Tugas Penetapan Kadar Fenol

1. Pembuatan larutan standar asam galat.

Jawaban : Sebanyak 10 mg asam galat dilarutkan dalam 0,1 ml etanol,
kemudian diencerkan dengan air suling sampai volume 100,0 ml
(Alfian dan Susanti 2012).
2. Pembuatan larutan Na2CO3 7.5%
Jawaban : Sebanyak 7,5 g Na2CO3 ditambah 80 ml air suling, kemudian
didihkan sampai serbuk Na2CO3 larut sempurna. Setelah itu
diamkan selama 24 jam, disaring dan diencerkan dengan air suling
sampai volume 100 ml (Alfian dan Susanti 2012).
3. Penentuan Panjang gelombang maksimum.
Jawaban : Sebanyak 300 μL larutan asam galat konsentrasi 30 μg/ml
ditambah 1,5 ml pereaksi Folin Ciocalteu (1:10), kemudian
dikocok dan didiamkan selama 3 menit ke dalam larutan tersebut
ditambah 1,2 ml larutan Na2CO3 7,5%, dikocok homogen dan
diamkan pada suhu ruang kamar kemudian absorbansinya diukur
pada panjang gelombang 600 - 850 nm (Alfian dan Susanti 2012).
4. Pembuatan larutan uji.
Jawaban : Timbang 50 mg ekstrak etanol herba sambiloto, kemudian
dimasukan ke dalam labu ukur 100 ml, volume dicukupkan
dengan etanol : air (1:1) hingga tanda batas.
5. Penentuan operating time.
Jawaban : Sebanyak 300 μL larutan asam galat konsentrasi 30 μg/ml
ditambah 1,5 ml reagen Folin Ciocalteu, kemudian dikocok dan
didiamkan selama 3 menit. Kedalam larutan tersebut ditambah 1,2
ml larutan Na2CO3 7,5%, dikocok homogen, dan diukur
absorbansinya dalam rentang waktu 0-60 menit pada panjang
gelombang maksimum (Alfian dan Susanti 2012).
6. Pembuatan kurva baku asam galat dengan pereaksi folin ciocalteu.
Jawaban : Diambil 1,8 ml, 3 ml, 4,2 ml, 5,4 ml, 6,6 ml larutan asam galat
dibuat dengan 5 konsentrasi yaitu 18, 30, 42, 54, dan 66 μg/ml
 menggunakan mikropipet dimasukkan dalam tabung reaksi,
kemudian pada masing-masing konsentrasi ditambah 1,5 ml reagen
Folin Ciocalteu (1:10) menggunakan mikropipet. Setelah
didiamkan selama 3 menit, masing-masing larutan ditambah 1,2 ml
larutan Na2CO3 7,5% menggunakan mikropipet dikocok homogen,
dan didiamkan pada range operating time pada suhu kamar. Semua
larutan diukur absorbansinya pada panjang gelombang 765,5 nm,
kemudian dibuat kurva kalibrasi hubungan antara konsentrasi asam
galat (μg/ml) dengan absorbansi.
7. Penetapan kadar fenolik total.
Jawaban : Sebanyak 50 mg ekstrak dari masing-masing sampel dilarutkan
sampai volume 25 ml di labu ukur yang berbeda dengan campuran
etanol : aquadest (1:1) hingga diperoleh konsentrasi 2000 ppm.
Larutan ekstrak yang diperoleh dipipet 300 μL dan ditambah 1,5
ml reagen Folin Ciocalteu dan dikocok. Didiamkan selama 3
menit, ditambah 1,2 ml larutan Na2CO3 7,5% dan didiamkan lagi
pada waktu 60 menit. Absorbansi larutan ekstrak diukur dengan
spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang 756,5 nm.
Dilakukan 3 kali pengulangan (Murtijaya dan Lim 2007).