Edy Batara Mulya Siregar Jurnal KOMUNIKASI PENELITIAN

Emmy Harso Khardinata Volume 17 ( 2) 2005

REKAYASA GENETIKA TANAMAN CABAI

(Capsicum annuum L.) TAHAN VIRUS MOSAIK
KETIMUN (CMV)

Edy Batara Mulya Siregar

Emmy Harso Khardinata
Laboratorium Bioteknologi, Fakultas Pertanian
Universitas Sumatera Utara

Abstrak
Pemuliaan tanaman merupakan suatu usaha untuk memperbaiki sifat atau bentuk tanaman. Proses pemuliaan
tanaman biasanya diawali dengan mendapatkan variabilitas genetik, melakukan kegiatan seleksi terhadap
sumber genetik tersebut, melakukan persilangan-persilangan dan seleksi lanjutan. Hal ini menjadi masalah bila
sifat yang diinginkan tidak terdapat pada sumber genetik tersebut, maka harus dicari dari sumber genetik lainnya.

Keperluan akan varietas cabai yang bermutu, terutama yang mempunyai ketahanan terhadap penyakit virus
sangat diperlukan dan dirasakan sangat mendesak. Telah pula diketahui bahwa pengendalian penyakit infeksi
yang terbaik adalah dengan menggunakan varietas yang resisten. Menurut Hull (1990), terdapat tiga pendekatan
untuk mencegah penurunan produksi akibat serangan virus, yaitu: (1) menghilangkan sumber infeksi, (2)
mencegah penyebaran virus, dan (3) menggunakan varietas yang tahan. Penggunaan varietas tahan
mempunyai keunggulan, yaitu secara ekonomi paling baik untuk petani, berwawasan lingkungan (mengurangi
penggunaan pestisida), dan efektif untuk jangka panjang.

Kata kunci: Rekayasa genetika, CMV

A. Pendahuluan produktivitas cabai di Indonesia, di antaranya

Tanaman cabai merupakan tanaman
hortikultura yang penting di Indonesia. Bila
dibandingkan dengan tanaman sayuran
lainnya, tanaman cabai menempati pilihan
utama yang ditanam petani. Total area
tanaman cabai merupakan yang terbesar,
yaitu mencapai luas 182.000 hektar sampai
tahun 1999. Jumlah ini kurang lebih 21,5 %
dari total area seluruh pertanaman sayuran
di Indonesia (BPS, 1999).
Berdasarkan data-data permintaan dan
produksi, diproyeksikan bahwa permintaan
terus meningkat dengan laju 13 % setiap
tahun. Jika produktivitas tidak ditingkatkan,
maka pemerintah akan mengimpor produk
segar cabai maupun produk hasil olahannya
setiap tahun.
Produktivitas tanaman cabai di Indonesia,
yaitu rata-rata 2,6 ton per hektar merupakan
produktivitas yang paling rendah di Asia
Tenggara dengan rata-rata dapat mencapai
8-9 ton per hektar (BPS, 1999). Banyak
faktor yang menyebabkan rendahnya
beberapa virus sekaligus akan menambah
keparahan dan reduksi hasil panen. Puso
(pertanaman terserang total) pada
adalah: penggunaan benih yang kurang
bermutu, teknik budidaya yang belum
sempurna, dan tingginya serangan hama
dan penyakit.
Fenomena serangan virus kompleks
(dengan gejala keriting) pada tanaman
cabai merupakan masalah yang telah lama
dihadapi para petani cabai di Indonesia.
Penyakit virus kompleks pada cabai
merupakan penyakit virus yang disebabkan
oleh infeksi lebih dari satu jenis virus
tanaman. Tanaman cabai yang sakit
diinfeksi oleh beberapa jenis virus, di
antaranya yang dominan adalah virus
mosaik ketimun (CMV), virus etch
tembakau (TEV), virus moasik tembakau
(TMV), virus Y kentang, dan chilli veinal
mottle virus (CVMV).
Setiap pertanaman cabai yang terinfeksi
oleh penyakit ini tidak dapat menghasilkan
buah yang dapat dipanen. Keparahan dan
besarnya reduksi hasil panen akibat
penyakit ini bergantung pada varietas
tanaman, jumlah virus yang menginfeksi
dan waktu infeksi di lapangan. Terjadinya
infeksi yang lebih awal dan adanya infeksi
pertanaman cabai akibat infeksi virus
kompleks sering kali terjadi.
Telah diketahui bahwa budidaya cabai
1
Edy Batara Mulya Siregar
Emmy Harso Khardinata
merupakan usaha tani yang berbiaya tinggi,
sehingga resiko kegagalan harus dihindarkan.
Oleh karena itu pengembangan pengendalian
yang tepat terhadap infeksi virus mutlak
diperlukan.
Pemuliaan tanaman merupakan suatu
usaha untuk memperbaiki sifat atau bentuk
tanaman. Proses pemuliaan tanaman
biasanya diawali dengan mendapatkan
variabilitas genetik, melakukan kegiatan
seleksi terhadap sumber genetik tersebut,
melakukan persilangan-persilangan dan
seleksi lanjutan. Hal ini menjadi masalah
bila sifat yang diinginkan tidak terdapat
pada sumber genetik tersebut, maka harus
dicari dari sumber genetik lainnya. Telah
dibuktikan bahwa teknik rekayasa genetik
merupakan salah satu cara yang menjanjikan
untuk mendapatkan tanaman yang resisten
terhadap penyakit virus. Gen ketahanan
tersebut berasal dari virus sendiri, yaitu gen
CP CMV dan gen tersebut dapat dimasukkan
ke dalam genom tanaman cabai.
Keperluan akan varietas cabai yang bermutu,
terutama yang mempunyai ketahanan
terhadap penyakit virus sangat diperlukan
dan dirasakan sangat mendesak. Telah
pula diketahui bahwa pengendalian
penyakit infeksi yang terbaik adalah dengan
menggunakan varietas yang resisten.
Menurut Hull (1990), terdapat tiga
pendekatan untuk mencegah penurunan
produksi akibat serangan virus, yaitu:
(1) menghilangkan sumber infeksi, (2) men-
cegah penyebaran virus, dan (3)
menggunakan varietas yang tahan.
Penggunaan varietas tahan mempunyai
keunggulan, yaitu secara ekonomi paling
baik untuk petani, berwawasan lingkungan
(mengurangi penggunaan pestisida), dan
efektif untuk jangka panjang.
Penggunaan gen pembungkus protein (gen
CP) untuk pengendalian virus pertama kali
dilaporkan oleh Powell-Abel et al. (1986) pada
yaitu gen CP CMV sehingga tersedia untuk
digunakan dalam rekayasa genetik
2
Jurnal KOMUNIKASI PENELITIAN
Volume 17 ( 2) 2005
tanaman tembakau. Tanaman tembakau yang
mengandung dan mengekspresikan gen CP
TMV dapat menghambat infeksi virus TMV.
Nelson et al. (1988) bahkan telah
melakukan percobaan lapangan terhadap
tomat transgenik yang mengandung gen CP
TMV. Sejak laporan tersebut, berbagai
tanaman transgenik yang mengandung
berbagai gen CP telah diregenerasikan dan
diuji resistensinya terhadap infeksi virus.
Diantaranya adalah resistensi TMV pada
tomat, resistensi AlMV pada alfalfa, resistensi
PVY pada kentang dan tembakau,
resistensi PStV pada kacang tanah, dan
berbagai resistensi lain pada tanaman yang
berbeda. Resistensi terhadap penyakit virus
tanaman telah di-review secara vekstensif
oleh Grumet (1990), dan Hull (1990).
Tiga komponen kunci rekayasa genetik untuk
mendapatkan tanaman cabai transgenik
tahan virus adalah: (1) tersedianya gen
antivirus (gen CP CMV), (b) tersedianya
cara introduksi gen CP ke dalam genom
tanaman cabai dan regenerasi cabai
transgenik, serta (c) ekspresi gen CP pada
tanaman transforman. Dua komponen, yaitu
komponen (2) dan (3) pada tanaman cabai
telah diteliti pada penelitian sebelumnya
(Siregar et al., 1997, Siregar & Sudarsono,
1997). Kedua metode untuk komponen (2)
dan (3) telah dibakukan Proyek RUT IV dan
Graduate Team Research Batch II),
sehingga bila komponen (a) yang
diperlukan tersedia maka rekayasa genetik
tanaman cabai tahan virus dapat
dilaksanakan.
Laboratorium Virologi Jurusan Hama dan
Penyakit Tumbuhan dan Pusat Kajian
Pengandalian Hama Terpadu Fakultas
Pertanian, Institut Pertanian Bogor telah
mengadakan serangkaian penelitian untuk
mendapatkan tanaman cabai tahan virus,
baik melalui pendekatan pemuliaan maupun
dengan teknik rekayasa genetik (Proyek
RUT, Hibah Bersaing, Graduate Team
Research, dan kegiatan penelitian rutin
lainnya).
Pada penelitian dilaksanakan kegiatan-
kegiatan untuk menghasilkan gen anti virus,
tanaman cabai. Gen ketahanan tersebut
diintroduksikan ke dalam genom tanaman
Edy Batara Mulya Siregar
Emmy Harso Khardinata
cabai, sehingga dihasilkan tanaman cabai
transgenik yang tahan terhadap infeksi virus
CMV. Kegiatan penelitian ini juga
merupakan usaha untuk mengatasi
serangan penyakit virus kompleks pada
tanaman cabai dengan menggunakan
tanaman cabai transgenik tahan virus.
Selain itu, kegiatan penelitian ini juga
merupakan usaha untuk mengembangkan
sumberdaya manusia terampil untuk
menghasilkan sesuatu yang orisinil Indonesia.
Kegunaan dan Tujuan Khusus
Hasil penelitian ini diharapkan dapat
menghasilkan gen anti virus (gen CP CMV)
sehingga dapat digunakan dalam rekayasa
genetik tanaman, khususnya tanaman
cabai. Gen CP CMV tersebut juga dapat
dimasukkan ke tanaman lain yang biasa
diinfeksi oleh virus CMV. Pengembangan
sumberdaya manusia yang terampil dalam
bidang rekayasa genetik tanaman juga
merupakan kegunaan dari penelitian.
Tujuan khusus penelitian adalah:
1. Menyediakan gen anti virus CMV (gen
CP CMV)
2. Menghasilkan vektor transforman yang
mengandung gen CP CMV
3. Menghasilkan planlet tanaman cabai
transgenik yang mengandung gen CP
CMV.
Introduksi Gen CP CMV ke dalam Genom
Tanaman Cabai
Kegiatan penelitian ini meliputi persiapan
kultur bakteri, kokultivasi, seleksi, dan
pemeliharaan kultur. Tiga kultivar cabai,
yaitu Tit L. Super, Jatilaba, dan Laris
digunakan sebagai bahan tanaman
percobaan. Daun dari kecambah cabai in
vitro yang berumur 21 hari digunakan
sebagai eksplan untuk dikokultivasi. Pada
percobaan diuji pengaruh tingkat populasi
bakteri, waktu inokulasi, waktu kokultivasi
dan pengaruh pre-kultur sebelum eksplan
dikokultivasi.
B. Metode Penelitian
1. Introduksi Gen CP CMV ke dalam
Genom Tanaman Cabai
Esplan daun tanaman cabai yang berumur
Jurnal KOMUNIKASI PENELITIAN
Volume 17 ( 2) 2005
Sebagai penyeleksi adalah antibiotik
hygromycin untuk menekan pertumbuhan
sel tanaman asal sehingga sel transgenik
dapat tumbuh dan dapat dibedakan dari sel
yang lain. Konsentrasi antibiotik tersebut
diuji untuk mendapatkan efisiensi seleksi
hasil kokultivasi.
Analisis Molekuler Tanaman Transgenik
Tanaman trasngenik yang diperoleh dianalisis
secara molekuler untuk membuktikan
adanya integrasi gen CP CMV yang
diintroduksikan. Deteksi integrasi gen nptII
dan gen CP CMV dilakukan dengan teknik
PCR. Susunan primer dan kondisi PCR
yang digunakan disesuaikan dengan
susunan dan kondisi PCR yang telah
dipublikasikan.
Uji Ketahanan Tanaman Transgenik
Kegiatan ini bertujuan untuk mengetahui
ketahanan tanaman transgenic yang
diperoleh terhadap sejumlah strain virus
CMV. Bahan tanaman transgenik yang diuji
diperoleh dengan cara sebagai berikut:
tanaman transgenik pertama (R0) yang
diperoleh dari kultur diaklimatisasi dan
ditanam pada pot di rumah kasa tertutup.
Benih R1 (generasi F1) dikumpulkan dari
tanaman R0. Masing-masing sebanyak 20
buah tanaman R1 yang berumur 21 hari
digunakan untuk pengujian. Inokulasi
dilakukan secara mekanik sesuai prosedur
yang ada. Tiga minggu setelah inokulasi
daun pucuk tanaman cabai dianalisis
dengan teknik ELISA.
Pola Pewarisan Gen CP CMV pada
Tanaman Cabai
Pola pewarisan gen CP CMV yang terdapat
pada tanaman transgenik dipelajari untuk
mengetahui bagaimana pewarisan gen CP
CMV. Studi pola pewarisan gen CP CMV
pada tanaman cabai transgenik yang
diperoleh akan dilakukan sampai keturunan
R2. Kegiatan penelitian ini juga akan dapat
mengetahui kestabilan integrasi gen CP
CMV pada genom tanaman cabai.
21 hari dikokutivasi dengan kultur bakteri
Agrobacterium dengan cara merendam
eksplan di dalam suspensi bakteri selama
5 menit. Kemudian eksplan dikulturkan pada
media regenerasi, yaitu media dasar MS
3
Edy Batara Mulya Siregar
Emmy Harso Khardinata
yang ditambahkan BAP (4 mg/l) dan IAA
(0.25 mg/l), antibiotik penyeleksi (50 dan
100 mg/l; sesuai perlakuan). Jumlah antibiotik
yang ditambahkan pada media merupakan
bagian percobaan untuk mengetahui
efisiensi transformasi. Selain itu pada media
juga ditambahkan antibiotik cefotaxime (500
mg/l) untuk membunuh agrobacterium.
Eksplan disubkultur ke dalam media seleksi
yang masih segar setiap tujuh hari
sekali. Semua kultur
diinkubasikan dalam ruang Kultur dengan
intensitas penyinaran 1000 – 1500 lux
selama 24 jam. Suhu ruangan diatur
sehingga berkisar antara 26 - 28 0C.
Pengamatan dilakukan terhadap jumlah
eksplan yang hidup, jumlah eksplan yang
beregenerasi, dan jumlah tunas yang terbentuk.
Percobaan juga dilakukan untuk mengetahui
pengaruh tingkat populasi bakteri
(OD600 = 0,2 dan OD600 = 0,5), waktu
inokulasi (2.5 dan 5 menit), waktu kokultivasi
(0, 1, dan 2 hari) dan pengaruh pre-kultur
(1, 2, dan 3 hari) sebelum eksplan
dikokultivasi.
2. Analisis Molekuler Tanaman Transgenik
Tanaman transgenik yang diperoleh dianalisis
secara molekuler untuk membuktikan adanya
integrasi gen CP CMV yang diintroduksikan.
Deteksi integrasi gen nptII dan gen CP
CMV dilakukan dengan teknik PCR.
Susunan primer dan kondisi PCR yang
digunakan disesuaikan dengan susunan
dan kondisi PCR yang telah dipublikasikan.
DNA diisolasi dari tanaman putatif transgenik
dan kontrol dengan metode CTAB mengikuti
Murray & Thompson (1980). Pada analisis
molekuler digunakan polimerase amplitaq
yang berasal dari Perkin Elmer Cetus.
CMV. Studi pola pewarisan gen CP CMV
4
Jurnal KOMUNIKASI PENELITIAN
Volume 17 ( 2) 2005
Reaksi dilakukan dalam volume 10 ul yang
terdiri atas 1 ul DNA tanaman, dNTPs
0.2 mM (Perkin Elmer), MgCl2 1.25 mM
(Perkin Elmer), bufer PCR (Tris-HCl 20 mM,
50 mM KCl), primer 0.005 uM dan Taq DNA
polymerase 2.5 unit (Perkin Elmer). Susunan
primer gen nptII yang digunakan adalah:
5’ – CAA GAT GGA TTG CAC GCA GGT TC
– ’3 dan 5’ – TCC AGA TCA TCC TGA TCG
ACA AG – ’3 yang akan menghasilkan
fragmen amplifikasi sebesar 465 bp.
Kondisi PCR untuk amplifikasi gen nptII
dilakukan sebanyak 30 siklus, setiap siklus
terdiri atas 94 0C selama 1 menit, 55 0C
selama 1 menit, dan 72 0C selama 2 menit.
Hasil amplifikasi PCR kemudian dimigrasikan
pada gel agarose-ethidium bromide 1.5 %
dengan bufer TBE. Hasil migrasi diamati
dengan sinar UV (panjang gelombang 300
nm), didokumentasi dengan kamera
polaroid dan untuk penanda ukuran
fragmne DNA digunakan penanda 1.0 kb
ladder (Promega).
3. Uji Ketahanan Tanaman Transgenik
Kegiatan ini bertujuan untuk mengetahui
ketahanan tanaman transgenik yang
diperoleh terhadap sejumlah strain virus
CMV. Bahan tanaman transgenik yang diuji
diperoleh dengan cara sebagai berikut:
tanaman transgenik pertama (R0) yang
diperoleh dari kultur diaklimatisasi dan
ditanam pada pot di rumah kasa tertutup.
Benih R1 (generasi F1) dikumpulkan dari
tanaman R0. Masing-masing sebanyak 20
buah tanaman R1 yang berumur 21 hari
digunakan untuk pengujian.
Inokulasi dilakukan secara mekanik
sesuai prosedur yang ada. Tiga minggu
setelah inokulasi daun pucuk
tanaman cabai dianalisis dengan teknik
ELISA. Prosedur yang dilakukan sesuai
dengan petunjuk pada Agdia PathoScreen
Kit DAS ELISA Peroxidase. Hasil yang
diperoleh kemudian dibaca dengan alat
ELISA READER pada panjang gelombang
490 nm.
4. Pola Pewarisan Gen CP CMV pada
Tanaman Cabai
Pola pewarisan gen CP CMV yang terdapat
pada tanaman transgenik dipelajari untuk
mengetahui bagaimana pewarisan gen CP
pada tanaman cabai transgenik yang
Edy Batara Mulya Siregar Jurnal KOMUNIKASI PENELITIAN
Emmy Harso Khardinata Volume 17 ( 2) 2005

diperoleh akan dilakukan sampai keturunan pemanjangan tunas dengan media dasar
R2. Kegiatan penelitian ini juga akan dapat MS yang mengandung BAP (1 mg/l),
mengetahui kestabilan integrasi gen CP AgNO3 (5 mg/l), GA3 (2 mg/l) dan Ca-P (2
CMV yang diinsersikan pada genom mg/l). Tanaman putatif transgenik yang
tanaman cabai. diperoleh selanjutnya dianalisis secara
molekuler untuk membuktikan introduksi
C. Hasil dan Pembahasan gen yang ditransformasikan. Analisis
Semua tunas yang diperoleh selanjutnya molekuler masih menunggu tunas tanaman
disubkultur pada media pembesaran dan membesar dan lengkap menjadi tanaman.
Tabel 1. Respons Eksplan Daun Cabai CV. Tit L. Super terhadap Konsentrasi Antibiotik
Kanamycin yang Digunakan untuk Menyeleksi Eksplan. Inokulasi Eksplan Dilakukan dengan
Merendam dalam Suspensi Bakteri Selama 5 Menit dengan Jumlah Populasi Bakteri pada
OD600 = 0.5. Eksplan Dikultur pada Media Regenerasi yang Mengandung Antibiotik
Penyeleksi.
Konsentrasi Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Rerata Jumlah Tunas
Kanamycin Awal yang Hidup yang Bertunas (%) per Eksplan
(mg/l)
50 100*) 74 53 (73.6 %) 1.8
100 100 32 17 (53.1 %) 1.3
*) Data merupakan rerata dari 3 seri percobaan

Tabel 2. Respons Eksplan Daun Cabai CV. Tit L. Super terhadap Dua Populasi Bakteri yang
Digunakan untuk Menginokulasi Eksplan. Inokulasi Eksplan Dilakukan dengan Merendam
dalam Suspensi Bakteri Selama 5 Menit. Eksplan Dikultur pada Media Regenerasi yang
Mengandung Antibiotik Penyeleksi.
Populasi Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Rerata Jumlah
Bakteri Awal yang Hidup yang Bertunas (%) Tunas per Eksplan
OD600 = 0.2 100*) 68 18 (26.5%) 1.8
OD600 = 0.5 100 46 12 (23.5%) 1.5
*) Data merupakan rerata dari 3 seri percobaan

Tabel 3. Respons Eksplan Daun Cabai CV. Tit L. Super terhadap Dua Waktu Inokulasi yang
Digunakan untuk Menginokulasi Eksplan. Inokulasi Eksplan Dilakukan dengan Merendam
dalam Suspensi Bakteri. Populasi Bakteri yang Digunakan adalah OD600 = 0.5. Eksplan
dikultur pada Media Regenerasi yang Mengandung Antibiotik Penyeleksi.
Lama Inokulasi Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Rerata Jumlah
(menit) Awal yang Hidup yang Bertunas (%) Tunas per Eksplan
2.5 100*) 10 0 (0%) 0
5 100 32 3 (71.9%) 1.5
*) Data merupakan rerata dari 3 seri percobaan

Tabel 4. Respons Eksplan Daun Cabai CV. Tit L. Super terhadap Tiga Waktu Kokultivasi yang
Digunakan untuk Menginokulasi Eksplan. Inokulasi Eksplan Dilakukan dengan Merendam
dalam Suspensi Bakteri Selama 5 Menit. Populasi Bakteri yang Digunakan adalah OD600 = 0.5.
Eksplan Dikultur pada Media Regenerasi yang Mengandung Antibiotik Penyeleksi.
Lama Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Rerata Jumlah
Kokultivasi Awal yang Hidup yang Bertunas (%) Tunas per Eksplan
(hari)
0 100*) 64 42(65.6%) 1.6
1 100 24 9(37.5%) 1.3
2 100 0 0 0
*) Data merupakan rerata dari 3 seri percobaan

5
Tabel 5. Respons Eksplan Daun Cabai CV. Tit L. Super terhadap tiga Waktu Perlakuan Pre-Kultur
Eksplan Sebelum Inokulasi Eksplan Dilakukan. Inokulasi Eksplan Dilakukan dengan
Merendam dalam Suspensi Bakteri Selama 5 Menit. Populasi Bakteri yang Digunakan adalah
OD600 = 0.5. Eksplan Dikultur pada Media Regenerasi yang Mengandung Antibiotik
Penyeleksi.
Lama Pre- Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Jumlah Eksplan Rerata Jumlah
Kultur Awal yang Hidup yang Bertunas (%) Tunas per Eksplan
(hari)
1 100*) 72 45(62.5%) 1.8
2 100 66 41(62.1%) 1.7
3 100 58 32(55.2%) 1.2
*) Data merupakan rerata dari 3 seri percobaan

D. Daftar Pustaka Kaper, J.M and M.E. Tousignant, 1977.

Cucumber Mosaic Virus – Assosiated
Agrios, G.N., 1998. Plant Pathology. RNA-5. I. Role of Host Plant and
Second Edition. Academic Helper Strain in Determining Amount
Press. New York. P. 466-470. of Associated RNA-5 with Virions.
Brunt, A.A., Crabtree, K., Dallwitz, Virology. 80: 186-195.
M.J., Gibbs, A.J., Watson, L.
and Zurcher, E.J., 1996. Plant MacNab, A.A., A.F. Sherf and J.K. Springer,
Viruses Online: Descriptions 1983. Identifying Diseases of
and Lists from the Vegetables. The Pennsylvania State
VIDE University.
Database.Version:20thAugust19 Mashari, M.A., 2003. Virus Si Biang
96.’URL.(http://biology.anu.edu. Penyakit Tanaman. Majalah Pertanian
au/Groups/M ES/vide/). Abdi Tani. Wahana Informasi
Chabbouh, N. and C. Cherif, 1990. Pertanian. Surabaya. (Vol. 4. No. 3 /
Cucumber Mosaic Virus in Edisi XVI Juli.).
artichoke. FAO Plant. Prot. Bull. Murant, A.F. and A.M. Mayo, 1982.
38:52-53. Satellites of Plant Viruses. Ann. Rev.
Clark, M.F. and Adams, A.N., 1977. Phytophatologi. 20: 47-70.
Characteristic of the Microplate Provvidenti, R., R.W. Robinson and J.W.
Method of Enzyme-Linked Shail, 1980. A Source of Resistance
Immunosorbent Assay (ELISA) to A Strain of CMV in Lactucia saligna
for the Detection of Plant L. Hort Scpence, 15: 528-529.
Viruses. J. Gen. Virol. 34. 475- Rist, D.L and J.W. Lorbeer, 1989.
483. Occurrence and Overwintering of
Dixon, G.R., 1981. Vegetable Crop CMV and Broad Bean Wilt Virus in
Diseases. First American Weeds Growing Near Commercial
Edition. The AVI Publishing Lettuce Field in New York.
Company. Inc. Westport, Phytophatology. 79: 65-69.
Connecticut. Hong Kong. Russels, G.E. 1981. Plant Breeding for
Duriat, A.S. dan S. Sastrosiswojo, Pest and Disease Resistance.
1999. Pengendalian Hama Butterworths. Toronto. 427p.
Penyakit Terpadu Pada Setiadi, 1997. Bertanam Cabai. Penebar
Agribisnis Cabai. Dalam Swadaya. Jakarta.
Santika, A. (Editor). Agribisnis Siregar, E.B.M, 1993. Assosiasi Virus
Cabai. Penebar Swadaya. Mosaik Ketimun-Satelit RNA-5 dalam
Jakarta. Memproteksi Tanaman Tomat
Francki, R.I.B., D.W. Mossop and T. (Lycopersicon esculentum Mill.) dan
Hatta, 1979. Cucumber Mosaic Cabai Merah (Capsicum annuum L.)
Virus. CM1/AAB Description of Terhadap Virus Mosaik Ketimun
Plant Viruses. No. 213.
Patogenik. Laporan Penelitian and Breeding of Resistance to
Program Pascasarjana. IPB.
Watterson, J.C., 1993. Development
Pepper and Tomato Viruses. Pp 80- of Vegetable. Timber Press,
101. In Kyle, M.M. (Editor). Oregon.
Resistance to Virus Diseases