LAPORAN RESMI

PRAKTIKUM PENGEMBANGAN OBAT TRADISIONAL

PERCOBAAN 1
PEMBUATAN DAN STANDARISASI SIMPLISIA

Nama : Nur Ashsiddiqiyyah Syarifuddin

NIM : 2000023183
Kel/Gol : 5/4
Hari, Tgl Praktikum : Selasa, 21 Maret 2022
Asisten Dosen : Zainab, M.Si., Apt
Asisten Mahasiswa :

LABORATORIUM PENGEMBANGAN OBAT TRADISIONAL

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS AHMAD DAHLAN
YOGYAKARTA
 2023
PERCOBAAN 1
PEMBUATAN DAN STANDARISASI SIMPLISIA
A. TUJUAN PRAKTIKUM
• Mahasiswa mampu membuat simplisia yang akan digunakan sebagai bahan baku
pembuatan ekstrak bahan alam.
• Mahasiswa mengetahui proses standarisasi bahan alam mulai dari uji organoleptis,
uji makroskopis, uji mikroskopis, uji kualitatif dan kuantitatif kandungan kimia dan
kromatografi.
• Mahasiswa mengetahui tentang parameter spesifik dan non spesifik dalam
standarisasi bahan alam.

B. DASAR TEORI
Dalam praktik kefarmasian, bahan yang digunakan dalam bentuk simplisia.
Simplisia adalah bahan yang belum mengalami perubahan apapun kecuali bahan alam
yan dikeringkan. Simplisia dapat berupa :
1. Simplisia nabati, adalah simplisia dari tanaman utuh, bagian tanaman atau
eksudat yaitu isi sel yang spontan keluar dari tanaman atau dikeluarkan dari
selnya dengan cara tertentu
2. Simplisia hewani adalah simplisia dari hewan berupa hewan utuh atau bagian
hewan berupa zat-zat berguna yang dihasilkan dan belum berupa zat kimia
murni
3. Simplisia pelican atau mineral adalah simplisia yang belum diolah dengan cara
sederhana dan belum berupa zat kimia murni (DepKes RI, 1985).
Atau dapat juga dikatakan simplisia merupakan bahan alam yang telah
dikeringkan yang digunakan untuk pengobatan dan belum mengalami pengolahan.
Pengeringan dapat dilakukan dengan penjemuran di bawah sinar matahari, diangin-
angin, atau menggunakan oven, kecuali dinyatakan lain suhu pengeringan dengan oven
tidak lebih dari 60℃ (FHI, 2017).
Tahapan membuat simplisia umumnya melalui tahap seperti berikut:
pengumpulan bahan baku, sortasi basah, pencucian, perajangan, pengeringan, sortasi
kering, pengepakan, penyimpanan, dan pemeriksaan mutu (DepKes, 1985).

Pemeriksaan mutu simplisia dilakukan dengan cara organoleptis meliputi

bentuk, warna, rasa, bau, dan tekstur. Kemudian juga dengan pengujian mikroskopis
untuk mengamati ciri-ciri anatomi histologi untuk menegaskan keaslian simplisia dan
 pemeriksaan mutu berdasarkan senyawa aktif. Beberapa jenis simplisia tertentu ada
yang perlu diperiksa dengan uji mutu kimia dan biologi.
Menurut Utami 2016, Standarisasi merupakan tahapan penting dalam
melakukan penelitian dan pengembangan obat bahan alam di Indonesia untuk
menjamin mutu dan keamanandari sediaan obat tersebut. Standarisasi simplisia dan
ekstrak secara kualitatif meliputi parameter spesifik dan parameter non-spesifik.

C. ALAT DAN BAHAN

1. Alat : Mikroskop dan optilab, kaca pembesar, penggaris, alat tulis, pinset, objek glass,
cover glass, pipet tetes, tabung reaksi, rak tabung.
2. Bahan : Simplisia utuh dan serbuk simplisia (daun jambu biji dan daun teh), larutan
kloralhidrat, akuades, pereaksi KOH 5%, HCl, pereaksi Meyer, pereaksi Dragendroff,
H2O2, toluen, pereaksi FeCl3, uap amonia, NaCl 2%, gelatin 1%, KOH 1 N, asam 3,5
– dinitro-benzoat, kloroform. Simplisia pembanding (serbuk daun meniran, biji merica,
daun tempuyung, daun digitalis atau daun nerii, klerak, akar klembak, daun belimbing
wuluh, cengkeh).

D. CARA KERJA
1. Uji organoleptis simplisia terdiri dari:
• Uji warna → dilakukan dibawah sinar lampu putih
• Uji bau → simplisia diremas dengan ibu jari dan telunjuk atau dengan kedua
telapak tangan →hirup baunya perlahan
• Uji rasa → letakkan simplisia di lidah → dikecap-kecap selama 10-50 detik →
keluarkan cuplikan dari mulut → kumur dengan air
2. Uji Makroskopik simplisia bentuk utuh dan serbuk
• Simplisia utuh: diamati bentuk, ukuran, warna, karakteristik, tekstur. Simplisia
• bentuk serbuk: diamati bentuk, warna, tekstur (halus, kasar, dll).
3. Uji Mikroskopis serbuk simplisia

Amati fragmen
Ambil sedikit Tambah 3 tetes
Tutup cover gelas, pengenalnya dan
sampel dan kloralhidrat dan
amati dibawah bandingkan dengan
letakkan diatas dihangatkan di
mikroskop buku FHI, foto min 4
objek glass atas api
fragmen berbeda

4. Uji kualitatif kandungan kimia

a. Pengujian Pendahuluan

Larutan yang dihasilkan bila

berwarna kuning sampai
Lakukan di atas merah menunjukkan adanya Bila larutan ditambah
Sampel ± 200 mg
penangas air mendidih, senyawa yang mengandung larutan KOH (3 tetes),
dipanaskan dengan air
larutan yang terjadi kromofor (flavonoid, warna larutan akan
(10 ml) selama 30 menit
disaring dengan kapas. antrakinon dan sebagainya), menjadi lebih intensif.
dengan gugus hidrofilik (gula,
asam fenolat dan sebagainya)
b. Pengujian Alkaloid
Sampel ± 200 mg
dipanaskan dalam
tabung reaksi besar
masukkan dalam tabung
dengan HCl 1% (10 ml)
selama 30 menit diatas
reaksi II sama banyak.
penangas air mendidih.
c. Uji Antrakinon
Sampel ± 200 mg didihkan
selama 2 menit dengan KOH 0,5
N (10 ml) dan larutan Hidrogen
peroksida 1 ml. Setelah dingin,
suspensi disaring melalui kapas.
d. Uji Flavonoid
Sampel ± 200 mg disari dengan
etanol 70% 10 ml dan disaring.
Filtrat diteteskan pada kertas
saring
e. Uji polifenol
Sampel ± 200 mg dipanaskan dengan
air (10 ml) selama 20 menit dalam
penangas air mendidih kemudian
disaring panas-panas.
f. Uji Tanin
Sampel ± 200 mg dipanaskan
dengan air (10 ml) selama 30
menit di atas penangas air,
kemudian disaring.
g. Uji Kardenolida
Filtrat (2 ml) sama
dengan uji tanin
(tahap a), ditambah
asam 3,5 –
dinitrobenzoat (0,4
ml) dan KOH 1 N (0,6)
dalam metanol
h. Uji Saponin
Sampel ± 200 mg dalam tabung
reaksi, ditambah 10 ml air suling,
tutup dan kocok kuat-kuat
selama 30 detik.
Cara II:
Serbuk tumbuhan (2
g) ditambah air 10 ml,
dipanaskan di atas
penangas air selama
30 menit, kemudian
disaring.
Larutan 1 dibagi dua sama
Suspensi disaring Bila dengan kedua
banyak, lalu ke dalam larutan ia
dengan kapas dan pereaksi tersebut
ditambah pereaksi Dragendorff
terbentuk endapan,
(3 tetes) dan larutan 1b
reaksi 1 dan tabung menunjukkan adanya
ditambah pereaksi Mayer (3
alkaloid.
tetes)
Kemudian tambahkan
Fitrat (5 ml) ditambah Kocok pelan-pelan, diamkan
KOH 0,5 N, jika timbul
asam asetat (10 tetes) sebentar, lapisan atas (5 ml)
warna merah pada
sampai pH 5, kemudian diambil dengan pipet dan
lapisan air (basa)
ditambah toluena (10 dimasukkan dalam tabung
menunjukkan adanya
ml). reaksi
senyawa antrakinon.
Kertas saring dikeringkan, Perubahan warna dari kuning
kemudian diuapi dengan pucat menjadi kuning intensif,
amoniak. menunjukkan adanya flavonoid.
Setelah dingin ditambah FeCl3 Uji diulang, tapi dengan filtrat hasil
sebanyak 3 tetes. Jika timbul warna pendidihan serbuk tumbuhan (2 g)
hijau biru menujukkan adanya dengan etanol 80% (10 ml) selama 10
polifenol menit dalam penangas air.
Filtrat (5 ml) ditambah larutan Filtrat ditambah larutan gelatin
NaCl 2% (1 ml), bila terjadi 1% (5 ml), bila timbul endapan
suspensi atau endapan disaring menunjukkan adanya tanin atau
melalui kertas saring. zat samak.
Lapisan atas diambil
dengan pipet,
sedangkan lapisan
Bila timbul warna Untuk penegasan,
bawah ditambah
biru ungu filtrat yang lain (2 ml)
dengan asam 3,5-
menunjukkan adanya ditambah kloroform
dinitrobenzoat (0,5)
kardenolida (glikosida (2 ml) kocok dan
ml). Bila timbul warna
jantung) biarkan sebentar.
biru-ungu
menunjukkan adanya
kardenolida.
Apabila timbul buih setinggi
Biarkan tabung dalam kurang lebih 3 cm dari permukaan
posisi tegak selama 30 yang tidak hilang setelah ditetesi
menit. HCl encer, menunjukkan adanya
saponin.
Kapiler diletakkan Bila tinggi cairan yang
dalam posisi tegak diuji setengah atau
Filtrat dimasukkan ke (vertikal), kemudian kurang dari tinggi air
dalam pipa kapiler cairan dibiarkan suling, maka sampel
(diameter 2 mm, mengalir bebas. ada kemungkinan
panjang 12,5 cm) Tinggi cairan mengandung
penuh-penuh. dibandingkan dengan saponin. Hasil
tinggi air suling yang disajikan dalam
diperlakukan sama. bentuk tabel III.
5. Pola Kromatografi Prosedur KLT
a. Parameter KLT daun teh
• Fase gerak = Toluen : P-aseton : P-asam format (5:4:1)
• Fase diam = Silica gel 60 F254
• Larutan uji = 5% dalam methanol P
• Larutan pembanding = Katekin 1% dalam Metanol P
• Volume penotolan = 10 µl Larutan Uji dan 5 µl larutan pembanding
• Deteksi = UV254
b. Penjenuhan Bejana
Kertas saring dimasukkan dalam bejana. Masukkan sejumlah fase gerak, hingga
tingginya 0,5 sampai 1 cm dari dasar bejana. Tutup kedap dan biarkan hingga
kertas saring basah seluruhnya.
c. Prosedur KLT
Totolkan larutan uji, larutan pembanding, serta larutan campuran dengan jarak 1,5
sampai 2 cm dari tepi bawah lempeng, dan biarkan mengering. Tempatkan
lempeng dalam bejana, penotolan disebelah bawah. Bagian bawah lempeng harus
menyentuh fase gerak. Tutup bejana, biarkan fase gerak sampai batas atas.
Keluarkan lempeng, amati bercak di sinar UV, tentukan harga Rf.
6. Uji Kuantitatif Kandungan Kimia
a. Penetapan Kadar Flavonoid Total
Untuk simplisia :
Timbang saksama lebih
kurang 1 g serbuk simplisia, Saring ke dalam labu tentukur
Ekstraksi selama 1 jam dengan
masukkan ke dalam labu 25 mL. Lalu tambahkan
pengaduk magnetik.
Erlenmeyer, tambahkan 25 metanol P sampai tanda
mL metanol P

Untuk pembanding :
Timbang saksama lebih
kurang 10 mg
pembanding, masukkan
dalam labu tentukur 25
mL.
Larutkan dalam metanol P
dan tambahkan metanol P
sampai tanda.
Buat seri pengenceran
larutan pembanding
dengan kadar berturut-
turut 100, 70, 50 dan 25
𝑢g/mL

Prosedur :
Pipet secara terpisah 0,5 mL
larutan uji dan masing-masing
larutan pembanding ke dalam Kocok dan diamkan 30 menit Lakukan pengukuran blanko
wadah yang sesuai, pada suhu kamar. Ukur dengan cara yang sama tanpa
tambahkan masing-masing serapan masing-masing pada penambahan larutan uji. Buat
dengan 1,5 mL etanol P, 0,1 panjang gelombang serapan kurva kalibrasi dan hitung
mL aluminium klorida 10%, maksimum. kadar larutan uji
0,1 mL natrium asetat 1M dan
2,8 mL air.
 b. Penetapan Kadar Fenol Total
Simplisia :
Timbang saksama lebih
kurang 1 g serbuk simplisia, Saring ke dalam labu tentukur
Ekstraksi selama 1 jam dengan
masukkan ke dalam labu 25 mL. Lalu tambahkan
pengaduk magnetik.
Erlenmeyer, tambahkan 25 mL metanol P sampai tanda
metanol P

Pembanding :
Timbang saksama lebih Buat seri pengenceran
kurang 10 mg Larutkan dalam metanol P larutan pembanding
pembanding, masukkan dan tambahkan metanol P dengan kadar berturut-
dalam labu tentukur 25 sampai tanda. turut 100, 70, 50, 30, 15
mL. dan 5 𝑢g/mL

Prosedur :
Pipet secara terpisah
1 mL larutan uji dan
masing-masing Lakukan pengukuran
larutan pembanding Ukur serapan masing- blanko dengan cara
Diamkan 8 menit,
ke dalam wadah yang masing pada panjang yang sama tanpa
tambahkan 4,0 mL
sesuai, tambahkan gelombang serapan penambahan larutan
NaOH 8%, inkubasi
masing-masing maksimum lebih uji. Buat kurva
selama 1 jam.
dengan 5,0 mL kurang 730 nm. kalibrasi dan hitung
enceran Folin kadar larutan uji
Ciocalteu LP (7,5%
dalam air).

E. HASIL PRAKTIKUM DAN PEMBAHASAN

Pada praktikum kali ini dilakukan percobaan pembuatan dan standarisasi simplisia.
Tujuan dari percobaan ini adalah membuat dan melakukan standarisasi simplisia yang akan
digunakan sebagai bahan baku pembuatan ekstrak bahan alam. Standarisasi simplisia
mempunyai pengertian bahwa simplisa yang digunakan sebagai bahan baku obat harus
memenuhi persyaratan yang tercantum dalam monografi terbitan resmi Departemen Kesehatan
(Materia Medika Indonesia), sedngkan sebagai produk yang langsung dikonsumsi harus
memenuhi persyaratan produk kefarmasian sesuai dengan peraturan yang berlaku. Dalam
percobaan ini kelompok kami memperoleh sampel daun teh dan larutan standar asam galat.
Ada beberapa uji yang dilakukan dalam percobaan ini, antara lain: uji organoleptis simplisia,
uji makroskopis simplisia serbuk, uji mikroskopis serbuk simplisia, uji kualitatif kandungan
kimia, dan pola kromatografi.

Tabel. 1 Uji Organoleptis

Parameter FHI Jilid 2, 2017 Hasil Percobaan

Uji
Warna Helaian daun hijau tua Hijau tua
Bau Tidak berbau Bau khas daun teh
Rasa Mula-mula tidak berasa, Awal-awal tidak berasa tetapi
lama-lama kelat dan pahit lama-kelamaan terasa pahit
dan kelat dan kelat
Tabel. 2 Uji Makroskopis
Parameter Hasil Percobaan
Simplisia utuh Helaian daun berbentuk bulat telur memanjang sampai
jorong, pangkal daun runcing, tepi bergerigi tajam,
melekuk ke dalam, kaku, ujung meruncing, permukaan
atas licin lebih mengilat, permukaan bawah kasar,
pertulangan daun menyirip, dengan ibu tulang daun
menonjol ke permukaan bawah.
Simplisia serbuk Berbentuk serbuk dengan tekstur kasar dan berwarna
hijau tua.

Tabel. 3 Uji Mikroskopis

Mikroskopis Simplisa
Daun Teh

Pembanding FHI 2017 Sampel

1. 2.

3. 4.

5. 6.
Tabel. 4 Uji Kualitatif Kandungan Kimia (Uji Tabung)
No Uji Tabung Daun Teh
Hasil Kesimpulan
1 Pendahuluan Warnakuning- Mengandung kromofor
merah

2 Alkaloid Tidak terbentuk endapan Tidak

mengandungalkaloid

3 Antrakinon Warnamerah Mengandung antrakinon

4 Flavonoid Kuning Mengandung

intensif flavonoid
5 Polifenol Warna
Mengandung polifenol
Hijau biru

6 Tanin Tidaktimbul Tidak mengandung

endapan tannin

7 Kardenolid Warna Coklat Tidak

mengandung kardenolida

8 Saponin Timbul Mengandung saponin

buih ± 3cm

*Nb: kolom hasil diisi perubahan warna atau terbentuknya endapan

 Tabel. 5 Kromatografi Lapis Tipis
Jarak yang ditempung
Rf =
analitJarak yang
ditempuh eluen

FHI Jilid 2, 2017 Hasil Percobaan Nilai Rf

•
•
• Rf sampel
7,8
1. Bercak 1 = = 0,975
8,0
7,6
2. Bercak 2 = = 0,95
8,0
6,9
3. Bercak 3 = = 0,8625
8,0
5,2
4. Bercak 4 = = 0,65
8,0

Rf pembanding
7,5
1. Bercak 1 = = 0,9375
8,0

6,9
2. Bercak 3 = = 0,8625
8,0

F. KESIMPULAN
Pada percobaan kali ini diperoleh hasil sebagai berikut :
1. Hasil Uji organoleptis simplisia (daun teh)
• Warna : Hijau tua
• Bau : Khas aromatik teh
• Rasa : Agak kelat
• Bentuk : Serbuk kasar
• Tekstur : Kasar
2. Uji mikroskopis simplisia
Hasil pengamatan mikroskopis didapatkan Kristal kalsium oksalat, sklerenkim,
makrosklereida, dan mesofil daun. Dari hasil praktikum sudah sesuai dengan FHI 2017.
3. Uji kandungan kimia
Hasil praktikum diperoleh hasil positif pada uji pendahuluan, uji antrakinon, uji
flavonoid, uji polifenol dan uji saponin. Sedangkan pada uji alkaloid diperoleh hasil
negative dan uji tanin.
4. Pola kromatografi
Hasil praktikum didapatkan Rf sampel sebesar 0,975, 0,95, 0,8625,dan 0,65 sedangkan
Rf pembanding sebesar 0,9375,dan 0,8625, sedangkan nilai Rx yang didapatkan adalah 0,5.
G. DAFTAR PUSTAKA
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1985). Cara Pembuatan
Simplisia. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (1995). Materia Medika Indonesia
Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. (2002). Parameter Standar Umum
Ekstrak Tumbuhan Obat. Derektorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan : Jakarta.
Depkes RI. 2017. Farmakope Herbal Indonesia. Edisi II. Jakarta: Departemen
Kesehatan Republik Indonesia.
Zainab, dkk. 2022. Petunjuk Praktikum Pengembangan Obat Tradisional.
Yogyakarta: Universitas Ahmad Dahlan.

H. LAMPIRAN

Simplisia Daun Teh Serbuk Simplisia Daun Teh

a. Uji Pendahuluan e. Uji Polifenol

Dragendrof Mayer
f. Uji Tanin
b. Uji Alkaloid
c. Uji Antrakinon g. Uji Kardenolida

h. Uji Saponin
d. Uji Flavonoid