MIKROBIOLOGI DASAR
Oleh:
Kelompok 10
Nama-nama Anggota Kelompok:
Penyusun
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Genetika merupakan suatu cabang ilmu yang dinamis dan berkembang
dengan cepat. Penelaahnya dilakukan oleh beribu-ribu ilmuwan diseluruh
dunia. Rekayasa genetika adalah suatu segi baru studi genetika yang
menjanjikan pada masyarakat baik perkembangan yang menguntungkan
maupun kemungkinan timbulnya akibat-akibat yang membawa bencana. Kita
harus merenungkan bagaimana cara untuk menaklukan semua penyakit
menurun dan kemungkinan terubahnya suatu mikroba yang umum dan tidak
berbahaya menjadi bentuk patogenik.
Pada masa kini genetika telah mampu menjelaskan cara DNA
mengendalikan sifat dan mempertahankan proses yang penting di dalam sel
hidup. Langkah pertama dalam pengekspresian sifat yang dikandung DNA
ialah dengan mencetak molekul RNA berdasarkan urutan nukleotida pada
DNA.Molekul RNA merupakan polimer rantai tunggal yang terdiri dari
empat macam nukleotida yaitu adenin (A), urasil (U), sitosin (C) dan guanin
(G)(Ristiati, 2000).
Genetika mikrobia telah mengungkapkan bahwa gen terdiri dari DNA,
suatu pengamatan yang melekat dasar bagi biologi molekuler. ‘Genetika
bakteri mendasari perkembangan rekayasa genetika, suatu teknologi yang
bertanggung jawab terhadap perkembangan di bidang kedokteran.
Berdasarkan paparan data tersebut, penulis akan menyajikan informasi
tentang genetika bakteri pada makalah ini.
B. Rumusan Masalah
1. Apa pengertian dari genetika mikroba?
2. Bagaimana sifat bahan genetis pada mikroba?
3. Apa saja komponen genetik yang dimiliki oleh bakteri?
4. Bagaimana mekanisme perpindahan materi genetik pada bakteri?
C. Tujuan
1. Untuk mengetahui pengertian dari genetika mikroba.
2. Untuk mengetahui sifat bahan genetis pada mikroba.
3. Untuk mengetahui komponen genetik yang dimiliki bakteri
4. Untuk mengetahui proses perpindahan materi genetik pada bakteri.
BAB II
PEMBAHASAN
A.Pengertian Genetika Mikroba
Penelaahan tentang genetika pertama kali dilakukan oleh seorang ahli botani
bangsa Austria, Gregor Mendel pada tanaman kacang polongnya. Pada tahun
1860-an ia menyilangkan galur-galur kacang polong dan mempelajari akibat-
akibatnya. Hasilnya antara lain terjadi perubahan-perubahan pada warna,
bentuk, ukuran, dan sifat-sifat lain dari kacang polong tersebut. Penelitian
inilah ia mengembangkan hukum-hukum dasar kebakaan. Hukum kebakaan
berlaku umum bagi semua bentuk kehidupan. Hukum-hukum mendel berlaku
pada manusia dan juga organisme. Percobaan terdahulu yang sangat populer
dalam genetika, yakni lalat buah Drosophila. Namun sekarang, percobaan
-percobaan ilmu kebakaan dengan menggunakan bakteri Escherichia coli.
Bakteri ini di pilih karena paling mudah di pelajari pada taraf molekuler
sehingga merupakan organisme pilihan bagi banyak ahli genetika. Hal ini
membantu perkembangan bidang genetika mikroba. Jasad renik yang di
pelajari dalam bidang genetika mikroba meliputi bakteri, khamir, kapang, dan
virus (Waluyo, 2005).
Genetika mikrobia tradisional terutama berdasarkan pada pengamatan atau
observasi perkembangan secara luas. Variasi fenotif telah diamati
berdasarkan kemampuan gen untuk tumbuh dibawah kondisi terseleksi,
misalnya bakteri yang mengandung satu gen yang resisten terhadap ampisilin
dapat dibedakan dari bakteri kekurangan gen selama pertumbuhannya dalam
lingkungan yang mengandung antibiotik sebagai suatu bahan penyeleksi.
Catatan, bahwa seleksi gen memerlukan ekspresinya dibawah kondisi yang
tepat, dapat diamati pada tingkat fenotif.
Genetika mikrobia telah mengungkapkan bahwa gen terdiri dari DNA, suatu
pengamatan yang melekat dasar bagi biologi molekuler. Penemuan
selanjutnya dari bakteri telah mengungkapkan adanya restriction enzymes
(enzim restriksi) yang memotong DNA pada tempat spesifik, menghasilkan
fragmen potongan DNA. Plasmida diidentifikasikan sebagai elemen genetika
kecil yang mampu melakukan replikasi diri pada bakteri dan ragi. Pengenalan
dari sebuah fragmen potongan DNA kedalam suatu plasmid memungkinkan
fragmen di perbanyak (teramplifikasi). Amplifikasi regio DNA spesifik dapat
di capai oleh enzim bakteri menggunakan polymerase chain reaction (PCR)
atau metode amplifikasi nukleotida berdasar enzim yang lain (misalnya
amplifikasi berdasar transkripsi). DNA yang di masukkan kedalam plasmid
dapat di kontrol oleh promoter ekspresi pada bakteri yang mengamati protein,
di ekspresi pada tingkat tinggi. Genetika bakteri mendasari perkembangan
rekayasa genetika, suatu teknologi yang bertanggung jawab terhadap
perkembangan di bidang kedokteran.(Jewetz, 2001).
Ada dua fenomena biologi pada konsep hereditas yaitu:
1.Hereditas yang bersifat stabil di mana generasi berikut yang terbentuk dari
pembelahan satu sel mempunyai sifat yang identik dengan induknya.
2.Variasi genetik yang mengakibatkan adanya perbedaan sifat generasi
berikut dari sel induknya akibat peristiwa genetik tertentu, misalnya
mutasi.Pada bakteri, unit herediternya disebut genom bakteri. Genom bakteri
lazimnya disebut sebagai gen saja. Gen bakteri biasanya terdapat dalam
molekul DNA (asam deoksirinukleat) tunggal, meskipun dikenal pula adanya
materi genetik di luar kromosom (ekstrakromosomal), yang di sebut plasmid,
yang tersebar luas dalam populasi bakteri. Meskipun bakteri bersifat haploid,
transimisi gen dari satu generasi ke generasi berikutnya berlangsung secara
linier, sehingga pada setiap siklus pembelahan sel, sel anaknya menerima satu
set gen yang identik dengan sel induknya.
a. Suatu enzim amino sel bakteri yang disebut enzim RNA polimerase
membentuk satu rantai oliribonukleotida (= messesnger RNA =
mRNA) dari rantai DNA yang ada. Proses ini diseut transkripsi. Jadi
pada transkripsi DNA, terbentuk satu rantai RNA yang
komplementer dengan salah satu rantai double helix dari DNA.
b. Secara enzimatik asam amino akan teraktifasi dan ditransfer kepada
transfer RNA (= tRNA yang mempunyai daptor basa yang
komplementer dengan basa mRNA di satu ujungnya dan mempunyai
asam amino spesifik di ujung lainnya tiga buah basa pada mRNA di
sebut triplet basa yang lazim disebut sebagai kodon untuk suatu
asam amino.
c. mRNA dan tRNA bersama-sama menuju kepermukaan ribosom
kuman, dan disinilah rantai polipeptida terbentuk sampai
seluruhkodon selesai dibaca menjadi menjadi suatu sekuen asam
amino yang membentuk protein tertentu. Proses ini disebut translasi.
Panjang molekul DNA pada umumnya tersusun dalam ribuan pasang
DNA ribuan pasang basa, atau kilobase pavis (kbp). Suatu kromosom
Eshericia coli memiliki 4639 kbp. Panjang keseluruhan kromosom E.coli
diperkirakan I nm. Oleh karena keseluruhan dimensi sel bakteri
diperkirakan 1000 kali lebih kecil dari pada panjangnya tersebut sehingga
terbentuk lipatan yang melipat lagi atau supercoiling, menyusun struktur
fisik dari molekul in vivo.
Tabel 1. Persentase Basa Nitrogen pada Khamir, Mycobacterium tuberculosis, dan
Manusia
Presentase basa nitrogen
Jenis
Adenin Sitosin Guanin Timin
Khamir (yeast) 32 18 18 32
Mycrobacterium
16 34 34 16
tuberculosis
Manusia 131 19 19 131
Molekul DNA dari bakteri yang membawa sebagian besar gen normalnya
sering disebut sebagai kromosomnya, dengan analogi kromosom
organisme yang lebih tinggi. Nama ini membedakan molekul dari DNA
plasmid, yang dalam beberapa kasus bisa hampir sama besar dengan
DNA kromosom tetapi biasanya membawa gen yang tidak selalu
diperlukan untuk pertumbuhan bakteri (Larry, 2007)
John Cairns mencapai visualisasi pertama yang jelas dari molekul DNA
bakteri, dia menggunakan autoradiografi (paparan emulsi film oleh
peluruhan atom radioaktif) untuk menunjukkan sirkularitas molekul
DNA E. coli yang utuh berlabel (Gambar 1.7). Molekul DNA memiliki
panjang yang sedikit lebih besar sekitar > 1mm dan terdiri dari sekitar
4700 kb yang ditutup secara kovalen (semua bergabung dengan ikatan
kimia kovalen). Panjang kontur 1000 kali lebih besar dari molekul DNA
bila dibandingkan dengan ukuran rata-rata sel E. coli menunjukkan
bahwa DNA harus sangat terlipat di dalam sitoplasma. David Pettijohn
dan rekan-rekan kerjanya kemudian menunjukkan bahwa adalah
mungkin untuk mengekstrak molekul DNA utuh dari sel-sel bakteri dan
mempertahankan setidaknya beberapa dari konfigurasi terlipat mereka.
Struktur ini telah ditetapkan nukleoida atau kromosom terlipat dan
menempati sekitar 20% volume E. coli. Suatu nukleoid yang khas dapat
dilihat pada Gambar 1.8. Sekitar 5% dari volume nukleoid adalah DNA.
Studi imunolabel dari bagian yang dilihat oleh mikroskop elektron telah
menunjukkan bahwa inti nukleoid pada dasarnya adalah DNA untai
ganda dengan DNA untai tunggal dan protein di pinggiran. Kepadatan
DNA dalam nukleoid sel bakteri sebanding dengan kromosom interfase
dalam sel mamalia (Edward, 2006)
Gambar 3.Autoradiograph dari molekul DNA diekstrak dari E. coli Hfr3000. DNA
diberi label dengan timidin tritiated selama dua generasi dan kemudian diekstrak dari
sel menggunakan enzim lysozyme, yang menyerang dinding sel. Emulsi fotografi
dilapisi DNA dan terkena atom radioaktif selama 2 bulan. Ketika tritium membusuk,
partikel beta yang dipancarkan mengaktifkan emulsi dengan cara yang sama seperti
paparan cahaya. Setelah pengembangan emulsi, butir-butir perak terbentuk yang
posisinya menunjukkan lokasi dari molekul DNA asli. Skala di bagian bawah mewakili
panjang 100 µm; panjang DNA, potongan bagian yang direplikasi, diperkirakan sekitar
1,1 mm. Harus diingat bahwa sel dari mana molekul DNA ini diekstraksi mungkin
hanya beberapa mikrometer panjangnya
Struktur DNA bakteri berbeda secara signifikan dari kromosom
organisme yang lebih tinggi. Satu perbedaan adalah bahwa DNA dalam
kromosom sebagian besar bakteri melingkar dalam arti bahwa ujung-
ujungnya bergabung satu sama lain. Sebaliknya, kromosom eukariotik
biasanya linier dengan ujung bebas. Sirkularitas DNA kromosom bakteri
memungkinkan untuk mereplikasi secara keseluruhan tanpa
menggunakan telomere, seperti kromosom eukariotik lakukan, atau ujung
terminal berlebihan, seperti yang dilakukan oleh beberapa bakteriofag.
Bahkan dalam kasus di mana kromosom bakteri bersifat linier, mereka
tidak menggunakan mekanisme yang sama, melibatkan telomerase untuk
meniru ujungnya, yang digunakan oleh kromosom eukariotik. Perbedaan
lain antara DNA bakteri dan eukariota adalah bahwa DNA pada
eukariota melilit protein yang disebut histone untuk membentuk
nukleosom. Bakteri memiliki protein HU, HN-S, Fis, dan IHF, di mana
DNA sering dibungkus, dan archaea memiliki histones belum sempurna
yang terkait dengan eukariota. Namun, secara umum, DNA kurang
terstruktur dalam bakteri daripada di eukariota (Larry, 2007).
Semua bakteri pada umumnya diasumsikan mengandung satu
kromosom melingkar (Circular). Namun, ada banyak pengecualian
(Jumas-Bilak et al. 1998). Rhodobacter sphaeroides memiliki dua
kromosom melingkar, kromosom I mengandung 3,0 juta pasangan basa
dan kromosom II yang mengandung 0,9 juta pasangan basa. Kode
kromosom II untuk beberapa gen asam amino dan gen biosintesis vitamin
tidak menunjukkan perbedaan mendasar dari kromosom I. Namun, data
sekuensing menunjukkan bahwa terdapat 144 “Open Reading Frame”
(daerah yang dapat diterjemahkan) pada kromosom II. Paduan kromosom
juga dikenal di Brucella melitensis dan Leptospira interrogans.
Rhizobium meliloti dan Burkholderia cepacia, di sisi lain, memiliki tiga
kromosom masing-masing. Dalam beberapa kasus, gen RNA ribosom
dapat ditemukan pada dua kromosom (Edward, 2006).
Terdapat beberapa contoh bakteri yang memiliki kromosom linear
(Casjens 1998). Yang menonjol di antara mereka adalah Streptomyces
coelicolor, Streptomyces lividans, Rhodococcus fascians, dan anggota
genus Borrelia. Yang paling tidak biasa adalah Agrobacterium
tumefaciensbiovar, yang memiliki kromosom melingkar dan kromosom
linier. Pertanyaan langsung yang mungkin muncul tentu saja adalah apa
yang terjadi pada ujung kromosom linear. Dalam sel eukariotik ternyata
terdapat telomere yang melindungi ujung DNA. Borrelia dan
Agrobacterium menggunakan sistem di mana satu untai DNA berayun
kembali menjadi untai komplementer (jepitan rambut).
Streptomycesprotects (Edward, 2006)
Gambar 4. Inti E. coli yang menempel. Sel-sel dilumuri lembut dengan lisozim dan
deterjen. DNA dipisahkan dari puing-puing seluler oleh sedimentasi melalui
peningkatan konsentrasi sukrosa dan kemudian dipasang untuk mikroskopi elektron
menggunakan monolayer Cytochrome Cmolecules pada permukaan larutan formamida.
DNA diwarnai dengan uranil asetat dan dilapisi dengan platinum untuk meningkatkan
kontras. Sisa-sisa membran sel dapat dilihat di dekat pusat foto. Partikel halus yang
mengelilinginya mungkin adalah bagian dari membran sel. Serat DNA kontinu dalam
berbagai keadaan superkoiling memancar keluar dari membran sel. Serabut keriting
RNA pendek untai tunggal, mewakili transkripsi yang sedang berlangsung, dapat dilihat
di sepanjang DNA
Tabel 2. Persamaan dan perbedaan rekombinasi yang terjadi melalui transformasi, transduksi,
dan konjugasi pada bakteri (Gardner,at al., 1991).
Kriteria
Proses rekombinasi Dibutuhkan kontak sel Sensitif terhadap DNase
Transformasi Tidak Ya
Transduksi Tidak Tidak
Konjugasi Ya Tidak
B. Transduksi
Proses transfer gen bakteri melalui perantara virus dinamakan transduksi.
Virus yang menyerang bakteri disebut bakteriofage, atau disebut juga fage.
Fenomena ini pertama ditemukan oleh Lederberg dan Zinder (Volk &
Wheeler.1984). Transduksi adalah proses pemindahan bahan genetik dari
suatu bakteri ke bakteri lain melalui bakteriofage. Bila bakteriofage
menyerang bakteri maka DNA bakteriofage diinjeksikan ke dalam sel bakteri.
Proses transduksi dipergunakan untuk mengembangkan galur-galur bakteri
baru, memetakan kromosom bakteri dan untuk banyak percobaan genetis lain
(Gardner, dkk, 1991).
Saat DNA fage dikemas di dalam pembungkusnya untuk membentuk
bakteri-bakteri fage baru, DNA fage tersebut dapat membawa sebagian dari
DNA bakteri yang telah menjadi inangnya. Selanjutnya, bila fage
menginfeksi bakteri lainnya, maka fage akan memasukkan DNAnya yang
mengandung sebagian dari DNA bakteri inang sebelumnya. Dengan
demikian, fage tidak hanya memasukkan DNAnya sendiri ke dalam sel
bakteri yang diinfeksinya, tetapi juga memasukkan DNA dari bakteri lain
yang ikut terbawa pada DNA fage. Jadi, secara alami fage memindahkan
DNA dari satu sel bakteri ke bakteri lainnya. Ada dua kemungkinan yang
terjadi yaitu sel mengalami lisis atau bersifat lisogenik (Snustad & Simmons,
2012). Ada dua tipe transduksi yaitu transduksi umum (generalized
transduction) dan transduksi khusus (specialized transduction).
1. Transduksi Umum
Transduksi umum terjadi bila suatu fage memindahkan gen dari kromosom
bakteri atau plasmid. Fage transduksi dimulai dengan adanya sel inang
yang diinjeksi fage. Partikel-partikel fage yang baru terbentuk di dalam sel
inang dan kromosom inang hancur. Salah satu partikel fage yang terbentuk
membawa fragmen DNA bakteri secara random dan disimpan di dalam
kepala fage tersebut. Hal tersebut terjadi karena enzim endonuklease yang
berperan dalam pengemasan DNA fage tanpa sengaja mengemas DNA
inang.
Ketika sel inang mengalami lisis, partikel transduksi dilepaskan bersama-
sama dengan fage normal. Partikel transduksi tidak dapat mereplikasi diri,
tetapi dapat mempengaruhi sel lain jika menginjeksi sel inang baru.
Kromosom sel inang dapat mengalami rekombinasi dengan DNA yang
dibawa partikel transduksi. Rekombinasi terjadi karena adanya allel sifat
yang sama baik dari DNA inang maupun DNA yang dibawa oleh fage.
Bakteri yang dapat mengalami transduksi umum contohnya Salmonella
thypimurium (Gardner, dkk, 1991).
Gambar 7. Mekanisme Transduksi Umum
2. Transduksi Khusus
Transduksi khusus biasanya terjadi pada daerah spesifik pada kromosom
inang yang terintegrasi langsung dengan genom fage. Hanya gen bakteri
yang dekat dengan titik penempelan saja yang bisa terintegrasi dengan
genom fage. Hal ini terjadi pada fage temperate tertentu. Fage transduksi
khusus ini terbentuk karena adanya kesalahan saat rekombinasi eksisi dari
profage. Karena DNA profage terikat dengan DNA inang, maka proses
replikasi dikendalikan oleh inang. Kebanyakan DNA fage diekspresikan
pada saat fage berada dalam fase profage (Anthony, dkk. 2004).
Pada induksi profage, genom fage terpisah dari DNA inang. Proses ini
disebut eksisi. Eksisi akan membentuk fage, prosesnya mirip dengan
pembentukan plasmid. Pada eksisi yang biasa terjadi, yang akan lepas dari
DNA inang hanyalah DNA fage itu sendiri. Tetapi pada beberapa
fenomena, fage yang terbentuk yang membawa gen-gen inang yang berada
di sebelahnya. Contohnya adalah profage ʎ yang terintegrasi diantara gen
gal dan bio pada kromosom E. coli dapat membawa gen gal dan bio
bersama DNA fage saat proses eksisi. Setelah fage terpisah dari DNA
inang, fage berreplikasi hingga sel induk lisis. Fage yang membawa gen
inang merupaka fage defektif yang dapat mengakibatkan rekombinasi pada
sel yang dijadikan inang baru (Gardner, dkk, 1991).
Gambar 10. proses transformasi bakter. A : segmen DNA bergabung dengan DNA
genom. B; Segmen DNA membentuk plasmid baru
1. Transformasi Alam
Sebagian besar jenis sel tidak dapat mengambil DNA secara efisien
kecuali mereka telah terpapar dengan zat kimia atau listrik khusus untuk
membuatnya lebih permeabel. Namun, beberapa jenis bakteri secara
alami dapat ditransformasikan, yang berarti bahwa mereka dapat
mengambil DNA dari lingkungannya tanpa memerlukan perlakuan
semacam itu. Bahkan bakteri yang dapat berubah secara alami tidak
selalu mampu mengambil DNA tetapi melakukannya hanya pada tahap
tertentu dalam siklus kehidupan mereka atau di bawah kondisi
pertumbuhan tertentu.
Bakteri pada tahap di mana mereka dapat mengambil DNA dikatakan
kompeten, dan bakteri yang secara alami mampu mencapai keadaan ini
dikatakan secara alami kompeten. Bakteri transformatif yang kompeten
secara alami ditemukan pada beberapa genus, termasuk bakteri gram
positif, seperti Bacillus subtilis, bakteri tanah, dan Streptococcus
pneumoniae, yang menyebabkan infeksi tenggorokan, dan bakteri gram
negatif, seperti Haemophilus influenzae, agen penyebab pneumonia. dan
meningitis tulang belakang, Neisseria gonorrhoeae, yang menyebabkan
gonorrhea, dan Helicobacter pylori, suatu patogen perut. Acinetobacter
baylyi, bakteri tanah lain, sangat sangat mudah berubah, seperti juga
beberapa spesies cyanobacteria laut, termasuk Synechococcus. Thermus
thermophilus, thermophile ekstrim, dan Deocococcus radiodurans, suatu
organisme yang tahan terhadap tingkat radiasi yang tinggi, juga secara
alami kompeten. Genome sequencing telah mengungkapkan bahwa
banyak organisme lain yang belum dibuktikan secara alami dapat
ditransformasikan mengandung beberapa gen yang diketahui terlibat
dalam kompetensi pada spesies lain, menunjukkan bahwa beberapa
organisme ini dapat berubah dalam kondisi tertentu.
2. Langkah Transformasi Alam
Langkah-langkah umum yang terjadi dalam transformasi alam agak
berbeda dalam sistem yang berbeda. Sistem model terbaik yang dicirikan
adalah B. subtilisand S. pneumoniae (gram positif) dan H. influenzaeand
N. gonorrhoeae (gram negatif). Proses pengambilan DNA tergantung
pada apakah bakteri gram negatif atau gram positif, karena adanya
membran luar pada bakteri gram negatif. Pada bakteri gram negatif,
langkah-langkah dasarnya adalah (i) pengikatan doubleblestranded DNA
ke permukaan sel luar dari bakteri, (ii) pergerakan DNA beruntai ganda
melintasi membran luar dan dinding sel, (iii) degradasi satu untaian
DNA, dan (iv) translokasi sisa untai DNA ke dalam sitoplasma sel di
seluruh membran dalam. Sekali dalam sel, DNA transformasi beruntai
tunggal dapat secara stabil berintegrasi ke dalam genom dengan
rekombinasi homolog dari untaian tunggal yang ditranslokasi ke dalam
kromosom atau DNA penerima lainnya, membangun kembali dirinya
sebagai plasmid setelah sintesis untai komplementer dan daur ulang
menggunakan rekombinasi, atau direndahkan. Dalam organisme gram
positif yang tidak memiliki membran luar, DNA dua kali lipat berikatan
dengan permukaan luar, satu untai terdegradasi, dan untai lainnya
diangkut melalui dinding sel dan membran.
BAB III
PENUTUP
A. Simpulan
1. Materi genetik pada bakteri terdiri dari DNA dan plasmid (materi genetik
ekstrakromosomal).
2. Proses perpindahan materi genetik pada bakteri dapat dilakukan dengan
konjugasi, transduksi, dan transformasi.
B. Saran
http://dewirha93.blogspot.co.id/2015/03/genetika-mikroba.html
http://mynameisobos.blogspot.co.id/2014/10/makalah-genetika-mikroba.html
http://ag1992.blogspot.co.id/2015/06/genetika-mikroba.html 26