Laporan Penelitian ini ditulis sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar
SARJANA KEDOKTERAN
OLEH :
Hasna Aqilah
NIM 11151030000078
i
LEMBAR PERNYATAAh{ KEASLIAN KARYA
1. Laporan penelitian ini menrpakan hasil karya asli saya yang diajukan
trrtuk memenuhi salah satu persyaratan memperoleh gelar strata I di UIN
Syari f Hidayatullah Jakarta.
2. Semua sumber yang saya gunakan dalam penulisan ini telah saya
canttrmkan sesuai dengau ketentuan yang berlaku di UIN Syarif
Hidayatullah Jakarta
3. Jika di kemudian hari terbukti bahwa karya ini bukan karya asli saya atau
merupakan hasil jiplakan dari karya orang lain, maka saya bersedia
menerima sanksi yang berlaku di UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
Hasna Aqilalr
LEMBAR PERSETTTJUA}Y PEMBIMBING
Laporan Penelitiatr
Oleh
H3sna Aqilqh
NIM: I1151030000078
Pembirnbing I Pembimbing II
ut
LEMBAR PE1\GESAILITN
DEWAN PENGUJT
Ketua Sidang
Penguji I
ffiifi$tan FK ulN-sH
ffi
Ituprodi PSK€d
,Yfufifr,"
laUl}Iendarto, Ph.D., Sp.PD-KEMD., dr. Aclunad Zaki, M.Epid., Sp.OT
PhiD., FINASIM" NrP. 1 978050720050 11 005
1 123200312r 003
tv
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT, berkat rahmat
dan karunia-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul
“Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Binahong (Anredera cordifolia) terhadap Kadar
Trigliserida Darah Tikus Jantan Galur Sprague dawley yang Diinduksi
Streptozotosin” untuk menyelesaikan studi sarjana kedokteran di Fakultas
Kedokteran UIN Syarif Hidayatullah Jakarta.
Hasna Aqilah
v
ABSTRAK
vi
ABSTRACT
Hasna Aqilah. Medical Study Program. The Effect of Ethanol Extract of
Binahong (Anredera cordifolia) Leaves on Level of Triglyceride in Blood of
Male Rats Sprague dawley Streptozotocin-induced. 2018.
Anredera cordifolia (Binahong) is a kind of the plant that has anti-hyperglycemia
and anti-hyperlipidemia effect. This study was conducted to determine the effect of
ethanol Binahong extract orally on blood triglyceride levels of male Sprague
dawley rats were induced by intraperitoneal streptozotocin. Rats declared
diabetes mellitus (DM) when blood glucose levels reach ≥200 mg/dl. The sample
consisted of 24 rats devided into 3 groups, namely a negative control group
(without treatment), a positive control group (DM) and a treatment group (DM
and given the ethanol extract of Binahong leaf 100 mg/kgBB for 14 days). Data
were analyzed by ANOVA statistic test to compare the effect. Statistical analysis
showed that giving Anredera cordifolia extract was not significantly lowering
blood triglyceride levels (p=0.898). The conclusion of this research is the extract
of ethanol leaves of Anredera cordifolia with dose of 100 mg/kgBB/day per oral
for 14 days is not able to decrease blood triglyceride levels.
Keywords: Binahong, Anredera cordifolia, Diabetes, Blood Triglycerides,
Sprague dawley
vii
DAFTAR ISI
viii
3.4.1. Alat ..................................................................................................... 25
3.4.2. Bahan .................................................................................................................. 25
3.4.3. Adaptasi Hewan Coba........................................................................ 25
3.4.4. Induksi dengan Streptozotosin ........................................................... 25
3.4.5. Pemberian Ekstrak Etanol Daun Binahong........................................ 25
3.4.6. Pengukuran Sampel ........................................................................... 26
3.5. Pengolahan dan Analisa Data................................................................................ 26
Alur Penelitian ................................................................................................................ 27
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................28
4.1. Hasil Penelitian ....................................................................................................... 28
4.1.1. Gambaran Umum Sampel Penelitian ................................................... 28
4.1.2. Hasil Pengukuran Trigliserida Darah ............................................................... 29
4.2. Pembahasan ............................................................................................................. 30
4.3. Keterbatasan Penelitian .......................................................................................... 31
BAB V SIMPULAN DAN SARAN .....................................................................32
DAFTAR PUSTAKA ...........................................................................................33
LAMPIRAN .........................................................................................................37
ix
DAFTAR SINGKATAN
x
DAFTAR TABEL
Tabel Halaman
2.1 Klasifikasi etiologi diabetes melitus ............................................................... 11
2.2 Kandungan fitokimia ekstrak etil asetat daun Binahong ................................ 17
3.1 Kondisi dan Perlakuan Sampel ....................................................................... 23
xi
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Pelepasan insulin oleh sel beta pankreas ............................................................5
2.2 Struktur triasilgliserol ........................................................................................7
2.3 Regulasi penyimpanan triasilgliserol .................................................................7
2.4 Komposisi lipoprotein ........................................................................................8
2.5 Mekanisme insulin pada jaringan lemak, otot dan hati ..................................... 9
2.6 Mekanisme insulin pada sel target ...................................................................10
2.7 Struktur Kimia Streptozotosin .........................................................................14
2.8 Kadar glukosa darah dan insulin setelah injeksi STZ ......................................15
2.9 Mekanisme toksisitas STZ ...............................................................................16
2.10 Tanaman binahong (Anredera cordifolia) .....................................................17
4.1 Diagram batang rata-rata kadar trigliserida darah setelah pemberian ekstrak
daun Binahong ................................................................................................29
6.1 Surat keterangan sehat hewan ..........................................................................37
6.2 Hasil determinasi / identifikasi bahan uji .........................................................38
6.3 Surat pengujian ekstrak ....................................................................................39
6.4 Sampel (Tikus Jantan Sprague dawley) ...........................................................42
6.5 Penimbangan berat badan ................................................................................42
6.6 Pengenceran streptozotosin dalam dapar sitrat pH 4,5 dengan aquades .........42
6.7 Induksi Streptozotosin......................................................................................42
6.8 Pelarutan esktrak ..............................................................................................42
6.9 Pemberian ekstrak etanol daun Anredera cordifolia........................................42
6.10 Pengambilan darah untuk pengukuran glukosa dan trigliserida darah...........43
6.11 Pengukuran glukosa darah dengan glukometer merek Gluco dr ..................43
6.12 Pengukuran trigliserida darah dengan pengukur kadar lipid merek Lipid pro43
6.13 Streptozotocin ................................................................................................43
6.14 Sukrosa 20% ..................................................................................................43
xii
DAFTAR LAMPIRAN
xiii
1
BAB I
PENDAHULUAN
1
2
1.3. Hipotesis
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1.1. Insulin
Insulin merupakan hormon polipeptida. Bentuk aktif dari insulin terdiri
dari dua rantai polipeptida (rantai A dan rantai B) dihubungkan oleh dua ikatan
disulfida. Insulin disintesis sebagai preprohormon yang diubah di dalam
retikulum endoplasma kasar menjadi proinsulin. Kemudian diangkut dalam
mikrovesikel menuju kompleks Golgi. Ia meninggalkan kompleks Golgi di
vesikel, dimana protease menghilangkan C-peptide yang tidak aktif secara
biologis dan beberapa sisa kecil lainnya sehingga menghasilkan pembentukan
insulin aktif secara biologis.10
Sekresi insulin oleh sel beta pankreas diinduksi oleh meningkatnya kadar
glukosa darah. Ketika kadar glukosa darah mencapai sekitar 80 mg/dl, glukosa
masuk melalui protein transporter spesifik yang dikenal sebagai glucose
transporter-2 (GLUT-2). Glukosa difosforilasi melalui aktivitas glukokinase
dalam membentuk glukosa 6 - fosfat yang dimetabolisme melalui glikolisis,
siklus asam sitrat serta fosforilasi oksidatif. Reaksi-reaksi tersebut
menghasilkan peningkatan kadar adenosine triphosphate (ATP) dalam sel beta.
Ketika rasio [ATP]/[ADP] pada sel beta meningkat, aktivitas saluran K+ATP
dihambat (saluran ditutup). Penutupan saluran ini mengarah ke depolarisasi
membran yang mengaktifkan saluran voltage-gated Ca2+ sehingga terjadi
peningkatan Ca2+ intraseluler secara signifikan. Peningkatan Ca2+ intraseluler
merangsang terjadinya eksositosis vesikel-vesikel yang membawa insulin,
menghasilkan sekresi insulin (Gambar 2.1).10
4
5
Trigliserida adalah lemak utama makanan manusia, yang terdiri dari tiga
asam lemak yang diesterifikasi menjadi gliserol (Gambar 2.2). Produk
degradasinya adalah asam lemak bebas dan 2-monoasilgliserol. Keduanya
dihasilkan oleh pencernaan yang dikemas dalam misel, sebuah mikrodroplet
kecil yang diemulsi oleh garam empedu. Misel bergerak ke mikrovili pada
permukaan sel epitel usus dimana selanjutnya akan diserap oleh usus halus.
Dalam sel epitel usus, asam lemak dan 2-monoasilgliserol dikondensasi oleh
reaksi enzimatik dalam retikulum endoplasma halus untuk membentuk TG.10
7
Gambar 2.5 Mekanisme insulin pada jaringan lemak, otot dan hati
Sumber: Marks, 2013
2.1.3.2. Patofisiologi
Diabetes melitus tipe 1 (DM1) ditandai oleh adanya kerusakan luas
pada sel beta pankreas, yang mensintesis dan melepaskan insulin. Bentuk
yang paling umum adalah diabetes melitus tipe 1a yaitu kerusakan yang
timbul disebabkan oleh sistem kekebalan tubuh seseorang melalui
serangan antibodi. Penyebab serangan ini yang terjadi masih belum jelas.
Pada tipe 1b, kerusakan sel beta disebabkan oleh mekanisme non imun.
Faktor lingkungan dianggap masih memiliki kontribusi yang signifikan
terhadap perkembangan diabetes melitus tipe 1. Beberapa jenis infeksi
virus telah terlibat dalam memicu kerusakan karena reaksi autoimun pada
sel beta, termasuk rubella congenital, cytomegalovirus, gondong dan virus
12
2.1.4. Streptozotosin
Streptozotosin (STZ) merupakan obat induksi permanen diabetes.
Disintesis dari turunan kotoran mikroba Streptomyces achromogenes (bakteri
Gram positif) dengan spektrum luas dari sifat bakteri tersebut. Struktur
molekul STZ sama seperti 2-deoxy-D-glucose dengan adanya pergantian pada
C2 menjadi grup N-methyl-N-nitrosourea, yang merupakan bagian sitotoksik
dari STZ perusak sel beta (Gambar 2.7).19, 20
14
Gambar 2.8 Kadar glukosa darah dan insulin setelah injeksi STZ
Sumber: Sameel N. Goyal, 2016
dan jalur poliol yang menghasilkan radikal bebas. STZ secara spesifik
membunuh sel-sel dengan menginhibisi OGA. O-GlcNAcase merupakan
glikosida hidrolase yang memecah beta-O-linked GlcNAc (N-acetyl
glucosamine (O-GlcNAc)) dari modifikasi protein sitosol sel beta selama
modifikasi pasca-translasi protein untuk menghasilkan keamanan dan
kualitas baik bagi fungsi protein. Penghambatan terhadap OGA
menyebabkan akumulasi protein-protein berbahaya dan mengarahkan
aktivasi jalur stres pada apoptosis sehingga merusak sel beta pankreas.20
Taksonomi tanaman21:
Kingdom (Plantae)
Divisio (Angiospermae)
Kelas (Dicotyledoneae)
Ordo (Caryophyllales)
Familia (Basellaceae)
Genus (Anredera Juss.)
Spesies (Anredera cordifolia (Tenore) Steen.)
Faktor Resiko
Resistensi insulin
Kerusakan sel β
pankreas
Alkilasi DNA
Induksi
↓ insulin Pelepasan NO Streptozotosin
↑ glukagon
Radikal Bebas
DM Inhibisi O-GlcNAcase
↓ sintesis LPL
↓ absorbsi glukosa intrasel
↑ lipolisis trigliserida di
↓ lipolisis pada adiposit
kilomikron dan Hiperglikemia
VLDL ↑ FFA
Menghambat
Antioksidan aktivitas enzim
α-glukosidase
Aktivasi
AMPK
Anredera cordifolia
(Binahong)
Keterangan:
= Diteliti = Berpengaruh
= Tidak diteliti = Menghambat
21
Diabetes Melitus
Keterangan:
= Diteliti = Berpengaruh
= Tidak diteliti = Menghambat
22
Trigliserida Komponen lemak Strip dan alat Darah yang diambil Numerik
makanan dengan pengukur dari ekor sampel
satuan kadar mg/dl kadar lipid diteteskan pada strip
(Sherwood, 2016). (merek Lipid pengukur kadar lipid,
Pro) lihat hasil
pengukuran pada
angka yang tertera di
alat.
23
BAB III
METODOLOGI PENELITIAN
Sampel penelitian dibagi menjadi tiga kelompok dengan kondisi seperti yang
ditunjukkan pada Tabel 3.1.
23
24
E=N–B–T
10 ≥ N – 1 – 2 20 ≤ N – 1 – 2
10 ≥ N – 3 20 ≤ N – 3
N ≥ 13 N ≤ 23
Keterangan:
E = Derajat kebebasan komponen kesalahan, (10-20)
N = Jumlah sampel dalam penelitian (dikurangi 1)
B = Blocking component menggambarkan pengaruh lingkungan yang
diperbolehkan dalam penelitian
T = Jumlah kelompok perlakuan (dikurangi 1)
3.4.1. Alat
Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah strip glukosa dan
glukosameter, strip dan alat pengukur profil lipid (merek Lipid pro), spuit 1
cc dan 3 cc, timbangan berat badan, vortex, tabung mikro, mikro pipet,
tabung falcon 15 ml, sonde, kandang tikus, alcohol swab, botol minuman
serta tempat makanan tikus.
3.4.2. Bahan
Bahan yang digunakan meliputi daun Binahong sebanyak 1 kg yang
dijadikan ekstrak dengan pelarut etanol 70 % oleh Balai Penelitian Tanaman
Rempah dan Obat Kampus Penelitian Pertanian Cimanggu Bogor, sehingga
diperoleh ekstrak etanol daun Binahong sebanyak 159,8 gram. Diperlukan
juga streptozotosin, dapar sitrat pH 4,5, sukrosa 20%, akuades serta etil eter
untuk proses pengambilan darah.
Alur Penelitian
(Hari ke-1)
- Tikus tiba di animal house
- Pengukuran berat badan tikus
(Hari ke 33)
Pengukuran glukosa darah dan
trigliserida
28
BAB IV
28
29
4.2. Pembahasan
Hewan coba yang digunakan dalam penelitian ini adalah tikus putih jantan
Sprague dawley berusia 12 minggu. Tikus sering digunakan dalam penelitian.
Tidak menggunakan jenis kelamin betina karena memiliki kondisi hormonal yang
sangat berfluktuasi pada saat mulai beranjak dewasa, sehingga dikhawatirkan
akan memberi respon yang berbeda serta dapat memengaruhi hasil penelitian.33
Dalam efek penyuntikan dengan STZ, tikus jantan cenderung lebih rentan
terhadap respon diabetes yang dihasilkan. Penurunan sensitivitas yang dialami
oleh tikus betina dapat dikaitkan dengan kemampuan estradiol untuk melindungi
sel β pankreas dari apoptosis yang disebabkan oleh stress oksidatif.20 Tikus
mempunyai daya tahan terhadap penyakit dan cukup agresif dibandingkan dengan
galur lainnya.34 Kondisi diabetes didapatkan dengan induksi STZ (ip) dosis
tunggal 50 mg/kgBB. Jika kadar GDS ≥ 200 mg/dl maka tikus sudah mengalami
diabetes.35
yang dilakukan oleh Dwintha Lestari dkk (2016), pemberian ekstrak daun
Binahong dengan dosis yang sama 100 mg/kgBB selama 21 hari mampu
menurunkan kadar trigliserida darah.36 Perbedaan hasil tersebut kemungkinan
disebabkan oleh teknik pengukuran TG yang berbeda dengan sensitivitas
pembacaan yang berbeda pula. Selain itu, hasil penelitian ini menunjukkan bahwa
dengan dosis 100 mg/kgBB selama 14 hari belum cukup waktu untuk
menurunkan kadar TG darah.
BAB V
5.1 Simpulan
Berdasarkan uji statistik dan pembahasan yang telah dilakukan, diperoleh
kesimpulan sebagai berikut:
Pemberian ekstrak daun Binahong (Anredera cordifolia) dengan dosis 100
mg/kgBB selama 14 hari tidak memberikan pengaruh terhadap penurunan
kadar trigliserida darah tikus DM yang diinduksi STZ dengan diperoleh
angka p>0,05 yang menunjukkan tidak adanya perbedaan bermakna antara
ketiga kelompok.
5.2 Saran
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan mengenai pengaruh
ekstrak daun Binahong (Anredera cordifolia) terhadap kadar glukosa darah dan
trigliserida pada tikus DM, saran yang dapat diberikan untuk peneliti selanjutnya
adalah sebagai berikut:
1. Menambah variasi waktu ataupun dosis yang diberikan dengan
harapan memperoleh hasil yang lebih akurat.
2. Dapat membandingkan hasil penelitian dengan obat antidiabetik
ataupun antilipidemik.
32
33
DAFTAR PUSTAKA
10. Smith, Colleen M., Allan D. Marks, M.A. Lieberman, Dawn B. Marks,
and Dawn B. Marks. Marks’ Basic Medical Biochemistry: a clinical
approach. 4th ed. Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins. 2013.
11. Kumar V, Abbas A.K, Fausto N., Robbins and Cotran Pathologic Basis of
Disease. 8th ed. Philadelphia, USA: Elsevier Saunders. 2010.
13. Sherwood, Lauralee. Human Physiology From Cells to Systems. 9th ed.
New York: Thompson Learning-Brooksdale Cole. 2016.
33
34
16. McCance, Kathryn L., Sue E. Huether, Valentina L. Brashes, Neal S. Rote.
Pathophysiology: The Biologic Basis for Disease in Adults and Children.
6th ed. Philadelphia: Mosby Elsevier. 2010.
18. Ganong, W.F. Review of Medical Physiology. 24th ed. New York: McGraw
Hill. 2012.
24. Djamil, Ratna. Wahyudi P., Wahono S., Heri A. Phytochemical and
Biological Screening of Anredera cordifolia (Ten)Steenis Leaves using
Artemia salina (Brine Shrimp Test). The 2nd Penang International
Conference For Young Chemists (Penang ICYC). 2008.
26. Djamil, Ratna., Wahyudi PS., Wahono S., M. Hanafi. Antioxidant Activity
of Flavonoid from Anredera cordifolia (Ten) Steenif Leaves. IRJP 2012, 3
(9).
27. Matsuda, Hiroko. Effects of Dietary Phytol on Glucose Uptake and Insulin
Secretion in Vitro and in Vivo. FNCR 2018, 1(1): 29-37.
29. Law, Vivian WY. Journoud, Melanie. Jones, Peter JH. Plant Sterols are
Efficacious in Lowering Plasma LDL and Non-HDL Cholesterol in
Hypercholesterolemic Type 2 Diabetic and Nondiabetic Persons. AJCN
2005, 81 (6).
34. Harkness, J.E., Wargnes, J.E. Biology and Medicine of Rabbits and
Rodents. Philadelphia: Lea and Fabriger. 1983.
LAMPIRAN
Lampiran 1
Surat Keterangan Sehat Hewan
37
38
Lampiran 2
Hasil Determinasi / Identifikasi Bahan Uji
Lampiran 3
Surat Pengujian Ekstrak
Lampiran 4
Pembuatan Ekstrak oleh Balitro
Lampiran 5
Analisa Data
Tests of Normality
a
Kolmogorov-Smirnov Shapiro-Wilk
.632 2 12 .548
ANOVA
Trigliserida
Lampiran 6
Gambar Proses Penelitian
Gambar 6.9
Gambar 6.8
Pemberian ekstrak etanol daun
Pelarutan Ekstrak
Anredera cordifolia
43
(lanjutan)
Gambar 6.14
Sukrosa 20%
44
Lampiran 7
Cara Perhitungan
= 0,88 gr/1 ml
= 880 mg/1 ml
V1 × M1 = V2 × M2
V1 × 880 mg = 8 ml × 20 mg
V1 × 880 = 160 ml
V1 = 0,18 ml
Jadi untuk 8 ekor tikus yang diberi perlakuan ekstrak etanol daun
Anredera cordifolia memerlukan 7,82 ml aquades dalam 1 hari.
46
Lampiran 8
Riwayat Penulis
Identitas Diri
Agama : Islam
Alamat : Jalan Pelabuhan II, Km. 10 Cikaret, RT: 001/RW: 014, Desa
Kebonmanggu, Kec. Gunungguruh, Kab. Sukabumi, Prov. Jawa
Barat (43156)
Email : hsnqilah@gmail.com
Riwayat Pendidikan
- 2002-2003 : TK Lingga