PANDUAN

MONITORING RESISTENSI VEKTOR

TERHADAP INSEKTISIDA

DIREKTORAT PENCEGAHAN DAN PENGENDALIAN PENYAKIT TULAR VEKTOR DAN ZOONOTIK

DIREKTORAT JENDERAL PENCEGAHAN DAN PENGENDALIAN PENYAKIT
TAHUN 2018
ii PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA
 KATA PENGANTAR

Puji syukur kita ucapkan ke hadirat Tuhan Yang Maka Kuasa

atas terbitnya Buku Panduan Monitoring Resistensi Nyamuk Vektor
Terhadap Insektisida, yang merupakan penyempurnaan dari panduan
sebelumnya.
Hingga saat ini insektisida masih digunakan dalam upaya
pengendalian penyakit tular vektor seperti malaria dan demam
berdarah dengue di Indonesia maupun di berbagai negara lain di dunia.
Fenomena resistensi vektor terhadap insektisida merupakan masalah
serius dalam upaya pengendalian vektor. Penggunaan insektisida
yang terlalu sering dan dalam jangka waktu lama dapat menyebabkan
terjadinya resistensi vektor. Jika sebagian besar populasi nyamuk
vektor sudah resisten terhadap insektisida maka akan menyebabkan
penggunaan insektisida menjadi tidak efektif untuk mengendalikan
vektor. Oleh karena itu diperlukan upaya untuk mendeteksi terjadinya
resistensi sedini mungkin, melalui kegiatan pengujian status kerentanan
insektisida secara berkala.
Semakin lambat resistensi dideteksi, semakin besar pula kerugian
yang ditimbulkan; karena insektisida sudah tidak efektif lagi dalam
memutuskan rantai penularan, akan mengakibatkan inefisiensi dalam
pembiayaan upaya pengendalian penyakit tular vektor. Selain itu,
semakin lama inseksitida tersebut digunakan, proporsi populasi nyamuk
vektor yang resisten akan semakin banyak sehingga memerlukan waktu
yang lebih lama untuk mengembalikan populasi serangga tersebut
menjadi rentan lagi. Kejadian resistensi vektor terhadap insektisida di

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA iii

suatu wilayah akan menyebabkan tidak efektifnya upaya pengendalian
penyakit tular vektor. Guna mencegah meluasnya resistensi, diperlukan
pemantauan dini status kerentanan vektor di wilayah-wilayah yang
melakukan pengendalian vektor menggunakan insektisida. Oleh
karena itu diperlukan adanya panduan pelaksanaan pengujian status
kerentanan nyamuk terhadap insektisida yang standar.
Terima kasih kami sampaikan kepada Komite Ahli Vektor dan
Binatang Pembawa Penyakit serta semua pihak yang telah berkontribusi
dalam penyusunan buku panduan ini, kiranya panduan ini dapat
menjadi acuan dalam pelaksanaan uji kerentanan vektor nyamuk
terhadap insektisida.
Kami menyadari masih terdapat banyak kekurangan dalam
buku panduan ini. Untuk itu kritik dan saran terhadap penyempurnaan
pedoman ini sangat diharapkan. Semoga buku panduan ini memberikan
manfaat bagi pelaksanaan uji kerantanan nyamuk dalam rangka
pengendalian vektor di Indonesia.

Jakarta, Oktober 2018

Direktur Pencegahan dan
Pengendalian Penyakit Tular Vektor
dan Zoonotik,

dr. Siti Nadia Tarmizi, M. Epid

NIP 19720831 200003 2 001

iv PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 TIM PENYUSUN

1. Dr. Suwito, SKM, M. Kes (Kasubdit Vektor BP2)

2. Prof. Sudomo (Komli)
3. Prof. Din Syafruddin, Ph. D (Komli)
4. Prof. Dr. drh. Upik Kusumawati Hadi, MS (Komli)
5. dr. Isra Wahid, Ph. D (Komli)
6. Dr. Lukman Hakim (GF Malaria)
7. dr. Tri Baskoro Tunggul Satoto, M. Sc, Ph. D (Komli)
8. Dra. Widiarti, M. Kes (Komli)
9. Drs. Z. Bahang Luhulima, MS (Komli)
10. Tri Wibowo Ambar Garjito, S. Si, M. Kes (Komli)
11. Drs. Saktiono, M. Sc (Komli)
12. Ir. Indrosancoyo AW, MM (Komli)
13. dr. Thomas Suroso, MPH (Komli)
14. Dra. Shinta, M. Si (Komli)
15. Dr. Ir. Martini, M. Kes (Komli)
16. dr. Herdiana, MPH (WHO Indonesia)
17. Bambang Siswanto, SKM, M. Kes (Subdit Vektor BP2)
18. Palge Hutagaol, SKM, MECH (Subdit Vektor BP2)
19. Yuliarni, S. SiT, MPH (Subdit Vektor BP2)
20. Dra. Fitri Riyanti, M. Si (Subdit Vektor BP2)
21. Sarjono (Subdit Vektor BP2)
22. Dr. drh. Sugiarto, M. Kes (Subdit Vektor BP2)
23. Yahidin Selian, SKM, M. Sc (Subdit Vektor BP2)
24. Dra. Vivi Widarsih (Subdit Vektor BP2)
25. Dahlia Hutagaol, SKM (Subdit Vektor BP2)

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA v

26. Shelvia Nova, SKM (Subdit Vektor BP2)
27. Hermawan Susanto, S. Si, MKM (Subdit Malaria)
28. dr. Galuh Budhi Leksono Adhi, M. Kes (Subdit Arbovirosis)
29. Lucky Mardan, SKM (BTKLPP Kelas I Palembang)
30. Ali Arsad Kerubun, SKM (BTKLPP Kelas II Ambon)
31. Ahadi Kurniawan, S. Si, M. Sc. PH (BTKLPP Kelas I Medan)
32. Avia Putriati Martha, S. Si (BBTKLPP Surabaya)
33. Budi Santoso, SKM (BTKLPP Kelas I Batam)
34. dr. Stanny (BBTKLPP Jakarta)
35. Y. Didik Setiawan, M. Sc (BBTKLPP Yogyakarta)
36. Nofrianus Sirapa, SKM (BTKLPP Kelas I Manado)
37. Supriyadi, S. Si, M. Kes(BBTKLPP Banjarbaru)
38. Naswir, S. Si, M. Sc (BTKLPP Kelas I Makassar)
39. Poppy Kurnia Galuh Tyas Kusuma (Dinas Kesehatan Provinsi
Kalimantan Timur)
40. Marthen F Robaha, SKM (Dinas Kesehatan Provinsi Papua)
41. Edi Sunandar, ST, M. Si (Dinas Kesehatan Provinsi Papua Barat)
42. Edward Ricardo, SKM, M. Kes (Dinas Kesehatan Provinsi
Lampung)
43. Akhmad Hasan Huda, SKM, M. Si (Dinas Kesehatan Provinsi
Jawa Timur)
44. Hironimus Taitoh, S. Sos (Dinas Kesehatan Provinsi NTT)
45. Risa E Lating, SKM (Dinas Kesehatan Provinsi Maluku)

vi PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 DAFTAR ISI

Hal

Kata Pengantar ................................................................................................... iii

Tim Penyusun....................................................................................................... v
Daftar Isi................................................................................................................. vii
Definisi Operasional........................................................................................... x
BAB. I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang............................................................................... 1
1.2. Tujuan............................................................................................... 3
BAB. II. UJI KERENTANAN VEKTOR
2.1. Lokasi dan Waktu ........................................................................ 4
2.1.1. Lokasi................................................................................................ 4
2.1.2. Waktu................................................................................................ 5
2.2. Pelaksanaan.................................................................................... 6
2.2.1. Pelaksanaan Uji............................................................................. 6
2.2.2. Hasil Uji............................................................................................ 7
BAB. III JENIS DAN CARA KERJA UJI KERENTANAN VEKTOR
3.1. Uji Kerentanan Nyamuk ....................……………………………… 8
3.1.1. Uji Standar WHO (WHO Susceptibility test)..................... 8
3.1.1.1. Persiapan.............................................……………………………… 8
3.1.1.2. Koleksi Nyamuk Uji.........................……………………………… 11
3.1.1.3. Pelaksanaan Pengujian..................……………………………… 14
3.1.1.4. Analisis Data......................................……………………………… 16
3.1.1.5. Kesimpulan Hasil Uji.......................……………………………… 17
3.1.2. Uji Botol CDC (CDC BioAssay test).……………………………… 18
3.1.2.1. Latar Belakang...................................……………………………… 18

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA vii

 3.1.2.2. Tujuan...................................................……………………………… 18
3.1.2.3. Kriteria Penggunaan Metode Uji Botol CDC................. 18
3.1.2.4. Bahan dan Alat..................................……………………………… 19
3.1.2.5. Reagen.................................................……………………………… 20
3.1.2.6. Materi Yang Akan Diuji..................……………………………… 20
3.1.2.7. Cara Kerja............................................……………………………… 21
3.1.2.7.1. Persiapan Botol Uji.......................……………………………… 21
3.1.2.7.2. Cara Melapisi Botol Uji Dengan Insektisida............... 21
3.1.2.8. Prosedur Pencucian dan Pengeringan Botol Uji.......... 24
3.1.2.9. Memasukkan Nyamuk Uji ke Dalam Botol.................... 24
3.1.2.10. Prosedur Uji Botol CDC....................................................... 25
3.1.2.11. Kriteri Nyamuk Mati............................................................. 26
3.1.3. Interpretasi / Penafsiran Data................................................. 26.
3.1.4. Pembuatan Stock Solution................ ……………………………. 27
3.2. UJI KERENTANAN LARVA.......................................................... 30
3.2.1. Persiapan.................................................…………………………….. 30
3.2.2. Metode Koleksi Larva Aedes.......... …………………………….. 31
3.2.3. Metode Koleksi Larva Anopheles.... ……………………………. 33
3.2.4. Identifikasi Larva Aedes dan Anopheles............................ 35
3.2.5. Pelaksanaan Uji kerentanan Larva Dengan Temephos. 37
3.2.6. Prosedur Uji Resistensi Menggunakan Larvasidasi
Kimiawi dan Bakteri.............................. ……………………………. 38
3.2.7. Analisis Hasil Uji........................................................................... 40

viii PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

BAB. IV. MONITORING DAN EVALUASI
4.1 Waktu dan Lokasi......................................................................... 44
4.2. Pelaksanaan.................................................................................... 44
4.3. Pelaporan......................................................................................... 45

BAB. V. PENUTUP ............................................................................................... 46
DAFTAR PUSTAKA............................................................................................... 47
DAFTAR LAMPIRAN............................................................................... 48.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA ix

 DEFINISI OPERASIONAL

1. Formula Abbot
Rumus perhitungan untuk menentukan persen kematian
terkoreksi
2. Animal bait trap
Metode untuk koleksi nyamuk vektor (khususnya untuk vektor
malaria) menggunakan umpan binatang ternak (sapi, kerbau
dan ternak lain yang memungkinkan) yang ditempatkan didalam
kelambu.
3. Daerah Endemis
Wilayah dengan kejadian penyakit yang sama selama tiga tahun
berturut-turut
4. Discriminating Dose
Dosis insektisida murni tertentu yang dilarutkan dalam
pelarut yang dipaparkan pada bagian tubuh nyamuk uji untuk
membedakan proporsi sampel dari populasi nyamuk yang rentan
dan resisten secara fenotip.
5. Discriminating consentration
Konsentrasi insektisida yang dipaparkan pada waktu tertentu
digunakan untuk membedakan proporsi sampel dari populasi
nyamuk yang rentan dan resisten secara fenotip. Yang ditulis
sebagai persentase ingridien aktif per unit volume yang pelarut
minyak yang diaplikasikan pada kertas tes dalam jumlah unit
tetap.

x PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

6. F0
Populasi nyamuk yang diambil dari lapangan dan dikembangkan/
dibiakkan di laboratorium
7. F1
Populasi nyamuk generasi pertama yang dipakai sampel uji
kerentanan vektor. Dalam pengertian lain adalah nyamuk dewasa
yang baru saja menetas dari telur-telur nyamuk yang berasal
dari alam untuk memperoleh sampel yang homogen untuk uji
kerentanan vektor.
8. GPS
Global Positioning System adalah alat untuk menentukan
letak dipermukaan bumi dengan bantuan penyelarasan
(synchronization) sinyal satelit.
9. Knock Down
Kondisi nyamuk terpapar insektisida yang menyebabkan nyamuk
paralisis (jatuh) dan dapat berlanjut ke kematian.
10. Koleksi Jentik
Metode yang digunakan untuk koleksi larva/jentik nyamuk
Anopheles, Aedes, Culex dan lainnya untuk tujuan tertentu seperti
identifikasi, mengukur populasi, mengetahui luas penyebarannya
termasuk melakukan pemetaan tempat perkembangbiakan
spesies nyamuk vektor.
11. Nyamuk Vektor
Nyamuk yang dapat menularkan, memindahkan, dan/atau
menjadi sumber penular penyakit
12. Nyamuk uji
Nyamuk yang dikumpulkan dari lapangan dan dipersiapkan
untuk dipaparkan dengan insektisida uji

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA xi

13. Rentan
Nyamuk sampel uji yang mati setelah dipaparkan dosis insektisida
tertentu.
14. Rearing nyamuk
Upaya memperoleh sejumlah nyamuk uji yang cukup dilakukan
dengan caraberternak atau mengembang biakkan nyamuk fase
larva hingga fase dewasa.
15. Resisten
Sample dari populasi nyamuk uji yang bertahan hidup setelah
dipaparkan dosis insektisida tertentu.
16. Resistensi
Kemampuan serangga nyamuk untuk mentoleransi dosis/
konsentrasi insektisida yang memberikan kematian pada
sebagian besar populasi pada spesies yang sama, pada waktu
tertentu di suatu tempat
17. Resistensi Silang
Resistensi terhadap dua atau lebih golongan insektisida yang
mempunyai mekanisme kerja yang sama
18. Resistensi Ganda
Resistensi terhadap dua atau lebih golongan insektisida yang
mempunyai mekanisme kerja yang beda
19. Resting collection
Metode yang digunakan untuk koleksi nyamuk dewasa dalam
keadaan hidup baik yang hinggap didinding dalam dan atau diluar
rumah atau yang hinggap disemak semak disekitar pemukiman
baik pada waktu malam atau pagi/siang hari, yang cara dan
penggunaannya disesuaikan dengan tujuan survei entomologi
yang ditetapkan.

xii PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

20. Uji Kerentanan
Uji yang dilakukan padapopulasi nyamuk dikumpulkan dari
lokasi tertentu yang dipaparkan terhadap dosis insektisida
tertentu. Uji ini dapat dilakukan dengan metode menurut WHO
dan atau CDC.
21. Vektor Primer
Spesies nyamuk yang mempunyai proporsi paling tinggi sebagai
vektor di suatu daerah
22. Vektor Sekunder
Spesies nyamuk selain vektor primer yang telah dikonfirmasi
sebagai vektor (suspek vektor)
23. Vektor Potensial
Genus nyamuk yang dicurigai dapat menularkan, memindahkan,
dan/atau menjadi sumber penular penyakit namun belum
dikonfirmasi sebagai vector
24. Sinergis
Bahan yang digunakan dalam pengendalian vektor yang berfungsi
untuk menghambat enzim detoksifikasi terhadap insektisida.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA xiii

xiv PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Saat ini resistensi insektisida merupakan fenomena global yang
dirasakan oleh semua pemangku kepentingan (stakeholders) di negara-
negara maju maupun negara-negara berkembang termasuk Indonesia.
Dengan adanya system monitoring yang baik, resistensi dapat dikelola
dengan baik
Resistensi ditandai oleh menurunnya efektivitas suatu insektisida.
Resistensi insektisida berkembang setelah adanya proses seleksi pada
serangga vektor yang terpapar insektisida secara terus menerus
menyebabkan jumlah individu yang rentan dalam suatu populasi
semakin menurun dan meningkatkan proporsi individu resisten dalam
populasi. Masalah resistensi menjadi lebih kompleks karena terjadi
resistensi ganda (multiple resistance) atau silang (cross resistance). 
Faktor-faktor yang menyebabkan berkembangnya resistensi
meliputi faktor genetik (frekuensi, jumlah dan dominansi alela resisten),
bioekologi (perilaku vektor, jumlah generasi per tahun, sex ratio,
keperidian dan mobilitas), dan operasional (jenis dan sifat insektisida
yang digunakan, persistensi, bentuk formulasi, dosis/konsentrasi,
frekuensi, cara aplikasi dan stadium sasaran). Faktor genetik dan
bioekologi lebih sulit dikelola dibandingkan dengan faktor operasional.
Mekanisme resistensi serangga terhadap insektisida digolongkan
menjadi:

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 1

1. Peningkatan enzim detoksifikasi insektisida karena bekerjanya
enzim-enzim tertentu pada serangga, seperti enzim
dehidroklorinase terhadap organoklorin; enzim mikrosomal
oksidase terhadap karbamat, organofosfat dan piretroid;enzim
glutation S-transferase, hidrolase dan esterase terhadap
organofosfat.
2. Penurunan kepekaan sasaran insektisida pada serangga seperti
asetilkolinesterase (Kdr) terhadap organofosfat dan karbamat,
juga sistem saraf (Kdr) terhadap organoklorin dan piretroid.
3. Penurunan laju penetrasi insektisida melalui kulit (integumen)
4. Perubahan perilaku menghindar.
Fenomena resistensi merupakan masalah serius dalam
upaya pengendalian vektor. Untuk itu upaya deteksi dan monitoring
resistensi terhadap insektisida perlu dilakukan sedini mungkin. Apabila
terjadi kegagalan dalam pengendalian dengan insektisida terhadap
vektor maka kemungkinannya terjadi karena berkembangnya populasi
resisten. Jika tingkat resistensi sangat tinggi maka akan memerlukan
waktu yang lama untuk mengembalikan populasi serangga rentan.
Oleh karena itu perlu diterapkan metode deteksi yang mudah, cepat
dan akurat.
Tingkat resistensi dapat diukur melalui uji laboratorium, dengan
prinsip membandingkan respon terhadap insektisida tertentu antara
populasi uji dengan populasi rentan.Metode deteksi yang standar
tersebut diperlukan juga untuk memonitor penyebaran dan tingkat
keparahan resistensi secara spasial dan temporal. Metoda yang
sudah digunakan adalah dengan WHO Susceptibility Test dan CDC
Bottle Bioassay. Pengujian biokimia dapat juga dilakukan untuk
mengidentifikasikan aktifitas enzim yang terkait dengan mekanisme

2 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

resistensi dan metode genetika molekuler untuk mendeteksi
keberadaan gen resisten dan memastikan kejadian resisten genetik
(mutasi genetik).
Resistensi vektor terhadap insektisida yang digunakandi suatu
wilayah akan menimbulkan tidak efektifnya upaya pengendalian
penyakit tular vektor. Oleh karena itu terjadinya resistensi vektor perlu
dideteksi sedini mungkin, agar penggunaan insektisida tersebut dapat
segera ditinjau ulang (review) dan jika diperlukan diganti insektida
lain yang sesuai. Atas dasar itu maka diperlukan pemantauan secara
teratur status kerentanan vektor di berbagaiwilayah yang melakukan
pengendalian vektor menggunakan insektisida.
Buku ini memuat langkah-langkah teknis pelaksanaan uji
resistensi nyamuk dewasa dan larva dengan metode standar WHO,
uji resistensi nyamuk dewasa dengan metode botol CDC serta
penyelenggaraan monitoring resistensi nyamuk vektor di Indonesia;
disusun sebagai panduan petugas kesehatan dan institusi-institusi
lain yang menyelenggarakan uji resistensi insektisida, serta bagi para
pengambil keputusan dalam menetapkan kebijakan penggunaan dan
rotasi insektisida.

1.2 Tujuan
1. Memberikan panduan pada kegiatan monitoring resistensi
nyamuk vektor terhadap insektisida
2. Standarisasi metode pengujian kerentananvektor terhadap
insektisida
3. Standarisasi pelaporan pengujian kerentanan vektor
terhadap insektisida
4. Sebagai bahan pertimbangan kebijakan penggunaan
insektisida

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 3

 BAB II
UJI KERENTANAN VEKTOR

Uji kerentanan vektor terhadap insektisida adalah suatu upaya

pemeriksaan laboratorium untuk menentukan apakah suatu populasi
nyamuk vektor telah resisten terhadap insektisida tertentu. Uji ini
dapat dilakukan pada stadium larva/jentik dan dewasa. Sampai saat
ini beberapa cara uji telah lazim digunakan oleh kalangan industri,
pemerintah dan lembaga swasta.
Insektisida yang diuji lebih diprioritaskan pada insektisida yang
sedang dipakai oleh program pengendalian vektor, dan insektisida
cadangan yang akan dipakai oleh program bila terbukti resistensi pada
insektisida yang ada.
Prioritas penentuan lokasi uji resistensi berdasar data
epidemiologi penyakit malaria atau arbovirosis dengan berkoordinasi
antara program malaria, arbovirosis dengan program vektor dan
binatang pembawa penyakit.

2.1 Lokasi dan Waktu

1.1.1. Lokasi
Lokasi uji resistensi terhadap nyamuk dilaksanakan pada daerah
dengan kriteria berikut:
- Daerah endemis penyakit tular vektor, atau
- Daerah dengan angka kepadatan vektor diatas angka
baku mutu vektor, atau

4 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 - Daerah yang telah melakukan pengendalian vektor
dengan metode kimia lebih dari 2 tahun.
Selain kriteria di atas, untuk wilayah endemis malaria dengan
prioritas sebagai berikut:
- Kabupaten endemis malaria dengan API > 5 ‰
- Daerah yang terjadi peningkatan kasus atau KLB
- Daerah yang setelah 2 tahun dilakukan aplikasi insektisida
tidak menunjukkan adanya penurunan insidens kasus
malaria.
Untuk wilayah endemis arbovirosis dengan prioritas sebagai
berikut:
- Daerah dengan IR DBD > 49 per 100.000 penduduk.
- Daerah endemis dengan ABJ < 95 %.
- Daerah yang terjadi peningkatan kasus atau KLB

1.1.2. Waktu
Kegiatan monitoring resistensi insektisida dilaksanakan satu
tahun sekali pada setiap kabupaten/kota atau KKP, melalui uji
kerentanan vektor terhadap insektisida. Kegiatan uji kerentanan
ini dapat dilaksanakan selama 6-12 hari tergantung lokasi
survei/ pengujian. Lama kegiatan tersebut termasuk survei larva,
penangkapan nyamuk, identifikasi spesies dan pelaksanaan
uji. Pelaksanaan monitoring resistensi dilakukan pada puncak
kepadatan nyamuk, atau bila data kepadatan nyamuk tidak
tersedia, kegiatan dilakukan satu bulan sebelum puncak jumlah
kasus malaria atau arbovirosis berdasarkan laporan tahun
sebelumnya.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 5

2.2 Pelaksanaan
1.1.1. Pelaksana Uji
Uji kerentanan vektor terhadap insektisida dilaksanakan oleh
tenaga entomolog kesehatan atau tenaga kesehatan lain yang
terlatih dan memiliki laboratorium entomologi. Uji ini dapat
dilakukan oleh petugas Pusat (Direktorat P2PTVZ, B/BTKLPP,
KKP) Dinas Kesehatan Provinsi, Kabupaten/Kota atau Puskesmas
dan institusi lain yang memiliki kompetensi.
Pelaksanaan uji melalui alur sebagai berikut:

Tahap 1 : Untuk menilai frekuensi resistensi fenotipe

Uji kerentanan dengan dosis dasar/diskriminasi (1x)

≥ 98% kematian 90-97% kematian nyamuk <90% kematian nyamuk uji

nyamuk uji: uji: Resisten
Rentan Terduga resisten

Lakukan pengujian

<90% kematian nyamuk uji

Resisten

Untuk menilai intensitas resistensi fenotipe

Tahap 2 :

Uji kerentanan dengan dosis 5x

≥ 98% kematian nyamuk uji: <98% kematian nyamuk uji

Intensitas resisten rendah Intensitas resisten sedang

Uji kerentanan dengan dosis 10x

≥ 98% kematian nyamuk uji: <98% kematian nyamuk uji

Intensitas resisten tinggi Intensitas resisten sangat tingggi

Untuk menilai mekanisme resistensi

Tahap 3 :
Synergist PBO -insecticide bioassay Molecular atau biochemical
Membandingkan paparan insektisida assays

6
dengan synergist-insecticide Hasil dan interpretasi
PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA
Kematian nyamuk kematian nyamuk uji Kaji resistensi pada Hasil dan
uji pada pada Insecticide- alel proses
insecticide- synergist lebih tinggi lainnya
synergistlebih dari hanya 0% >0%
rendah dari hanya insektisida: frekuensi frekuensi
insektisida: Mekanisme alel alel
Mekanisme metabolik terlibat
metabolik tidak
terbukti
 Uji kerentanan dengan dosis 10x

≥ 98% kematian nyamuk uji: <98% kematian nyamuk uji

Intensitas resisten tinggi Intensitas resisten sangat tingggi

Untuk menilai mekanisme resistensi

Tahap 3 :
Synergist PBO -insecticide bioassay Molecular atau biochemical
Membandingkan paparan insektisida assays
dengan synergist-insecticide Hasil dan interpretasi

Kematian nyamuk kematian nyamuk uji Kaji resistensi pada Hasil dan
uji pada pada Insecticide- alel proses
insecticide- synergist lebih tinggi lainnya
synergistlebih dari hanya 0% >0%
rendah dari hanya insektisida: frekuensi frekuensi
insektisida: Mekanisme alel alel
Mekanisme metabolik terlibat
metabolik tidak
terbukti

Mekan Mekan Mekanisme

Mekanisme Mekanisme
isme isme terdeteksi
metaboliktidak metabolik
tidak terdet /tidak
terdeteksi terdeteksi
terdet eksi terdeteksi
eksi

1.1.2. Hasil Uji

Hasil uji kerentanan vektor harus diinformasikan ke
Direktorat Pencegahan dan Pengendalian Penyakit Tular
Vektor dan Zoonotik (P2PTVZ). Halsil uji tersebut sebagai
dasar untuk menyusun pernyataan status resistensi vektor,
yang ditetapkan oleh Direktur P2PTVZ setelah mendapatkan
rekomendasi dari Komli Vektor dan Binatang Pembawa
Penyakit. Hasil monitoring resistensi vektor terhadap
insektisida digunakan untuk mendapatkan rekomendasi
senyawa/bahan aktif (insektisida) yang akan digunakan
dalam rotasi dan penggunaan insektisida.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 7

 BAB III
JENIS DAN CARA KERJA UJI KERENTANAN VEKTOR

1.1. Uji Kerentanan Nyamuk

1.1.1. Uji Standar WHO (WHO Susceptibility test)

1.1.1.1. Persiapan
a. Mengumpulkan data sekunder tentang riwayat penggunaan
insektisida oleh program, permukiman/rumah tangga,
pertanian dan perkebunan (minimal 2 tahun terakhir)
di lokasi survei dan menentukan lokasi survei yang akan
dilakukan monitoring resistensi vektor terhadap insektisida
(koordinat lokasi survei diukur dengan GPS).
b. Mempersiapkan bahan dan peralatan untuk uji kerentanan,
bahan dan alat sebagai berikut :
1). Alat Pemeliharaan (Rearing) Nyamuk
- Kurungan nyamuk
- Nampan plastik/tray
- Pipet
- Makanan larva
- Cawan / kobokan
- Kertas saring
- Kertas tissue
- Air Gula 10 %

8 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 - Vitamin C
- Air sumur
- Handuk katun
- Paper cup
- pH Meter
- Kapas
- Senter
- Counter
- Wadah pengendap air
- Marmut
2). Alat / Bahan Penangkap Nyamuk Uji
- Tabung aspirator
- Paper cup
- Timer
- Higrometer
- Termometer maksimum-minimum
- Larutan gula 10%
- Handuk katun
- Kain kasa
- Gunting
- Senter
- Karet gelang
- Kapas
- Cool box

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 9

 3). Alat / Bahan Uji Kerentanan
- WHO Susceptibility test kit
- Insecticides impregnated paper
- Control impregnated paper
- Larutan gula 10 %
- Kapas
- Mikroskop Stereo
- Kertas label/masking tape
- Kertas tissue
- Gunting
- Cawan petri
- Pinset
- Nuct Vial (eppendorf)
- Silika gel
- Chloroform

Gambar 3.1. Tabung WHO Susceptibility Test Kit

10 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

1.1.1.2. Koleksi Nyamuk Uji
a. Nyamuk Aedes spp.
1) Lokasi sampling
Jumlah titik sampel minimal 100 rumah/ bangunan di
wilayah kelurahan/desa atau wilayah kerja KKP sampai
diperoleh jumlah jentik yang cukup untuk diuji.
2) Larva dari setiap kontainer diambil secara proporsional/
sama jumlahnya.
3) Larva terkumpul dipelihara sampai menghasilkan F0/
F1/F2 untuk digunakan sebagai nyamuk uji.
4) Sampling nyamuk uji
Jumlah nyamuk yang digunakan dalam uji setiap bahan
aktif insektisida sebanyak 120 sampai 150 nyamuk
(masing-masing unit perlakuan (4 tabung) dan kontrol
(2 tabung) terdiri atas 20-25 nyamuk)
5) Kondisi fisiologis nyamuk relatif homogen
- Spesies sama
- Betina
- Umur nyamuk berkisar 3-5 hari
- Kondisi perut kenyang larutan gula 10%.
6) Identifikasi spesies
- Dilakukan sebelum uji tanpa merusak nyamuk.
- Dikelompokkan berdasarkan spesies.
- Identifikasi dilakukan dengan melihat ciri khas
- Identifikasi spesies berdasar kunci identifikasi
nyamuk Aedes

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 11

 - Hasil identifikasi dimasukkan dalam paper cup
dengan spesies yang sama sampai jumlahnya
memenuhi kebutuhan uji.

b. Nyamuk Anopheles spp.

1) Jumlah titik dan area sampel
Jumlah titik dan area sampel ditentukan secara
purposive sampling. Pengumpulan nyamuk dilakukan
sesuai dengan keberadaan nyamuk vektor setempat
(topografi, ekosistem, musim dan kepadatan populasi).
2) Koleksi nyamuk dapat dilakukan dengan beberapa
cara tergantung kondisi lokasi lingkungan setempat,
sebagai berikut:
- animal bite trap, dan/atau
- resting collection dan/atau
- human landing collection, dan/atau
- larval collection.
catatan: metode sesuai dengan modul entomologi
3) Nyamuk/larva yang diperoleh dari habitatnya disimpan
dalam botol-botol/wadah berisi air (larva) dan paper
cup untuk yang dewasa.
4) Nyamuk/larva yang terkumpul tersebut dipelihara
sampai menghasilkan F0/ F1/ F2 untuk digunakan
sebagai nyamuk uji.
5) Jika tidak memungkinkan untuk dilakukan rearing,
dapat menggunakan nyamuk yang diambil dari
lapangan dengan cara:

12 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 - animal bite trap, dan/atau
- resting collection dan/atau
- human landing collection, dan/atau
- larval collection.
- Metode lain yang memungkinkan.
6) Sampling nyamuk uji
Jumlah nyamuk yang digunakan dalam uji setiap bahan
aktif insektisida sebanyak 120 sampai 150 nyamuk
(masing-masing unit pajanan (4 tabung/ulangan) dan
kontrol (2 tabung/ulangan) terdiri atas 20-25 nyamuk)
7) Kondisi fisiologis nyamuk relatif homogen:
- Spesies sama
- Betina
- Umur nyamuk berkisar 3-5 hari
- Kondisi perut kenyang larutan gula 10%.
8) Identifikasi nyamuk
- Identifikasi sebaiknya dilakukan sebelum uji
tanpa merusak nyamuk, jika tidak memungkinkan
identifikasi dilakukan stetelah nyamuk di uji.
- Dikelompokkan berdasarkan spesies.
- Identifikasi dilakukan dengan melihat ciri khas
(spesifik) dari lokasi.
- Identifikasi spesies berdasar kunci identifikasi
nyamuk Anopheles
- Hasil identifikasi dimasukkan dalam paper cup
dengan spesies yang sama sampai jumlahnya
memenuhi kebutuhan uji.
- Setelah uji selesai nyamuk disimpan berdasar
respon dan diperiksa ulang spesiesnya, untuk
konfirmasi.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 13

1.1.1.3. Pelaksanaan Pengujian
a. Untuk setiap uji bahan aktif, siapkan susceptibility test kit
- Untuk Aedes 6 pasang (2 kontrol & 4 ulangan)
- Untuk Anopheles 6 pasang (2 kontrol & 4 ulangan)
- Tabung penyimpanan (holding tube) ditandai warna
hijau, dilapisi dengan kertas putih yang bersih (tanpa
minyak pelarut/insektisida).
- Tabung pajanan (exposure tube) ditandai dengan warna
merah
- Tabung kontrol (control tube) ditandai dengan warna
kuning
- Impregnated paper yang digunakan sesuai
discriminating dose WHO 2016.
b. Masukkan nyamuk dalam tabung holding selama 1 jam.
c. Hitung dan catat jumlah nyamuk yang pingsan & mati
(tidak diikutkan dalam uji)
d. Pindahkan dengan hati-hati ke tabung perlakuan.
e. Untuk bahan aktif yang bersifat knock down (melumpuhkan)
lakukan pengamatan jumlah nyamuk setiap 5, 10, 15, 20,
30, dan 60 menit.
f. Posisi tabung vertikal (Gambar 2).
g. Lama perlakukan sesuai jenis insektisida yang digunakan
(lampiran 1)
h. Setelah selesai tahap pajanan, pindahkan kembali ke
tabung holding. Diamkan selama 24 jam.
i. Catat jumlah nyamuk yang mati

14 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 Gambar 3.2. Prosedur Pengujian Dengan Susceptibility Test
Kit (WHO, 2016)

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 15

1.1.1.4. Analisis Data
a. Hasil pengamatan dicatat dalam form
b. Nyamuk yang survive (masih hidup) setelah uji selesai,
dimatikan dengan cara dimasukkan ke dalam freezer dan
disimpan secara individual dalam nuct vial (eppendorf)
dengan label yang lengkap. Spesimen dalam nuct vial
(eppendorf) disimpan dalam wadah berisi silica gel. Nyamuk
ini dipersiapkan untuk uji mekanisme resistensi secara
molekuler/genetika di laboratorium rujukan.
c. Koreksi Angka Kematian Nyamuk Uji
Dihitung persentasi kematian nyamuk uji dan kontrol. Bila
persentasi kematian nyamuk kontrol setelah pengamatan/
pemeliharaan 24 jam antara 3-10%, maka persentase
kematian nyamuk uji dikoreksi dengan formula Abbot:

A-B
AI = X 100
100 - B
AI = % Kematian nyamuk uji setelah dikoreksi
A = % Kematian nyamuk uji
B = % Kematian nyamuk kontrol
d. Apabila persentasi kematian nyamuk kontrol lebih dari
10%, maka pengujian ini dianggap gagal dan harus diulang
lagi.
e. Kriteria Status Kerentanan
Tingkat kerentanan vektor ditentukan berdasarkan
persentase kematian nyamuk uji setelah periode
pengamatan/pemeliharaan 24 jam (WHO 2016).
- kematian nyamuk uji ≥ 98% dinyatakan rentan

16 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 - kematian nyamuk uji 90 - <98 % adalah terduga
resisten
- sedangkan kematian < 90% adalah resisten
1.1.1.5. Kesimpulan Hasil Uji
Jika hasil uji kerentanan menunjukkan kematian nyamuk uji
sebagai berikut:
a. Lebih besar/sama dengan 98% kematian, maka disimpulkan
bahwa nyamuk masih rentan terhadap insektisida
tersebut dan masih bisa digunakan untuk pengendalian
vektor pada spesies tersebut.
b. Kematian nyamuk 90% - < 98%, dinyatakan terduga
resisten.
c. Dibawah 90% kematian dinyatakan resisten.
d. Jika terjadi terduga resisten dan resisten, maka diteruskan
pengujian dengan dosis 5 kali, apabila hasil pengujian
kematian nyamuk dibawah 98% maka intensitas
resistensinya sedang, pada kondisi ini perlu dilakukan
rotasi berdasarkan golongan insektisida.
e. Untuk penggunaan kelambu berinsektisida, jika terduga
resisten dan resisten maka diteruskan dengan uji
mekanisme menggunakan uji penambahan sinergis (PBO).
Apabila kematian nyamuk pada sinergis + insektisida lebih
tinggi dibandingkan dengan insektisida saja, maka dapat
disimpulkan telah terjadi mekanisme resistensi metabolik.
Pada kondisi ini dapat dilakukan rotasi insektisida dengan
golongan yang sama dengan sinergis atau insektisida
golongan berbeda.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 17

1.1.2. Uji Botol CDC (CDC Bottle BioAssay Test)
1.1.2.1. Latar Belakang
Uji Botol CDC dilakukan untuk mendeteksi atau membaca
karakteristik vektor terhadap insektisida apakah resisten atau
rentan. Uji botol CDC adalah uji menggunakan botol yang
dilapisi dengan satu jenis insektisida yang akan memberikan
informasi apakah nyamuk yang akan diuji resisten atau
susceptible/rentan serta informasi tentang intensitas resistensi.
Di samping itu, uji ini juga bisa digunakan untuk mengetahui
mekanisme resistensi dengan menggunakan sinergis. Metode
ini lebih efisien, cepat dan mudah dilakukan dibandingkan
dengan uji resistensi yang lain. Prinsip metode pengujian
ini sama dengan uji WHO bioassay, dengan memasukkan
insektisida yang telah dilarutkan dengan aceton atau ethanol
absolut (untuk beberapa jenis insektisda tertentu) ke dinding
botol bagian dalam secara merata. Dosis yang digunakan
dapat disesuaikan dengan intensitas resistensi yang ada.
1.1.2.2. Tujuan
a. Untuk menentukan status dan intensitas resistensi dari
nyamuk uji
b. Untuk mengetahui mekanisme resistensi metabolik pada
nyamuk
1.1.2.3. Kriteria Penggunaan Metode Uji Botol CDC
a. Uji Botol CDC dapat digunakan sebagai monitoring berkala
kerentanan insektisida, misalnya dilakukan 1 kali dalam
satu tahun
b. Apabila di lokasi tersebut mempunyai lebih dari 1 spesies
vektor, uji kerentanan disesuaikan dengan spesies tersebut.

18 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

1.1.2.4. Bahan dan Alat
a. Botol Wheaton volume 250 ml berwarna bening beserta
tutupnya. Untuk tiap kali uji digunakan 5 buah botol, yaitu
4 botol untuk uji dan 1 untuk control
b. Pipet plastik (disposable pipette) atau micropipette dengan
tips dengan volume minimal 1 ml
c. Aspirator untuk mengumpulkan nyamuk yang akan diuji
d. Paper cup untuk penyimpanan sementara nyamuk sebelum
dimasukkan ke botol uji
e. Botol untuk stok larutan insektisida berupa botol berwarna
atau botol bening yang dilapisi dengan foil wrapped/
aluminium foil
f. Timer untuk menghitung dalam menit
g. Permanent markers/spidol untuk labelling/menandai botol,
tutup, dan pipet agar tidak tertukar.
h. Sarung tangan karet sekali pakai (Disposible gloves)
i. Kertas, bolpoint, dan pensil untuk pencatatan data
j. Alas (Lab Mat)/taplak meja untuk menghindari kontaminasi
pada meja uji

Gambar 3.3. Pemberian label pada botol uji/wheaton bottle

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 19

1.1.2.5. Reagen
a. Technical grade/ absolut Aceton atau technical grade/
absolut ethanol untuk melarutkan insektisida
b. Insektisida yang akan di uji (technical grade/senyawa murni
atau formulasi)

1.1.2.6. Materi Yang Akan Diuji

a. Nyamuk betina spesies tertentu, diutamakan yang dikoleksi
dalam bentuk jentik dari alam (F0/ F1/ F2), atau jika tidak
memungkinkan dapat menggunakan hasil penangkapan
nyamuk dewasa
b. Nyamuk betina yang akan diuji berumur 3 - 5 hari dengan
kondisi sudah diberi makan larutan gula 10%
c. Pada situasi dimana lebih dari satu spesies yang
dikumpulkan dari alam maka direkomendasikan untuk
identifikasi spesies sebelum uji dan spesies yang dominan
(> 95%) itu yang di uji
d. Bila tidak ada spesies yang dominan maka tetap dilakukan
uji dan melakukan identifikasi setelah uji
e. Spesies yang bertahan hidup setelah waktu diagnostik
akan diidentifikasi secara khusus
f. Perlu diperhitungkan waktu puncak kepadatan nyamuk
dan data sekunder kasus (data nyamuk 1 bulan sebelum
puncak kasus)

20 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

1.1.2.7. Cara Kerja

1.1.2.7.1. Persiapan Botol Uji

Botol uji dapat dipergunakan beberapa kali setelah dicuci.
Untuk botol yang akan dipergunakan lagi, badan dan tutup
botolnya harus diberi label dengan marking tape sebagai
penanda (Jangan menulis langsung di badan botol).
• Tandai 1 (satu) botol dan tutupnya tertulis KONTROL
• Tandai 4 botol dan tutupnya lainnya dengan angka (1,
2, 3 dan 4) sesuai jumlah replikasi, dan juga tanggal uji.
Botol ini merupakan botol uji berinsektisida (treated).
• Bila lebih dari satu konsentrasi yang akan diuji, tulis
konsentrasi yang akan diuji dan tanggal pelaksanaan
• Tandai botol dan tutupnya agar tidak tertukar, hal ini
penting karena insektisida yang melapisi botol akan
sama dengan insektisida yang menempel ditutupnya.

1.1.2.7.2. Cara Melapisi Botol Uji Dengan Insektisida

- Pastikan botol dan tutupnya kering sempurna
- Lepaskan tutup botol
- Sediakan satu pipet kontrol (Aceton) dan satu pipet uji.
Pipet kontrol diberi tanda “Kontrol” dan pipet uji diberi
tanda “larutan insektisida“
- Siapkan botol untuk membuat larutan stok (larutan
untuk siap uji) misalnya 50 ml/jenis insektisida yang
dapat digunakan untuk beberapa kali uji. Apabila tidak

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 21

 segera digunakan larutan stok dapat disimpan dalam
kulkas (40C). Cara pencampuran dapat dilihat pada
lampiran
- Teteskan aceton 1 ml ke dalam botol kontrol kemudian
tutup rapat.
- Teteskan insektisida yang akan diuji sebanyak 1 ml ke
dalam botol uji (treated) kemudian tutup rapat-rapat.
Pemolesan botol uji (coating) dan kontrol sebaiknya
dilakukan berjauhan atau ada jeda waktu 1 atau 2 jam
agar tidak tertukar dan terkontaminasi.
- Ulangi untuk botol berikutnya dengan cara yang sama
- Putar botol yang telah ditetesi insektisida atau kontrol
agar larutan menempel merata ke dasar botol
- Botol dibalik kemudian diputar agar menempel
ditutupnya juga
- Kemudian letakkan botol miring atau tidur dan
kemudian digulirkan. Lakukan berulang hingga larutan
tersebut menempel merata pada permukaan dalam
botol
- Lakukan pada semua botol uji

Pemolesan insektisida (coating) Pemolesan insektisida (coating)

pada dasar botol pada bagian atas botol

22 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

Pemolesan insektisida (coating) pada Pengeringan botol
bagian samping dalam botol

Gambar 3.4. Melapisi Botol Uji Dengan Insektisida

- Buka tutup botol secara perlahan untuk mengeluarkan

gas dan lanjutkan dengan menggulirkan botol hingga
terlihat dari seluruh ruang tidak ada larutan lagi dan
botolkeringsempurna
- Biarkan botol mengering, lalu tutup dengan kain atau
karton agar terlindung dari cahaya
- Apabila botol yang sudah siap belum akan digunakan
segera, simpan botol tadi di tempat yang gelap seperti
laci dengan tutup terbuka agar tidak lembab dengan
suhu kamar. Jika botol akan dikirim ke tempat lain, botol
dalam kondisi tertutup dengan tutup botol.
- Botol yang sudah berinsektisida tidak boleh digunakan
lebih dari 5 hari dihitung dari awal pemolesan botol uji
(coating) dan 5 kali penggunaan uji.
- Metode Uji Botol CDC secara visual dapat diakses melalui
website di www.youtube.com/watch?v=K6prY3jpPSU

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 23

1.1.2.8. Prosedur Pencucian dan Pengeringan Botol Uji
- Botol uji dicuci dengan air hangat dan dibilas dengan air
bersih minimal 3 kali
- Botol dikeringkan di dalam oven suhu 500C selama 15 – 20
menit hingga keseluruhan botol kering sebelum digunakan
- Apabila tidak ada oven dapat dikeringkan pada suhu ruang
atau dijemur dibawah sinar matahari dengan posisi tutup
dibuka. Apabila dalam kondisi lembab, botol uji dikeringkan
dengan tutup terbuka selama semalam atau dengan waktu
pengeringan lebih lama.
- Untuk memastikan pengeringan botol uji sudah memenuhi
syarat, masukkan beberapa nyamuk rentan ke dalam
botol uji yang baru saja dicuci dan dikeringkan. Indikator
kebersihan botol ditunjukkan dengan tidak adanya nyamuk
yang mati ketika dimasukkan ke dalam botol. Apabila
nyamuk mati lakukan pengulangan prosedur pencucian
dan pengeringan.

1.1.2.9. Memasukan Nyamuk Uji ke Dalam Botol

- Usahakan dalam aspirator tidak berembun atau basah oleh
udara dari dalam mulut agar nyamuk tidak menempel di
dinding aspirator
- Hembuskan perlahan-lahan nyamuk ke dalam botol dan
tidak terlalu keras dengan jumlah yang tidak terlalu banyak.
Sebaiknya tidak lebih dari 5 ekor setiap kali ditiupkan ke
dalam botol agar nyamuk tidak mati sebelum tersentuh
dengan insektisida

24 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 - Berhati-hati agar ujung aspirator tidak menyentuh ke
dinding botol agar tidak terkontaminasi dengan insektisida.
Aspirator untuk kontrol tidak dicampur penggunaannya
dengan untuk treated
- Jumlah nyamuk pada tiap botol tidak harus berjumlah
sama satu dengan yang lainnya
- Identifikasi spesies dari nyamuk sebelum atau sesudah
dilakukan uji.

1.1.2.10. Prosedur Uji Botol CDC

Uji Botol CDC dapat dilakukan dengan posisi berdiri atau
ditidurkan, yang penting harus tetap atau konsistent dengan
prosedur yang sama.
Langkah- langkahnya:
- Dengan aspirator masukkan 10 – 25 nyamuk ke dalam
botol kontrol
- Dengan aspirator yang berbeda masukkan 10 – 25 nyamuk
ke dalam botol uji
- Siapkan timer untuk menghitung waktu. Pastikan awal
masuknya nyamuk ke dalam botol sebagai menit ke 0.
Catat dan masukkan sesuai dalam formulir
- Jika ditemukan nyamuk mati pada menit 0 catat dan
masukkan ke dalam formulir
- Catat jumlah nyamuk yang hidup atau mati saja, tergantung
mana yang lebih memudahkan untuk dihitung setiap 15
menit sampai 2 jam.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 25

 - Apabila kematian nyamuk pada botol kontrol lebih dari 10
% dalam waktu 2 jam, maka uji harus diulang. Tetapi apabila
kematian kontrol antara 3 – 10 % maka perhitungan harus
menggunakan “Abbot formula“

3.11. Kriteria Nyamuk Mati

- Nyamuk dinyatakan “mati“ apabila nyamuk tidak dapat
berdiri.
- Untuk meyakinkan mati atau hidup bisa dengan memutar
botol perlahan – lahan, apabila nyamuk tidak dapat
bergerak dan terguling ketika botol diputar perlahan, maka
nyamuk dapat dikategorikan mati
- Untuk memudahkan perhitungan, maka pada menit-menit
awal uji dilakukan, yang dihitung adalah nyamuk yang mati,
dan sebaliknya pada menit-menit akhir uji yang dihitung
adalah nyamuk yang hidup.
- Pada tahap akhir dari uji, nilai prosentase nyamuk mati
pada waktu diagnostik (nyamuk mati/total nyamuk assay)
adalah nilai yang paling penting dalam grafik.

3.1.3. Interpretasi / Penafsiran Data

Jika hasil uji resistensi menunjukkan kematian nyamuk uji
sebagai berikut:
a. Lebih besar/sama dengan 98% kematian, maka disimpulkan
bahwa nyamuk masih rentan terhadap insektisida tersebut
dan masih bisa digunakan untuk pengendalian vektor pada
spesies tersebut.

26 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 b. Kematian nyamuk 80% - < 98%, dinyatakan terduga
resisten.
c. Dibawah 80% kematian dinyatakan resisten.
d. Jika terjadi terduga resisten dan resisten, maka diteruskan
pengujian dengan dosis 5 kali, apabila hasil pengujian
kematian nyamuk dibawah 98% maka intensitas resistensinya
sedang, pada kondisi ini perlu dilakukan rotasi berdasarkan
golongan insektisida.
e. Untuk penggunaan kelambu berinsektisida, jika terduga
resisten dan resisten maka diteruskan dengan uji
mekanisme menggunakan uji penambahan sinergis (PBO).
Apabila kematian nyamuk pada sinergis + insektisida lebih
tinggi dibandingkan dengan insektisida saja, maka dapat
disimpulkan telah terjadi mekanisme resistensi metabolik.
Pada kondisi ini dapat dilakukan rotasi insektisida dengan
golongan yang sama dengan sinergis atau insektisida
golongan berbeda
f. Penggantian golongan insektisida merujuk pada lampiran
Permenkes No. 50 tahun 2017 tentang Standar Baku
Mutu Kesehatan Lingkungan dan Persyaratan Kesehatan
untuk Vektor dan Binatang Pembawa Penyakit serta
Pengendaliannya.

3.1.4. Pembuatan Stock Solution

1. Persiapan pembuatan larutan stok dari technical grade/absolut
insektisida

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 27

 Misalkan kita menggunakan 100% deltamethrin sebagai technical
grade/absolut insektisida. Untuk mendapatkan konsentrasi 12,5
µg/botol larutkan 12,5 mg insektisida ke dalam aceton untuk
membuat 1 liter larutan total. Setiap 1 ml larutan mengandung
12,5 µg insektisida.
Tabel 3.1. Contoh dosis diagnosis dan waktu pengamatan untuk
nyamuk Anopheles dan Aedes

Tabel 3.2. Jumlah senyawa murni yang dibutuhkan untuk persiapan

pembuatan larutan stock

28 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 Gambar 3.5. Alur kerja uji botol CDC dengan zat sinergis

Gambar 3.6. Penentuan ambang resistensi (tambah keterangan <30

menit, 30-120 menit, > 120 menit)

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 29

1.2. UJI KERENTANAN LARVA
1.2.1. Persiapan
Mempersiapkan alat dan bahan untuk uji, sebagai berikut:
a) Alat dan Bahan Koleksi Larva Aedes
- Pipet plastik 5 ml
- Pipet dengan bola karet
- Nampan plastik warna putih/terang
- Spidol tahan air
- Global positioning system/GPS
- Kaca benda dan penutup
- Cool box
- Cidukan larva
- Saringan larva
- Senter
- Batu baterai
- Formulir entomologi
- Compound microscope
- Kertas tissue
- Selang plastik diameter 1cm, panjang 2 meter
- Plastik larva/pot plastik/botol larva 50 ml
b) Alat dan Bahan Koleksi Larva Anopheles
- Pipet plastik 5 ml
- Pipet dengan bulp
- Nampan plastik putih
- Spidol waterproof
- Global positioning system/GPS
- Kaca benda dan penutup
- Cool box
- Cidukan

30 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 - Saringan
- pH meter
- Formulir entomologi
- Compound microscope
- Kertas tissue
- Thermometer
- Refraktometer
- Plastik larva/pot plastik/botol larva 50 ml
c) Alat dan Bahan Uji Kerentanan Larva
- Larvasida kimiawi technical grade
- Larvasida bakteri
- Aquades
- Beaker glass 2000 ml : 1 gelas
- Beaker glass 300 ml : 4 gelas ulangan, 2 gelas kontrol
- Pipet plastic
- Tips 1000 microliter
- Micropipet 1000 microliter
- Sentrifuge dan biji magnet
- Penghitung waktu
- Penghitung jumlah larva (Counter)
- Label
- Termometer air
- Formulir uji kerentanan larva

1.2.2. Metode Koleksi Larva Aedes

Etika Mengunjungi Rumah
- Petugas pengamat larva bersama jumantik/kader
mendatangi rumah yang akan dijadikan tempat koleksi
larva.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 31

 - Mengucapkan salam dan memperkenalkan diri
- Mengutarakan maksud dan tujuan kunjungan
- Meminta izin untuk melakukan pemeriksaan larva di
dalam dan di luar rumah
- Melakukan pemeriksaan dan koleksi larva
- Bila rumah kosong, pindah ke rumah berikutnya
- Mengucapkan terimakasih dan salam
Koleksi larva dilakukan menurut metode survei potong
lintang/cross sectional survey. Pengambilan sampel
menggunakan metode stratified random sample dengan
cara:
- Daerah dengan angka insidensi (Incidence Rate/IR)
DBD > 49 per 100.000 penduduk
- Daerah endemis dengan ABJ <95 %
- Daerah yang terjadi peningkatan kasus atau KLB
- Riwayat penggunaan larvasida minimal 2 tahun
- Memilih Puskesmas yang mempunyai desa/kelurahan
endemis. Dari puskesmas terpilih, dipilih 1 desa/
kelurahan paling tinggi kasus demam berdarah.
- Dari 1 Desa/Kelurahan terpilih, ditentukan 1 RW. Dari
1 RW diambil 100 rumah/bangunan positif larva.
Pengambilan larva dilakukan dengan memeriksa
10 – 20 rumah/bangunan per RT. Apabila sampel
tidak mencukupi maka pencarian sampel larva bisa
diperluas ke RW terdekat untuk mendapatkan larva
yang heterogen.
- Cara pengambilan larva di setiap rumah/bangunan
dilakukan dengan menerangi air menggunakan senter
di tempat-tempat penampungan air : bak mandi,

32 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 drum, ember, aquarium, vas bunga dan lain-lain yang
potensial sebagai habitat larva nyamuk.
- Bila ditemukan kontainer positif larva, maka diambil
maksimal 5 larva dengan menggunakan pipet plastik/
selang dan dimasukkan ke dalam plastik/botol larva.
- Kita bisa juga mempersiapkan habitat larva dengan
memasang larvitrap 7 hari sebelum pelaksanaan
kegiatan, diambil maksimal 5 (lima) larva.
- Melakukan pencatatan identitas lokasi pengambilan
sampel larva menggunakan GPS dan dicatat dalam
formulir
- Hasil koleksi larva dibawa ke laboratorium, dilakukan
identifikasi spesies serta dipisahkan menurut spesies
dan stadiumnya.
- Menghitung jumlah dengan spesies yang sama dari
instar 3 akhir atau 4 awal (untuk larvasida kimia dan
bakteri) dan instar 2-3 (untuk larvasida IGR).
- Jumlah larva untuk pengujian sebanyak 150 larva,
bila jumlah tidak mencukupi, dapat melebarkan area
koleksi ke wilayah yang berdampingan dengan yang
telah didatangi.
- Bila ada kelebihan sample, maka sisa sample harus
dimusnahkan dengan air panas.

1.2.3. Metode Koleksi Larva Anopheles

- Kegiatan ini harus didahului dengan pemahaman
yang baik tentang tempat yang menjadi habitat
perkembangbiakan nyamuk. Langkah selanjutnya
adalah mencari informasi tentang jenis/tipe dan lokasi

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 33

 habitat larva yang terdapat di wilayah kegiatan. Tahap
selanjutnya adalah tahap pengumpulan larva, dilakukan
dengan menyisir seluruh area habitat larva secara teliti
untuk menemukan larva tersebut.
- Untuk mendapatkan larva Anopheles, dapat dilakukan
dengan cara mencari genangan-genangan air yang
diperkirakan menjadi habitat larva Anopheles, misalnya
sawah, rawa-rawa, pinggir-pinggir parit, kubangan,
jejak kaki sapi/kerbau dan lain-lain.
- Koleksi larva menggunakan cidukan, cidukan dicelupkan
dengan kemiringan 450  ke arah kumpulan larva. Pada
setiap genangan dengan luas sekitar 1m2 diambil 10
cidukan, bila habitatnya kecil dapat menggunakan
pipet, bila arealnya luas diambil beberapa titik sampel.
- Larva yang diperoleh dalam cidukan dipindahkan ke
botol larva menggunakan pipet plastik, botol larva
diberi label/ barcode sesuai dengan identitas dimana
larvanya diambil: tanggal, kode wilayah, kode tipe
habitat.
- Koleksi larva dilakukan pada semua genangan air di
wilayah kerja Puskesmas.
- Dilakukan pencatatan identitas lokasi pengambilan
sampel larva dan GPS dalam formulir terlampir
- Hasil koleksi dibawa ke laboratorium untuk dilakukan
uji.
- Menghitung jumlah instar 3 akhir dan 4 awal (untuk
larvasida kimia dan bakteri) dan instar 2-3 (untuk
larvasida IGR) sebanyak 150 larva.

34 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 1.2.4. Identifikasi Larva Aedes dan Anopheles
Ciri-ciri larva Aedes aegypti
- Bentuk larva menyerupai huruf S
- Bentuk siphon besar dan pendek yang terdapat
pada abdomen terakhir
- Bentuk gigi sisir/comb teratur seperti trisula
- Posisi istirahat larva Aedes aegypti membentuk
sudut di permukaan air.
Ciri-ciri larva nyamuk Anopheles
- Tidak memiliki siphon
- Posisi istirahat larva nyamuk Anopheles sejajar
dipermukaan air

Aedes aegypti Aedes albopictus Culex

Anopheles Mansonia Larva Aedes,

Anopheles, Culex

Gambar 3.7. Morfologi larva Aedes, Mansonia dan Culex sp

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 35

 Gambar 3.8. Posisi siphon dan comb untuk identifikasi larva

Ciri khusus ;
comb terusun
beraturan
dan berduri
seperti trisula

Gambar 3.9 Bentuk comb pada Ae aegypti

Ciri khusus ;
comb terusun
beraturan
dan berdu-
ri seperti
jarum, lurus

Gambar 3.10 Bentuk comb pada Ae albopictus

36 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 Ciri khusus:
comb susu-
nan bertum-
puk, tidak
beraturan

Gambar 3.11. Bentuk comb pada Culex

1.2.5. Pelaksanaan Uji Kerentan Larva Dengan Temephos

Pelaksanaan uji kerentaan larva dilakukan terhadap temephos
technical grade (bukan temephos formulasi granul), dengan
4 konsentrasi temephos technical grade yang tersedia, yaitu
156,25 mg/l, 31,25 mg/l, 6,25 mg/l dan 1,25 mg/l. Setiap
konsentrasi diencerkan menggunakan prosedur pengenceran
sebagai berikut :

A. Prosedur pengenceran
1. Pengenceran temephos 156,25 mg/L
- Mengambil dengan pipet temephos 156,25 mg/L
sebanyak 1 ml (menggunakan mikropipet).
- Menambahkan ke dalam aquades 249 ml sehingga
didapatkan konsentrasi 0.625 mg.
2. Pengenceran temephos 31,25 mg/L
- Mengambil dengan pipet temephos 31,25 mg/L
sebanyak 1 ml (menggunakan mikropipet).
- Menambahkan ke dalam aquades 249 ml sehingga
didapatkan konsentrasi 0.125 mg/L.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 37

 3. Pengenceran temephos 6,25 mg/L
- Mengambil dengan pipet temephos 6,25 mg/L
sebanyak 1 ml (menggunakan mikropipet).
- Menambahkan ke dalam aquades 249 ml sehingga
didapatkan konsentrasi 0.025 mg/L.
4. Pengencerantemephos 1,25 mg/L
- Mengambil dengan pipet temephos 1,25 mg/L
sebanyak 1 ml (menggunakan mikropipet).
- Menambahkan ke dalam aquades 249 ml sehingga
didapatkan konsentrasi 0.005 mg/L.

1.2.6. Prosedur Uji Resistensi Menggunakan Larvasida

Kimiawi dan Bakteri
- Menyiapkan 6 beaker glass; 4 gelas sebagai ulangan, di
isi larutan temephos yang telah dibuat pengenceran
sesuai prosedur ke masing-masing beaker glass
sebanyak 250 ml dan 2 gelas sebagai kontrol
- Untuk membuat larutan uji sebanyak 1000 ml larutan
larvasida bakteri, dapat melakukan pengenceran
dengan melihat konsentrasi diagnostik sesuai dengan
jenisnya.
a. Bacillus thuringiensis israelensis strain AM 65-
52 (3000 ITU/mg); membuat pengenceran
dengan cara memasukkan 2-10 mg produk /liter
aquades
b. Bacillus thuringiensis israelensis strain 266/2
(≥1200 ITU/mg); membuat pengenceran

38 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 dengan cara memasukkan 120-160 mg produk /
liter aquades
c. Spinosad, membuat pengenceran dengan cara
memasukkan 120-160 mg produk /liter aquades
- Kedalam setiap beaker glass dimasukan 20-25 larva
Aedes, menggunakan pipet dan saringan kecil
- Dilakukan pengamatan secara visual pada setiap
beaker glass, pada jam pertama untuk mengetahui
efek knock down dan pada jam ke 24 untuk
menghitung kematian larva. Selama pengujian larva
tidak diberi makan.
- Kemudian dilakukan penghitungan Lethal
Consentration (LC) 90 menggunakan analisis probit.
- Jika ada kematian larva pada kelompok kontrol
>10% maka pengujian harus diulang.Jika kematian
larva pada kontrol sebesar 5-10%, mortalitas larva uji
harus dikoreksi dengan rumus Abbott.
- Dilakukan penghitungan jumlah larva yang mati, larva
disebut mati bila ada larva yang sudah tenggelam
dan tidak bergerak-gerak lagi saat siphon disentuh
dengan lidi.
- Data kematian larva dicatat dalam formulir dan
analisis atas kelompok status resistensinya
- Dilakukan pencatatan suhu ruangan, kelembaban
dan pH air.

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 39

 Tabel 6 Konsentrasi Diagnostik Larvasida

Dosis Konsentrasi
Larvasida Jenis
(mg/L) Diagnostik (mg/L)
Bacillus thuringiensis israelensis Bakteri 1-5 2-10
strain AM 65-52 (3000 ITU/mg)

Bacillus thuringiensis israelensis Bakteri 60-80 120 -160

strain 266/2(≥1200 ITU/mg)

Spinosad Bakteri 0,1-0,5 0,2-1,0

Temephos Kimia 0,02 0,02
Diflubenzuron IGR 0,02-0,25 0,04 - 0,5
Pyriproxyfen IGR 0,01 0,02

Sumber : WHO, 2016

1.2.7. Analisis Hasil Uji

A. Hasil Analisis Larvasida Kimia dan Bakteri
• Lebih besar/sama dengan 98% kematian, maka
disimpulkan bahwa nyamuk masih rentan
terhadap insektisida tersebut dan masih bisa
digunakan untuk pengendalian vektor pada spesies
tersebut.
• Kematian nyamuk 80% - < 98%, dinyatakan terduga
resisten.
• Dibawah 80% kematian dinyatakan resisten.
• Jika terjadi terduga resisten dan resisten, maka
diteruskan pengujian dengan dosis 5 kali,
apabila hasil pengujian kematian nyamuk dibawah
98% maka intensitas resistensinya sedang, pada

40 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 kondisi ini perlu dilakukan rotasi berdasarkan
golongan insektisida.
• Apabila kematian larva pada kontrol antara
5-10 %, maka kematian sesungguhnya dikoreksi
menggunakan rumus Abbott sebagai berikut :

% kematian larva uji - % kematian larva kontrol

Rumus Abbott = ––––––––––––––––––––––––––––––––––––––––– x 100 %
100 - % kematian larva kontrol

• Apabila kematian larva kontrol >10 % maka

pengujian diulang.

Tabel 3.4. Formulir Pengujian Resistensi Larvasida Kimia dan Biologi

Provinsi : Tanggal :
Uji
Kabupaten : Nama :
penguji
Kecamatan : Instansi :
penguji
Jenis Larvasida : Kimia / Bakteri (pilih salah satu)
Nama Larvasida :
Konsentrasi Diagnostik :
Spesies uji :
Suhu
Kelembaban :
pH :

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 41

 KEMATIAN

1 Jam 24 Jam
Jumlah % Jumlah %
Ulangan I :
Ulangan II :
Ulangan III :
Ulangan IV :
Jumlah :

Kontrol I :
Kontrol II :
Jumlah :

Interpretasi / penafsiran data paparan 24 jam dilakukan sebagai berikut:

• Spesimen larva uji dinyatakan rentan apabila kematian 98 – 100 %.
• Spesimen larva uji dinyatakan terduga resisten apabila kematian
80% - < 98%
• Spesimen larva uji dinyatakan resisten apabila kematian < 80%.

42 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 BAB IV
MONITORING DAN EVALUASI

Pemerintah daerah provinsi dan kabupaten/ kota

bertanggungjawab terhadap manajemen resistensi insektisida di provinsi
dan kabupaten/ kota. Adapun pemerintah pusat bertanggungjawab
manajemen resistensi insektisida di tangkat nasional.
Monitoring resistensi vektor terhadap insektisida dilakukan
dengan uji kerentanan insektisida di berbagai wilayah di Indonesia.
Lokasi uji kerentanan ditentukan dengan berdasarkan data
epidemiologi penyakit malaria atau arbovirosis dengan berkoordinasi
antara program malaria, arbovirosis dengan program vektor dan
binatang pembawa penyakit. Lokasi yang diprioritaskan adalah wilayah
yang sedang dilakukan penggunaan insektisida untuk pengendalian
malaria dan arbovirosis yang endemis tinggi atau yang menunjukkan
tanda-tanda ketidakberhasilan dalam menurunkan penyakit tersebut.
Setiap Dinas Kesehatan Kabupaten/ Kota dan KKP melakukan
monitoring resistensi vektor terhadap insektisida minimal satu tahun
sekali. Selain itu kegiatan uji kerentanan juga dapat dilakukan oleh
instansi lain antara lain Dit P2PTVZ, B/BTKLPP, Dinas Kesehatan
Provinsi, Badan Litbangkes dan lembaga/ instansi/ institusi lain yang
mempunyai kompetensi.
Jenis insektisida yang diuji adalah insektisida yang sedang
digunakan oleh program pengendalian vektor dan insektisida lain yang
akan digunakan oleh program sebagai pengganti apabila insektisida
yang digunakan terbukti tidak efektif. Hasil dari pengumpulan data
dan laporan uji kerentanan vektor digunakan untuk mendeteksi secara

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 43

dini status kerentanan vektor terhadap insektisida yang diuji. Evaluasi
dilakukan dengan membandingkan data/ laporan hasil uji kerentanan
vektor terhadap insektisida yang diuji pada lokasi yang sama.

4.1. Pelaporan
Semua institusi/penyelenggaran uji kerentanan melaporkan
kepada pusat (Direktorat P2PTVZ), yang dilaporkan secara berjenjang
dari Dinas Kesehatan Kabupaten/ Kota, selanjutnya ke Dinas Kesehatan
Provinsi dan ke pusat (Direktorat P2PTVZ), sebagaimana alur pelaporan
sebagai berikut:

Data hasil uji kerentanan yang telah dilaporkan oleh penyelenggara

uji kerentanan dikompilasi dan dianalisis oleh Direktorat PPTVZ (Subdit
Vektor BP2). Hasil analisis kerentanan kemudian dibahas dan dikaji
bersama Komisi Ahli Vektor dan Binatang Pembawa Penyakit, bersama
Subdit terkait sekurang-kurangnya satu tahun sekali. Hasil kajian

44 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

bersama ini disampaikan kepada Direktur P2PTVZ sebagai dasar untuk
membuat keputusan.
Proses dalam menghasilkan keputusan akhir (rekomendasi)
setidaknya mengikuti alur uji resistensi sebagai berikut:

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 45

 BAB V
PENUTUP

Panduan Monitoring Resistensi Vektor Terhadap Insektisida

ini telah disesuaikan dengan Pedoman Monitoring Resistensi Vektor
terhadap Insektisida terbitan WHO 2016. Buku Panduan ini sangat
berguna bagi tenaga Entomolog baik di daerah maupun ditingkat
nasional dalam melakukan uji kerentanan (susceptibility test) vektor
terhadap insektisida di suatu wilayah.
Buku panduan ini diharapkan dapat memberikan petunjuk dalam
memperbaiki sistem surveilan dalam memantau kerentanan vektor
terhadap insektisida, dan memberi arah yang tepat dalam penggunaan
insektisida, sehingga dapat menunjang keberhasilan pengendalian
vektor serta pengendalian malaria, demam berdarah dan penyakit tular
vektor nyamuk lainnya.

46 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 DAFTAR PUSTAKA

1. WHO 2011: Guidelines for monitoring the durability of long

lasting insecticidal mosquito nets under operational conditions.
WHO/HTM/NTD/WHOPES /2011.5
2. WHO 2013 : Test procedures for insecticide resintance monitoring
in malaria vector mosqouitoes
3. WHO. 2016. Test procedures for insecticide resistance monitoring
in malaria vector mosquitoes. Second edition.
4. WHO. 2016. Monitoring and managing insecticide resistance in
Aedes mosquito populations.
5. Ebook: https://www.cdc.gov/malaria/resources/pdf/fsp/ir_
manual/ ir_cdc_bioassay_en.pdf
6. Video: https://www.youtube.com/watch?v=K6prY3jpPSU

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 47

 Lampiran

Form 1 : Formulir uji kerentanan nyamuk dewasa dari data lapangan dengan
metode WHO susceptibility test

Kode desa : ………………………………………………………………………………………………

Tanggal pelaksanaan uji : ………………………………………………………………………………………………
Nama petugas pelaksana uji : ………………………………………………………………………………………………
Tempat pelaksanaan uji
Provinsi ..………………………………………………………Kabupaten/kota…………………………………………………..
Kecamatan…………………………………………………….Desa…………………………………………………………………...
Koordinat lokasi uji : Garis bujur (X)…………………………….o Garis lintang (Y) …………………………..….O
Informasi sampel
Spesies uji………………………………………………… Spesies kontrol…………………………………………………………
Jenis kelamin sampel: jantan/betina/campur (coret yang tidak perlu)
Usia sampel (hari) …………………………………………………………………………..(jika koloni diketahui dan F1)
Metode koleksi (tandai yang sesuai)
Umpan badan dalam rumah Resting malam dalam rumah

Resting pagi dalam rumah Umpan hewan

Umpan badan luar rumah Resting malam luar rumah

Pengumpulan larva Lainnya.....................

Koloni
Nama strain koloni………………………………………………………………
Tahap fisiologi
Unfed Kenyang darah Setengah darah-setengah telur

Penuh telur (gravid) Progeny F0/F1/F2

Informasi insektisida uji
Insektisida diuji…………………………………………..Tanggal kadaluarsa……………………………………..............
Kertas impregnated disiapkan oleh…………….Tanggal kotak pertama dibuka………………….……..………
Konsentrasi…………………………………………………Frekuensi kertas impregnanted digunakan………………
Suhu ruangan Dikulkas (Refrigerator)
Kondisi penyimpanan :
Kondisi uji
Periode paparan: Mulai Akhir
Suhu oC ……………………………… ……………………….
Kelembaban relatif (%) …………………………….. ………………………

48 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

 Form 2 : Formulir pencatatan hasil uji kerentanan nyamuk dewasa di lapangan
dengan metode WHO susceptibility

Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ulangan 4 Kontrol 1 Kontrol 2

Jumlah
nyamuk

Jumlah nyamuk knocked down (KD) setelah paparan

Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3 Ulangan 4 Kontrol 1 Kontrol 2

Waktu Jumlah Waktu Jumlah Waktu Jumlah Waktu Jumlah Waktu Jumlah Waktu Jumlah
Mulai
10’
15’
20’
30’
40’
50’
60’

Jumlah nyamuk mati/hidup pada periode akhir paparan (24 jam)

Ulangan Ulangan Ulangan Ulangan Jumlah Ulangan Kontrol Kontrol Jumlah Kontrol
1 2 3 4 (1+2+3+4) 1 2 (1+2)
Jumlah % Jumlah %
Jumlah
nyamuk mati
Jumlah
nyamuk hidup

Petugas 1 Petugas 2

Tanggal:……………………… Tanggal:………………………

Tanda tangan………………… Tanda tangan……………….

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 49

 Form 3 : Pencatatan Uji Kerentanan menggunakan CDC Bottle

Tanggal : _________________________ Spesies nyamuk: _________________________

Insektisida: _______________________________________________________________

Dosis diagnosis: ____________________Waktu diagnosis:_________________________

Lokasi pengumpulan nyamuk: ________________________________________________

Waktu Botol 1 Botol 2 Botol 3 Botol 4 Semua botol tes Kontrol

(menit) Hidup Mati Hidup Mati Hidup Mati Hidup Mati Total Total % Total Total %
mati mati mati mati
0
15
30
35
40
45
60
75
90
105
120
Total
dalam
botol

50 PANDUAN MONITORING RESISTENSI VEKTOR TERHADAP INSEKTISIDA

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA 51