginfeksi
pada hewan dari kedua golongan tersebut, antara lain:
1. Jenis Virus gugus RNA, antara lain: Virus cacar air, herpes simpleks, virus epstin-
barr (demam kelenjar), Human papilovirus penyakit kutil dan kanker vagina, dll.
2. Jenis Virus DNA, antara lain: HIV (penyebab AIDS) Virus Hepatitis (penyakit
kuning/ hati), rhinovirus (selesma), Virus Influenza, Virus Campak, Dengue
(demam berdarah dan demam tulang), Virus ebola, Virus Avian Influenza,
Rotavirus (diare), Virus Folio (lumpuh anak), dll.
Akibat Infeksi Virus
Sebagai akibat dari infeksi virus pada sel inang, maka akan timbul beberapa hal baik
bersifat positif maupun negatif, kondisi ini dipaparkan sebagai berikut:
1. Selama berkembang biak dalam sel inang, virus mendapat perlawanan dari sel dan
memanfaatkan zat-zat makanan dan enzym yang terbatas. Hal ini lama kelamaan
akan menurunkan daya viriulensi virus.
2. Jika virus tidak membunuh sel inang maka sel tersebut akan memiliki sifat otonom
untuk memperbanyak diri sendiri yang mangakibatkan tumor atau kanker.
3. Sel inang akan melakukan perlawanan terhadap infeksi virus, untuk membentuk
sel/zat kebal yang disebut Interferon. Interferon adalah glycoprotein yang
diproduksi oleh sel-sel tertentu dan Sel Lymfoid T. Ada 3 interferon yaitu Alfa, Betta
dan Gamma. Interferon Alfa dan Beta dibentuk oleh berbagai macam sel sebagai
reaksi terhadap infeksi virus. Yang fungsi selanjutnya untuk melindungi membrans
sel sehat sehingga jika ada virus sejenis tidak mampu melakukan perekatan pada
dinding sel. Selain sebagai virus statis interferon ini berguna untuk cytostatis (anti
radang). Untuk interferon Gamma yang dibentuk oleh sel Lymfoid T, berfungsi
untuk mengatur proses imum.
RESEP REAGEN / ZAT WARNA
No Nama dan Kegunaan Resep
1 Karbol Gentian - Gentian Violet 1 grm; fenol kristal 2 grm; alkohol 95% 10
Violet ml; aquades qs 100 ml. campur semua bahan secara
Pewarnaan Gram perlahan, biarkan 24 jam dan saring.
2 Larutan Lugol 1 % - Jodium 1 grm; Kaliumjedida 2 grm; aquades 300 ml
3 Alkohol-Aseton - Larutan A = Aseton : 3 Bag + 7 Bag. Aquades.
Pewarnaan Gram - Ambil larutan A = 3 bagian + alkohol 70 % = 7 bagian.
4 Karbol Fuchsin - Karbol fuchsin basa 1 grm; fenol kristal 5 grm; alkohol
Pewarna tahan 95% 10 ml aquades 100 ml. fuchsin dicampur alkohol,
asam tambah fenol, tambahkan aquades sedikit demi sedikit.
4 Methylen blue - Methylen blue 1 grm; alkohol 95 % 10 ml; aquades Qs
Pewarnaan 100 ml.
sederhana
5 Methylen blue - Serbuk methylen blue : 0,3 g; alkohol 95 % 30 ml; KOH
Loffer 10 % 0,1 ml; aquades qs 100 ml.
Pewarna tahan
asam
6 Asam Alkohol - HCL Pekat 5 ml; alkohol 95 % qs 100 ml.
7 Larutan Safranin - Serbuk safranin 1 grm; alkohol 95 % 4 ml; aquades qs
Pewarnaan Gram 360 ml, larutkan safranin pada alkohol dan tambahkan
aquades 360 ml
8 Karbol Fuchin - Karbol fuchsin basa 4 grm; fenol kristal 8 grm; alkohol
Kinyoun 95% 20 ml aquades 100 ml. Karbolfuchsin dicampur
alkohol dan aquades, panaskan fenol pada suhu 56oC
dan tambah ke dalam larutan tersebut.
9 Lart. Neisser A - Methilen Blue 0,1 g; alkohol 95 % 2 ml; asam asetat
(cuka) pekat 5 ml; aquades 95 ml.
Lart. Neisser B - Gentian violet 1 gr; alkohol 95 % 10 ml; aquades 300 ml.
Lart. Neisser C - Chrysoidin 2 gr; aquades 300 ml. dipanaskan agar larut.
Pewarna Neisser
10 Larutan Eosis - Eosin 1 gr; dinatrium phosfat 5 gr; kalium fosfat 6,25 gr
aquades 500 ml. larurutka sedikit demi sedikit.
11 Larutan Baku Zat - Bahan Pewarna (eosisn, kristal violet, methylen blue, dll)
Pewarna secara 10 gr
umum - Alkohol 95 % 100 ml. larutan bahan tersebut secara
sedikit demi sedikit. Simpat sebagai larutan baku atau
larutan lindi
Larutan Penyangga
Larutkan KH2PO4 sebanyak 9,25 grm dalam 1 liter aquades

Larutan Na2H2PO4H2O sebanyak 11,2 gr dalam 1 liter aquades.
Buat larutan sesuai pH yang dikehendaki seperti formula 1
pH Larutan Na2H2PO4H2O KH2PO4 Jumlah

6,8 50,4 49,6 100 ml
7,0 38,9 61,1 100 ml
7,2 28,0 72,0 100 ml
7,4 19,7 80,3 100 ml

Buku Teks Bahan Ajar Bakterologi

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Buku Teks Bahan Ajar Bakterologi

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

BUKU TEKS BAHAN AJAR SISWA

BADAN PENYULUHAN DAN PENGEMBANGAN SDM PERTANIAN

Mikrobiologi Dalam Kehidupan

2. INOKULASI BAKTERI PADA MEDIA BIAKAN

3. PEMERIKSAAN BAKTERI PADA MEDIA BIAKAN

4. IDENTIFIKASI MORFOLOGI BAKTERI

1. Tujuan Pembelajaran. ………………………………..…………………………………

RUANG LINGKUP LABORATORIUM

PEMERIKSAAN PEMERIKSAAN PEMERIKSAAN

PEMERIKSAAN KESEHATAN TERNAK/

Saudara tidak diperbolehkan melanjutkan modul berikutnya sebelum

1. Petunjuk Pemanfaatan Bahan Ajar Bagi Guru

Pada saat berlangsungnya proses belajar:

Sesudah Pembelajaran Selesai

E. Cek Kemampuan Awal

2. Uraian Materi Pelajaran.

Syarat Media Biakan:

Media biakan sebagai tempat tumbuh bakteri/mikroorganisme harus

Berdasar jenisnya media biakan bakteri dibedakan menjadi:

Media Biakan ditinjau berdasar bentuk:

Media biakan berdasar bentuknya dapat dibedakan menjadi 3 bentuk, yaitu:

Alat dan Bahan :

Contoh: Resep Media Biakan Cair:

Langkah Kerja Pembuatan Media Biakan.

Gambar: Skema Autoklaf

4. Penuangan Media Biakan.

Tuangkan media biakan ke dalam Tutup tabung reaksi dan sterilkan

2. Membuat Media Biakan Padat dan Setengah Padat

Media biakan padat adalah media biakan untuk menumbuhkan bakteri

Bentuk Media Biakan Padat:

Berdasar bentuknya media biakan padat dibagi menjadi 3 bentuk, yaitu:

1. Kaldu Boylon Agar teridiri dari :

- Untuk mendia penyubur tambahkan darah merah 5-10 % pada sehu 45 oC

4. TSI- Agar (tripel sugar iron agar) Terdiri dari :

Langkah Kerja Pembuatan Media Biakan.

4. Penuangan Media Biakan.

Prosedur Menuang Media Biakan Plat/Lempeng Agar secara Manual

1. Letakkan cawan pada telapak tangan 2. Tuangkan media Biakan

1. Semua Pekerjaan dilakukan di dalam Enkas.

No Ranah Penialain Nilai Ket.

Kegiatan Pembelajaran II: Menanam/Inokulasi Bakteri

Pertumbuhan mahluk hidup bisa dimaknai sebagai pertambahan jumlah dan

Setelah belajar siswa mampu:

a. Melakukan Inokulasi/menanam pada bakteri media biakan cair dengan

2. Uraian Materi Pelajaran

2.1 Pertumbuhan Bakteri

Pertumbuhan bakteri pada media biakan dapat digambarkan seperti kurva

Grafik Pertumbhan Bakteri pada Media Biakan:

A – B : Pertumbuhan adaptasi 0-4 Jam Setelah inokulasi

2.3 Inokulasi Bakteri

2.3.1 Inokulasi Bakteri pada media biakan Cair.

Alat dan Bahan

a. Langkah Kerja Inokulasi Bakteri pada Media Biakan Cair.

No Langkah Kerja Penjelasan/Gambar

1. Siapkan semua bahan dan peralatan Spesimen, media biakan, bunsen,

2.3.2 Inokulasi Bakteri Pada Media Biakan Padat.

a. Inokulkasi Bakteri pada Lempeng atau Plat Agar

No Langkah Kerja Penjelasan/Gambar

1. Siap semua bahan dan peralatan Spesimen, media biakan, bunsen,

b. Inokulasi Bakteri pada Media Biakan Agar Tegak.

c. Inokulasi pada Media Agar Miring

No Langkah Kerja Penjelasan/Gambar

1. Siapkan semua bahan dan peralatan Spesimen, media biakan, bunsen,