BAB 2

PEMBAHASAN

A. Ringkasan Jurnal

Tingkat pengendalian parasit yang efektif dan berkelanjutan tergantung pada deteksi
spesifiknya. Di laboratorium parasitologi, identifikasi parasit yang lebih akurat, terutama dalam
studi taksonomi trematoda, cestoda, nematoda, serta untuk membedakan telur dan larva
parasit masih didasarkan pada deteksi ciri morfologi spesifik dan detail struktur internal setelah
pewarnaan. menggunakan pewarna sintetis/alami, hematoxylin, eosin, pewarna Romanowsky,
Lactophenol cotton blue, Lugol's iodine, malachite green, carmine.

Hematoxylin yang paling banyak digunakan, pewarna alami yang diekstraksi dari kayu pohon
logwood (Hematoxylon campechianum) ditemukan di Meksiko dan Amerika Tengah yang
setelah oksidasi mencapai kemampuan pewarnaan karena pembentukan kationik hematin-Al+3
molekul. Eosin adalah pewarna sintetis, anggota keluarga pewarna xanthene, yang berasal dari
fluorescein. Fitur bermuatan negatif asam memungkinkan untuk mengikat dengan protein
bermuatan positif (protein kationik) - Arginin, lisin, dan histidin pada pH yang lebih rendah di
sitoplasma, jaringan ikat, dan protein nuklir. Alkohol eosin Y diformulasikan untuk
menghasilkan kontras yang optimal dengan hematoxyli kolagen, otot dan sitoplasma berbagai
warna oranye/merah muda.

Isolasi zat warna herbal dari ekstrak daun, bunga, kulit kayu, akar, dan bagian lain dari beberapa
spesies tanaman hias sebagian besar melibatkan pembuatan serbuk, pencampuran dengan
bahan lain, perebusan dalam air, dan pelarutan dalam pelarut anorganik atau organik.

Gula atau bit merah (Beta vulgaris) tanaman termasuk dalam subfamili Betoideae dari famili
Amaranthaceae dengan daun basal membentuk roset dan akarnya kokoh, kadang-kadang
menonjol membengkak membentuk bit bersama dengan hipokotil Mereka dapat digunakan
dalam banyak hal, sebagai obat dalam berbagai penyakit dan yang terpenting sebagai pewarna
alami yang meliputi warna kuning, oranye, merah, dan ungu pada es krim, minuman, dan
beberapa produk buah.

Penelitian ini direncanakan untuk mengevaluasi efektivitas ekstrak air dan alkohol dari pewarna
herbal seperti ekstrak bit merah (B. vulgaris), Cina naik (H. rosasinensis), dan mawar merah
(Rosa hybrida) sebagai pewarna alternatif untuk pewarna konvensional, hematoxylin dalam
pewarnaan cacing pipih.

Pengumpulan dan persiapan bahan tanaman

Bunga dikumpulkan dari taman universitas sementara akar bit merah dibeli dari pasar lokal.
Kelopak bunga dipisahkan dengan cara dipetik dengan tangan, dan bit merah diiris kecil-kecil.

Ekstraksi etanol

Lima puluh gram bahan tanaman yang tidak dikeringkan dicampur dengan 100 ml etanol 96% (0,5 g/ml).
Kemudian, mereka diinkubasi pada suhu 4 ° C selama 24-48 jam untuk ekstraksi lengkap dari noda.
Ekstrak dilanjutkan ke prosedur pemurnian.

Pemurnian ekstrak

Pada akhir setiap prosedur ekstraksi, ekstrak dimurnikan dengan proses penyaringan dua langkah.
Awalnya, ekstrak disaring melalui wire mesh diikuti dengan penyaringan menggunakan kertas saring
Whatman. Filtrat disentrifugasi pada 5000 rpm selama 30 menit. Supernatan dikumpulkan ke dalam
botol reagen dan setelah pelabelan yang tepat disimpan pada suhu 4 ° C sampai penggunaan berikutnya.

Pewarnaan parasit

Seluruh atau segmen spesimen Platyhelminthes diikat dan difiksasi di antara dua slide dan diawetkan
dalam formalin 10%. Setelah difiksasi dan diratakan, spesimen dipindahkan dari formalin 10% ke dalam
etanol 70% selama minimal 15 menit. Spesimen direndam dalam larutan pewarna dan diinkubasi selama
1-2 hari. Untuk menghilangkan noda yang berlebihan tanpa kehilangan pigmentasi, spesimen diinkubasi
ke dalam alkohol asam (2 ml HCl pekat dalam 100 ml etanol 70%) selama 1-5 menit.

Spesimen yang telah dihilangkan nodanya dipindahkan lagi ke dalam etanol 70% selama 1 jam untuk
mengeringkannya. Untuk dehidrasi lebih lanjut, spesimen ditempatkan ke dalam 80, 90, dan etanol
100% selama 1 jam di setiap larutan. Spesimen yang terdehidrasi dijernihkan ke dalam clearing agent,
minyak cengkeh. Setelah dibersihkan, spesimen dipasang pada slide menggunakan diastrenedibutil ftalat
xilena. Larutan hematoxylin dan saline mount digunakan sebagai kontrol dalam penelitian ini.
Hasil

Ekstrak mempertahankan kemampuan sekarat dan stabilitas selama sekitar 1 bulan bila disimpan pada
4°C. Semua ekstrak menunjukkan kondisi sedikit asam, saat diperiksa menggunakan kertas pH. Ekstrak
bit merah tampak berwarna merah tua hingga coklat sedangkan ekstrak mawar berwarna merah muda
hingga merah muda-merah. Cacing bernoda memperoleh berbagai tingkat pigmentasi dengan
perbedaan struktur internal mereka menggunakan ekstrak tumbuhan ini sebagai sebanding dengan
kontrol.
Gambar 1: Platyhelminthes diwarnai dalam ekstrak bit gula (Ekstrak berair: (a) Fasciola gigantica, (b)
bagian depan F. gigantica, (c) bagian tengah F. gigantica, (d) bagian depan Gastrothylax crumenifer, (e)
bagian tengah G. crumenifer, (f) segmen dari Moniezia expansa; ekstrak alkohol: (g) bagian anterior F.
gigantica, (h) bagian depan G. crumenifer, (i) segmen dari M.expansa).

Gambar 2: Platyhelminthes diwarnai dalam ekstrak mawar Cina (Ekstrak berair: (a) Bagian anterior
Fasciola gigantica, (b) bagian depan Gastrothylax crumenifer, (c) segmen dari Moniezia expansa, (d)
segmen dari Taenia solium; ekstrak alkohol: (e) bagian tengah F. gigantica, (f) segmen dari T. solium).

Gambar-3: Platyhelminthes diwarnai dengan ekstrak mawar merah (Ekstrak berair: (a) Bagian anterior
Fasciola gigantica, (b) bagian tengah Gastrothylax crumenifer, (c) segmen dari Moniezia expansa, (d)
segmen dari Taenia solium; ekstrak alkohol: (e) bagian tengah F. gigantica, (f) segmen dari M.expansa).

Ekstrak mawar lebih baik daripada ekstrak gula bit dalam pewarnaan cacing,F. raksasa dan G.
crumenifer, terutama pengisapnya, usus bercabang, kelenjar vitelline, saluran vitelline, ootipe. Bagian
dalam proglottid (cirrus, kantong cirrus, dan vas deference) dan agregasi telur dariM.expansa dan T.
solium mengambil warna kuning hingga coklat dengan kontras yang baik pada bit gula dan merah muda
menjadi merah muda-merah di Cina dan noda mawar merah .

Metode ekstraksi tidak memberikan perbedaan yang terlalu signifikan dalam pola pewarnaan spesimen
yang diwarnai. Ekstrak air/alkohol mawar merah adalah pewarna yang cocok dan dengan jelas
mendefinisikan organ internal parasit, duri permukaan tubuh, telur, dan terutama uji cabang trematoda
dibandingkan dengan ekstrak mawar China. Ekstrak air Cina/mawar merah memberikan warna yang
lebih kontras daripada ekstrak alkohol karena air mendidih mengekstrak lebih banyak zat pigmen
daripada alkohol