Tugas Praktikum Biokimia

Modul 2.3

1. Sebutkan komponen-komponen yang terdapat di dalam saliva!

Jawaban:
 98,5% air
 Kurang lebih 0,5% benda-benda padat:
 Inorganic constituents: SO42-, PO43-, HCO3-, Cl-, Ca2+, Mg2+, Na+, K+.
 Organic constituents: ptyalin (enzim α-amylase) dan musin

2. Sebutkan fungsi dari enzim α-amylase dan bagaimana cara kerja enzim tersebut!
Jawaban:
 Enzim α-amylase berfungsi menghidrolisis pati menjadi molekul yang lebih kecil
(amylodextrin, erythrodextrin, and achrodextrin) dan berakhir dengan molekul maltosa
 Enzim α-amylase memutus ikatan α-1, 4-glucoside dari pati (polisakarida)  dipecah
menjadi unit yang lebih kecil (dextrins)  terakhir mejadi maltosa melalui proses
hidrolisis.
3. Gambarkan tahapan hidrolisis pati oleh enzim α-amilase disertai dengan reaksi iodium yang
terjadi!
Jawaban:

4. Sebutkan alat dan bahan yang dibutuhkan dalam percobaan enzim amilase!
Jawaban:
o Substrat pati (0,5% buffer fosfat)
o Larutan iodium 0,1 N dalam 3% kalium iodida
o NaCl 1%
o Pengaduk
o White tile
o Water bath
o Stop watch
5. Buatlah diagram cara kerja percobaan enzim amylase!
Jawaban:
Tahap 1: Pengumpulan saliva encer
o Kumur dengan air bersih
o Ambil kurang lebih 20 cc NaCl 1%  Kumurlah minimal 1 menit, air kumur ini masukkan
tabung.
o Tabung digojok dan kemudian disaring.

Tahap 2:

o Ambil 4 tabung masing-masing isi dengan 5 ml saliva dan diberikan perlakuan sbb:
 Tabung I : dipanaskan sampai mendidih selama 2 menit, didinginkan, kemudian
tambah dengan 5 ml amilum 1%.
 Tabung II : tambah 5 tetes HCl encer dan 5 ml amilum 1%.
 Tabung III : tambah 5 tetes NaOH encer dan 5 ml amilum 1%.
 Tabung IV : tambah 5 ml amilum1%.
o Kemudian keempat tabung tersebut dimasukkan ke dalam penangas air dengan suhu
37oC.
o Catat waktu menambah amilum 1%.
o Teteskan larutan iodium pada white tile.
o Teteskan masing-masing tabung tiap selang waktu 30 detik.
o Catat perubahan yang terjadi.

6. Jelaskan prinsip dasar pemeriksaan kadar kolesterol total dalam plasma (Metode CHOD-PAP)!
Jawaban:
Cholesterol ditentukan akibat adanya hidrolisa enzimatik oleh cholesterol esterase (CHE) dan
oksidasi enzimatik oleh cholesterol oxidase (CHO) dengan hasil akhir berupa hydrogen
peroksidase yang kemudian bereaksi dengan 4-aminoantypirine dan phenol membentuk
quinoneimine yang dapat terdeteksi dengan spektrofotometer.

7. Sebutkan alat dan bahan yang dibutuhkan dalam pemeriksaan kadar kolesterol total dalam
plasma (Metode CHOD-PAP)!
Jawaban:
  Cuvet
 Mikropipet
 Sampel serum/plasma
 Pipet Pasteur
 Spektrofotometer
 Larutan standar yakni kolesterol dengan konsentrasi 200 mg/dl atau 5.17 mmol/l
 Colesterol LS yang berisi:
 Pipes buffer, pH 6.9
 Phenol
 Cholesterol oxidase
 Cholesterol esterase
 Peroxidase
 4-aminoantipyrine

8. Buatlah diagram cara kerja pemeriksaan kadar kolesterol total dalam plasma (Metode CHOD-
PAP)!
Jawaban:
1. Ambil darah vena, masukkan dalam tabung yang sudah ada EDTA, pusingkan dengan
kecepatan 4000 rpm selama 30 menit.
2. Siapkan 3 cuvet, isi dengan larutan dengan komponen sebagai berikut:

3. Campur dan inkubasi selama 20 menit (20–25oC), atau 10 menit (37oC).

4. Ukur Abs. Standard (Astd) dan Sample (ASampel) terhadap blanko reagen (RB) dalam
waktu 60 menit pada panjang gelombang Hg 546 (500 nm).