ANALISIS SAMPEL BTM

Kostiawan Sukamto, MT
ANALISIS PEWARNA SINTESIS

 Prinsip uji kualitatif bahan zat warna dalam contoh makanan/minuman

diserap oleh benang wool dalam suasana asam dengan pemanasan
kemudian dilakukan kromatografi.
 Setelah dilakukan uji kualitatif, dilakukan uji kuantitatif menggunanakan
instrument Spektrofotometri UV-Visibel untuk menentukan konsentrasi dari
zat pewarna tersebut.
ANALISIS PEWARNA SINTESIS

 Preparasi Sampel Kualitatif

✓ Memasukan ± 10 mL sampel cair atau 10 – 25 gram sampel padatan ke
dalam gelas piala 100 ml.
✓ Diasamkan dengan menambahkan 5 mL Asam asetat 10 %.

✓ Memasukan dan merendam benang wool ke dalam sampel tersebut. d.

Memanaskan dan mendiamkan sampai mendidih (± 10 menit).
✓ Mengambil benang wool, dicuci dengan air dan dibilas dengan aquades.

✓ Menambahkan 25 ml amoniak 10 % ke dalam benang wool yang telah

dibilas tersebut.
ANALISIS PEWARNA SINTESIS

 Preparasi Sampel Kualitatif

✓ Memanaskan benang wool sampai tertarik pada benang wool (luntur).

✓ Benang wool dibuang, larutan diuapkan di atas water bath sampai

kering.
✓ Residu ditambah beberapa tetes metanol, untuk ditotolkan pada kertas
kromatografi yang siap pakai.

 Pembuatan Larutan Baku Pembanding

✓ Pembuatan larutan baku pembanding dibuat dengan menimbang 100
mg Pewarna Sintetis Standar dan dilarutkan dalam 100 mL aquadest
ANALISIS PEWARNA SINTESIS

Identifikasi Sampel dengan KLT

 Plat KLT GF 254

✓ Panaskan plat GF 254 dengan ukuran 4 x 10 cm diatas hot plate

dengan suhu 110 °C selama 15 menit, setelah itu beri tanda 1 cm
diatas dan 1 cm dibawah dengan pensil.

❑ Penjenuhan
✓ Fase gerak berupa n-Butanol : asam asetat : ammonia (10:4:5)
sebanyak 10 mL dimasukan dalam chamber dan dijenuhkan dengan
kertas saring. Penjenuhan selesai setelah eluen telah naik sampai atas
kertas saring.
ANALISIS PEWARNA SINTESIS

Identifikasi Sampel dengan KLT

 Identifikasi pada KLT

✓ Sampel yang telah disiapkan ditotolkan sebanyak 20 𝜇l, 1 cm dari

bawah dengan menggunakan Syringe tiap sampel dan baku
pembanding diberi jarak 1 cm dari tiap pentolan.
✓ Plat yang telah ditotolkan, dimasukan dalam chamber yang telah
dijenuhkan dan ditutup kemudian didiamkan sampai eluen naik ke
batas atas plat.
✓ Setelah itu amati dibawah sinar UV 254 nm dan dihitung nilai Rf-nya.
PEWANALISIS PEWARNA SINTESISARNA

 Preparasi Standart
✓ Membuatan larutan dari 100 mg Pewarna Standar dan dilarutkan

dalam 0,1 liter HCl 0,1 N dan didapat konsentrasi 1000 ppm
kemudian diencerkan dan dibuat enam seri kadar dengan konsentrasi
2, 3, 4, 5, 6, 7 ppm.
ANALISIS PEWARNA SINTESIS

 Preparasi Sampel Kuantitatif

✓ Memasukan ± 10 ml sampel cair atau 10 – 25 gram sampel padatan ke
dalam gelas piala 100 mL.
✓ Diasamkan dengan menambahkan 5 mL asam asetat 10 %.

✓ Memasukan dan merendam benang wool ke dalam sampel tersebut. d.

Memanaskan dan mendiamkan sampai mendidih (± 10 menit).
✓ Mengambil benang wool, dicuci dengan air dan dibilas dengan aquades.

✓ Menambahkan 25 ml amoniak 10 % ke dalam benang wool yang telah

dibilas tersebut.
✓ Memanaskan benang wool sampai warna yang tertarik pada benang wool
luntur kembali.
✓ Warna yang telah ditarik dari benang wool dan masih larut dalam amoniak
kemudian di analisa dengan spektrofotometer UV-Visibel.
ANALISIS PEWARNA SINTESIS

 Pembuatan kurva baku

✓ Seri kadar Pewarna standar diukur panjang gelombang maksimal

menggunakan spektrofotometri UV-Vis, kemudian seri kadar dengan

konsentrasi 2, 3, 4, 5, 6, 7 ppm masing masing diukur absorbansinya
dengan panjang gelombang maksimal, kemudian akan diperoleh kurva
konsentrasi, sebagai blanko digunakan HCl 0,1 N.
ANALISIS PEWARNA SINTESIS

 Penetapan Kadar
✓ Sampel yang telah disiapkan diukur serapannya pada panjang

gelombang 557 nm, dan dihitung kadar pewarna sintesis dalam

sampel dengan kurva kalibrasi persamaan regresi y = ax+b
Perhitungan :
Konsentrasi (ppm) = ppm kurva x (ml ekstrak sampel/1000 ml g sampel)
x 1000 g x FP

*FP = Faktor Pengenceran

PEMANIS

 Uji Kualitatif Pemanis Buatan (Sakarin)

✓ 100 mL Sampel dimasukkan dalam corong pisah, ditambah dengan

H2SO4 10%.
✓ Larutan di ekstraksi 1 kali dengan 25 ml etil asetat.

✓ Lapisan etil asetat disaring dengan Na2SO4 anhidrit dan ditampung

dalam cawan.
✓ Filtrat dikeringkan di atas penangas air.

✓ Disiapkan lempeng tipis dengan ukuran yang sesuai camber yang

berisi eluen.
✓ Standar sakarin ditotolkan pada lempeng tipis.
ANALISIS PEMANIS SINTESIS

 Uji Kualitatif Pemanis Buatan (Sakarin)

✓ Sampel yang telah dikeringkan dilarutkan dengan pelarut campuran

NH4OH: H2O: etanol (5:5:10), beberapa tetes sampel ditotolkan

pada lempengan dengan bantuan mikrokapiler (2-4 pengambilan).
✓ Lempengan dimasukkan dalam camber kromatrografi hingga
mencapai batas garis.
✓ Lempengan dikeringkan dan dilihat dibawah sinar UV.

✓ Warna ungu menunjukkan sampel positif mengandung sakarin.

ANALISIS PEMANIS SINTESIS

 Uji Kualitatif Pemanis Buatan (Siklamat)

✓ 25 ml sampel dimasukkan dalam gelas piala dan diencerkan dengan
aquades dengan perbandingan 1 : 1, kemudian ditambahkan sepucuk
sendok arang aktif untuk menghilangkan warna contoh, kemudian
sampel disaring.
✓ Ditambahkan 10 ml HCl 10% ke dalam filtrat dan ditambahkan 10 mL
BaCl2 10%, kemudian dikocok.
✓ Filtrat dibiarkan selama 30 menit, kemudian disaring dengan kertas
Whatman 42 dan ditambahkan 10 mL Natrium Nitrit 10%.
✓ Larutan dipanaskan di atas penangas air.

✓ Apabila timbul endapan putih, berarti Siklamat Positif

ANALISIS PEMANIS SINTESIS

 Uji Kuantitatif Pemanis Buatan (Sakarin)

✓ 50 mL sampel dipipet dan ditambahkan 2 mL HCl 5%.

✓ Endapan diekstraksi sebanyak 3 kali dengan larutan campuran

chloroform dan etanol masing-masing 30 mL, 20 mL, dan 20 mL.

✓ Hasil ekstraksi dikeringkan.

✓ Ditambahkan 50 mL aquadest.

✓ Sampel dititrasi dengan NaOH 0,1N menggunakan indikator BTB

(Brom Thimol Blue).

✓ Titik akhir titrasi ditandai dengan warna biru sebagai pertanda bahwa

zat-zat tersebut telah habis bereaksi

ANALISIS PEMANIS SINTESIS

 Uji Kuantitatif Pemanis Buatan (Siklamat)

✓ 25 ml sampel dimasukkan dalam gelas piala dan diencerkan dengan
aquades dengan perbandingan 1 : 1, kemudian ditambahkan sepucuk
sendok arang aktif untuk menghilangkan warna contoh, kemudian
sampel disaring.
✓ Ditambahkan 10 ml HCl 10% ke dalam filtrat dan ditambahkan 10 ml
BaCl2 10%, kemudian dikocok.
✓ Filtrat dibiarkan selama 30 menit, kemudian disaring dengan kertas
whatmann 42 dan ditambahkan 10 ml Natrium Nitrit 10%.
✓ Larutan dipanaskan di atas penangas air.

✓ Endapan yang terjadi, disaring, dicuci, dikeringkan, dan ditimbang

ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kualitatif Zat Pengawet Dalam Makanan

❑ Pembuatan Larutan Baku Asam Oksalat 0,1 N

✓ Asam oksalat ditimbang sebanyak 0,225 g, dimasukkan ke dalam

labu takar.
✓ Setelah itu, dilarutkan dengan sedikit akuades dan setelah larut
dihimpitkan hingga tanda batas dan dihomogenkan.
❑ Pembuatan Larutan NaOH 0,05 N

✓ NaOH ditimbang sebanyak 0,201 g, kemudian dimasukkan

kedalam labu takar.
✓ Setelah itu, dilarutkan dengan sedikit akuades dan setelah larut
dihimpitkan hingga tanda batas dan dihomogenkan
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kualitatif Zat Pengawet Dalam Makanan

❑ Standarisasi Larutan NaOH 0,05 N

✓ Larutan NaOH dipipet sebanyak 25 mL dan dimasukkan ke dalam

Erlenmeyer selanjutnya ditambahkan indikator PP dan dititrasi dengan
larutan asam oksalat kemudian dicatat volume asam oksalat yang
digunakan.
❑ Pembuatan Pereaksi Asam Kromatopat

✓ Asam kromatopat ditimbang sebanyak 0,005 g kemudian

dimasukkan ke dalam gelas kimia yang telah berisi 9 mL H2SO4 98%
dan akuades 1 mL.
✓ Setelah itu, diaduk hingga homogen (Ditjen POM, 1979).
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kualitatif Zat Pengawet Dalam Makanan

❑ Uji Senyawa Boraks

✓ Sampel ditimbang sebanyak 10 gram dan dipotong-potong kecil

lalu di oven pada suhu 120 °C selama 6 jam, kemudian sampel

dimasukkan ke dalam cawan porselin, dipijarkan dalam tanur pada
suhu 800 °C selama 3 jam.
✓ Sisa pemijaran ditambahkan 1-2 tetes asam sulfat pekat dan 5-6

tetes metanol kemudian dibakar.

✓ Bila timbul nyala hijau maka menandakan adanya senyawa boraks

dalam sampel tersebut (Uji Nyala).

ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kualitatif Zat Pengawet Dalam Makanan

❑ Uji Senyawa Formalin

✓ Dipipet sebanyak 50 mL akuades kemudian dididihkan di dalam gelas

✓ kimia.

✓ Sampel yang telah dikeringkan, direndam dalam akuades tersebut selama

5 menit, setelah itu dimasukkan pereaksi asam kromatropat sebanyak 3 mL
kemudian diaduk dan disaring, hingga terbentuk residu dan filtrat.
✓ Filtratnya diambil dan dipanaskan dengan akuades baru di dalam gelas
kimia 500 mL.
✓ Dipanaskan kembali di atas penangas air selama 5 menit.

✓ Produk yang mengandung formalin akan ditunjukkan dengan berubahnya

warna air dari bening menjadi merah muda menjadi ungu.
✓ Semakin ungu kadar formalin semakin tinggi.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kualitatif Zat Pengawet Dalam Makanan

❑ Uji Senyawa Natrium Benzoat

✓ Sampel ditimbang sebanyak 10 gr ditambahkan 300 mL akuades

kemudian dihancurkan dengan waring blender selama 2 menit.

✓ Ditambahkan NaOH 10% hingga basa dibiarkan selama 2 jam kemudian
disaring.
✓ Filtrat 50 mL dimasukkan kedalam corong pisah, ditambahkan HCl 1 M

hingga asam (uji dengan kertas lakmus), diekstraksi dengan 3x15 mL eter.
✓ Lapisan air diekstraksi kembali dengan eter sebanyak 2 kali.

✓ Ekstrak eter dicuci sebanyak 3 kali masing-masing dengan 5 mL akuades.

ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kualitatif Zat Pengawet Dalam Makanan

❑ Uji Senyawa Natrium Benzoat

✓ Ekstrak eter yang telah dicuci dimasukkan kedalam cawan porselin,

diuapkan di atas penangas air.
✓ Residu yang diperoleh dilarutkan dalam akuades.

✓ Setelah itu, dipanaskan 80-85 °C selama 10 menit.

✓ Larutan tersebut ditambahkan dengan beberapa tetes NH3 sampai larutan

menjadi basa, larutan diuapkan untuk menghilangkan kelebihan NH3.
✓ Residu yang tersisa dilarutkan kembali dengan air panas. Setelah itu
ditambahkan beberapa tetes FeCl3 0,5%.
✓ Terbentuknya endapan ferribenzoat yang berwarna salmon (kecoklatan)
menunjukkan adanya asam benzoate.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Boraks Dalam Makanan dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Sebelum menganalisis ada atau tidaknya boraks dalam sampel bakso maka
diperlukan isolasi boraks dalam sampel tersebut.
❑ Sebanyak 5 gram sampel makanan ditambah dengan 20 mL akuades lalu

diblender sampai halus.

❑ Setelah diblender, sampel tersebut dimasukkan ke dalam tabung sentrifusa.

❑ Proses sentrifugasi dilakukan selama 2 menit dengan kecepatan 3000 rpm.

❑ Bagian supernatannya diambil dengan cara disaring dengan kertas saring.

❑ Supernatan yang didapatkan akan digunakan untuk analisis boraks secara

kuantitatif dengan spektrofotometer.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Boraks Dalam Makanan dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Penentuan Panjang Gelombang Maksimum dan Pembuatan Kurva Standar
Boraks
✓ Larutan induk boraks dibuat dengan menimbang 50 mg serbuk boraks yang
kemudian dilarutkan dengan 100 mL akuades sehingga konsentrasi larutan
menjadi 500 μg/mL.
✓ Larutan induk boraks 500 μg/mL tersebut diencerkan menjadi konsentrasi 5
μg/mL, 10 μg/mL, 20 μg/mL, 30 μg/mL, 60 μg/mL dan 80 μg/mL dengan
menambahkan akuades.
✓ Selanjutnya sebanyak 0,5 mL larutan boraks dari masing-masing konsentrasi
yang sudah dibuat dimasukkan ke dalam cawan porselin dan ditambah 0,5
mL larutan NaOH 10%.
✓ Cawan ini kemudian dipanaskan di atas penangas air sampai larutan
kering.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Boraks Dalam Makanan dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Penentuan Panjang Gelombang Maksimum dan Pembuatan Kurva Standar
Boraks
✓ Pemanasan dilanjutkan dengan oven pada suhu 1000 ± 50 °C selama 5
menit.
✓ Larutan ditambah 1,5 mL larutan kurkumin 0,125% lalu dipanaskan sambil
diaduk selama ± 3 menit.
✓ Setelah dingin larutan ditambah 1,5 mL larutan asam sulfat dan asam
asetat (1:1), sambil diaduk sampai tidak ada warna kuning baik pada
cawan maupun pada pengaduk lalu didiamkan selama ± 8 menit.
✓ Larutan ditambah sedikit etanol kemudian disaring dengan kertas saring lalu
dimasukkan ke dalam labu ukur 25 mL dan diencerkan dengan etanol
sampai garis tanda.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Boraks Dalam Makanan dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Penentuan Panjang Gelombang Maksimum dan Pembuatan Kurva Standar
Boraks
✓ Untuk penentuan panjang gelombang maksimum digunakan pada larutan

standar boraks 5 μg/mL dari boraks murni.

✓ Larutan ini diamati serapannya pada panjang gelombang antara 400

sampai 600 nm pada alat spektrofotometer UV-Vis.

✓ Penentuan kurva standar boraks dilakukan dengan mengukur nilai

serapannya pada panjang gelombang maksimum yang telah diperoleh.

✓ Konsentrasi boraks yang digunakan yaitu 5 μg/mL, 10 μg/mL, 20 μg/mL,
30 μg/mL, 60 μg/mL dan 80 μg/mL
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Boraks Dalam Makanan dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Penentuan Kadar Boraks pada Sampel

✓ Supernatan hasil isolasi boraks dalam sampel dipipet sebanyak 0,5 mL lalu

ditambahkan sebanyak 0,5 mL larutan NaOH 10% dalam cawan porselin.

✓ Cawan ini kemudian dipanaskan di atas penangas air sampai larutan
kering.
✓ Pemanasan dilanjutkan dengan oven pada suhu 1000 ± 50 °C selama

5 menit.
✓ Setelah kering, kedalam cawan porselin tersebut ditambahkan 1,5 mL
larutan kurkumin 0,125% dan dipanaskan sambil diaduk selama ± 3 menit.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Boraks Dalam Makanan dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Penentuan Kadar Boraks pada Sampel

✓ Setelah dingin, kedalam cawan tersebut ditambahkan 1,5 mL larutan

asam sulfat dan asam asetat (1:1), sambil diaduk sampai tidak ada
warna kuning baik pada cawan maupun pada pengaduk lalu diamkan
selama ± 8 menit.
✓ Larutan yang terbentuk lalu ditambah sedikit etanol absolut kemudian
disaring dengan kertas saring lalu dimasukkan ke dalam labu ukur 25
mL dan diencerkan dengan etanol sampai garis tanda.
✓ Hasil saringan larutan yang sudah dipreparasi tersebut dikumpulkan
dan diamati serapannya pada panjang gelombang 428 nm pada alat
spektrofotometer UVVIS.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Formalin dalam Makanan dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Larutan standar dibuat dengan mengencerkan larutan induk formaldehid

37% (formalin) konsentrasi 0; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5, dan 3,0 ppm.
❑ Masing-masing 5 mL larutan dimasukkan ke dalam tabung reaksi,

ditambahkan 5 mL asam kromatofat 0,5% dalam asam sulfat 60%.

❑ Larutan dipanaskan selama 15 menit pada suhu 100°C dan diukur
serapannya menggunakan Spektrofotometri UV-Vis pada panjang
gelombang 520 nm, kemudian dibuat kurva kosentrasi larutan standar vs
absorbansinya.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Formalin dalam Makanan dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Sampel yang telah dihaluskan ditimbang sebanyak 10 g kemudian

dimasukkan ke dalam gelas kimia dan ditambahkan 100 mL aquabidest.

❑ Ke dalam tabung reaksi dimasukkan 5 mL filtrat dan 5 mL asam

kromatofat 0,5% dalam asam sulfat 60%.

❑ Selanjutnya dipanaskan selama 15 menit pada suhu 100°C dan diukur
serapannya menggunakan Spektrofotometri UV-Vis pada panjang
gelombang 520 nm.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Natrium Benzoat dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Sebanyak 5 g sampel ditimbang dengan teliti dan dimasukkan ke dalam
gelas kimia 100 mL kemudian ditambahkan larutan NaCl jenuh hingga
100 mL.
❑ Ditambahkan dengan HCl sampai bersifat asam (kertas lakmus biru
menjadi merah) selanjutnya dihomogenkan sampai sempurna.
❑ Dimasukkan ke dalam corong pemisah, pertama diesktrak dengan 35 mL
dietil eter terbentuk 2 lapisan dimana lapisan atas/lapisan eter
dipisahkan ke dalam gelas erlenmeyer sedangkan lapisan bawah
❑ Diekstrak kembali dengan 25 mL dietil eter dan seterusnya ekstraksi
diulangi lagi dengan 20 mL, 15 mL dietil eter.
ANALISIS PENGAWET MAKANAN SINTESIS

Uji Kuantitatif Natrium Benzoat dengan Spektrofotometer UV-Vis

❑ Campuran lapisan atas/ekstrak eter dimasukkan ke dalam corong
pemisah dan dicuci dengan 25 mL HCl 0,1%.
❑ Lapisan bawah dibuang dan lapisan atas dicuci lagi dengan 20 mL HCl
0,1% dan seterusnya pencucian dilakukan dengan 15 mL HCl 0,1%.
❑ Ekstrak eter dimasukkan ke dalam labu takar 100 mL dan dipaskan
sampai garis batas dengan etanol-air dan dihomogenkan.
❑ Sebanyak 25 mL ekstrak eter diencerkan kedalam labu takar 100 mL
dipaskan sampai garis batas dan dihomogenkan
❑ Diukur dengan Spektrofotometer UV-Vis pada panjang gelombang
223,4 nm
ANALISIS ANTIKEMPAL

❑ Bahan antikempal umumnya mengandung logam alkali (kalium dan

natrium).
❑ Alkali tanah (magnesium dan kalsium), aluminium dengan anion-anion
silikat, dan fosfat.
❑ Sehingga untuk analisisnya dilakukan analisis terhadapa kation-kation
dan anionnya.
ANALISIS ANTIKEMPAL

Silika dengan Metode gravimetri

❑ Dimulai dengan preparasi sampel yakni sampel padat dikeringkan,

digiling dalam mortar dan ditimbang.

❑ Sampel dimasukkan dalam krus platina yang tidak tertutup dan

dipanaskan dengan api sampai kertas gosong.

❑ Krus ditutup dan dibakar dengan hati-hati, kemudian ditutup semua dan
dimasukkan dalam oven dengan suhu 1150 – 1200 °C.
❑ Didinginkan dalam desikator dan ditimbang (W) diulangi sampai berat
konstan.
ANALISIS ANTIKEMPAL

Silika dengan Metode gravimetri

❑ Ditambahkan 1 mL air, 2 tetes asam sulfat, dan 10 ml HCl, kemudian

diuapkan sampai kering dan dipanaskan selama 2 menit pada suhu

1050 – 1100 0C, didinginkan dalam desikator dan ditimbang (B).
❑ Dihitung gram SiO2 dalam sampel = W-B
ANALISIS ANTIKEMPAL

Aluminium secara Kolometri

Penentuan aluminium secara kolometri ini menggunakan beberapa pereaksi
sebagai berikut :
a. Larutan standar aluminium (100 µg Al/ml), 0.100 g/logam Al murni
dalam beaker 30 ml, kemudian ditambahakan HCl dengan
perbandingan 1 : 1. Larutan campuran ditutup dengan kaca arloji dan
dipanaskan sampai logam Al larut secara sempurna, kemudian
diencerkan dengan 1 liter air.
b. Larutan kerja 40 µg/ml, diambil larutan stok sebayak 20 ml kemudian
diencerkan sampai tepat 500 ml.
ANALISIS ANTIKEMPAL

Aluminium secara Kolometri

Penentuan aluminium secara kolometri ini menggunakan beberapa pereaksi
sebagai berikut :
c. Larutan aluminium, dibuat dengan melarutkan masing-masing larutan
0,5 g ammonium aurintrikarboksilat dalam 100 ml, 10 g acacia (gum
arab) dalam 200 mldan 100 g NH4CH3COO dalam 400 ml. Larutan
acacia disaring dan ditambahkan 56 ml HCl ke dalam NH4CH3COO
dan pH diatur sampai dengan 4,5 dengan HCl/NH4OH. Ketiga larutan
kemudian dicampurkan dan diencerkan sampai 1 liter dengan akuades.
ANALISIS ANTIKEMPAL

Aluminium secara Kolometri

Penentuan aluminium secara kolometri ini menggunakan beberapa pereaksi
sebagai berikut :
d. Larutan anti foaming dibuat dengan mendispersikan 0,03 g silicon
defoamer dalam 100 ml air.
e. Larutan asam thioglycolik, dibuat dari pengeceran 1 ml HSCH2COOH
dengan air sampai 100 ml.
ANALISIS ANTIKEMPAL

Aluminium secara Kolometri

Cara analisisnya sebagai berikut :
❑ Larutan pereaksi telah selesai dibuat, kemudian dilakukan pembuatan

kurva standar dengan membuat larutan standar dengan berbagai

kadar yakni, 0,4; 20; 40; 60 dan 80 µg Al dalam labu ukur 100 mL.
❑ Pada tahap penentuan Aluminium dimulai dengan memindahkan aliquot
(20 ml mengandung kurang dari 80 µg Al) sampel kedalam labu ukur
100 ml, kemudian diencerkan sampai 20 ml dengan air dan ditambah 2
ml larutan d; 0,5 larutan c; dan 10 ml larutan b.
ANALISIS ANTIKEMPAL

Aluminium secara Kolometri

Cara analisisnya sebagai berikut :
❑ Labu ukur yang berisi larutan diletakkan dalam air mendidih selama 20

menit.
❑ Didinginkan selama 30 menit dan diencerkan dengan air sampai volume
100 ml.
❑ Pada tahap akhir larutan standar dengan berbagai kadar yakni, 0,4;

20; 40; 60 dan 80 µg Al dibaca absorbansinya dan ditentukan dengan

kurva standar kemudian diketahui konsentrasi dari aluminium.
ANALISIS PENYEDAP RASA

Uji Kuliatatif MSG Metode Spot Test

 1 mL larutan sampel

 Tambahkan 1 mL Triktohidindena hidrat TS dan 100 mg Natrium Asetat

 Masukkan ke dalam Waterbath selama 10 menit

 Bila timbul warna ungu maka +MSG

ANALISIS PENYEDAP RASA

Uji kualitatif dengan kromatografi kertas berdasarkan pengujian mutu

MSG menurut standar SII (standar industri Indonesia)
Pereaksi :
 Larutan contoh: 0,5±0,05 gram contoh dilarutkan dalam air hingga 1

liter.
 Larutan standar: 0,393±0,001 gram asam glutamat (kemurnian tidak
kurang dari 99,5%) dinetralkan dengan NaOH p.a dan diencerkan.
 Pelarut: Campuran butanol asam asetat pekat dan air dalam
perbandingan volume 4:2:1.
 Pembangkit warna: Larutan 0,2% ninhidrin dalam alcohol 95% v/v.
ANALISIS PENYEDAP RASA

Uji kualitatif dengan kromatografi kertas berdasarkan pengujian mutu MSG

menurut standar SII (standar industri Indonesia)
Cara Kerja :
 Isikan pelarut kedalam wadahnya dalam bak kromatografi dan dibiarkan 12
jam.
 Pada kertas kromatografi dibuat garis pada jarak 25 mm dari tepi dengan
pensil.
 Teteskan 0,025 ml contoh dan larutan standar pada garis tersebut dengan
jarak masing-masing 10 mm dan 25 mm, dan biarkan hingga kering.
 Kromatografi dilakukan dengan cara descending, yaitu pelarut bergerak dari
bawah keatas.
ANALISIS PENYEDAP RASA

Uji kualitatif dengan kromatografi kertas berdasarkan pengujian mutu MSG

menurut standar SII (standar industri Indonesia)
Cara Kerja :
 Tepi yang diletakkan di bagian bawah dan ujungnya dicelupkan dalam
larutan (10 mm), selama 8 jam.
 Kertas kemudian diangkat dan digantung sehingga semua pelarut menguap.

 Seluruh kertas kemudian disemprotkan dengan larutan nihidrasin dan setelah

beberapa menit dikeringkan dalam oven 105 sampai 1100 C selam 5 menit.
 Pada kertas akan tampak spot biru dan tampak pula batas akhir pelarut.

 Pada pusat tiap spot diberi tanda jarak antara titik awal dengan pusat spot
dan dengan batas akhir pelarut di ukur dengan teliti.
 Harus hanya ada satu spot biru dari larutan contoh dan nilai Rf contoh harus
sama nilai Rf standar.
ANALISIS PENYEDAP RASA

Uji Kuantitatif Metode Titrasi Bebas Air

 Timbang 250 mg sampel secara teliti

 Basahkan dengan air, larutkan dalam asam asetat glasial 100 mL,

 Titrasi dengan Asam perklorat 0,1 N .

 Tiap 0,1 N asam perklorat setara dengan 9,356 mg Monosodium

glutamat.
ANALISIS PENYEDAP RASA

Penentuan kadar MSG metode Titrasi Bebas Air

 Persamaan Reaksi

MSG + CH3COOH → Asam Glutamat + CH3COONa

Asam Glutamat + HClO4 → Monochlorida glutamat + H2O

 Perhitungan kadar
[V x N] HClO4 x BE
% MSG = x 100 %
𝑚.𝑠𝑎𝑚𝑝𝑙𝑒
ANALISIS PENYEDAP RASA

Uji Kuantitatif Metode Metode Titrasi Kjedhal

 0,4 gram contoh MSG dipanasi dalam labu kjedhal dengan 0,5 gram

Cu-sulfat, 4,5 gram kalium sulfat dan 20 ml H2SO4 (p) sampai cairan
menjadi jernih.
 Pemanasan dilanjutkan hingga 3 jam, lalu dinginkan.

 Larutan dipindahkan ke dalam labu destilasi, cuci dengan air suling dan
encerkan hingga volume 200 ml,
 Tambahkan 80 ml NaOH 30 %,

 Amonia yang terdestilasi ditampung dalam 25 ml H2SO4 0,1 N dan

indikator merah metil.

ANALISIS PENYEDAP RASA

Uji Kuantitatif Metode Metode Titrasi Kjedhal

 Bila 2/3 volume larutan telah terdestilasi, titer kelebihan H2SO4 dengan

NaOH 0,1 N. dan

 hitung kadar kemurnian MSG

mEk N = [V x N] H2SO4 – [VxN] NaOH

Mg N = mEk N x BE N
𝑚𝑔 𝑁
%N = 𝑥 100%
𝑚𝑔 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑙𝑒
% MSG = % N x fk N
ANALISIS PENGEMULSI

Analisis Pengemulsi dengan metode kromatografi lapis tipis

Prinsip
 Pengemulsi bersama dengan lemak diekstraksi dengan pelarutan
kloroform dan methanol pada penambahan sejumlah air, kloroform
mengandung lemak dan pengemulsi dapat dipisahkan.
 Lapisan kloroform diuapkan sampai kering kemudian pengemulsi
diekstraksi dengan methanol.
 Ektraks methanol digunakan untuk analisis dengan metode TLC.

 Bahan yang digunakan: kloroform, methanol, larutan magnesium klorida

1 m, 1,2 dikloroetana, sikloheksana, butana 2 one A>R, asam asetat
glacial, solven
ANALISIS PENGEMULSI

Analisis Pengemulsi dengan metode kromatografi lapis tipis

Pengembangan kromatogram:
 0,5mL larutan pengemulsi ditotolkan pada plat, dikeringkan pada suhu 100
°C selama 10 menit.
 Kira-kira 25 ml pelarut yang dibutuhkan sebagai fase gerak. Totolan atau
spot akan bergerak ke atas.
 Pelarut kedua juga digerakkan pada kondisi yang sama, tetapi pada sisi
sebaliknya.
 Penandaan spot ditandai oleh penyemprotan dengan penggunaan larutan
0,02 % dibromofluoresein dalam 96% etanol sampai berwarna oranye pucat.
 Keringkan dengan cepat pada suhu 100 °C dan dilihat di bawah sinar UV.
ANALISIS ANTIOKSIDAN (Asam Askorbat)

Penentuan Kadar Asam Total

 Penentuan konsentrasi asam total dalam larutan sampel asam dilakukan

dengan cara 5,0 mL larutan sampel ditambah 2 tetes indikator

fenolftalein kemudian dititrasi dengan larutan standar NaOH 0,5 N
yang telah di standarisasi dengan larutan standar H2C2O4 0,1 N.
 Titrasi dilakukan hingga terbentuk warna merah muda pada larutan dan

titrasi diulang sebanyak 3 kali.

ANALISIS ANTIOKSIDAN (Asam Askorbat)

Uji Kuantitatif asam askorbat dalam sampel

 Preparasi larutan standar asam askorbat dengan melarutkan 25,0 mg

asam askorbat dalam labu takar 250 mL sehingga memiliki konsentrasi

100 ppm.
 Kemudian dibuat larutan standar dengan konsentrasi 26 ppm, 28 ppm,

30 ppm, 32 ppm, 34 ppm.

 Ditentukan panjang gelombang maksimum dari larutan standar asam

askorbat dengan spektrofotometer UVVis pada berbagai konsentrasi.

 Dibuat kurva absorbansi pada panjang gelombang maksimum pada

larutan standar.
ANALISIS ANTIOKSIDAN (Asam Askorbat)

Uji Kuantitatif asam askorbat dalam sampel

 Sampel diencerkan hingga absorbansi yang terbaca oleh

spektrofotometer UV-Vis tercapai konsentrasi yang masuk dalam range

kurva standar yang sudah ada.
 Tentukan konsentrasi asam askorbat.