Oleh:
HAMIDATUN NISA (8196142001)
KELAS : B
Dosen Pengampu:
Prof. Dr. Manihar Situmorang, M.Sc
A. Identitas Artikel
Judul Artikel : Amperometric Biosensor Based on Diamine Oxidase/Platinum
Nanoparticles/Graphene/Chitosan Modified Screen-Printed
Carbon Electrode for Histamine Detection
B. Pendahuluan
Amina biogenic merupakan senyawa yang bersifat organik dengan berat
molekul yang relative rendah karakter dasar, dan struktur kimia yang berbeda
yang mengandung setidaknya satu atom nitrogen oleh proses dekarboksilasi asam
amino. Amina biogenic ini merupakan komponen biologis aktif yang dihasilkan
oleh proses dekarboksilasi asam amino bebas yang terdapat pada bahan pangan
olahan ikan, daging, anggur dan keju. Amina biogenic biasanya dikenal dengan
senyawa kunci yang mengindikasikan peluruhan mikrobiologis pada produk ikan
dan kerang. Bahan amina bogenik sebagai implikasi kuantitas dan biologis atau
nutrisi yang terkait dengan pembusukan pada daging dan ikan yaitu putresin (1,4-
diaminobutane), kadaverin (1,5-diaminopentane), tyramine (2-p-hydroxyphenyl
ethylamine) dan histamine (2-(4-imidazolyl)ethylamine. Dalam amino biogenic
terdapat zat histamine yang merupakan senyawa yang paling aktif secara
biokimiawi dari golongan senyawa ini. Akibatnya, penting untuk mengetahui
jumlah histamine dalam sampel karena memprovokasi sindrom scombroid.
Histamine muncul pada beberapa ikan segar setelah ikan mengalami pendinginan
atau konservasi setalah penangkapan. UnEfek dari histamine adalah ketika
dicerna, senyawa ini memiliki efek negative pada fungsi normal jantung, neutron
motorik otot, dan perut halus. Untuk itu diperlukan metode ekonomis untuk
mengimplementasikan kuantifikasi histamine secara cepat, selektif dan sensitive.
Metode Ini terdiri atas kromatografi cair kinerja tinggi, kromatografi pertukaran
kation, dan kromatografi lapis tipis. Kemudian digunakan biosensor untuk
penyaringan pada senyawa amino biogenic. Sedangkan graphene (GPH)
digunakan sebagai bahan pengubah berstruktur nano untuk elektroda kerja
pengembangan sensor elektrokimia dan biosensor, gas serta sel bahan
bakar.Biosensor yang digunakan untuk menguji histamine terlebih dahulu
divalidasi berdasarkan jumlah histamine pada sampel ikan tawar kemudian
dievaluasi nilai histamine yang diperoleh.
C. Tujuan Penelitian
Untuk mengetahui jumlah histamine dalam sampel yang diuji
Untuk mengetahui kuantifikasi histamine pada ikan tawar
D. Manfaat Penelitian
Sebagai informasi bagi pembaca jumlah kadar histamine pada ikan tawar dan
bahayanya
E. Metodologi
E.1 Bahan dan Alat
Reduced graphene oxide (GPH) dari Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA)
digunakan untuk karbon modifikasi layar dicetak elektroda (CSPE). Elektroda
cetak karbon, elektroda yang bekerja dengan diameter 4 mm) diperoleh dari
Dropsens Ltd. CSPE dimodifikasi dengan graphene, chitosan, Pt nanoparticles
dan DAO untuk mendapatkan sebuah biosensor.
F. Hasil Penelitian
Dalam karya ini, sinyal elektrokimia dari biosensor DAO-nPt / GPH / kitosan / CSPE
terutama terkait dengan proses oksidasi hidrogen peroksida (H2O2 ), yang merupakan enzimatik
produk interaksi antara DAO dan histamin. Komponen lapisan sensitif dan skema
dari proses elektrokimia dan enzim pada tingkat permukaan aktif biosensor digambarkan pada Gambar 1.
Nanopartikel logam, seperti platinum atau emas, banyak digunakan dalam elektrokimia sebagai katalis untuk
proses redoks H2O2. Untuk menunjukkan sifat elektrokatalitik dari Lapisan nanostruktur GPH / chitosan dan
nPt / GPH / chitosan, yang digunakan untuk modifikasi elektroda, untuk Oksidasi H2O2 . Sinyal elektrokimia
dari semua elektroda tidak menunjukkan puncak elektrokimia dalam PBS pH = 7,4 jika sampel tidak
mengandung H2O2 . CV dari biosensor DAO-nPt / GPH / chitosan / CSPE dalam 10 ´2 M PBS dari _pH =
7,4 mengandung 10 4 M histamin. Dalam voltammogram siklik dari DAO-nPt / GPH /kitosan / CSPE
dalam larutan histamin 10-5 M, gelombang anodik yang terkait dengan proses oksidasi H2O2 adalah +0.60 V
dan puncak katodik pada ´0.15 V yang terkait dengan proses reduksi H2O2 diamati,
H2O2 dideteksi secara elektrokimiawi pada permukaan biosensor pada nilai potensial rendah. Ini adalah
deteksi prinsip biosensor berdasarkan DAO, nPt dan GPH dikembangkan dalam penelitian ini.
Efek dari tingkat pemindaian dalam respon elektrokimia biosensor dipelajari dengan CV dari biosensor
DAO-nPt / GPH / chitosan / CSPE dengan laju sapuan yang berbeda, dalam kisaran 0,05–1.00 V¨ s
´1 . Intensitas puncak yang terkait dengan proses oksidasi H 2 O 2 mengikuti linier ketergantungan yang
dijelaskan oleh persamaan, I = 9 ˆ 10 ´5 ˆ v 1/2 + 7 ˆ 10 ´6 membuktikan bahwa prosesnya adalah satu
dikontrol oleh difusi, sesuai dengan persamaan Randles-Sevcik sensitivitas biosensor.
deteksi sensitif histamin amina biogenik, respon elektrokimia (saat ini) diukur,
memvariasikan potensi yang diterapkan pada biosensor. Kehadiran kelompok –COOH dan –OH
memfasilitasi
imobilisasi DAO pada permukaan biosensor (nPt / GPH / chitosan) dengan cara elektrostatik,
hidrofobik, van der Waals, interaksi ikatan hidrogen, dan kombinasi dari keduanya [37] Itu
lapisan sensitif biosensor stabil dan proses cross-linking tidak diperlukan, menghasilkan
peningkatan sensitivitas biosensor Seperti disorot sebelumnya, respon amperometrik biosensor terkait dengan
H 2 O 2 yang menghasilkan
proses biokatalitik, yang biasanya terjadi pada nilai potensial tinggi. Di tingkat novel ini
biosensor, sistem sinergis enzimatik dengan GPH, meningkatkan permukaan electroensor biosensor
dan memfasilitasi transfer elektron dan NPT sebagai katalis untuk Oxido-pengurangan H 2 O 2 memfasilitasi,
potensial adalah salah satu parameter penting yang secara pasti mempengaruhi sinyal elektrokimia biosensor
untuk histamin, baik untuk selektivitas dan sensitivitas. Rentang potensi yang dianalisis adalah antara 0,0 V
vs Ag
dan 0,8 V vs Ag. Respons paling intens diperoleh pada +0,4 V vs Ag. Karena itu, nilai potensial
dari +0,4 V vs Ag dipilih karena, pada nilai ini, respons biosensor tertinggi terhadap histamin
(10 44 M) tercapai, versus respon biosensor dalam larutan elektrolit kosong (PBS). (Gambar 3).
, 422
Percobaan elektrokimia dilakukan pada +0,4 V dalam rangkap tiga (RSD = 2,24%); ( B ) Variasi dari
pada +0,4 V dalam rangkap tiga (RSD = 4,46%) dalam 10 ´4 M larutan histamin (dukungan elektrolit 10 ´2 M
PBS dari
pH = 7,4).
8 dari 15
Untuk menemukan jumlah optimal diamineoksidase pada permukaan nPt / GPH / kitosan /
menggambarkan variasi respon biosensor versus jumlah DAO yang diimobilisasi di permukaan.
Arus puncak meningkat ketika kuantitas DAO meningkat. Jika kuantitasnya lebih besar dari 9 μU
DAO, sedikit penurunan respons biosensor dapat diamati. Kecenderungan ini menunjukkan bahwa,
pada jumlah yang relatif kecil, DAO yang diimobilisasi meningkatkan laju proses enzimatik histamin.
Jumlah DAO yang tinggi yang diimobilisasi dapat menyebabkan keterbatasan difusi histamin ke aktif
pusat DAO. Akibatnya, 9 μU DAO digunakan untuk mengembangkan biosensor yang optimal, karena
tidak ada perbedaan besar pada respon biosensor antara 9 μU dan 11 μU DAO yang diperhatikan.
Hasil yang diperoleh mengungkapkan pengaruh asam amino yang tidak signifikan dalam deteksi
amperometrik
dan kuantifikasi histamin, dalam kisaran batas kesalahan (3%). Pengaruh amina biogenik lainnya dalam
deteksi amperometrik dan kuantifikasi histamin lebih besar daripada yang diamati untuk asam amino
Sampel ikan air tawar yang berbeda dianalisis dengan DAO / nPt / GPH / kitosan / CSPE
biosensor untuk deteksi dan kuantifikasi histamin. Tujuan keragaman ini relatif tinggi
sampel adalah untuk mengevaluasi apakah kuantifikasi jumlah histamin dalam ikan air tawar yang berbeda
merencanakan. Untuk studi pemulihan dan untuk pengaruh efek matriks dalam deteksi histamin, the
pengukuran dengan biosensor dilakukan dalam rangkap tiga. Hasilnya disajikan pada Tabel 1. ada perbedaan
yang relatif kecil antara interpolasi langsung
dan metode penambahan. Oleh karena itu, efek mengganggu matriks tidak signifikan dalam deteksi histamin
Halaman 12
12 dari 15
Evolusi kesegaran diikuti oleh kuantifikasi jumlah histamin di semua air tawar
sampel ikan disimpan pada suhu 4 ˝ C. Isi histamin ditentukan pada awalnya (sampel yang sangat segar) dan
setelah 48 jam penyimpanan untuk semua sampel ikan. Hasil yang diperoleh terungkap pada
Gambar 10 dalam bentuk a
diagram batang.
. Peningkatan jumlah histamin total dalam sampel ikan air tawar. Nilai yang dilaporkan adalah
rata-rata semua metode kuantifikasi. S1 — Ikan Mas (segar); S2 — Karper (48 jam); S3 — Tench (segar); S4
— Tench
(48 jam); S5 — Ikan mas Prusia (segar); S6 — Ikan mas Prusia (48 jam); S7 — bertengger Eropa (segar); S8
— Eropa
hinggap (48 jam); S9 — Wels lele (segar); S10 — Las lele (48 jam).
Untuk semua sampel dalam penelitian ini, konten histamin meningkat setelah 48 jam penyimpanan. Itu diakui
bahwa tingkat jumlah histamin dapat dianggap sebagai indikator kesegaran ikan yang spesifik dan dapat
diandalkan. Itu
kualitas ikan juga terkait dengan kandungan histamin. Kontrol kualitas dan kesegaran penting untuk ikan
sampel untuk mencegah sindrom scombroid, yang terkait dengan konsumsi ikan busuk. Saya t
dapat berhasil diimplementasikan dengan biosensor novel ini.
Sebagai konfirmasi tambahan dari metode berdasarkan DAO-nPt / GPH / chitosan / CSPE
biosensor, didasarkan pada uji-t sampel berpasangan Siswa (tingkat kepercayaan 95%, sembilan derajat
metode ELISA. Ketika membandingkan hasil yang ditemukan oleh metode interpolasi dan
metode penambahan standar, nilai-t eksperimental yang diperoleh adalah 0,4678, sedangkan kritis ditabulasi
nilai t adalah 2,2621. Oleh karena itu, perbedaan antara konsentrasi histamin yang diperoleh oleh
metode interpolasi dan metode penambahan standar tidak signifikan secara statistik. Tambahan,
nilai t yang diperoleh secara eksperimental adalah 0,1678 dan 0,7263, masing-masing, ketika metode
interpolasi
vs. ELISA dan metode penambahan standar vs ELISA dibandingkan. Nilai-t eksperimental adalah
lebih rendah dibandingkan dengan t-nilai kritis teoritis 2.2621. Karena itu, perbedaan antara
konsentrasi histamin yang diperoleh melalui biosensor dan ELISA tidak secara statistik
rata-rata semua metode kuantifikasi. S1 — Ikan Mas (segar); S2 — Karper (48 jam); S3 — Tench (segar); S4
— Tench
(48 jam); S5 — Ikan mas Prusia (segar); S6 — Ikan mas Prusia (48 jam); S7 — bertengger Eropa (segar); S8
— Eropa
hinggap (48 jam); S9 — Wels lele (segar); S10 — Las lele (48 jam).
Untuk semua sampel dalam penelitian ini, konten histamin meningkat setelah 48 jam penyimpanan. Itu diakui
bahwa tingkat jumlah histamin dapat dianggap sebagai indikator kesegaran ikan yang spesifik dan dapat
diandalkan. Itu
kualitas ikan juga terkait dengan kandungan histamin. Kontrol kualitas dan kesegaran penting untuk ikan
sampel untuk mencegah sindrom scombroid, yang terkait dengan konsumsi ikan busuk. Saya t
Sebagai konfirmasi tambahan dari metode berdasarkan DAO-nPt / GPH / chitosan / CSPE
biosensor, didasarkan pada uji-t sampel berpasangan Siswa (tingkat kepercayaan 95%, sembilan derajat
metode ELISA. Ketika membandingkan hasil yang ditemukan oleh metode interpolasi dan
metode penambahan standar, nilai-t eksperimental yang diperoleh adalah 0,4678, sedangkan kritis ditabulasi
nilai t adalah 2,2621. Oleh karena itu, perbedaan antara konsentrasi histamin yang diperoleh oleh
metode interpolasi dan metode penambahan standar tidak signifikan secara statistik. Tambahan,
nilai t yang diperoleh secara eksperimental adalah 0,1678 dan 0,7263, masing-masing, ketika metode
interpolasi
vs. ELISA dan metode penambahan standar vs ELISA dibandingkan. Nilai-t eksperimental adalah
lebih rendah dibandingkan dengan t-nilai kritis teoritis 2.2621. Karena itu, perbedaan antara
konsentrasi histamin yang diperoleh melalui biosensor dan ELISA tidak secara statistik
G. KESIMPULAN
Kami mengembangkan film tebal nanobiokomposit novel DAO / nPt / GPH / chitosan untuk histamin
biosensing. Biosensor mengungkapkan sensitivitas yang sangat baik terhadap histamin (0,0631 µA¨ µM) dan
rendah
batas deteksi (2,54 ˆ 10 ´8 M). Sensitivitas yang meningkat terkait dengan sinergi elektrokatalitik
efek GPH dan nPt pada deteksi elektrokimia H 2 O 2 . Berbasis DAO / nPt / GPH / kitosan
biosensor memiliki respons amperometrik sensitif terhadap histamin, yang dapat dikaitkan dengan
area elektroaktif besar dan pertukaran elektron cepat yang dimediasi oleh nPt dan GPH. Biosensor
fabrikasi sangat dapat direproduksi dan biosensor menghadirkan stabilitas yang sangat baik. L- histidin, L -
rosin,
sampel ikan diukur secara andal dengan biosensor. Jumlah histamin dalam sampel ikan adalah
diperoleh dengan metode interpolasi dan metode penambahan standar dengan presisi yang baik. Luar biasa
korelasi antara jumlah histamin, diperoleh dengan biosensor yang dikembangkan dan ELISA
metode, ditemukan.
H. KELEBIHAN JURNAL
Jurnal ini sangat ilmiah sehingga setiap bahasan yang diuraikan ringkas,
sistematis, dan sangat rapi. Sumber referensi yang digunakan oleh penulis akurat
dan sangat bagus. Jurnal ini cocok untuk informasi bagi penelitian selanjutnya.
I. KELEMAHAN JURNAL
Gambar yang disajikan pada jurnal kurang jelas sehingga pembaca tidak
kelihatan informasi yang terdapat pada gambar terutama mengenai aplikasi.