BAB I......................................................................................................................................................2
PENDAHULUAN.....................................................................................................................................2
1.1 Latar Belakang.............................................................................................................................2
1.2 Rumusan Masalah.......................................................................................................................2
1.3 Tujuan..........................................................................................................................................3
1.4 Manfaat.......................................................................................................................................3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA....................................................................................................................4
2.1 Skrining Fitokimia........................................................................................................................4
2.2 Alkaloid........................................................................................................................................4
2.3 Senyawa Glikosida Saponin, Triterpen, Dan Steroid....................................................................5
2.4 Flavonoid.....................................................................................................................................7
2.5 Polifenol dan Tanin......................................................................................................................8
2.6 Glikosida antrakuinon............................................................................................................9
2.7 Tanaman Kemuning.....................................................................................................................9
BAB III..................................................................................................................................................11
METODE..............................................................................................................................................11
3.1 Identifikasi Golongan Alkaloid...................................................................................................11
3.2 Identifikasi Glikosida Saponin, Triterpenoid dan Steroid...........................................................12
3.3 Identifikasi Golongan Flavonoid.................................................................................................15
3.4 Identifikasi Golongan Polifenol dan Tanin.................................................................................16
3.5 Identifikasi Golongan Antrakuinon............................................................................................18
BAB IV..................................................................................................................................................21
HASIL DAN PEMBAHASAN...................................................................................................................21
4.1 Hasil Praktikum (Tabulasi data latihan 1-5)................................................................................21
4.2 PEMBAHASAN............................................................................................................................22
4.2.1 Identifikasi Senyawa Golongan Alkaloid.................................................................................22
4.2.2 identifikasi glikosida saponin, triterpen, dan steroid..............................................................23
4.2.3 Identifikasi senyawa golongan Flavonoid...............................................................................24
4.2.4 Polifenol dan Tanin..........................................................................................................25
4.2.5 Identifikasi Senyawa Golongan Antrakuinon..........................................................................27
BAB V PENUTUP...................................................................................................................................28
5.1 Kesimpulan................................................................................................................................28
5.2 Saran..........................................................................................................................................28
Daftar Pustaka.....................................................................................................................................29
1
BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
2
1.2.4. Bagaimana struktur dan fungsi dari alkaloid, glukosida, saponin, triterpenoid,
steroid, flavonoid, polifenol, dan antrakinon?
1.2.5. Bagaimana hasil skrining fitokimia buah kemuningan dan perbandingannya
dengan literatur?
1.3 Tujuan
Mahasiswa dapat mengetahui cara skrining fitokimia dengan senyawa golongan alkaloid,
glikosida saponin, triterpenoi dan steroid, flavonoid, polifenol dan tanin dan antrakinon.
1.4 Manfaat
3
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
Skrining fitokimia merupakan tahap pendahuluan dalam satu penelitian fitokimia yang
bertujuan untuk memberikan gambaran tentang golongan senyawa yang terkandung dalam
tanaman yang sedang diteliti. Skrining fitokimia merupakan tahap pendahuluan dalam suatu
penelitian fitokimia yang bertujuan untuk memberikan gambaran tentang golongan senyawa
yang terkandung dalam tanaman yang sedang diteliti. Metode skrining fitokimia dilakukan
dengan melihat reaksi pengujian warna dengan menggunakan suatu pereaksi warna. Hal
penting yang berperan penting dalam skrining fitokimia adalah pemilihan pelarut dan metode
ekstraksi (Kristianti dkk., 2008). Pendekatan fitokimia meliputi analisis kualitatif kandungan
kimia dalamtumbuhan atau bagian tumbuhan (akar, batang, daun, bunga, buah dll).Terutama
kandungan metabolit sekunder yang bioaktif yaitu alkaloida,antrakuinon, flavonoida,
glikosida jnatung, saponin (steroid dan hiterpenoid ), tannin (polifenolat), minyak atsiri
(terpenoid) iridoid dan sebagainya (Harbone, 1987). Dengan tujuan pendekatan skring
fitokimia mensurvei tumbuhan untuk mendapatkan kandungan bioaktif ataukandungan yang
berguna untuk pengobatan (Robinso,1995).
Adapun metode yang digunakan atau dipilih untuk melakukan skriningfitokimia harus
memenuhi beberapa persyaratan antara lain(Robinson,1995).
1. Sederhana
2. Cepat
3. Dapat dilakukan dengan peralatan minimal
4. Selektif terhadap golongan senyawa yang dipelajari
5. Bersifat semikuantitatif yaitu memiliki batas kepekaan untuk senyawayang
dipelajari
6. Dapat memberikan keterangan tambahan ada/tidaknya senyawa darigolongan yang
dipelajari
2.2 Alkaloid
Alkaloid adalah senyawa metabolit sekunder terbanyak yang memiliki atom nitrogen.
Sebagian sumber alkaloid adalah pada tanaman berbunga, angiosperma, (familia
Leguminoceae, papavraceae, Ranunculaceae, Rubiaceae, solanaceae, Berberidaceae) dan juga
pada tumbuhan monokotil (familia Solanaceae dan Liliaceae). Alkaloid berkhasiat atau
sebagai antidiare, antidiabetes, antimikroba, dan antimalarial. Namun beberapa senyawa
golongan alkaloid bersifat racun, sehingga perlu adanya identifikasi senyawa golongan
alkaloid yang dapat diketahui manfaatny (Ningrum dkk., 2016). Sistem klasifikasi
4
yangditerima, menurut Hegnauer, alkaloid dikelompokkan sebagai (a) Alkaloid
sesungguhnya, (b)Protoalkaloid, dan (c) Pseudoalkaloid. Sifat-sifat dari Alkaloid antara lain:
A. Mengandung atom nitrogen yang umumnya berasal dari asam amino.
B. Berupa padatan kristal yang halus dengan titik lebur tertentu yang bereaksi dengan asam
membentuk garam.
C. Alkaloid berbentuk cair dan kebanyakan tidak berwarna.
D. Dalam tumbuhan alkaloid berada dalam bentuk bebas, dalam bentuk N-oksida atau dalam
bentuk garamnya.
E. Umumnya mempunyai rasa yang pahit.
F. Alkaloid dalam bentuk bebas tidak larut dalam air, tetapi larut dalamkloroform, eter dan
pelarut organik lainnya yang bersifat relative non polar.
G. Alkaloid dalam bentuk garamnya mudah larut dalam air, contohnya Strychnine HCl lebih
larut dalam air daripada bentuk basanya.
H. Alkaloid bebas bersifat basa karena adanya pasangan elektron bebas, garam pada atom N-
nya.
2.3 Senyawa Glikosida Saponin, Triterpen, Dan Steroid
Glikosida adalah senyawa yang terdiri atas gabungan dua bagian senyawa, yaitu gula
dan bukan gula. Keduanya dihubungkan oleh suatu bentuk ikatan berupa jembatan oksigen
(O-glikosida, dioscin), jembatan nitrogen (N-glikosida, adenosine), jembatan sulfur (S-
glikosida, sinigrin), maupun jembatan karbon (C-glikosida, barbaloin). Bagian gula biasa
disebut glikon sementara bagian bukan gula disebut sebagai aglikon atau genin. Apabila
glikon dan aglikon saling terikat maka senyawa ini disebut sebagai glikosida. Glikosida
sering diberi nama sesuai bagian gula yang menempel di dalamnya dengan menambahkan
kata 'osida. Sebagai contoh, glikosida yang mengandung glukosa disebut glukosida, yang
mengandung arabinosa disebut arabinosida dan seterusnya (Gunawan dan Mulyani, 2004).
5
terhidrolisis maka ikatan glikosida akan terputus sehingga molekul akan pecah menjadi dua
bagian yaitu glikon dan aglikon. Sifat-sifat dari glikosida yaitu mudah menguap, mudah larut
dalam pelarut polar seperti air, mudah terurai dalam keadaan lembab dan lingkungan asam
(Gunawan dan Mulyani, 2002).
Banyak sistem penggolongan glikosida telah dilakukan. Sebagian di antara
penggolongan tersebut didasarkan pada gugus gulanya dan sebagian lain didasarkan pada
gugus aglikonnya. Namun ada pula penggolongan glikosida dilakukan berdasarkan pada
aktivitas farmakologinya (Gunawan dan Mulyani, 2004).
1. Glikosida steroid
2. Glikosida antrakuinon
3. Glikosida saponin
4. Glikosida resin
5. Glikosida tanin
6. Glikosida sianopora
7. Glikosida isotiosiana
8. Glikosida flavonol
9. Glikosida sianhidrin
10. Glikosida alkohol, aldehida, lakton, fenol
Saponin merupakan senyawa dalam bentuk glikosida yang tersebar luas pada
tumbuhan tingkat tinggi. Saponin membentuk larutan koloidal dalam air dan membentuk
busa yang mantap jika dikocok dan tidak hilang dengan penambahan asam (Harborne, 1996).
Saponin diberi nama demikian karena sifatnya menyerupai sabun “Sapo” berarti sabun.
Saponin adalah senyawa aktif permukaan yang kuat dan menimbulkan busa bila dikocok
dengan air. Beberapa saponin bekerja sebagai antimikroba. Dikenal juga jenis saponin yaitu
glikosida triterpenoid dan glikosida struktur steroid tertentu yang mempunyai rantai
spirotekal. Kedua saponin ini larut dalam air dan etanol, tetapi tidak larut dalam eter.
Aglikonya disebut sapogenin, diperoleh dengan hidrolisis dalam suasana asam atau hidrolisis
memakai enzim (Robinson,1995).
Saponin mempunyai rasa yang pahit, biasanya menyebabkan bersin atau mengiritasi
selaput lendir, bersifat toksik pada binatang berdarah dingin seperti ikan. Saponin digunakan
juga sebagai deterjen, selain itu meningkatkan absorbs diuretika serta merangsang kerja
ginjal. Dalam pengobatan rakyat digunakan untuk mengobati rematik.
Uji saponin yang sederhana adalah dengan mengkocok ekstrak alkohol air dari
tanaman dalam tabung reaksi dan apakah terbentuk busa yang tahan lama pada permukaan
cairan, paling tidak busa bertahan selama 30 menit. Identifikasi dapat dilakukan berdasarkan
kemampuan saponin menghemolisis sel darah merah. Tetapi biasanya lebih baik bila uji
sederhana itu dipastikan dengan cara kromatografi lapis tipis (Harborne,1996).
Saponin berdasarkan struktur aglikonnya didapat dibedakan menjadi dua macam,
yaitu tipe steroida dan tipe triterpenoida. Kedua senyawa ini memiliki hubungan glikosidik
pada atom C-3 dan memiliki asal usul biogenetika yang sama lewat asam mevalonat dan
satuan-satuan isoprenoid (Gunawan dan Mulyani, 2004).
Saponin steroid tersusun atas inti steroid (C27) dengan molekul karbohidrat. Steroid
saponin dihidrolisis menghasilkan satu aglikon yang dikenal sebagai sapogenin. Tipe saponin
ini memiliki efek antijamur. Pada binatang menunjukan penghambatan aktifitas otot polos.
6
Saponin steroid diekskresikan setelah koagulasi dengan asam glukotonida dan digunakan
sebagai bahan baku pada proses biosintetis obat kortikosteroid. Saponin jenis ini memiliki
aglikon berupa steroid yang di peroleh dari metabolisme sekunder tumbuhan. Jembatan ini
juga sering disebut dengan glikosida jantung, hal ini disebabkan karena memiliki efek kuat
terhadap jantung. Salah satu contoh saponin jenis ini adalah Asparagosida (Asparagus
sarmentosus).
Saponin tritetpenoid tersusun atas inti triterpenoid dengan molekul karbohidrat.
Dihidrolisis menghasilkan suatu aglikon yang disebut sapogenin ini merupakan suatu
senyawa yang mudah dikristalkan lewat asetilasi sehingga dapat dimurnikan. Tipe saponin ini
adalah turunan -amyrine (Amirt Pal,2002). Salah satu jenis contoh saponin ini adalah
asiatosida.
2.4 Flavonoid
Flavonoid merupakan salah satu kelompok senyawa metabolit sekunder yang paling
banyak ditemukan di dalam jaringan tanaman (Rajalakshmi dan S. Narasimhan, 1985). Lebih
dari 2000 flavonoid yang berasal dari tumbuhan telah diidentifikasi, tetapi ada tiga kelompok
yang umum dipelajari, yaitu antosianin, flavonol, dan flavon. Antosianin (dari bahasa
Yunani anthos, bunga dan kyanos, biru-tua) adalah pigmen berwarna yang umumnya terdapat
di bunga berwarna merah, ungu, dan biru. Pigmen ini juga terdapat di berbagai bagian
tumbuhan lain misalnya, buah tertentu, batang, daun dan bahkan akar. Flavonoid sering
terdapat di sel epidermis. Sebagian besar flavonoid terhimpun di vakuola sel tumbuhan
walaupun tempat sintesisnya ada di luar vakuola. Flavonoid termasuk dalam golongan
senyawa phenolik dengan struktur kimia C6-C3-C6 (White dan Y. Xing, 1951; Madhavi et
al., 1985; Maslarova, 2001). Kerangka flavonoid terdiri atas satu cincin aromatik A, satu
cincin aromatik B, dan cincin tengah berupa heterosiklik yang mengandung oksigen dan
bentuk teroksidasi cincin ini dijadikan dasar pembagian flavonoid ke dalam sub-sub
kelompoknya. Berbagai jenis senyawa, kandungan dan aktivitas antioksidatif flavonoid
sebagai salah satu kelompok antioksidan alami yang terdapat pada beberapa tumbuhan.
7
Flavonoid berperan sebagai antioksidan dengan cara mendonasikan atom hidrogennya atau
melalui kemampuannya mengkelat logam, berada dalam bentuk glukosida (mengandung
rantai samping glukosa) atau dalam bentuk bebas yang disebut aglikon (Cuppett et al.,1954).
Berikut struktur dari flavonoid
Polifenol
Polifenol adalah kelompok zat kimia yang ditemukan pada tumbuhan. Zat ini
memiliki tanda khas yaitu memiliki banyak gugus phenol dalam molekulnya. Polifenol sering
terdapat dalam bentuk glikosida polar dan mudah larut dalam pelarut polar. Beberapa
golongan bahan polimer penting dalam tumbuhan seperti lignin, melanin dan tanin adalah
senyawa polifenol dan kadang-kadang satuan fenolitik dijumpai pada protein, alkaloid dan
terpenoid (Harbone, 1987).
Polifenol berperan dalam memberi warna pada suatu tumbuhan seperti warna daun
saat musim gugur. Polifenol banyak ditemukan dalam buah-buahan, sayuran serta biji-bijian
(Hattenschwiler dan Vitousek, 2000). Rata-rata manusia mengkonsumsi polifenol dalam
sehari sampai 23 mg. Khasiat dari polifenol adalah menurunkan kadar gula darah dan efek
melindungi terhadap berbagai penyakit seperti kanker. Polifenol membantu melawan
pembentukan radikal bebas dalam tubuh sehingga dapat memperlambat penuaan dini.
Polifenol memiliki spektrum luas dengan sifat kelarutan pada suatu pelarut yang berbeda-
beda. hal ini disebabkan oleh gugus hidroksil pada senyawa tersebut yang dimiliki berbeda
jumlah dan posisinya. Turunan polifenol sebagai antioksidan dapat menstabilkan radikal
bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yangdimiliki radikal bebas, dan menghambat
terjadinya reaksi berantai dari pembentukan radikal bebas. (Arnelia, 2002).
Tanin
Tanin merupakan senyawa kimia yang terdapat luas dalam tumbuhan berpembuluh,
khusus dalam tumbuhan angiospermae terdapat dalam jaringan kayu. Secara kimia terdapat
dua jenis utama tanin, yaitu tanin terkondensasi dan tanin terhidrolisis. Tanin terkondensasi
atau flavolan secara biosintesis dapat dianggap terbentuk dengan cara kondensasi katekin
tunggal (galokatekin) yang membentuk senyawa dimer dan kemudian oligomer yang lebih
tinggi. Ikatan karbon-karbon menghubungkan satu flavon dengan satuan berikutnya
melalui ikatan 4-6 atau 6-8. Kebanyakan flavolan mempunyai 2-20 satuan flavon. Tanin
8
terhidrolisis terdiri atas dua kelas, yang paling sederhana ialah depsida galoiglukosa. Pada
senyawa ini, inti yang berupa glukosa dikelilingi oleh lima atau lebih gugus ester galoil. Pada
jenis yang kedua, inti molekul berupa senyawa dimer asam galat yaitu asam
heksahidroksidifenat, yang berikatan dengan glukosa. Bila dihidrolisis, elagitanin ini
menghasilkan asam elagat (Harborne, 1987).
2.6 Glikosida antrakuinon
O
Di dalam tumbuhan biasanya terdapat sebagai turunan antrakuinon terhidroksilasi,
termetilasi, atau terkarboksilasi. Pada tanaman enyawa ini dapat ditemukan di akar, daun,
bunga, dan buah. Antrakuinon juga merupakan konstituen pigmen alami terbesar yang hingga
saat ini tercatat sekitar 700 senyawa dan 200 senyawa dihasilkan oleh tanaman berbunga dan
sisnya dihasilkan oleh fungi dan lichen (Duval, 2016). Kebanyakan senyawa antrakuinon
ditemukan pada family Fabaceae, Liliaceae, Polygonaceae, Rhamnaceae, Rubiaceae, dan
Scrophulariaceae (Seigler, 2012).
Banyak literatur menunjukkan bahwa senyawa antrakuinon mempunyai bioaktivitas
yang cukup luas. Singh (2014) merangkum beberapa penelitian tentang bioaktivitas senyawa
antrakuinon diantarannya sebagai laksatif, antikanker, antimikroba, anti malaria, antioksidan,
antiosteoporosis dan diuretic. Aktivitas antidiabetes juga telah dilaporkan oleh Choi et al
(2005). Selain itu antrakuinon juga memilik aktivitas antiinflamasi dan imunosupresif
(Spencer, 1997)
2.7 Tanaman Kemuning
9
tumbuhnya dari dataran rendah hingga dataran tinggi dengan ketinggian 400 meter di atas
permukaan laut .
Sistematika tumbuhan kemuning adalah sebagai berikut:
Kingdom : Plantae ( plants )
Divisi : Spermatophyta
Subdivisi : Angiospermae
Kelas : Dicotyledonae
Ordo : Sapindales
Famili : Rutaceae
Genus : Murraya
Spesies : Murraya paniculata (L.) Jack.
Kemuning termasuk tanaman semak atau pohon kecil. Pohon kemuning bercabang
dan beranting banyak. Tinggi tanaman sekitar 3-8 m. Batang kemuning keras, beralur, dan
tidak berduri. Daunnya majemuk bersirip ganjil dengan jumlah anak daun antara 3-9 helai
dan letaknya berseling. Helaian daun bertangkai berbentuk telur, sungsang, ujung pangkal
runcing, serta tepi rata atau sedikit bergerigi. Panjang daun sekitar 2-7 cm dan lebar antara 1-
3 cm. Permukaan daun licin, mengkilap, dan berwarna hijau. Bunga kemuning majemuk dan
berbentuk tandan yang terdiri dari 1-8 bunga. Warnanya putih dan berbau harum. Bunga –
bunga kemuning keluar dari ketiak daun atau ujung ranting. Buah kemuning berbentuk bulat
telur atau bulat memanjang dengan panjang 8-12 mm. Bila masih muda, buah berwarna hijau
dan setelah tua menjadi merah mengkilap. Di dalam buah terdapat dua buah biji (Iskandar,
2005).
10
BAB III
METODE
a. Alat
Tabung reaksi
Penanggas air
Lempeng KLT
b. Bahan
Ekstrak simplisia “X”
HCl 2N
NaCL
Pereaksi mayer
Peraksi wagner
NH4OH 28%
Kloroform
Pereaksi dragendorf
Etil asetat
Metanol
Air
c. Cara Kerja
Penyiapan sampel
11
0,3 gran ekstrak ditambahkan 5mL HCl 2N
Filtrat yang diperoleh dibagi menjadi 3 bagian yatu larutan IA, IB dan IC
Reaksi Pengendapan
12
3.2 Identifikasi Glikosida Saponin, Triterpenoid dan Steroid
a. Alat
Tabung reaksi
Pipet tetes
Penanggas Air
Corong
Lempeng KLT
Kapas basah
b. Bahan
Ekstrak simplisia “X”
Air suling
Reagen Liebermann – Burchard
Etanol
H2SO4 pekat
HCl 2N
Amonia
N-Heksana
c. Cara Kerja
Uji Buih
Ditambahkan 10mL air suling. Dikocok kuat selama kira - kira 30 detik
Tes buih positif mengandung saponin apabila terjadi buih yang stabil selam 30
menit dengan tinggi 3cm
Reaksi Warna
13
Dilarutkan 0,1g ekstrak dalam 6mL reagen Liebermann - Burchard
Uji Salkowski
Adanya steroid tak jenuh ditandai dengan timbulnya cincin berwarna hitam
Didihkan dan tutup dengan corong berisi kapas basah selama 2 jam untuk
menghidrolisis saponin
14
Terpenoid
a. Alat
Tabung reaksi
Penanggas air
Lempeng KLT
Spektrofotometer
b. Bahan
Ekstrak simplisia “x”
n-Heksana
Etanol
Magnesium
Air suling
Butanol
HCl pekat
Asam asetat glasial
c. Cara Kerja
Reaksi Warna
15
0,3g ekstrak dikocok dengan 3mL n-heksana berkali -kali (5x) sampai ektrak
n-heksana tidak berwarna
Residu dilarutkan dalam etanol dan dibagi menjadi 4 bagian yaitu larutan
IIIA, IIIB,IIIC, dan IIID
Uji Bate-Smith dan Metcalf
Larutan IIIA sebagai blanko, larutan IIIB ditambah 0,5mL HCl pekat dan
diamati perubahan warna yang terjadi
Dipanaskan diatas penanggas air dan diamati perubahan warna yang terjadi
Uji Wilstater
Larutan IIIA sebagai blanko, larutan IIIC ditambah 0,5mL HCl pekat dan 4
potong magnesium diamati perubahan warna yang terjadi
16
Larutan IIID ditotolkan pada fase diam
a. Alat
Tabung reaksi
Penanggas air
Lempeng KLT
b. Bahan
Ektrak simplisia “x”
Aquadest
Nacl 10%
FeCL3 5%
Larutan gelatin 10%
Toluena
Aseton
Asam Frmiat
c. Cara Kerja
Reaksi Warna
0,3g ekstrak ditambah 10mL aquadest panas, diaduk dan dibiarkan sampai
suhu kamar
Filtrat dibagi menjadi 3 masing - masing 4mL yaitu larutan IVA, IVB, dan
IVC
Uji Ferriklorida
17
Larutan IVC ditambahkan 1 tetes laruran FeCl3 5%, diamati terjadinya
perubahan warna
Jika pada penambahan gelatin dan NaCl tidak timbul endapan tetapi setelah
ditambah larutan FeCl3 terjadi perubahan warna menjadi biru hngga hijau
kehitaman menunjukkan adanya senyawa polifenol
18
3.5 Identifikasi Golongan Antrakuinon
a. Alat
Tabung reaksi
Lempeng KLT
b. Bahan
Ekstrak simplisia “X”
Air suling
Toluena
Amonia
Asam asetat glasial
Etil
KOH 10%
Metanol
KOH 5N
H2SO4 10N
c. Cara Kerja
Reaksi Warna
Uji Borntrager
19
Ekstrak sebanyak 0,3g diektraksi dengan 10mL air suling, disaring
Filtrat diekstraksi dengan 3mL toluena dalam tabung reaksi dengan dikocok
pelan
Fase tluena diambil, dan dibagi menjadi 2 yaitu larutan VIA dan VIB
20
Sampel (larutan VA / VIA) ditotolkan pada lempeng KLT
Adanya noda berwarna kuning, kuning coklat, merah ungu atau hijau
menunjukkan adanya senyawa antrakuinon
21
BAB IV
22
Butanol:asam asetat
glasial:air (4:1:5)
PN : sitroborat
4.2 PEMBAHASAN
Pada reaksi pengendapan, ekstrak ditambah dengan HCl 2N. Alasan ditambahkannya
HCl pada reaksi ini adalah karena alkaloid bersifat basa sehingga biasanya diekstrak dengan
pelarut yang mengandung asam. Endapan terbentuk karena alkaloid merupakan komposisi
dari golongan basa nitrogen, dimana jika basa nitrogen direaksikan dengan asam, dalam hal
ini adalah HCl maka akan membentuk garam yang tidak larut, jadi garam inilah yang akan
membentuk endapan. Penambahan pereaksi mayer dan wagner menghasilkan endapan
berwarna kuning pada pereaksi mayer dan endapan berwarna coklat pada pereaksi wagner.
Pereaksi Meyer mengandung merkuri klorida dan kalium iodida yang akan bereaksi dengan
23
alkaloid dan membentuk endapan berwarna kuning. Sehingga pada reaksi pengendapan ini
didapatkan hasil bahwa pada ekstrak positif mengandung alkaloid.
Pada pemeriksaan KLT, digunakan fase diam berupa silica gel F254, fase gerak berupa
etil asetat-metanol-air (9:2:2) dan dengan penampak noda dragendorff memberikan hasil
noda berwarna jingga pada lempeng KLT. Penampak noda dragendorff mengandung
(Nitrooxy) oxobismuthine (BiNO4xH2O) dan kalium iodida, sehingga senyawa alkaloid akan
bereaksi dengan bismuth menghasilkan warna jingga. Sehingga, pada pemeriksaan KLT ini
didapatkan hasil bahwa pada ekstrak positif mengandung alkaloid.
Windono (2002), melaporkan bahwa pada kemuning (Murraya Paniculata (L.) Jack.)
mengandung senyawa alkaloid terutama alkaloid indol. Sehingga, untuk hasil percobaan yang
meliputi reaksi pengendapan dan pengujian KLT untuk mengidentifikasi senyawa golongan
alkaloid telah sesuai dengan literatur yang ada. Sehingga dapat disimpulkan bahwa pada
ekstrak buah kemuning (Murraya Paniculata (L.) Jack.) mengandung senyawa alkaloid.
Pada praktikum kali ini dilakukan pengujian saponin, triterpenoid dan steroid. Metode
pengujian yang dilakukan adalah uji buih, reaksi warna yang terdiri dari uji Liebermann-
Burchard dan uji Salkowski, identifikasi sapogenin steroid atau triterpenoid secara KLT, serta
identifikasi terpenoid atau steroid bebas secara KLT.
Saponin merupakan senyawa glikosida kompleks dengan berat molekul tinggi yang
dihasilkan terutama oleh tanaman, hewan laut tingkat rendah dan beberapa bakteri. Saponin
larut dalam air tetapi tidak larut dalam eter (Aswin, 2008). Pada uji saponin dapat dilakuan
uji buih. Timbulnya busa menunjukkan adanya glikosida yang mempunyai kemampuan
membentuk buih dalam air yang terhidrolisis menjadi glukosa dan senyawa lainnya
(Marliana, 2005). Steroid atau sterol adalah triterpenoid yang mempunyai bentuk dasar
siklopentana perhidrofenantren yang biasanya larut dalam pelarut yang kurang polar
(Febriany, 2004).
Triterpenoid adalah senyawa yang kerangka karbonnya berasal dari enam satuan
isoprena dan secara biosintesis diturunkan dari hidrokarbon C 30 asiklik yaitu skualena.
Senyawa ini berstruktur siklik yang kebanyakan berupa alkohol, aldehid, atau asam
karboksilat (Harborne, 1987). Senyawa triterpenoid/steroid dapat mengalami dehidrasi
dengan penambahan asam kuat dan membentuk garam yang memberikan sejumlah reaksi
warna (Robinson, 1995).
24
Pada uji buih dilakukan dengan ekstrak ditambahkan dengan air suling lalu dikocok
kuat-kuat, apabila timbul busa ketika dikocok dengan air, maka mengandung saponin
(Harborne, 1987). Pada ekstark buah kemuning, uji buih menunjukkan nilai negatif, karena
hanya terbentuk buih setinggi 1 cm. Hal ini menunjukkan ekstrak buah kemuning tidak
mengandung saponin. Selain uji buih dilkukakn uji reaksi warna pada ekstrak buah
kemuning. Uji Liebermann-Burchard merupakan uji reagen yang spesifik pada senyawa
triterpenoid. Pada uji Liebermann-Burchard ditambahkan H2SO4 pekat untuk menarik air
yang ada dalam ekstrak dan asam sulfat untuk menghdrolisis air sehingga terbentuk warna
merah ungu yang berasal dari reaksi antara sterol tidak jenuh/triterpenoid didalam
ekstrak.Pada ekstrak buah kemuning yang dilkukan uji Liebermann-Burchard menunjukkan
adanya perubahan warna yaitu warna kuning yang menunjukkan adanya saponin jenuh.
Uji reaksi warna selanjutnya adalah uji Salkowski. Apabila sterol dengan konfigurasi
tidak jenuh didalam molekulnya direaksikan dengan asam kuat dalam kondisi bebas air maka
akan terjadi perubahan warna. Pada uji ini ekstrak buah kemuning ditambahkan H2SO4 pekat,
hal ini bertujuan untuk memutuskan ikatan gula pada senyawa sehingga terbentuk cincin
merah. Selain itu, gugus sulfat akan menggantikan –OH sehingga terjadi kompleks warna
merah. Pada uji didapatkan hasil positif dan terbentuk cincin merah yang menunjukkan
bahwa ekstrak buah kemuning mengandung steroid tak jenuh.
Uji selanjutnya menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT). Pada identifikasi
terpenoid/steroid ditambahkan HCl 2N yang bertujuan untuk membebaskan aglikon dari
suatu ikatan glikosida. Dilakukan pemanasan yang bertujuan untuk membantu dan
mempercepat putusnya sapogenin dari ikatan glikosidanya. Setelah dingin ekstrak lalu
ditambahkan dengan ammonia yang bertujuan untuk menetralkan larutan awalnya bersifat
asam. Lalu diekstraksi dengan n-heksana dengan tujuan untuk memisahkan sapogeninn
dengan senyawa lain. Dari hasil penotolan ekstrak dan dilkukan eluasi lalu lempeng KLT
disemprot dengan penampak noda anesaldehida asam sulfat memunjukkan perubahan warna
merah ungu. Hal ini menunjukkan ekstrak kemuning mengandung sapogenin.
Identifikasi terpenoid/steroid bebas juga dilkukan dengan KLT. Ekstrak diekstraksi
dengan n-heksan dengan tujuan untuk melaurtkan ekstrak. Setelah itu ekstrak ditambhakan
dengan etanol, hal ini bertujuan untuk melarutkan senyawa golongan glikosida saponin,
triterpenoid dan steroid. Dari hasil penotolan ekstrak dan dilakukan eluasi, ekstrak buah
kemuning menunjukkan adanya perubahan warna merah ungu. Hal ini menunjukkan ekstrak
buah kemuning mengandung terpenoid/steroid.
25
4.2.3 Identifikasi senyawa golongan Flavonoid
Murraya paniculate (Linn.) Jack merupakan tumbuhan khas daerah Asia Tenggara,
diperkenalkan pada negara Brazil dan dikembangkan di daerah Sao Paulo. Di Brazil
diperdayakan sebagai tanaman hias, namun sebenarnya tanaman ini memiliki khasiat
pengobatan di daerah tropical dan sub-tropical asia. (Ferracin, 1998)
Flavonoid terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu, buah,
kulit, nectar, bunga, biji. Penyebaran flavonoid pada golongan tumbuhan yang terbesar yaitu,
pada golongan angiospermae.
Hasil praktikum yang dilakukan pada ekstrak buah kemuning (Murraya paniculate
(Linn.) Jack) menunjukan bahwa pada uji batesmith dan metclaf tidak menimbulkan warna
merah terang/ungu sehingga disimpulkan (-) mengandung leukoantosianin. Penambahan HCl
pekat bertujuan untuk menghidrolisi flavonoid menjadi aglikonnya. Begitu pun pada reaksi
wilstater menunjukan hasil (-) flavon, flavonol, flavonon. Reduksi dengan magnesium dan
HCl pekat akan menghasilkan warna merah, kuning, atau jingga jika mengandung flavonoid.
Namun, pada uji lempeng KLT dimana uji ini memiliki sensitifitas yang tinggi menunjukan
adanya perubahan warna sehingga diduga mengandung flavonoid.
Menurut literatur terdapat 9 senyawa flavonoid yang terkandung pada buah kemuning
antara lain: 5,7,3’,4’,5’-pentamethoxyflavanonol, 5,6,7,3’,4’,5’-hexamethoxyflavone,
3,5,6,7,3’,4’,5’-heptamethoxyflavone, 5,7,8,3’,4’,5’-hexamethoxyflavone, 3,5,7,8,3’,4’,5’-
heptamethoxyflavone, 3,5,7,8,3’,4’-hexamethoxyflavone, 5- hydroxy-3,7,8,3’,4’-
pentamethoxyflavone, 5-hydroxy-3,7,8,3’,4’,5’-hexamethoxyflavone and 8-hydroxy-
3,5,7,3’,4’,5’-hexamethoxyflavone (Ferracin, 1998)
26
4.2.4 Polifenol dan Tanin
27
dioksigenasi, 6,7-dioksigenasi dan 7,s-dioksigenasi); beberapa senyawa alkaloid indol dan
karbazol, senyawa sinamat dan sterol (Tri Windono, 2002). Dalam literatur disebutkan bahwa
pada buah Kemuning terdapat senyawa flavonoid yang termasuk golongan polifenol. Maka,
melihat dari hasil penelitian lain menunjukkan bahwa praktikum ini mendapatkan kandungan
polifenol yang sama dalam ekstrak buah Kemuning.
Antrakuinon adalah senyawa kristal bertitik leleh tinggi, larut dalam pelarut organik
dan basa. Antrakuinon termasuk dalam senyawa turunan kuinon
Pada praktikum kali ini dilakukan uji skrining senyawa antrakuinon pada ekstrak buah
kemunging menggunakan 2 uji tabung yaitu uji bontrager dan modifikassi uji bontrager,
dillanjutkan dengan analisis menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT).
Uji bontrager dapat mendeteksi antrakuinon, namun uji ini akan menunjukkan hasil
yang negatiif untuk glikosida antrakuinon yang sangat stabil, atau turunan yang tereduksi dari
tipe antranol, untuk itu uji bontrager dimodifikasi dengan sebelumnya menghidrolisis dan
mengoksidasi senyawa ini. Antrakuinon akan memberikan karakteristik warna merah, violet,
hijau atau ungu dengan basa (Marliana,2005) namun pada kedua uji tersebut baik bontrager
maupun bontrager termodifikasi, tidak ditemukannya perubahan warna yang sesuai, sehingga
menunjukkan tidak adanya senyawa antrakuinon pada ekstrak buah kemuning.
Pada analisis kromatografi lapis tipis, hasil yang didapatkan berkebalikan dengan uji
tabung yang dilakukan. Hasil KLT menunjukkan bahwa terdapat senyawa antrakuinon pada
ekstrak buah kemuning yang ditandai dengan adanya warna kuning pada lempeng KLT
setelah disemprot oleh reagen KOH 10%
Ketidaksesuaian hasil uji tabung dengan analisis kromatografi lapis tipis
kemungkinan disebabkan oleh kontaminasi pada lempeng KLT dan pereaksi. Dari hasil
praktikum,uji tabung telah sesuai dengan teori bahwa antrakuinon tidak terkandung pada
ekstrak buah kemuning.
28
BAB V
PENUTUP
5.1 Kesimpulan
Pengujian tabung lebih mudah, sederhana, dan cepat dibandingkan dengan uji KLT,
namun hasil uji KLT lebih akurat dibandingkan dengan uji tabung. Berdasarkan hasil
praktikum, ekstrak buah kemuning (Murraya paniculate Linn.) memiliki kandungan alkaloid,
flavonoid, polifenol, terpenoid, dan steroid. Jika ditinjau berdasarkan literatur, buah
kemuning mengandung senyawa alkaloid, flavonoid, polifenol, dan terpenoid. Hal ini
menunjukkan adanya beberapa senyawa yang tidak sesuai antara hasil praktikum dan
literatur.
5.2 Saran
29
Daftar Pustaka
30
Seigler, D.S.2012.Plant Secondary Metabolism.Springer Science & Bussines Media
Singh, A.2014.Herbal Drugs as Therapeutic Agents.CRC Press
Spencer, C.M dan Wilde, M.I.1997.Diacerin.Drugs.53(1):98-106
Sumardjo, Damin. 2006. Pengantar Kimia Buku Panduan Kuliah Mahasiswa Kedokteran.
Jakarta : Penerbit Buku Kedokteran EGC.
White, P.J. and Y. Xing. (1954). Antioxidants from Cereals and Legumes dalam Foreidoon
Shahidi: Natural Antioxidants, Chemistry, Health Effect and Applications. AOCS
Press, Champaign, Illinois: 25-63
Windono, T. 2002. Kajian pustaka kandungan kimia kemuning (murraya paniculata (l.)
jack.). Fakultas Farmasi Universitas Surabaya.
31