1.

Eluate
Adalah suatu cairan yang mengandung lepsan antibodi yang diperoleh dari pemerasan
sel darah merah.

2. Prinsip
Suatu cara atau teknik untuk melepaskan antibodi yang sudah bereaksi sensitisasi
(coated), baik in vivo maupun in vitro, oleh suatu antibodi yang tidak diketahui jenisnya
ke dalam suatu media cair.

3. Tujuan

4. Alat dan Bahan

 Peralatan :

1. Centrifuge
2. Inkubator
3. Working table ( ID card holder & tube holder )
4. Pipetor
5. Tips
6. Dispenser ( ukuran 0.5 ml )
7. Rider M ( Equepment for automated prosedures )

 Bahan-bahan :

1. Card : Liss / Coombs

2. Larutan ID diluent 2 ( modified LISS )
3. Sel pasien suspensi 1% dalam diluent 2
4. Sel panel kecil (abtectcell ) suspensi 1% dalam diluent 2
5. Standar sel A 5% atau 1% dan standar sel B 5% atau 1% dalam diluent 2.

5. Metode Pemeriksaan

a. Metode Tabung

b. Metode Gel
Uji gel dikembangkan di Swiss pada akhir 1980-an sebagai cara untuk
membakukan metode memperoleh aglutinasi dan untuk menyediakan cara sederhana
dan dapat diandalkan untuk membacanya. Tidak seperti tes tabung dalam metode gel,
aglutinasi tidak terjadi dalam fasa cair melainkan dalam gel terkandung dalam
microtube khusus.

Tes gel hanya berlisensi tersedia di Kanada adalah teknik gel MTS didistribusikan
secara eksklusif oleh Ortho Clinical Diagnostics. Satu-satunya fase gel-IAT (Indirect
Antihuman Test) yang tidak memerlukan pencucian specimen sebelum menambahkan
 antihuman globulin serum. Digunakan mikrotubes sebagai pengganti tabung reaksi
kaca.

6. Prosedur Pemeriksaan
Eluate :

a) Metode Landsteiner-Muller :

1) Alat ddan bahan disiapkan dan diberi label

2) Eritrosit pekat (PRC) sebanyak 1 mL dicuci dengan saline sebanyak 6 kali.
Supernatan pencucian terakhir ditampung dalam tabung sebagai kontrol negatif.
3) Kedalam eritrosit yang sudah dicuci, ditambahkan Bovine Albumin 6 % sama
banyak.
4) Tabung tersebut ditutup denganparafilum kemudian dipanaskan dalam waterbath
suhu 56 C selama 10 menit sambil dikocok kuat. Bersamaan dengan itu, cup
sentrifuge dihangatkan untuk pemutaran.
5) Kemudian dengan segera tabung yang berisi eritrosit tadi diputar dengan
kecepatan 3000 rmp selama 10 menit.
6) Setelah itu, supernatan segera dipisahkan kedalam tabung lainnya.
7) Eluate yang dihasilkan segera digunakan untuk pemerikasaan.

b) Metode Rubbin :

1) Alat ddan bahan disiapkan dan diberi label

2) Eritrosit pekat (PRC) sebanyak 1 mL dimasukkan kedalam tabung reaksi
kemudian dicuci dengan saline sebanyak 6 kali.
3) Saline ditambahkan kedalam tabung tersebut sama banyak.
4) Ether ditambahkan juga kedalam tabung tersebut ( 2 kali volume eritrosit yang
telah dicuci).
5) Kemudian tabung ditutup dengan oarafilum, dan dihomogenkan selama 1 menit.
6) Tutup tabung dibuka lalu diinkubasi dengan suhu 37°C selama 30 menit
7) Setelah itu tabung tersebut diputar dengan kecepatan 3000 rpm selama 5 menit.
Hasil pemutaran akan tampak 3 lapisan yaitu :
- Atas = sisa ether
- Tengah = stroma sel ( kulit sel eritrosit)
- Bawah = Eluate
8) Lapisan ether dibuang dengan pipet tetes, kemudian ujung pipet ditembuskan
kedasar tabung, dan eluate diambil lalu ditampung kedalam tabung lain.
9) Tabung yang berisi eluate dihangatkan pasa waterbath suhu 37°C selama 15 menit
( untuk menghilangkan sisa ether).
10) Eluate dapat segera digunakan untuk pemeriksaan.