Laporan Pemeriksaan TPHA

Tanggal :

Tujuan : Untuk mendeteksi antibodi terhadap Treponema pallidum dalam

serum atau plasma manusia.

Metode : Hemaglutinasi tidak langsung (IHA)

Prinsip : Reagen TPHA ini digunakan untuk mendeteksi antibodi

Treponema pallidum pada serum manusia dengan menggunakan
metode hemaglutinasi tidak langsung (IHA). Eritrosit burung yang
diawetkan dan dilapisi dengan antigen dari Treponema pallidum
patogen (Nichol’s Strain). Pada uji tersebut akan menimbulkan
aglutinasi apabila direaksikan dengan antibodi spesifik untuk
Treponema pallidum dan menunjukan reaksi pada plate mikrotiter.

Alat dan bahan : 1. Plate mikrotiter berbentuk U

2. Mikropipet 12 ul, 25ul,75ul, dan 190ul.

3. Tissue

4. Waste

5. Sel uji (eritrosit burung yang sudah direkatkan dengan ekstrak

Treponema pallidum)

6. Sel kontrol (eritrosit burung yang tidak direkatkan dengan

ekstrak Treponema pallidum)

7. serum kontrol positif

8. serum kontrol negatif

Cara Kerja : KUALITATIF

1. Siapkan alat dan bahan

2. Masukkan 190ul regaen pengencer ke well 1
3. Tambahkan 10ul serum ke well 1
4. Dengan menggunakan mikropipet, homogenkan larutan pada
well 1, lalu masing-masing sebanyak 25ul dipipet ke dalam well
2 dan 3
 5. Pastikan sel kontrol dan sel uji homogen secara menyeluruh,
tambahkan 75ul sel kontrol ke well 2 dan tambahkan 75ul sel
tes ke dalam well 3.
6. Dimasukan 25ul serum kontrol positif ke well 4 dan 5 kemudian
ditambahkan sel kontrol pd well 4 dan sel uji pada well 5.
7. Dimasukan 25ul serum kontrol negatif ke well 6 dan 7 kemudian
ditambahkan sel kontrol pd well 6 dan sel uji pada well 7.
8. Homogenkan campuran pada masing-masing well dengan
menggoyangkan plate secara perlahan.
9. Inkubasi selama 45-60 menit pada suhu kamar.
10. Hati-hati! Hindari plate mikrotiter dari panas, sinar matahari
langsung dan getaran.
11. Baca hasil. Hasil akan stabil selama 24 jam jika plate mikrotiter
terjaga dan diperlakukan seperti cara kerja no. 7.

Interpretasi Hasil :

HASIL SEL UJI SEL KONTROL

Positif kuat Seluruh sususan well Tidak terjadi aglutinasi
menutupi dasar well
Positif lemah Susunan sel menutupi kira- Tidak terjadi aglutinasi
kira 1/3 bagian dari dasar
well
Tak tentu Susunan sel membuka Tidak terjadi aglutinasi
bagian tengah
Negatif Sel-sel tersusun rapat di Tidak terjadi aglutinasi
dasar khas dengan bagian
tengah yang encer
Tidak Spesifik Reaksi positif Reaksi positif
Hasil :

Keterangan : Well 1 = Pengenceran diluet dan sampel

Well 2 = Sampel + sel kontrol

Well 3 = Sampel + sel uji

Well 4 = Positif kontrol + sel kontrol

Well 5 = Positif kontrol + sel uji

Well 6 = Negatif kontrol + sel kontrol

Well 7 = Negatif kontrol + sel uji

Kesimpulan : Berdasarkan hasil pemeriksaan didapatkan hasil pada well 2

menunjukan tidak terjadi aglutinasi dan well 3 menunjukan susunan
sel menutupi dasar well. Hadil tersebut menunjukan sampel serum
pasien mempunyai antibodi terhadap Treponema pallidum.