Anda di halaman 1dari 81

KATA PENGANTAR

Puji syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Kuasa atas rahmat dan berkat-Nya
kami dapat menyelesaikan Modul Mikrobiologi ini. Adapun tujuan dari pembuatan
modul ini adalah sebagai panduan bagi para pembaca dalam melakukan kegiatan
praktikum mikrobiologi, khususnya mahasiswa Program Studi Sarjana Terapan
Sanitasi Lingkungan. Semoga modul ini dapat membantu para pembaca yang berminat
untuk mengembangkan diri, memperkaya wawasan dan menambah khasanah ilmu
pengetahuan.
Mikrobiologi merupakan cabang ilmu dari biologi yang mempelajari tentang
mikroba. Pada modul praktikum ini mahasiswa dapat mempelajari alat dan bahan
yang akan dipakai, cara menggunakan alat dan bahan untuk melihat segala jenis
mikroba, bentuk mikroba, sifat mikroba, dan melakukan kegiatan simulasi dalam
melakukan sterilisasi alat dan bahan, melakukan perkembangbiakan mikroba dan
melakukan identifikasi jenis mikroba.
Semoga, modul ini dapat dipakai sebagai acuan/pegangan oleh mahasiswa
Program Studi Sarjana Terapan Sanitasi Lingkungan Poltekkes Kemenkes Gorontalo.

Gorontalo, September 2022


Hormat Kami,

Penyusun

ii

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ..............................................................................................................ii


DAFTAR ISI .......................................................................................................................... iii
ATURAN UMUM LABORATORIUM MIKROBIOLOGI LINGKUNGAN .................................. v
A. KELENGKAPAN MAHASISWA............................................................................... v
B. PERSIAPAN ........................................................................................................... v
C. KETERLAMBATAN................................................................................................. v
D. ALUR PRAKTIKUM ................................................................................................ v
E. PERGANTIAN JADWAL .........................................................................................vi
KESEHATAN DAN KESELAMATAN KERJA LABORATORIUM .......................................... vii
A. Prosedur K3 Laboratorium secara Umum .............................................................. vii
B. Prosedur K3 Laboratorium Mikrobiologi ................................................................. vii
MATERI 1 Pengenalan Alat dan Bahan Laboratorium........................................................... 1
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................... 1
B. Landasan Teori ....................................................................................................... 1
C. Cara Kerja .............................................................................................................. 4
D. Hasil Praktikum ....................................................................................................... 4
MATERI 2 Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan ...................................................................... 5
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................... 5
B. Landasan Teori ....................................................................................................... 5
C. Alat ......................................................................................................................... 6
D. Bahan ..................................................................................................................... 6
E. Metode.................................................................................................................... 6
F. Hasil Praktikum ....................................................................................................... 7
MATERI 3 Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan ............................. 8
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................... 8
B. Landasan Teori ....................................................................................................... 8
C. Alat ....................................................................................................................... 10
D. Bahan ................................................................................................................... 10
E. Metode.................................................................................................................. 11
F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 11
MATERI 4 Sampling Mikrobiologi ........................................................................................ 12
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 12
B. Landasan Teori ..................................................................................................... 12
C. Alat ....................................................................................................................... 13
D. Bahan ................................................................................................................... 13
E. Prosedur Kerja ...................................................................................................... 14
F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 15
MATERI 5 Pemeriksaan Angka Lempeng Total .................................................................. 16
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 16
B. Landasan Teori ..................................................................................................... 16
C. Alat ....................................................................................................................... 17 iii

D. Bahan ................................................................................................................... 17
E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 17
F.Hasil Praktikum ....................................................................................................... 18

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 6 Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp................................................................... 19
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 19
B. Landasan Teori ..................................................................................................... 19
C. Alat ....................................................................................................................... 20
D. Bahan ................................................................................................................... 20
E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 20
F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 22
MATERI 7 Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform ................................................................... 23
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 23
B. Landasan Teori ..................................................................................................... 23
C. Alat ....................................................................................................................... 24
D. Bahan ................................................................................................................... 24
E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 24
F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 25
MATERI 8 Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli......................................................... 26
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 26
B. Landasan Teori ..................................................................................................... 26
C. Alat ....................................................................................................................... 27
D. Bahan ................................................................................................................... 27
E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 27
F.Hasil Praktikum ....................................................................................................... 28
MATERI 9 Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus Aureus .................................................... 29
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 29
B. Landasan Teori ..................................................................................................... 29
C. Alat ....................................................................................................................... 30
D. Bahan ................................................................................................................... 30
E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 30
F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 31
MATERI 10 Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir ............................................................ 32
A. Tujuan Praktikum .................................................................................................. 32
B. Landasan Teori ..................................................................................................... 32
C. Alat ....................................................................................................................... 33
D. Bahan ................................................................................................................... 33
E. Prosedur Praktikum .............................................................................................. 33
F. Hasil Praktikum ..................................................................................................... 34
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................................ 35
LAMPIRAN Tugas Pendahuluan ......................................................................................... 38
KONTRAK PENILAIAN PRAKTIKUM ................................................................................. 41

iv

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


ATURAN UMUM LABORATORIUM MIKROBIOLOGI LINGKUNGAN

A. KELENGKAPAN MAHASISWA
Setiap praktikum mikrobiologi lingkungan, praktikan harus menggunakan ketentuan
pakaian sebagai berikut secara lengkap.
1. Seragam mahasiswa sanitasi lingkungan
2. Pin logo Poltekkes Kemenkes Gorontalo
3. Nametag mahasiswa
4. Jas laboratorium
5. Kaos kaki
6. Sepatu yang menutup seluruh bagian kaki
7. Masker
8. Sarung tangan
Adapun perlengkapan lain yang harus dibawa praktikan setiap melaksanakan
praktikum mikrobiologi lingkungan yaitu:
1. Modul praktikum
2. Alat tulis dan kalkulator
3. Kelengkapan yang telah disampaikan PLP sebelum pertemuan

B. PERSIAPAN
Sebelum praktikum dimulai, praktikan harus mempersiapkan diri dengan melakukan
hal-hal berikut:
1. Membaca dan memahami modul praktikum
2. Datang tepat waktu
3. Mengisi daftar pengguna laboratorium
4. Meletakkan tas pada titik yang telah ditentukan oleh PLP

C. KETERLAMBATAN
1. Praktikan yang terlambat kurang dari 15 menit dari jadwal praktik masih dapat mengikuti
praktikum dengan memperoleh sanksi kedisiplinan dari PLP setelah praktikum selesai.
2. Praktikan yang terlambat lebih dari 15 menit tidak diperkenankan mengikuti praktikum
dan mendapat nilai 0 pada mata praktikum tersebut.
3. Praktikan yang terlambat mengumpulkan laporan praktikum akan mendapat
pengurangan nilai 10% hingga 100% untuk laporan praktikum yang disusun.

D. ALUR PRAKTIKUM
1. Praktikan telah siap menggunakan seluruh kelengkapan measuki laboratorium
2. Praktikan meletakkan tas di tempat yang telah ditentukan oleh PJ Laboratorium
3. Berdoa sebelum praktikum
4. Praktikan mengisi presensi dan peminjaman alat
5. Praktikan melaksanakan pre-test v
6. Pelaksanaan praktikum
7. Praktikan melakukan dokumentasi kegiatan praktikum dengan bimbingan PLP
8. Praktikan melakukan pemeliharaan alat dan mengisi form pemeliharaan

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


9. Penugasan dari PLP
10. Berdoa selesai praktikum

E. PERGANTIAN JADWAL
Pelaksanaan praktikum sesuai dengan jadwal yang telah ditentukan oleh pengelola
laboratorium. Pergantian jadwal hanya berlaku pada alasan khusus dimana praktikan
mengalami sakit atau memiliki urusan mendesak. Adapun prosedur pergantian jadwal
dilaksanakan sebagai berikut:
1. Menghubungi PLP terkait materi praktikum maksimal 3 jam sebelum praktikum dimulai
2. Mencari praktikan lainnya yang bersedia bertukar jadwal
3. Jika tidak ada praktikan yang dapat bertukar jadwal, maka praktikan yang mengajukan
pergantian jadwal wajib melakukan praktikum pengganti pada waktu yang telah
disepakati dengan PLP.

vi

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


KESEHATAN DAN KESELAMATAN KERJA LABORATORIUM

A. Prosedur K3 Laboratorium secara Umum


1. Tidak diperkenankan membawa hewan peliharaan, makanan dan minuman ke dalam
laboratorium.
2. Gunakan Alat Pelindung Diri dan ketentuan perlengkapan secara lengkap.
3. Ikuti pernyataan kehati-hatian yang disampaikan PLP pada tiap praktikum.
4. Kenali simbol internasional biohazard, jangan membuang limbah hasil praktikum
sembarangan.
5. Rapihkan seluruh fasilitas dan peralatan sebelum meninggalkan laboratorium.

B. Prosedur K3 Laboratorium Mikrobiologi


1. Lakukan cuci tangan menggunakan sabun sebelum dan sesudah melaksanakan
praktikum.
2. Disinfeksi area kerja dengan mengusap meja kerja menggunakan ethanol 70% sebelum
dan sesudah melaksanakan praktikum.
3. Jauhkan segala macam bahan yang mudah terbakar saat menyalakan lampu Bunsen.
4. Matikan lampu Bunsen dengan cara ditutup menggunakan penutupnya, bukan ditiup.
5. Jangan menghirup bau bahan kimia / reagen secara sengaja

vii

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 1
Pengenalan Alat Laboratorium

A. Tujuan Praktikum
1. Praktikan dapat mengetahui peralatan yang digunakan di laboratorium mikrobiologi
2. Praktikan dapat memahami fungsi dari peralatan yang terdapat di laboratorium
mikrobiologi
3. Praktikan dapat mengoperasikan peralatan yang ada di laboratorium mikrobiologi

B. Landasan Teori
Laboratorium mikrobiologi berkaitan dengan pendeteksian, pembiakan, dan
identifikasi mikroorganisme seperti: jamur, bakteri, dan virus. Laboratorium ini
membutuhkan gedung yang terbangun dengan baik dan dilengkapi oleh komponen
penyusun berupa: peralatan praktik dan keamanan yang memadai, sumber daya
manusia yang terlatih, sanitasi area kerja, dan pemeliharaan alat yang rutin. Peralatan
yang terdapat di laboratorium mikrobiologi dapat dikategorikan menjadi: alat untuk
sterilisasi, alat untuk pembiakan dan identifikasi, dan barang pecah belah.
1. Alat untuk Sterilisasi
Sterilisasi merupakan sebuah proses dari penghancuran atau penghilangan
semua bentuk kehidupan mikroorganisme termasuk sel vegetative, spora, dan virus
dari sebuah permukaan, media, atau benda. (Naveena Varghese) Alat yang biasa
digunakan untuk melakukan sterilisasi adalah sebagai berikut.
a. Autoklaf = Berfungsi untuk melakukan disinfeksi dan sterilisasi menggunakan
metode fisik dengan mengombinasikan uap panas, tekanan, dan
waktu.
b. Oven = Berfungsi untuk melakukan disinfeksi dan sterilisasi melalui sistem
konduksi dengan menggunakan suhu yang tinggi pada beberapa
jam. Suhu yang tinggi memanaskan permukaan alat dan panas
diserap dan dipindah ke bagian tengah alat.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


2. Alat untuk Pembiakan dan Identifikasi
Pembiakan merupakan kegiatan untuk menumbuhkan populasi bakteri dalam
media pertumbuhan yang ada di laboratorium. Kegiatan ini bertujuan untuk
mempermudah proses identifikasi jenis bakteri, sebab ukurannya sangat kecil dan
harus dibiakkan koloninya terlebih dahulu untuk dapat diamati. Seluruh tahapan
dalam kegiatan pembiakan dan identifikasi mikroorganisme harus dilaksanakan
secara aseptis (Milne Library). Adapun peralatan yang paling sering berperan dalam
kegiatan ini adalah:
a. Neraca Analitik = Berfungsi untuk mengukur berat / masa
bahan yang ditimbang.
b. Biologycal Safety Cabinet = Berfungsi untuk menyediakan personil,
(BSC) produk, dan perlindungan lingkungan saat
melaksanakan pemeriksaan laboratorium
yang berkaitan dengan mikroorganisme .
c. Lampu Bunsen = Lampu yang menyediakan api dari gas
terbuka dan berfungsi untuk pemanasan,
sterilisasi, dan pembakaran.
d. Centrifuge = Berfungsi untuk memisahkan cairan / fluida
berdasarkan densitasnya.
e. Colony Counter = Instrumen yang berfungsi untuk menghitung
koloni bakteri atau mikroorganisme lainnya
yang tumbuh pada media agar.
f. Hotplate = Kompor listrik yang permukaannya
dilengkapi oleh elemen pemanas tanpa
menghasilkan api terbuka.
g. Inkubator = Perangkat terisolasi dan tertutup yang
menyediakan kondisi suhu, kelembaban,
dan kondisi lingkungan lain yang optimal
untuk keperluan pertumbuhan
mikroorganisme. Alat ini dapat digunakan
untuk membudidayakan organisme
uniseluler dan multiseluler.
h. Mikroskop = Sebuah alat yang mampu melihat benda
dengan ukuran sangat kecil dan tidak 2
terdeteksi oleh mata manusia dengan cara
memperbesar objek sehingga bisa diamati.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


i. Mikropipet = Jenis pipet untuk mengambil suatu zat cair
dengan volume yang sangat kecil dalam
skala mikroliter dengan nilai akurasi dan
presisi tinggi.
j. pH meter = Alat yang digunakan untuk mengukur
konsentrasi ion hidrogen dalam bahan atau
larutan dan menyatakan derajat keasaman
darinya.
k. Vortex Mixer = Berfungsi untuk mencampur larutan yang
ada dalam tabung reaksi.
l. Water Bath = Berfungsi untuk mengkondisikan suhu yang
konstan untuk keperluan inkubasi
menggunakan tabung reaksi pada
pemeriksaan mikrobiologi.
m. Jarum Ose = Merupakan jarum inoculum yang terbuat dari
kawat nichrome atau platinum dan
digunakan untuk menginokulasi mikrobia
dari suatu media ke media lainnya.
n. Pipet Filler = Pipet yang terbuat dari karet dan berfungsi
untuk mentransfer sejumlah cairan yang
terukur dari pipet ukur.

3. Barang Pecah Belah


a. Beaker Glass = Berfungsi untuk menampung berbagai media secara
sementara maupun, tempat penyimpanan akuades, dll.
b. Cawan Petri = Cawan kaca transparan yang dangkal dan digunakan
sebagai wadah media untuk menumbuhkan koloni mikroba
dan jamur.
c. Pipet Ukur = Berfungsi untuk memindahkan cairan dengan volume yang
diketahui.
d. Gelas Ukur = Berfungsi untuk mengukur volume suatu benda atau
cairan.
e. Drugalsky = Berfungsi untuk meratakan cairan / sampel pada media
agar. 3
f. Tabung reaksi = Berfungsi untuk mencampurkan cairan dan penumbuhan
mikroba yang diinkubasikan di dalam water bath.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


g. Erlenmeyer = Berfungsi sebagai wadah untuk membuat, mencampur,
dan memanaskan senyawa kimia.
h. Mortar & Pestle = Berfungsi untuk menyiapkan bahan atau zat dengan
menghancurkan dan menggilingnya menjadi pasta atau
bubuk halus.

C. Cara Kerja
1. Pranata Laboratorium Pendidikan (PLP) menyiapkan seluruh peralatan mulai dari alat
sterilisasi, alat identifikasi, dan perlengkapan kaca.
2. Pranata Laboratorium Pendidikan (PLP) menjelaskan fungsi, prinsip kerja, dan cara
penggunaan alat kepada praktikan.
3. Praktikan memperhatikan, mencatat, dan mengambil gambar alat untuk kelengkapan
pada laporan praktikum.

D. Hasil Praktikum

No. Nama Alat Fungsi Prinsip dan Cara Kerja


1.
2.
3.
4.
5.
6.
dst.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 2
Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan

A. Tujuan Praktikum
1. Mahasiswa dapat mengetahui berbagai metode disinfeksi dan sterilisasi peralatan di-
laboratorium mikrobiologi.
2. Mahasiswa dapat melakukan disinfeksi dan sterlisasi yang biasa dilakukan pada
peralatan di laboratorium mikrobiologi.

B. Landasan Teori
Disinfeksi dan sterilisasi merupakan bagian dari kegiatan dekontaminasi. Proses ini
sangat esensial untuk memastikan bahwa peralatan di laboratorium terbebas dari
kontaminasi mikroorganisme pathogen. Dekontaminasi merupakan seluruh proses
penghilangan mikroorganisme atau bisa juga diartikan dengan penghilangan dan
netralisasi dari bahan kimia dan bahan radioaktif. Disinfeksi adalah sebuah proses yang
mengeliminasi sebagian besar atau keseluruhan mikroorganisme (kecuali spora bakteri)
yang ada pada benda mati. Sterilisasi adalah sebuah proses yang dapat mematikan dan/
atau menghilangkan seluruh tingkatan mikroorganisme dan spora.
Disinfeksi dan sterilisasi di laboratorium mikrobiologi menunjukkan proses yang
dilaksanakan pada persiapan pembiakan media, reagen, dan alat-alat yang harus
memiliki kondisi steril. Ada banyak cara yang dilakukan untuk proses sterilisasi yaitu:
metode fisika, kimia, dan gabungan antara keduanya.

Metode Disinfeksi / Sterilisasi

Metode Fisik Metode Kimia Fisika – Kimia

Matahari Panas Radiasi Filtrasi Getaran Cairan


Alkohol, Aldehid, Phenol,
Kering Basah Halogen, Logam Berat, dll.
• Non-Ionisasi
• Ionisasi
• Red Heat • T < 100°C • Elektro- Gas
• Flaming • T = 100°C magnetik
• Insenerasi • T > 100°C • Partikulat Formaldehid, Etilen Oksida,
• Oven Ion Plasma 5
• Inframerah

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


C. Alat
1. Oven
2. Autoklaf
3. Alat yang disterilisasi
4. Lampu Bunsen
5. Korek Api

D. Bahan
1. Kertas payung
2. Karet / Benang
3. Alkohol 70%
4. Akuades
5. Spirtus

E. Metode
1. Panas Basah
a. Bungkus peralatan menggunakan kertas payung dan ikat.
b. Cek air pada penyimpanan alat, pastikan bahwa volume berada di batas yang
disarankan.
c. Pasang steker autoclave pada stopkontak
d. Tekan tombol power on untuk menyalakan alat dan tunggu hingga layar monitor
menunjukkan tulisan “OPEN” sebagai tanda bahwa autoklaf sudah siap
digunakan.
e. Buka pintu autoklaf dengan menggeser gagang ke arah tulisan “OPEN”
f. Masukkan alat yang akan disterilisasi
g. Tutup pintu autoklaf
h. Atur suhu hingga 121°C dan waktu 15 menit
i. Klik tombol “START”
j. Tunggu hingga autoklaf memberi petunjuk bahwa pintu sudah siap untuk dibuka.
2. Panas Kering
a. Bungkus peralatan menggunakan kertas payung dan ikat.
b. Tancapkan steker pada sumber listrik.
c. Nyalakan oven dengan menekan tombol PUSH / TURN yang merupakan tombol
ON / OFF dari oven dan berada pada bagian ujung kiri atas oven hingga muncul
display pada oven. 6
d. Atur suhu dengan cara menekan tombol SET secara berbarengan dengan
memutar knob PUSH / TURN. (Arah kanan untuk menaikkan suhu dan arah kiri
untuk menurunkan suhu)

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


e. Atur pertukaran udara di dalam oven dengan cara menggeser tombol air valve.
(Arah maksimum untuk membuka lubang udara dan arah minimum untuk
menutup lubang udara)
f. Apabila display temperature sudah menunjukkan suhu yang diinginkan,
masukkan alat yang akan disterilisasi ke dalam oven.
g. Setting waktu dilakukan dengan menekan tombol SET selama tiga detik,
kemudian lepas dan putar knob PUSH / TURN ke kanan atau kiri dan pilih TIME
OPERATION.
h. Tekan knob PUSH / TURN untuk mematikan oven
3. Red Heat & Flamming
a. Buka penutup lampu Bunsen, isi dengan menggunakan spirtus
b. Atur sumbu dan nyalakan menggunakan korek api
c. Ambil jarum ose yang akan disterilisasi, paparkan ke lampu Bunsen hingga ujung
jarum berwarna merah membara.

F. Hasil Praktikum
Penggunaan
No. Metode Sterilisasi Keunggulan Kelemahan
yang Tepat
1.
2.
3.
4.
5.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 3
Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan

A. Tujuan Praktikum
1. Praktikan dapat mengetahui berbagai media yang digunakan dalam pembiakan
mikroorganisme dalam praktikum mikrobiologi.
2. Praktikan dapat memahami berbagai metode dalam preparasi media untuk
pembiakan mikroorganisme dalam praktikum mikrobiologi.
3. Praktikan dapat membuat media untuk pembiakan mikroorganisme dalam praktikum
mikrobiologi.

B. Landasan Teori
Bakteri dan jamur merupakan organisme yang sesuai untuk penelitian terkait
genetika, fisiologi, sitologi, dan biokimia karena pertumbuhannya yang sangat cepat1.
Hal penting yang perlu diperhatikan dalam pembiakan mikroorganisme ini adalah
pengondisian lingkungan dan nutrisi yang sesuai dengan kondisi pada habitat mereka.
Sebagian besar media pembiakan memiliki kandungan air, sumber karbon & energi,
sumber nitrogen, dan faktor penumbuh. Selain itu, pH optimum, ketegangan oksigen,
dan osmolaritas juga perlu dijaga2.
Koloni merupakan sekelompok mikroorganisme yang berkumpul dan dapat terlihat
oleh mata manusia dan tersusun dari sebuah sel induk yang sama. Koloni ini dapat
dilihat mata manusia setelah milyaran satuan mikroorganisme terproduksi. Karena
seluruh penyusun koloni bakteri berasal dari sel induk yang sama, maka karakteristik
dari koloni tersebut seluruhnya sama. Mikroorganisme dengan jenis yang berbeda
memiliki karakter spesifik tertentu. Oleh sebab itu, pengidentifikasian karakter koloni
bakteri menjadi kunci utama dari proses identifikasi mikroorganisme3.
Mikroorganisme dapat tumbuh pada media cair (liquid medium), media padat (solid
medium), atau media semipadat (semisolid medium), media bifasik (biphasic media), dan
agen padatan lainnya2.
1. Media Cair (Liquid Medium)
Media cair merupakan media yang berbentuk seperti kuah dan digunakan untuk
pertumbuhan mikroorganisme dalam jumlah yang besar3. Mikroba yang hidup dalam
media ini terdeteksi dengan adanya kekeruhan, dan udara pada media. Kekurangan
penggunaan media ini adalah sifat mikroba yang tidak terlihat dan eksistensi jenis 8
mikroba lain yang tumbuh tidak dapat terdeteksi2.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


2. Media Padat (Solid Medium)
Media padat (solid medium) adalah media yang tersusun dari 1,5% - 2,5% agar
dan berfungsi untuk mempelajari karakteristik dari koloni bakteri, isolasi pembiakan
alami, dan menyediakan pembiakan dalam waktu yang singkat3. Media padat
memiliki kesulitan untuk mendeteksi koloni yang jumlahnya rendah. Oleh sebab itu,
biasanya penggunaan media padat disertai dengan tahapan pengayaan mikroba
terlebih dahulu. Saat melakukan isolasi pembiakan, inoculum harus disebarkan
menggunakan jarum ose steril4.
3. Media Semipadat (Semisolid Medium)
Media semipadat merupakan media yang berisi agen pemadatan tertentu yang
dicampurkan dengan cairan. Media semipadat ini berbentuk padat pada suhu 40°C
dan berbentuk cair pada suhu 100°C. Media ini berfungsi untuk mengetahui motilitas
mikroba3.
4. Media Bifasik (Biphasic Media)
Media bifasik terbentuk ketika sebuah kultur terdiri atas media padat dan media
cair dalam botol yang sama. Media ini biasa digunakan dalam kultur darah untuk
meminimalisasi pembukaan wadah media sehingga memperkecil kemungkinan
kontaminasi2.
Ada tiga tipe media yang biasa digunakan dalam pembiakan mikroorganisme
diantaranya sebagai berikut.
1. Media Nutrien, media ini memiliki bahan kimia khusus yang mengandung nutrisi dan
mineral untuk pertumbuhan mikroorganisme secara umum. Bahan dasar untuk
pertumbuhan mikroba dan zat-zat tertentu yang ditambahkan seperti serum, kuning
telur, dan lain-lain.
2. Media Selektif, media ini mengandung nutrisi untuk mikroorganisme tertentu, bahkan
kandungan dalam media selektif menjadi penghambat pertumbuhan bagi
mikroorganisme yang bukan sasarannya.
3. Media Diferensial, media ini berfungsi untuk mengenali mikroorganisme secara
spesifik. Media ini memanfaatkan berbagai reaksi biokimia untuk mendeteksi
keberadaan mikroorganisme, contohnya adalah dengan perubahan warna.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Jenis media dan fungsinya dapat dilihat pada tabel berikut:
Jenis Nama Fungsi
Cair Lactose Broth (LB) Mendeteksi adanya coliform pada air
dan menyediakan nutrisi untuk
pengayaan Salmonella pada tahap
pre-enrichment.
Brilliant Green Lactose Broth Menghambat pertumbuhan bakteri
(BGLB) gram positif dan menggiatkan
pertumbuhan Coliform.
Padat Plate Count Agar (PCA) Media tumbuh mikroba pada
pemeriksaan Total Plate Count (TPC).
Triple Sugar Iron Agar (TSIA) Melihat kemampuan mikroorganisme
untuk memfermentasikan gula.
Salmonella Shigella Agar (SSA) Memisahkan bakteri Salmonella dan
Shigella.
Manitol Salt Agar (MSA) Media untuk mengisolasi bakteri
Staphylococcus sp.(2-10)
Potato Dextrose Agar (PDA) Identifikasi, pembiakan, dan enumerasi
ragi (khamir) dan jamur. (2-9)
Semipadat Sulphur Indole Motility (SIM) Diferensiasi Enterobacteriaceae
berdasarkan kemampuannya untuk
menghasilkan Hidrogen Sulfida (H2S).

C. Alat
1. Neraca Analitik
2. Gelas Ukur
3. Erlenmeyer
4. Tabung Reaksi
5. Pipet
6. Batang Pengaduk
7. Krustang
8. Hotplate / Kompor Listrik
D. Bahan
1. Plate Count Agar (PCA) 10
2. Akuades
3. Alkohol 70%

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


E. Metode
1. Timbang media sesuai dengan takaran yang tertera pada kemasan.
2. Masukkan media secara berhati-hati ke dalam Erlenmeyer.
3. Tambahkan akuades dengan volume yang sesuai dengan takaran media, aduk
sampai merata menggunakan batang pengaduk.
4. Panaskan media dalam Erlenmeyer menggunakan kompor listrik hingga homogen
(tidak ada gumpalan dan jernih).
5. Tutup Erlenmeyer menggunakan Alumunium Foil
6. Sterilisasikan media menggunakan Autoklaf pada suhu 121°C pada tekanan 1 atm
selama 15 menit.

F. Hasil Praktikum
Volume :
PCA yang ditimbang :
Sterilisasi :

11

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 4
Sampling Mikrobiologi

A. Tujuan Praktikum
1. Mahasiswa memahami konsep pengambilan sampel untuk pemeriksaan parameter
mikrobiologi.
2. Mahasiswa dapat melakukan pengambilan sampel untuk pemeriksaan parameter
mikrobiologi pada makanan, minuman, dan swab permukaan.

B. Landasan Teori
Pemantauan lingkungan merupakan kegiatan yang sangat penting untuk
memastikan bahwa perangkat medis atau hal yang kita konsumsi dan gunakan terbebas
dari cemaran agen penyakit dalam seluruh tahapan produksinya. Sampling dan
pemeriksaan parameter mikrobiologi merupakan kunci dari kegiatan pemantauan
lingkungan untuk mengurangi risiko cemaran mikroorganisme. Sampling mikrobiologi
untuk tujuan tertentu dan tidak dilakukan secara rutin harus memperhatikan hal berikut.
1. Protokol tertulis untuk pengumpulan sampel dan pembiakan mikroorganisme.
2. Analisis dan interpretasi hasil menggunakan dasar yang ilmiah.
3. Tindak lanjut harus berdasarkan hasil yang diperoleh.
Sampling mikrobiologi yang baik harus memastikan bahwa hasil analisis nantinya
dapat merepresentasikan kontaminasi. Selain itu, teknik yang dilakukan dalam kegiatan
ini harus sesuai dengan tujuan pengambilan sampelnya. Saat melakukan sampling
mikrobiologi, hal yang harus diperhatikan adalah mempertahankan kondisi sampel yang
siap untuk diperiksa di laboratorium agar tetap sama dengan saat pengambilan. Oleh
karenanya, sampling membutuhkan peralatan yang steril dan membutuhkan pendingin
saat membawa sampel ke laboratorium5. Sebelum melakukan sampling, seorang
petugas pengambilan sampel harus memahami informasi terkait hal-hal berikut.
1. Jenis sampling (Grab / Composite / dst.)
2. Parameter yang akan diperiksa.
3. Potensi gangguan termasuk kondisi lingkungan dan dampak cuaca.
4. Jumlah sampel lapangan yang akan dikumpulkan.
5. Jumlah bahan yang dibutuhkan untuk pengambilan tiap sampel.
6. Lokasi dan frekuensi pengambilan sampel
7. Pengawetan sampel dan persyaratan waktu pena hanan 12
8. Pengemasan sampel
9. Kelengkapan dokumentasi
10. Prosedur dan teknik pengambilan sampel

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


11. Alat yang dibutuhkan untuk pengambilan sampel
12. Tipe dan ukuran wadah sampel.

C. Alat
1. Pisau
2. Gunting
3. Sendok
4. Swab Steril
5. Lampu Bunsen
6. Cool Box
7. Ice Tube
8. Botol Sampel Steril
9. Termometer
10. pH meter
11. Korek Api
12. Templat untuk Swab (10 x 10 cm2)
13. Tabung Reaksi dan Rak Tabung Reaksi6

D. Bahan
1. Kertas Label
2. Plastik Sampel
3. Larutan Buffer Phosphat
4. Alkohol 70%
5. Kapas
6. Lidi Kapas Steril
7. Bolpoin

13

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


E. Prosedur Kerja
1. Sampling Makanan dan Minuman
a) Lakukan cuci tangan sebelum mengambil sampel / basahi tangan menggunakan
alkohol 70%
b) Makanan kemasan yang tertutup (botol, kaleng, karton, dll.) dipilih secara random
dan dibawa beserta wadahnya ke laboratorium.
c) Makanan dengan ukuran sedang yang dapat masuk ke plastik sampel langsung
dimasukkan ke dalam plastik.
d) Makanan berukuran besar dipotong bagian sampel dengan menggunakan alat
tajam steril (pisau / gunting) dan dimasukkan ke dalam plastik sampel.
e) Minuman dengan volume yang besar diciduk menggunakan sendok steril dan
dimasukkan ke dalam botol sampel steril sebanyak 100 - 200 ml.
f) Beri label pada wadah sampel yang telah terisi.
g) Masukkan sampel makanan / minuman telah diberi label ke dalam cool box yang
berisi ice tube. Saat membuka cool box, cukup buka sedikit bagian saja dan
setelah sampel masuk langsung ditutup kembali.
h) Segera bawa sampel ke laboratorium6.
2. Sampling Air
a) Pilih keran yang mudah diakses dan biasa digunakan untuk keperluan
masyarakat sehari-hari untuk mengambil sampel.
b) Ukur suhu dan pH dari air yang akan diambil sampelnya.
c) Lakukan cuci tangan sebelum mengambil sampel / basahi tangan menggunakan
alkohol 70%.
d) Lakukan sterilisasi pada mulut kran air dengan cara mengusapnya menggunakan
kapas yang dibasahi alkohol kemudian kontakkan dengan api. Jangan kontakkan
dengan api jika mulut keran terbuat dari plastik.
e) Nyalakan keran untuk suhu air normal, biarkan air mengalir selama 3-5 menit.
f) Atur aliran keran agar mengalir dengan lembut sehingga tidak menimbulkan
percikan dalam pengambilan sampel.
g) Buka tutup botol dengan berhati-hati dan pegang tutup botol selama pengambilan
sampel.
h) Alirkan air ke dalam botol hingga terisi sekitar 2/3 volume botol.
i) Kontakkan api pada mulut botol sampling, pasang kembali tutup botol dan
kencangkan7. 14
j) Pasang label pada bagian luar botol sampel.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


k) Masukkan botol sampel yang telah diberi label ke dalam cool box yang berisi ice
tube. Saat membuka cool box, cukup buka sedikit bagian saja dan setelah sampel
masuk langsung ditutup kembali.
3. Swab Permukaan
a) Lakukan cuci tangan sebelum mengambil sampel / basahi tangan menggunakan
alkohol 70%.
b) Ambil dan nyalakan Lampu Bunsen, letakkan di dekat permukaan yang akan
diusap
c) Ambil templat steril untuk memastikan luas permukaan area yang akan diusap.
d) Letakkan templat steril pada permukaan area yang akan diusap.
e) Ambil lidi kapas dan tabung reaksi yang berisi larutan Buffered Phosphate.
Masukkan lidi kapas ke tabung reaksi hingga seluruh bagian kapas terbasahi oleh
larutan. Tekan lidi kapas pada dinding tabung untuk mengurangi tetesan larutan
saat melakukan swab alat.
f) Usap seluruh area yang ada di dalam templat menggunakan lidi kapas yang berisi
larutan Buffered Phosphate dengan cara memutar. Lakukan kembali pengusapan
mulai dari titik awal gerakan lidi kapas.
g) Masukkan lidi kapas ked alam tabung reaksi dan patahkan sisa lidi yang telah kita
pegang, tutup kembali tabung menggunakan kapas.
h) Beri label pada tabung reaksi.
i) Masukkan tabung reaksi ke dalam cool box dan segera kirim ke laboratorium5.

F. Hasil Praktikum

15

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 5
Pemeriksaan Angka Lempeng Total

A. Tujuan Praktikum
1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan Angka Lempeng
Total (ALT).
2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan Angka Lempeng Total (ALT).

B. Landasan Teori
Penghitungan mikroorganisme dengan Angka Lempeng Total (ALT) atau biasa
juga dikenal dengan analisis Total Plate Count (TPC) adalah salah satu metode yang
paling umum digunakan untuk menunjukkan kualitas mikrobiologis dalam makanan
dengan kondisi suhu umum: 30 - 35°C dan masa inkubasi selama 48 - 72 jam. Angka
Lempeng Total (ALT) juga disebut Aerobic Plate Count, Standard Plate Count (SPC),
Total Viable Count (TVC). Satuan dari perhitungan ini dinyatakan dalam CFU/ml atau
CFU/gram8.
ALT dapat dipergunakan sebagai indikator proses higine sanitasi produk,analisis
mikroba lingkungan pada produk jadi, indikator proses pengawasan, dan digunakan
sebagai dasar kecurigaan dapat atau tidak diterimanya suatu produk berdasarkan
kualitas mikrobiologinya9. Mikroorganisme yang dinyatakan dengan ALT secara umum
merupakan bakteri, kapang, dan khamir yang tumbuh pada media mikrobiologi non
spesifik8.
Metode TPC merupakan metode yang paling sensitif dalam menentukan
jumlah mikroorganisme karena memiliki kelebihan-kelebihan sebagai berikut 10:
1. Hanya sel yang masih hidup yang dihitung.
2. Beberapa jenis mikroba dapat dihitung sekaligus.
3. Dapat digunakan untuk isolasi dan identifikasi mikroba karena koloni yang
terbentuk berasal dari satu sel mikroba dengan penampakan mikroba yang
spesifik.
Selain kelebihan-kelebihan tersebut, metode TPC juga mempunyai
beberapa kekurangan seperti:
1. Hasil perhitungan percobaan tidak menunjukkan jumlah sel mikroba yang
sebenarnya karena beberapa sel yang terdekat kemungkinan membentuk 16
satu
sel koloni.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


2. Faktor persiapan medium dan inkubasi yang tidak sama dapat menghasilkan
jumlah mikroba yang berbeda.
3. Mikroba yang ditumbuhkan harus dapat tumbuh pada medium padat dan
membentuk koloni yang kompak, jelas dan tidak menyebar.
4. Diperlukan waktu untuk beberapa tahap persiapan dan inkubasi yang lama
sehingga koloni mikroba dapat tumbuh dan dihitung.

C. Alat
1. Cawan Petri
2. Erlenmeyer
3. Gelas Ukur
4. Tabung Reaksi
5. Rak Tabung Reaksi
6. Pipet Ukur
7. Colony Counter
8. Gunting
9. Pinset
10. Vortex
11. Lampu Bunsen
12. Timbangan Analitik
13. Inkubator
14. Korek Api
15. Mortar dan Pestle

D. Bahan
1. Plate Count Agar (PCA)
2. Akuades
3. Alkohol 70%

E. Prosedur Praktikum
1. Lumatkan sampel padat menggunakan mortar dan pestle steril
2. Timbang sampel padat maupun semi padat sebanyak 10 gram atau untuk sampel
cair ukur sebanyak 10 ml secara aseptik, kemudian masukkan ke Erlenmeyer. 17
3. Tambahkan 90 ml akuades ke dalam Erlenmeyer yang berisis sampel untuk
mendapatkan pengenceran 10-1.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


4. Ambil 1 ml suspensi menggunakan pipet steril, masukkan ke tabung reaksi dan
tambahkan akuades 9 ml untuk mendapatkan pengenceran 10-2. Lakukan hal yang
sama untuk membuat pengenceran 10-3.
5. Masukkan sebanyak 1 ml suspensi dari setiap pengenceran ke dalam cawan petri.
6. Tambahkan 15-20 ml PCA yang sudah hangat-hangat kuku sekitar 45°C pada
masing-masing cawan yang sudah terisi suspensi.
7. Homogenkan suspensi dan media dengan menggerakkan cawan petri mengikuti pola
angka “0” atau angka “8”. Tunggu hingga media mengeras. Tutup cawan petri
menggunakan kertas payung dan beri label.
8. Inkubasikan pada temperature 34°C-36°C selama 24-48 jam secara terbalik. Adapun
produk susu, suhu inkubasi adalah 32°C ± 1°C.
9. Keluarkan cawan hasil inkubasi, lakukan perhitungan koloni menggunakan Colony
Counter.
10. Interpretasikan hasil perhitungan dengan menggunakan rumus11:

Keterangan:
N = Jumlah koloni / ml atau mg sampel (CFU/ml atau CFU/mg)
C = Koloni di cawan petri yang terhitung
n1 = Jumlah cawan petri pada pengenceran 1
n2 = Jumlah cawan petri pada pengenceran 2
d = Pengenceran yang dimasukkan sebagai n1 → 10-2

F. Hasil Praktikum

18

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 6
Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp.

A. Tujuan Praktikum
1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan Salmonella sp.
2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan Salmonella sp.

B. Landasan Teori
Salmonellosis dianggap sebagai infeksi melalui media makanan yang menyerang
saluran cerna manusia. Agen penyebab penyakit ini adalah bakteri Salmonella sp.
Bakteri ini merupakan bakteri gram negative yang bergerak menggunakan flagella.
Bakteri Salmonella ditularkan melalui makanan dan minuman yang terkontaminasi oleh
kotoran atau tinja dari seseorang penderita12.
Bakteri ini akan masuk melalui mulut bersama makanan dan minuman kemudian
hanyut ke saluran pencernaan. Apabila bakteri masuk ke dalam tubuh manusia, tubuh
akan berusaha untuk mengeliminasinya. Tetapi bila bakteri dapat bertahan dan jumlah
yang masuk cukup banyak, maka bakteri akan berhasil mencapai usus halus. Kemudian
bakteri berusaha masuk ke dalam tubuh yang akhirnya dapat merangsang sel darah
putih untuk menghasilkan interleukin yang merangsang terjadinya gejala demam,
perasaan lemah, sakit kepala, nafsu makan berkurang13. Salmonella dapat
diklasifikasikan sebagai berikut:
Kingdom = Bacteria
Filum = Proteobacteria
Kelas = Gamma Proteobakteria
Ordo = Enterobakteriales
Famili = Enterobacteriaceae
Genus = Salmonella
Bakteri Salmonella diketahui dapat bertahan dalam waktu yang lama pada produk
makanan dengan kadar air rendah, dengan demikian bakteri ini termasuk bersifat
anaerobic fakultatif. Bakteri ini berbentuk batang lurus dengan ukuran 0,7-1,5 x 2,0-5,0
µm. Bakteri ini memiliki sekitar 2500 sterotip yang dikenali dan jumlahnya selalu
bertambah tiap tahun dan beberapa tidak dapat terdeteksi oleh pemeriksaan biokimia12.
Salmonella dapat berada pada berbagai jenis makanan dan 68% diantaranya
merupakan makanan yang berasal dari peternakan. Adapun makanan selain dari 19
peternakan yang dapat mengandung bakteri Salmonella yaitu: bawang merah, ikan,
buah campuran, dll. Sebenarnya, tanaman tidak mengandung bakteri Salmonella secara
natural, akan tetapi dalam beberapa masa terakhir, berbagai organ dari bakteri ini

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


berubah. Salmonella mampu memproduksi enzim periplasmic yang memiliki kemampuan
untuk menghancurkan pertahanan tumbuhan12.
C. Alat
1. Cawan Petri
2. Erlenmeyer
3. Gelas Ukur
4. Tabung Reaksi
5. Rak Tabung Reaksi
6. Pipet Ukur
7. Batang Pengaduk
8. Gunting
9. Pinset
10. Spreader Glass / Drugalsky
11. Lampu Bunsen
12. Timbangan Analitik
13. Inkubator
14. Korek Api
15. Mortar dan Pestle

D. Bahan
1. Lactose Broth (LB)
2. Selenite Broth (SB)
3. Salmonella Shigella Agar (SSA)
4. Triple Sugar Iron Agar
5. Urease Agar (UA)
6. Akuades
7. Alkohol 70%
8. Alumunium Foil
9. Kapas

E. Prosedur Praktikum
Pra-Enrichment
1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol
2. Nyalakan lampu Bunsen 20

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


3. Timbang 5 gram sampel dan haluskan sampel menggunakan mortar dan masukkan
ke dalam Erlenmeyer. Untuk media semipadat, ambil sebanyak 5 ml dan masukkan
ke dalam Erlenmeyer.
4. Tambahkan 45 ml media Lactose Broth (LB) ke dalam Erlenmeyer secara aseptis,
dan homogenkan dengan cara mengaduknya menggunakan batang pengaduk.
5. Tutup Erlenmeyer menggunakan Alumunium Foil, Beri label
6. Inkubasikan selama 24 jam dengan suhu 35°C.
Enrichment
1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol
2. Nyalakan lampu Bunsen
3. Siapkan 9 ml media Selenite Broth
4. Siapkan sampel yang telah selesai diinkubasikan pada tahap Pra-Enrichment
5. Masukkan 1 ml sampel yang ada di media Lactose Broth ke dalam Media Selenite
Broth menggunakan pipet ukur steril.
6. Beri label pada tabung reaksi dan Inkubasikan media Selenite Broth yang berisi
sampel selama 24 jam 35°C.
Seleksi
1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol
2. Nyalakan lampu Bunsen
3. Siapkan media Salmonella Shigella Agar (SSA) yang sudah siap pada cawan petri
steril.
4. Siapkan sampel yang telah selesai diinkubasikan pada tahap Enrichment
5. Ambil 1 ml suspensi dari media Selenite Broth, tuangkan pada permukaan media
Salmonella Shigella Agar (SSA) yang ada di cawan petri.
6. Sebar suspense ke seluruh permukaan Salmonella Shigella Agar (SSA) dengan
menggunakan Spreader.
7. Bungkus kembali media Salmonella Shigella Agar (SSA) yang telah diberi suspensi
sampel.
8. Beri label dan inkubasikan pada suhu 35◦C selama 24 jam.
9. Keberadaan Koloni Salmonella ditandai dengan adanya bercak hitam pada media
Identifikasi
1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol
2. Nyalakan lampu Bunsen
3. Siapkan media Triple Sugar Iron Agar (TSIA) pada tabung reaksi. 21
4. Siapkan media Urease Agar (UA) pada cawan petri.
5. Siapkan sampel yang telah selesai diinkubasikan pada tahap Seleksi

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


6. Sterilkan Jarum Ose, goreskan jarum ose ke koloni Salmonella yang terdapat pada
media SSA.
7. Inokulasikan jarum ose secara zig-zag pada media Triple Sugar Iron Agar (TSIA).
Beri label pada tabung reaksi.
8. Lakukan hal yang sama dan inokulasikan pada media Urease Agar (UA) yang ada
pada cawan petri.
9. Bungkus kembali media Urease Agar (UA), yang telah diberi inokulasi sampel, beri
label pada pembungkus media Urease Agar (UA).
10. Inkubasikan pada suhu 35◦C selama 24 jam.

F. Hasil Praktikum
Tabel Pengamatan
Tahap Pemeriksaan Bentuk Media Salmonella (+ / -)
Pra-Enrichment
Enrichment
Seleksi
Identifikasi

22

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 7
Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform

A. Tujuan Praktikum
1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan MPN Bakteri
Coliform
2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan MPN Bakteri Coliform

B. Landasan Teori
Bakteri patogen yang menyebabkan penyakit serius sulit dideteksi dalam air bersih
karena memiliki prosedur pengujian yang panjang dan kompleks. Oleh karenanya,
pemeriksaan kualitas mikroorganisme air biasanya menggunakan organisme indikator.
Organisme indikator mungkin tidak patogen tetapi hadir ketika patogen ada dan tidak
ada ketika patogen tidak ada14. Bakteri Coliform merupakan bakteri indikator keberadaan
bakteri patogenik dan masuk dalam golongan mikroorganisme yang lazim digunakan
sebagai indikator, dimana bakteri ini dapat menjadi sinyal untuk menentukan suatu
sumber air telah terkontaminasi oleh bakteri patogen atau tidak15.
Bakteri Coliform adalah golongan bakteri intestinal yang hidup dalam saluran
pencernaan manusia. Bakteri Coliform memiliki bentuk seperti batang, tidak memiliki
spora, gram negatif, dan termasuk kedalam mikroorganisme aerobik dan anaerobik
fakultatif16. Bakteri ini mampu memfermentasikan Lactose Broth (LB) dengan
menghasilkan asam dan gas dalam waktu 24 jam pada suhu 37°C dan menunjukkan
hasil positif dengan menghasilkan gas pada media BGLB dalam waktu 24 jam15.
Metode yang sering digunakan untuk mengetahui keberadaan Bakteri Coliform
adalah MPN (Most Probable Number). Metode ini dilakukan untuk menyatakan secara
kualitatif dan kuantitatif adanya Coliform16. Pemeriksaan dengan MPN menggunakan
seri 3-3-3, 5-1-1, dan 5-5-5. Secara lengkap, metode ini terdiri atas 4 tahapan yaitu:
1. Uji Perkiraan (Presumtive test)
2. Uji Penegasan (Convirmative test)
3. Uji Pelengkap (Completed test)
4. Uji Identifikasi (Identification test). (7-2)
Uji perkiraan dan penegasan dapat menginterpretasikan keberadaan Bakteri
Coliform secara kualitatif. Adapun uji pelengkap dan identifikasi berguna untuk
mengetahui apakah jenis bakteri Coliform merupakan faecal coliform atau sebaliknya 23
dan untuk mengetahui visualisasi bakteri sebagai gram negatif. Uji perkiraan dilakukan
dengan menginokulasikan sampel ke dalam Lactose Broth. Jika dalam tabung durham
timbul gas setelah diinkubasikan dengan suhu 35 – 37°C, maka dilanjutkan ke tahap uji

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


penegasan. Namun, jika tidak terbentuk gas, maka uji tidak perlu dilanjut ke tahapan
berikutnya17.
C. Alat
1. Gelas Ukur
2. Tabung Reaksi
3. Tabung Durham
4. Rak Tabung Reaksi
5. Pipet Ukur
6. Gunting
7. Lampu Bunsen
8. Timbangan Analitik
9. Inkubator
10. Korek Api

D. Bahan
1. Lactose Broth (LB)
2. Brilliant Green Lactose Bile Broth (BGLBB)
3. Akuades
4. Alkohol 70%
5. Kapas

E. Prosedur Praktikum
Uji Perkiraan

1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol


2. Nyalakan lampu Bunsen
3. Timbang 5 gram sampel dan haluskan sampel menggunakan mortar dan masukkan
ke dalam Erlenmeyer. Untuk media semipadat, ambil sebanyak 5 ml dan masukkan
ke dalam Erlenmeyer.
4. Tambahkan 45 ml Buffered Peptone Water (BPW) ke dalam Erlenmeyer secara
aseptis, dan homogenkan dengan cara mengaduknya menggunakan batang
pengaduk.
5. Pindahkan 1 ml suspensi pengenceran tersebut menggunakan pipet steril ke dalam 3
seri tabung berisi Media Lactose Broth yang telah dipasang Tabung Durham.
6. Beri label, Inkubasikan pada temperatur 35◦C selama 24-48 jam.
7. Setelah selesai masa inkubasi, perhatikan Tabung Durham. Jika terdapat gas, maka 24

lanjutkan ke Uji Penegasan.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Uji Penegasan
1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol
2. Nyalakan lampu Bunsen
3. Sterilkan jarum ose menggunakan lampu bunsen
4. Pindahkan biakan positif dari media LB menggunakan jarum ose dan inokulasikan ke
dalam tabung berisi media BGLBB yang telah dipasang tabung durham.
5. Beri label pada tabung media BGLBB berisi sampel, inkubasikan pada temperatur
35◦C selama 24-48 jam.
6. Setelah selesai masa inkubasi, perhatikan Tabung Durham. Jika terdapat gas, berarti
sampel postif mengandung Coliform.
7. Gunakan tabel Most Probable Number (MPN) untuk menentukan nilai MPN per
milliliter atau per gram.

F. Hasil Praktikum

25

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 8
Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli

A. Tujuan Praktikum
1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan MPN Bakteri
Eschericia Coli.
2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli.

B. Landasan Teori
Kualitas air dapat diketahui dengan mengidentifikasi berbagai bakteri berbeda
yang terkandung di dalamnya. Meski demikian, hal ini dapat menghabiskan biaya yang
cukup tinggi. Terlebih lagi, keberadaan bakteri pathogen biasanya berjumlah sedikit
sehingga dapat saja menghilang selama proses identifikasi. Metode yang mudah untuk
mengecek kualitasi air adalah dengan mengidentifikasi adanya Bakteri Coliform sebagai
indikator18. Berdasarkan rekomendasi dari WHO, pemantauan kualitas mikrobiologi air
dilakukan dengan mengukur keberadaan Bakteri Eschericia Coli yang menunjukkan
adanya cemaran feses pada air yang dapat menimbulkan penyakit pada manusia19.
Bakteri Eschericia Coli yang dikenal sebagai E.Coli merupakan bakteri Gram-
negatif berbentuk batang. Bakteri ini masuk ke dalam genus Eschericia yang biasa
ditemukan pada usus bagian bawah organisme berdarah panas (endotermis). Bentuk sel
dari bakteri ini mirip dengan bentuk batang yang memiliki panjang sekitar 2,0 µm,
diameter 0,25 – 1,0 µm dan volume sel 0,6-0,7 µm3,20. Bakteri ini bersifat anaerob
fakultatif, dia tidak dapat dihilangkan dengan proses pendinginan atau pembekuan.
Meski demikian, bakteri ini dapat hilang karena adanya pemberian antibiotik, Sinar
Ultraviolet (UV), atau pemanasan dengan suhu >100°C21.
Manusia dapat terinfeksi bakteri E.Coli bukan hanya akibat dari konsumsi air yang
memiliki kualitas buruk, melainkan dapat juga disebabkan oleh kontak langsung dengan
organisme yang terkena infeksi, atau mengonsumsi media lainnya yang mengandung
E.Coli. Media makanan yang dapat mengandung E.Coli diantaranya: daging, buah, sayur
yang terkontaminasi, dan susu yang belum dipasteurisasi. Selain itu, pupuk kendang
yang digunakan untuk membantu kesuburan tanah juga dapat berperan dalam
penyebaran bakteri ini. Saar pupuk digunakan, maka bakteri dapat mencemari tumbuhan
yang ada di tanah tersebut22.
Ada berbagai metode yang digunakan dalam mengidentifikasi Escherichia Coli, 26
diantaranya adalah Metode MPN dan Membran Filter. Prinsip Metode MPN adalah
mengencerkan sampel hingga tingkat tertentu yang sesuai dan menunjukkan
pertumbuhan pada tabung reaksi dengan ditandai adanya gas pada tabung Durham.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Metode membran filter dilakukan dengan menyaring sampel menggunakan kertas
membran, kemudian diletakkan pada Media Emdo Agar23.
C. Alat
1. Gelas Ukur
2. Tabung Reaksi
3. Tabung Durham
4. Rak Tabung Reaksi
5. Pipet Ukur
6. Gunting
7. Lampu Bunsen
8. Timbangan Analitik
9. Inkubator
10. Korek Api

D. Bahan
1. Lactose Broth (LB)
2. Escherichia Coli Broth (ECB)
3. Akuades
4. Alkohol 70%
5. Kapas

E. Prosedur Praktikum
Uji Perkiraan
1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol
2. Nyalakan lampu Bunsen
3. Timbang 5 gram sampel dan haluskan sampel menggunakan mortar dan masukkan
ke dalam Erlenmeyer. Untuk media semipadat, ambil sebanyak 5 ml dan masukkan
ke dalam Erlenmeyer.
4. Tambahkan 45 ml Buffered Peptone Water (BPW) ke dalam Erlenmeyer secara
aseptis, dan homogenkan dengan cara mengaduknya menggunakan batang
pengaduk.
5. Pindahkan 1 ml suspensi pengenceran tersebut menggunakan pipet steril ke dalam 3
seri tabung berisi Media Lactose Broth yang telah dipasang Tabung Durham.
6. Beri label, Inkubasikan pada temperatur 35◦C selama 24-48 jam.
7. Setelah selesai masa inkubasi, perhatikan Tabung Durham. Jika terdapat gas, maka 27
lanjutkan ke Uji Penegasan.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Uji Penegasan
1. Sterilkan tangan dan meja praktik dengan menggunakan alkohol
2. Nyalakan lampu Bunsen
3. Sterilkan jarum ose menggunakan lampu bunsen
4. Pindahkan biakan positif dari media LB menggunakan jarum ose dan inokulasikan ke
dalam tabung berisi media Eschericia Coli Broth (ECB) yang telah dipasang tabung
durham.
5. Beri label pada tabung media Eschericia Coli Broth (ECB) berisi sampel, inkubasikan
pada temperatur 45,5◦C selama 24 jam, jika hasilnya negative, inkubasikan kembali
selama 48 jam.
6. Setelah selesai masa inkubasi, perhatikan Tabung Durham. Jika terdapat gas, berarti
sampel postif mengandung Coliform.
7. Gunakan tabel Most Probable Number (MPN) untuk menentukan nilai MPN per
milliliter atau per gram.

F. Hasil Praktikum

28

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 9
Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus Aureus

A. Tujuan Praktikum
1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan Bakteri
Staphylococcus Aureus.
2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan Bakteri Staphylococcus Aureus.

B. Landasan Teori
Staphylococcus Aureus merupakan salah satu agen bakti yang paling banyak
mengakibatkan penyakit bawaan makanan pada manusia24. Klasifikasi taksonomi dari
bakteri ini adalah sebagai berikut:
Kingdom : Bacteria
Divisi : Firmicutes
Kelas : Cocci
Ordo : Bacillales
Familia : Staphylococcaceae
Genus : Staphylococcus
Spesies : Staphylococcus Aureus25
Staphylococcus Aureus termasuk bakteri Gram-positif yang tidak menimbulkan
spora dan tidak motil26. Bakteri ini memiliki sifat anaerobik fakultatif sehingga
perkembangbiakannya menggunakan respirasi aerob dan fermentasi27. Pada umumnya,
bakteri ini tumbuh berpasangan atau berkelompok dengan diameter sekitar 0,8 – 1,0
µm26. Dinding sel dari bakteri dilapiasi oleh mantel pelindung yang berbentuk tidak
beraturan dengan ketebalan sekitar 40 nm. Pertumbuhan bakteri ini tergantung pada
kemampuan sel untuk menyesuaikan diri terhadap lingkungan27.
Bakteri Staphylococcus Aureus dapat menyebabkan penyakit karena
kemampuannya untuk berkembang biak menyebar luas dalam jaringan tubuh dan
produksi enterotoksin. Manusia biasanya dapat menjadi pembawa S.Aureus dengan
enterotoksin tanpa merasakan gejala apapun. Bakteri ini biasanya bersarang pada
hidung, tenggorokan, dan kulit. Oleh sebab itu, penjamah makanan merupakan salah
satu titik kritis yang harus diawasi dalam mencegah penyakit bawaan makanan24.
Enterotoksin yang dihasilkan oleh bakteri ini bersifat tahan panas dan jika toksin
terkonsumsi oleh manusia akan mengakibatkan gejala berupa: mual, muntah, dan 29
diare27.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


C. Alat
1. Cawan Petri
2. Erlenmeyer
3. Gelas Ukur
4. Tabung Reaksi
5. Rak Tabung Reaksi
6. Pipet Ukur
7. Colony Counter
8. Gunting
9. Pinset
10. Lampu Bunsen
11. Timbangan Analitik
12. Inkubator
13. Korek Api
14. Mortar dan Pestle

D. Bahan
1. Mannitol Salt Agar (MSA)
2. Akuades
3. Alkohol 70%
4. Kapas

E. Prosedur Praktikum
1. Lumatkan sampel padat menggunakan mortar dan pestle steril
2. Timbang sampel padat maupun semi padat sebanyak 10 gram atau untuk sampel
cair ukur sebanyak 10 ml secara aseptik, kemudian masukkan ke Erlenmeyer.
3. Tambahkan 90 ml akuades ke dalam Erlenmeyer yang berisis sampel untuk
mendapatkan pengenceran 10-1.
4. Sterilkan jarum ose, ambil suspense sampel dengan cara menggoreskan jarum ose
ke sampel yang tidak diencerkan.
5. Inokulasikan suspensi sampel yang ada di jarum ose ke media Mannitol Salt Agar
(MSA) yang ada di cawan petri 1.
6. Lakukan hal yang sama pada sampel yang sudah dicairkan 10-1 dan inokulasikan
pada media Mannitol Salt Agar (MSA) yang ada di cawan petri 2.
5. Beri label, Inkubasikan pada temperature 37°C selama 24-48 jam. 30
6. Keluarkan cawan hasil inkubasi, lakukan perhitungan koloni menggunakan Colony
Counter.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


7. Hasil positif menunjukkan perubahan warna pada medium dari warna merah menjadi
kuning dan hasil negatif tidak terjadi perubahan warna.
F. Hasil Praktikum

31

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


MATERI 10
Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir

A. Tujuan Praktikum
1. Mahasiswa dapat memahami prinsip dan prosedur pemeriksaan Jamur Kapang dan
Khamir.
2. Mahasiswa mampu melakukan pemeriksaan Kapang dan Khamir.
B. Landasan Teori
Kapang dan Khamir (fungi / jamur) merupakan bawaan makanan mikroskopis yang
memiliki ratusan spesies. Organisme ini mampu menyerang banyak makanan karena
dapat hidup dalam berbagai kondisi lingkungan yang bebeda. Sebagian besar Kapang
dan Khamir bersifat aerob obligat (membutuhkan oksigen bebas untuk pertumbuhan).
Rentang pH yang dibutuhkan untuk kehidupannya berkisas antara 2 sampai di atas pH 9
dan rentang suhu hidup antara 10-35°C28.

Meskipun memiliki banyak karakteristik yang sama, Kapang dan Khamir


sebenarnya memiliki beberapa perbedaan. Kapang merupakan jenis jamur yang tumbuh
secara pada filamen multiseluler yang disebut hifa. Cabang-cabang tubular ini memiliki
banyak inti yang identik secara genetik, namun membentuk satu organisme, yang
dikenal sebagai koloni. Sebaliknya, Khamir adalah jenis jamur yang tumbuh sebagai sel
tunggal. Selain itu, ada banyak faktor yang bisa digunakan untuk membedakan kedua
jamur ini.

Banyak studi yang telah membahas bahwa jamur sebagai mikroorganisme


berperan atas kontaminasi dan kerusakan makanan. Hal ini berdampak buruk secara
ekonomi dan kesehatan. Jamur mampu menghasilkan mikotoksin yang disimpan dalam
makanan dan berisiko menimbulkan penyakit. Agen utama jamur yang berperan
membentuk racun ini diantaranya termasuk dalam genre Fusarium, Penicillium, dan
Aspergillus29. Angka Kapang dan Khamir yang lebih dari 103 CFU/ml memiliki
probabilitas tinggi untuk pertumbuhan genre jamur yang dapat meracuni tubuh30.

Mikotoksin merupakan metabolit sekunder yang beracun untuk manusia dan


hewan. Pertumbuhan jamur yang tidak diinginkan dapat menyebabkan penyakit bawaan
makanan yang berdampak serius. Kontaminasi produk makanan oleh Kapang dan
Khamir biasanya disebabkan oleh peralatan yang tidak bersih. Kontaminasi ini dapat 32
dikendalikan dengan perbaikan manufaktur dan penggunaan teknik aseptik saat
memproduksi makanan.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


C. Alat
1. Cawan Petri
2. Erlenmeyer
3. Gelas Ukur
4. Pipet Ukur
5. Colony Counter
6. Gunting
7. Pinset
8. Lampu Bunsen
9. Timbangan Analitik
10. Inkubator
11. Korek Api
12. Mortar dan Pestle

D. Bahan
1. Potato Dextrose Agar (PDA)
2. Kloramfenikol
3. Buffered Peptone Water (BPW)
4. Alkohol 70%

E. Prosedur Praktikum
1. Lumatkan sampel padat menggunakan mortar dan pestle steril
2. Timbang sampel padat maupun semi padat sebanyak 10 gram atau untuk sampel
cair ukur sebanyak 10 ml secara aseptik, kemudian masukkan ke Erlenmeyer.
3. Tambahkan 90 ml Buffered Peptone Water (BPW) ke dalam Erlenmeyer yang berisis
sampel untuk mendapatkan pengenceran 10-1.
4. Ambil 1 ml suspensi menggunakan pipet steril, masukkan ke tabung reaksi dan
tambahkan akuades 9 ml untuk mendapatkan pengenceran 10-2. Lakukan hal yang
sama untuk membuat pengenceran 10-3.
5. Masukkan sebanyak 1 ml suspensi dari setiap pengenceran ke dalam cawan petri.
5. Tambahkan 15-20 ml Potato Dextrose Agar (PDA) yang sudah hangat-hangat kuku
sekitar 45°C pada masing-masing cawan yang sudah terisi suspensi.
6. Homogenkan suspensi dan media dengan menggerakkan cawan petri mengikuti pola
angka “0” atau angka “8”. Tunggu hingga media mengeras. Tutup cawan petri
menggunakan kertas payung dan beri label. 33
7. Beri label, Inkubasikan pada temperature 25◦C selama 5 hari.
8. Keluarkan cawan hasil inkubasi, lakukan perhitungan koloni menggunakan Colony
Counter.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


9. Interpretasikan hasil perhitungan dengan menggunakan rumus:

Keterangan:
N = Jumlah koloni / ml atau mg sampel (CFU/ml atau CFU/mg)
C = Koloni di cawan petri yang terhitung
n1 = Jumlah cawan petri pada pengenceran 1
n2 = Jumlah cawan petri pada pengenceran 2
d = Pengenceran yang dimasukkan sebagai n1 → 10-2

F. Hasil Praktikum

34

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


DAFTAR PUSTAKA

1. Hausman GJ. Techniques for studying adipocytes. Biotech Histochem.


1981;56(3):149–54.
2. Dascanio JJ. Bacterial Culture. Equine Reprod Proced. 2021;519–20.
3. Mikrobiology F. Objectives : Principles : :1–23.
4. UK SMIs. UK Standards for Microbiology Investigations Inoculation of culture
media for bacteriology. Public Heal Engl [Internet]. 2017;(2):1–22. Tersedia
pada:
https://assets.publishing.service.gov.uk/government/uploads/system/uploads/a
ttachment_data/file/583859/Q_5i2.pdf
5. Willis C, Nye K, Aird H, Lamph D, Fox A. Examining food, water and
environmental samples from healthcare environments - Microbiological
Guidelines. 2013;19–25. Tersedia pada:
https://assets.publishing.service.gov.uk/government/uploads/system/
uploads/attachment_data/file/865369/Hospital_F_W_E_Microbiology_Guidelin
es_Issue_3_February_2020__1_.pdf%0Ahttp://www.gov.uk/phe
6. Kumar D. Sampling for. 2021;(11014).
7. Central C. How to collect a water sample for microbiology examination 1. US
Geol Surv [Internet]. 2020;Handbooks(book 9):11–2. Tersedia pada:
http://water.usgs.gov/owq/FieldManual/chapter4/pdf/Chap4_v2.pdf
8. NFI-PTM. Microbiological Analysis NFI-PTM 01-2019: Total Plate Count
(CFU/g) in Freeze Dried Chicken. Profic Test. 2019;01(January).
9. Nelly Puspandari AI. Di AS, Produsen Tarik Susu ber-Sakazakii. Yayasan
Lemb Konsum Indones [Internet]. 2011;5(2):106–12. Tersedia pada:
http://ylki.or.id/2011/06/di-as-produsen-tarik-susu-ber-sakazakii/
10. Anggraini RD. Hubungan Higiene Sanitasi Penjamah Makanan Dengan
Jumlah Bakteri Pada Minuman Nira Aren Di Mojokerto Sebagai Sumber
Belajar Biologi. Skripsi Univ Muhammadiyah Malang. 2019;2:1–51.
11. Maturin, Larry; Peeler JT. BAM Chapter 3: Aerobic Plate Count | FDA. FDA
Gov [Internet]. 2020;3(January 2001):1–11. Tersedia pada:
https://www.fda.gov/food/laboratory-methods-food/bam-chapter-3-aerobic-
plate-count
12. Ehuwa O, Jaiswal AK, Jaiswal S. Salmonella, food safety and food handling
practices. Foods. 2021;10(5):1–16.
13. MULYA RR. PEMERIKSAAN BAKTERI Escherichia coli DAN BAKTERI
Salmonella typhi PADA MINUMAN ES CINCAU DI KOTA MEDAN. 2019. 1–54
hal.
35
14. HACH. MEL MPN Total Coliform Laboratory Procedures Manual. Prosedure
Manual. 2018.
15. Andrianary M, Antoine P. Analisa Bakteri Coliform dengan Metode Most

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Probable Number pada Air Minum Isi Ulang di Jalan Purwosari. Vol. 2. Medan:
Politeknik Kesehatan Medan; 2019. 89 hal.
16. Mursalin, Syahidah. Analysis of Most Probable Number (mpn) of Coliform
Bacteria and Fecal Coli on Coconut Ice Sold in Makassar. Int J Sci Basic Appl
Res. 2017;36(7):101–7.
17. Sunarti RN. Uji Kualitas Air Sumur Dengan Menggunakan Metode MPN (Most
Probable Numbers). Biolimi J Pendidik. 2015;1(1):30–4.
18. Youssry MA, Radwan AM, Gebreel MA, Patel TA. Prevalence of maternal
anemia in pregnancy: the effect of maternal hemoglobin level on pregnancy
and neonatal outcome. Open J Obstet Gynecol. 2018;08(07):676–87.
19. Sandar S, Phyo M, Yu SS, Saing KM. Bacteriological Examination of Bottled
Drinking Water by MPN Method Bacteriological Examination of Bottled
Drinking Water by MPN Method. Biomed Serv. 2019;6221(August):227–32.
20. Panchangam SC. ENGINEERING & SCIENCE FOCUS :: AITK A monthly
academic bulletin Article : Eng Sci Focus AITK. 2015;(September):1–4.
21. Amallia HT. Monitoring Number Of Colifom and Escherichia Coli on Drinking
Water Refill as Pollution Bioindicator. J Biota. 2020;6(1):30–6.
22. Sartika RAD, Indrawani YM, Sudiarti T. Pada Hasil Olahan Hewan Sapi
Dalam Proses Produksinya. 2005;9(1):23–8.
23. Rizki Z, Mudatsir, Samingan. Perbandingan Metode Tabung Ganda Dan
Membran Filter Terhadap Kandungan Escherichia Coli Pada Air Minum Isi
Ulang. J Kedokt Syiah Kuala. 2013;13(1):6–12.
24. Gutiérrez D, Delgado S, Vázquez-Sánchez D, Martínez B, Cabo ML,
Rodríguez A, et al. Incidence of staphylococcus aureus and analysis of
associated bacterial communities on food industry surfaces. Appl Environ
Microbiol. 2012;78(24):8547–54.
25. Alifia M. Gambaran Bakteri Staphylococcus Aureus pada Handphone
Mahasiswa: Sistematic Review. Vol. 7. Medan: Politeknik Kesehatan Medan;
2021. 6 hal.
26. Rahmawati R, Apriliana E, Agus A. Identifikasi Staphylococcus aureus pada
Daging Ayam yang Dijual di Pasar Besar Kota Palangka Raya. Borneo J Med
Lab Technol. 2019;1(1):13–6.
27. Harris LG, Foster SJ, Richards RG, Lambert P, Stickler D, Eley A. An
introduction to Staphylococcus aureus, and techniques for identifyingand
quantifying S. aureus adhesins in relation to adhesion to biomaterials:Review.
Eur Cells Mater. 2002;4:39–60.
28. Valerie Tournas; Michael E.Stack PBMHAKRB. BAM Chapter 18: Yeasts,
Molds and Mycotoxins. Bacteriol Anal Man [Internet]. 2022;18(September):1– 36
14. Tersedia pada: https://www.fda.gov/food/laboratory-methods-food/bam-
chapter-18-yeasts-molds-and-mycotoxins
29. de Freitas J, Pereira Neto LM, da Silva TIB, de Oliveira TFL, da Rocha JHL,

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Souza MD, et al. Counting and identification of molds and yeasts in dry salted
shrimp commercialized in Rio Branco, Acre, Brazil. Food Sci Technol.
2021;41(June):284–9.
30. Monita K, Sari AN, Nurhayati. Pemeriksaan Angka Kuman , Kapang / Khamir
dan Identifikasi Bakteri Patogen Pada Jamu Beras Kencur di Pasar Tradisional
Kota Surakarta. Indones J Med Sci. 2021;8(2):142–6.

37

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


LAMPIRAN
Tugas Pendahuluan

Tugas Pendahuluan praktikum mikrobiologi yang harus dikumpulkan sebelum


praktikum adalah membuat Draft Laporan Praktikum dengan isi sebagai berikut.
1. Latar Belakang (lihat poin yang diperlukan pada tabel 11.1)
2. Tujuan Praktikum (diambil dari modul praktikum)
3. Landasan Teori (lihat poin yang diperlukan pada tabel 11.1)
4. Alat (diambil dari modul praktikum)
5. Bahan (diambil dari modul praktikum)
6. Prosedur Kerja (diambil dari modul praktikum)

Tabel 11.1 Konten Latar Belakang dan Landasan Teori pada Tugas Pendahuluan

Materi Konten Latar Belakang Konten Landasan Teori


• Pentingnya pemeriksaan parameter • Definisi Laboratorium Mikrobiologi.
mikrobiologi lingkungan. • Kategori peralatan yang ada di
1. • Pentingnya mengetahui peralatan Laboratorium Mikrobiologi.
laboratorium sebelum praktikum. • Contoh peralatan pada masing-
masing kategori dan fungsinya.
• Pentingnya disinfeksi dan sterilisasi • Definisi Disinfeksi
dalam praktikum laboratorium. • Definisi Sterilisasi
2. • Dampak negatif jika disinfeksi dan • Fungsi Disinfeksi dan Sterilisasi
sterilisasi tidak dilakukan di • Macam-Macam Teknik Disinfeksi dan
laboratorium. Sterilisasi
• Pentingnya pembiakan mikroba dalam • Definisi Pembiakan Mikroorganisme
pemeriksaan parameter mikrobiologi. • Fungsi Pembiakan Mikroorganisme
• Pentingnya memilih media yang tepat • Jenis Media yang digunakan dalam
3.
untuk pembiakan mikroba. pembiakan mikroorganisme
• Berbagai teknik penanaman
mikroorganisme pada media.
• Akibat dari kesalahan prosedur • Definisi sampling untuk pemeriksaan
sampling dalam pemeriksaan parameter mikrobiologi.
4. mikrobiologi • Prinsip pengambilan sampel pada 38
• Pentingnya metode sampling yang makanan dan minuman, air, dan usap
tepat dalam praktikum mikrobiologi. alat.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


• Label yang perlu dicantumkan pada
pengambilan sampel untuk
pemeriksaan mikrobiologi.
• Kasus penyakit yang ditimbulkan • Definisi ALT
tingginya ALT. • Penyakit yang ditimbulkan oleh ALT
5. • Pentingnya pemeriksaan ALT yang melebihi standar
• Berbagai Metode Pemeriksaan ALT
• Prinsip Pemeriksaan ALT.
• Kasus penyakit yang ditimbulkan • Definisi Salmonella sp.
tingginya Salmonella sp. • Penyakit yang ditimbulkan oleh
• Pentingnya pemeriksaan Salmonella Salmonella sp.yang melebihi standar
6.
sp. • Berbagai Metode Pemeriksaan
Salmonella sp.
• Prinsip Pemeriksaan Salmonella sp..
• Kasus penyakit yang ditimbulkan • Definisi MPN Coliform
tingginya Coliform. • Penyakit yang ditimbulkan oleh
• Pentingnya pemeriksaan Coliform Coliform yang melebihi standar
7.
• Berbagai Metode Pemeriksaan
Coliform
• Prinsip Pemeriksaan MPN Coliform.
• Kasus penyakit yang ditimbulkan • Definisi MPN e.Coli
tingginya E.Coli. • Penyakit yang ditimbulkan oleh E.Coli
8. • Pentingnya pemeriksaan E.Coli yang melebihi standar
• Berbagai Metode Pemeriksaan E.Coli
• Prinsip Pemeriksaan MPN E.Coli.
• Kasus penyakit yang ditimbulkan • Definisi Staphylococcus Aureus
tingginya Staphylococcus Aureus. • Penyakit yang ditimbulkan oleh
• Pentingnya pemeriksaan Staphylococcus Aureus yang melebihi
Staphylococcus Aureus standar
9.
• Berbagai Metode Pemeriksaan
Staphylococcus Aureus.
• Prinsip Pemeriksaan Staphylococcus
Aureus. 39
• Kasus penyakit yang ditimbulkan • Definisi kapang
10.
tingginya kapang dan khamir. • Definisi khamir

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


• Pentingnya pemeriksaan kapang dan • Peran kapang dan khamir dalam
khamir. aktivitas sehari-hari.
• Penyakit yang ditimbulkan oleh
kapang dan khamir yang melebihi
standar
• Berbagai Metode Pemeriksaan
kapang dan khamir.
• Prinsip Pemeriksaan kapang dan
khamir.

40

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


KONTRAK PENILAIAN PRAKTIKUM

A. KRITERIA PENILAIAN
Bobot penilaian praktikum matakuliah Mikrobiologi adalah 35% dari nilai total bobot
penilaian pada matakuliah Mikrobiologi. Mahasiswa harus aktif (hadir) dalam
pelaksanaan praktikum di laboratorium mikrobiologi (100%) sebagai bukti adalah daftar
hadir praktikan. Adapun yang menjadi patokan penilaian dalam praktikum adalah:
1. Kedisiplinan mengumpulkan tugas pendahuluan (15%)
2. Kedisiplinan dan ketepatan melakukan responsi (post-test) (15%)
3. Ketepatan penyelesaian laporan praktikum (35%)
4. Ketuntasan Ujian Akhir Praktikum (35%)

B. SANKSI-SANKSI
Sanksi diberikan kepada mahasiswa berupa pembatalan tugas yang berakibat tidak
lulusnya peserta apabila peserta melakukan:
a. Melanggar kontrak praktikum.
b. Melanggar tata tertib laboratotium.
c. Tidak aktif (hadir) selama kegiatan praktikum.
d. Melakukan duplikasi laporan.

C. KONTRAK PRAKTIKUM
Praktikum pada pemeriksaan mikrobiologi bersifat wajib dilakukan bagi setiap
mahasiswa(i) peserta mata kuliah Mikrobiologi. Praktikum dilakukan secara
berkelompok, dengan penyusunan tugas pendahuluan (lihat Borang 1), responsi (pre
dan/atau post-test) dan laporan dilakukan secara perorangan (lihat borang 2). Setiap
mahasiswa(i) yang akan memasuki ruang laboratorium wajib membawa peralatan yang
dibutuhkan dan mengisi daftar hadir (lihat borang 4 Kartu Praktikum)

D. KARTU MONITORING
Kartu monitoring digunakan sebagai lembar monitoring dan evaluasi selama
pelaksanaan praktikum, penyusunan dan pengumpulan laporan agar sesuai dengan
tujuan praktik yang diharapkan. Kartu Monitoring terdiri dari Kartu Praktikum dan
Lembar Bimbingan dapat dilihat pada format yang telah tersedia (Lihat Borang 3).
41
E. PENILAIAN LAPORAN PRAKTIKUM
Penilaian laporan praktikum terdiri dari serangkaian kegiatan dimulai dari
bimbingan/konsultasi selama penyusunan laporan hingga pengumpulan laporan.

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


1. Konsultasi bimbingan laporan praktikum dilakukan sebanyak minimal 1 kali dan
maksimal 3kali. Jika tidak melakukan minimal 1 kali maka prosentase nilai
berkurang sebesar 10 - 100 %. Namun jika laporan dianggap sudah benar dan
tepat pada bimbingan pertama maka tidak ada pengurangan prosentase nilai.
2. Jika waktu pengumpulan laporan tidak sesuai batas waktu yang telah ditentukan
maka praktikan akan mendapat pengurangan nilai 10% hingga 100% untuk laporan
praktikum yang disusun.
i. Kurang dari 24 jam berkurang 10%
ii. Lewat sehari berkurang 20%
iii. Lewat dua hari berkurang 40%
iv. Lewat tiga hari sampai dengan satu minggu berkurang 60%
v. Lebih dari satu minggu berkurang 80%
vi. Tidak mengumpulkan laporan hingga jadwal penginputan nilai berkurang
100%.

42

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


BORANG 1
FORMAT TUGAS PENDAHULUAN

43

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Tabel Rencana Penugasan Terstruktur Tugas Pendahuluan

Program Studi Sarjana Terapan Sanitasi Lingkungan


Jurusan Sanitasi Lingkungan Politeknik Kesehatan
Kemenkes Gorontalo
RENCANA PENUGASAN TERSTRUKTUR
MATA KULIAH Mikrobiologi
KODE KL.B.1.01 SKS 2 SEMESTER 1
DOSEN PENGAMPU Marhamah Yudin, SKM., M.Kes
Yazmin Armin Abdullah, SKM, M.Kes
PRANATA Atyaf Umi Faizah, S.Tr.Kes
LABORATORIUM
PENDIDIKAN (PLP)
BENTUK TUGAS WAKTU PENGERJAAN TUGAS
Individu 1-3 hari (disesuaikan jadwal praktikum)
JUDUL TUGAS
Tugas Pendahuluan: Menyusun Draft Laporan Praktikum
CAPAIAN PEMBELAJARAN MATA KULIAH
CPMK 3. Mahasiswa mampu memahami dan melakukan cara desinfeksi, cara
pengambilan, dan pemeriksaan secara sistematis, logis, mandiri, dan
bertanggung jawab.

DESKRIPSI TUGAS
Susunlah Draft Laporan Praktikum berdasarkan topik yang telah ditentukan.
METODE PENGERJAAN TUGAS
A. Mahasiswa menyusun tugas pendahuluan berupa draft laporan praktikum sebanyak
topik/materi praktikum, yaitu:
1. Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum
2. Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan
3. Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan
4. Sampling Mikrobiologi
5. Pemeriksaan Angka Lempeng Total
6. Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp.
7. Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform
8. Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia coli
9. Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus aureus
10. Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir
B. Tugas pendahuluan disusun menggunakan kertas A4, jenis huruf Arial, ukuran huruf
12, ukuran margin (atas 4 cm, bawah 3 cm, kiri 4 cm, kanan 3 cm), spasi 1.5, rata
kiri-kanan (justify).
C. Sistematika format penyusunan draft laporan praktikum/tugas pendahuluan terdiri
atas: (lihat Borang 1)
- Sampul
- Pembahasan yang terdiri dari:
1. Latar Belakang (lihat poin yang diperlukan pada tabel 11.1 pada modul
ptaktikum)
2. Tujuan Praktikum (diambil dari modul praktikum)
3. Landasan Teori (lihat poin yang diperlukan pada tabel 11.1 pada modul
ptaktikum)
4. Alat (diambil dari modul praktikum)
5. Bahan (diambil dari modul praktikum) 44
6. Prosedur Kerja (diambil dari modul praktikum)
- Daftar Pustaka
Gunakan referensi 10 tahun terakhir (tahun 2012 sampai dengan 2022)
BENTUK DAN FORMAT LUARAN

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


a. Objek Garapan: Penyusunan tugas pendahuluan mencakup 10 topik/materi (lihat
bagian metode pengerjaan tugas poin A)
b. Bentuk Luaran :
Tugas Pendahuluan Praktikum (draft laporan praktikum) dikumpulkan dalam bentuk
softcopy file dengan format ekstensi (*.docx), sistematika nama file
TP1_Nama_NIM_KelasA/B_Nama Lengkap.docx yang diunggah pada Link:
https://bit.ly/Upload-TPP_Mikling
Contoh:
TP1_7513351220000_Kelas A_Jonathan (Untuk Tugas Pendahuluan Topik 1)
TP2_7513351220000_Kelas A_Jonathan (Untuk Tugas Pendahuluan Topik 2)
…….. Dst.

INDIKATOR, KRETERIA DAN BOBOT PENILAIAN


Indikator dan kriteria penilaian sesuai dengan rubrik penilaian (lihat Borang 4);
Bobot penilaian tugas pendahuluan 1-10 adalah 15% dari 100% penilaian praktikum.
JADWAL PELAKSANAAN
16 September 2022 24 September 2022
LAIN-LAIN
Mahasiswa tidak diperkenankan melakukan duplikasi (plagiat) tugas pendahuluan.
DAFTAR RUJUKAN
Modul Praktikum Mikrobiologi

45

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Margin atas 4 cm

TUGAS PENDAHULUAN I
“PENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRAKTIKUM”

Menyesuaikan topik/materi

Logo Poltekkes
Kemenkes
Gorontalo
ukuran 5 × 5 cm

Margin Margin
kiri 4 cm kanan
3 cm

DISUSUN OLEH:
NAMA MAHASISWA
NIM
KELOMPOK 1/2/3 Pilih salah satu
KELAS A/B

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA


POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES GORONTALO
JURUSAN SANITASI LINGKUNGAN
PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN SANITASI LINGKUNGAN
TA. 2022/2023 46

“PENGENALAN ALAT DAN BAHAN PRAKTIKUM”

Margin bawah 3 cm Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


A. Latar Belakang
Lengkapi sesuai konten latar belakang topik/materi 1.

B. Tujuan Praktikum
Isi sesuai dengan tujuan praktikum topik/materi 1.

C. Landasan Teori
Lengkapi sesuai konten latar belakang topik/materi 1.

D. Alat
Isi sesuai dengan alat yang digunakan pada praktikum topik/materi 1.

E. Bahan
Isi sesuai dengan bahan yang digunakan pada praktikum topik/materi 1.

F. Prosedur Kerja
Isi sesuai dengan prosedur kerja praktikum topik/materi 1.

G. Daftar Pustaka
- Isi sesuai dengan referensi/artikel yang digunakan dalam penyusunan
latar belakang dan landasan teori pada praktikum topik/materi 1 (10
tahun terakhir 2012-2022).
- Daftar Pustaka disusun secara sistematis berdasarkan urutan abjad
(A-Z).
- Tidak diperbolehkan menggunakan referensi bersumber dari
WordPress dan Blogspot.

Catatan:
Judul Menyesuaikan topik/materi praktikum

47

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


BORANG 2
FORMAT LAPORAN PRAKTIKUM

48

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Tabel Rencana Penugasan Terstruktur Penyusunan Laporan Praktikum

Program Studi Sarjana Terapan Sanitasi Lingkungan


Jurusan Sanitasi Lingkungan Politeknik Kesehatan
Kemenkes Gorontalo
RENCANA PENUGASAN TERSTRUKTUR
MATA KULIAH Mikrobiologi
KODE KL.B.1.01 SKS 2 SEMESTER 1
DOSEN PENGAMPU Marhamah Yudin, SKM., M.Kes
Yazmin Armin Abdullah, SKM, M.Kes
PRANATA Atyaf Umi Faizah, S.Tr.Kes
LABORATORIUM
PENDIDIKAN (PLP)
BENTUK TUGAS WAKTU PENGERJAAN TUGAS
Individu 1-3 hari (disesuaikan jadwal praktikum)
JUDUL TUGAS
Laporan: Menyusun Laporan Praktikum Mikrobiologi
CAPAIAN PEMBELAJARAN MATA KULIAH
CPMK 3. Mahasiswa mampu memahami dan melakukan cara desinfeksi, cara
pengambilan, dan pemeriksaan secara sistematis, logis, mandiri, dan
bertanggung jawab.

DESKRIPSI TUGAS
Susunlah Laporan Praktikum berdasarkan hasil kegiatan praktikum di laboratorium
mikrobiologi.
METODE PENGERJAAN TUGAS
A. Mahasiswa menyusun laporan praktikum menggunakan kertas A4, jenis huruf Arial,
ukuran huruf 12, ukuran margin (atas 4 cm, bawah 3 cm, kiri 4 cm, kanan 3 cm),
spasi 1.5.
B. Sistematika format penyusunan laporan praktikum harus memuat (lihat Borang 2):
1. Sampul
2. Lembar Pengesahan
3. Kata Pengantar
4. Daftar Isi
5. Praktikum 1 “Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum”
6. Praktikum 2 “Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan”
7. Praktikum 3 “Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan”
8. Praktikum 4 “Sampling Mikrobiologi”
9. Praktikum 5 “Pemeriksaan Angka Lempeng Total”
10. Praktikum 6 “Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp.”
11. Praktikum 7 “Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform”
12. Praktikum 8 “Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia Coli”
13. Praktikum 9 “Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus Aureus”
14. Praktikum 10 “Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir”
C. Penulisan nomor halaman pada metode pengerjaan tugas poin B nomor 1-4
menggunakan format i, ii, iii, … dst, sedangkan untuk nomor 5-14 menggunakan
format angka 1, 2, 3, …. dst.

49

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


BENTUK DAN FORMAT LUARAN
A.Objek Garapan: Penyusunan laporan mencakup 10 topik/materi praktikum yakni:
1. Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum
2. Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan
3. Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi Lingkungan
4. Sampling Mikrobiologi
5. Pemeriksaan Angka Lempeng Total
6. Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp.
7. Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform
8. Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia coli
9. Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus aureus
10. Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir
B.Bentuk Luaran :
Laporan Praktikum dikumpulkan dalam bentuk:
1) Softcopy file dengan format ekstensi (*.docx), sistematika nama file LPMIKRO
_NIM_KelasA/B_Nama Lengkap.docx yang diunggah pada Link:
https://bit.ly/Upload-LP_Mikling
Contoh: LPMIKRO _7513351220000_Kelas A_Jonathan
2) Hardcopy file / print out / dicetak pada kertas A4, dijilid biasa, dengan cover (depan:
plastik; belakang: kertas) berwarna hijau muda
INDIKATOR, KRITERIA DAN BOBOT PENILAIAN
Indikator dan kriteria penilaian sesuai dengan rubrik penilaian (lihat Borang 4);
Bobot penilaian laporan praktikum adalah 35% dari 100% penilaian praktikum.
JADWAL PELAKSANAAN
Akan diumumkan
LAIN-LAIN
Mahasiswa dihimbau untuk memasukkan laporan praktikum sesuai jadwal yang telah
ditentukan
DAFTAR RUJUKAN
Modul Praktikum Mikrobiologi.

50

Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


Margin atas 4 cm

LAPORAN PRAKTIKUM
MATA KULIAH MIKROBIOLOGI

Logo Poltekkes
Kemenkes
Gorontalo
ukuran 5 × 5 cm

Margin Margin
Margin
kiri 4 cm Margin
kanan
kiri 4 cm kanan
3 cm
3 cm

DISUSUN OLEH:
NAMA MAHASISWA
NIM
KELOMPOK 1/2/3 Pilih salah satu
KELAS A/B

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA


POLITEKNIK KESEHATAN KEMENKES GORONTALO
JURUSAN SANITASI LINGKUNGAN
PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN SANITASI LINGKUNGAN
TA. 2022/2023 51

Margin bawah 3 cm Modul Praktikum Mikrobiologi Lingkungan |


LEMBAR PENGESAHAN
LAPORAN PRAKTIKUM
MATA KULIAH MIKROBIOLOGI

DISUSUN OLEH:

NAMA MAHASISWA
KELOMPOK 1/2/3 Pilih salah satu
KELAS A/B

Gorontalo, Tanggal Bulan Tahun

Mengetahui,
Dosen Pembimbing Instruktur

Nama Lengkap beserta Gelar Nama Lengkap beserta Gelar


NIP. ………………….. NIP. …………………..

Menyetujui,
Koordinator Mata Kuliah

Nama Lengkap beserta Gelar


NIP. …………………..

ii
KATA PENGANTAR

……………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………….

Gorontalo, Bulan 2022


Penyusun

Nama Mahasiswa
NIM.

iii
DAFTAR ISI

Halaman
SAMPUL .................................................................................................. i
LEMBAR PENGESAHAN ........................................................................ i
KATA PENGANTAR ................................................................................ i
DAFTAR ISI ............................................................................................. i
Praktikum 1 Pengenalan Alat dan Bahan Praktikum ................................ 1
Praktikum 2 Disinfeksi dan Sterilisasi Peralatan ...................................... 1
Praktikum 3 Pembuatan Media dalam Praktikum Mikrobiologi
Lingkungan ........................................................................ 1
Praktikum 4 Sampling Mikrobiologi .......................................................... 1
Praktikum 5 Pemeriksaan Angka Lempeng Total..................................... 1
Praktikum 6 Pemeriksaan Bakteri Salmonella sp. .................................... 1
Praktikum 7 Pemeriksaan MPN Bakteri Coliform ..................................... 1
Praktikum 8 Pemeriksaan MPN Bakteri Eschericia coli ............................ 1
Praktikum 9 Pemeriksaan Bakteri Staphylococcus aureus....................... 1
Praktikum 10 Pemeriksaan Jamur Kapang & Khamir ............................... 1
KARTU MONITORING ............................................................................ 1

iv
PRAKTIKUM 1
“PENGENALAN ALAT DAN
BAHAN PRAKTIKUM”

Catatan:
Khusus lembar ini menggunakan kertas berwarna hijau muda

1
BAB I
PENDAHULUAN

A. Latar Belakang
…………… (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)

B. Tujuan Praktikum
………….. (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)

2
BAB II
LANDASAN TEORI

………………………………………………………………………………….…
………………………………………………………………………………
(dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan).

3
BAB III
METODE PRAKTIKUM

A. Alat
………. (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)

B. Bahan
………. (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)

C. Prosedur Kerja
………. (dapat menggunakan hasil kerja pada tugas pendahuluan)

4
BAB IV
HASIL DAN PEMBAHASAN

A. Hasil
………. (Disesuaikan berdasarkan hasil praktikum)

B. Pembahasan
………. (menguraikan hasil praktikum yang dibandingkan dengan teori/hasil
penelitian-penelitian sebelumnya).

5
BAB V
PENUTUP

A. Kesimpulan
……….

B. Saran
……..

6
DAFTAR PUSTAKA

Disusun berdasarkan urutan abjad A-Z


Contoh:
Dwidjoseputro, D. 2003. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Jakarta. Djambatan.
Jawetz, Melnick, Adelberg’s. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Jakarta. Salemba
Medika.
Lim, D. 1998. Microbiology 2nd Edition. United of States America. McGraw Hill.
Pelczar, M., E.C.S. Chan. 2005. Dasar-Dasar Mikrobiologi. Penerbit Universitas
Indonesia. Jakarta.

7
DOKUMENTASI

GAMBAR 1 GAMBAR 2

Keterangan gambar Keterangan gambar

GAMBAR 3 GAMBAR 4

Keterangan gambar Keterangan gambar

GAMBAR 5 GAMBAR 6

Keterangan gambar Keterangan gambar

GAMBAR 7 GAMBAR 8

Keterangan gambar Keterangan gambar


BORANG 3
FORMAT KARTU MONITORING
KARTU PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI SEMESTER I TA. 2022/2023
PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN SANITASI LINGKUNGAN
JURUSAN SANITASI LINGKUNGAN POLTEKKES KEMENKES GORONTALO

Nama :
NIM :
Kelas :

A. Daftar Hadir dan Pelaksanaan Praktikum Di Laboratorium

Jadwal Praktikum
No Aspek Penilaian
16/9/22 19/9/22 20/9/22 21/9/22 22/9/22 23/9/22 24/9/22
1 Kehadiran

2 Tugas Pendahuluan (PT)


TP 1
TP 2
TP 3
TP 4
TP 5
TP 6
TP 7
TP 8
TP 9
TP 10
3 Responsi (Post-Test)/PT
PT 1
PT 2
PT 3
PT 4
PT 5
PT 6
PT 7
PT 8
PT 9
PT 10
Masing-masing kotak diparaf oleh PLP/Instruktur/dosen pembimbing di laboratorium
LEMBAR BIMBINGAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI SEMESTER I TA. 2022/2023
PROGRAM STUDI SARJANA TERAPAN SANITASI LINGKUNGAN
JURUSAN SANITASI LINGKUNGAN POLTEKKES KEMENKES GORONTALO

Nama :
NIM :
Kelas :

HARI /
TANGGAPAN & ARAHAN PARAF KET
NO TANGGAL
1

Gorontalo, .......................2022
Mengetahui,
Dosen Pembimbing Instruktur

(…………………………) (…………………………)
NIP:................................. NIP:...............................

Menyetujui,
Koordinator MK

(………………………………..)
NIP.
BORANG 4
INDIKATOR DAN KRITERIA
PENILAIAN
INDIKATOR DAN KRITERIA PENILAIAN TUGAS PENDAHULUAN

Indikator : Ketepatan menjelaskan cara disinfeksi, cara pengambilan, dan pemeriksaan mikrobiologi secara sistematis, logis,
mandiri, dan bertanggung jawab.
A. Aspek Kognitif (Ko) dan Psikomotor (Ps)
Skala Kriteria Penilaian
No Aspek / Dimensi Yang Dinilai Sangat Kurang (E) Kurang (D) Cukup (C) Baik (B) Sangat Baik (A)
(Skor <20) (21 – 40) (41 – 60) (61 – 80) (Skor ≥ 81)
1 Kesesuaian penulisan dengan Isi latar belakang Isi latar Isi latar belakang Isi latar belakang Isi disajikan
konten topik/materi (Ko) dan landasan teori belakang dan dan landasan dan landasan dengan fakta latar
disajikan tidak landasan teori teori disajikan teori disajikan belakang yang
sesuai dengan disajikan kurang secara umum sesuai dan akurat dan teori
konten sesuai dengan sesuai namun lengkap yang telah
konten belum lengkap dianalisis
sesuai konten
2 Kesesuaian pemilihan referensi Referensi yang Referensi yang Referensi yang Referensi yang Referensi yang
(Ko) digunakan tidak digunakan digunakan digunakan digunakan
relevan dan tidak kurang relevan relevan dan tidak relevan dan relevan, mutakhir,
mutakhir (<10 tahun dan tidak mutakhir mutakhir dan berasal dari
terakhir) mutakhir sumber yang
terpercaya
3 Kemampuan penulisan (Ps) Isinya tidak logis Isinya kurang Isi secara Isi disusun Isi disusun secara
atau terlalu umum logis, kurang umum logis, secara logis, logis, runtut dan
atau menyesatkan runtut, dan tetapi runtut dan saling saling
kurang saling tidak/kurang berhubungan berhubungan
berhubungan runtut dan saling serta sesuai
berhubungan dengan Pedoman
Umum Ejaan
Skala Kriteria Penilaian
No Aspek / Dimensi Yang Dinilai Sangat Kurang (E) Kurang (D) Cukup (C) Baik (B) Sangat Baik (A)
(Skor <20) (21 – 40) (41 – 60) (61 – 80) (Skor ≥ 81)
Bahasa Indonesia
(PUEBI)

4 Kesesuaian tata/sistematika Tugas disusun tidak Tugas disusun Tugas disusun Tugas disusun Tugas disusun
penulisan (Ps) sesuai dengan kurang sesuai sesuai dengan sesuai dengan sesuai dengan
sistematika dengan sistematika sistematika sistematika
penulisan sistematika penulisan, penulisan, penulisan,
penulisan (50%) namun tidak kurang lengkap lengkap dan
lengkap (10%) (dengan tepat, tanpa ada
kesalahan minor kesalahan
5%)
TOTAL
Nilai Keseluruhan = (total kolom (A)
+ total kolom (B) + total kolom (C) +
total kolom (D) + total kolom (E))
Nilai Keseluruhan
XA = ×100
400
B. Sikap (S)

Skala
No Aspek yang Dinilai Nilai
Kriteria Skor
Tugas dikumpulkan tepat
sebelum waktu yang telah 100
ditentukan (%)
Kedisiplinan/
1 ketepatan waktu
Tugas pendahuluan tidak
pengumpulan tugas
dikumpulkan/ tidak diunggah 0
di drive
Tugas dikerjakan secara
Kemandirian/ mandiri tanpa duplikasi ≥ 71
2 Kejujuran
(plagiarism) 0 – 70
Ditemukan duplikasi tugas

TOTAL
NILAI MAHASISWA (XB) = TOTAL / 2

C. Nilai Akhir Tugas Pendahuluan Topik n (TP)

(Nilai Mhsswa (Ko dan Ps) XA + Nilai Mhssw (S) XB)


TP 𝐧=
2

D. Rata-rata Tugas Pendahuluan

TP1 +TP2 +TP3 +TP4 +TP5 + TP6 + TP7+TP8 + TP9 +TP10


TP̅̅̅̅̅
(X) =
10
INDIKATOR DAN KRITERIA PENILAIAN POST TEST
Indikator : Ketepatan menjelaskan cara disinfeksi, cara pengambilan, dan pemeriksaan mikrobiologi secara sistematis, logis, mandiri, dan
bertanggung jawab.
Skala Kriteria Penilaian
Aspek / Dimensi Yang Sangat Kurang (E) Kurang (D) Cukup (C) Baik (B) Sangat Baik (A)
No.
Dinilai (Skor <20) (21 – 40) (41 – 60) (61 – 80) (Skor ≥ 81)
1 Kemampuan komunikasi (Ps) Menyampaikan Konsep materi Konsep materi Konsep materi Konsep materi
konsep materi secara disampaikan disampaikan secara disampaikan disampaikan
bertele-tele (tidak kurang efektif efektif namun secara efektif secara efektif dan
efektif), dan artikulasi dan artikulasi artikulasi kurang jelas dan artikulasi artikulasi sangat
tidak jelas kurang jelas jelas jelas
2 Penguasan Materi Tidak mampu Sebagian besar Konsep materi Konsep materi Konsep materi
(Ko) menjelaskan konsep konsep materi dijelaskan dengan dijelaskan dijelaskan secara
materi dengan benar yang dijelaskan beberapa kesalahan dengan benar dan tepat,
dan tepat kurang tepat yang tidak signifikan kesalahan tanpa ada
(50%) (10%) minor (5%) kesalahan
TOTAL
Nilai Keseluruhan = (total kolom (A)
+ total kolom (B) + total kolom (C) +
total kolom (D) + total kolom (E))

NK
̅̅̅̅=
PT(X) ×100
200

RATA-RATA POST TEST

PT1 +PT2 +PT3 +PT4 +PT5 + PT6 + PT7+PT8 + PT9 +PT10


PT =
10
INDIKATOR DAN KRITERIA PENILAIAN LAPORAN PRAKTIKUM

Indikator : Ketepatan menjelaskan cara disinfeksi, cara pengambilan, dan pemeriksaan mikrobiologi secara sistematis, logis, mandiri, dan
bertanggung jawab.
A. Aspek Kognitif (Ko) dan Psikomotor (Ps)
Skala Kriteria Penilaian
Sangat Kurang
No Aspek / Dimensi Yang Dinilai Kurang (D) Cukup (C) Baik (B) Sangat Baik (A)
(E)
(Skor <20) (21 – 40) (41 – 60) (61 – 80) (Skor ≥ 81)
1 Kesesuaian tata/sistematika Tugas disusun Tugas disusun Tugas disusun Tugas disusun Tugas disusun
penulisan tidak sesuai kurang sesuai sesuai dengan sesuai dengan sesuai dengan
dengan dengan sistematika sistematika sistematika
sistematika sistematika penulisan, penulisan, penulisan,
penulisan penulisan namun tidak kurang lengkap lengkap dan
(50%) lengkap (10%) (dengan tepat, tanpa ada
kesalahan kesalahan
minor 5%)
2 Kedalaman pembahasan Tidak mampu Konsep Konsep yang Konsep Konsep sangat
menjelaskan dijelaskan dijelaskan dengan jelas,
konsep dengan masih bersifat dengan kesalahan mendalam dan
benar dan tepat umum dan beberapa minor (5%) mudah
kurang kesalahan dipahami serta
mendalam yang tidak sesuai dengan
signifikan topik yang
(10%) dibahas
3 Ketepatan penarikan kesimpulan Tidak mampu Kesimpulan Kesimpulan Kesimpulan Kesimpulan
menarik yang dijelaskan dijelaskan dijelaskan
kesimpulan dijelaskan dengan dengan secara benar
dengan benar kurang tepat beberapa kesalahan dan tepat, tanpa
dan tepat (kesalahan kesalahan minor (5%) ada kesalahan
50%) yang tidak
signifikan
Skala Kriteria Penilaian
Sangat Kurang
No Aspek / Dimensi Yang Dinilai Kurang (D) Cukup (C) Baik (B) Sangat Baik (A)
(E)
(Skor <20) (21 – 40) (41 – 60) (61 – 80) (Skor ≥ 81)
(10%)
4 Ketepatan pemberian saran
TOTAL Saran yang Saran kurang Saran dengan Saran dengan Saran diuraikan
diberikan tidak tepat beberapa kesalahan secara benar
sesuai dan tidak (kesalahan kesalahan minor (5%) dan tepat, tanpa
tepat 50%) yang tidak ada kesalahan
signifikan
(10%)
Nilai Keseluruhan = (total kolom (A)
+ total kolom (B) + total kolom (C) +
total kolom (D) + total kolom (E))
Nilai Keseluruhan
XA = ×100
400
B. Sikap (S)
Skala
No Aspek yang Dinilai Nilai
Kriteria Skor
0 kali - (10-100)

1 kali (%)
90-100
1 Bimbingan / konsultasi
laporan 2 kali 80-70
3 kali 70-80

Tepat waktu 100

Kategori 1 (<24jam) 90
Kategori 2 (>1hari) 80
Kedisiplinan/ketepatan Kategori 3 (>2hari) 60
2 waktu penyelesaian
laporan Kategori 4 (3-7 hari) 40
Kategori 5 (>1minggu) 20

Kategori 6 (tidak kumpul) 0

Tugas dikerjakan secara


mandiri tanpa duplikasi ≥ 71
Kemandirian/Kejujuran
3
(plagiarism)
Ditemukan duplikasi 0 – 70
tugas
TOTAL
NILAI MAHASISWA (XB) = TOTAL / 3

E. Nilai Akhir Laporan (LA)

(Nilai Mhsswa (Ko dan Ps) XA + Nilai Mhssw (S)𝐗𝐁)


LA ̅̅̅̅
(X)=
2
NILAI AKHIR PRAKTIKUM

Nilai Mhs (Nilai Mhs) ×


No Item Penilaian Bobot (%)
(0 – 100) (Bobot%)
1 Tugas Pendahuluan (TP) 15
2 Post-test (PT) 15
3 Laporan (LA) 35
4 Ujian Akhir Praktikum (UAP) 35
Total Bobot (%) 100
Nilai akhir praktikum (∑ (Nilai Mhs) × (Bobot%))

PENILAIAN AKHIR MATA KULIAH

Nilai Mhs (Nilai Mhs) ×


No Item Penilaian Bobot (%)
(0 – 100) (Bobot%)
1 Tugas 20
2 Praktikum 35
3 UTS 10
4 UAS 35
Total Bobot (%) 100
Nilai akhir mata kuliah (∑ (Nilai Mhs) × (Bobot%))

Anda mungkin juga menyukai