LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI TEKNIK

SEMESTER : II (DUA)
TAHUN AJARAN : 2019/2020
HARI/TGL. PERCOBAAN : SABTU/02 MEI 2020
JUDUL PERCOBAAN : PREPARASI MEDIA DAN INOKULUM
KELOMPOK : B-10 (B-SEPULUH)

NAMA NIM
ARI FERNANDO PANJAITAN 190405073
NAVIRI MARIA E. SITORUS 190405089

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI TEKNIK

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2020
 UNIVERSITAS SUMATERA UTARA Kode : F/Dik-3/SPMI-PSTK-
FAKULTAS TEKNIK USU

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA Tanggal : 8 Agustus 2019

Revisi : 01
LEMBAR PENGESAHAN DOSEN Halaman : 1/1

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI TEKNIK

MODUL PRAKTIKUM : PREPARASI MEDIA DAN INOKULUM
KELOMPOK : B-10 (B-SEPULUH)
NAMA/NIM : 1. ARI FERNANDO PANJAITAN/190405073
2.NAVIRI MARIA E. SITORUS/190405089
HARI/TGL. PRAKTIKUM : SABTU/ 02 MEI 2020

Medan, 2020
Dosen Pembimbing

(Nisaul Fadilah Dalimunthe, ST., M.Eng.)

Dokumen ini milik Departemen Teknik Kimia Universitas Sumatera Utara
Dilarang memperbanyak atau menggunakan informasi di dalamnya untuk keperluan komersial atau yang lainnya tanpa persetujuan
pemilik dokumen ini.
 UNIVERSITAS SUMATERA UTARA Kode : F/Dik-3/SPMI-PSTK-
FAKULTAS TEKNIK USU

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA Tanggal : 8 Agustus 2019

Revisi : 01
LEMBAR PENGESAHAN ASISTEN Halaman : 1/1

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI TEKNIK

MODUL PRAKTIKUM : PREPARASI MEDIA DAN INOKULUM
KELOMPOK : B-10 (B-SEPULUH)
NAMA/NIM : 1. ARI FERNANDO PANJAITAN/190405073
2. NAVIRI MARIA E. SITORUS/190405089
HARI/TGL. PRAKTIKUM : SABTU/02 MEI 2020

Medan, 2020
Asisten

(Alri Julfifty Tamba)

Dokumen ini milik Departemen Teknik Kimia Universitas Sumatera Utara
Dilarang memperbanyak atau menggunakan informasi di dalamnya untuk keperluan komersial atau yang lainnya tanpa persetujuan
pemilik dokumen ini.
 UNIVERSITAS SUMATERA UTARA Kode : F/Dik-3/SPMI-PSTK-
FAKULTAS TEKNIK USU

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA Tanggal : 8 Agustus 2019

Revisi : 01
LEMBAR PENUGASAN Halaman : 1/1

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI TEKNIK

MODUL PRAKTIKUM : PREPARASI MEDIA DAN INOKULUM
KELOMPOK : B-10 (B-SEPULUH)
NAMA/NIM : 1. ARI FERNANDO PANJAITAN/190405073
2. NAVIRI MARIA E. SITORUS/190405089
HARI/TGL. PRAKTIKUM : SABTU/2 MEI 2020

Sampel : Serbuk kacang kedelai , Sukrosa

Media : MSA , Air kolam udang uji
Metode : Pour Plate , Pour Plate
Variabel : Lama inkubasi 24 jam dengan Suhu 37oC , Lama inkubasi 24 jam dengan suhu 25OC

Medan, 2020
Asisten

(Alri Julfifty Tamba)

Dokumen ini milik Departemen Teknik Kimia Universitas Sumatera Utara
Dilarang memperbanyak atau menggunakan informasi di dalamnya untuk keperluan komersial atau yang lainnya tanpa persetujuan
pemilik dokumen ini.
 UNIVERSITAS SUMATERA UTARA Kode : F/Dik-3/SPMI-PSTK-
FAKULTAS TEKNIK USU

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA Tanggal : 8 Agustus 2019

Revisi : 01
LEMBAR DATA Halaman : 1/3

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI TEKNIK

MODUL PRAKTIKUM : PREPARASI MEDIA DAN INOKULUM
KELOMPOK : B-10 (B-SEPULUH)
NAMA/NIM : 1. ARI FERNANDO PANJAITAN/190405073
2. NAVIRI MARIA E. SITORUS/190405089
HARI/TGL. PRAKTIKUM : SABTU/2 MEI 2020

Jurnal Pemanfaatan Serbuk Kacang Kedelai untuk Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus Aureus
dan Staphylococcus Epidermidis
Hasil pertumbuhan bakteri Staphylococcus Aureus pada media MSA serbuk kacang kedelai

Sampel Metode/Media Gambar Keterangan

Kurang subur
Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 1-2 mm
Pour Plate / Bersifat manitol fermenter
Manitol Salt lemah
Agar (MSA)
Warna koloni kuning

Serbuk Kurang subur

Kacang bersifat manitol fermenter
lemah
Kedelai Pour Plate / Warna koloni kuning
Manitol Salt Morfologi koloni : Bulat,
Agar (MSA) smooth, diameter 1-2 mm

Subur
Pour Plate / Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 2-4 mm
Warna koloni kuning

Bersifat manitol fermenter

Dokumen ini milik Departemen Teknik Kimia Universitas Sumatera Utara

Dilarang memperbanyak atau menggunakan informasi di dalamnya untuk keperluan komersial atau yang lainnya tanpa persetujuan
pemilik dokumen ini.
 UNIVERSITAS SUMATERA UTARA Kode : F/Dik-3/SPMI-PSTK-
FAKULTAS TEKNIK USU

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA Tanggal : 8 Agustus 2019

Revisi : 01
LEMBAR DATA Halaman : 2/3

Pour Plate / Subur

Manitol Salt Agar Morfologi koloni : Bulat,
(MSA) smooth, diameter 2-4 mm
Warna koloni kuning
Bersifat manitol fermenter
Pour Plate / Subur
Manitol Salt Agar Morfologi koloni : Bulat,
(MSA) smooth, diameter 2-4 mm,
Warna koloni kuning
Bersifat manitol fermenter

Hasil pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis pada media MSA serbuk kacang kedelai

Sampel Metode/Media Gambar Keterangan

Pour Plate / Manitol Kurang subur
Salt Agar (MSA) Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 1-2 mm,
Warna koloni putih
Warna media merah
Serbuk Bersifat non manitol fermenter
Kacang
Kedelai Pour Plate / Manitol Subur
Salt Agar (MSA) Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 2-4 mm,
Warna koloni putih
Warna media merah,
Bersifat non manitol fermenter
Pour Plate / Manitol Subur
Salt Agar (MSA) Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 2-4 mm,
Warna koloni putih
Warna media merah
Bersifat non manitol fermenter
 UNIVERSITAS SUMATERA UTARA Kode : F/Dik-3/SPMI-PSTK-
FAKULTAS TEKNIK USU

DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA Tanggal : 8 Agustus 2019

Revisi : 01
LEMBAR DATA Halaman : 3/3

Pour Plate / Subur

Manitol Salt Agar Morfologi koloni : Bulat, smooth,
(MSA) diameter 2-4 mm, Warna koloni
putih
Warna media merah,
Bersifat non manitol fermenter
Pour Plate / Subur
Manitol Salt Agar Morfologi koloni : Bulat, smooth,
(MSA) diameter 2-4 mm, Warna koloni
putih
Warna media merah
Bersifat non manitol fermenter
Jurnal pengaruh pemberian sukrosa sebagai sumber karbon dan probiotik terhadap dinamika populasi
bakteri
Sampel Metode/Media Gambar Keterangan
Pour Plate/ Air kolam
Udang Uji

Pour Plate/ Air Kolam

Sukrosa Udang Uji

Medan, 2020
Asisten

(Alri Julfifty Tamba)

Dokumen ini milik Departemen Teknik Kimia Universitas Sumatera Utara
Dilarang memperbanyak atau menggunakan informasi di dalamnya untuk keperluan komersial atau yang lainnya tanpa persetujuan
pemilik dokumen ini.
 Laporan Keterampilan
DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

LAPORAN PRAKTIKUM

LABORATORIUM : MIKROBIOLOGI TEKNIK

PRAKTIKUM MATA KULIAH : PENGANTAR BIOPROSES

MODUL : PREPARASI MEDIA DAN INOKULUM

1. ARI FERNANDO PANJAITAN / 190405073
NAMA PRAKTIKAN / NIM :
2. NAVIRI MARIA E. SITORUS / 190405089
KELOMPOK : B-10 (B-SEPULUH)

TANGGAL / SESI PRAKTIKUM : 02 MEI 2020 / SETELAH UTS

ASISTEN : ALRI JULFIFTY TAMBA

DOSEN PEMBIMBING MODUL : NISAUL FADILAH DALIMUNTHE, ST., M.Eng.

1. Metodologi Percobaan :
1.1 Alat dan Bahan Percobaan
Berikut alat dan bahan percobaan yang digunakan pada kedua jurnal tersebut.
Alat :
- Autoclave - Kertas Payung
- Batang Pengaduk - Magnetic Stirer
- Beaker Glass - Mikroskop
- Cawan Petri - Objek Glass
- Erlenmeyer - Ose
- Hot Plate - Oven
- Inkubator Goyang - Spiritus
- Kain Kasa Steril - Timbangan digital
- Kapas
Bahan :
- Aquades
- Bacto agar
- Bacto phenol red
- Bakteri Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, dan Vibrio
- Gula Tebu (sukrosa)
- Kacang kedelai
- Manitol
- Media MSA, Media SWC cair, dan Media Air
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

- NaCl
- Probiotik
- Sampel I : Serbuk kacang kedelai
- Sampel II : Gula tebu (sukrosa)
- Sumber Nutrisi bagi mikroba

1.2 Prosedur Percobaan

Berikut prosedur percobaan berdasarkan kedua jurnal yang kami peroleh.
Pada kedua Jurnal adapun Proses Sterilisasi terjadi sama, sebagai berikut.

Mulai
A

Hidupkan Autoclave
dan isi dengan air Biarkan selama 2 jam

Matikan oven
Cuci, keringkan dan
bungkus alat alat dengan tisu

Apakah
Cawan petri Tidak perlatan
dimasukkan ke sudah
dalam oven bersih ?

Ya
Operasikan oven
hingga suhu 180oC
Selesai

A
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

1.2.1 PEMANFAATAN SERBUK KACANG KEDELAI (Glycine max)

SEBAGAI BAHAN PEMBUATAN MEDIA MANITOL SALT AGAR
(MSA) UNTUK PERTUMBUHAN BAKTERI STAPHYLOCOCCUS

Mulai
B

Preparasi pembuatan Timbang serbuk kacang

serbuk kacang kedelai kedelai dan masukkan 2 gram, 3 gram,
ke dalam masing 4 gram, 5 gram,
6 gram
masing erlenmeyer

Pilih kedelai yang baik

Keringkan menggunakan oven
pada suhu 25 oC selama 24 jam
Tambahkan 7,5 gram
NaCl, 1 gram manitol,
0,0025 gram bacto phenol
red, 1,5 gram bacto agar
dan 100 mL aquades

Panaskan di atas hot plate pH netral adalah

sambil diaduk sampai larut ± 7,4
Giling dan blender halus
sehingga diperoleh tepung
kedelai, kemudian disaring

Ukur pH media

Pembuatan media
MSA berbahan baku
serbuk kacang kedelai
Apakah pH Tidak
Tambahkan HCl
media sudah
atau NaOH
netral ?

Ya

A
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

A C D

Tutup erlenmeyer dengan Tutup erlenmeyer dengan Ambil 1-2 ose biakkan
kertas, dibungkus dengan kertas, dibungkus dengan strain murni lalu tanam ke
kertas payung, disterilkan kertas payung, disterilkan media MSA degan digores
dengan autoclave pada suhu dengan autoclave pada suhu di permukaan media
121 oC selama 15 menit 121 oC selama 15 menit

Inkubasi pada suhu

Masukkan ke Masukkan ke 37 oC selama 24 jam
dalam cawan dalam cawan
petri ± 15 mL petri ± 15 mL

Amati morfologi koloni yang

tumbuh pada media MSA
Pembuatan Media Persiapan Strain
Rehidrat MSA (Oxoid) Staphylococcus

Lakukan pewarnaan gram dari

Siapkan alat dan bahan koloni tersangka dari media MSA
Timbang Media MSA
sebanyak 5,55 gram yang digunakan

Ambil biakan ± 1-2 Inokulas Staphylococcus

Masukkan ke dalam pada Media MSA
gelas kimia 100 mL, ose, ratakan pada
objek glass dan fiksasi Serbuk Kacang Kedelai
tambahkan 50 mL
aquades

Lakukan pewarnaan gram Siapkan alat dan

Panaskan di atas bahan yang digunakan
hot plate sambil
diaduk sampai larut

D B

C
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

B D

Ambil biakan strain

Ambil biakan strain murni
S. aureus ± 1-2 ose,
tanamkan pada media MSA
serbuk kacang kedelai pada
cawan yang diberi label
murni E. coli ± 1-2 ose, 2 gram, 3 gram, 4
2 gram, 3 gram, 4 tanamkan pada media gram, 5 gram, 6 gram
gram, 5 gram, 6 gram MSA serbuk kacang
kedelai pada cawan
yang diberi label

Inkubasi pada suhu Inkubasi pada suhu

37 oC selama 24 jam 37 oC selama 24 jam

Amati morfologi koloni Amati perumbuhan

yang tumbuh pada media bakteri pada media MSA
MSA serbuk kacang serbuk kacang kedelai
kedelai pada variasi tertentu pada variasi tertentu

Penanaman bakteri
kontrol gram negatif
pada media MSA
Tidak Apakah hasil
serbuk kacang kedelai
pengamatan
sudah sesuai ?

Siapkan alat dan

bahan yang digunakan Ya

Selesai

Lakukan praktikum kembali

 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

1.2.2 PENGARUH PEMBERIAN SUKROSA SEBAGAI SUMBER KARBON

DAN PROBIOTIK TERHADAP DINAMIKA POPULASI BAKTERI
DAN KUALITAS AIR MEDIA BUDIDAYA UDANG VANAME,
Litopenaeus vannamei Culture

Mulai E

Sebanyak 5 ppm probiotik

diencerkan menggunakan Lakukan pengenceran berseri
air media pemeliharaan

10-1, 10-2, 10-3, 10-4.

Inokulasikan bakteri
Tambahkan Sukrosa ke Untuk Inokulas Vibrio
secara duplo
: 10-1 & 10-2
dalam media pemeliharaan

Sebanyak 2 ose bakteri
probiotik dibiakkan ke
dalam media SWC cair
Hasil inokulasi
digunakan sebagai
acuan pengenceran
pada pengambilan
sampel selanjutnya

Lakukan Praktikum kembali

Inkubasi pada suhu 25 oC selama
24 jam pada inkubator goyang
Apakah hasil Tidak
inokulas
sudah sesuai ?
Inokulasi dan
perhitungan bakteri

Ya

Ambil sampel air dengan sedikit Selesai

pengadukan secara perlahan
menggunakan botol film

E
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

2. Hasil dan Pembahasan

2.1 Hasil
Berdasarakan dua jurnal penelitian yang kami ambil, adapun perbandingan hasil
percobaan jurnal tersebut sebagai berikut :
2.1.1 PEMANFAATAN SERBUK KACANG KEDELAI (Glycine max)
SEBAGAI BAHAN PEMBUATAN MEDIA MANITOL SALT AGAR
(MSA) UNTUK PERTUMBUHAN BAKTERI STAPHYLOCOCCUS
Dari jurnal tersebut, didapat hasil penelitian. Berikut kami sajikan tabel
sebagai berikut.
Tabel 1. Hasil Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus pada media MSA serbuk
kacang kedelai
No Variasi Pertumbuhan S. aureus Pertumbuhan S. epidermidis
Kurang subur, Morfologi koloni :
Kurang subur, Morfologi koloni :
Bulat, smooth, diameter 1-2 mm,
Bulat, smooth, diameter 1-2 mm,
1. 2 gram Warna koloni putih, warna media
Warna koloni kuning, bersifat
merah, bersifat non manitol
manitol fermenter lemah
fermenter
Kurang subur, Morfologi koloni : Subur, Morfologi koloni : Bulat,
Bulat, smooth, diameter 1-2 mm, smooth, diameter 2-4 mm, Warna
2. 3 gram
Warna koloni kuning, bersifat koloni putih, warna media merah,
manitol fermenter lemah bersifat non manitol fermenter
Subur, Morfologi koloni : Bulat, Subur, Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 2-4 mm, Warna smooth, diameter 2-4 mm, Warna
3. 4 gram
koloni kuning, bersifat manitol koloni putih, warna media merah,
fermenter bersifat non manitol fermenter
Subur, Morfologi koloni : Bulat, Subur, Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 2-4 mm, Warna smooth, diameter 2-4 mm, Warna
4. 5 gram
koloni kuning, bersifat manitol koloni putih, warna media merah,
fermenter bersifat non manitol fermenter
Subur, Morfologi koloni : Bulat, Subur, Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 2-4 mm, Warna smooth, diameter 2-4 mm, Warna
5. 6 gram
koloni kuning, bersifat manitol koloni putih, warna media merah,
fermenter bersifat non manitol fermenter

2.1.2 PENGARUH PEMBERIAN SUKROSA SEBAGAI SUMBER KARBON

DAN PROBIOTIK TERHADAP DINAMIKA POPULASI BAKTERI
DAN KUALITAS AIR MEDIA BUDIDAYA UDANG VANAME,
Litopenaeus vannamei Culture
Dari jurnal tersebut, didapat hasil penelitian. Berikut kami sajikan
gambar sebagai berikut.
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

Gambar 1. Dinamika populasi bakteri total pada beberapa perlakuan selama penelitian

Gambar 2. Persentase rata-rata kemunculan bakteri golongan Vibrio selama penelitian

2.2 Pembahasan
Berdasarakan dua jurnal penelitian yang kami ambil, adapun perbandingan hasil
percobaan jurnal tersebut sebagai berikut.
2.2.1 PEMANFAATAN SERBUK KACANG KEDELAI (Glycine max)
SEBAGAI BAHAN PEMBUATAN MEDIA MANITOL SALT AGAR
(MSA) UNTUK PERTUMBUHAN BAKTERI STAPHYLOCOCCUS
Berdasarkan jurnal tersebut, hasil pertumbuhan bakteri S.aureus mulai
tumbuh membentuk koloni pertumbuhan bakteri S.aureus kurang subur pada
variasi 2 gram dan 3 gram, dan kurang memfermentasikan manitol sehingga
media MSA serbuk kacang kedelai tetap berwarna merah agak kekuningan,
perbedaan pertumbuhan bakteri ini dikarnakan sumber nutrisi atau protein
serbuk kacang kedelai tidak mencukupi nutrisi protein yang dibuhuhkan,
sehingga pertumbuhan bakteri S.aureus kurang baik atau proses metabolisme
bakteri berlangsung kurang optimal dan pertumbuhannya tidak seoptimal
media MSA standar.
Sedangkan pertumbuhan bakteri S.epidermidis yang subur mulai dari
variasi 3 gram sampai 6 gram dengan tidak memfermentasikan manitol maka
koloni yang tumbuh dan pada media MSA terjadi perubahan warna merah
setelah ditanami bakteri S.epidermidis. disebabkan karena S.epidermidis tidak
memfermentasikan manitol menjadi asam dan gas, menyebabkan pH media
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

menjadi basa, indikoator phenol red yang terdapat dalam media berubah
menjadi merah.
Pada media MSA serbuk kacang kedelai ini, menunjukkan hasil
optimal dan sebanding dengan media MSA standar (Oxoid) dapat dilihat
dalam hal ukuran, bentuk koloni, warna, elevasi, permukaan, pinggiran dan
sifat manitol fermenter. Koloni yang terbentuk terlihat besar dan nyata serta
mudah diamati. Hal tersebut dikarenakan nutrisi atau sumber protein yang
terkandung dalam serbuk kacang kedelai yang tinggi, dan kandungan nutrisi
yang lain yang melimpah seperti karbohidrat, vitamin dan mineral (Andrianto,
2004). Dan variasi serbuk kacang kedelai yang digunakan semakin banyak,
sehingga proses metabolisme bakteri akan berlangsung cepat dan optimal,
sehingga proses pembelahan sel berjalan baik yang dapat menyebabkan
ukuran koloni semakin besar dan cepat dalam proses memfermentasikan
manitol.
Dalam kondisi nutrisi yang baik waktu yang dibutuhkan untuk
pertumbuhan bakteri relatif cepat, sebaliknya jika nutrisi yang dibutuhkan
tidak melimpah, sel-sel harus menyesuaikan dengan lingkungan dan
pembentukan enzim - enzim untuk mengurai substrat membutuhkan waktu
yang lebih lama.

2.2.2 PENGARUH PEMBERIAN SUKROSA SEBAGAI SUMBER KARBON

DAN PROBIOTIK TERHADAP DINAMIKA POPULASI BAKTERI
DAN KUALITAS AIR MEDIA BUDIDAYA UDANG VANAME,
Litopenaeus vannamei Culture
Berdasarkan jurnal tersebut, proses pengambilan sampel dilakukan
dengan mengaduk media terlebih dahulu untuk mensuspensikan endapan yang
terdapat di dasar akuarium. Hal ini perlu diperhatikan karena jumlah bakteri
pada sedimen biasanya lebih tinggi daripada badan air. Hal ini diakibatkan
oleh kandungan nutrien yang lebih tinggi di dasar wadah budidaya akibat
akumulasi bahan organik sisa pakan dan metabolisme ikan. Kandungan
bakteri heterotropik pada badan air tambak sistem intensif dengan produksi
4,9 – 5,8 ton/hektar berkisar antara 1,8×104 cfu/ml sampai 6,3×104 cfu/ml.
Sedangkan kandungan bakteri heterotrofik pada sedimen mencapai 1,2×10 6
cfu/ml.
Secara umum, peningkatan jumlah biomassa bakteri dalam sistem
budidaya dapat dilakukan dengan pemberian bahan berkarbon. Walapun
begitu, pemberian probiotik saja dalam sistem budidaya juga berpotensi
meningkatkan biomassa bakteri di perairan (P>0.05). Peningkatan tersebut
diperoleh selain dari penambahan massa bakteri probion juga diduga akibat
reaksi yang timbul antara bakteri probion dengan bakteri asli perairan di
media budidaya. Interaksi yang muncul memungkinkan timbulnya proliferasi
bakteri asli tertentu sebagai akibat respon dari interaksi tersebut.
Tanpa pemberian probion, peningkatan jumlah bakteri juga dapat
diperoleh dengan penambahan sumber karbon tertentu saja, dalam hal ini
sukrosa. Laju penambahan biomassa secara signifikan lebih besar daripada
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

hanya menambahkan bakteri probiotik saja (P>0.05). Hal tersebut terjadi

diduga akibat adanya pengkayaan nutrien (karbon) yang mampu mendukung
pertumbuhan bakteri heterotrof secara umun untuk berproliferasi. Organisme
akuatik biasanya mengeluarkan limbah metabolitnya dalam bentuk amonia.
Penambahan bahan berkarbon pada badan perairan dapat mendukung
biosintesis protein mikroba. Proses tersebut biasanya terjadi setelah
terkonversinya amonia menjadi amonium sebelum akhirnya diasimilasi
bersama dengan karbon oleh bakteri dalam proses pembentukan sel barunya.
Secara umum, penambahan karbon dan probiotik ataupun kombinasi
keduanya dapat memicu tumbuhnya bakteri golongan Vibrio. Hal yang perlu
diperhatikan adalah bahwa penambahan karbon dapat meningkatkan
pertumbuhan bakteri golongan Vibrio, meskipun dikombinasikan dengan
bakteri probiotik Bacillus sp. Namun dengan penambahan probiotik dihasilkan
peng-hambatan spesifik terhadap bakteri jenis Vibrio hijau. Pada penelitian ini
hanya ditemukan bakteri Vibrio kuning dan hijau yang tidak berpendar,
namun tidak ditemukan bakteri golongan Vibrio yang berpendar. Bakteri
Vibrio hijau hanya ditemukan pada pengambilan sampel ke-4 dan 5 pada
semua perlakuan termasuk kontrol.
Pertumbuhan suatu jenis bakteri dalam lingkungan budidaya
dipengaruhi oleh komposisi nutrien dan bakteri yang terdapat dalam perairan.
Beberapa jenis bakteri ada yang memerlukan kondisi lingkungan tertentu
untuk tumbuh dan berkembang. Beberapa jenis bakteri lain bahkan berperan
sebagai kompetitor bagi jenis bakteri yang lain. Rendahnya persentase
kemunculan bakteri golongan Vibrio pada perlakuan penambahan probiotik
sangat mungkin dipengaruhi oleh kinerja bakteri probiotik. Keberadaan
bakteri Vibrio dalam media budidaya dapat tereduksi oleh enzim atau senyawa
kimia yang dikeluarkan oleh bakteri probiotik atau kalah dalam kompetisi
pemanfaatan nutrien.
Secara umum, penambahan nutrien seperti sukrosa dapat mendukung
pertumbuhan semua jenis bakteri termasuk Vibrio. Namun karena kemampuan
asimilasi dan proliferasi yang berbeda antar bakteri, maka akan terbentuk
kompetisi dan stratifikasi populasi bakteri. Hal tersebut dapat dilihat pada
perlakuan penambahan sukrosa yang mampu meningkatkan persentase
kemunculan bakteri Vibrio. Akan tetapi persentase tersebut cenderung
menurun setelah penambahan probiotik (perlakuan penambahan probiotik).
Pada kontrol, persentase bakteri Vibrio ditemukan paling tinggi karena
terbatasnya nutrien (terutama karbon) sehingga menyebabkan ter-hambatnya
pertumbuhan beberapa jenis bakteri heterotrof. Kondisi ini mengakibatkan
tingginya persentase bakteri Vibrio dalam komposisi bakteri total.

2.2.3 Faktor yang mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan bakteri

Adapun kami mendapatkan pembanding faktor yang mempengaruhi
pertumbuhan dan perkembangan bakteri berdasarkan kedua jurnal penelitaian
yang kami ambil sebagai berikut.

Faktor yang mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan bakteri pada

 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

media MSA kacang kedelai :

- Kandungan nutrisi protein dari kacang kedelai.
- Kandungan nutrisi lain seperti karbohidrat, vitamin, dan mineral.
- pH.
- Lingkungan.
- Suhu.

Faktor yang mempengaruhi pertumbuhan dan perkembangan bakteri pada

media SWC cair :
- Kandungan nutrisi.
- Penambahan probiotik.
- Penambahan sukrosa.
- Kompetitor.
- Kondisi lingkungan.
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

Lampiran

Bakteri
Staphylococcus aureus Staphylococcus epidermidis
Media

MSA Serbuk
Kacang
Kedelai (2
gram)

MSA Serbuk
Kacang
Kedelai (3
gram)

MSA Serbuk
Kacang
Kedelai (4
gram)

MSA Serbuk
Kacang
Kedelai (5
gram)

MSA Serbuk Kacang

Kedelai (6 gram)
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

3. Kesimpulan dan Saran

3.1 Kesimpulan
Berikut Kesimpulan yang kami peroleh berdasarkan kedua jurnal tersebut.
1. Penambahan nutrisi seperti protein pada kacang kedelai dan sukrosa ke
dalam media pertumbuhan dapat mempercepat laju pertumbuhan bakteri,
sehingga bakteri tersebut dapat tumbuh dan berkembang dengan baik.
2. Agar bakteri dapat tumbuh dan berkembang dengan baik, pH juga harus
dijaga dengan suasan netral. Jika pHnya belum netral, dapat ditambahkan
HCl atau NaOH ke dalam media pertumbuhannya.
3. Di dalam suatu media pertumbuhan, hanya ada satu jenis bakteri yang
ditambahkan ke dalam media. Seperti penambahan probiotik ke dalam
media yang sudah ada golongan Vibrio, akan terjadinya penghambatan
pertumbuhan golongan Vibrio, sehingga bakteri yang dihasilkan sedikit.
4. Kacang kedelai dapat digunakan sebagai bahan alternatif sumber protein
pengganti bacto beef ekstrak daging sapi dan bacto pepton untuk
menumbuhkan bakteri Staphylococcus.
5. Pemberian karbon dan probiotik maupun kombinasinya dapat
meningkatkan jumlah populasi bakteri total yang mencapai 10 7 cfu/ml.
Sedangkan bakteri golongan Vibrio hanya mencapai 103 – 104 cfu/ml.

3.2 Saran
Berikut berbagai saran yang kami peroleh berdasarkan kedua jurnal tersebut.
1. Sebaiknya diperiksa apakah alat alat laboratorium yang akan digunakan
pada percobaan ini sudah steril atau belum.
2. Sebaiknya kedua penelitian ini dapat diterapkan dan diaplikasikan dalam
kehidupan sehari hari seperti menghasilkan suatu produk untuk
kepentingan bersama.
3. Sebaiknya dilihat kadar nutrisi protein serbuk kacang kedelai apakah
sudah mencukupi atau belum, sehingga hasil yang diperoleh dapat
maksimal.
4. Sebaiknya digunakan media pembanding yang lainnya agar bisa
mendapatkan pembanding yang lebih bervariasi lagi.
5. Sebaiknya dilakukan penelitian lebih lanjut lagi mengenai media
pertumbuhan dari MSA serbuk kacang kedelai dan SWC cair serta
penambahan sukrosa serta probiotik yang memiliki jenis serta kandungan
yang bervariasi dari bakteri uji yang berbeda sehingga hasil yang akan
diperoleh lebih banyak variasinya.
 DEPARTEMEN TEKNIK KIMIA
FAKULTAS TEKNIK
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

Daftar Pustaka
Sukenda, dkk. 2006. Pengaruh Pembarian Sukrosa sebagai Sumber Karbon & Probiotik
terhadap Dinamika Populasi Bakteri dan Kualitas Air Media Udang Vaname,
Litopenaeus vannamei. Bogor : Institut Pertanian Bogor

Surhatati, R, dkk. 2018. Pemanfaatan Serbuk Kacang Kedelai (Glycine max) sebagai
Bahan Pembuatan Media Manitol Salt Agar (MSA) untuk Pertumbuhan Bakteri
Staphylococcus. Tasikmalaya : STIKes BTH Tasikmalaya
LITERATUR
Pengaruh
Jurnal pemberian
Akuakultur sukrosa 5(2):
Indonesia, sebagai sumber(2006)
179-190 karbon Available : http://journal.ipb.ac.id/index.php/jai 179
http://jurnalakuakulturindonesia.ipb.ac.id

PENGARUH PEMBERIAN SUKROSA SEBAGAI SUMBER KARBON DAN

PROBIOTIK TERHADAP DINAMIKA POPULASI BAKTERI DAN KUALITAS AIR
MEDIA BUDIDAYA UDANG VANAME, Litopenaeus vannamei

Effect of Sucrose as Carbon Source and Probiotic Administrations on Bacterial Population

Dinamic and Water Quality in White Shrimp, Litopenaeus vannamei Culture

Sukenda, P. Hadi dan E. Harris

Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan,
Institut Pertanian Bogor, Kampus Darmaga, Bogor 16680

ABSTRACT

Disinfection and nutrient enrichment prior stocking of post larvae in the pond will be affected on the
growth and composition of microbe. Attention should be taken to some factors related to deterministic and
stochastic factors of aquaculture environment in order to develop microbe community. This study was
performed to determine effect of sucrose and probiotic supplementation to shrimp culture pond on water
quality profile and population dynamic on shrimp culture media. The treatments were supplementation of
sucrose as carbon source, probiotic, and sucrose + probiotic into 25 L culture medium containing white
shrimp, Litopenaeus vannamei. Shrimp were fed commercial diet containing 30% protein by 5% body weight
every day. The result of study showed that bacterial population was increased by increasing time of shrimp
rearing. Increased of bacterial population was contrary to DO value. Bacteria grew was heterotrop and vibrio
that its intensity varied during experiment. Supplementation of sucrose supported proliferation of bacteria
including heterotrop, probiotik and vibrio groups. Specifically, interaction between probiotic bacteria and
vibrio was also found. The presence of probiotic bacteria showed a negative impact on vibrio population.
Further, development of bacteria in general was also implicated to fluctuation of ammonia concentration in
pond.

Keywords: carbon, sucrose, probiotic, white shrimp, Litopenaeus vannamei

ABSTRAK

Kegiatan disinfeksi dan pengkayaan nutrien sebelum penebaran PL akan mempengaruhi pola
pertumbuhan dan komposisi mikroba di tambak. Hal-hal yang perlu diperhatikan dalam pengembangan
komunitas mikroba adalah faktor-faktor deterministic dan sthocastic masing-masing lingkungan budidaya.
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian bahan berkarbon (sukrosa) dan probiotik di
tambak terhadap profil kualitas air serta dinamika populasi pada perairan budidaya. Pada penelitian ini
dilakukan penambahan sumber karbon (sukrosa), penambahan probiotik dan penambahan sukrosa + probiotik
pada masing-masing wadah yang berisi 25 liter air dan udang Vanamei, Litopenaeus vannamei. Pakan yang
diberikan berupa pellet komersial dengan kadar protein 30% setiap hari sebanyak 5% dari biomassa awal. Dari
hasil penelitian ini diketahui bahwa populasi bakteri pada media budidaya meningkat seiring dengan
bertambahnya waktu pemeliharaan. Peningkatan jumlah populasi bakteri ini diikuti oleh semakin menurunnya
nilai DO secara umum. Selain bakteri heterohof, tumbuh juga bakteri golongan Vibrio dengan persentase
kemunculan yang berbeda pada setiap perlakuan. Penambahan sukrosa dalam media budidaya mendukung
proliferasi bakteri secara umum, heterotrof, probiotik dan golongan Vibrio. Secara spesifik, timbul juga
interaksi antara bakteri probiotik dengan bakteri Vibrio. Tumbuhnya bakteri probiotik berimplikasi negatif
terhadap populasi Vibrio. Selain itu pertumbuhan bakteri secara umum juga berimplikasi terhadap fluktuasi
kadar amonia perairan.

Kata kunci : karbon, sukrosa, probiotik, udang vaname, Litopenaeus vannamei

180
PENDAHULUAN
Dalam budidaya ikan, kegiatan dis-
infeksi sebelum penebaran serta pengkayan
nutrien perairan budidaya dan pemberian
pakan akan mempengaruhi pola pertumbuhan
dan komposisi mikroba didalamnya. Hal ini
mengakibatkan pengendalian kondisi
optimum komunitas mikroba pada sistem
budidaya intensif menjadi sulit. Hal-hal yang
perlu diperhatikan dalam pengembangan
komunitas mikroba adalah faktor-faktor
deterministic dan sthocastic masing-masing
lingkungan budidaya yang berbeda
(Verschuere et al., 2000).
Faktor-faktor deterministic akan
mempengaruhi perkembangan mikroba
dalam sistem akuakultur seperti salinitas,
suhu, oksigen dan jumlah serta kualitas
pakan yang diberikan. Kombinasi dari faktor-
faktor lingkungan tersebut akan membentuk
suatu habitat terbatas yang akan menyeleksi
relung mikroba yang mampu untuk hidup
dan berproliferasi. Perkembangan komunitas
mikroba dalam sistem akuakultur juga
terpengaruh oleh faktor-faktor sthocastic,
yaitu kesempatan yang dimiliki oleh suatu
organisme untuk berada dalam waktu dan
saat yang tepat untuk masuk dan
berproliferasi pada lingkungan yang
mendukung (Moriarty, 1999).
Sudah banyak pihak yang mulai merasa
perlu mengembangkan kontrol biologis
berkaitan dengan munculnya degradasi
kualitas perairan dan penyakit yang menjadi
hambatan utama dalam produksi akuakultur.
Munculnya strain-strain bakteri resisten
antibiotik dan peraturan yang membatasi
penggunaan antibiotik serta beberapa bahan
kimia. Oleh karena itu diperlukan alternatif
untuk mengatasi masalah tersebut.
Penambahan karbon untuk mendukung
pertumbuhan bakteri indigenous perairan
telah banyak dilakukan untuk mengurangi
jumlah amonia dalam perairan dan berpotensi
sebagai sumber protein alternatif. Namun
masalah akan timbul saat konsumsi oksigen
perairan akan meningkat dan bakteri patogen
tumbuh sehingga dapat rnenginfeksi
organisme budidaya. Untuk mengatasi
masalah patogen tersebut telah
dikembangkan beberapa bakteri probion
Sukenda, P. Hadi dan E. Harris
yang diintroduksikan dalam perairan.
Umuurnya bakteri probion ini dimanfaatkan
untuk mereduksi atau menghambat
pertumbuhan beberapa bakteri patogen
tertentu setelah sebelumnya diuji secara in
vitro terlebih dahulu. Probion juga
bermanfaat dalam bioremediasi lingkungan
perairan budidaya.
Efektivitas dari penggunaan probiotik
akan meningkat seiring dengan kemampuan
hidup dan proliferasi probion tersebut pada
lingkungan. Hal tersebut memungkinkan
adanya ketidaksesuaian kondisi lingkungan
yang cocok untuk bakteri hidup dengan
lingkungan barunya. Munculnya beragam
produk probiotik yang diproduksi secara
massal memerlukan studi mengenai
efektivitasnya berkaitan dengan faktor-faktor
deterministic dan sthocastic. Tujuan
penelitian ini adalah untuk mengetahui
pengaruh pemberian bahan berkarbon
(sukrosa) dan probiotik dalam suatu
lingkungan budidaya terhadap profil kualitas
air serta dinamika populasi bakteri total dan
Vibrio yang terdapat dalam perairan
budidaya.
BAHAN DAN METODE
Pemeliharaan udang uji
Pemeliharaan udang uji dilakukan pada
akuarium berukuran 50×35×40 cm3 yang
diisi air laut sebanyak 25 liter dengan
kepadatan 9 ekor/akuarium. Pakan sebanyak
1,25 gram diberikan setiap hari yang dibagi
dalam 5 kali pemberian (pukul 07.00, 11.00,
15.00, 19.00, dan 22.00). Pakan yang
diberikan berupa pelet komersil yang
mengandung protein 30%. Pakan diberikan
dalam jumlah yang sama selama 25 hari
masa pemeliharaan.
Perlakuan yang digunakan pada
penelitian ini adalah:
1. Kontrol, tanpa pemberian sukrosa maupun
probiotik
2. Penambahan karbon, penambahan sukrosa
sebanyak 0,45 gram setiap hari pada
media pemeliharaan.
3. Penambahan probiotik, penambahan
probiotik sebanyak 5 ppm dilakukan
setiap 4 hari kedalam media pemeliharaan.
Pengaruh pemberian sukrosa sebagai sumber karbon
Probiotik yang diberikan adalah Bacillus
sp. yang telah dikultur dalam media SWC
cair sehari sebelumnya.
4. Penambahan probiotik dan karbon,
penambahan sukrosa sebesar 0,'45 grarn
dilakukan setiap hari, sedangkan
penambahan probiotik Bacillus sp.
dilakukan setiap 4 hari dengan dosis 5
ppm
Penambahan karbon
Proses intesifikasi mikroba dilakukan
dengan penambahan sukrosa (gula tebu) pada
media pemeliharaan udang sesuai
perhitungan yang dilakukan oleh Avnimelech
(1999). Kontrol akumulasi nitrogen inorganik
pada tambak didasarkan pada proses
immobilisasi nitrogen oleg mikroba. Bakteri
dan mikroorganisme lain menggunakan
karbohidrat (gula, pati dan selulosa) s ebagai
makanan untuk menghasilkan energy dan
tumbuh melalui pembentukan protein dan
sel-sel baru (Avnimelech, 1999).
C organik → CO2 + energi + C yang
terasimilasi dalam sel mikroba
Persentase karbon yang terasimilasi
berkaitan dengan metabolisme karbon pakan
sering diidefinisikan sebagai Efisiensi
konversi mikroba (E) yang berkisar antara 40
– 60% (Paul dan van Veen, 1978; Gaudy dan
Gaudy, 1980 dalam Avnimelech et al., l994).
Selain karbon, bakteri juga memerlukan
nitrogen sebagai penyusun utama protein.
Bersama karbon, nitrogen inorganik akan
diimobilisasi menjadi sel-sel mikroba. Proses
ini merupakan peristiwa mendasar yang
terjadi hampir pada semua jenis bakteri.
Dari persamaan di atas, penambahan
karbon yang diperlukan untuk menggeser
nitrogen inorganik sehingga menjadi mikroba
dapat dihitung dengan rumus berikut :
ΔCmik = ΔCH × %C × E
Keterangan ;
ΔCmik : jumlah karbon yang terasimilasi
oleh mikroba
%C : kandungan karbon dari bahan
sumber karbon yang ditambahkan
(biasanya 50%)
E : efisiensi konversi mikroba.
181
Jumlah nitrogen yang diperlukan untuk
pembentukan sel baru tergantung pada C/N
rasio bakteri (bakteri heterotrof 4 .3).
ΔN = ΔCmik / [C/N]mik
= (ΔCH × %C × E) / [C/N]mik
ΔCH = ΔN / %C × (E / [C/N]mik
= ΔN / 0,5 × (0,5 / 4,3)
= ΔN / 0,05814
Keterangan:
ΔN : jumlah nitrogen yang diperlukan untuk
pembentukan sel baru
ΔCH : jumlah sumber karbon yang harus
ditambahkan
Secara umum, N yang masuk ke
perairan dari sisa pakan, degradasi bakteri
maupun ekskresi ikan adalah 50% dari
nitrogen pakan.
ΔCH = pakan × %N pakan × %N ekskresi
= pakan × 0,0465 × 0,5/0,05814
= pakan × 0,3999
Asumsi:
1. Kadar protein Pakan 30%
2. Efisiensi konversi mikroba 50%
3. jumlah karbon dalam sumber karbon
50%
4. C/N rasio bakteri heterotrof (target)
4,3
Dengan demikian sukrosa yang
diberikan adalah 0,399 kali jumlah pakan.
Sebelum diberikan, sukrosa dilarutkan dalam
air laut terlebih dahulu untuk rneratakan
distribusinya.
Pembuatan dan pemberian probiotik
Bakteri probiotik diperoleh dari isolat
murni bakteri Bacillus sp. yang biasa
digunakan pada tambak udang vannamei
intensif. Sebanyak 2 ose bakteri probiotik
dibiakkan dalam 25 ml SWC cair dan
diinkubasi selama 24 jam pada inkubator
goyang (25 °C). Sebelurn dimasukkan ke
media pemeliharaan, probiotik sebanyak 5
ppm diencerkan terlebih dahulu
menggunakan air media pemeliharaan agar
distribusinya lebih merata. Dosis yang
diberikan dari awal sampai akhir penelitian
adalah sama.
182
Inokulasi dan penghitungan bakteri
Pengambilan sampel air untuk inokulasi
bakteri total dan golongan Vibrio dilakukan
setiap 4 hari sesaat sebelum pemberian
probiotik. Air sampel diambil dari badan air
dengan sedikit pengadukan secara perlahan
menggunakan botol film. Setelah itu
dilakukan pengenceran berseri dan bakteri
diinokulasi secara duplo pada pengenceran
l0-1, 10-2, 10-3 dan 10-4. Sedangkan inokulasi
bakteri golongan Vibrio dilakukan pada
pengenccran 10-l dan 10-2. Hasil inokulasi
dari pengenceran sampel pertama digunakan
sebagai acuan pengenceran pada
pengambilan sampel selanjutnya.
Pengamatan udang uji dan kualitas air
Selama masa pemeliharaan dilakukan
pengumpulan data berkaitan dengan profil
bakteri (bakteri total dan golongan Vibrio),
kualitas air (TAN dan amonia nitrogen (NH3-
N), DO, pH, suhu dan salinitas) serta
beberapa parameter penunjang lain seperti
tingkat kelangsungan hidup dan Food
Conversion Ratio (FCR). Pengambilan
sampel air dilakukan bersamaan dengan
pengambilan sampel air untuk pemeriksaan
bakteri yaitu setiap 4 hari.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Dinamika populasi bakteri total
Jumlah total bakteri heterotropik yang
hidup pada kolom air cenderung meningkat
dengan semakin bertambahnya waktu
pemeliharaan. Berdasarkan analisa ragam
Gambar 1. Dinamika populasi bakteri total pada beberapa perlakuan selama penelitian
Sukenda, P. Hadi dan E. Harris
pada selang kepercayaan 95%, laju
pertumbuhan semua perlakuan berbeda nyata
dengan kontrol. Populasi bakteri masing-
masing perlakuan pada awal pemeliharaan
hampir sama yaitu berkisar pada level 2 ×104
cfu/ml dan terus mengalami pertumbuhan
hingga mencapai kisaran 4 × 107 cfu/ml.
Dari uji BNJ diketahui bahwa
pertumbuhan bakteri pada kontrol dan
perlakuan penarnbahan probiotik tidak
berbeda secara nyata (P>0.05). Pertumbuhan
bakteri pada perlakuan penambahan karbon
dan kombinasi penambahan karbon dan
probiotik relative lebih cepat yang ditandai
dengan kelimpahannya yangg lebih besar
daripada kontrol dan perlakuan penambahan
probiotik (P>0.05). Tidak dijumpai
perbedaan yang signifikan antara perlakuan
penambahan karbon dan kombinasi
penambahan karbon dan probiotik.
Proses pengambilan sampel dilakukan
dengan mengaduk media terlebih dahulu
untuk mensuspensikan endapan yang
terdapat di dasar akuarium. Hal ini perlu
diperhatikan karena jumlah bakteri pada
sedimen biasanya lebih tinggi daripada badan
air (Widiyanto, 2005). Hal ini diakibatkan
oleh kandungan nutrien yang lebih tinggi di
dasar wadah budidaya akibat akumulasi
bahan organik sisa pakan dan metabolisme
ikan. Kandungan bakteri heterotropik pada
badan air tambak sistem intensif dengan
produksi 4,9 – 5,8 ton/hektar berkisar antara
1,8×104 cfu/ml sampai 6,3×104 cfu/ml.
Sedangkan kandungan bakteri heterotrofik
pada sedimen mencapai 1,2×106 cfu/ml
(Devaraja dalam Widiyanto, 2005).
Pengaruh pemberian sukrosa sebagai sumber karbon
Secara umum, peningkatan jumlah
biomassa bakteri dalam sistem budidaya
dapat dilakukan dengan pemberian bahan
berkarbon. Walapun begitu, pemberian
probiotik saja dalam sistem budidaya juga
berpotensi meningkatkan biomassa bakteri di
perairan (P>0.05). Peningkatan tersebut
diperoleh selain dari penambahan massa
bakteri probion juga diduga akibat reaksi
yang timbul antara bakteri probion dengan
bakteri asli perairan di media budidaya.
Interaksi yang muncul memungkinkan
timbulnya proliferasi bakteri asli tertentu
sebagai akibat respon dari interaksi tersebut.
Tanpa pemberian probion, peningkatan
jumlah bakteri juga dapat diperoleh dengan
penambahan sumber karbon tertentu saja,
dalam hal ini sukrosa. Laju penambahan
biomassa secara signifikan lebih besar
daripada hanya menambahkan bakteri
probiotik saja (P>0.05). Hal tersebut terjadi
diduga akibat adanya pengkayaan nutrien
(karbon) yang mampu mendukung
pertumbuhan bakteri heterotrof secara umun
untuk berproliferasi. Organisme akuatik
biasanya mengeluarkan limbah metabolitnya
dalam bentuk amonia. Penambahan bahan
berkarbon pada badan perairan dapat
mendukung biosintesis protein mikroba.
Proses tersebut biasanya terjadi setelah
terkonversinya amonia menjadi amonium
sebelum akhirnya diasimilasi bersama
NH3 + H2O ↔ NH4+ + OH- → ionisasi ammonia
Bakteri heterotrof (1)
BOD5 + NH4+ → C5H7NO2
Bakteri autotrof (2)
22 NH4+ + 37 O2 + 4 CO2 + HCO3-
↓ Proses-proses mikroba yang
C5H7NO2 + 21 NO2- + 2 H2O + 42 H+
Bakteri nitrifikasi (3)
106 CO2 + 16 NH4+ + 52 H2O + PO-3
↓
C106H152O53N16P + 106 O2 + 16 H+
183
dengan karbon oleh bakteri dalam proses
pembentukan sel barunya.
Dengan penambahan probiotik dan
karbon, kedua keuntungan di atas secara
bersama-sama dapat didapatkan dalam suatu
pemeliharaan organisme akuatik.
Penambahan karbon tidak mengganggu
pertumbuhan dari bakteri probiotik, bahkan
cenderung mendukung terbukti dengan
peningkatan biomassa bakteri yang
signifikan. Dengan demikian dapat diketahui
bahwa penambahan probiotik dan karbon
pada suatu media budidaya dapat
mempercepat tumbuhnya bakteri total secara
umum. Jika tidak dimanfaatkan oleh udang,
biomassa mikroba ini dapat rneningkatkan
kandungan bahan organik dan mempercepat
proses sedimentasi pada dasar kolam.
Nilai TAN (NH3 + NH4+) cenderung
stabil dengan fluktuasi kecil terbentuk karena
adanya asimilasi nitrogen anorganik tersebut
oleh bakteri. Amonia merupakan limbah
nitrogenik utama yang diekskresikan oleh
udang dan kebanyakan organisme akuatik
lainnya. Sebagian besar nitrogen dari protein
pakan akan diubah menjadi amonia.
Di dalam perairan, karena pengaruh
suhu dan pH, amonia akan terionisasi
menjadi NH4+, salah satu bentuk nitrogen
anorganik yang paling banyak dimanfaatkan
oleh bakteri heterotrof dan nitrifikasi.
umum berlangsung dalam
media budidaya
184
Proses-proses mikrobial yang ber-
langsung akan menggeser persamaan
kesetimbangan NH3 dan NH4+ ke kanan yang
berdampak pada pengurangan jumlah
amonia. Terjadinya proses pengurangan ini
akan mengimbangi proses penambahan
amonia setiap harinya akibat pemberian
pakan dan metabolisme udang. Proses ini
akan menjaga amonia sehingga stabil pada
level rendah dan akan mendorong terjadinya
pengkayaan mikroba dalam lingkungan
budidaya.
Dinamika populasi bakteri Vibrio
Populasi bakteri golongan Vibrio
mengalami pertumbuhan yang signifikan
pada semua perlakuan. Bakteri tersebut ikut
berkembang seiring dengan bertambahnya
waktu. Pada selang kepercayaan 95%, bakteri
golongan Vibrio pada perlakuan karbon
Gambar 2. Dinamika populasi bakteri golongan Vibrio dalam beberapa perlakuan selama
Penelitian
Gambar 3. Profil penghambatan spesifik bakteri golongan Vibrio hijau pada perlakuan selama
Penelitian
Sukenda, P. Hadi dan E. Harris
mengalami laju pertumbuhan yang paling
besar.
Secara umum, penambahan karbon dan
probiotik ataupun kombinasi keduanya dapat
memicu tumbuhnya bakteri golongan Vibrio.
Hal yang perlu diperhatikan adalah bahwa
penambahan karbon dapat meningkatkan
pertumbuhan bakteri golongan Vibrio,
meskipun dikombinasikan dengan bakteri
probiotik Bacillus sp. Namun dengan
penambahan probiotik dihasilkan peng-
hambatan spesifik terhadap bakteri jenis
Vibrio hijau. Pada penelitian ini hanya
ditemukan bakteri Vibrio kuning dan hijau
yang tidak berpendar, namun tidak
ditemukan bakteri golongan Vibrio yang
berpendar. Bakteri Vibrio hijau hanya
ditemukan pada pengambilan sampel ke-4
dan 5 pada semua perlakuan termasuk
kontrol.
Pengaruh pemberian sukrosa sebagai sumber karbon
Penghambatan secara spesifik ini
rnerupakan hasil kompetisi mikroba dalam
proses-proses ekologi yang umum dijumpai.
Sifat ini seringkali digunakan sebagai dasar
pengembangan bakteri probiotik. Bakteri
tersebut berkompetisi dengan bakteri lain
dengan berbagai cara seperti produksi
senyawa inhibitor, pengelnbangan
kemamprum mengikat Fe atau senyawa
kimia tertentu untuk memperoleh energi
(Veschuere et a1., 2000). Beberapa strain
Bacillus mampu menghasilkan senyawa
antibiotik yang menghambat pertumbuhan
bakteri Vibrio. Dengan meningkatnya laju
mortalitas Vibrio, populasi bakteri lain dapat
meningkat sehingga mampu menggeser
dominasi Vibrio (Moriarty, 1999).
Tumbuhnya Vibrio pada kegiatan
intensifikasi mikroba seperti ini harus tetap
diperhatikan walaupun yang bukan termasuk
golongan Vibrio berpendar. Hal tersebut
berkaitan dengan dekatnya hubungan antara
probiotik yang digunakan dengan bakteri
patogen yang pada lingkungan budidaya.
Pada lingkungan budidaya yang kompleks,
memungkinkan terjadinya transfer gen bukan
hanya gen resistensi tapi juga kemampuan
patogenitas lewat R plasmid dan transposons.
Karena memungkinkannya R plasmid ini
dalam metransfer gen antar bakteri yang
berbeda dalam grup Gram negatif, akan
berbahaya bagi para pelaku budidaya untuk
menggunakan bakteri seperti Vibrio atau
Pseudomonas sebagai Probiotik.
Hal yang perlu diperhatikan dalam
teknik intensifikasi mikroba adalah dominasi
Gambar 4. Bakteri golongan Vibrio kuning (A) dan hijau (B) yang tumbuh pada saat penelitian
185
jenis bakteri awal perairan dan jenis bakteri
probion yang digunakan. Pengkayaan bahan
organik sumber karbon dalam perairan juga
dapat meningkatkan potensi tumbuhnya
bakteri-bakteri patogen. Bahkan pemberian
probion juga dapat memicu tumbuhnya
bakteri patogen jika terdapat kedekatan
hubungan taksonomi antara bakteri probion
dengan bakteri patogen yang terdapat pada
lingkungan budidaya. Dalam prakteknya,
sterilisasi awal akan sangat membantu
menekan peluang munculnya bakteri patogen
dalam lingkungan budidaya. Setelah itu
pengkayaan bakteri probion yang bermanfaat
dapat dilakukan untuk menciptakan dominasi
populasi bakteri yang diinginkan. Hal
tersebut dapat meminimalkan tumbuhnya
bakteri patogen saat dilakukan pengkayaan
bahan sumber karbon (sukrosa molase)
dalam praktek selanjutnya. Metode ini
diduga efektif pada sistem budidaya tanpa
pergantian air (zero water exchange).
Persentase kemuncnlan bakteri golongan
Vibrio selama penelitian
Persentase kemunculan Vibrio memiliki
selama penelitian cenderung menurun seiring
dengan pertambahan waktu. Dengan
demikian, laju perumbuhan populasi bakteri
lainnya memiliki kecepatan yang lebih tinggi
dibandingkan dengan laju pertumbuhan
bakteri Vibrio. Rata-rata kemunculan paling
paling tinggi ditemukan pada kontrol yang
mencapai l,82% (Gambar 5).
186
Gambar 5. Persentase rata-rata kemunculan bakteri golongan Vibrio selama penelitian
Pertumbuhan suatu jenis bakteri dalam
lingkungan budidaya dipengaruhi oleh
komposisi nutrien dan bakteri yang terdapat
dalam perairan. Beberapa jenis bakteri ada
yang memerlukan kondisi lingkungan
tertentu untuk tumbuh dan berkembang.
Beberapa jenis bakteri lain bahkan berperan
sebagai kompetitor bagi jenis bakteri yang
lain. Rendahnya persentase kemunculan
bakteri golongan Vibrio pada perlakuan
penambahan probiotik sangat mungkin
dipengaruhi oleh kinerja bakteri probiotik.
Keberadaan bakteri Vibrio dalam media
budidaya dapat tereduksi oleh enzim atau
senyawa kimia yang dikeluarkan oleh bakteri
probiotik atau kalah dalam kompetisi
pemanfaatan nutrien.
Secara umum, penambahan nutrien
seperti sukrosa dapat mendukung
pertumbuhan semua jenis bakteri termasuk
Vibrio. Namun karena kemampuan asimilasi
dan proliferasi yang berbeda antar bakteri,
maka akan terbentuk kompetisi dan
stratifikasi populasi bakteri. Hal tersebut
dapat dilihat pada perlakuan penambahan
sukrosa yang mampu meningkatkan
persentase kemunculan bakteri Vibrio. Akan
tetapi persentase tersebut cenderung menurun
setelah penambahan probiotik (perlakuan
penambahan probiotik). Pada kontrol,
persentase bakteri Vibrio ditemukan paling
tinggi karena terbatasnya nutrien (terutama
karbon) sehingga menyebabkan ter-
hambatnya pertumbuhan beberapa jenis
bakteri heterotrof. Kondisi ini mengakibatkan
tingginya persentase bakteri Vibrio dalam
komposisi bakteri total.
Sukenda, P. Hadi dan E. Harris
Kualitas air pemeliharaan
Dari data pengambilan sampel TAN
terbentuk profil yang tidak berbeda nyata
antar perlakuan pada selang kepercayaan
95%. Perlakuan kontrol dan penambahan
karbon cenderung lebih tinggi dari pada
perlakuan penambahan karbon atau karbon
probiotik. Kisaran TAN pada perlakuan
karbon adalah 0,5 – 1,5 ppm, sedangkan pada
perlakuan karbon + probiotik mencapai 0,8 –
1,55 ppm dan perlakuan penambahan
probiotik berkisar antara 0,98 – 2,32 ppm
serta kontrol antara 1,38 – 2,7 ppm (Gambar
6).
Perlakuan penambahan karbon dan
perlakuan penambahan karbon + probiotik
cenderung menghasilkan konsentrasi TAN
yang lebih kecil jika dibandingkan dengan
perlakuan lain. Hal tersebut sejalan dengan
lebih besarnya populasi bakteri yang tumbuh
pada perlakuan tersebut. Dari grafik 6 terlihat
bahwa pengendalian nitrogen inorganik dapat
dilakukan dengan memanipulasi C/N rasio
perairan melalui penambahan bahan organik
sumber karbon. Perhitungan yang lebih
cermat perlu dilakukan untuk penentuan
banyaknya bahan organik yang harus
ditambahkan. T'idak signifikannya laju
penurunan amonia antar perlakuan
mengindikasikan bahwa dosis bahan organik
yang ditambahkan (0,399 kali jumlah pakan
yang diberikan) masih kurang. Kurangnya
sumber karbon dalam perairan dapat
menghambat laju pertumbuhan bakteri secara
umum.
Pengaruh pemberian sukrosa sebagai sumber karbon
Sedangkan dari data pemeriksaan NH3
diketahui bahwa kisaran NH3 pada perlakuan
penambahan karbon dan perlakuan
penambahan karbon + probiotik relatif lebih
rendah dibandingkan dengan perlakuan lain.
Pada perlakuan penambahan karbon, NH3
dicapai pada kisaran 0,0096 – 0.029 ppm,
sedangkan pada perlakuan penambahan
karbon + probiotik sebesar 0,00922 – 0.02
ppm. Pada perlakuan penambahan probiotik,
NH3 berada pada kisaran 0,0068 – 0,04,
sedangkan kontrol pada kisaran 0,018 – 0,03
ppm (Gambar 7).
Nitrogen merupakan bahan yang
dibutuhkan oleh bakteri terutama untuk
proses sintesis asam amino dan nukleotida.
Sumber nitrogen dapat berasal dari sumber
Gambar 6. Profil TAN pada beberapa perlakuan selama penelitian
Gambar 7. Profil amonia pada beberapa perlakuan selama penelitian
187
organik dan anorganik. Sumber bahan
organik yang biasanya diperoleh oleh bakteri
dalam sistem budidaya adalah sisa pakan dan
hasil metabolit udang. Protein yang terdapat
dalam sisa pakan akan didekomposisi oleh
bakteri menggunakan enzim protease
menjadi asam amino-asam amino yang
akhirnya diasimilasi ke dalam sel balkteri.
Penambahan karbon ternyata dapat
meningkatkan asimilasi N oleh bakteri yang
berimplikasi pada pengurangan jumlah TAN.
Nilai total amonia nitrogen (TAN)
menggambarkan jumlah total nitrogen yang
berada dalam bentuk NH3 (tidak terionisasi)
dan NH4+ (terionisasi). Secara umum, nilai
TAN ini akan berkurang jika terdapat
asimilasi NH3 atau NH4+ oleh bakteri.
188
Kebanyakan bakteri cenderung memanfaakan
ammonia dalam bentuk NH4+ daripada NH3.
Hal tersebut berkaitan dengan fisiologis
metabolik bakteri. Sukrosa yang dilarutkan
dalam perairan akan meningkatkan C/N rasio
perairan dan mendorong terjadinya
+
immobilisasi NH4 menjadi biomassa bakteri.
Terjadinya asimilasi NH4+ perairan ini
akan mendorong kesetimbangan reaksi
amonia-amonium ke arah kanan sehingga
mendukung proses detoksifikasi amonia dan
percepatan mineralisasi bahan organik pada
media pemeliharaan.
Bahan organik → NH3 ↔ NH4+
Kecenderungan terjadinya pengurangan
TAN yang berimplikasi juga pada
pengurangan amonia disertai dengan
peningkatan jumlah biomass bakteri
memberikan peluang terjadinya bioremediasi
lingkungan dan penyediaan sumber nutrien
alternatif untuk udang.
Gambar 8. Immobilisasi N menjadi sel
bakteri dan potensinya sebagai
sumber nutrien alternatif untuk
udang
Gambar 9. Profil DO pada beberapa perlakuan selama penelitian
Sukenda, P. Hadi dan E. Harris
Secara statistik, tidak ada perbedaan
yang signifikan antara perlakuan dan kontrol
berkaitan dengan profil rataan penurunan DO
yang terjadi secara linier ini. Namun DO
pada perlakuan penambahan probiotik +
karbon dan penambahan probiotik cenderung
lebih rendah perlakuan penambahan karbon
dan kontrol. Kisaran DO pada kontrol adalah
2,59 – 5,06 ppm, sedangkan pada perlakuan
penambahan probiotik berkisar antara 2,9 –
6,10 ppm dan antara 3,14 – 4,87 ppm pada
perlakuan penambahan karbon. Kandungan
DO pada perlakuan penambahan karbon +
probiotik berkisar antara 2,17 – 4,9 ppm.
Profil Do yang terbentuk selama penelitian
ini tersaji pada gambar 9.
Kandungan DO pada semua perlakuan
cenderung menurun dari kisaran 4 – 6 ppm
pada awal pemeliharaan menjadi 2 – 3 ppm
pada akhir penelitian. Turunnya nilai DO ini
diduga berkaitan dengan semakin
meningkatnya proses-proses mikroba yang
terjadi pada akhir pemeliharaan. Populasi
bakteri yang semakin melimpah
menyebabkan terjadinya ekstensifikasi
pemanfaatan oksigen terlarut dalam perairan.
Nilai pH perairan pada semua
perlakuan mengalami penurunan seiring
dengan bertambahnya waktu pemeliharaan.
Secara statistik, rataan pH pada semua
perlakuan tidak menunjukkan perbedaan
yang nyata pada selang kepercayaan 95 %.
Penurunan ini diduga akibat kerja bakteri.
Proses respirasi dan dekomposisi bahan
organik oleh mikroba menghasilkan banyak
CO2 yang akan mengkibatkan perairan
menjadi lebih asam.
Pengaruh pemberian sukrosa sebagai sumber karbon 189

Pertumbuhan mutlak, FCR dan SR tersebut terjadi diduga akibat pengkayaan

nutrien terlarut dalam bentuk single cell
Tingkat pertumbuhan mutlak terbaik
protein (bakteri) dan perbaikan kualitas air
pada penelitian ini diperoleh pada perlakuan
akibat adanya immobilisasi nitrogen
penambahan karbon + probiotik yang
inorganik oleh komunitas mikroba.
mencapai 0,97 gram./hari (Tabel 1).
Nilai FCR udang biasanya dipengaruhi
Keragaman tingkat pertumbuhan antar
oleh kualitas air dan makanannya. Perbedaan
perlakuan mengindikasikan adanya variasi
nilai FCR yang tercatat selama penelitian
asupan nutrien yang diterima oleh udang.
kemungkinan juga disebabkan oleh kedua
Tingginya tingkat pertumbuhan pada
faktor tersebut. Penambahan karbon dan
perlakuan karbon + probiotik diduga akibat
probiotik secara umum telah berdampak
pemanfaatan populasi bakteri yang melimpah
positif terhadap kualitas air dan tersedianya
sebagai sumber nutrien alternatif oleh udang.
sumber nutrien alternatif. Sedangkan
Perlakuan penambahan karon dan probiotik
Survival rate (SR) udang selama penelitian
atau kombinasi keduanya dapat
pada semua perlakuan masih tinggi dengan
meningkatkan tingkat pertumbuhan lebih
kisaran rata-tata 96,30 – 100%.
tinggi dibandingkan dengan kontrol. Hal

Gambar 10. Nilai pH pada beberapa perlakuan selama penelitian

Tabel 1. Pertumbuhan mutlak rata-rata udang vaname, Litopenaeus vannamei selama penelitian

Perlakuan Pertumbuhan mutlak rata-rata (g/hari)

Kontrol 0,75 ± 0,12
Penambahan karbon 0,87 ± 0,16
Penambahan probiotik 0,86 ± 0,06
Penambahan karbon + probiotik 0,97 ± 0,06

Tabel 2. Nilai rata-rata FCR udang vaname, Litopenaeus vannamei selama penelitian

Perlakuan FCR
Kontrol 1,70 ± 0,26
Penambahan karbon 1,46 ± 0,27
Penambahan probiotik 1,45 ± 0,10
Penambahan karbon+ probiotik 1,30 ± 0,08
190
KESIMPULAN
Pemberian karbon dan probiotik
maupun kombinasinya dapat meningkatkan
jumlah populasi bakteri total yang mencapai
107 cfu/ml. Sedangkan bakteri golongan
Vibrio hanya mencapai 103 – 104 cfu/ml.
Peningkatan jumlah populasi bakteri total ini
juga diikuti oleh semakin rendahnya nilai
Food Conversion Ratio (FCR) dan semakin
tinginya tingkat pertumbuhan mutlak udang
vannamei, Vannamei litopenaeus. Hal ini
mengindikasikan adanya pemanfaatan
populasi bakteri yang tumbuh sebagai
sumber nutrien tambahan. Total amonia
nitrogen (TAN), NH3, DO dan pH juga
semakin rendah seiring dengan penambahan
jumlah bakteri.
DAFTAR PUSTAKA
Avnimelech, Y., Kochva. M., M., Mokady,
S., 1994. Development of controlled
intensive aquaculture systems with a
limited water exchange and adjusted
Sukenda, P. Hadi dan E. Harris
carbon to nitrogen ratio. Bamidgeh,
46: 119 – 131.
Avnimelech, Y. 1999. Carbon / Nitrogen
ratio as a control element in
aquaculture systems. Aquaculture,
176: 227 – 235
Moriarty D. J. W. 1999. Microbial
biosystem; New Frontiers' in: Bell C.
R. Rrylinsky M., Johnson GP
(Editor). Proceeding of the 8th
International Symposium on
Microbial Ecology. Canada.
Verschuere L., Rombaut G., Sorgeloos P.,
Verstraete W. 2000. Probiotic
bacteria as biological control agents
in aquaculture. Microbiology and
Molecular Biology Reviews, 655 –
67l.
Widiyanto, T. 2005. Seleksi bakteri
nitrifikasi dan denitrifikasi untuk
bioremediasi di tambak udang.
Disertasi Sekolah Pascasarjana.
Institut Pertanian Bogor.
 Prosiding Seminar Nasional dan Diseminasi Penelitian Kesehatan
STIKes Bakti Tunas Husada Tasikmalaya, 21 April 2018
ISBN:978-602-72636-3-5

PEMANFAATAN SERBUK KACANG KEDELAI (Glycine max)

SEBAGAI BAHAN PEMBUATAN MEDIA MANITOL SALT AGAR
(MSA) UNTUK PERTUMBUHAN BAKTERI STAPHYLOCOCCUS
R. SUHARTATI 1*, SULISTIANI2, AI NURAINI3
Program Studi DIII Teknologi Laboratorium Medis STIKes BTH Tasikmalaya
Email 1: rsuhartati @stikes-bth.ac.id

Abstrak : Kacang kedelai memiliki kandungan protein sekitar 40% mengandung asam amino esensial dan non esensial, karbohidrat,
lemak, vitamin dan mineral. Kacang kedelai banyak digunakan sebagai bahan baku dalam membuat makanan. Tujuan penelitian ini
untuk mengetahui apakah serbuk kacang kedelai dapat dimanfaatkan sebagai alternatif sumber protein dalam media MSA (Manitol Salt
Agar) untuk pertumbuhan bakteri patogen yaitu Staphylococcus. Penelitian bersifat eksperimen, menggunakan serbuk kacang kedelai
dengan variasi berat yang digunakan mulai dari 2 gram sampai 6 gram sebagai sumber protein dalam pembuatan media MSA. Dari hasil
penelitian diperoleh bahwa serbuk kacang kedelai dapat menumbuhkan bakteri Staphylococcus mulai dari 3 gram/ 100 mL sampai 6
gram/ 100 mL, hasil penelitian menunjukan bahwa serbuk kacang kedelai dapat dimanfaatkan sebagai salah satu sumber protein untuk
pertumbuhan bakteri Staphylococcus.

Kata kunci : Manitol Salt Agar, Kacang Kedelai, Bakteri Staphylococcus.

1. LATAR BELAKANG

Mikroorganisme membutuhkan suatu media sebagai tempat pertumbuhannya, media tersebut harus
mengandung nutrisi yang dibutuhkan untuk pertumbuhannya. Nutrisi dapat berupa molekul besar seperti Karbohidrat,
Lemak dan Protein, asam nukleat, vitamin dan beberapa mineral seperti unsur makronutrien C, H, O, N, P dan S serta
unsur mikronutien seperto K, Ca, Mg, Fe, Cl, Mn, Cu (Dwijoseputro, 2010).
Ketersediaan nutrisi untuk diagnosis bakteri Staphylococcus membutuhkan media yang dapat menumbuhkan
bakteri kelompok Staphylococcus dan menghambat pertumbuhkan bakteri lain selain Staphylococcus. Media Manitol
Salt Agar (MSA) saat ini merupakan media yang banyak digunakan untuk menumbuhkan bakteri kelompok
Staphylococcus. Media MSA bersifat selektif mampu menghambat pertumbuhan bakteri selain Staphylococcus dengan
zat penghambat garam NaCl 7,5% sehingga bakteri lain dari kelompok Gram negatif dan Gram positif seperti
Streptococcus dihambat.
Media MSA mengandung bacto ekstrak daging, bacto pepton, NaCl, bacto phenol red, manitol dan bacto agar.
Media MSA mengandung nutrisi atau protein bahan dasar bacto ekstrak daging dan bacto pepton (Safitri, 2010).
Ekstrak daging sapi dan pepton digunakan sebagai bahan dasar karena merupakan sumber protein, nitrogen, yang
sangat dibutuhkan oleh mikroorganisme.
Bahan untuk membuat media MSA berbentuk redihrat (sudah jadi) memiliki harga yang relatif mahal dan
media tersebut banyak diproduksi oleh perusahaan asing. Indonesia memiliki sumber daya alam yang melimpah,
beberapa diantaranya terdapat protein nabati yang dapat menggantikan bahan bacto ekstrak daging dan bacto pepton
pembuatan media MSA. Sumber protein alternatif tersebut dapat diperoleh dari kacang kedelai, bahan ini merupakan
bahan yang mudah didapat dan tidak memerlukan biaya yang mahal.
Kacang kedelai merupakan protein lengkap, murah, dan merupakan salah satu bahan makanan yang
mengandung jenis asam amino esensial dan non esensial karbohidrat, lemak, vitamin,dan mineral (Nurhayati; Desinar,
2013).
Peneliti sebelumnya berhasil menumbuhkan bakteri Sallmonela typhi dan S.aureus dari sumber protein nabati
kacang - kacangan yaitu kacang tanah sebagai alternatif sumber nutrisi atau protein yaitu bacto ekstrak daging dan
bacto pepton dengan serbuk kacang tanah dalam media AN (Agar Nutrien). Variasi serbuk kacang tanah yang
digunakan adalah 2 gram, 3 gram, 4 gram, 5 gram dan 6 gram. Berat minimal serbuk kacang tanah yang dapat
menumbuhkan bakteri S.typhi adalah 6 gram/ 100 mL, dan berat minimal kacang tanah yang dapat menumbuhkan
bakteri S.aureus adalah 5 gram/ 100 mL (Anisa, 2010).

2. METODE PENELITIAN

Cara kerja
a. Sterilisasi Alat
Alat - alat gelas seperti cawan petri, erlenmeyer yang akan digunakan dicuci, kemudian dikeringkan dan cawan
petri disterilkan pada oven dengan 180°C selama 2 jam, dan untuk sterilisasi ose caranya dengan membakar diatas
api lampu spirtus (Soemarno, 1987).
163
 Prosiding Seminar Nasional dan Diseminasi Penelitian Kesehatan
STIKes Bakti Tunas Husada Tasikmalaya, 21 April 2018
ISBN:978-602-72636-3-5

b. Preparasi pembuatan serbuk kacang kedelai

Pembuatan serbuk kacang kedelai
1) Kacang kedelai disortasi dipilih untuk memilih kedelai yang baik (utuh bulat, tidak pecah), membuang benda
asing dan kedelai yang rusak atau pecah.
2) Kacang kedelai direndam selama 8 - 10 jam. Setelah itu, kedelai ditiriskan dan dipisahkan kulitnya.
3) Kemudian dikeringkan dengan menggunakan oven dengan suhu 50 oC selama 24 jam.
4) Kemudian digiling atau diblender halus sehingga diperoleh tepung kedelai, kemudian disaring (Koswara, 1993).
c. Pembuatan Media MSA berbahan baku serbuk kacang kedelai
1) Timbang serbuk kacang kedelai dengan variasi penimbangan sebanyak 2 gram, 3 gram, 4 gram, 5 gram, dan 6
gram dan masukan kedalam erlenmeyer 250 yang telah diberi label variasi 2 gram, 3 gram , 4 gram , 5 gram ,
dan 6 gram.
2) Tambahkan masing - masing 7,5 gram NaCl, 1 gram manitol, 0,0025 gram bacto phenol red, 1,5 gram bacto
agar dan 100 mL aquades pada erlenmenyer yang telah diberi label variasi 2 gram, 3 gram , 4 gram , 5 gram ,
dan 6 gram.
3) Kemudian panaskan diatas hot plate sambil diaduk sampai larut.
4) Ukur pH pada media dan disesuaikan menjadi ± 7,4, jika tidak netral maka dapat ditambahkan HCl / NaOH.
5) Tutup lubang erlenmeyer dengan sumbat kapas yang dibungkus dengan kain kasa, dan labu erlenmeyer
dibungkus dengan kertas payung dan diseterilkan dengan autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit.
6) Larutan yang sudah steril dimasukan kedalam cawan petri yang steril ± 15 mL, dan biarkan sampai dengan
dingin dan siap untuk digunakan.

Tabel 2.1
Komposisi media MSA serbuk kacang kedelai per 100 mL

No Variasi Komposisi media MSA serbuk

kacang kedelai
1. 2 gram 2 gram serbuk kacang kedelai + 7,5 gram NaCl + 1 gram manitol + 0,0025 gram
phenol red + 1,5 gram bacto agar + 100 mL aquades.
2. 3 gram 3 gram serbuk kacang kedelai + 7,5 gram NaCl + 1 gram manitol + 0,0025 gram
phenol red + 1,5 gram bacto agar + 100 mL aquades.
3. 4 gram 4 gram serbuk kacang kedelai + 7,5 gram NaCl + 1 gram manitol + 0,0025 gram
phenol red + 1,5 gram bacto agar + 100 mL aquades.
4. 5 gram 5 gram serbuk kacang kedelai + 7,5 gram NaCl + 1 gram manitol + 0,0025 gram
phenol red + 1,5 gram bacto agar + 100 mL aquades.
5. 6 gram 6 gram serbuk kacang kedelai + 7,5 gram Nacl + 1 gram manitol + 0,0025 gram
phenol red + 1,5 gram bacto agar + 100 mL aquades.

d. Pembuatan Media Rehidrat MSA (Oxoid)

1) Timbang sebanyak 5,55 gram media MSA.
2) Masukan kedalam gelas kimia 100 mL, tambahkan aqudest sebanyak 50 mL.
3) Kemudian panaskan diatas hot plate sambil diaduk sampai larut.
4) Tutup lubang erlenmeyer dengan sumbat kapas yang dibungkus dengan kain kasa, dan erlenmeyer dibungkus
dengan kertas payung dan diseterilkan dengan autoclave pada suhu 121°C selama 15 menit.
5) Larutan yang sudah steril dimasukan kedalam cawan petri yang steril ± 15 mL, dan biarkan sampai dengan
dingin dan siap untuk digunakan (Novel, 2010).
e. Persiapan Strain Staphylococcus
1) Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2) Ambil biakan dari strain murni S.aureus ± 1 - 2 ose, kemudian ratakan pada objek glass (diabuat sediaan)
keringkan dan fiksasi.
3) Lakukan pewarnaan Gram
a) Sediaan yang telah difiksasi dibubuhi dengan larutan kristal violet selama 1 menit, cuci dengan air kran.
b) Tetesi lugol dan diamkan selama 1 menit, cuci dengan air kran.
c) Tetesi dengan alkohol 70% selama 20 - 30 detik, cuci dengan air kran.
d) Kemudian tetesi dengan safranin selama 30 detik, cuci dengan air kran dan keringkan.
e) Lihat hasil morfologi bakteri Staphylococcus aureus dibawah mikroskop dengan pembesaran 100x.
f) Hasil S.aureus akan terlihat bentuk coccus bergerombol seperti buah anggur dan berwarna ungu.
4) Diambil 1 - 2 ose dari biakan starin murni S.aureus lalu tanam pada media MSA, dengan cara digores di
permukaan media.
5) Inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.
6) Amati morfologi koloni yang tumbuh pada media MSA.
7) Lakukan pewarnaan Gram dari koloni tersangka dari media MSA (Hadioetomo, 1990).
164
 Prosiding Seminar Nasional dan Diseminasi Penelitian Kesehatan
STIKes Bakti Tunas Husada Tasikmalaya, 21 April 2018
ISBN:978-602-72636-3-5

f. Inokulasi Staphylococcus Pada Media MSA Serbuk Kacang Kedelai

1) Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2) Ambil 1 - 2 ose dari biakan starin murni S.aureus lalu tanam pada media MSA serbuk kacang kedelai pada
cawan yang diberi label variasi 2 gram, 3 gram, 4 gram, 5 gram, dan 6 gram .
3) Inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.
4) Amati morfologi ciri - ciri koloni yang tumbuh pada masing masing media MSA serbuk kacang kedelai pada
variasi 2 gram, 3 gram, 4 gram, 5 gram, dan 6 gram (Hadioetomo, 1990).
g. Penanaman Bakteri Kontrol Gram Negatif pada media MSA Serbuk kacang kedelai
1) Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan.
2) Ambil 1 - 2 ose dari masing masing biakan starin murni Eschericia coli lalu tanam pada masing masing
media MSA serbuk kacang kedelai pada cawan yang diberi label variasi 2 gram,3 gram, 4 gram, 5 gram, dan 6
gram .
3) Inkubasi pada suhu 37°C selama 24 jam.
4) Amati pertumbuhan bakteri pada media MSA serbuk kacang kedelai pada variasi 2 gram,3 gram, 4 gram, 5
gram, dan 6 gram (Hadioetomo, 1990).

3. HASIL DAN PEMBAHASAN

Hasil
Berdasarkan hasil penelitian serbuk kacang kedelai (Glycine max) dapat digunakan sebagai alternatif sumber
protein dalam pembuatan media MSA, Hal tersebut dapat dibuktikan dengan tumbuhnya koloni bakteri
Staphylococcus yaitu Staphylococcus aureus dan Staphylococcus epidermidis pada media MSA yang ditambahkan
serbuk kacang kedelai. Dengan variasi serbuk kacang kedelai yang digunakan 2 gram, 3 gram, 4 gram, 5 gram dan 6
gram.
Berdasarkan analisa pengamatan serbuk kacang kedelai dapat digunakan sebagai sumber alternatif protein
(bacto ekstrak daging dan bacto pepton) pada media MSA mulai dari variasi 2 gram, hal tersebut dapat dilihat hasil
pada Tabel 3.1.

Tabel 3.1 Hasil Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus pada media MSA Serbuk kacang kedelai

No Variasi Pertumbuhan S. aureus Pertumbuhan S. epidermidis

Kurang subur, Morfologi koloni : Bulat,
Kurang subur, Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 1-2 mm, Warna
1. 2 gram smooth, diameter 1-2 mm, Warna koloni
koloni putih, warna media merah,
kuning, bersifat manitol fermenter lemah
bersifat non manitol fermenter
Subur, Morfologi koloni : Bulat,
Kurang subur, Morfologi koloni : Bulat,
smooth, diameter 2-4 mm, Warna
2. 3 gram smooth, diameter 1-2 mm, Warna koloni
koloni putih, warna media merah,
kuning, bersifat manitol fermenter lemah
bersifat non manitol fermenter
Subur, Morfologi koloni : Bulat,
Subur, Morfologi koloni : Bulat, smooth,
smooth, diameter 2-4 mm, Warna
3. 4 gram diameter 2-4 mm, Warna koloni kuning,
koloni putih, warna media merah,
bersifat manitol fermenter
bersifat non manitol fermenter
Subur, Morfologi koloni : Bulat,
Subur, Morfologi koloni : Bulat, smooth,
smooth, diameter 2-4 mm, Warna
4. 5 gram diameter 2-4 mm, Warna koloni kuning,
koloni putih, warna media merah,
bersifat manitol fermenter
bersifat non manitol fermenter
Subur, Morfologi koloni : Bulat,
Subur, Morfologi koloni : Bulat, smooth,
smooth, diameter 2-4 mm, Warna
5. 6 gram diameter 2-4 mm, Warna koloni kuning,
koloni putih, warna media merah,
bersifat manitol fermenter
bersifat non manitol fermenter

Pembahasan

Hasil pertumbuhan bakteri S.aureus mulaitumbuh membentuk koloni pertumbuhan bakteri S.aureus kurang
subur pada variasi 2 gram dan 3 gram, dan kurang memfermentasikan manitol sehingga media MSA serbuk kacang
kedelai tetap berwarna merah agak kekuningan, perbedaan pertumbuhan bakteri ini dikarnakan sumber nutrisi atau
protein serbuk kacang kedelai tidak mencukupi nutrisi protein yang dibuhuhkan, sehingga pertumbuhana bakteri
S.aureus kurang baik atau proses metabolisme bakteri berlangsung kurang optimal dan pertumbuhannya tidak
seoptimal media MSA standar.

165
 Prosiding Seminar Nasional dan Diseminasi Penelitian Kesehatan
STIKes Bakti Tunas Husada Tasikmalaya, 21 April 2018
ISBN:978-602-72636-3-5

Sedangkan pertumbuhan bakteri S.epidermidis yang subur mulai dari variasi 3 gram sampai 6 gram dengan
tidak memfermentasikan manitol maka koloni yang tumbuh dan pada media MSA terjadi perubahan warna merah
setelah ditanami bakteri S.epidermidis. disebabkan karena S.epidermidis tidakmemfermentasikan manitol menjadi asam
dan gas, menyebabkan pH media menjadi basa, indikoator phenol red yang terdapat dalam media berubah menjadi
merah (Safitri, 2010 ).
Pada media MSA serbuk kacang kedelai ini, menunjukkan hasil optimal dan sebanding dengan media MSA
standar (Oxoid) dapat dilihat dalam hal ukuran, bentuk koloni, warna, elevasi, permukaan, pinggiran dan sifat manitol
fermenter. Koloni yang terbentuk terlihat besar dan nyata serta mudah diamati. Hal tersebut dikarenakan nutrisi atau
sumber protein yang terkandung dalam serbuk kacang kedelai yang tinggi, dan kandungan nutrisi yang lain yang
melimpah seperti karbohidrat, vitamin dan mineral (Andrianto, 2004). Dan variasi serbuk kacang kedelai yang
digunakan semakin banyak, sehingga proses metabolisme bakteri akan berlangsung cepat dan optimal, sehingga proses
pembelahan sel berjalan baik yang dapat menyebabkan ukuran koloni semakin besar dan cepat dalam proses
memfermentasikan manitol.
Dalam kondisi nutrisi yang baik waktu yang dibutuhkan untuk pertumbuhan bakteri relatif cepat, sebaliknya
jika nutrisi yang dibutuhkan tidak melimpah, sel-sel harus menyesuaikan dengan lingkungan dan pembentukan enzim -
enzim untuk mengurai substrat membutuhkan waktu yang lebih lama (Anisah; Rahayu, 2005). Hasil pertumbuhan
bakteri Staphylococcus pada media MSA dapat terlihat pada Gambar1 dan Gambar 2.

Gambar 1. Pertumbuhan Bakteri S.aureus pada Media MSA dengan bahan baku Kacang kedelai

Gambar 2. Pertumbuhan Bakteri S. epidermidis pada Media MSA dengan bahn baku Kacang kedelai

Pada penelitian ini media MSA serbuk kacang kedelai bakteri kontrol negatif bakteri Esherichia coli. Untuk
menguji media MSA serbuk kacang kedelai, apakah fungsi media tersebut dalam menghambat bakteri Gram negatif
baik atau tidak. Pertumbuhan bakteri pada kontrol negatif yaitu Esherichia coli pada media MSA serbuk kacang

166
 Prosiding Seminar Nasional dan Diseminasi Penelitian Kesehatan
STIKes Bakti Tunas Husada Tasikmalaya, 21 April 2018
ISBN:978-602-72636-3-5

kedelai tidak terjadinya pertumbuhan koloni, dan media tetap berwarna orange sama seperti media MSA serbuk
kacang kedelai setelah diinkubasi pada suhu 37ºC selama 24 jam yang tidak ditanam bakteri, hal tersebut disebabkan
karena media MSA merupakan media selektif yang memiliki konsentrasi garam NaCl sangat tinggi (7,5%) sebagai
penghambat pertumbuhan bakteri lainnya. Kebanyakan bakteri tidak dapat bertahan hidup dilingkungan dengan kadar
garam sangat tinggi (hipertonik), kecuali genus Staphylococcus mampu adaptasi dengan lingkungan tinggi kadar garam
dan tumbuh baik dimedia MSA ini (Saftri, 2010). Sedangkan E.coli termasuk bakteri Gram negatif, dan tidak tahan
terhadap kadar garam yang sangat tinggi. Sehingga E. coli tidak dapat tumbuh dan fungsi media MSA sebagai media
selektif dengan sumber protein diganti serbuk kacang kedelai berfungsi dengan baik.

4. KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa kacang kedelai dapat digunakan sebagai bahan
alternatif sumber protein pengganti bacto beef ekstrak daging sapi dan bacto pepton untuk menumbuhkan bakteri
Staphylococcus.

5. UCAPAN TERIMAKASIH
Kami ucapkan terimakasih kepada :
1. Ketua STIKes BTH Tasikmalaya,
2. Ketua Program Studi DIII Teknologi Laboratorium Medik
3. Ketua Pusat Penelitian dan Pengabdian Masyarakat STIKes BTH Tasikmalaya
Atas bantuan dan kerjasama dalam program penelitian dosen STIKes BTH Tasikmalaya tahun 2017.

6. DAFTAR PUSTAKA
Andrianto, T. T., dan N. Indarto,. Budidaya dan Analisis Usaha Tani Kedelai, Kacang Hijau, Kacang Panjang, Absolut;
Yogyakarta, 2004.
Anisa Ayu. Pemanfaat Serbuk Kacang Kedelai sebagai Media Alternatif Pertubuhan Sallmonela typhy, Jurnal Politeknik
Kesehatan; Bandung, 2010.
Anisah dan Rahayu, Media Alternatif untuk Pertumbuhan Bakteri Menggunakan Sumber Karbohidrat yang Berbeda. Universitas
MuhammadiyahSurakarta, Surakarta, 2015. Diakses pada 01 Juni 2016
https://eprints.ums.ac.id./38852/21/NASKAH/%20PUBLIKASI.pdf.
Dwidjoseputro, Dasar Dasar Mikrobiologi, Djambatan; Jakarta, 2010.
Hadioetomo Sari Ratna, Mikrobiologi Dasar Dalam Praktek Teknik dan Prosedur Dasar Laboratorium, PT. Gramedia; Jakarta,
1990.
Koswara, Sutrisno, Teknologi Pengolahan Kedelai Menjadikan Makanan Bermutu ,Penebar Swadaya; Jakarta 1992.
Novel Sinta Sasika, Praktikum mikrobiologi dasar, Trans Info Medika; Jakarta, 2010.
Nurhayati, Desinar, Pembuatan Pepton secara enzimatis menggunakan bahan baku jeroan ikan tongkol, JPPHI Vol. 16.No. 1,
2013
Safitri Ratu dan Sinta Sasika, Medium Analisis Mikroorganisme, CVTrans Info Medika; Jakarta, 2010.
Soemarno, Penuntun Praktikum Bakteriologi, CV.Karyono; Yogyakarta, 1987.

167