Jurnal Clinical dan screning diagnosis Thalassemia

Introduction

Selama dekade terakhir, pengetahuan kami tentang diagnosis klinis dan

manajemen thalassemia telah berkembang pesat. Dalam beberapa tahun terakhir,
perubahan paling kritis dalam diagnosis klinis adalah klasifikasi baru yang telah
disederhanakan dan membantu membimbing manajemen klinis dari thalassemia
intermedia (TI) menjadi tidak tergantung transfusi thalassemia (NTDT) dan
thalassemia mayor (TM) menjadi thalassemia yang bergantung pada transfusi
(TDT) berdasarkan kebutuhan transfusi darah secara teratur untuk bertahan hidup.
Klasifikasi baru ini telah memasukkan beberapa bentuk sindrom talasemia lainnya
disamping penyakit b-thalassemia (b-TI dan b-TM) yang telah menjadi prototipe
sindrom talasemia selama bertahun-tahun. Selain itu, teknologi medis
untukskrining dan diagnosis pasti ciri dan penyakit thalassemia juga telah
ditingkatkan dan merupakan subjek ulasan kami di artikel ini. Namun,
klasifikasinya talasemia terus bergantung pada presentasi klinis dan tingkat
keparahannya. Tes diagnostik, termasuk analisis molekuler, hanya dapat memandu
tetapi belum menggantikan evaluasi klinis dan penilaian

Klasifikasi klinisi talasemia

Spektrum klinis sindroma thalassemia berdasarkan kebutuhan regularnya transfusi

darah menjadi non-transfusion dependent thalassemia (NTDT) dan tergantung
transfusi thalassemia (TDT). Panah menunjukkan spektrum heterogenitas klinis
dari asimtomatik (atau dengan anemia ringan) pada pembawa talasemia (atau
talasemia minor) hingga ringan, penyakit thalasemia sedang dan berat, NTDT dan
TDT. Istilah sebelumnya dari thalassemia intermedia (TI) dan thalassemia mayor
(TM) ditampilkan di dalam panah dan mengacu pada konsep serupa tentang
keparahan klinis pada sindrom talasemia. (Diubah dari Taher A, Vichinsky E,
MusallamK, dkk. Pendahuluan [Bab 1]. Masuk: Weatherall D, editor. Pedoman
pengelolaan thalassemia yang tidak tergantung transfusi (NTDT). Nicosia (Siprus):
Thalasemia Federasi Internasional; 2013. hal. 1; dengan izin.)
Gangguan hemoglobin (Hb) dicirikan sesuai dengan defek patologis pada produksi
rantai globin; cacat kuantitatif atau "thalassemia," terutama a-thalassemia dan b-
thalassemia, dan cacat kualitatif, yaitu hemoglobinopati (atau struktural Varian
Hb), dan, terakhir, keturunan janin Hb. Interaksi dari 3 jenis ini cacat globin
mengakibatkan beragam sindrom talasemia dan terkait penyakit 1 Thalassaemia
memiliki spektrum keparahan klinis yang luas, yang sebelumnya digunakan untuk
klasifikasi klinis talasemia menjadi TM, TI, dan talasemia minor. Itu istilah TM
menggambarkan pasien yang mengalami anemia berat yang muncul di awal
kehidupan dan membutuhkan transfusi darah seumur hidup dan kelasi besi,
sedangkan talasemia minor, di ujung lain spektrum klinis, adalah orang dengan
anemia ringan asimtomatik dan kondisi (sifat) talasemia heterozigot. Kelompok
terakhir membutuhkan no transfusi, tetapi konseling genetik. TI adalah kelompok
pasien yang sangat beragam berbagai tingkat keparahan klinis dari anemia ringan,
sedang, hingga sedang, tidak memerlukan transfusi darah ke transfusi darah
sesekali dan sering. Bahkan, entitas klinis ini dinamis; pasien dengan TI mungkin
membutuhkan transfusi yang lebih sering atau bahkan teratur jika terjadi beberapa
komplikasi karena thalassemia, seperti hipertensi pulmonal, hematopoietik
ekstrameduler massa, atau ulserasi kronis. Selain itu, artikel dan pedoman yang
diterbitkan lebih awal ditangani terutama manajemen klinis dan komplikasi TM
(kebanyakan homozigot b-thalassemia atau b-TM) .2 Klasifikasi ini telah
meninggalkan beberapa talasemia klinis sindroma, terutama thalassemia dan
hemoglobinopati, seperti Hb E / b-thalassemia. Baru-baru ini, konsep diagnosis
klinis sindrom talasemia telah berubah secara dramatis karena beberapa penelitian
klinis dan temuan pengamatan yang berfokus tentang manajemen klinis dan
komplikasi TI menunjukkan hal itu, bahkan memang demikian disebut kelompok
yang lebih ringan menurut derajat anemia dan kebutuhan transfusi, pasien dengan
TI dapat mengalami komplikasi serius di kemudian hari. Lebih baik pemantauan
dan pengobatan dengan hasil yang lebih baik menjadi semakin penting.3 Pada
tahun 2012, terminologi baru untuk klasifikasi klinis talasemia (TDT dan NTDT)
adalah diusulkan dan kemudian diadopsi oleh Federasi Thalassaemia Internasional
di mereka pedoman dan publikasi terbaru. 4,5 Diferensiasi pasien talasemia baru
karena baik TDT maupun NTDT memerlukan evaluasi klinis yang cermat
menggunakan beberapa klinis dan parameter hematologi, terutama kadar Hb dasar
(Gbr. 1). Kebanyakan pasien dengan b-TM dan mereka yang selamat dari hidrops
Hb Bart menderita penyakit yang sangat parah fenotipe dan dapat dengan mudah
diklasifikasikan sebagai TDT. Namun, pada penderita lain sindrom thalassemia,
terutama Hb E / b-thalassemia, biasanya muncul selama an Infeksi kambuhan yang
menyebabkan krisis hemolitik akut yang dapat membuat mereka presentasi
menjadi lebih serius, dengan limpa yang membesar dan tingkat Hb yang rendah
dengan gejala anemia.6 Dianjurkan untuk mengikuti pasien tersebut setidaknya
selama 3 sampai 6 bulan untuk mengamati tingkat keparahan klinis pada nilai
dasar yang sebenarnya sebelum diagnosis TDT atau NTDT dibuat. (pertanyaan)

Penderita TDT adalah mereka yang membutuhkan transfusi teratur untuk bertahan
hidup, yang terdiri dari dari b-TM (homozigot b0-thalassemia atau anemia
Cooley), Hb E / b-thalassemia berat, penyakit Hb H nondeletional berat, dan
mereka yang selamat dari hidrops fetalis Hb Bart.4 Presentasi klinis, riwayat, dan
pemeriksaan fisik Onset klinis dari presentasi pertama untuk a- dan b-thalassemia
berat berbeda dengan a akibat peralihan Hb fisiologis selama perkembangan janin
dan bayi. Di Hb Bart hydrops fetalis, bentuk paling parah dari a-thalassemia
dengan penghapusan semua 4 a-globin gen (/), anemia berat terjadi dalam rahim,
mengakibatkan hidrops janin. facie thalassemic. Untuk TDT yang tidak diobati
atau tidak diobati secara adekuat, derajat
retardasi pertumbuhan, perubahan tulang, dan organomegali menjadi lebih

semu. Perubahan kerangka ini termasuk kelainan bentuk tulang panjang (kaki)

dan perubahan kraniofasial (atasan frontal, menonjolnya malar, tekanan hidung

jembatan, dan hipertrofi rahang atas, yang cenderung mengekspos gigi atas),

dan osteoporosis.18 Sementara itu, TDT pada anak-anak yang dirawat dengan baik
sangat sedikit atau tidak ada

temuan abnormal pada pemeriksaan fisik diharapkan. Namun, sangat buruk

kasus, bahkan jika diobati dengan transfusi yang adekuat, bersifat progresif

splenomegali mungkin masih terjadi

Pada pasien dengan NTDT, gejala klinis pertama yang sering muncul adalah
anemia dengan gejala episode infeksi bersamaan yang terjadi di awal kehidupan,
biasanya saat mereka lebih tua dari usia 2 tahun. Akibatnya, transfusi darah
mungkin diperlukan pada pasien yang mengalami anemia sedang sampai berat.21
Di ujung lain spektrum NTDT, banyak pasien melakukannya dengan baik dan
didiagnosis memiliki NTDT di kemudian hari selama skrining donor darah,
pemeriksaan kesehatan rutin, konsultasi KB, atau kapan mencari perhatian medis
karena kondisi yang tidak terkait. Juga, dalam beberapa kasus, file Diagnosis
NTDT ditegakkan bila ada komplikasi terkait talasemia, seperti gejala batu empedu
atau ulkus kaki kronis, terjadi. Untuk menentukan tingkat keparahan klinis
thalasemia, terutama pada kelompok pertama, sangat penting untuk mengikuti
bayi-bayi ini dengan cermat atau anak kecil yang mengalami krisis hemolitik,
apakah mereka benar-benar NTDT atau TDT dengan menentukan tingkat Hb
kondisi mapan setelah penyakit akut teratasi. Namun, beberapa pasien dengan
NTDT mungkin memerlukan terapi transfusi yang sering atau bahkan teratur
karena pertumbuhan dan perkembangan yang tertunda selama masa kanak-kanak.
Pasien dewasa dengan NTDT mungkin memerlukan transfusi yang lebih teratur
karena komplikasi yang terlambat, khususnya anemia progresif sekunder akibat
peningkatan splenomegali Pemeriksaan fisik pada pasien dengan NTDT bisa
sangat berbeda karena ada beberapa faktor, termasuk usia, kadar Hb dasar, derajat
hemolisis dan hematopoiesis ekstrameduler, dan frekuensi transfusi
sebelumnya.3,24 Penderita dengan yang lebih berat Bentuk NTDT tanpa
pengobatan yang adekuat semasa kanak-kanak mungkin sudah singkat perawakan,
pucat sedang sampai berat dengan ikterus sedang, dan sedang sampai berat
hepatosplenomegali. Ini

Screening talasemia

Secara umum, skrining dan algoritma diagnostik untuk thalasemia dapat dibedakan
menjadi 2 tingkat — populasi dan individu — di mana pendekatan yang berbeda
telah diterapkan karena tujuan skrining yang berbeda. Metode penyaringan yang
digunakan dalam pendekatan populasi yang difokuskan pada identifikasi ciri-ciri
varian talasemia dan Hb dijelaskan. Terakhir, tes diagnostik komprehensif untuk
konfirmasi talasemia didiskusikan. Semua tes laboratorium yang tersedia saat ini
untuk penyaringan dan konfirmasi dari ciri dan penyakit talasemia dengan
karakteristik terkait seperti akurasi, validitas, dan ketersediaan dirangkum dalam

Tes Skrining untuk Pembawa Thalassaemia dalam Pendekatan Populasi

Beberapa program skrining skala besar untuk mengidentifikasi pembawa talasemia

telah diusulkan. 25-30 Tujuan utama skrining untuk status pembawa talasemia
adalah untuk mengidentifikasi pasangan yang berisiko memiliki keturunan dengan
penyakit talasemia berat, seperti b-TM, Hb E / b-thalassemia, dan Hb Bart's
hydrops fetalis sebagai bagian pertama dari pencegahan dan program pengendalian
sindrom thalasemia di beberapa belahan dunia.30 Semua ini program didasarkan
pada deteksi heterozigot (pembawa), identifikasi pasangan yang berisiko,
konseling genetik, dan diagnosis janin. Program pemutaran dapat bervariasi dalam
detailnya

1. Uji kerapuhan osmotik satu tabung

Uji kerapuhan osmotik satu tabung (OTOFT), awalnya dijelaskan oleh Parpart dan
rekan pada tahun 1947,33 digunakan untuk mengukur resistensi eritrosit terhadap
hemolisis saat sedang terkena berbagai konsentrasi larutan garam. Dalam larutan
hipotonik, air memasuki sel darah merah (RBC), mengakibatkan pembengkakan
dan akhirnya terjadi lisis RBC. Kerentanan tersebut hemolisis osmotik ini
merupakan fungsi rasio luas permukaan terhadap volume. Di thalassemia, sel darah
merah memiliki Hb seluler yang rendah, sehingga terjadi peningkatan resistensi
osmotik dibandingkan dengan sel darah merah normal. Umumnya, setetes kecil
darah segar (20 mL) digunakan dan dipipet ke dalam larutan NaCl buffer (biasanya
0,36% NaCl) atau gliserin-garam dalam tabung reaksi.34 Tabung dicampur dan
dibiarkan pada suhu kamar selama 15 sampai 30 menit (sesuai dengan masing-
masing protokol) dan derajat hemolisis dinilai dengan inspeksi visual atau
pengukuran fotometri. Solusi yang jelas diartikan sebagai a hasil negatif dan
penampilan keruh sebagai hasil positif.

Keuntungan OTOFT adalah metode yang sederhana, cepat, dan murah yang tidak
membutuhkan peralatan canggih. Ini telah divalidasi untuk digunakan sebagai
skrining awal metode untuk status pembawa talasemia dan memberikan sensitivitas
yang baik (87.0% -100%) dan spesifisitas (59% -100% untuk skrining pembawa
Thalassemia dan Hb E; 34,1% -83,7% untuk skrining pembawa talasemia b) .35-39
Dalam interaksi yang kompleks seperti gabungan sifat a-thalassemia dan b-
thalassemia, tes ini dapat menghasilkan borderline mean corpuscular volume
(MCV) nilai (dibahas di tempat lain dalam artikel ini) dan alevel Hb A2 normal.
Namun, OTOFT bisa menjadi positif dalam situasi ini

Kekurangan Ada beberapa faktor yang dapat mempengaruhi sensitivitas OTOFT.

Di Skrining pembawa talasemia-b, ko-pewarisan a-thalassemia, sifat Hb E, sifat
Hb S, beberapa varian Hb, defisiensi glukosa-6-fosfat dehidrogenase, atau
Tenggara Ovalositosis Asia dapat menyebabkan OTOFT positif palsu.34,39,40
Anemia defisiensi besi (IDA) juga memengaruhi OTOFT, menyebabkan rasio
positif palsu hingga 63,9% dalam studi dari Mesir yang penduduknya memiliki
angka prevalensi IDA yang tinggi.35 Apalagi hampir 10% subjek normal memiliki
hasil OTOFT positif palsu.34 Untuk meningkatkan efektivitas dari OTOFT,
beberapa studi membandingkan sensitivitas dan spesifisitasnya menggunakan
buffered yang berbeda solusi.34,41–43 Sejauh ini, tidak ada konsensus tentang
rekomendasi standar tentang protokol yang paling cocok untuk OTOFT.

Indeks sel darah merah:

Rata-rata volume sel dan rata-rata hemoglobin korpuskular Penganalisis sel darah
otomatis adalah salah satu instrumen terpenting di dunia modern laboratorium
hematologi. Secara umum, sampel darah disedot dan dipisahkan menjadi aliran
fluida yang berbeda, yang berisi larutan buffer berbeda untuk mencapai tujuan
tertentu tujuan analisis, misalnya mengukur Hbs dalam RBC menggunakan reagen
tertentu seperti solusi Drapkin. Secara singkat, pengukuran setiap parameter terjadi
di bawah a Prinsip aliran sitometri, sebagai sel tunggal dalam aliran fluidik yang
melewati laser sinar dan sinyal dikumpulkan dari serangkaian detektor. Untuk
indeks RBC, MCV, Hitung sel darah merah, konsentrasi Hb, dan lebar distribusi
sel darah merah diukur secara langsung, sedangkan hematokrit, rata-rata sel Hb
(MCH), dan konsentrasi MCH dihitung dari pengukuran utama ini. Untuk skrining
talasemia, MCV kurang dari 80 fL dan / atau MCH kurang dari 27 pg umumnya
digunakan sebagai batas level positif hasil skrining.18 Tingkat batas ini berasal
dari -2 standar deviasi distribusi normal MCV dan KIA dari populasi normal.
Keuntungan MCV dan MCH disediakan dari mesin otomatis yang menyediakan
analisis yang cepat, hemat biaya, dapat direproduksi, dan akurat.

Kekurangan Beberapa kondisi seperti IDA dan anemia peradangan dapat

mempengaruhi Indeks RBC, terutama MCV, dan nilainya bisa serendah yang
ditemukan ciri-ciri talasemia. Kisaran normal MCV bervariasi menurut usia pada
bayi dan anak kecil Selain itu, terdapat variasi MCV dari penghitung sel darah
otomatis yang berbeda, meskipun tingkat batas KIA tampaknya lebih konsisten di
antara semua penganalisis.45 Oleh karena itu, disarankan untuk memvalidasi
tingkat batas untuk setiap penganalisis yang digunakan dalam penyaringan
program.45 Telah dicatat dengan baik bahwa MCV rendah tidak cocok untuk
menyaring pembawa Hb E. dan individu dengan penghapusan gen a-globin tunggal
(-a3.7 dan -a4.2) atau nondeletional mutasi gen a-globin (yaitu, Hb Constant
Spring [Hb CS] dan Hb Quong Sze) .46 Selain itu, interaksi talasemia-b
heterozigot dengan sifat talasemia-a saja atau dengan defisiensi glukosa-6-fosfat
dehidrogenase dapat menyebabkan MCV normal dan hasil negatif palsu untuk
skrining thalassemia.30,47 Oleh karena itu, skrining thalassemia pembawa dengan
menggunakan indeks RBC saja dalam populasi dengan prevalensi tinggi a-
thalassemia, b-thalassemia, dan Hb E saja tidak cukup

Uji presipitasi diklorofenol indofenol

Seperti disebutkan, indeks RBC memiliki keterbatasan dalam mendeteksi sifat Hb

E. Pemutaran Hb Uji E dengan dichlorophenol indophenol (DCIP) telah dijelaskan
sejak tahun 1976.49 Hb E tidak stabil dihasilkan dari mutasi gen b-globin pada
kodon 26 (GAG> AAG), menyebabkan substitusi asam amino dari glutamin
menjadi lisin, yang dapat dioksidasi oleh pewarna DCIP pada pH netral. Selain Hb
E, Hbs tidak stabil lainnya seperti Hb H juga dapat diendapkan dengan pengujian
ini. Secara teknis, 20 mL utuh segar darah ditambahkan ke 2 mL reagen DCIP.
Setelah pencampuran lembut dan inkubasi pada 37 C selama

15 menit, 20 mL reagen penghenti ditambahkan untuk menghilangkan dan

menghilangkan warna berlebih Pewarna DCIP. 25 Tes diinterpretasikan dengan
visualisasi dengan mata telanjang. Solusi yang jelas diartikan sebagai hasil negatif
dan penampilan mendung atau adanya curah hujan dari Hb sebagai hasil positif.
Keuntungan Uji presipitasi DCIP untuk Hb E telah divalidasi secara ekstensif dan
memiliki sensitivitas 98,1% hingga 100% dan spesifisitas 65,4% hingga 100% .
25,36-38 Juga, itu adalah teknik yang sederhana, cepat, dan ekonomis.
Kekurangan Interpretasi dari tes DCIP positif terkadang sulit; hasil samar-samar
atau positif palsu ditemukan di beberapa heterozigot majemuk varian Hb, seperti
Hb S dengan Hb C dan Hb S dengan Hb F.50 Karena tingginya tingkat positif
palsu, tes skrining baru untuk Hb E telah dikembangkan dan ditunjukkan hasil
yang memuaskan dengan sensitivitas tinggi (100%) dan spesifisitas (99,1% -100%)
43,51 Namun pengujian ini belum banyak tersedia dan masih perlu divalidasi lebih
lanjut.

Kombinasi teknik skrining talasemia

Kombinasi uji kerapuhan osmotik satu tabung dan dichlorophenol

indophenol
tes Untuk meningkatkan sensitivitas dan spesifisitas metode skrining, beberapa
penulis telah menyarankan menggunakan kombinasi teknik yang disebutkan
sebelumnya. SEBUAH kombinasi OTOFT dan DCIP telah divalidasi secara
ekstensif dan sensitivitasnya dan spesifisitas metode ini adalah 99,2% hingga
100% dan 79,3% hingga 97,1%, masing-masing. 37,52,53 Meskipun kedua metode
tersebut mudah dilakukan, interpretasi hasil yang tepat membutuhkan staf yang
terlatih. Tingkat positif palsu dilaporkan antara 15,5% dan 36.1% .25,37,54,55
Sebuah penelitian di Thailand menunjukkan bahwa angka positif palsu yang tinggi
ini menyebabkan a beban ekonomi yang tinggi untuk diagnosis konfirmasi dengan
analisis Hb; Namun, trenangka positif palsu selama periode 10 tahun pertama
menurun karena program pelatihan dan pengalaman staf. 54 Penjelasan lain dari
tingginya angka positif palsu adalah a prevalensi tinggi dari bentuk ringan lainnya
dari thalassemia dan / atau IDA.25,54,55 Kombinasi rata-rata volume korpuskuler
dan diklorofenol indofenol pengujian Sensitivitas dan spesifitas dari tes gabungan
ini adalah 99,4% hingga 100% dan 76,2% menjadi 98,93%, masing-masing, 52,55
dan terbukti hemat biaya dalam program pencegahan talasemia.56 Kombinasi ini
saat ini direkomendasikan untuk digunakan secara luas di Thailand30 (Gbr. 3).
Model ini untuk skrining talasemia Program dapat diterapkan di negara terbatas
sumber daya. Singkatnya, di negara-negara dengan sumber daya kesehatan
terbatas, penggunaan MCV ditambah DCIP tes skrining akan membantu dalam
memilih individu yang membutuhkan rujukan ke pusat laboratorium untuk
diagnosis pasti lebih lanjut untuk thalassemia.

Tes Diagnostik untuk Thalassaemia

Interpretasi dari apusan darah tepi Alat diagnostik penting untuk thalassemia
adalah interpretasi perifer apusan darah (Gbr. 4). Morfologi RBC khas pada
penyakit talasemia menunjukkan mikrositosis, hipokromia, anisositosis jelas
(variasi ukuran sel), dan poikilositosis (variasi bentuk). Biasanya, mikrosit dapat
dievaluasi dengan membandingkan ukuran sel darah merah dengan ukuran inti
limfosit kecil (lihat Gambar 4A, C, E, F). Sel darah merah hipokromik adalah
mereka dengan diameter yang meningkat dari pucat sel darah merah sentral, lebih
dari sepertiga diameternya. Hasil anisopoikilositosis dari berbagai morfologi sel
darah merah abnormal termasuk skistosit, mikrosferosit, sel target, polikromasia,
dan sel darah merah berinti (eritroblas). Jumlah eritroblas berhubungan dengan
derajat anemia dan meningkat tajam setelah splenektomi (lihat Gambar 4D)
Analisis hemoglobin

Analisis Hb merupakan evaluasi laboratorium penting untuk memberikan

identifikasi dugaan dan diagnosis dari diagnosis varian thalassemia dan / atau Hb.
Namun, untuk menyediakan diagnosis yang akurat, diperlukan informasi klinis,
yang meliputi usia, etnis, riwayat dan onset anemia, status kehamilan, riwayat
transfusi darah (dan tanggal transfusi terbaru), dan riwayat keluarga. Semua
informasi ini penting untuk interpretasi dari analisis Hb. Dengan rentang referensi
yang sesuai dengan usia, sebuah Hb analisis dapat dilakukan pada semua usia,
bahkan pada periode neonatal.32 Juga, RBC indeks dan apusan darah tepi sangat
membantu untuk mendapatkan interpretasi yang lebih baik dari analisis Hb. Ada
beberapa platform penganalisis Hb, termasuk elektroforesis Hb menggunakan
membran selulosa asetat (pada pH 8,6), asam agarosa (pada pH 6,0) atau sitrat gel
agar, fokus isoelektrik, kromatografi cair kinerja rendah, kinerja tinggi
kromatografi cair (HPLC), dan elektroforesis kapiler (lihat Tabel 2) .58,59 Setiap
metode menggunakan prinsip yang berbeda untuk memisahkan spesies yang
berbeda Molekul Hb, tetapi beberapa membosankan dan usang.59 Saat ini ada 3
platform utama analisis Hb yang umum digunakan. Pertama, pemfokusan
isoelektrik adalah metode yang sensitif, memberikan pemisahan yang baik dari
varian Hb

Analisis DNA atau molekuler

Karena talasemia dan hemoglobinopati terutama disebabkan oleh mutasi pada gen
globin, analisis molekuler urutan DNA adalah diagnosis yang paling pasti
modalitas untuk kondisi seperti itu. Saat ini, ada beberapa langkah yang perlu
dipelajari dasar molekuler dari gangguan globin. Pada prinsipnya, studi molekuler
thalassemia dapat dibagi menjadi 2 kategori utama: deteksi khusus mutasi dan
genom pemindaian (lihat Tabel 2). Deteksi khusus mutasi menggunakan informasi
dari populasi tertentu pada profil umum mutasi a-globin dan b-globin mereka
(penghapusan, mutasi titik, atau penyusunan ulang gen) untuk menghasilkan panel
mutasi deteksi, dan menggunakan metode berbasis reaksi berantai polimerase
(PCR) yang berbeda untuk mengidentifikasi mutasi yang diketahui ini. Ada
beberapa teknik molekuler yang biasa digunakan mendeteksi mutasi yang
diketahui, termasuk GAP-PCR menggunakan deteksi konvensional63 atau real-
time (untuk penghapusan atau penyisipan gen), 64 PCR spesifik mutasi terkait alel,
65-67 reverse dot blot hybridization68 atau deteksi berbasis larik, 69 pembatasan
PCR yang tidak sesuai polimorfisme panjang fragmen, 70 dan analisis kurva leleh
resolusi tinggi (untuk titik atau perubahan nukleotida kecil) .71,72 Meskipun
pendekatan ini dapat memberikan a ukuran yang kuat, hemat biaya, dan lebih cepat
untuk mengidentifikasi mutasi penyebab, itu

Kesimpulan

Penyakit Thalassaemia diklasifikasikan menjadi TDT dan NTDT, berdasarkan

klinis pasien keparahan apakah mereka memerlukan transfusi darah biasa untuk
bertahan hidup (TDT) atau tidak (NTDT). Skrining dan diagnosis definitif
talasemia dan hemoglobinopati memerlukan evaluasi yang komprehensif, mulai
dari riwayat klinis, pemeriksaan fisik, dan hasil laboratorium, termasuk hitung
darah lengkap, profil Hb, dan molekuler studi. Ada beberapa alat skrining yang
digunakan dalam skrining populasi. Dokter perlu memahami kelebihan dan
kekurangan masing-masing metode laboratorium untuk memilih tes diagnostik
yang sesuai dan menafsirkan hasil secara akurat. Sebuah Analisis Hb dapat
dilakukan pada semua usia; bagaimanapun, interpretasi membutuhkan rentang
referensi khusus usia. Analisis genetik untuk mutasi globin diperlukan untuk
mengkonfirmasi diagnosis klinis dalam beberapa tetapi tidak semua kasus. Namun
demikian, pengujian DNA akan berhasil sangat diperlukan untuk konseling
genetik, perhitungan risiko, dan genetik prenatal diagnosa.