Diterjemahkan dari bahasa Portugis ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Akuakultur 546 (2022) 737338

Daftar isi tersedia diSains Langsung

akuakultur

halaman utama jurnal:www.elsevier.com/locate/aquaculture

Pengosongan gastrointestinal dan pola harian aktivitas enzim

proteinolitik pada ikan nila (Oreochromis niloticus  

Camilla Gomes de OliveiraItu    , Jose Fernando López-OlmedaB, Leandro Santos Costac, Amanda
Hastenreiter dari Espirito SantoItu, Fabio Aremil Costa dos SantosItu, Ronald Kennedy LuzItu, Paula
Adriane Perez RibeiroItu
ItuUniversitas Federal Minas Gerais (UFMG), Departemen Ilmu Hewan, Sekolah Kedokteran Hewan, Laboratorium Akuakultur - Laqua, Avenida Antônio Carlos, n  
6627, CEP 31270-901 Belo Horizonte, Minas Gerais, Brasil
BDepartemen Fisiologi, Fakultas Biologi, Universitas Murcia, 30100 Murcia, Spanyol

cUniversitas Federal Viçosa (UFV), Departemen Ilmu Hewan, Av. Peter Henry Rolfs, s/n - Campus Universitário, Viçosa - MG, CEP 36570-900, Minas Gerais, Brasil

INFO ARTIKEL ABSTRAK

Kata kunci: Studi ini mengevaluasi pengosongan gastrointestinal, aktivitas enzim, dan pola ritme harian pencernaan protein di berbagai bagian saluran pencernaan ikan nila (Oreochromis niloticus  
Nila Tiga puluh enam remaja didistribusikan dalam enam tangki (masing-masing 100-L) disimpan dalam sistem air resirkulasi dan diberi makan dua kali sehari selama 30 hari. Ikan kemudian
Nutrisi diberi makan pada ZT1 h (waktu Zeitgeber  ZT) dan disampel pada enam kali: ZT1.5, ZT5, ZT9, ZT13, ZT17 dan ZT21 jam (masing-masing milik 0,5, 4, 8, 12, 16 dan 20 jam, pasca-makan).
irama sirkadian
Parameter yang dievaluasi adalah berat lambung, keberadaan makanan di lambung, perjalanan makanan di usus, aktivitas protease asam di lambung dan aktivitas trypsin dan chymotrypsin
Pengosongan
di berbagai bagian usus. Bobot perut terbesar ditemukan tepat setelah makan di ZT1,5 jam. Kehadiran makanan di lambung dan usus menunjukkan variasi yang signifikan di antara titik
gastrointestinal Omnivora
pengambilan sampel. Semua enzim menunjukkan variasi harian dalam aktivitasnya di semua bagian usus yang dianalisis, kecuali tripsin di bagian perantara. Aktivitas protease asam lebih

tinggi pada ZT5 jam, dan akrofase variasi harian terletak pada ZT06:24 jam. Aktivitas tripsin berbeda secara signifikan antara waktu pengambilan sampel di usus awal dan akhir dan akrofase

terletak masing-masing pada ZT3:35 dan ZT12:05 jam. Aktivitas chymotrypsin berbeda secara signifikan di antara waktu pengambilan sampel di semua bagian dan akrofase muncul secara

berurutan pada ZT03:45, ZT7:01 dan ZT10:30 jam, masing-masing di usus awal, tengah dan akhir. Kesimpulannya, perjalanan makanan di saluran cerna mempengaruhi hidrolisis protein dan

berkorelasi dengan aktivitas enzim proteolitik selama 20 jam. Selain itu, ada ritme dalam aktivitas protease asam, tripsin dan kimotripsin, dengan akrofase terletak melalui fase cahaya.

Aktivitas chymotrypsin berbeda secara signifikan di antara waktu pengambilan sampel di semua bagian dan akrofase muncul secara berurutan pada ZT03:45, ZT7:01 dan ZT10:30 jam,

masing-masing di usus awal, tengah dan akhir. Kesimpulannya, perjalanan makanan di saluran cerna mempengaruhi hidrolisis protein dan berkorelasi dengan aktivitas enzim proteolitik

selama 20 jam. Selain itu, ada ritme dalam aktivitas protease asam, tripsin dan kimotripsin, dengan akrofase terletak melalui fase cahaya. Aktivitas chymotrypsin berbeda secara signifikan di

antara waktu pengambilan sampel di semua bagian dan akrofase muncul secara berurutan pada ZT03:45, ZT7:01 dan ZT10:30 jam, masing-masing di usus awal, tengah dan akhir.

Kesimpulannya, perjalanan makanan di saluran cerna mempengaruhi hidrolisis protein dan berkorelasi dengan aktivitas enzim proteolitik selama 20 jam. Selain itu, ada ritme dalam aktivitas

protease asam, tripsin dan kimotripsin, dengan akrofase terletak melalui fase cahaya.

1. Perkenalan
Adaptasi terhadap perubahan lingkungan difasilitasi oleh ritme biologis
yang dimiliki organisme hidup. Variasi dalam penyinaran (terang-gelap) dan
siklus makan adalah salah satu sinkronisasi sirkadian yang paling penting
(lebih dari 24 jam) (Montoya et al., 2010a  Lazado et al., 2017  Lopez-Olmeda,
2017   Mekanisme ini memberi organisme keuntungan adaptif untuk
mengantisipasi perubahan lingkungan, mengatur waktu proses biologis
untuk terjadi pada saat-saat penting dalam siklus harian atau tahunan.
Yerushalmi dan Green, 2009  Vaze dan Sharma, 2013  Lazado et al.
2017   Ketika hewan mengalami jadwal harian ketersediaan makanan terbatas,
mereka mungkin menunjukkan jam sebelum aktivitas antisipatif makanan (FAA),
yang memungkinkan mereka untuk mengantisipasi waktu makan (Mistberger,
1994  Lazado et al., 2017   Di alam, efek ini memungkinkan ikan mengoptimalkan
proses pencernaan dan metabolismenya dengan memusatkan asupan makanan
dan airnya dalam waktu singkat, sehingga menghindari pemangsaan dan
meningkatkan pemanfaatan makanan.Strubbe dan Dijk, 2002  Vera et al., 2007  
Lopez-Olmeda, 2017  
Enzim pencernaan hadir di seluruh saluran pencernaan, dan aktivitasnya
secara langsung memengaruhi kinerja hewan (Kolkovskil et al.,

* Penulis koresponden di: Laboratory of Aquaculture, Department of Animal Science, Veterinary School, Federal University of Minas Gerais (UFMG), Av. Antônio Carlos,
6627, Belo Horizonte-MG CEP 31270-901, Brasil.
Alamat email:camilaoliveira080@gmail.com (CG Oliveira).

https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2021.737338
Diterima 23 Mei 2021; Diterima dalam bentuk revisi 27 Juli 2021; Diterima 10 Agustus 2021
Tersedia online 16 Agustus 2021
0044-8486/© 2021 Elsevier BV Semua hak dilindungi undang-undang.
CG de Oliveira dkk. Akuakultur 546 (2022) 737338

1993  Li et al., 2015   Protease asam (kebanyakan pepsin), trypsin dan Tabel 1
chymotrypsin adalah enzim proteolitik yang sangat penting dalam Komposisi makanan percobaan.
pencernaan.Moraes dan Almeida, 2014   Pepsin bertanggung jawab bahan   
atas pencernaan awal protein di lambung, karena bentuknya yang
makanan ikan 21.00
tidak aktif (pepsinogen) diaktifkan saat bersentuhan dengan asam makanan dari kacang kedelai 31.00
klorida yang ada dalam cairan lambung. Di usus, protein terus Jagung 31.50
mengalami hidrolisis melalui aksi trypsin dan chymotrypsin (Nelson dan dedak padi 5.00
Cox, 2002  Moraes dan Almeida, 2014   Produksi enzim ini tidak hanya albumin 1.60
minyak kedelai 6.60
merespon adanya makanan di usus tetapi juga menunjukkan ritme
Selulosa 1.00
harian (Lopez-Olmeda, 2017   Memang, sebagai FAA untuk perilaku, bikalsium fosfat 0,50
produksi dan pelepasan enzim pencernaan dapat menghadirkan suplemen vitaminItu 0,50
antisipasi, menunjukkan peningkatan pelepasannya sebelum makanan B HTB 0,02
0,50
sampai ke usus (Montoya et al., 2010b   Garam

Ikan nila (Oreochromis niloticus) adalah ikan air tawar yang penting secara
global karena kualitas dagingnya dan potensi produk sampingannya (Unajak et al.,
2012   Peningkatan produksi nila di seluruh dunia telah menyebabkan
peningkatan besar dalam permintaan pakan untuk spesies ini (Schulz et al., 2007   Ekstrak halus (%)
Santos et al., 2013   Tilapia adalah ikan omnivora dengan plastisitas fisiologis yang
besar, yang memungkinkannya memiliki pola makan dengan berbagai macam
bahan (Goncalves et al., 2013   Karakteristik ini memungkinkan hewan-hewan ini
untuk menggunakan karbohidrat secara efisien dan memungkinkan untuk
menggunakan protein dan energi yang berasal dari tumbuhan tanpa
mengganggu pertumbuhan (Furuya et al., 2013   Di saluran pencernaan ikan nila,
makanan disimpan dalam waktu singkat, direduksi menjadi partikel yang lebih
kecil melalui proses fisik dan kimia, lalu diserap, dengan membuang apa yang
tidak dapat digunakan. Lamanya proses ini terjadi dapat bervariasi karena
kebiasaan makan dan pola makan yang diberikan. Studi sebelumnya telah
melaporkan bahwa fisiologi pencernaan ikan nila dapat menampilkan ritme harian
meskipun, hingga saat ini, tidak ada yang diketahui tentang pengosongan
pencernaan melalui siklus 24 jam. Ekspresi mRNA dari beberapa enzim
pencernaan menyajikan ritme pada tahap larva (Espirito Santo dkk., 2020   Pada
ikan nila remaja, Guerra-Santos et al. (2017)menggambarkan ritme harian dalam
aktivitas protease alkali di usus, tetapi analisis semacam itu tidak memungkinkan
untuk mengidentifikasi kontribusi spesifik dari trypsin dan chymotrypsin.
Pemahaman dan peningkatan pengetahuan tentang fisiologi ritmik ikan
nila dapat membantu dalam manajemen pakan. Oleh karena itu, tujuan dari
penelitian ini adalah untuk menyelidiki pengosongan gastrointestinal,
aktivitas enzim, dan variasi enzim harian yang terkait dengan pencernaan
protein di lambung dan bagian usus ikan nila yang berbeda.
2. Bahan-bahan dan metode-metode
Eksperimen dilakukan di Laboratório de Aquacultura (Laqua) dari
Escola de Veterinária dari Universidade Federal de Minas Gerais,
mengikuti standar etika yang disetujui oleh Komite Etika Penggunaan
Hewan institusi (protokol CEUA 159/2016).
2.1. Hewan dan kondisi percobaan
Tiga puluh enam, remaja laki-lakiO. niloticus, dengan berat rata-rata
130,48   6,99 g, didistribusikan dalam enam tangki (masing-masing 100-
L) disimpan dalam sistem resirkulasi air dengan filtrasi mekanis dan
biologis, aerasi tambahan konstan, dan kontrol suhu. Diet disiapkan di
laboratorium dan diekstrusi sebagai pelet berukuran 4 mm,
komposisinya ditunjukkan padaTabel 1   Analisis komposisi
bromatologis dilakukan mengikuti metode AOAC (AOC, 2016  
Parameter kualitas air dipantau selama periode percobaan
menggunakan probe multiparameter YSI 6920 V2 (Yellow Springs
Incorporated-YSI, OH USA), menjaga kisaran yang ditunjukkan untuk
spesies (oksigen terlarut 6.89  0,73 mgL  1   suhu 28.3   0,5  C dan pH
6,19  0,14).
Fotoperiode ditetapkan pada 12:12 jam LD (terang:gelap), dengan lampu
dinyalakan pada jam 7:00 pagi dan dimatikan pada jam 7:00 malam. Intensitas
cahaya adalah 301 Lux di permukaan air pada siang hari. Secara kronobiologis
lembamc 0,78
Komposisi dianalisis (berdasarkan bahan kering)
Protein kasar (%) 12.31
Energi kotor (MJ kg  1) 17.86
7.77
Abu (%) 7.02
ItuKomposisi Suplemen Vitamin dan Mineral : Vit. A, 1200000 IU;
Vit. D3, 200.000 IU; Vit. E, 12000 mg; Vit. K, 2400mg; Vit. B1, 4800
mg; Vit. B2, 4800 mg; Vit. B6, 4000 mg; Vit. B12, 4800 mg; asam
folat, 1200 mg; asam pantotenat, 3750 mg; Vit. C, 48000 mg;
Biotin, 48 mg; Kolin, 65.000 mg; Niasin, 24.000 mg; Fe, 10.000 mg;
Cu, 6000 mg; Mn, 4000mg; Zn, 6000 mg; saya, 20mg; Co, 2 mg;
Jika, 20 mg.
BBHT - Butyl Hydroxy Toluene (antioksidan).
cBentonit.
studi, onset ringan diatur sebagaiZeitgeber  sinkronisasi) waktu 0 jam (ZT0
jam), untuk membakukan titik waktu terlepas dari waktu lokal dan
memfasilitasi reproduktifitas (Espirito Santo dkk., 2020   Jadi, onset cahaya
pada 7:00 sesuai dengan ZT0 h dan offset cahaya pada 7:00 sesuai dengan
ZT12 h. Hewan diberi makan dua kali sehari pada ZT1 dan ZT9 h (masing-
masing 8:00 dan 16:00 waktu setempat), dan tangki dibersihkan setelah
makan, dengan sisa makanan dibuang dan dibuang. Tidak ada kematian
yang dicatat selama periode percobaan.
2.2. Prosedur pengambilan sampel dan analisis kimia
Setelah 30 hari di bawah kondisi yang dijelaskan di atas, ikan diberi
makan hanya pada ZT1 jam, melewatkan pemberian makan pada ZT9 jam.
Kemudian, keesokan harinya, ikan diberi makan lagi pada ZT1 jam dan
proses pengambilan sampel dimulai. Pertama, enam hewan dikumpulkan 30
menit setelah makan (ZT1.5 jam), selanjutnya koleksi dilakukan setiap empat
jam (Fortes-Silva et al., 2019  Espirito Santo dkk., 2020), menghasilkan total
enam kali pengumpulan pasca-makan (ZT1.5, ZT5, ZT9, ZT13, ZT17 dan ZT21
h), dengan enam ekor ikan dikorbankan pada setiap titik sampling (n  6).
Remaja dibius menggunakan benzocaine (100 mg L-1).  1), ditimbang dan
dibedah untuk pengambilan jaringan. Perut ditimbang dan dievaluasi ada/
tidaknya makanan, yang digunakan untuk menghitung persentase hewan
dengan makanan di perut pada setiap titik sampling. Hubungan antara
berat perut (SW) dan berat hewan (AW) dihitung dengan menggunakan
persamaan berikut:Rasio SW/AW  SW*100/AW   Usus diukur dan dievaluasi
untuk ada/tidaknya makanan, serta lokasi makanan saat ada. Usus
kemudian dibagi menjadi tiga bagian (awal, menengah dan akhir) dan
sampel disimpan pada suhu -80  C untuk analisis enzimatik.
2.3. Aktivitas enzimatik
Aktivitas asam protease ditentukan di lambung dan aktivitas trypsin
dan chymotrypsin ditentukan di tiga bagian usus (awal, tengah dan
akhir) mengikuti protokol yang dijelaskan olehSantos dkk. (2020)  
Pengukuran aktivitas enzim dilakukan dalam rangkap tiga
menggunakan microplate reader (Multiskan GO, Thermo Scientific,
Waltham, Massachusetts, USA). protein total

dua
CG de Oliveira dkk. Akuakultur 546 (2022) 737338

konsentrasi ditentukan olehBradford (1976)   Meja 2

Untuk sampel perut, strata disiapkan dalam 20 mM Tris-HCl, pH Parameter ikan nila yang dianalisa diserahkan pada waktu pengumpulan pasca-makan yang

7.0, sedangkan untuk sampel usus ekstrak yang digunakan adalah 100 mM berbeda.

Tris-HCl, pH 7,8, dengan 0,1% Triton X-100 dan 0,1 mM Parameter Waktu (ZTh)
ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA). Hemoglobin sapi digunakan sebagai
1.5 5 9 13 17 21 P  
substrat untuk penentuan protease asam. Aliquot 20 μL ekstrak enzim nilai
diinkubasi dengan 250 μL hemoglobin (0,5% dalam buffer glisin 0,1 M, pH
SW/AW 3.76 0,71 0,53 0,28 0,30 0,28 0,0005
2,0) selama 20 menit pada suhu 37  C. Reaksi ini kemudian dihentikan perbandingan                  
dengan penambahan 250 μL asam trikloroasetat (20%). Aktivitas diukur 0,61Itu 0,36ab 0,39sm 0,04c 0,06c 0,07c
pada 280 nm, dan untuk setiap sampel dibuat "kosong" yang mengandung perut 6.25 0,80 0,68 0,59 0,48 0,47 0,0001
20 μL ekstrak enzim, 250 μL hemoglobin (0,5% (b / v) dan 250 μL asam berat (g)                  
0,81Itu 0,43B 0,89B 0,096B 0,13B 0,16B
trikloroasetat (20% (b / v) Aktivitas spesifik didefinisikan sebagai μg tirosin
hewan 100 100 50 16.67 0 0 0,0001
yang dilepaskan per menit per mg total protein larut pada 37  C, dengan makanan

menggunakan 0,008 mL/μg per cm3 sebagai koefisien kepunahan molar.
Aktivitas trypsin ditentukan menggunakan Nα-benzoyl-L-arginine-4-
nitroanilide (BApNA) sebagai substrat. Aliquot 100 μL BAPNA (1 mM, dalam
50 mM Tris-HCl, pH 8,2 dan 20 mM CaCl2) diinkubasi dengan 20 μL ekstrak
enzim pada suhu 30  C. Aktivitas diukur pada 410 nm, setiap 30 detik, selama
30 menit. Aktivitas spesifik didefinisikan sebagai nmol dari 4-nitroanilin yang
diproduksi per menit (U) per mg protein (mU  1mg protein). Koefisien
kepunahan molar adalah 8800 M/cm. Aktivitas chymotrypsin ditentukan
menggunakan N-benzoyl-L-tyrosine ethyl ester (BTEE) sebagai substrat.
Alikuot 140 μL BTEE (1,13 mM, dalam 100 mM Tris-HCl, pH 7,8 dan 25 mM
CaCl2) diinkubasi dengan 20 μL ekstrak enzim, pada suhu 30  C, dan aktivitas
diukur pada 256 nm, setiap 20 detik, selama 20 menit. Aktivitas spesifik
didefinisikan sebagai nmol Benzoil-L-tirosin yang dihasilkan per menit per
mg protein. Koefisien kepunahan molar adalah 964 M/cm.
2.4. Analisis statistik
Data dianalisis menggunakan InfoStat   (versi 2016, 240 University
of Cordoba, Argentina) paket perangkat lunak komputer dan
dinyatakan sebagai rata-rata  standar deviasi. Data diserahkan ke uji
Levene untuk homoskedastisitas dan uji normalitas Shapiro-Wilk. Data
dengan distribusi tidak normal dikenai uji Kruskall Wallis (P <0,05). Data
mengenai ada/tidaknya makanan di dalam perut dilakukan uji
kecenderungan chi-square, ditentukan padaksampel, masing-masing
dengan dua kategori (ITUdanB) dalam 2xkmeja(P <0,05). Data aktivitas
enzim menjadi sasaran analisis Cosinor menggunakan perangkat lunak
EL TEMPS (v.1.179, Prof. Díez-Noguera, Universitas Barcelona,
Spanyol), untuk menentukan keberadaan ritme harian yang signifikan (
Espirito Santo dkk., 2020   3.4. aktivitas kimotripsin
dalam
perut
Huruf yang berbeda pada baris menunjukkan perbedaan yang signifikan dengan uji
Kruskal-Wallis (P <0,05). Data makanan perut dikenai uji tren chi-square (P <0,05).
aktivitas protease berbeda secara signifikan di antara waktu pengambilan sampel,
dengan aktivitas yang lebih tinggi lima jam setelah onset ringan (ZT5 jam) (4 jam setelah
makan) (Kruskall-Wallis,P  0,0234).
3.3. aktivitas tripsin
Aktivitas tripsin di bagian awal usus menunjukkan variasi harian
yang signifikan (Cosinor,P  0,00002), dengan akrofasenya ditampilkan
dalam fase cahaya, pada ZT 3:35 jam (Ara. 3A danTabel 3   Selain itu,
perbedaan signifikan juga terdeteksi di antara titik waktu aktivitas
enzim ini di bagian ini, dengan nilai ZT1.5 yang lebih tinggi (Kruskall-
Wallis,P  0,0006) dan ZT5 h dibandingkan dengan ZT13, ZT17 dan ZT21
h. Namun, tidak ada perbedaan yang ditemukan untuk pola ritmis pada
bagian perantara (Cosinor,P  0,08780), maupun aktivitas enzim di
dalamnya (Kruskall-Wallis,P  0,0800) (Ara. 3B&BTabel 3  
Di bagian akhir usus, tripsin menunjukkan variasi harian yang
signifikan (Cosinor,P  0,00014), dengan akrofase di awal fase gelap,
pada ZT 12:05 jam (Ara. 3C danTabel 3   Aktivitas tripsin pada porsi ini
berbeda secara signifikan di antara waktu pengambilan sampel,
dengan nilai tertinggi terletak pada ZT9, ZT13 dan ZT17 jam (Kruskall-
Wallis,P   0,0003).

3. Hasil Aktivitas chymotrypsin di bagian awal usus menunjukkan pola harian

3.1. Pengosongan gastrointestinal
Rata-rata berat akhir hewan adalah 171,74  34,94g. Bobot lambung
menunjukkan perbedaan yang signifikan di antara waktu pengambilan sampel,
dengan bobot yang secara signifikan lebih tinggi ditemukan segera setelah
makan, pada ZT1,5 jam (Kruskall-WallisP  0,0001), setelah itu beratnya menurun (
Meja 2   Rasio SW/AW berbeda secara signifikan di antara waktu pengambilan
sampel, dengan rasio tertinggi terdeteksi pada ZT1,5 jam dan terendah pada ZT13,
ZT17 dan ZT21 jam (P  0,0005).
Adanya makanan di dalam lambung menurut uji tendensi
menunjukkan hasil yang signifikan (P  0,0001), menunjukkan tren
penurunan dengan nilai negatif A (− 25.000): seiring bertambahnya
waktu setelah makan, proporsi hewan dengan makanan di perut
menurun (Meja 2   Pengosongan usus diwakili dalamAra. 1   ini juga berbeda secara signifikan di antara waktu pengambilan sampel,
3.2. aktivitas protease asam
yang signifikan (Cosinor,P  0,00002) (Ara. 4A danTabel 3   Acrophase dari
variasi ritme terletak pada fase cahaya, pada ZT 03:45 jam. Selain itu,
aktivitasnya berbeda secara signifikan di antara waktu pengambilan sampel,
menjadi aktivitas yang lebih tinggi pada ZT1.5 dan ZT5 jam (Kruskall-Wallis,P  
0,0006).
Aktivitas chymotrypsin di bagian tengah usus menunjukkan pola
harian yang signifikan, dengan acrophase terletak di fase ringan
(Cosinor,P  0,01039), pada ZT 7:01 jam (Ara. 4B&BTabel 3   Aktivitas
enzim ini meningkat hampir sepanjang hari dan menurun hanya pada
ZT17 dan secara signifikan pada ZT 21 jam (Kruskall-Wallis,P   0,0221).
Aktivitas chymotrypsin di bagian akhir usus menunjukkan variasi harian
yang signifikan dengan akrofase pada ZT 10:30 jam, mendekati akhir fase
cahaya (Cosinor,P  0,00040) (Ara. 4C danTabel 3   Selain itu, aktivitas enzim
dengan nilai tertinggi pada ZT9 jam (Kruskall-Wallis,P   0,0008).

Aktivitas enzim protease asam dalam sampel lambung menunjukkan 4. Diskusi

variasi harian yang signifikan (Cosinor,P  0,00034) pada nila remaja (Ara. dua
danTabel 3), dengan akrofase (waktu dengan nilai tertinggi) terdeteksi di Dalam penelitian ini, pengosongan berbeda tergantung pada
sekitar pertengahan fase cahaya, pada ZT 06:24 jam. asam daerah gastrointestinal yang dianalisis. Di perut, proses ini terjadi

3
CG de Oliveira dkk. Akuakultur 546 (2022) 737338

Pengosongan usus

41,48%
1.5
17,58% 86,93%
5

Waktu setelah menyusui

23,06% 96,16%
9

(ZTh)
51,40% 97,40%
13
71,90%
17

21
Awal Intermediat Terakhir

10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

Usus (%) Rata-rata panjang usus 116,59±22,30 cm

tidak ada makanan yang hadir Kehadiran makanan

Ara. 1.Representasi nilai rata-rata untuk lokalisasi makanan pada ikan nila selama 20 jam setelah pemberian makan. Panjang usus dinyatakan dalam persentase (%). Nilai
yang ditunjukkan di atas batang mengacu pada lokasi makanan di usus.

lingkungan (Sunde et al., 2004   Pencernaan adalah proses transformasi

25 makanan yang bergantung pada faktor-faktor seperti evakuasi
Itu P=0,0234 gastrointestinal, aktivitas enzim, dan bioavailabilitas nutrisi.Mata-Sotres et
(U/mg protein larut

20 al., 2016   Enzim sangat penting dalam pencernaan nutrisi, oleh karena itu
B
Protease Asam

mereka meningkatkan kapasitas pencernaan hewan (Wen et al., 2009  

15 Adeoye et al., 2016  Hassan dkk., 2020   Kebiasaan makan dan morfologi
dapat secara langsung mempengaruhi distribusi dan intensitas enzim di
10 B B saluran cerna.Hassan dkk., 2020  

B B Dalam penelitian ini, pengosongan saluran pencernaan terjadi hanya 20

5 jam setelah konsumsi makanan. Jumlah waktu ini relatif tinggi jika
0 total waktu evakuasi usus pada nila dan memperkirakan total waktu
1.5 5 9 13
Zeitgeber  H)
Ara. dua.Variasi harian dalam aktivitas enzim protease asam pada ikan nila remaja. Ikan
diberi makan pada ZT1 jam dan sampel perut dikumpulkan pada ZT1.5, ZT5, ZT9, ZT13,
ZT17 dan ZT21 (jadi 0,5 jam, 4 jam, 8 jam, 12 jam, 16 jam dan 20 jam setelah pemberian
makan). Garis putus-putus mewakili penyesuaian ke fungsi sinusoidal yang dihitung
dengan uji Cosinor, kapan pun itu signifikan (p <0,05). Huruf yang berbeda menunjukkan
perbedaan yang signifikan secara statistik dengan uji Kruskall-Wallis (P <0,05). Bilah putih
dan hitam di atas grafik mewakili periode terang dan gelap. Skala sumbu x dinyatakan
sebagaiZeitgeberWaktu (ZT), di mana ZT0 h sesuai dengan permulaan cahaya.
lebih cepat, dimana setelah 4 jam sudah menunjukkan tingkat evakuasi yang
tinggi dan benar-benar kosong setelah 16 jam. Sebaliknya, di bagian usus,
pengosongan memakan waktu antara 8 dan 12 jam, dan terhitung total 20
jam di seluruh usus. Selain itu, enzim proteolitik yang dianalisis
menunjukkan variasi ritme harian, dengan pengecualian trypsin pada
bagian tengah (Ara. 5   Acrophases berkorelasi dengan adanya makanan dan
dengan demikian muncul secara berurutan di usus (Ara. 5  
Pengetahuan tentang enzim pencernaan membantu dalam memahami
mekanisme pencernaan dan adaptasi organisme terhadap perubahan dalam
dibandingkan dengan studi tentangUscanga et al. (2010), yang menyelidiki
17 21 pencernaan menjadi 7,15 jam. Namun pengosongan total dapat dipengaruhi
oleh beberapa faktor seperti perbedaan anatomi (Uscanga et al., 2010), suhu
air (Dia dan Wurtsbaugh, 1993  Temming dan Hermann, 2001  Terburu-buru,
2004), ukuran makanan (Anderson, 1999) dan komposisi pakan (Polunin et
al., 1995   Perbedaan antara studi itu dan yang sekarang tampaknya terkait
dengan faktor terakhir, karena tidak seperti yang dikemukakan olehUscanga
et al. (2010), penelitian ini tidak menggunakan pakan semi murni, yang
dapat memperpanjang waktu pencernaan pakan. Hal ini disebabkan fakta
bahwa diet ini kompleks untuk dicerna, karena nutrisi tidak segera tersedia
untuk diserap (Horn dan Messer, 1992  
Protease asam bertanggung jawab untuk tahap awal pencernaan protein,
memungkinkan pemecahan rantai polipeptida panjang di perut (Tengjaroenkul
dkk., 2000  Natalia et al., 2004  Xiong et al., 2011   Aktivitas protease asam yang
dievaluasi di sini tertinggi empat jam setelah makan. Pengasaman lambung yang
dipicu oleh konsumsi makanan adalah proses dengan mekanisme kompleks yang
melibatkan beberapa reaksi termasuk kontrol saraf dan endokrin (Holmgren dan
Olsson, 2011  Yufera et al., 2012   Dibandingkan dengan spesies karnivora yang
lebih efisien dalam pencernaan mekanis, ikan omnivora memiliki dinding perut
yang tipis dan membutuhkan media yang sangat asam untuk pencernaan yang
optimal.Uys dan Hecht, 1987   Xiong et al., 2011   Ikan mempertahankan pH antara
4 dan 7 di perut antara waktu makan (Yufera et al., 2004  Darias et al., 2005  Yufera
dan

Tabel 3
Nilai mesor, amplitudo dan akrofase dari aktivitas enzim diserahkan ke analisis Cosinor.

aktivitas enzim Tisu Mesor Amplitudo Akrofase (jam) P-nilai

protease asam St.omach 7.26  1.63 5.12  2.29 06:24  2:17 0,00034

Tripsin Awal 150.88  45.54 176.85  81.14 3:35  1:50 0,00002
Intermediat          0,0878
Terakhir 113.15  39.63 133.04  67.73 12:05  2:15 0,00014
kimotripsin Awal 8954.96  2394.82 9248.59  4265.72 03:45  1:50 0,00002
Intermediat dan 10.013,89  2634.03 5939.20  4692.94 7:01  3:29 0,01039
Terakhir 3499.20  1176.01 4402.32  2046.45 10:30  2:00 0,0004

DItu
Okedialami kembali sebagai nilai  fid kamu
batasan sosial (95%). Mesor dan amplitudo adalah ex ditekan sebagai U/mg protein terlarut. Akrofase ditunjukkan dalamZeigeberjam waktu
(Z T).

4
CG de Oliveira dkk. Akuakultur 546 (2022) 737338

800
ITU 40000 ITU
P=0,0006 P=0,0006

(U / mg protein larut)
(U/mg protein larut)

600 Itu 30000 Itu Itu

Itu

kimotripsin
Tripsin

400 20000
ab
ab B
200 10.000
B B B
B B
0 0
1.5 5 9 13 17 21 1.5 5 9 13 17 21
Zeitgeber  H)
Zeitgeber  H)

1000 B 30000 B
Itu Itu

(U / mg protein larut)
P=0,0800 P=0,0221
800
(U/mg protein larut  

20000
Itu Itu

kimotripsin
600 ab
Tripsin

400 10.000

200 B
0
0
1.5 5 9 13 17 21
1.5 5 9 13 17 21
Zeitgeber  H)
Zeitgeber  H)

600
C
20000
C
(U/mg protein larut)

(U / mg protein larut)

P=0,0003 Itu P=0,0008

16000
Itu ab
400
kimotripsin
Tripsin

12000 ab
ab
8000
200 ABC
4000 c bc
sm c
c c
0 0
1.5 5 9 13 17 21 1.5 5 9 13 17 21
Zeitgeber  H) Zeitgeber  H)

ara3    Variasi harian dalam aktivitas enzim tripsin di awal (A), menengah
(B) dsebuah
bagian akhir (C) usus ikan nila remaja. Ikan diberi makan di Z
T1 jam dan sampel dikumpulkan pada ZT1.5, ZT5, ZT9, ZT13, ZT17 dan ZT21 0,5 jam, 4 jam,
(th kita8 jam, 12 jam, 16 jam dan 20 jam setelah pemberian makan). Garis putus-putus mewakili
resjadipenyesuaian ke fungsi sinusoidal yang dihitung dengan uji Cosinor,
when ay eh itu signifikan (hal  0,05). Huruf yang berbeda menunjukkan perbedaan
nifi secara statistik dengan uji Kruskall-Wallis (P  0,05). Putih dan hitam
mengikuti
Pubsa BDi atas grafik menunjukkan
r periode terang dan gelap. Skala sumbu x disingkat
expressebagaiZeitgeberWaktu (ZT), di mana ZT 0 jam sesuai dengan permulaan cahaya.
Ara. 4.Variasi harian dalam aktivitas enzim chymotrypsin di bagian awal (A),
menengah (B) dan akhir (C) dari usus ikan nila remaja. Ikan diberi makan pada ZT1
jam dan sampel dikumpulkan pada ZT1.5, ZT5, ZT9, ZT13, ZT17 dan ZT21 (jadi 0,5
jam, 4 jam, 8 jam, 12 jam, 16 jam dan 20 jam setelah pemberian makan). Garis
putus-putus mewakili penyesuaian ke fungsi sinusoidal yang dihitung dengan uji
Cosinor, kapan pun itu signifikan (hal.  0,05). Huruf yang berbeda menunjukkan
perbedaan yang signifikan secara statistik dengan uji Kruskall-Wallis (P  0,05). Bilah
putih dan hitam di atas grafik mewakili periode terang dan gelap. Skala sumbu x
dinyatakan sebagaiZeitgeberwaktu (ZT), di mana ZT 0 jam sesuai dengan
permulaan cahaya.

Darias, 2007  Holmgren dan Olsson, 2011   Namun, aktivasi pepsin

sparus aurata  Montoya et al., 2010b) dan ikan kakap putih (Diplodus Sargus  
hanya terjadi ketika ada cukup asam klorida setelah konsumsi, yang
Yufera et al., 2012) dan enam jam untuk izin (trachinotus falcatus  Lazado et
memungkinkan transformasi pepsinogen menjadi pepsin, tetapi ini
al., 2017   Untuk semua spesies ini, terjadi peningkatan aktivitas pepsin
hanya terjadi pada pH ideal, yang biasanya di bawah pH 4.Yufera et al.,
selama periode ini, berkorelasi erat dengan penurunan pH (Yufera et al.,
2012   Memang, perlu dicatat bahwa aktivitas pepsin mungkin tidak
2012  Lazado et al., 2017   Meskipun remaja dari penelitian ini memiliki berat
ketatly berkorelasi dengan pe produksi psin atau ekspresi mRNA. Untuk
perut yang lebih tinggi pada ZT1.5, terkait dengan adanya makanan di organ
Misalnya, pada larva ikan nila, ekspresi mRNA daripepsinogenmenyajikan puncak
ini untuk semua hewan, kemungkinan pengasaman hanya mencapai tingkat
segera setelah makan (Espirito Santo dkk., 2020   Namun, aktivitas pepsin dalam
yang memadai setelah beberapa jam. Akibatnya, aktivitas protease asam
penelitian ini meningkat 5 tjam setelah asupan makanan, sehingga menunjukkan
hanya mencapai tingkat yang lebih tinggi empat jam setelah makan. Setelah
peran kunci dari variasi pH lambung. Pada ikan, induksi penurunan pH yang dipicu
periode ini, terjadi pengosongan perut hewan. Pengurangan protease asam
oleh datangnya makanan biasanya memakan waktu beberapa jam. Misalnya, pH
selanjutnya bisa
lambung menurun empat jam setelah memberi makan ikan air tawar

5
CG de Oliveira dkk. Akuakultur 546 (2022) 737338

variasi harian yang signifikan, dengan nilai tertinggi disesuaikan dengan

kedatangan makanan. Hasil serupa ditemukan olehLazado et al. (2017)yang
mengevaluasi aktivitas chymotrypsin ditrachinotus falcatus   Di gilthead sea

protease asam
bream, ketika ikan diberi makan setiap hari pada waktu yang sama,Montoya dkk.
(Perut) (2010b)juga mengamati pola harian aktivitas protease alkalin dengan maksimum
terletak 1 jam setelah waktu makan. Memang, dalam penelitian tersebut, penulis
melaporkan adanya peningkatan aktivitas protease yang mengantisipasi
Awal datangnya makanan (Montoya et al., 2010b   Peningkatan serupa dalam produksi
enzim sebelum waktu makan, ketika ikan diberi makan secara berkala pada waktu
Tripsin
yang sama, telah dilaporkan pada spesies lain seperti ikan mas (Carassius auratus)
(Usus)
dan ikan kakap putih (Diplodus Sargus  Vera et al., 2007   Yufera et al., 2012  
Dalam percobaan ini, ikan nila diberi makan secara berkala pada ZT1 jam. Ini
Terakhir

mungkin menyebabkan ritme enzim proteolitik, di antara faktor pencernaan

lainnya, untuk disinkronkan dengan waktu makan ini dan menunjukkan antisipasi.
Awal Ini akan menjelaskan mengapa kadar tripsin dan kimotripsin meningkat hanya 30
menit setelah makan, terutama di usus anterior. Dalam penelitian ini, ikan juga
kimotripsin Intermediat diberi makan secara berkala pada ZT9 jam, namun tidak ada peningkatan yang
(Usus)
terlihat pada waktu itu. Ini mungkin dijelaskan oleh fakta bahwa makan pada ZT9
Terakhir
h dihentikan selama 2 hari terakhir. Banyak ritme makan yang sangat bergantung
pada keberadaan makanan dan hilang dengan mudah saat jadwal makan
0 4 8 12 16 20 24 dihilangkan (Lopez-Olmeda, 2017   Akhirnya, harus disorot bahwa Guerra-Santos
et al. (2017)menunjukkan bahwa ikan nila yang diberi makan pada siang hari
waktu Zeitgeber (j) selama 30 hari menampilkan ritme protease alkalin, tetapi dengan akrofase
tertunda yang terletak di akhir fase gelap. Dalam studi yang sama, aktivitas
Ara. 5.Peta akrofase enzim yang dianalisis pada ikan nila remaja. Akrofase untuk protease asam tidak menunjukkan ritme yang signifikan. Perbedaan antara
aktivitas protease asam, tripsin, dan kimotripsin masing-masing diwakili oleh penelitian ini dan satu olehGuerra-Santos et al. (2017)dapat dijelaskan oleh
kotak putih, lingkaran putih, dan lingkaran hitam. Akrofase diindikasikan hanya beberapa faktor yang juga mempengaruhi sinkronisasi makanan, beberapa terkait
untuk variasi harian yang signifikan secara statistik (Cosinor,p <0,05). Nama setiap dengan makanan seperti komposisi atau rasio pakan, dan lainnya terkait dengan
enzim ditunjukkan di sebelah kiri dan daerah usus di sebelah kanan. Bilah putih
variabel biologis seperti tahap hidup dan status gizi (Sánchez-Vázquez dan Madrid,
dan hitam di atas grafik masing-masing mewakili fase terang dan gelap. Panah di
2001  López-Olmeda dan Sánchez-Vázquez, 2010   Namun demikian, dalam
atas grafik menunjukkan waktu makan (ZT1 h). Skala sumbu x dinyatakan sebagai
penelitian ini, efek langsung dari waktu makan tidak dapat diabaikan. Dengan
waktu Zeitgeber (ZT), di mana ZT 0 jam sesuai dengan permulaan cahaya.
demikian, variasi harian yang diamati pada aktivitas enzim proteolitik mungkin
disebabkan oleh efek masking yang disebabkan oleh kedatangan makanan. Oleh
karena itu, penelitian lebih lanjut diperlukan untuk menjelaskan kekhasan variasi
kemungkinan denaturasi enzim oleh penurunan makanan yang
ini, terutama penelitian yang melibatkan waktu makan yang berbeda atau kondisi
mengikuti pencernaan lebih lanjut, meningkatkan pH lambung dengan
lingkungan yang konstan (puasa dan pencahayaan konstan).
mengurangi asam klorida (Caruso et al., 2008  
Pola aktivitas tripsin dan kimotripsin pada penelitian ini menunjukkan
perilaku yang serupa di usus. Di setiap daerah usus, enzim ini memiliki
aktivitas puncak pada waktu yang sama. Temuan ini dapat dijelaskan
5. Kesimpulan
dengan kemampuan tripsin untuk mengaktifkan dirinya sendiri dan sisa
zimogen (proenzim yang disekresikan oleh pankreas) (Falcon-Hidalgo et al.,
Singkatnya, penelitian ini menunjukkan bahwa perjalanan makanan di
2011   Dengan adanya makanan di usus, trypsinogen dan chymotrypsinogen
saluran pencernaan jelas mempengaruhi hidrolisis protein melalui aktivitas
disekresikan di lumen. Kemudian, tripsinogen diaktifkan menjadi tripsin,
enzim proteolitik selama 20 jam. Selain itu, dari aktivitas protease asam,
yang mengkatalisis aktivasinya sendiri dan aktivasi kimotripsinogen menjadi
tripsin dan kimotripsin menunjukkan variasi harian yang tampaknya
kimotripsin (Moraes dan Almeida, 2014   BerdasarkanCaruso et al. (2008), di
disinkronkan dengan waktu makan, yang dapat berkontribusi untuk
negara Eropa (anguila anguila) sekresi enzim proteolitik diatur oleh asupan
meningkatkan efisiensi pencernaan dan serapan nutrisi.
makanan, dengan aktivitas di usus cenderung meningkat beberapa jam
setelah makan. Seperti yang ditunjukkan dalam penelitian ini, aktivitas
Pernyataan kontribusi kepengarangan CRedit
tripsin dan ch yang lebih tinggi
ymotrypsin di awal l, menengah dan akhir bagian-bagian di-
Camila Gomes de Oliveira:Metodologi, Validasi, Analisis formal,
testine, meskipun pada waktu yang berbeda, tampaknya terkait dengan lewatnya
Investigasi, Kurasi data, Penulisan - draf asli, Penulisan - review &
f
darah. Namun, dalam kasus ini, pelepasan enzim lebih cepat daripada belut Eropa,
penyuntingan, Visualisasi.Jose Fernando López-Olmeda: Menulis - draf
karena tingkat yang tinggi dapat diamati bahkan tidak lama setelahnya
asli, Menulis - meninjau & mengedit, Visualisasi. Leandro Santos
asupan makanan (0,5 jam setelahnya), terutama di bagian awal usus. Dalam
Costa:Konseptualisasi, Metodologi, Penulisan - review & penyuntingan,
arti ini,Mata-Sotres et al. (2016)menemukan bahwa di ikan air tawar (sparus
Visualisasi.Amanda Hastenreiter dari Espírito Santo:Konseptualisasi,
aurata) ada pelepasan trypsin yang cepat sebagai respons terhadap
Metodologi, Validasi, Analisis Formal, Investigasi, Kurasi Data.Fabio
pemberian makan dan, akibatnya, memberikan proses hidrolisis protein
Aremil Costa dos Santos:Metodologi, Validasi, Analisis Formal,
yang optimal di mana senyawa nitrogen dalam makanan tersedia secara
Investigasi, Kurasi Data. Ronald Kennedy Luz:Sumber Daya,
hayati. Oleh karena itu, interaksi pakan dengan usus berpengaruh pada
Administrasi Proyek, Akuisisi Pendanaan.Paula Adriane Perez Ribeiro:
sekresi enzim proteolitik, yang tercermin dalam aktivitas enzim (Zeytin et al.,
Konseptualisasi, Metodologi, Penulisan - tinjauan & penyuntingan,
2016  
Visualisasi, Sumber Daya, Administrasi proyek, Akuisisi pendanaan,
Mekanisme kedua, non-saling eksklusif yang dapat menjelaskan respons
Pengawasan.
cepat dalam produksi enzim terhadap kedatangan makanan terkait dengan
ritme biologis dan sinkronisasi makanan. Dalam penelitian ini, aktivitas
enzimatik protease asam, tripsin dan kimotripsin ditunjukkan

6
CG de Oliveira dkk.
Deklarasi Kepentingan Bersaing
Para penulis menyatakan bahwa mereka tidak memiliki kepentingan
keuangan yang bersaing atau hubungan pribadi yang dapat mempengaruhi
pekerjaan yang dilaporkan dalam makalah ini.
Terima kasih
Studi ini didanai oleh CNPq (Dewan Nasional Pengembangan Ilmiah
dan Teknologi 401117/2014-6) dan CAPES (Koordinasi Peningkatan
Tenaga Pendidikan Tinggi). Luz, RK dan Ribeiro, PAP menerima hibah
penelitian CNPq no. 308547/2018-7 dan no. 308684/2017-6, masing-
masing. Kami berterima kasih kepada Universidade Federal de Minas
Gerais (UFMG), khususnya Laboratório de Aquacultura (LAQUA) atas
ruang untuk menjalankan percobaan dan melakukan analisis.
Universitas Federal Lavras (UFLA) untuk menyediakan Laboratorium
Enzimologi dan Biologi Molekuler untuk analisis aktivitas enzim.
Referensi
AOAC (Asosiasi Ahli Kimia Analitik Resmi), 2016. Metode analisis resmi, 20thed. Asosiasi
Kimiawan Analitik Resmi, Inc., Arlington, VA   Adeoye A, Jaramillo-Tores A, Fox S,
Merrifield D, Davies S, 2016. Suplementasi
diet yang diformulasikan untuk ikan nila (Oreochromis niloticus) dengan enzim eksogen
terpilih: kinerja keseluruhan dan efek pada histologi usus dan mikrobiota. Satwa Pakan
Sci. Technol. 215, 133–143.https://doi.org/10.1016/j. anifeedsci.2016.03.002  
Espirito Santo, AH, Alba, G., Reis, YS, Costa, LS, Sanchez-Vazquez, FJ, Luz, RK,
Ribeiro, PAP, Lopez-Olmeda, JF, 2020. Pengaruh rezim suhu terhadap pertumbuhan
dan ritme harian faktor pencernaan pada ikan nila (Oreochromis niloticus) larva.
Akuakultur 528, 735545.https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2020.735545   Natalia Y, Hashim R, Ali A, Chong A, 2004. Karakterisasi enzim pencernaan pada
Andersen, NG, 1999. Pengaruh ukuran predator, suhu, dan karakteristik mangsa
pada evakuasi lambung di kapur sirih. J. Ikan Biol. 54, 287–301  
Bradford, MM, 1976. Sebuah metode cepat dan sensitif untuk kuantifikasi mikrogram
jumlah protein yang memanfaatkan prinsip pengikatan protein-pewarna. Anal. Biokimia.
72, 248–254.https://doi.org/10.1016/0003-2697(76)90527-3  
Caruso G., Denaro MG, Genovese L., 2008. Perubahan sementara pada enzim pencernaan
aktivitas di saluran pencernaan belut Eropa (anguila anguila) (Linneo 1758) setelah
makan. Laut. segarw. Perilaku.Physiol. 41, 215–228.https://doi.org/
10.1080/10236240802492931  
Darias MJ, Murray HM, Martínez-Rodríguez G., Cárdenas S., Yúfera M., 2005. Gene
ekspresi pepsinogen selama perkembangan larva porgy merah (pagrus pagrus  
Akuakultur 248, 245–252.https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2005.04.044   Falcón-
Hidalgo, B., Forrellat-Barrios, A., Farnés, OC, Hernández, KU, 2011. Pencernaan
enzim dari dua ikan air tawar (limia vittatadanGambusia punctata) dengan
preferensi diet yang berbeda pada tiga tahap perkembangan. Komp. Biokimia. Fisik.
B. Biokimia. mol. Biol. 158, 136–141.https://doi.org/10.1016/j.cbpb.2010.10.009   G., Silva, WS, Rosa, PV, Luz, RK, Ribeiro, Paula, 2020. Efek kadar protein makanan
Fortes-Silva, R., Leme, FOP, Boaventura, TPM, Mendonca, HCP, Moreira, JPL,
Cunha, PHH, Luz, RK, 2019. Ritme harian populasi leukosit, biokimia dan
parameter darah enzimatik pada ikan lele air tawar karnivora (Lophiosilurus
alexandri   Chronobiol. Int. 36, 276–287.https://doi.org/10.1080/
07420528.2018.1537284  
Furuya WM, Pezzato LE, Barros MM, Cyrino JE, 2013. Persyaratan Gizi dan
pakan ikan nila. Dalam: Fracalossi, DM, Cyrino, JEP (Eds.), Nutriaqua: Nutrisi
dan pemberian makan spesies yang menarik bagi akuakultur Brasil. Copiart,
Florianópolis, hal. 255–265  
Goncalves, LU, Rodrigues, APO, Moro, GV, Cargnin-Ferreira, E., Cyrino, JEP,
2013. Morfologi dan Fisiologi Sistem Pencernaan Ikan. Dalam: Fracalossi, DM,
Cyrino, JEP (Eds.), Nutriaqua: Nutrisi dan pemberian makan spesies yang menarik
bagi akuakultur Brasil. Copiart, Florianópolis, hal. 9–36   Guerra-Santos, B., López-
Olmeda, JF, Mattos, BO, Baião, AB, Pereira, DSP,
Sánchez-Vázquez, FJ, Cerqueira, RB, Albinati, RCB, Fortes-Silva, R., 2017. Sinkronisasi
dengan cahaya dan waktu makan ritme harian aktivitas alat gerak, glukosa plasma,
dan enzim pencernaan di ikan nila (Oreochromis niloticus   Komp. Biokimia. Fisik.
Bagian A Mol. Integrasi Fisik. 204, 40–47.https://doi.org/10.1016/j.cbpa.2016.11.006   10.1006/jfbi.2000.1531
Hassaan MS, Mohammady EY, Soaudy MR, Palma J, Shawer EE, El-Haroun E,
2020. Pengaruh diet serisit terhadap kinerja pertumbuhan, aktivitas enzim
pencernaan, mikrobiota usus dan parameter hematologi ikan nila,Oreochromis
niloticus  L.) benih. Satwa Pakan Sci. Technol. 262, 114400https://doi.org/10.1016/
j.anifeedsci.2020.114400  
He, E., Wurtsbaugh, WA, 1993. Model Empiris Tingkat Evakuasi Lambung Ikan
dan Analisis Pencernaan pada Piscivorous   niloticusL.). FoodChem. 134, 1533–1541. https://doi.org/10.1016/
Holmgren, S., Olsson, C., 2011. Kontrol otonom kelenjar dan sekresi: a
pandangan komparatif. Otomatis. Ilmu saraf. 165, 102–112.https://doi.org/10.1016/j.
autneu.2010.10.008  
Horn, MH, Messer, KS, 1992. Usus ikan sebagai Reaktor kimia: model alimentary
kanal ikan herbivora laut. Laut. Biol. 113, 527–535  
7
Akuakultur 546 (2022) 737338
Hurst, TP, 2004. Suhu dan ketergantungan keadaan makan dan evakuasi lambung
di halibut Pasifik remaja. J. Ikan Biol. 65, 157–169.https://doi.org/10.1111/
j.1095-8649.2004.00440.x  
Kolkovskil, S., Tandler, A., Kissil, GWm., Gertler, A., 1993. Pengaruh diet
enzim pencernaan eksogen pada konsumsi, asimilasi, pertumbuhan dan kelangsungan
hidup gilthead seabream  sparus aurata,Sparidae, Linnaeus) larva. Fisik Ikan. Biokimia. 12,
203–209  
Lazado CC, Pedersen PB, Nguyen HQ, Lund I., 2017. Irama dan plastisitas
fisiologi pencernaan pada ikan teleost euryhaline, izin (trachinotus falcatus   Komp.
Biokimia. Fisik. A.212, 107–116.https://doi.org/10.1016/j.cbpa.2017.07.016   Li Y., Ru
B., Liu X., Miao W., Zhang K., Han L., Ni H., Wu H., 2015. Efek dari
medan magnet arus bolak frekuensi sangat rendah terhadap kinerja pertumbuhan
dan aktivitas enzim pencernaan ikan nilaOreochromis niloticus   Mengepung. Biol.
Ikan 98, 337–343.https://doi.org/10.1007/s10641-014-0263-6   opez-Olmeda, JF,
aku'
2017. Entrainment nonfotik pada ikan. Komp. Biokimia. Fisik A.
203, 133–143.https://doi.org/10.1016/j.cbpa.2016.09.006  
López-Olmeda, JF, Sánchez-Vázquez, FJ, 2010. Irama Memberi Makan pada Ikan: Dari
Pendekatan Perilaku ke Molekuler. Dalam: Kulczykowska E, Popek W, Kapoor BG
(Eds.), Jam Biologis pada Ikan. Penerbit Sains, Enfield, AS, hal. 155–184   Mata-Sotres,
JA, Moyano, FJ, Martínez-Rodriguez, G., Yúfera, M., 2016. Irama harian
aktivitas enzim pencernaan dan ekspresi gen di gilthead seabream (sparus aurata)
selama ontogeni. Komp. Biokimia. Fisik. A.197, 43–51.https://doi.org/10.1016/
j.cbpa.2016.03.010  
Mistlberger, RE, 1994. Kegiatan Antisipasi Pangan Sirkadian: Model Formal dan
mekanisme fisiologis. Ilmu saraf. biobehav. Putaran. 18, 171–195   Montoya A,
Lopez-Olmeda JF, Garayzar ABS, Sanchez-Vazquez FJ, 2010a.
Sinkronisasi ritme harian aktivitas alat gerak dan glukosa plasma, kortisol, dan hormon
tiroid untuk memberi makan di Gilthead seabream (sparus aurata) di bawah siklus terang-
gelap. Fisik. berperilaku. 101, 101–107.https://doi.org/10.1016/j. physbeh.2010.04.019  
Montoya A, Lopez-Olmeda JF, Yufera M, Sanchez-Muros MJ, Sanchez-Vazquez F.
J., 2010b. Waktu makan menyinkronkan ritme perilaku harian dan fisiologi
pencernaan pada gilthead seabream (sparus aurata   Akuakultur 306, 315–321.
https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2010.06.023  
Moraes, G., Almeida, LC, 2014. Aspek nutrisi dan fungsional pencernaan ikan. Di:
Baldisserotto B, Cyrino JEP, Urbinati EC (Eds.), Biologi dan fisiologi ikan air tawar
neotropis. FUNEP, Jaboticabal, hal. 233–250  
ikan hias karnivora, lidah bertulang AsiaScleropages formosus
(Osteoglossidae). Akuakultur 233, 305–320.https://doi.org/10.1016/j.
akuakultur.2003.08.012  
Nelson, DL, Cox, M., 2002. Lehninger-Principles of Biochemistry, edisi ke-3. Sarvier, Sao Paulo  
Polunin, NVC, Harmelin-Vivien, M., Galzin, R., 1995. Kontras dalam pengolahan makanan alga
di antara lima ikan terumbu karang herbivora. J. Ikan Biol. 47, 455–465.https://doi.org/
10.1111/j.1095-8649.1995.tb01914.x  
Sánchez-Vázquez, FJ, Madrid, JA, 2001. Memberi makan aktivitas antisipatif pada ikan. Di:
Houlihan DF, Boujard T., Jobling M. (Eds.), Asupan Makanan pada Ikan. Blackwell
Science, Oxford, hal. 216–232  
Santos, JF, Castro, PF, Leal, ALG, Junior, ACVF, Lemos, D., Carvalho, Jr,
Bezerra, LB, 2013. Aktivitas enzim pencernaan pada ikan nila remaja (Oreochromis
niloticus, L) diserahkan ke tingkat diet hidrolisat protein udang yang berbeda.
Aquac. Int. 21, 563–577.https://doi.org/10.1007/s10499-012-9589-2  
Santos WM, Costa LS, Lopez-Olmeda JF, Costa NCS, Santos FAC, Gamarano P.
pada aktivitas protease dan ekspresi gen terkait pencernaan dan pencernaan
protein pada ikan nila remaja. Aquac. Res. 51, 2973–2984.https://doi.org/10.1111/
are.14635  
Schulz C., Wickert M., Kijora C., Ogunji J., Rennert B., 2007. Evaluasi kacang polong
isolat protein sebagai sumber protein alternatif dalam pakan ikan nila juvenil (Oreochromis
niloticus   Aquac. Res. 38, 537–545.https://doi.org/10.1111/j.1365- 2109.2007.01699.x  
Strubbe, JH, Dijk, GV, 2002. Organisasi sementara perilaku menelan dan nya
interaksi dengan pengaturan keseimbangan energi. Ilmu saraf. biobehav. Putaran.
26, 485–498.https://doi.org/10.1016/s0149-7634(02)00016-7  
Sunde J, Eiane SA, Rustad A, Jensen HB, Opstvedt J, Nygard E, Venturini G,
Rungruangsak-torrissen, K., 2004. Pengaruh kondisi pengolahan pakan ikan terhadap
aktivitas protease pencernaan, kolam asam amino bebas, efisiensi konversi pakan dan
pertumbuhan salmon Atlantik (salar salarL.). Aquac. Memelihara 10, 261–277.https://doi.
org/10.1111/j.1365-2095.2004.00300.x  
Temming, A., Herrmann, J.-P., 2001. Evakuasi lambung pada makarel kuda. L. Efek
ukuran makan, suhu dan berat predator. J. Ikan Biol. 58, 1230–1245.https://doi.org/
  
Tengjaroenkul B., Smith BJ, Caceci T., Smith SA, 2000. Distribusi usus
aktivitas enzim di sepanjang saluran usus ikan nila yang dibudidayakan,Oreochromis
niloticusL. Akuakultur 182, 317–327.https://doi.org/10.1016/S0044-8486(99) 00270-7  
Unajak S, Meesawat P, Paemanee A, Areechon N, Engkagul A, Kovitvadhi U,
Kovitvadhi, S., Rungruangsak-Torrissen, K., Choowongkomon, K., 2012. Karakterisasi
tripsin termostabil dan penentuan isozim tripsin dari usus ikan nila (Oreochromis
j.foodchem.2012.03.074  
Uscanga, A., Moyano, FJ, Alvarez, CA, 2010. Penilaian efisiensi enzimatik pada
pencernaan protein pada ikan nilaOreochromis niloticus   Fisik Ikan. Biokimia.
36, 1079–1085.https://doi.org/10.1007/s10695-010-9385-8  
CG de Oliveira dkk. Akuakultur 546 (2022) 737338

Uys, W., Hecht, T., 1987. Pengujian enzim pencernaan lele gigi tajam, Clarius J.Anim. Fisik. Satwa Memelihara 95, 56–64.https://doi.org/10.1111/j.1439-
guripinus  Ikan: Clariidae). Akuakultur 63, 301–313.https://doi.org/ 0396.2009.00984.x  
10.1016/0044-8486(87)90080-9   Yerushalmi, S., Green, RM, 2009. Bukti signifikansi adaptif sirkadian
Vaze, KM, Sharma, VK, 2013. Tentang signifikansi adaptif jam sirkadian untuk mereka ritme. Ramah lingkungan Lett. 12, 970–981.https://doi.org/10.1111/
pemilik. Chronobiol. Int. 30, 413–433.https://doi.org/10.3109/ j.1461- 0248.2009.01343.x  
07420528.2012.754457   Yúfera, M., Darías, MJ, 2007. Perubahan pH gastrointestinal dari larva menjadi dewasa pada
Vera, LM, De Pedro, N., Gómez-Milán, E., Delgado, MJ, Sánchez-Muros, MJ, sol senegal (Solea senegalensis   Akuakultur 267, 94–99  
Madrid, JA, Sánchez-Vázquez, FJ, 2007. Memberi makan irama aktivitas lokomotor, Yúfera M, Fernández-Díaz C, Vidaurreta A, Cara JB, Moyano FJ, 2004.
enzim pencernaan dan faktor neuroendokrin pada ikan mas. Fisik. berperilaku. 90, pH gastrointestinal dan perkembangan pencernaan asam pada larva dan
518–524.https://doi.org/10.1016/j.physbeh.2006.10.017   juvenil awalsparus aurata  Pisces: Teleostei). Laut. Biol. 144, 863–869  
Wen ZP, Zhou XQ, Feng L, Jiang J, Liu Y, 2009. Pengaruh asam pantotenat diet Yúfera, M., Moyano, FJ, Astola, A., Pousão-Ferreira, P., Martínez-Rodríguez, G., 2012.
suplemen pada pertumbuhan, komposisi tubuh dan aktivitas enzim usus ikan mas Jian Pencernaan asam dalam teleost: pola postprandial dan sirkadian pH lambung, aktivitas
remaja (Cyprinus carpiovar. Jian). Aquac. Memelihara 15, 470–476.https://doi.org/10.1111/ pepsin, dan ekspresi mRNA pompa pepsinogen dan proton. PLoS Satu 7, 1–9. https://
j.1365-2095.2008.00612.x   doi.org/10.1371/journal.pone.0033687  
Xiong, DM, Xie, CX, Zhang, HJ, Liu, HP, 2011. Enzim pencernaan sepanjang sistem pencernaan Zeytin, S., Schulz, C., Ueberschär, B., 2016. Pola harian aktivitas enzim tryptic
saluran ikan karnivoraMakulatum Glyptosternum  Sisoridae, Siluriformes). di bawah rezim makan yang berbeda di gilthead sea bream (sparus aurata) larva.
Akuakultur 457, 85–90.https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2016.02.017