LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

PENGAMATAN SAMPEL AIR PDAM DENGAN METODE MPN

Disusun oleh:

Kelompok 1 (A4-18)

Vina Septyarini Sodikin 1351810251

Dimas Aditya Prihansyah 1351810252

Miftah Agustriana 1351810254

Sella Berliana Fabiola 1351810255

Erni Puspitasari 1351810256

Wahyu Putri Widya Ningrum 1351810257

Ilmi Nur Khafidah 1351810258

Umi Aslihatin Nuriyah 1351810264

AKADEMI FARMASI SURABAYA

2019
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Air merupakan suatu sarana utama untuk meningkatkan derajat kesehatan

masyarakat karena air merupakan salah satu media dari berbagai macam penularan penyakit. Air
bersih adalah air yang jernih, tidak berwarna, tawar dan tidak berbau. Sumber daya alam yaitu air,
dapat diperoleh dari air permukaan meliputi air sungai, danau, waduk, rawa dan genangan air
lainya.
Air merupakan kebutuhan yang paling dibutuhkan di dalam kehidupan manusia. Air yang
ada di alam bukanlah didapat sebagai air murni, melainkan sebagai air yang mengandung
bermacam-macam zat, baik yang terlarut ataupun tersuspensi. Jenis dan jumlah zat tersebut
tergantung dari kondisi lingkungan sekitar sumbernya.
Air merupakan materi esensial bagi kehidupan makhluk hidup, karena makhluk hidup
memerlukan air untuk mempertahankan kelangsungan hidupnya. Secara umum fungsi air dalam
tubuh setiap mikroorganisme adalah untuk melarutkan senyawa organik, menstabilkan suhu tubuh
dan melangsungkan berbagai reaksi kimia tingkat seluler.
Pemeriksaan air secara mikrobiologi sangat penting dilakukan karena air merupakan
substansi yang sangat penting dalam menunjang kehidupan mikroorganisme yang meliputi
pemeriksaan secara mikrobiologi baik secara kualitatif maupun kuantitatif dapat dipakai sebagai
pengukuran derajat pencemaran.
Uji kualitatif Coliform secara lengkap terdiri dari tiga tahap yaitu uji dugaan (presumptive
test), uji penetapan (confirmed test), dan uji pelengkap (completed test). Metode pengujian yang
digunakan adalah metode Most Probable Number (MPN) atau Jumlah Perkiraan Terbatas (JPT).
Analisis kuantitatif mikrobiologi pada air minum penting dilakukan untuk mengetahui
mutu air minum tersebut. Ada beberapa cara yang dapat digunakan untuk menghitung atau
mengukur jumlah jasad renik dalam suatu suspensi, salah satunya adalah pemeriksaan adanya
bakteri Coliform pada minuman dengan metode MPN (Most Probable Number).
Pemeriksaan derajat pencemaran air secara mikrobiologi umumnya ditunjukkan dengan
kehadiran bakteri indikator seperti Coliform dan Fecal coli. Bakteri Coliform sebagai suatu
kelompok dicirikan sebagai bakteri berbentuk batang gram negatif, tidak membentuk spora,
aerobik, dan anaerobik fakultatif yang memfermentasi laktosa dengan menghasilkan asam dan gas
dalam waktu 48 jam pada suhu 35° C. Berdasarkan hal inilah yang melatar belakangi
dilaksanakannya praktikum ini untuk mengetahui teknik pengujian kualitas air dengan
menggunakan metode MPN sehingga dapat mengetahui air yang baik untuk dikonsumsi.

1.2 Rumusan Masalah

1. Bagaimana hasil pengamatan makroskopis yang telah dilakukan ?
2. Bagaimana hasil pengamatan mikroskopis yang telah dilakukan ?

1.3 Tujuan
Adapun tujuan dari praktikum uji kualitas air dengan menggunakan metode MPN adalah:
1. Untuk mengetahui teknik uji kualitas air dengan menggunakan metode MPN.
2. Untuk mengetahui kualitas dari air pdam dan air isi ulang .

1.4 Manfaat
Adapun manfaat yang diperoleh dari hasil praktikum uji kualitas air dengan metode MPN
ini ,yaitu :
1. dapat mengetahui metode uji kualitas air dengan metode MPN sehingga dapat mengetahui
kualitas dari air pdam dan air isi ulang , yang di ujikan sehingga diketahui layak tidaknya
air tersebut untuk dikonsumsi.
2. Sebagai tenaga kesehatan masyarakat, dengan adanya pengetahuan tentang pengujian
kualitas air, maka dapat dilakukan penyuluhan kepada masyarakat akan pentingnya air
yang bersih dan bebas dari mikroba, demi meningkatkan derajat kesehatan masyarakat.
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Air
Air merupakan bahan esensial bagi hidupnya organisme, oleh karena itu air selalu penuh
dengan benda-benda hidup. Manusia dan makhluk-makhluk lain yang tidak hidup di dalam air
senantiasa mencari tempat-tempat tinggal dekat air supaya mudah mengambil air untuk keperluan
hidupnya, maka desa atau kota zaman dulu tumbuh di sekitar sumber air, di tepi sungai, atau di
tepi danau. Sesudah manusia lebih maju, tempat tinggalnya tidak perlu dekat air dengan sumber
jauh yang disalurkan dengan pipa dan didistribusikan (Prawiro, 1989).
Pentingnya air di dalam tubuh manusia, berkisar antara 50%–70% dari seluruh total berat
badan. Tulang manusia mengandung air sebanyak 22% berat tulang, dalam darah dan ginjal
sebanyak 83%. Pentingnya air bagi kesehatan dapat dilihat dari jumlah air yang ada di dalam
organ, 80% dari darah terdiri atas air, dalam tulang mengandung 25%, sedangkan dalam urat syaraf
terdapat 75% air, dalam ginjal mengandung 80% air, dalam hati 70% air, dan otot 75% air.
Kekurangan air menyebabkan penyakit batu ginjal dan kandung kemih, karena terjadi kristalisasi
unsur-unsur yang ada di dalam cairan tubuh. Kehilangan air sebanyak 15% dari berat badan dapat
mengakibatkan kematian. Kebutuhan minum orang dewasa adalah minimum 1,5–2 liter air sehari
(Slamet, 2004).
Selain pentingnya air bagi tubuh manusia, air dibutuhkan bagi kehidupan lainnya, baik
untuk kebutuhan hidup sehari-hari yaitu keperluan untuk kebutuhan domestik rumah tangga
maupun kebutuhan dalam pertanian, industri, perikanan, pembangkit listrik tenaga air, dan
navigasi, serta rekreasi (Soerjani, 1997).
Air tawar bersih yang layak minum, demikian langka di perkotaan. Sungai-sungai yang
menjadi sumbernya sudah tercemar berbagai macam limbah, mulai dari buangan sampah organik,
rumah tangga hingga limbah beracun dari industri. Air tanah sudah tidak aman dijadikan bahan air
minum karena telah terkontaminasi rembesan dari tangki septik maupun air permukaan
(Pudjarwoto, 1993).
Air merupakan komponen esensial bagi kehidupan jasad hidup. Akan tetapi dapat juga
merupakan suatu substansi yang membawa malapetaka, karena air dapat membawa
mikroorganisme patogen dan zat-zat kimia yang bersifat racun (Gause, 1946).
 Banyaknya kontaminan dalam air memerlukan standar tertentu untuk menjamin
kebersihannya. Air yang terkontaminasi oleh bakteri patogen saluran cerna sangat berbahaya untuk
diminum. Hal ini dapat dipastikan dengan penemuan organisme yang ada dalam tinja manusia atau
hewan dan yang tidak pernah terdapat bebas di alam. Ada beberapa organisme yang termasuk
kategori ini, yaitu bakteri Coliform (Escherichia coli), Enterococcus faecalis,dan Clostridium. Di
Indonesia, bakteri indikator air terkontaminasi adalah Escherichia coli (Gause, 1946).

2.2 Bakteri Coliform

Bakteri Coliform adalah jenis bakteri yang umum digunakan sebagai indikator penetuan
kualitas sanitasi makanan dan air. Coliform sendiri sebenarnya bukan penyebab dari penyakit-
penyakit bawaan air, namun bakteri jenis ini mudah untuk dikultur dan keberadaannya dapat
digunakan sebagai indikator keberadaan organisme patogen seperti bakteri lain, virus atau
protozoa yang banyak merupakan parasit yang hidup dalam sistem pencernaan manusia serta
terkandung dalam feses. Organisme indikator digunakan karena ketika seseorang terinfeksi oleh
bakteri patogen, orang tersebut akan mengekskresi organisme indikator jutaan kali lebih banyak
dari pada organisme patogen. Hal inilah yang menjadi alasan untuk menyimpulkan bila tingkat
keberadaan organisme indikator rendah maka organisme patogen akan jauh lebih rendah atau
bahkan tidak ada sama sekali (Servais, 2007).
Bakteri Coliform dijadikan sebagai bakteri indikator karena tidak patogen, mudah serta
cepat dikenal dalam tes laboratorium serta dapat dikuantifikasikan, tidak berkembang biak saat
bakteri patogen tidak berkembang biak, jumlahnya dapat dikorelasikan dengan probabilitas adanya
bakteri patogen, serta dapat bertahan lebih lama daripada bakteri patogen dalam lingkungan yang
tidak menguntungkan (Slamet, 2004).
Bakteri Coliform adalah bakteri indikator keberadaan bakteri patogenik lain. Lebih
tepatnya, sebenarnya, bakteri Coliform fekal adalah bakteri indikator adanya pencemaran bakteri
patogen. Penentuan Coliform fekal menjadi indikator pencemaran dikarenakan jumlah koloninya
pasti berkorelasi positif dengan keberadaan bakteri patogen. Selain itu, mendeteksi Coliform jauh
lebih murah, cepat, dan sederhana daripada mendeteksi bakteri patogenik lain. Contoh bakteri
Coliform adalah, Esherichia coli dan Entereobacter aerogenes. Jadi, Coliform adalah indikator
kualitas air. Makin sedikit kandungan Coliform, artinya, kualitas air semakin baik. (Friedheim,
2001).
 Eschericia coli, merupakan anggota Coliform yang dapat dibedakan dari bakteri Coliform
lain karena kemampuannya memfermentasikan laktosa pada suhu 44°C (pada JPT hal ini
dilakukan pada tahap terakhir atau saat uji kelengkapan). Pengidentifikasian dapat dilihat dari
pertumbuhan dan reaksi yang memberikan warna berbeda pada media kultur khusus. Saat
dikulutur pada media EMB, hasil positif E. coli adalah koloni berwarna hijau metalik. Tidak seperti
golongan Coliform pada umumnya, E. coli merupakan bakteri yang berasal dari feses dan
kehadirannya efektif mengkonfirmasi adanya kontaminasi fekal pada badan air. Umumnya, pada
feses, E. coli ada sebanyak 11% dari Coliform (Slamet, 2004).

2.3 Metode MPN

Jumlah mikroorganisme dapat dihitung melalui beberapa cara, namun secara mendasar
dapat dikelompokkan menjadi dua yaitu perhitungan langsung dan tidak langsung. Perhitungan
secara langsung dapat mengetahui beberapa jumlah mikroorganisme pada suatu bahan pada suatu
saat tertentu tanpa memberikan perlakuan terlebih dahulu, sedangkan jumlah organisme yang
diketahui dari cara tidak langsung terlebih dahulu harus memberikan perlakuan tertentu sebelum
dilakukan perhitungan. Perhitungan secara langsung, dapat dilakukan dengan beberapa cara antara
lain adalah dengan membuat preparat dari suatu bahan (preparat sederhana diwarnai atau tidak
diwarnai) dan penggunaan ruang hitung (counting chamber). Sedangkan perhitungan cara tidak
langsung hanya untuk mengetahui jumlah mikroorganisme pada suatu bahan yang masih hidup
saja (viable count). Dalam pelaksanaannya, ada beberapa cara yaitu, perhitungan pada cawan petri
(total plate count/TPC), perhitungan melalui pengenceran, perhitungan jumlah terkecil atau
terdekat (Metode MPN) dan kalorimeter (cara kekeruhan atau turbidimetri). Metode perhitungan
MPN sering digunakan dalam pengamatan untuk menghitung jumlah bakteri yang terdapat di
dalam tanah seperti Nitrosomonas dan Nitrobacter. Kedua jenis bakteri ini memegang peranan
penting dalam meningkatkan pertumbuhan dan produksi tanaman, sehubungan dengan
kemampuannya dalam mengikat N2 dari udara dan mengubah amonium menjadi
nitrat (Dwidjoseputro, 1994).
Metode MPN merupakan salah satu metode perhitungan secara tidak langsung. Metode
MPN terdiri dari tiga tahap, yaitu uji pendugaan (presumptive test), uji konfirmasi (confirmed test),
dan uji kelengkapan (completed test). Dalam uji tahap pertama, keberadaan Coliform masih dalam
tingkat probabilitas rendah, masih dalam dugaan. Uji ini mendeteksi sifat fermentatif Coliform
dalam sampel (Lim, 1998).
Dalam metode MPN, pengenceran harus dilakukan lebih tinggi daripada pengenceran
dalam hitungan cawan, sehingga beberapa tabung larutan hasil pengenceran tersebut mengandung
satu sel jasad renik. Beberapa tabung mungkin mengandung lebih dari satu sel, sedangkan tabung
lainnya tidak mengandung sel. Dengan demikian setelah inkubasi diharapkan terjadi pertumbuhan
pada beberapa tabung yang dinyatakan sebagai tabung positif sedang tabung lainnya negatif.
Metode MPN biasanya digunakan untuk menghitung jumlah mikroba di dalam contoh yang
berbentuk cair, meskipun dapat pula digunakan untuk contoh berbentuk padat dengan melakukan
pengenceran terlebih dahulu (Fardiaz, 1996).
Metode MPN merupakan uji deretan tabung yang menyuburkan pertumbuhan Coliform
sehingga diperoleh nilai untuk menduga jumlah Coliform dalam sampel yang diuji. Uji positif akan
menghasilkan angka indeks. Angka ini disesuaikan dengan tabel MPN untuk menentukan jumlah
Coliform dalam sampel (Pakadang, 2010).
Metode MPN biasanya dilakukan untuk menghitung jumlah mikroba di dalam contoh yang
berbentuk cair, meskipun dapat pula digunakan untuk contoh berbentuk padat dengan terlebih
dahulu membuat suspensi 1:10 dari contoh tersebut. Metode MPN digunakan medium cair di
dalam tabung reaksi, dimana perhitungannya dilakukan berdasarkan jumlah tabung yang positif
yaitu yang ditumbuhi oleh jasad renik setelah inkubasi pada suhu dan waktu tertentu. Pengamatan
tabung yang positif dapat dilihat dengan mengamati timbulnya kekeruhan atau terbentuknya gas
di dalam tabung kecil (tabung durham) yang diletakkan pada posisi terbalik, yaitu untuk jasad
renik pembentuk gas. Untuk setiap pengenceran pada umumnya digunakan tiga atau lima seri
tabung. Lebih banyak tabung yang digunakan menunjukkan ketelitian yang lebih tinggi, tetapi alat
gelas yang digunakan juga lebih banyak (Fardiaz, 1996).
Untuk metode MPN (most probable number) digunakan medium cair dalam wadah berupa
tabung reaksi, perhitungan di lakukan berdasarkan jumlah tabung yang positif yaitu tabung yang
mengalami perubahan pada mediumnya baik itu berupa perubahan warna atau terbentuknya
gelembung gas pada dasar tabung durham. Pada metode perhitungan MPN ini digunakan bentuk
tiga seri pengenceran, yang pertama 10-1, 10-2 dan 10-3. Kemudian dari hasil perubahan tersebut
dicari nilai MPNnya pada tabel nilai MPN, dan untuk jumlah bakterinya maka digunakan rumus
(Gobel, 2008).
 Tabel yang digunakan untuk menentukan nilai MPN dari tiga seri tabung berbeda dengan
tabel lima seri tabung. Kombinasi yang dipilih mulai dari pengenceran tertinggi yagn masih
menghasilkan semua tabung positif sedangkan pada pengenceran yang berikutnya ada tabung yang
negatif. Kombinasi yang diambil terdiri dari tiga pengenceran. Jika pada pengenceran yang
keempat atau seterusnya masih diketemukan tabung yang hasilnya positif, maka jumlah tabung
yang positif tersebut harus ditambahkan pada angka kombinasi yang ketiga sampai mencapai
jumlah maksimum (Volk, 1993).
Beberapa jenis bakteri selain Coliform juga memiliki sifat fermentatif, sehingga diperlukan
uji konfirmasi untuk mengetes kembali kebenaran adanya Coliform dengan bantuan medium
selektif diferensial. Uji kelengkapan kembali meyakinkan hasil tes uji konfirmasi dengan
mendeteksi sifat fermentatif dan pengamatan mikroskop terhadap ciri-ciri Coliform seperti,
berbentuk batang, gram negatif, tidak-berspora. Output metode MPN adalah nilai MPN. Nilai
MPN adalah perkiraan jumlah unit tumbuh (growth unit) atau unit pembentuk koloni (colony
forming unit) dalam sampel. Namun, pada umumnya nilai MPN juda diartikan sebagai perkiraan
jumlah individu bakteri. Satuan yang digunakan, umumnya per 100 mL atau per gram. Metode
MPN memiliki limit kepercayaan 95 persen sehingga pada setiap nilai MPN, terdapat jangkauan
nilai MPN terendah dan nilai MPN tertinggi (Lim, 1998).
Uji penduga merupakan uji positif untuk menentukan bakteri Coliform. Media yang
digunakan ialah media Lactose Broth. Bakteri dapat menggunakan laktosa sebagai sumber karbon,
namun ada pula sebagian bakteri enteric yang tidak dapat melakukannya. Kaldu laktosa
mengandung surface tension depressant yang menekan pertumbuhan bakteri gram positif dan
memacu bakteri gram negatif terutama bakteri Coliform. Hasil uji penguat yang positif atau
meragukan menyatakan bahwa sampel air tidak layak untuk diminum. Uji penguat memerlukan
media selektif dan diferensial seperti Eosin-Biru Metilen atau ENDO agar yang akan diinokulasi
dari tabung laktosa yang positif. Uji pelengkap, uji ini merupakan tahap akhir analisis bakteri dari
contoh air. Uji pelengkap dilakukan dengan pewarnaan gram (Volk, 1993).
 BAB III

METODOLOGI PENELITIAN

1.1 Waktu dan Tempat

Adapun waktu dan tempat dilaksanakannya praktikum uji kualitas air dengan menggunakan
metode MPN adalah :
Hari/Tanggal : Senin, 16 Desember 2019
Waktu : 08.00 - Selesai
Tempat : Laboratorium Mikrobiologi Akademi Farmasi Surabaya.

2.1 Alat dan Bahan

Adapun alat dan bahan yang digunakan dalam praktikum uji kualitas air dengan
menggunakan metode MPN adalah :

2.1.1 Alat
1. Pipet tetes
2. Rak tabung
3. Tabung reaksi
4. Gelas ukur 10 ml
5. Tabung durham
6. Bunsen
7. Inkubator

2.1.2 Bahan
1. Sampel air (air PDAM dan air isi ulang )
2. Medium Brilliant Green Lactase Bilebroth (BGLB)
3. Medium Laktose Broth (LB)
4. Medium Escherichia coli (EC)
5. Aquades steril
 6. Alkohol 70%
7. Korek api
8. Spiritus
9. Label

3.1 Prosedur Kerja

3.1.1 Pengenceran
1. Menyiapkan 9 tabung reaksi dan memberikan label pada masing-
masing tabung dengan tanda 10-1, 10-2 dan 10-3.
2. Mengisi tabung reaksi masing-masing 9 ml aquadest steril yang
telah di ukur dengan menggunakan gelasukur.
3. Menambahkan sampel air pdam dan air isi ulang masing-masing 1
ml dengan menggunakan pipet tetes ke dalam tabung yang telah
berisi aquades steril pada tabung pengenceran 10-1, kemudian
mengocok agar tercampur secara homogen. Air galon tidak
dilakukan pengenceran karena telah melalui proses sterilisasi.
4. Menambahkan 1 ml sampel dari pengenceran 10-1 ke dalam tabung
pengenceran 10-2, kemudian mengocok sehingga tercampur secara
homogen.
5. Menambahkan 1 ml sampel dari pengenceran 10-2 ke dalam tabung
pengenceran 10-3, kemudian mengocok sehingga tercampur secara
homogen.
6. Perlakuan pada poin 3-5 dilakukan sebanyak 3 kali pada tabung
reaksi yang lain.

3.1.2 Uji Pendugaan

1. Memfiksasi mulut tabung media LB (Lactose Broth) pada api Bunsen kemudian
menambahkan masing-masing 5 ml/100 tetes dari tabung pengenceran 10-1 ke
 dalam 3 tabung media Lactose Broth (LB), dan kembali memfiksasi tabung
reaksi dan menutup dengan kapas.
2. Memfiksasi mulut tabung media LB (Lactose Broth) kemudian menambahkan
masing-masing 1 ml/20 tetes dari tabung pengenceran 10-2 ke dalam 3 tabung
media Lactose Broth (LB), dan kembali memfiksasi tabung reaksi dan menutup
dengan kapas.
3. Memfiksasi mulut tabung media LB (Lactose Broth) kemudian menambahkan
masing-masing 0.5 ml/10 tetes dari tabung pengenceran 10-3 ke dalam 3 tabung
media Lactose Broth (LB), dan kembali memfiksasi tabung reaksi dan menutup
dengan kapas.
4. Menghomogenkan secara perlahan pada seluruh tabung agar sampel menyebar
rata keseluruh media.
5. Menginkubasikan seluruh tabung pada suhu 340C selama 24 jam.
6. Mengamati adanya gelembung udara di dalam tabung durham dan mencatat
kode tabung yang positif mengeluarkan gas.

3.1.3 Uji Penegasan

1. Mengambil sampel air dari tabung LB yang positif yang ditandai adanya
gelembung pada tabung durham kemudian memasukkan sebanyak 2 tetes
kedalam tabung BGLB dan EC medium untuk pemeriksaan total Coliform.
2. Menginkubasi media BGLB dan EC pada suhu 34oC selama 24 jam.
3. Mencatat jumlah tabung yang menunjukkan tes penegasan positif.
4. Menentukan nilai MPN Coliform berdasarkan tabel MPN yang terdapat pada
lampiran.
 BAB IV
PEMBAHASAN

4.1 Pembahasan

Pada praktikum kali ini melakukan pemeriksaan air. Pemeriksaan air ini dilakukan agar
kita dapat mengetahui apakah air tersebut layak untuk di minum atau digunakan dalam
kehidupan sehari – hari. Pemeriksaan air ini menggunakan metode MPN. Metode perhitungan
MPN menggunakan media cair di dalam tabung rekasi yang berisi tabung durham, dimana
perhitungan dilakukan berdasarkan jumlah tabung yang positif yaitu yang ditumbuhi oleh jasad
renik setelah inkubasi pada suhu dan waktu tertentu. Pengamatan tabung yang positif dapat
dilihat dengan mengamati terbentuknya gas di dalam tabung durham yang diletakkan pada posisi
terbalik, yaitu untuk jasad renik pembentukan gas, sehingga tabung durham tersebut naik ke atas.

Pengamatan terhadap air PDAM menunjukkan hasil positif dalam uji coliform yang
ditandai dengan adanya gas dalam tabung durham oleh karena di dalam medium BGLB terdapat
mikroba pembentukan gas. Gelembung udara yang dihasilkan pada tabung durham disebabkan
oleh adanya aktivitas yang respirasi mikroorganisme, sehingga dapat dilihat hasil dari respirasi
mikroorganisme tersebut berupa gelembung gas. Fungsi dari tabung durham sendiri sebagai
media untuk menampung gas akibat metabolisme bakteri. Tabung yang menunjukkan hasil
positif pada uji penetapan ditumbuhkan pada media BGLB yang merupakan media selektif
karena kandungan empedunya akan meningkatkan pertumbuhan bakteri gram negatif Coliform,
namun kandungan hijau berliannya akan menghambat pertumbuhan bakteri gram positif dengan
jalan merusak dinding selnya.

Pada uji kali ini untuk uji pelengkap ini dilakukan pewarnaan gram untuk mengetahui
bentuk dari bakteri yang terdapat pada sampel. Prosedur pewarnaan gram yang dilakukan sama
seperti sebelumnya. Adapun pewarnaan gram dilakukan untuk mengetahui fungsi – fungsi dari
pewarnaan bakteri gram yaitu, pewarnaan kristal ungu ditambahkan sebagai pemberi pewarna
awal, lugol ditambahkan untuk memperkuat ikatan pada dinding sel sehingga warna yang terlihat
tampak lebih jelas, alkohol ditambahkan sehingga pada bakteri gram negatif menjadi berwarna
merah sedangkan pada gram positif berwarna ungu. Setelah dilakukan pewarnaan gram dan
diamati dengan mikroskop, bakteri yang teramati yaitu bakteri berbentuk basil dan berwarna
merah muda sehingga dapat dikatakan bakteri E. Colli kemudian diamati dengan pada mikroskop
lalu dilihat warna dan bentuknya.
 BAB V
PENUTUP

5.1 Kesimpulan
Berdasarkan hasil pengamatan dan pembahasan dari uji kualitas air dengan menggunakan
metode MPN dapat diambil kesimpulan bahwa:
1. Metode yang digunakan dalam pemeriksaan kualitas air adalah metode MPN (Most
Probable Number) karena metode ini dapat mendeteksi Coliform dalam jumlah yang
sangat rendah. Metode MPN terdiri dari tiga tahap, yaitu uji pendugaan (presumptive test),
uji konfirmasi (confirmed test), dan uji kelengkapan (completed test). Metode MPN (most
probable number) menggunakan medium cair dalam wadah berupa tabung reaksi,
perhitungan di lakukan berdasarkan jumlah tabung yang positif yaitu tabung yang
mengalami perubahan pada mediumnya baik itu berupa perubahan warna atau
terbentuknya gelembung gas pada dasar tabung durham.