BIOSAFETY CABINET

Dosen Pembimbing :
Basti Andriyoko, dr., SpPK(K)

PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER SPESIALIS

PATOLOGI KLINIK

FAKULTAS KEDOKTERAN
UNIVERSITAS PADJADJARAN
2023

1
 I. Biohazard dan Biosafety
Biohazard didefinisikan sebagai agen infeksius yang dapat berisiko atau berpotensi
mengganggu kesejahteraan manusia, hewan dan / atau tanaman, baik itu secara langsung yaitu
melalui infeksi ataupun secara tidak langsung melalui gangguan lingkungan. Centers for
Disease Control (CDC) dan National Institutes of Health (NIH) telah menetapkan biosafety
menjadi 4 tingkatan (level) berdasarkan kombinasi praktik dan teknik laboratoriumoratorium,
perlengkapan keselamatan dan fasilitas.

Tabel 1. Perbedaan Level Biosafety dan Agen Infeksius

Agen Praktik dan Perlengkapan
Level Contoh Agen Fasilitas
Infeksius Teknik Keselamatan
1 Belum Bacillus subtilis, Praktik Tidak dibutuhkan Diperlukan
diketahui Naegleria gruberi, mikrobiologis Open benchtop
Infectious canine, standar sink
hepatitis virus,
E.Coli
2 Terkait dengan Measles virus, Level 1 dengan Perlindungan Level 1 dengan
penyakit salmonellae, tambahan: pertama: tambahan:
manusia. Toxoplasma spp,  Pembatasan akses  BSC Kelas I  Tersedianya
Penularan Hepatitis B Virus.  Tanda peringatan atau II atau autoklaf
primer melalui biohazard perangkat
cedera  Tindakan perlindungan
perkutan, pencegahan fisik lainnya
makanan, "benda tajam" yang
paparan selaput  Manual Biosafety digunakan
lendir untuk menentukan untuk semua
Dekontaminasi agen yang
Limbah yang menyebabkan
Diperlukan atau percikan atau
Kebijakan aerosol bahan
menular.

2
 Pengawasan
Medis Alat pelindung
 Perlindungan diri: jas
pernapasan sesuai laboratorium,
kebutuhan sarung tangan,
perlindungan
wajah sesuai
kebutuhan

3 Agen asli atau M. Tuberculosis, Level 2 dengan Perlindungan Level 2 dengan

asing dengan St. louis encepha tambahan: Pertama: tambahan:
potensi - litis virus,  Pengendalian BSC Kelas I atau  Pemisahan
penularan Coxiella Burnetii, Akses II atau perangkat fisik dari
aerosol, Bacillus  Dekontaminasi penahanan fisik koridor akses
penyakit anthracis limbah lainnya yang  Akses pintu
mungkin (production  Dekontaminasi digunakan untuk ganda yang
memiliki level) pakaian semua agen. menutup
konsekuensi laboratorium sendiri
serius atau  Sampel serum Peralatan  Udara dari
mematikan dasar personel Pelindung pembuangan
laboratorium Pribadi: Pakaian tidak
Laboratorium, disirkulasi
Sarung Tangan, ulang
Perlindungan  Aliran udara
Pernafasan sesuai negatif ke
kebutuhan laboratorium
4 Agen Ebola zaire, Sin Level 3 dengan Perlindungan Level 3 dengan
berbahaya/ Nombre Virus, Rift tambahan: pertama: tambahan:
asing yang Valley Fever  Berganti pakaian Semua prosedur  Bangunan
menimbulkan sebelum masuk yang dilakukan di terpisah atau
risiko tinggi ke laboratorium BSC Kelas III zona terisolasi

3
 penyakit yang  Mandi saat atau I atau II  Sistem vakum
mengancam keluar dalam kombinasi pemasukan/
jiwa. Infeksi  Semua material dengan pakaian pembuangan
laboratoriumor didekontaminasi full -body, yang dan sistem
atorium yang saat keluar dari disuplai oleh dekontaminasi
ditransmisikan laboratorium udara, dan  Persyaratan
aerosol atau bertekanan positif tambahan
agen terkait sebagaimana
dengan risiko diuraikan
penularan yang dalam
tidak diketahui biosafety di
laboratorium
mikrobiologis
dan biomedis

II. Biological Safety Cabinets - BSC

Istilah biological safety cabinet and biosafety cabinet telah banyak digunakan untuk
menggambarkan berbagai perangkat tambahan yang dilengkapi dengan filter HEPA, yang
dirancang untuk memberikan perlindungan personal atau keduanya dari produk bahan-bahan
yang bersifat berbahaya.
Istilah-istilah tersebut hanya boleh diterapkan pada perangkat yang memenuhi
persyaratan spesifikasi Kelas I, II, atau III, berdasarkan konstruksi, kecepatan dan pola aliran
udara, serta sistem pembuangannya.

Tabel 2. Kelas BSC (Biological Safety Cabinet)

Kecepatan Udara Kontrol
Udara
aliran daur Pleno Alternatif Level
Kelas pembuangan
masuk ulang Dikelilingi pembuangan Biosafety
(%)
(m/s) (%) oleh:
US:0.38 Dalam
I 0 100 Udara luar 1,2,&3
EN:0.40 ruangan/saluran keras

4
 Dalam
II tipe US:0.38
0 100 Udara luar ruangan/saluran 1,2,&3
A1 EN:0.40
thimble
Dalam
II tipe US:0.50 Pleno
70 30 ruangan/saluran 1,2,&3
A2 EN:0.40 negative
thimble
II tipe US:0.50 Pleno
70 30 Hanya saluran keras 1,2,&3
B1 EN:0.40 negatif
II tipe US:0.50 Pleno
30 70 Hanya saluran keras 1,2,&3
B2 EN:NA negative
Closed: * Pleno Dalam 1,2,3,&4
III 0 100
>0.5”WC negative ruangan/saluran keras

Gambar 1. Kelas II Tipe A2 BSC Gambar 2. Kelas II Tipe B2

5
 Gambar 3. Kelas III BSC

A. Filter HEPA & ULPA

Filter HEPA merupakan jantung dari BCS. Filter HEPA adalah filter tipe kering
sekali pakai, dibangun dari mikrofiber borosilikat yang dilemparkan ke dalam lembaran
tipis, seperti selembar kertas.
 HEPA : High Efficiency Particulate Air (Udara Partikulat Efisiensi Tinggi): HEPA
"Konvensi Amerika" modern: 99,99% pada 0,3 mikron
 ULPA : Ultra Low Penetration air (Udara Penetrasi Ultra Low): ULPA "Konvensi
Amerika" modern: 99,999% pada 0,12 mikron

Filter HEPA/ ULPA dirancang untuk menghilangkan berbagai kontaminan yang ada
di udara, termasuk:
 Debu halus
 Asap
 Bakteri (ukuran tipikal: 500 hingga 0,3 mikron)
 Jelaga
 Serbuk sari
 Partikel radioaktif
 Ion kotor yang dapat mempengaruhi kecepatan sirkuit terintegrasi

6
III. Pemilihan, Pemasangan, dan Penggunaan BSC yang tepat
A. Pemilihan BSC
BSC harus dipilih terutama sesuai dengan jenis perlindungan yang diperlukan:
perlindungan produk; Perlindungan personil terhadap kelompok mikroorganisme risiko
1-4; perlindungan personel terhadap paparan radionuklida dan bahan kimia beracun
yang mudah menguap; atau kombinasi dari ini. Tabel berikut menunjukkan BSC mana
yang direkomendasikan untuk setiap jenis perlindungan.
Tabel 3. Pemilihan BSC
Jenis Perlindungan Pemilihan BSC
Perlindungan Personil, Mikroorganisme dalam Kelas I, II, III
Kelompok Risiko 1-3
Perlindungan Personil, Mikroorganisme dalam Kelas III
Kelompok Risiko 4, sarung tangan
Laboratoriumoratorium
Perlindungan Personil, Mikroorganisme dalam Kelas I, II
Kelompok Risiko 4, jas laboratoriumoratorium
Perlindungan produk Kelas II, Kelas III Hanya Jika
Termasuk Aliran Laminar
Perlindungan Radionuklida / kimia yang Kelas II Tipe B1, Kelas II Tipe
mudah menguap, hitungan menit A2 yang memiliki ventilasi ke
luar
Perlindungan Radionuklida / kimia Kelas I, Kelas II tipe B2, Kelas
III

B. Penggunaan BSC di Laboratorium

1. Lokasi
Idealnya, BSC harus ditempatkan di lokasi yang jauh dari lalu lintas dan berpotensi
mengganggu arus udara. Jika memungkinkan, jarak bebas 30 cm harus disediakan
di belakang dan di setiap sisi BSC untuk memudahkan akses. Jarak 30-35 cm di

7
 atas BSC mungkin diperlukan untuk menyediakan pengukuran akurat kecepatan
udara yang melintasi filter pembuangan dan untuk penggantian filter pembuangan.

2. Operator
Jika BSC tidak digunakan dengan benar, manfaat perlindungannya dapat sangat
berkurang. Operator harus berhati-hati untuk menjaga integritas aliran masuk udara.
Lengan harus digerakkan masuk dan keluar perlahan, tegak lurus dengan bukaan
depan.
Alat dan bahan pengerjaan di dalam BSC harus ditunda selama sekitar 1 menit
setelah meletakkan tangan dan lengan di dalam agar BSC dapat menyesuaikan dan
"membersihkan udara" permukaan tangan dan lengan. Jumlah gerakan melintasi
bukaan depan juga harus diminimalisir dengan menempatkan semua barang yang
diperlukan ke dalam BSC sebelum memulai pengerjaan.

3. Penempatan bahan
Lubang-lubang yang ada didepan BSC Kelas II tidak boleh terhalang oleh kertas,
peralatan, atau benda lain. Bahan yang akan ditempatkan di dalam kabinet harus
didekontaminasi permukaannya dengan alkohol 70%.
Semua bahan harus ditempatkan jauh di belakang BSC, menuju tepi belakang
permukaan kerja, praktis tanpa menghalangi grill belakang. Peralatan penghasil
aerosol harus ditempatkan di bagian belakang BSC.
Barang berukuran besar harus ditempatkan di salah satu sisi bagian dalam BSC.
Kantung pengumpul bahan berbahaya yang dapat diautoklaf dan wadah pengumpul
pipet tidak boleh diletakkan di luar BSC.

4. Operasi dan Pemeliharaan

BSC harus dihidupkan setidaknya 5 menit sebelum memulai pekerjaan dan setelah
pekerjaan selesai. Hal ini untuk memungkinkan BSC "membersihkan diri", yaitu
untuk memberikan waktu agar udara yang terkontaminasi dikeluarkan dari
lingkungan BSC.

8
 Semua perbaikan yang dilakukan pada BSC harus dilakukan oleh teknisi yang
berkualifikasi. Setiap malfungsi dalam pengoperasian BSC harus dilaporkan dan
diperbaiki sebelum BSC digunakan kembali.

5. Sinar UV
Sinar ultraviolet tidak diperlukan dalam BSC. Jika digunakan, mereka harus
dibersihkan setiap minggu untuk menghilangkan debu dan kotoran yang dapat
menghalangi efektivitas cahaya.
Sinar ultraviolet harus dimatikan saat ruangan ditempati, untuk melindungi mata
dan kulit dari paparan yang tidak disengaja.

6. Pembakaran terbuka
Pembakaran terbuka harus dihindari di lingkungan yang hampir bebas mikroba
yang dibuat di dalam BSC. Untuk mensterilkan loop bakteriologis, tersedia
pembakar mikro atau "tungku" listrik dan lebih disukai daripada pembakaran
terbuka.

7. Tumpahan
Ketika terjadi tumpahan bahan berbahaya di dalam BSC, pembersihan harus segera
dimulai, sementara alat terus beroperasi. Disinfektan yang efektif harus digunakan
dan diterapkan dengan cara yang meminimalkan pembentukan aerosol. Semua
bahan yang bersentuhan dengan bahan tumpahan harus didesinfeksi dan/atau
diautoklaf.

8. Sertifikasi tahunan
Operasi fungsional dan integritas setiap BSC harus disertifikasi dengan standar
kinerja nasional atau internasional pada saat pemasangan dan selanjutnya secara
teratur oleh teknisi yang memenuhi syarat, sesuai dengan petunjuk pabrik awal.

9. Pembersihan dan disinfeksi

9
 Semua barang di dalam BSC, termasuk peralatan, harus didekontaminasi
permukaannya dan dikeluarkan dari kabinet saat pekerjaan selesai. Permukaan
interior BSC harus didekontaminasi sebelum dan sesudah digunakan. Permukaan
kerja dan dinding interior harus dilap dengan disinfektan.
Selesai kerja, dekontaminasi permukaan akhir harus mencakup pembersihan
permukaan kerja, sisi, belakang, dan bagian dalam BSC. Larutan pemutih atau
alkohol 70% harus digunakan jika dirasa efektif. Penyekaan kedua dengan air steril
diperlukan saat disinfektan korosif, seperti pemutih, digunakan. Disarankan agar
BSC dibiarkan berjalan. Jika tidak, itu harus dijalankan dahulu selama 5 menit
sebelum dimatikan untuk membersihkan atmosfer di dalamnya.

10. Dekontaminasi
Metode dekontaminasi yang paling umum adalah dengan pengasapan dengan gas
formaldehida. Di beberapa negara Eropa yang melarang formaldehida,
dekontaminasi dapat dilakukan dengan klorin dioksida atau hidrogen peroksida
(metode STERIS dan BIOQUELL).

11. Alat Pelindung Diri

Jas laboratorium dapat dipakai untuk melakukan pekerjaan pada BSC tingkat 1 dan
2. Baju laboratorium dengan penutup depan dan belakang yang kokoh memberikan
perlindungan yang lebih baik dan harus digunakan pada kondisi BSC tingkat 3 dan
4.
Sarung tangan harus ditarik ke pergelangan gaun. Lengan elastis dapat dikenakan
untuk melindungi pergelangan tangan. Masker dan kaca mata pengaman mungkin
diperlukan untuk beberapa prosedur.

12. Alarm
BSC dapat dilengkapi dengan salah satu dari dua jenis alarm. Alarm sash hanya
ditemukan di BSC dengan pintu geser. Alarm menandakan bahwa operator telah
memindahkan selempang ke posisi yang tidak benar.

10
 Alarm aliran udara menunjukkan gangguan pada pola aliran udara normal BSC. Ini
merupakan bahaya langsung bagi operator atau produk.

13. Informasi Tambahan

Sangat disarankan agar BSC berada di bawah pengawasan profesional yang terlatih
dan berpengalaman. Profesional harus sangat akrab dengan literatur relevan, dan
harus dilatih tentang semua aspek BSC. Operator harus menerima pelatihan formal
dalam pengoperasian dan penggunaan BSC.

C. Penggunaan BSC yang aman

1. Permulaan
 Kenakan sarung tangan untuk perlindungan tangan
 Isi peralatan dengan semua barang yang diperlukan sebelum memulai pekerjaan
dan dekontaminasi permukaan
 Dekontaminasi permukaan kerja, dinding samping dan dinding belakang bagian
dalam
 Biarkan udara zona kerja bersih selama beberapa menit sebelum mulai bekerja
 Jangan memenuhi zona kerja
 Tutup katup kuras sebelum pengoperasian
2. Operasi (Saat Penggunaan)
 Jangan menghalangi lubang-lubang udara depan atau belakang
 Bekerja sejauh mungkin ke dalam peralatan
 Minimalkan gerakan lengan; buat gerakan lambat untuk menghindari gangguan
aliran udara peralatan
 Saat melepas lengan dari peralatan pastikan ke permukaan dekontaminasi
terlebih dahulu, dan gerakkan lengan keluar perlahan dari peralatan (ke arah
tegak lurus terhadap bidang bukaan zona kerja)
 Minimalkan gangguan aliran udara eksternal
 Bekerja dari "bersih menjadi kotor"
 Tas pengumpul bahan berbahaya harus ditempatkan di dalam BSC, bukan di luar

11
  Gunakan bantalan penyerap pada permukaan kerja yang sesuai untuk
meminimalkan percikan dan pembentukan aerosol jika terjadi tumpahan
 Dekontaminasi permukaan sebelum mengeluarkan barang yang berpotensi
terkontaminasi dari interior
 Tempatkan instrumen penghasil aerosol sejauh mungkin ke bagian dalam
peralatan
 Bahan bersih harus berjarak minimal 150 mm dari objek penghasil aerosol untuk
meminimalkan kemungkinan kontaminasi silang
 Pegang tutup/penutup di atas piring/pelat sampel untuk mencegah pelampiasan
udara ke bawah
 Jangan gunakan api gas jika memungkinkan karena mengganggu aliran udara
 Letakkan peralatan penghasil turbulensi udara seperti centrifuge, blender, atau
sonicator di 1/3 bagian belakang peralatan

3. Pembakar Bunsen
Pembakar dapat menyebabkan keluarnya udara dari dalam peralatan yang dapat
membahayakan operator. Pada peralatan Kelas II, perlindungan terhadap
kontaminasi silang juga harus dipertimbangkan. Ada insiden di mana pintu
peralatan pengaman Kelas II resirkulasi ditutup saat pembakar masih menyala,
menyebabkan panas menumpuk di peralatan yang merusak filter.
Keamanan Pembakar Bunsen:
 Pembakar elektronik yang secara otomatis mengurangi suplai gas untuk
mempertahankan nyala api yang lebih kecil selama periode tidak digunakan
 Katup pemutus darurat harus mudah dijangkau di dekat peralatan jika terjadi
keadaan darurat.
 Pembakar harus ditempatkan sejauh mungkin ke dalam ruang kerja alat untuk
meminimalkan pengaruhnya terhadap kinerja peralatan.
 Katup solenoida dapat saling bertautan dengan suplai gas untuk mematikan
kompor secara otomatis

4. Mematikan alat

12
 Mengoperasikan peralatan secara terus-menerus bila memungkinkan untuk
memaksimalkan perlindungan-dekontaminasi permukaan semua item
 Segel kantong bahan berbahaya jika digunakan
 Dekontaminasi permukaan dinding bagian dalam peralatan, dinding belakang,
permukaan kerja, panci penguras dan bagian dalam selempang geser/jendela
berengsel
 Biarkan udara zona kerja bersih
 Jika tersedia: pasang penutup depan atau pintu dan aktifkan lampu UV (jika
diinginkan)

5. Pemeliharaan Pengguna
 Penggantian pra-filter setiap 3 bulan sekali
 Penggantian lampu UV setahun sekali
 Verifikasi operasional jika sesuai (misalnya pemeriksaan alarm, pengukuran
aliran udara dasar, dll.)

IV. Prosedur pembersihan dan tumpahan bahan berbahaya

1. Di dalam BSC:
 Tunggu setidaknya lima menit agar BSC mengandung aerosol.
 Kenakan jas laboratorium, kacamata pengaman, dan sarung tangan selama
pembersihan.
 Biarkan peralatan bekerja selama pembersihan.
 Terapkan desinfektan dan biarkan waktu kontak minimal 20 menit.
 Bersihkan tumpahan dengan tisu sekali pakai yang dibasahi desinfektan.
 Bersihkan dinding, permukaan kerja, dan peralatan apa pun di dalam kabinet
dengan handuk kertas yang dibasahi disinfektan.
 Buang bahan sekali pakai yang terkontaminasi dengan menggunakan prosedur
pembuangan limbah bahan berbahaya yang sesuai (misalnya autoklaf atau BFI).
 Tempatkan barang-barang yang dapat digunakan kembali yang terkontaminasi
dalam kantong biohazard, wadah yang dapat diautoklaf dengan penutup atau
bungkus dengan koran sebelum autoklaf dan pembersihan.
13
  Paparkan bahan yang tidak dapat diautoklaf dengan disinfektan (waktu kontak 20
menit) sebelum dikeluarkan dari BSC.
 Lepas pakaian pelindung yang digunakan selama pembersihan dan masukkan ke
dalam kantong biohazard untuk autoklaf.
 Jalankan peralatan 10 menit setelah pembersihan sebelum melanjutkan pekerjaan
atau mematikan peralatan.

2. Di Dalam Laboratorium, Di Luar BSC:

 Hubungi kantor BSC jika bahannya mengandung BSL-2 atau lebih besar.
 Bersihkan area dari semua personel. Tunggu setidaknya 15 menit hingga aerosol
mengendap sebelum memasuki area tumpahan.
 Lepaskan semua pakaian yang terkontaminasi dan masukkan ke dalam kantong
biohazard untuk diautoklaf.
 Kenakan jubah sekali pakai, kacamata keselamatan, dan sarung tangan.

Langkah memulai pembersihan dengan disinfektan sebagai berikut:

1. Tempatkan handuk kertas kering di atas tumpahan (untuk menyerap cairan);
kemudian lapisi set kedua handuk kertas yang dibasahi desinfektan di atas
tumpahan.
2. Lingkari tumpahan dengan disinfektan tambahan dengan hati-hati untuk
meminimalkan aerosolisasi sambil memastikan kontak yang memadai.
3. Dekontaminasi semua barang di area tumpahan.
4. Biarkan waktu kontak 20 menit untuk memastikan tindakan disinfektan.
5. Bersihkan peralatan dengan disinfektan yang sesuai.
6. Buang bahan sekali pakai yang terkontaminasi menggunakan prosedur
pembuangan limbah biohazard yang sesuai (misalnya, autoklaf atau BFI).
7. Desinfeksi barang-barang yang dapat digunakan kembali.

3. Di dalam Centrifuge
 Bersihkan area dari semua personel.

14
  Tunggu 30 menit hingga aerosol mengendap sebelum mencoba membersihkan
tumpahan.
 Kenakan jas laboratorium, kacamata pengaman, dan sarung tangan selama
pembersihan.
 Pindahkan bagian generator yang berputar dan wadah ke lemari pengaman biologis
terdekat untuk dibersihkan.
 Disinfeksi bagian dalam centrifuge secara menyeluruh.
 Buang bahan sekali pakai yang terkontaminasi menggunakan biohazard yang tepat
 Prosedur pembuangan limbah (misalnya, autoklaf atau BFI).

4. Di Luar Laboratorium, Dalam Perjalanan

 Pindahkan bahan berbahaya dalam wadah utama yang tidak dapat dipecahkan dan
disegel dengan baik, yang ditempatkan di dalam wadah kedua yang tidak dapat
dipecahkan dan berpenutup (pendingin, panci atau ember plastik) yang diberi
laboratoriumel dengan simbol bahan berbahaya.
 Jika terjadi tumpahan di tempat umum, jangan mencoba membersihkannya tanpa
alat pelindung diri yang sesuai.
 Amankan area, jauhkan semua orang dari tumpahan.
 Hubungi bantuan profesional untuk membantu pembersihan.
 Berjaga selama pembersihan tumpahan dan berikan bantuan hanya sesuai
permintaan atau seperlunya.

15