3. Menurut Anda, apa hubungan kepolaran sampel dengan fasa diam dan fasa gerak
pada kromatografi lapis tipis! Jelaskan beserta contoh aplikasinya
Pada dasarnya, teknik kromatografi ini, membutuhkan zat terlarut yang terdistribusi di
antara dua fase, yaitu fase diam (silika gel yang mengikat molekul air) Partikel silica gel
mengandung gugus hidrosil dipermukaannya yang akan membentuk ikatan hydrogen
dengan molekul – molekul polar., dan fase gerak yaitu pelarut organik yang sesuai. Fase
gerak (eluen) adalah yang berperan penting pada proses elusi bagi larutan untuk melewati
fasa diam (adsorben). Interaksi antara adsorben dengan eluen sangat menentukan
terjadinya pemisahan komponen. Oleh sebab itu pemisahan komponen sampel secara
kromatografi dipengaruhi oleh laju alir eluen.Proses elusi sampel bergerak naik dengan
adanya gaya kapiler. Senyawa polar akan melekat lebih kuat pada lempengan dari pada
senyawa non polar akibat interaksi dipol-dipol. Senyawa non polar kurang melekat erat
pada fasa diam sehingga memiliki laju alir yang lebih besar ke atas lempeng begitu
sebaliknya dengan senyawa non polar, dimana jarak tempuh ke atas lempeng merupakan
cermin polaritas senyawa (like dissolved like). Pada proses pemisahan dengan kromatografi
lapis tipis, terjadi hubungan kesetimbangan antara fase diam dan fase gerak, dimana ada
interaksi antara permukaan fase diam dengan gugus fungsi senyawa organik yang akan
diidentifikasi yang telah berinteraksi dengan fasa geraknya. Kesetimbangan ini dipengaruhi
oleh 3 faktor, yaitu : kepolaran fase diam, kepolaran fase gerak, serta kepolaran dan ukuran
molekul.
Contoh : Dalam bidang farmasi, penggunaan metode pemisahan secara Kromatografi Lapis
Tipis (KLT) dapat diterapkan dalam menganalisis adanya senyawa paracetamol dan kafein
dalam sediaan obat paten seperti poldanmig yang beredar di pasaran apakah memenuhi
persyaratan mutu obat atau tidak. Sehingga dengan kadar yang tepat obat dapat
memberikan efek terapi yang dikehendaki.
4. Jelaskan bagaimana analisis kualitatif dan kuantitatif dari hasil pemisahan dengan
kromatografi lapis tipis!
Analisis kualitatif dari hasil pemisahan dengan kromatogrfi lapis tipis dapat dilakukan
dengan cara kimia yaitu dengan cara mereaksikan bercak dengan suatu perekasi
melalui penyemprotan sehingga bercak menjadi jelas, Cara fisika dapat digunakan
untuk menampakan bercak adalah dengan cara pencacahan radioaktif serta fluorosensi
sinar ultraviolet yaitu membandingkan penampakan warna noda pada visualizer atau
alat deteksi lain yang menggunakan sinar UV serta menghitung dan membandingkan
nilai Rf sampel uji dengan baku yang diidentifikasi dari 2 atau 3 pelat KLT yang dielusi
dengan eluen berbeda, Dua senyawa yang dikatakan identik jika mempunyai nilai Rf
yang sama jika diukur pada kondisi kromatografi lapis tipis yang sama.
Analisis kuantitatif noda bercak dilakukan dengan metode densitometri. Densitometri
adalah metode analisis instrumental yang didasarkan pada interaksi radiasi
elektromagnetik dengan analit yang merupakan noda pada KLT. Interaksi radiasi
elektromagnetik dengan noda pada KLT yang ditentukan adalah absorbsi, trasnmisi,
pantulan pendar fluor dari radiasi semula. Metode lain adalah dengan menggunakan
metode spektrofotometri, suatu berkas radiasi dikenakan pada cuplikan dan intensitas
sinar radiasi yang diteruskan diukur besarnya radiasi yang diserap oleh cuplikan
ditentukan dengan membandingkan intensitas sinar yang diteruskan dengan intensitas
sinar yang diserap
Sumber :
https://id.strephonsays.com/paper-and-vs-thin-layer-and-vs-column-chromatography-8153
https://farmasiindustri.com/industri/pengertian-kromatografi-dan-
jenisnya.html#:~:text=Kromatografi%20adalah%20teknik%20laboratorium%20dalam%20memis
ahkan%20komponen%20atau,sedangkan%20fase%20diam%20dapat%20berupa%20padat%2
0atau%20cairan.
https://reshayainiresha.wordpress.com/2011/12/30/klasifikasi-kromatografi/
https://id.classicfoxvalley.com/collate/difference-between-paper-thin-layer-and-column-
chromatography/
https://www.dosenpendidikan.co.id/kromatografi/
https://isnha.wordpress.com/2012/03/19/kromatografi-kertas-dan-klt/