Tugas Memahami Artikel Ilmiah Bahasa Inggris 2

Nama : 21801031014_alamin_3A

Judul Artikel : Effect of plant growth regulatorsonovary culture of coconut

(Cocos nucifera L.)

Penulis : P. I. P. Perera Æ V. R. M. Vidhanaarachchi Æ

T. R. Gunathilake Æ D. M. D. Yakandawala Æ
V. Hocher Æ J. L. Verdeil Æ L. K. Weerakoon.

Nama Jurnal : Effect of plant growth regulatorsonovary culture

of coconut (Cocos nucifera L.)

Vol no hal : 1-9

Link :https://scholar.google.co.id/citations?user=UPDOedEAAAAJ&hl=id&oi=sra
Part of the English Translator My Version
article
Abstrack Coconut is a cross pollinating palm, Kelapa merupakan pohon palem Kelapa adalah pohon palem penyerbukan
propagated only by seeds. Tissue penyerbuk silang, diperbanyak hanya silang, diperbanyak hanya dengan biji.
culture is the only vegetative prop- dengan biji. Kultur jaringan adalah satu- Kultur jaringan adalah satu-satunya
agation method available for satunya metode perbanyakan vegetatif metode perbanyakan vegetatif yang
coconut. Consistent callo-genesis yang tersedia untuk kelapa. Callo- tersedia untuk kelapa. Kalogenesis yang
was obtained by culturing genesis yang konsisten diperoleh konsisten diperoleh dengan kultur
unfertilised ovaries at -4 stage in CRI dengan mengkulturkan ovarium yang ovarium yang tidak dibuahi pada tahap
72 medium containing 100 lM 2,4- tidak dibuahi pada tahap -4 dalam -4 dalam media CRI 72 yang berisi 100 l
dichlo-rophenoxyacetic acid (2,4-D) media CRI 72 yang mengandung 100 M 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-
and 0.1% activated charcoal. lM 2,4-dichlo-rophenoxyacetic acid D) dan 0,1% arang aktif. Callusing
Callusing was improved by (2,4-D) dan 0,1% arang aktif. ditingkatkan dengan aplikasi 9 l M
application of 9 lM thidiazu-ron Penggunaan kapalan ditingkatkan thidiazuron (TDZ). Kalus embriogenik
(TDZ). Embryogenic calli were dengan penerapan 9 lM thidiazu-ron disubkultur ke media induksi
subcultured onto somatic (TDZ). Kalus embriogenik disubkultur embriogenesis somatik berisi 66 l M 2,4-
embryogenesis induction medium ke media induksi embriogenesis D. Pertumbuhan kerdil diamati pada
containing 66 lM 2,4-D. Stunted somatik yang mengandung 66 lM 2,4- embrio somatik setelah subkultur ke
growth was observed in the somatic D. Pertumbuhan kerdil diamati pada media CRI 72 yang mengandung asam
embryos after subculture onto CRI embrio somatik setelah subkultur ke absisat (ABA). Bisa saja pematangan
72 medium containing abscisic acid media CRI 72 yang mengandung asam embrio somatik dicapai di Y 3 medium
(ABA). Maturation of somatic absisat (ABA). Pematangan embrio tanpa zat pengatur tumbuh. Konversi
embryos could be achieved in Y3 somatik dapat dilakukan pada medium embrio somatik diinduksi dengan
medium without growth regulators. Y3 tanpa zat pengatur tumbuh. menambahkan asam giberelat (GA 3) ke
Conversion of somatic embryos was Konversi embrio somatik diinduksi media konversi yang mengandung5 l M
induced by adding gibberellic acid dengan menambahkan asam giberelat 6-benzyladenine (BA) sedangkan 2-
(GA3) to conversion medium (GA3) ke media konversi yang isopentyl adenine (2iP) meningkatkan
containing 5 lM 6-benzyladenine mengandung 5 lM 6-benzyladenine frekuensi regenerasi tanaman. Sebanyak
(BA) while 2-isopentyl adenine (2iP) (BA) sedangkan 2-isopentyl adenine 83 planlet dihasilkan dari 32 ovarium
increased the frequency of plant (2iP) meningkatkan frekuensi yang dibudidayakan. Kata kunci
regeneration. A total of 83 plantlets regenerasi tanaman. Sebanyak 83 Regenerasi Kalogenesis Embriogenesis
was produced from 32 cultured planlet dihasilkan dari 32 ovarium yang somatik Palm Arecaceae Singkatan ABA
ovaries. Keywords Callogenesis dibudidayakan. Kata kunci Regenerasi 2,4-D BA 2iP GA 3 TDZ 2,4-Asam
Regeneration Somatic Kalogenesis Embriogenesis somatik diklorofenoksiasetat 6-Benzyladenine 2-
embryogenesis Palm Arecaceae Palm Arecaceae Singkatan ABA Asam Isopentyl adenine Asam giberelat
Abbreviations ABA Abscisic acid absisat 2,4-D 2,4-Asam Thidiazuron Asam absisat
2,4-D 2,4-Dichlorophenoxyacetic diklorofenoksiasetat BA 6-
acid BA 6-Benzyladenine 2iP 2- Benzyladenine 2iP 2-Isopentyl adenine
 Isopentyl adenine GA3 Gibberellic GA3 Asam giberelat TDZ Thidiazuron.
acid TDZ Thidiazuron
Introduction 1 Grown in about 90 countries, the Pengantar Tumbuh di sekitar 90 negara, Tumbuh di sekitar 90 negara, kelapa
coconut palm (Cocos nucifera L.) is kelapa sawit (Cocos nucifera L.) ( Cocos nucifera L.) merupakan tanaman
an important perennial tropical merupakan tanaman perkebunan tropis perkebunan tropis tahunan yang penting.
plantation crop. It occurs in the palm tahunan yang penting. Tumbuh dalam Itu terjadi di keluarga palem (Arecaceae)
family (Arecaceae) and is the sole famili sawit (Arecaceae) dan merupakan dan merupakan satu-satunya spesies dari
species of the genus Cocos within satu-satunya spesies dari genus Cocos genus Cocos dalam subfamili Arecoideae
the subfamily Arecoideae which also dalam subfamili Arecoideae yang juga yang juga mengandung spesies penting
contains other economically impor- mengandung spesies penting lainnya secara ekonomi lainnya termasuk kurma
tant species including date palm and secara ekonomi termasuk kurma dan dan kelapa sawit (Dransfield dan Uhl
oil palm (Dransfield and Uhl 1986). sawit (Dransfield dan Uhl 1986). Semua 1986 ). Semua bentuk kelapa yang
All forms of coconut known to date bentuk kelapa yang diketahui sampai diketahui sampai saat ini berbentuk
are diploid (2n = 2x = 32). Coconut saat ini berbentuk diploid (2n = 2x = diploid (2 n = 2 x = 32). Kelapa adalah
is a cross pollinating crop propagated 32). Kelapa adalah tanaman tanaman penyerbukan silang yang
only by seed. Consequently, penyerbukan silang yang diperbanyak diperbanyak hanya dengan biji.
phenotypic variation within planta- hanya dengan biji. Akibatnya, variasi Akibatnya, variasi fenotipik di dalam
tions hinders agronomic practices. fenotipik di dalam tanaman perkebunan menghambat praktik
Homogenous planting materials for menghalangi praktik agronomi. Bahan agronomi. Bahan tanam yang homogen
the coconut industry through tanam yang homogen untuk industri untuk industri kelapa melalui
vegetative propagation would kelapa melalui perbanyakan vegetatif perbanyakan vegetatif akan mengatasi
alleviate the problem. Tissue culture akan mengatasi masalah tersebut. masalah tersebut. Kultur jaringan adalah
has been the only possible clonal Kultur jaringan adalah satu-satunya satu-satunya metode perbanyakan klonal
propagation method available for metode perbanyakan klonal yang yang mungkin tersedia untuk kelapa.
coconut. Previous studies on somatic mungkin tersedia untuk kelapa. Penelitian sebelumnya tentang
embryogenesis in coconut have been Penelitian sebelumnya tentang embriogenesis somatik pada kelapa telah
conducted using different explant embriogenesis somatik pada kelapa dilakukan dengan menggunakan jenis
types including immature telah dilakukan dengan menggunakan eksplan yang berbeda termasuk
inflorescences (Branton and Blake jenis eksplan yang berbeda termasuk pendaratan yang belum matang (Branton
1983; Verdeil et al. 1994) and tender perbungaan yang belum matang dan Blake 1983 ; Verdeil dkk. 1994 ) dan
leaves (Pannetier and Buffard-Morel (Branton dan Blake 1983; Verdeil et al. daun lembut (Pannetier dan Buffard-
1982; Buffard-Morel et al. 1988); the 1994) dan tender daun (Pannetier dan Morel 1982 ; Buffard-Morel dkk. 1988 );
response of these somatic tissues to Buffard-Morel 1982; Buffard-Morel et respon jaringan somatik ini terhadap
in vitro culture has been low and al. 1988); respon jaringan somatik ini kultur in vitro rendah dan tidak konsisten.
inconsistent. Even though zygotic terhadap kultur in vitro rendah dan tidak Padahal jaringan zigotik seperti embrio
tissues such as immature embryos konsisten. Meskipun jaringan zigotik yang belum matang (Karunaratne dan
(Karunaratne and Periyapperuma seperti embrio yang belum matang Periyapperuma 1989 ; Fernando dan
1989; Fernando and Gamage 2000) (Karunaratne dan Periyapperuma 1989; Gamage 2000 ) dan bulu kecil (Hornung
and plumules (Hornung 1995; Chan Fernando dan Gamage 2000) dan bulu 1995 ; Chan dkk. 1998 ; Fernando dkk.
et al. 1998; Fernando et al. 2003) kecil (Hornung 1995; Chan et al. 1998; 2003 ) menunjukkan respon yang lebih
showed better response, these are not Fernando et al. 2003) menunjukkan baik, ini tidak ideal untuk perbanyakan
ideal for clonal propagation since respon yang lebih baik, ini tidak ideal klonal karena menghasilkan klon dengan
they produce clones with unknown untuk perbanyakan klonal karena kinerja yang tidak diketahui karena
per-formance due to heterogeneity menghasilkan klon yang tidak diketahui heterogenitas antar bibit setelah
among seedlings after cross kinerjanya karena heterogenitas antar penyerbukan silang pada kelapa. Ovarium
pollination in coconut. The ovary is bibit setelah penyerbukan silang pada adalah jaringan potensial untuk
a potential tissue for somatic kelapa. embriogenesis somatik karena pengaruh
embryogen-esis due to the Ovarium merupakan jaringan potensial juvenilisasi jaringan meiosis di dekatnya
juvenilizing influence of nearby untuk embriogenesis somatik karena (Bonga 1982 ). Regenerasi tanaman telah
meiotic tissues (Bonga 1982). Plant pengaruh juvenilisasi jaringan meiosis dicapai melalui kultur ovarium beberapa
regeneration has been achieved via di dekatnya (Bonga 1982). Regenerasi tanaman seperti bawang merah ( Allium
ovary culture of several crops such as tanaman telah dicapai melalui kultur cepa; Bohanec dkk. 1995 ; Luthar dan
onion (Allium cepa; Bohanec et al. ovarium pada beberapa tanaman seperti Bohanec 1999 ), ubi ( Ipomoea batatas;
1995; Luthar and Bohanec 1999), bawang merah (Allium cepa; Bohanec Ruth dkk. 1993 ), lily ( Lilium spp .; Van
sweetpotato (Ipomoea batatas; Ruth et al. 1995; Luthar dan Bohanec 1999), Tuyl dkk. 1991 ), tulip ( Tulipa
et al. 1993), lily (Lilium spp.; Van ubi jalar (Ipomoea batatas; Ruth et al. generiana; Van Creij dkk. 2000 ), jagung
Tuyl et al. 1991), tulip (Tulipa 1993), lily (Lilium spp.; Van Tuyl et al. ( Zea mays; Tang dkk. 2006 ) dan bit gula
generiana; Van Creij et al. 2000), 1991), tulip (Tulipa generiana; Van ( Beta vulgaris; Gurel dkk. 2000 ).
maize (Zea mays; Tang et al. 2006) Creij et al. 2000), jagung (Zea mays; Kultur in vitro dari ovarium kelapa yang
and sugar beet (Beta vulgaris; Gurel Tang et al. 2006) dan bit gula (Beta tidak dibuahi menghasilkan kalus dan
et al. 2000). In vitro culture of vulgaris; Gurel et al. 2000). In vitro pembentukan akar adventif; namun, tidak
unfertilized ovaries of coconut has kultur ovarium kelapa yang tidak ada kejadian embriogenesis somatik yang
resulted in callus and adventitious dibuahi menghasilkan kalus dan telah diamati (Grif fi s dan Litz 1997 ).
root formation; however, no inci- pembentukan akar adventif; Namun, Kondisi kultur yang sesuai telah
dence of somatic embryogenesis has tidak ada kejadian embriogenesis dikembangkan untuk kalogenesis yang
been observed (Griffis and Litz somatik yang telah diamati (Griffis dan konsisten dari ovarium kelapa yang tidak
1997). Suitable culture conditions Litz 1997). Kondisi kultur yang sesuai dibuahi (Perera et al. 2007 ). Laporan ini
have been developed for consistent telah dikembangkan untuk kalogenesis dikombinasikan dengan protokol yang
callogenesis from unfertilized yang konsisten dari ovarium kelapa dikembangkan untuk perkalian kalus
ovaries of coconut (Perera et al. yang tidak dibuahi (Perera et al. 2007). (Perez-Nunez et al. 2006 ) menyarankan
2007). This report in combination Laporan ini masuk kombinasi dengan kemungkinan produksi massal bahan
with a protocol developed for callus protokol yang dikembangkan untuk tanam homogen varietas kelapa unggul.
multi-plication (Perez-Nunez et al. multi-plikasi kalus (Perez-Nunez et al. Meskipun kalusi konsisten dilaporkan,
2006) suggest the possibility of 2006) menunjukkan kemungkinan frekuensi kalogenesis (30%) dan efisiensi
mass production of homogenous tersebut produksi massal bahan tanam regenerasi tanaman rendah (Perera et al.
planting materials of improved homogen varietas kelapa unggul. 2007 ). Dalam penelitian ini upaya
coconut varieties. Even though Meskipun penggunaan panggilan yang dilakukan untuk meningkatkan
consistent call-using was reported, konsisten dilaporkan, frekuensi kalogenesis dan efisiensi regenerasi
the callogenesis frequency (30%) and kalogenesis (30%) dan efisiensi tanaman dengan memasukkan zat
the plant regeneration efficiency regenerasi tanaman rendah (Perera et al. pengatur tumbuh yang berbeda ke dalam
were low (Perera et al. 2007). In the 2007). media kultur. Thidiazuron telah
present study attempts were made to Dalam penelitian ini upaya dilakukan ditemukan sebagai sitokinin kuat untuk
enhance callogenesis and plant untuk meningkatkan kalogenesis dan mendorong pembentukan kalus pada
regeneration efficiency by incorpo- efisiensi regenerasi tanaman dengan tanaman berkayu (Huetteman dan Preece
rating different growth regulators memasukkan zat pengatur tumbuh yang 1993 ). ABA telah digunakan untuk
into the culture medium. Thidiazuron berbeda ke dalam media kultur. menginduksi embriogenesis somatik
has been found to be a potent Thidiazuron telah ditemukan sebagai dalam kultur bulu kecil kelapa (Fernando
cytokinin for promoting callus sitokinin yang kuat untuk meningkatkan dan Gamage 2000 ). Perera dkk. ( 2007 )
formation in woody plants pembentukan kalus pada tanaman menginduksi embriogenesis somatik
(Huetteman and Preece 1993). ABA berkayu (Huetteman dan Preece 1993). dengan mensubkultur kalus kelapa yang
has been used to induce somatic ABA telah digunakan untuk berasal dari ovarium ke dalam media CRI
embryogenesis in plumule culture of menginduksi somatik embriogenesis 72 yang mengandung ABA, dengan
coconut (Fernando and Gamage dalam kultur plumule kelapa (Fernando efisiensi regenerasi tanaman yang rendah.
2000). Perera et al. (2007) induced dan Gamage 2000). Perera dkk. (2007) Efisiensi regenerasi telah ditingkatkan
somatic embryogenesis by menginduksi embriogenesis somatik pada spesies tanaman monokotil dan
subculturing ovary-derived calli of dengan mensubkultur kalus kelapa yang berkayu dengan menambahkan 2iP ke
coconut onto CRI 72 medium diturunkan dari ovarium ke media CRI dalam media kultur yang dikombinasikan
containing ABA, with low plant 72 yang mengandung ABA, dengan dengan auksin atau sitokinin lain (Levi
regeneration efficiency. efisiensi regenerasi tanaman yang and Sink 1991 ; Fraser dan Harvey
Regeneration efficiency has been rendah. Efisiensi regenerasi telah 1986 ). Penggabungan GA 3 juga
 improved in monocots and woody ditingkatkan pada spesies tanaman meningkatkan regenerasi tanaman pada
plant species by supplementing 2iP monokotil dan berkayu dengan spesies tanaman yang berbeda. Jadi di
into the culture medium in menambahkan 2iP ke dalam media studi saat ini TDZ, ABA, 2iP dan GA 3
combination with other auxins or kultur yang dikombinasikan dengan telah diuji embriogenesis somatik dan
cytokinins (Levi and Sink 1991; auksin atau sitokinin lain (Levi dan Sink regenerasi tanaman pada kelapa kultur
Fraser and Harvey 1986). 1991; Fraser dan Harvey 1986). ovarium.
Incorporation of GA3 has also Penggabungan GA3 juga meningkat
improved plant regeneration in regenerasi tanaman pada spesies
different crop species. Thus in the tanaman yang berbeda. Jadi dalam
present study TDZ, ABA, 2iP and penelitian ini TDZ, ABA, 2iP dan GA3
GA3 were tested for somatic diuji untuk embriogenesis somatik dan
embryogenesis and plant regenerasi tanaman dalam kultur
regeneration in coconut ovary ovarium kelapa.
culture.
Materials and Plant material Unfertilized ovaries material dan metode material dan metode Bahan tanaman
methods excised from immature female Bahan tanaman Ovarium yang tidak Ovarium yang tidak dibuahi yang
flowers of adult coconut palms (‘Sri dibuahi yang dipotong dari bunga betina dipotong dari bunga betina muda dari
Lanka Tall’) were used as explants. muda dari pohon kelapa dewasa ('Sri pohon kelapa dewasa ('Sri Lanka Tall')
Ovaries were obtained from Lanka Tall') digunakan sebagai eksplan. digunakan sebagai eksplan. Ovarium
inflorescences of -4 stage that has an Ovarium diperoleh dari perbungaan diperoleh dari infus -4 stadium yang
average length of 48 cm (Fig. 1a). stadium -4 yang memiliki panjang rata- memiliki panjang rata-rata 48 cm (Gbr. 1
The female flowers attached to the rata 48 cm (Gbr. 1a). Bunga betina yang Sebuah). Bunga betina menempel pada
basal part of each rachilla (Fig. 1b, c) menempel pada bagian basal tiap bagian basal tiap rachilla (Gbr. 1 b, c)
were collected and the two male rachilla (Gbr. 1b, c) dikumpulkan dan dikumpulkan dan dua bunga jantan
flowers flanking each female flower dua bunga jantan yang mengapit tiap mengambang setiap bunga betina (Gbr. 1
(Fig. 1d) were removed. Then the bunga betina (Gbr. 1d) dibuang. d) telah dihapus. Kemudian bunga betina
female flowers were disinfected with Kemudian bunga betina didesinfeksi didesinfeksi dengan 2% clorox selama 12
2% clorox for 12 min followed by dengan kloroks 2% selama 12 menit menit diikuti dengan empat kali
four rinses with sterile water. The diikuti dengan empat kali pembilasan pembilasan dengan air steril. Eksisi
excision of ovaries from female dengan air steril. Eksisi ovarium dari ovarium dari bunga betina dilakukan
flowers was carried out in a laminar bunga betina dilakukan dalam lemari dalam lemari laminar flow. Segmen
flow cabinet. The perianth segments aliran laminar. Segmen perianth dari perianth dari setiap bunga betina telah
of each female flower were removed setiap bunga betina dihilangkan dan dibuang dan ovariumnya (diameter
and the ovaries (about 1–3 mm in ovarium (diameter sekitar 1-3 mm; sekitar 1-3 mm; Gambar. 1 e) dibedah
diameter; Fig. 1e) were dissected and Gambar 1e) dibedah dan dikultur dalam dan dikultur dalam cawan petri yang
cultured in Petri plates containing cawan Petri yang berisi media kultur. berisi media kultur. Penyusunan media
culture media. Preparation of culture Penyusunan media kultur kultur Bahan kimia tingkat analar
media Analar-grade chemicals were Bahan kimia tingkat analar digunakan digunakan untuk persiapan semua media
used for preparation of all culture untuk persiapan semua media kultur. kultur. Semua zat pengatur tumbuh
media. All growth regulators were Semua zat pengatur tumbuh diperoleh diperoleh dari Sigma Chemical Company
obtained from Sigma Chemical dari Sigma Chemical Company (USA). (USA). PH semua media diatur menjadi
Company (USA). The pH of all PH semua media diatur menjadi 5,8 5,8 sebelum menambahkan 0,1% (b / v)
media was adjusted to 5.8 before sebelum menambahkan 0,1% (b / v) arang aktif (dicuci dengan asam BDH).
adding 0.1% (w/v) activated charcoal arang aktif (dicuci dengan asam BDH). Agar ditambahkan pada 0,55% (b / v).
(BDH acid-washed). Agar was added Agar ditambahkan pada 0,55% (b / v). Media kultur disterilkan dengan autoklaf
at 0.55% (w/v). Culture media were Media kultur disterilkan dengan pada 121 C dan 1,1 kg cm- 2 tekanan
sterilized by autoclaving at 121LC autoklaf pada 121LC dan tekanan 1,1 selama 15 menit. Setelah sterilisasi,
and 1.1 kg cm-2 pressure for 15 min. kg cm-2 selama 15 menit. Setelah media kultur dibagikan ke dalam cawan
After sterili-zation, culture media sterilisasi, media kultur disebarkan ke petri (25 ml per cawan petri; 100 9 10
were dispensed into Petri plates (25 dalam cawan Petri (25 ml per setiap mm; Sterillin) dalam lemari aliran
ml per each petri plate; 100 9 10 cawan petri; 100 9 10 mm; Sterillin) laminar. Kondisi kultur untuk kalogenesis
mm; Sterillin) in a laminar flow dalam lemari aliran laminar. CRI 72 medium (Karunaratne dan
cabinet. Culture conditions for Periyapperuma 1989 ) ditambah dengan
callogenesis CRI 72 medium Kondisi kultur untuk kalogenesis 100 l M 2,4-D dan 4% (w / v) sukrosa
(Karunaratne and Periyapperuma (Perera et al. 2007 ) digunakan untuk
1989) supplemented with 100 lM CRI 72 medium (Karunaratne dan induksi kalus. Tingkat TDZ yang berbeda
2,4-D and 4% (w/v) sucrose (Perera Periyapperuma 1989) dilengkapi (9 dan 18 l M / l) pada media induksi
et al. 2007) was used for callus dengan 100 lM 2,4-D dan 4% (w / v) kalus dibandingkan dengan media CRI 72
induction. Different levels of TDZ sukrosa (Perera et al. 2007) digunakan tanpa TDZ. Struktur seperti telinga
(9 and 18 lM/l) in callus induction untuk induksi kalus. Berbeda Kadar (Perez-Nunez et al. 2006 ) yang
medium were compared with CRI 72 TDZ (9 dan 18 lM / l) dalam media berkembang dalam media induksi kalus
medium devoid of TDZ. The ear-like induksi kalus dibandingkan dengan basal disubkultur ke dalam media yang
structures (Perez-Nunez et al. 2006) media CRI 72 tanpa TDZ. Struktur sama untuk perbanyakan. Jumlah kalus
that developed in the basal callus mirip telinga (Perez-Nunez et al. 2006) yang berkembang dari satu kalus asli
induction medium were subcultured yang berkembang dalam media induksi dicatat setelah 8 minggu. Semua kultur
onto the same medium for kalus basal disubkultur ke media yang dipelihara dalam gelap pada suhu 28 C
multiplication. Number of calli that sama untuk perbanyakan. Jumlah kalus selama 10 minggu tanpa subkultur.
developed from a single original yang berkembang dari satu kalus asli Persentase produksi kalus pada
callus was recorded after 8 weeks. dicatat setelahnya 8 minggu. Semua perlakuan yang berbeda dicatat.
All cultures were maintained in the kultur dipertahankan dalam gelap pada Embriogenesis somatik dan regenerasi
dark at 28LC for 10 weeks without 28LC selama 10 minggu tanpa tanaman Pengaruh 2iP dan ABA Kalus
subculture. The percentage of callus subkultur. Persentase produksi kalus yang berkembang baik dipindahkan ke
production in different treatments pada perlakuan yang berbeda dicatat. media CRI 72 yang berisi 66 l M 2,4-D
was recorded. Somatic Embriogenesis somatik dan regenerasi selama 4 minggu. Empat perawatan
embryogenesis and plant tanaman Pengaruh 2iP dan ABA Kalus Perawatan T 1 dan T 2 menggunakan
regeneration Effect of 2iP and ABA yang berkembang baik dipindahkan ke serangkaian tiga media (induksi embrio,
Treatments T1 and T2 employed a media CRI 72 yang mengandung 66 lM pematangan embrio dan perkembangan
series of three media (embryo 2,4-D selama 4 minggu. embrio versi) setelah kalus berkembang
induction, embryo maturation and pada medium 2,4-rendah. Fase induksi
embryo con-version) after the calli Empat perawatan embrio pada medium CRI 72? 5 l M
had developed on low-2,4-D Perawatan T1 dan T2 menggunakan ABA dilakukan selama 4 minggu, diikuti
medium. The embryo induction rangkaian tiga media (induksi embrio, fase pematangan (CRI 72 media tanpa zat
phase on CRI 72 medium ? 5 lM pematangan embrio dan versi konversi pengatur tumbuh) selama 4 minggu,
ABA was for 4 weeks, followed by embrio) setelah kalus berkembang pada kemudian fase konversi embrio
maturation phase (CRI 72 medium medium 2,4-D rendah. Fase induksi [dimodifikasi Eeuwens Y 3 medium
without growth regulators) for 4 embrio pada medium CRI 72? 5 lM ditambah dengan 5 l M6-benzyladenine
weeks, then embryo conversion ABA selama 4 minggu, diikuti oleh fase (BA) dan 0.1 l M 2,4-D]. Efek 2iP (di T 1
phase [modified Eeuwens Y3 pematangan (media CRI 72 tanpa media konversi) tadinya dibandingkan
medium supplemented with 5 lM 6- pengatur tumbuh) selama 4 minggu, dengan tidak ada 2iP di T 2 media
benzyladenine (BA) and 0.1 lM 2,4- kemudian fase konversi embrio [media konversi. Struktur embriogenik
D]. The effect of 2iP (in the T1 Eeuwens Y3 yang dimodifikasi kemudian disubkultur untuk menginduksi
conversion medium) was compared ditambah dengan 5 lM 6-benzyladenine somatik embriogenesis. Pengaruh 2iP
with no 2iP in T2 conversion (BA) dan 0,1 lM 2,4- D]. Pengaruh 2iP (dalam media konversi) dibandingkan
medium. Embryo-genic structures (dalam media konversi T1) dengan T 2 itu tanpa 2iP. Embrio fase
were then subcultured to induce dibandingkan dengan tidak ada 2iP induksi dieliminasi dalam perawatan T 3
somatic embryogenesis. Effect of 2iP dalam media konversi T2. Struktur dan T 4 dan perlakuan media konversi
(in the conversion medium) was embrio-genik kemudian disubkultur yang sama (2iP) adalah com- dikupas.
compared with T2 that was devoid of untuk menginduksi somatik Kultur dipertahankan dalam gelap pada
2iP. The embryo induction phase embriogenesis. Pengaruh 2iP (dalam suhu 28 C sampai embrio somatik
was eliminated in treatments T3 and media konversi) dibandingkan dengan diubah. Kemudian kultur dipertahankan
T4 and the same conversion medium T2 tanpa 2iP. Fase induksi embrio di bawah fotoperiode 16 jam (PAR; 25 l
treatments (2iP) were com-pared. dihilangkan dalam perlakuan T3 dan T4 mol m- 2 s- 1) pada suhu 28 C dan
The cultures were maintained in the dan perlakuan media konversi yang disubkultur pada interval bulanan hingga
dark at 28LC until the somatic sama (2iP) dibandingkan. Kultur tahap aklimatisasi. Percobaan diulang dua
embryos converted. Then the dipertahankan dalam gelap pada suhu kali dengan minimal delapan kali ulangan
cultures were maintained under a 16 28LC sampai embrio somatik diubah. (delapan kalus). Jumlah tunas yang
h photoperiod (PAR; 25 lmol m-2 s- Kemudian kultur dipertahankan di dihasilkan pada setiap perlakuan dicatat.
1) at 28LC and subcultured at bawah fotoperiode 16 jam (PAR; 25 Namun, pembentukan pucuk kecil
monthly intervals up to the lmol m-2 s-1) pada 28LC dan diamati pada keempat perlakuan, bahkan
acclimatisation stage. The disubkultur pada interval bulanan setelah mensubkultur struktur
experiment was repeated two times hingga tahap aklimatisasi. Percobaan embriogenik ke media konversi segar
with a minimum of eight replicates diulang dua kali dengan minimal sebanyak empat kali. Semua struktur
(eight calli). The number of shoots delapan kali ulangan (delapan kalus). embriogenik kemudian dipindahkan ke
pro-duced in each treatment was Jumlah tunas yang dihasilkan pada media konversi yang berbeda (tanpa 2iP)
recorded. However, little shoot setiap perlakuan dicatat. Namun, ditambah dengan 0,35 l M asam giberelat
formation was observed in all four pembentukan pucuk kecil diamati pada (GA 3) ( filter-disterilkan) untuk
treatments, even after subculturing keempat perlakuan, bahkan setelah menginduksi pembentukan tunas. Ketika
the embryogenic structures onto mensubkultur struktur embriogenik ke planlet menunjukkan sistem akar yang
fresh conver-sion medium four media konversi baru sebanyak empat berkembang dengan baik, itulah
times. All of the embryogenic kali. Semua struktur embriogenik kenyataannya disubkultur ke media
structures were then transferred to a kemudian dipindahkan ke media konversi cair. Pengaruh GA 3
different conversion medium konversi yang berbeda (tanpa 2iP) Berdasarkan observasi penelitian
(without 2iP) supplemented with ditambah dengan 0,35 lM asam sebelumnya, an Eksperimen dilakukan
0.35 lM gibberellic acid (GA3) giberelat (GA3) (disterilkan dengan untuk mengidentifikasi pengaruh GA 3
(filter-sterilized) to induce shoot filter) untuk menginduksi pembentukan konsentrasi (0 -kontrol, 0,2, 0,35 dan 0,45
formation. When plantlets exhibited tunas. Ketika planlet memperlihatkan l M) untuk menembak pengembangan.
a well-developed root system, they sistem akar yang berkembang dengan Percobaan diulang dua kali. Dalam
were subcultured onto liquid baik, mereka disubkultur ke media percobaan ini, kalus pertama kali
conversion medium. Effect of GA3 konversi cair. disubkultur ke media CRI 72 ditambah
Based on the observations of the dengan 66 l M 2,4-D diikuti oleh media
previous study, an experiment was Pengaruh GA3 Berdasarkan observasi pematangan (Y 3 media tanpa zat
conducted to identify the effect of penelitian sebelumnya, dilakukan pengatur tumbuh) dan media konversi (Y
GA3 concentration (0 -control, 0.2, percobaan untuk mengetahui pengaruh 3 medium ? 5 l M BA dan 0.1 l M 2,4-D,
0.35 and 0.45 lM) for shoot konsentrasi GA3 (0-kontrol, 0,2, 0,35 dengan atau tanpa GA 3). Kultur
development. The experiment was dan 0,45 lM) terhadap perkembangan diinkubasi dalam kondisi yang dijelaskan
repeated two times. In these tunas. Percobaan diulang dua kali. atas. Berdasarkan hasil percobaan ini
experiments, calli were first Dalam percobaan ini, kalus pertama kali yang lain percobaan dilakukan untuk
subcultured onto CRI 72 medium disubkultur ke media CRI 72 ditambah menguji tingkat tambahan GA 3 (0,45
supplemented with 66 lM 2,4-D dengan 66 lM 2,4-D diikuti oleh media sebagai kontrol, 0,75, 1,0, 1,5, 2.0 l M)
followed by maturation medium (Y3 pematangan (media Y3 tanpa zat untuk mengidentifikasi konsentrasi
medium devoid of any growth pengatur tumbuh) dan media konversi optimal GA 3 tentang regenerasi
regulators) and conversion medium (media Y3? 5 lM BA dan 0,1 lM 2,4 -D, tanaman. Efek gabungan dari 2iP dan GA
(Y3 medium ? 5 lM BA and 0.1 lM dengan atau tanpa GA3). Kultur 3 Berdasarkan hasil di atas, kombinasi
2,4-D, either with or without GA3). diinkubasi dalam kondisi yang 2iP dan GA 3 diuji untuk regenerasi
The cultures were incubated under dijelaskan di atas. Berdasarkan hasil tanaman. Struk embriogenik tanaman
the conditions described above. percobaan ini dilakukan percobaan lain yang berkembang pada media
Based on the results of this untuk menguji kadar tambahan GA3 pematangan adalah subkultur. tured ke
experiment another experiment was (0,45 sebagai kontrol, 0,75, 1,0, 1,5, 2,0 tiga media konversi yang berbeda (Y 3
conducted to test additional levels of lM) untuk mengetahui konsentrasi GA3 media dengan; 5 l M BA dan 0.1 l M 2,4-
GA3 (0.45 as the control, 0.75, 1.0, yang optimum pada regenerasi tanaman. D; 5 l M BA dan 0.1 l M 2,4-D? 0.35 l M
1.5, 2.0 lM) to identify the optimum Efek gabungan dari 2iP dan GA3 GA 3; 5 l M BA dan 0.1 l M 2,4- D? 0.35
concentration of GA3 on plant Berdasarkan hasil diatas maka l M GA 3? 5 l M 2iP). Kultur diinkubasi
regeneration. Combined effect of dilakukan pengujian kombinasi 2iP dan dalam kondisi yang dijelaskan di atas.
2iP and GA3 Based on the above GA3 untuk regenerasi tanaman. Analisis statistik Setelah 10 minggu
results, a combination of 2iP and Struktur embriogenik yang berkembang inisiasi kultur, jumlah kalus yang
GA3 was tested for plant pada medium maturasi disubkulasikan dihasilkan (dari ovarium yang dikultur)
regeneration. The embryogenic struc- ke dalam tiga media konversi yang dengan perlakuan yang berbeda tercatat.
tures that developed on maturation berbeda (media Y3 dengan; 5 lM BA Jumlah tunas yang dihasilkan pada setiap
medium were subcul-tured onto three dan 0,1 lM 2,4-D; 5 lM BA dan 0,1 lM percobaan regenerasi juga dicatat. Data
different conversion media (Y3 2,4-D? 0,35 lM GA3; 5 lM BA dan 0,1 dianalisis menggunakan paket statistik
medium with; 5 lM BA and 0.1 lM lM 2,4-D? 0,35 lM GA3? 5 lM 2iP). SAS (SAS Institute 1999 ). Analisis
2,4-D; 5 lM BA and 0.1 lM 2,4-D ? Kultur diinkubasi dalam kondisi yang varians Chi-square atau kemungkinan
0.35 lM GA3; 5 lM BA and 0.1 lM dijelaskan di atas. Analisis statistik maksimum dilakukan dengan
2,4-D ? 0.35 lM GA3 ? 5 lM 2iP). Setelah 10 minggu inisiasi kultur, menggunakan prosedur Proc CatMod dari
The cultures were incubated under jumlah kalus yang dihasilkan (dari PC-SAS. Cara pengobatan dibandingkan
the conditions described above. ovarium yang dikultur) dalam perlakuan dengan menggunakan SE, interval
Statistical analysis After 10 weeks yang berbeda ditentukan kepercayaan 95% atau koefisien kontras
of culture initiation, number of calli ortogonal, jika sesuai (Compton 1994 ).
pro-duced (from cultured ovaries) in tercatat. Jumlah tunas yang dihasilkan
different treatments was recorded. pada setiap percobaan regenerasi juga
Number of shoots produced in each dicatat. Data dianalisis menggunakan
of the regeneration experiments was paket statistik SAS (SAS Institute
also recorded. The data were 1999). Analisis varians Chi-square atau
analysed using SAS statistical kemungkinan maksimum dilakukan
package (SAS Institute 1999). Chi- dengan menggunakan prosedur Proc
square or Maximum likelihood CatMod dari PC-SAS. Cara pengobatan
analysis of variance was conducted dibandingkan dengan menggunakan SE,
using the Proc CatMod procedures of interval kepercayaan 95% atau koefisien
PC-SAS. Treatment means were kontras ortogonal, jika sesuai (Compton
compared using SE, 95% confidence 1994).
intervals or orthogonal contrast
coeffi-cients, where appropriate
(Compton 1994).