Machine Translated by Google

Jurnal Kedokteran Hewan Maret 2017, 11(1):45-49

P-ISSN : 1978-225X; E-ISSN : 2502-5600 DOI: https://doi.org/10.21157/j.ked.hewan.v11i1.5810

KEMAMPUAN PEMBEKUAN SPERMA BANTENG PASUNDAN MENGGUNAKAN TRIS

KUNING TELUR, TRIS-SOY, DAN PENGECER ANDROMED®

Abdullah Baharun1 *, R.Iis Arifiantini2 dan Tuty, L. Yusuf2 1Prodi

Peternakan, Fakultas Pertanian, Universitas Djuanda, Bogor, Indonesia 2Divisi Reproduksi dan
Kebidanan, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor , Bogor, Indonesia
*Penulis koresponden: abdullah.baharun@ymail.com

ABSTRAK

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk menyelidiki kemampuan pembekuan spermatozoa banteng Pasundan dalam Tris-kuning telur (TEY), Tris-kedelai (TS), dan AndroMed®
sebagai pengencer. Semen dikumpulkan dua kali seminggu dari empat ekor sapi jantan Pasundan berumur 3-5 tahun menggunakan vagina buatan dan dievaluasi secara makro dan
mikroskopis. Semen memiliki motilitas sperma ÿ70%, konsentrasi sperma ÿ800x106 /mL, dan kelainan sperma kurang dari 20% dibagi menjadi tiga bagian yang masing-masing
diencerkan dengan TEY, TS, atau Andromed® . Setelah langkah kesetimbangan pada suhu 5°C selama empat jam, semen encer dikemas dalam 0,25 mL jerami, dibekukan dalam
nitrogen cair selama sepuluh menit dan disimpan dalam wadah nitrogen cair sampai pemeriksaan. Uji motilitas semen segar, encer, setimbang, dan setelah dicairkan dilakukan
dengan menggunakan Androvision® . Hasil penelitian menunjukkan bahwa setelah dicairkan motilitas sperma yang diencerkan dalam AndroMed® (58,64±0,72%) lebih tinggi
dibandingkan TEY (49,45±1,22%) dan TS (39,34±6,33%). Motilitas sperma sapi jantan Pasundan yang diencerkan dalam ketiga pengencer ini berkurang sekitar 33,27±2,45% selama
proses pembekuan.
______________________________________________________________________________________________________________________
Kata kunci: andromeda, kemampuan membekukan, banteng Pasundan, tris-kuning telur, tris-kedelai

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan mengetahui kemampuan bertahan spermatozoa sapi pasundan dalam proses pembekuan menggunakan pengencer tris kuning telur (TKT), tris soya
(TS), dan AndroMed® . Empat ekor pejantan sapi pasundan dengan umur sekitar 3-5 tahun dikoleksi semennya menggunakan vagina buatan dua kali dalam seminggu. Semen hasil
koleksi segera dievaluasi secara makroskopis dan mikroskopis. Semen dengan motilitas ÿ70%, konsentrasi ÿ800x106 / ml, dan abnormalitas spermatozoa ÿ20% dibagi tiga bagian,
masing-masing diencerkan menjadi 100x106 / ml, menggunakan pengencer TKT, TS, atau AndroMed® diekuilibrasi pada suhu 5°C selama empat jam, dan dikemas dalam straw
,
0,25 ml. Semen yang telah dikemas dibekukan dalam uap nitrogen cair selama sepuluh menit dan disimpan dalam kontainer untuk pengujian lebih lanjut. Pengujian motilitas
dilakukan menggunakan Androvision® pada semen segar, setelah pengenceran, setelah ekuilibrasi, dan post thawing.

Hasil penelitian menunjukkan motilitas spermatozoa post thawing dalam pengencer AndroMed® (58,64±0,72%) lebih tinggi dibandingkan pengencer TS (39,34±6,33%), namun tidak
berbeda dengan TKT (49,45±1,22%). Pengencer TKT tidak memperlihatkan perbedaan (P>0,05) dengan TS. Penurunan motilitas selama proses pembekuan pada sapi pasundan
adalah sebesar 33,27±2,45%.
______________________________________________________________________________________________________________________
Kata kunci: andromed, freezing capability, sapi pasundan, tris kuning telur, tris soya

PERKENALAN Untuk tujuan IB, semen harus dikumpulkan dari pejantan

Indonesia memiliki sejumlah sumber daya alam dan
genetik yang perlu dipertahankan keberadaannya seperti
sapi potong lokal. Sapi-sapi ini telah menunjukkan
produktivitas maksimum dan efisiensi ekonomi dalam
kondisi perkembangbiakan yang terbatas. Salah satu sapi
potong lokal adalah sapi Pasundan yang secara genetik
memiliki gen karakteristik sapi bali, sapi jawa, sapi ongole
dan sapi madura. Sapi ini telah ditetapkan sebagai salah
satu keanekaragaman hayati sapi potong Indonesia menurut
Keputusan Menteri Pertanian Republik Indonesia No.
1051/KPTS/SR.120/10/2014. Sapi pasundan mudah beradaptasi
dengan lingkungan, mudah berkembang biak, memiliki kualitas
karkas yang baik, dan relatif tahan terhadap penyakit tropis.
Populasi sapi Pasundan sekitar 52.540 ekor dan
tersebar di beberapa kabupaten seperti Ciamis (535 ekor),
Pangandaran (5.130 ekor), Tasikmalaya (7.231 ekor),
Cianjur (10.346 ekor), Sukabumi (12.897 ekor), Garut
(1.842 ekor) , Purwakarta (2.788 ekor), Kuningan (7.218
ekor), dan Majalengka (4.553 ekor) (Balai Peternakan Jawa
Barat, 2014). Provinsi Jawa Barat telah merencanakan
untuk meningkatkan mutu genetik sapi-sapi tersebut melalui
program inseminasi buatan (IB) dengan menggunakan
semen beku pejantan terpilih di Balai Inseminasi Buatan
(BBI) Daerah Ciamis-Jawa Barat).
terpilih, dengan menggunakan breeding soundness
Evaluation (BSE) termasuk evaluasi kualitas semen.
Kemampuan sperma bertahan selama proses pembekuan
(freezing ability) merupakan aspek penting untuk memilih
pejantan di pusat IB. Selama proses pembekuan
(cryopreservation) akan mengurangi viabilitas spermatozoa
yang disebabkan oleh pengencer hiper osmotik dan
perubahan suhu selama pembekuan. Kemampuan
pembekuan juga dipengaruhi oleh aspek individu hewan
(Arifiantini et al., 2014; Nalley et al., 2015), teknik
pembekuan, jenis dan konsentrasi krioprotektan (Aboagla
dan Terada, 2004) dan jenis pengencer (Arifiantini dan
Yusuf, 2010). Motilitas sperma menurun sekitar 40%
selama pembekuan. Untuk mencapai kualitas produksi
semen beku yang baik, diperlukan pengencer yang mampu
menjaga kualitas sperma selama proses pendinginan dan
pembekuan serta pada tahap pencairan (Aboagla dan
Terada, 2004).
Pengencer yang biasa digunakan untuk pengenceran
semen banteng adalah skim kuning telur, Tris-kuning telur
(TEY) (Arifiantini et al., 2005) dan pengencer komersial
berbahan dasar lesitin kedelai (Beran et al., 2012) seperti
Biochiphos plus® dan Bioxcell® (IMV, Prancis) dan
AndroMed® (Minitub, Jerman). Selama ini proses
pembekuan semen banteng Pasundan hanya menggunakan pengencer kom
Pengencer ini tidak selalu tersedia, yang berpotensi

45
Machine Translated by Google

Abdullah Baharun dkk.

mengganggu produksi semen beku. Arifiantini dan Yusuf (2010)
telah mengembangkan pengencer Tris-soy (TS) yang
dimodifikasi untuk pembekuan semen banteng dan menunjukkan
tingkat konsepsi yang sebanding dengan pengencer komersial.
Pengencer yang dimodifikasi mengandung Tris
(hidroksimetil) aminometana, buffer universal yang biasa
digunakan untuk semen beku dari beberapa hewan seperti rusa
(Tambing et al., 2004), ram (Rizal et al., 2003), rusa (Saenz,
2007), anjing (Yildiz et al., 2000), dan kerbau (Asr et al., 2011).
Selama ini Tris kombinasi dengan kuning telur dipercaya
sebagai pengencer yang memiliki kemampuan menjaga
stabilitas membran plasma lebih baik dibandingkan TS. Sifat
yang terkait dengan kandungan protein yang tinggi dalam
kuning telur dapat meminimalkan efek buruk dari proses
pembekuan pada sperma. Pengencer Tris-kedelai, di sisi lain,
dapat memberikan alternatif pengencer berbasis lesitin kedelai
yang menjanjikan untuk air mani. Mengingat kualitas semen
banteng Pasundan belum dipelajari secara komprehensif, dan
pengencer yang saat ini digunakan untuk semen banteng
Pasundan adalah Andromed® maka penelitian ini dilakukan
untuk mengetahui karakteristik semen dan kemampuan
pembekuan spermatozoa sapi Pasundan selama proses
pembekuan menggunakan TEY dan TS sebagai pengencer pembanding.
BAHAN DAN METODE
Empat ekor sapi jantan Pasundan terpilih dengan berat
300-350 kg dikandangkan secara individual yang dilengkapi
ransum dan tempat minum. Semua pejantan diberi pakan dua
kali sehari dengan rumput 10% dan konsentrat 1% dari total BB
dan air diberikan secara ad libitum.
1,78 g asam sitrat dan 1,25 g fruktosa ditambahkan dengan
aquabidest hingga 100 ml (TEY) dan buffer B terdiri dari 3,03 g
Tris hidroksimetil aminometana, 1,78 g asam sitrat dan 1,75 g
fruktosa ditambahkan dengan aquabidest hingga 100 mL (TS).
AndroMed® disiapkan sesuai dengan brosur. TEY mengandung
20 ml kuning telur dan pengencer TS mengandung 2,5 g susu
kedelai. Tris dengan dan Tris dengan kedelai awalnya
disentrifugasi pada 1.500 rpm selama 10 menit. Supernatan
dikumpulkan, dicampur masing-masing dengan 6 mL gliserol,
penisilin 1000 IU/mL, dan streptomisin 1 mg mL-1 dan
digunakan sebagai
pengencer.
Pengumpulan dan Evaluasi Semen
Semen dikumpulkan dua kali seminggu pada pagi hari
menggunakan vagina buatan. Segera setelah dikumpulkan,
semen dievaluasi secara makro dan mikroskopis.
Evaluasi makroskopik meliputi volume, warna, viskositas dan
, pH dengan menggunakan kertas indikator khusus.
Evaluasi mikroskopis termasuk pergerakan massa dilakukan di
bawah mikroskop dengan perbesaran 200 X. Persentase
motilitas progresif dilakukan dengan menggunakan instrumen
Computer
untuk Assisted
itu menggunakan
Sperma Analyse
Andromed®
(CASA)
. Androvision®
(Minitub-Germany).
Konsentrasi sperma diukur menggunakan fotometer (SDM 6;
Minitub-Germany) sedangkan viabilitas sperma dan persentase
morfologi ditentukan dengan pewarnaan eosin negrosin.
Selaput plasma sperma utuh diukur dengan mencampurkan 10
µL semen dengan 1 mL pembengkakan hipoosmotik (HOS-
Test) menggunakan larutan yang dibuat dari 7,35 g natrium-
sitrat dan 13,52 g fruktosa dalam 1000 mL air suling.

Persiapan Pengencer
Penelitian ini menggunakan pengencer Tris yang Proses Pembekuan Semen
dimodifikasi yaitu TEY, TS, dan pengencer komersial Semen segar memiliki motilitas sperma lebih tinggi dari
AndroMed® . Pengencer TEY dan TS dibuat dengan 70% dan konsentrasi sperma lebih dari 800x106 mL-1
dibagi menjadi tiga tabung. Air mani saat itu
menggunakan buffer Tris A yang terdiri dari 3,03 g Tris hidroksimetil aminometana,

Tabel 1. Motilitas sperma semen segar pejantan Pasundan

Banteng
Parameter Rata-rata±SE
R5 R4 R3 R2
A
Motilitas total 87,61±2,34a 89,37±2,32a90,53±2,74 89,44±2,35a
80,55±3,03a 82,41±2,97a Motilitas progresif Motilitas 89,91±1,80a
cepat 73,01±3,58a 73,82±3,98a 7,16±1,37a 8,26±1,88a
7.09±0.98a 5.45±1.19a 84,08±3,61 A Motilitas lambat 9,03±1,42±
83,67±2,92a
0,3a 0.63a 0.35±0.30a
81,35±2,30a
Lingkaran motilitas Motilitas lokal
77,24±4,08aImotil R5, R4, R3, R2 (identitas banteng).
6.89±1.80a 12.39±2.34a 10.56±2.35a 10.58±2.20a 73,93±3,23a
Huruf yang sama71,08±5,02a
setelah angka pada baris yang sama
6,79±1,55a menunjukkan perbedaan yang tidak Anyata (P>0,05).
10,04 ±3,16a
0,05±0,23a 0,22±0,13a
6,44±1,93a 8,58±3,09a
9,27±2,27a 10,09±1,83a

Tabel 2. Motilitas sperma sapi Pasundan setelah dibekukan dan dicairkan dalam tiga pengencer yang berbeda
Jenis pengencer (Rata-rata±SE)
Parameter
TEY (%) TS (%) Andromed® (%)
Motilitas total 62,59±2,12a 52,79±6,50a 49,45±1,22ab 71,64±0,78a
Motilitas progresif 39,34±6,33b 40,65±1,35ab 32,18±5,91b 8,42 58,64±0,72a
motilitas cepat ±0,22a 9,02±1,42a 0,02± 0,01a 0,01 ± 0,004a 51,05±1,53a
Motilitas lambat 21,04± 11,25 1.02a 37.62±2.18ab 48.16±6.58b 5,96±0,58a
Motilitas lingkaran a, ab, b Perbedaan superskrip pada baris yang 0,03±0,01a
A
motilitas lokal sama menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05); 7,94±0,93
Tidak bergerak TEY = Tris-kuning telur; TS= Tris-kedelai 28,36±0,78a

46
Machine Translated by Google

Abdullah Baharun dkk.

diencerkan dalam TEY, TS, atau AndroMed® (konsentrasi akhir
adalah 100x106 sperma mL-1 ). Semen diseimbangkan dalam
cool top (5°C) selama empat jam kemudian dikemas menggunakan
mesin pengisian dan penyegelan otomatis. Proses pembekuan
dilakukan menggunakan nitrogen cair dalam kotak styrofoam
berukuran 60x40x30 cm3 selama sepuluh menit. Semen beku
kemudian disimpan dalam wadah nitrogen cair (-196°C) untuk
pemeriksaan lebih lanjut.
Berdasarkan hasil pemeriksaan kualitas semen segar sapi
jantan Pasundan tergolong normal. Volume semen sapi Pasundan
adalah 3,80±0,58 mL. Menurut Arifiantini (2012), volume normal
semen sapi jantan berkisar antara 2 sampai 15 mL dengan rata-
rata 4-8 mL. Mengingat sapi Pasundan merupakan breed lokal,
volume semen yang terkumpul hampir sama dengan breed lokal
lainnya seperti sapi persilangan Bali, Madura, Jawa, dan Ongole,
yaitu berkisar antara 3,00-6,30 mL.

Evaluasi Semen
Evaluasi kualitas semen dilakukan pada semen segar, encer,
diseimbangkan, dan setelah dicairkan. Thawing dilakukan dalam
air hangat (37°C) selama 30 detik setelah 24 jam penyimpanan.
Analisis Data
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap
dengan pengukuran berulang terdiri dari tiga pengencer sebagai
perlakuan dengan masing-masing tiga kali ulangan. Data yang
diperoleh dianalisis dengan analisis varians (ANOVA). Tes
Duncan digunakan untuk membandingkan rata-rata perlakuan
(Steel dan Torrie, 1994).
HASIL DAN DISKUSI
Kualitas Semen Segar Banteng Pasundan
Evaluasi kualitas semen segar dilakukan untuk mengetahui
kualitas semen segar untuk proses pembekuan. Hasil penelitian
menunjukkan secara makroskopis semen sapi jantan Pasundan
menunjukkan volume rata-rata 3,80±0,58 mL, berwarna putih
hingga krem, konsistensi sedang hingga kental, dan kadar asam
(pH) 6,43±0,08. Pemeriksaan mikroskopis mengidentifikasi
motilitas massa berkisar antara ++ hingga +++ dan motilitas
sperma progresif konsentrasi 1355,85±6,06x106 mL-1 dengan
82,41±2,97%. Sperma viabilitas sperma dulu
(jumlah sperma hidup) 84,37±1,05%. Jumlah sperma dengan
membran utuh 84,89±1,00% dan abnormalitas sperma
11,13±0,39%.
Warna semen berkisar dari putih susu hingga krem. Hal ini
sejalan dengan Garner dan Hafez (2000) yang mengamati warna
ejakulasi normal semen sapi adalah krem sampai putih susu,
sedangkan semen dengan konsentrasi sperma rendah akan
berwarna keruh. Konsistensi atau tingkat kekentalan semen
banteng Pasundan encer sampai sedang dengan pH rata-rata
6,43±0,01. Semen sapi jantan normal memiliki konsistensi
berkisar dari sedang hingga kental dan pH berkisar antara 6,4
hingga 7,8 (Garner dan Hafez, 2000).
Berdasarkan pemeriksaan mikroskopis, pergerakan massa
semen sapi Pasundan berkisar antara ++ sampai +++, hal ini
termasuk pergerakan massa sperma sapi jantan yang normal.
Perbedaan motilitas semen yang dikumpulkan dari keempat ekor
sapi Pasundan tidak signifikan (Tabel 1). Nilai motilitas yang
diamati masih tergolong normal motilitas semen yang dilaporkan
oleh Garner dan Hafez (2000), yaitu 70% sampai 80%.
Konsentrasi sperma sapi jantan Pasundan adalah
1355.85±6.06x106 mL-1 . Nilai tersebut termasuk dalam kisaran
normal konsentrasi spermatozoa sapi dewasa yaitu 800-1200x106
mL-1 . Motilitas dan konsentrasi sperma yang tercatat dari sapi
Pasundan tidak berbeda dengan sapi Bali yang dilaporkan oleh
Arifiantini et al. (2006), masing-masing 71,04±3,69% dan
1,340±447,85 x106 mL-1 .
Viabilitas dan abnormalitas spermatozoa sapi Pasundan masing-
masing 84,37±1,05% dan 11,13±0,39% tidak berbeda dengan
sperma sapi jantan Bali yang tercatat 84,60±2,04% dan
10,00±1,22% (Matahine et al., 2014 ) .
Menurut Gordon (2003) warna, angka, volume, konsentrasi,
konsistensi, gerakan massa,

Tabel 3. Penurunan Motilitas Sperma Sapi Pasundan Selama Proses Pembekuan Pengencer

Proses
TEY TS Andromed® Rata-rata±SE
Semen segar sampai setelah pengenceran 0,33±2,05 1.7±2.27 2.33±1.80 1,45±0,60
Setelah pengenceran hingga setelah kesetimbangan 8,17±0,87 12,91±1,27 1,98±0,78 7,69±3,16
Setelah kesetimbangan hingga setelah pencairan 24,46±0,57 19,1±4,16 24,12±1,21 22,56±1,73
Semen segar untuk setelah pencairan 32,96±1,75 43,07±3,35 23,77±2,25 33,27±5,57
TEY = Tris-kuning telur; TS= Tris-kedelai

Tabel 4. Motilitas Sperma Sapi Pasundan Segar dan Setelah Dicairkan Tahap Pengolahan
FS Pengencer (Rata-rata±SE)
Parameter RR (%)
TEY (%) TS (%) AndroMed® (%)
82,41±2,97% -
Motilitas progresif
PADA 49,45±1,22ab 39,34±6,33b 58,64±0,72a 59,62±5,57
PADA 49,45±1,22ab 39,34±6,33b 58,64 ± 0,72a -
Motilitas total
PADA ab 40.65±1.35 32,18±5,91b 51,05 ±1,53a -
motilitas cepat
PADA 8.42±0.22a 9,02± 1,42a 5,96± 0,58a -
Motilitas lambat
PADA 0.02±0.01a 0,01±0,004a 0,03±0,01a -
Motilitas lingkaran
PADA 11.25±2.04a 11,02 ±1,02a 7,94±0,93a -
motilitas lokal
Tidak bergerak PADA 37.62±2.18ab a, 48,16±6,58b 28,36±0,78a -

ab, b Perbedaan superskrip pada baris yang sama menunjukkan perbedaan bermakna (P<0,05); TEY = Tris-kuning telur; TS= Tris-kedelai; RR = Tingkat pemulihan;
FS= Semen segar; AT= Setelah dicairkan

47
Machine Translated by Google
Abdullah Baharun dkk.
pH, dan motilitas sperma segar yang dikumpulkan dari pejantan
berbeda-beda. Hal tersebut dipengaruhi oleh banyak faktor seperti
kondisi individu, kualitas organ reproduksi, umur, kondisi
manajemen breeding, pakan, dan breed.
Penggunaan CASA dalam pemeriksaan motilitas sperma
dimaksudkan untuk mengatasi subjektivitas dalam penilaian.
Metode berbasis pengembangan teknologi citra digital untuk
mendapatkan hasil analisis yang cepat dan akurat, mampu
meningkatkan dan menstandarisasi evaluasi parameter motilitas
sperma yang relevan untuk evolusi fertilitas. Studi menggunakan
CASA menampilkan delapan parameter motilitas sperma, yaitu
motilitas total, motilitas progresif, motilitas cepat, motilitas lambat,
motilitas lingkaran, hiperaktif, motilitas lokal, dan immotil.
Hasil analisis menunjukkan bahwa tidak ada perbedaan
(P>0,05) yang ditemukan di antara empat ekor pejantan (R5, R4,
R3, dan R2) dalam gerakan motilitas progresif (Tabel 1).
Rata-rata nilai motilitas progresif spermatozoa sapi Pasundan
adalah 82,41±2,97%, sebagai prasyarat untuk mengetahui tingkat
fertilitas betina dan sebagai pertimbangan produksi semen beku.
Menurut Garner dan Hafez (2000), persentase motilitas semen
segar minimal 80% dengan motilitas massa ++ sampai +++.
Kualitas Semen Beku Banteng Pasundan
Pada penelitian ini, setelah thawing motilitas semen beku sapi
jantan Pasundan di TEY, TS, dan Andromed® berturut-turut
adalah 49,45±1,22%, 39,34±6,33%, dan 58,64±0,72% (Tabel 2).
Tidak ada perbedaan antara TEY dan AndroMed® . Hasil ini juga
tidak berbeda dengan yang diperoleh dari spermatozoa sapi
jantan Bali dengan ultrasentrifugasi-kuning telur mampu
meningkatkan motilitas progresif hingga 51,5±10,1%. Hasil ini
juga sebanding dengan yang diperoleh dari percobaan
menggunakan pengencer komersial AndroMed®,
46,4±11,0-47,4±2,11% (Mohamad et al., 2009; Beran et al.,
2012). Penggunaan pengencer AndroMed® dan TEY dalam
penelitian ini mampu melindungi membran spermatozoa dalam
proses pembekuan.
Diliyani dkk. (2014) melaporkan bahwa penggunaan
Andromed® dan kuning telur sebagai pengencer mampu
melindungi keutuhan membran sperma. Keutuhan membran
spermatozoa dipengaruhi oleh kandungan fosfolipid yang berperan
dalam menjaga keutuhan membran dan membentuk permukaan
antar sel yang dinamis yang pada gilirannya memberikan
mekanisme perlindungan terhadap tekanan dari lingkungan.
Terganggunya integritas membran akibat terlepasnya fosfolipid
akan mempengaruhi viabilitas sperma.
Penurunan Kualitas Semen Banteng Pasundan Selama
Pembekuan
Untuk menilai keberhasilan dan mengetahui destruksi sperma
pada setiap tahapan dilakukan evaluasi persentase motilitas
progresif pada benih segar, setelah pengenceran, setelah
ekuilibrasi, dan thawing (Tabel 3). Tanpa mempertimbangkan
jenis pengencer, penurunan persentase motilitas progresif sebesar
1,45±0,60% diamati dari semen segar hingga setelah pengenceran.
48
Pengurangan motilitas progresif dari setelah pengenceran ke
setelah ekuilibrasi adalah 7,69±3,16%, dan dari setelah ekuilibrasi
ke setelah pencairan adalah 22,56±1,73%.
Dengan demikian total penurunan persentase motilitas progresif
spermatozoa dari semen segar ke semen setelah dicairkan adalah
33,27±5,57%.
Persentase motilitas progresif yang menurun (33,27±5,57%)
menunjukkan bahwa terjadi penurunan drastis mulai dari tahap
pengenceran hingga setelah pencairan. Penurunan motilitas
semen pada hewan lain berkisar 10% sampai 40%, bahkan
mencapai 50% (Sorenson, 1979). Penurunan motilitas progresif
dalam proses pembekuan semen domba dan kambing masing-
masing adalah 27,42% (Herdis, 2005) dan 33,05% (Tambing et
al., 2004), lebih rendah dari yang diamati dalam penelitian ini. Hal
ini kemungkinan berhubungan dengan cold shock yang disebabkan
oleh perubahan suhu ekstrim yang dialami sperma selama
perawatan. Kejutan dingin terjadi karena penurunan suhu segera
dari suhu tubuh ke suhu yang sangat rendah (lebih rendah dari
0°C) mengakibatkan penurunan viabilitas sel (Rehman et al.,
2013). Menurut Medeiros et al. (2002) kerusakan sel disebabkan
oleh perubahan organisasi struktur membran dan perubahan
fungsi metabolisme sel.
Efek utama cold shock pada sel sperma adalah dapat
menurunkan motilitas dan viabilitas, perubahan permeabilitas dan
komponen lipid pada membran.
Jumlah motil mengalami reduksi disertai pelepasan enzim,
pergerakan ion melalui membran, dan perubahan kandungan lipid
seperti fosfolipid dan kolesterol yang berperan penting dalam
menjaga integritas membran plasma, serta berkurangnya
kemampuan sel sperma dalam mengontrol pergerakan Ca2 +
(Ogbuewu et al., 2010).
Tingkat pemulihan adalah kemampuan sperma untuk pulih
setelah dicairkan dibandingkan dengan sperma segar (Hafez, 2000).
, Terlepas dari jenis pengencernya, penelitian ini mengamati tingkat
pemulihan sperma adalah 59,62±5,57% (Tabel 4). Hal ini berarti
59,62±5,57% spermatozoa sapi Pasundan mampu pulih setelah
proses pembekuan.
Penggunaan TEY dan AndroMed® keduanya mampu
memberikan sumber nutrisi bagi sperma untuk bergerak secara
progresif untuk bertahan hidup selama proses penyimpanan.
Menurut Aboagla dan Terada (2004), penggunaan TEY dan
AndroMed® pada dasarnya adalah untuk melindungi sperma
selama perubahan suhu dari suhu kamar (28°C) ke suhu
kesetimbangan (5°C). Andromed® mengandung lesitin kedelai
yang memiliki fungsi serupa dengan lesitin kuning telur. Fungsi
utama lesitin (fosfatidilkolin) adalah sebagai pelapis membran
untuk mempertahankan konfigurasi normal lapisan ganda
fosfolipid, struktur organisasi utama membran sperma.
Sperma yang diencerkan dalam TS tidak menunjukkan perbedaan
pada sperma (P>0,05) dengan yang diencerkan dalam TEY, tetapi
memiliki ®
motilitas yang lebih rendah dibandingkan dengan yang . Ini
diencerkan pada temuan Andromed mendukung laporan dari Arifiantini
dan Yusuf (2010) yang menyatakan bahwa semen FH yang diawetkan
menggunakan pengencer Tris-kedelai modifikasi memiliki motilitas
sperma setelah dicairkan yang lebih rendah dibandingkan dengan
semen yang dibuat menggunakan Andromed® . Namun, tingkat
,
konsepsi in vivo yang pertama lebih tinggi dari yang lain. Meskipun berbeda dengan AndroM
Machine Translated by Google
Abdullah Baharun dkk.
TS dapat digunakan sebagai pengencer semen di masa
mendatang karena mengandung lesitin kedelai. Lesitin yang
diekstraksi dari kacang kedelai merupakan pilihan yang tepat
untuk pengencer lesitin semen di masa mendatang (Aires et al.,
2003) dan mampu menekan stres oksidatif (Ogbuewu et al.,
2010), namun diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mendapatkan
komposisi buffer dengan kualitas yang sama. ke AndroMed® .
Motilitas sperma semen beku yang dibuat menggunakan
AndroMed® tinggi karena , pengencernya tidak hanya mengandung
lesitin yang tinggi (6,76 g/100 mL) tetapi juga beberapa senyawa
penting bagi sperma seperti protein, karbohidrat (fruktosa,
glukosa, manosa, dan maltotriosa), mineral. (natrium, kalsium,
kalium, magnesium, klorida, fosfor, dan mangan), asam sitrat,
gliserol, lemak, dan gliserilfosforil kolin (GPC)
Perbedaan kualitas semen beku yang tidak signifikan yang dibuat
menggunakan pengencer mengandung lesitin kedelai
(AndroMed® ) dan yang dibuat menggunakan pengencer lesitin
hewan (kuning telur/Tris-kuning telur) berkaitan dengan sifat
kuning telur itu sendiri sebagai penyangga tekanan osmotik
sehingga sperma lebih toleran terhadap lingkungan hipotonik
atau hipertonik (Khalifa dan El Saidy, 2006).
Selain itu, kuning telur mengandung fosfolipid yang terdiri dari
77% lecithin (phosphatidylcholin), 18% phosphatidyl
ethanolamine, dan 3% sphingomyelin.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa mutu semen beku dalam
pengencer TEY dan AndroMed® telah memenuhi Standar
Nasional Indonesia (SNI) semen beku, SNI Nomor 4869.1:2008,
sehingga layak untuk keperluan inseminasi. Studi ini juga
membuktikan bahwa TEY dapat digunakan sebagai pengencer
alternatif untuk semen beku sapi jantan Pasundan ketika
Andromed® tidak tersedia.
KESIMPULAN
Dapat disimpulkan bahwa kemampuan pembekuan
spermatozoa sapi jantan Pasundan menggunakan pengencer
kuning telur AndroMed® dan Tris hampir sama.
REFERENSI
Aboagla, EME dan T.Terada. 2004. Pengaruh kuning telur selama tahap
pembekuan kriopreservasi terhadap viabilitas spermatozoa kambing.
Teriogenologi. 62:1160-1172.
Aires, VA, KD Hinsch, F. Müller-Schlösser, K. Bogner, S. Müller Schlösser,
and E. Hinsch. 2003. Perbandingan in vitro dan in vivo pemanjang berbasis
lesitin berbasis kuning telur dan kedelai untuk kriopreservasi semen sapi.
Teriogenologi. 60:269-279.
Arifiantini, R.I. 2012. Teknik Koleksi dan Evaluasi Semen pada Hewan. IPB
Press, Bogor.
Arifiantini, RI dan TL Yusuf. 2010. Pengembangan Pengencer Susu Kedelai
Tris untuk Semen Beku Banteng Friesian Holstein. Hayati J. Biosci.
17(2):91-9
Arifiantini, RI, WMM Nally, T. Susnawati, dan E. Rochmiati.
2014. Variasi Individu Kemampuan Pembekuan Sperma Grade Etawah.
Prosiding Konferensi Kambing Perah Asia-Australasia ke-2 . 25-27
April. Bogor. Indonesia:127-130.
Arifiantini, R.I., T. Wresdiyati, and E.F. Ratnani. 2006. Pengujian morfologi
spermatozoa sapi Bali (Bos sondaicus) menggunakan pewarnaan
“Williams”. J. Indon. Trop. Agric. 31(2):105-110.
Arifiantini, R.I., T.L. Yusuf, and D. Yanti. 2005. Kaji banding semen beku sapi
Friesian Holstein menggunakan pengencer dari ber
bagai balai inseminasi buatan di Indonesia. Anim. Prod. 7:168- 176.
Asr, ST, R. Beheshti, dan H. Kohram. 2011. Evaluasi Tris-citrate acid atau
Bioxcell extender terhadap parameter sperma kerbau pasca pencairan.
Sejarah. Biol. Res. 2(4):360-365.
Beran, J., L. Stádník, J. Bezdíÿek, J. Louda, J. ÿítek, and J.
Ducháÿek. 2012. Pengaruh pejantan dan ekstender terhadap motilitas
sperma dan porsi sperma hidup atau mati pada ejakulasi segar pejantan
dan pada dosis IB setelah dicairkan. Arsip. Tierzucht. 55(3):207-218.
Diliyani, F.K., T. Susilawati, and S. Rahayu. 2014. Keutuhan membran
spermatozoa disekuensing sentrifugasi gradient densitas percoll
berpengencer AndroMed® dan CEP-2 yang ditambah kuning telur. J. Vet.
15(1):23-30.
Garner, DL dan ESE Hafez. 2000. Spermatozoa dan Seminal Plasma. Dalam
Hafez B. dan Hafez, Reproduksi ESE pada Hewan Ternak. 7
th
ed. Lippincott Williams dan Wilkins, Philadelphia.
Gordon, I. 2003. Laboratorium Produksi Embrio Sapi. edisi ke-2 .
Penerbitan CABI, AS.
Hafez, ESE 2000. Pelestarian dan Kriopreservasi Gamet dan Embrio. Dalam
Reproduksi pada Hewan Ternak. Hafez B. dan ESE Hafez (Eds.). 7 ed.
th
Lippincott Williams dan Wilkins, Philadelphia.
Herdis. 2005. Optimalisasi Inseminasi Buatan melalui Aplikasi Teknologi
Laserpunktur pada Domba Garut (Ovis aries).
Disertasi. Program Pascasarjana, Institut Pertanian Bogor.
Bogor.
Khalifa, TAA dan BE El-Saidy. 2006. Pelet-pembekuan semen kambing
Damaskus dalam ekstender yang ditentukan secara kimiawi. Animasi.
Reproduksi Sains. 93:303-315.
Matahine, T., Burhanuddin, and A. Marawali. 2014. Efektivitas air buah lontar
dalam mempertahankan motilitas, viabilitas dan daya tahan hidup
spermatozoa sapi bali. J. Vet. 15(2):263-273.
Medeiros, CM, F. Forell, AT Oliveira, dan JL Rodrigues. 2002.
Status kriopreservasi sperma saat ini: Mengapa tidak lebih baik
Teriogenologi. 57:327-344.
Mohamad, K., M. Olsson, HTA van Tol, S. Mikko, BH Vlamings, G. Andersson,
H. Rodríguez-Martínez, B. Purwantara, RW
Paling, B. Colenbrander, dan JA Lenstra. 2009. Tentang Asal Usul Ternak.
dari doi PLoS SATU 4(5):e5490.
Indonesia:10.1371/journal.pone.0005490.
Nalley, W.M., R.I. Arifiantini, M. Nofriza, and E. Sukmawati. 2015.
Variasi Individu Terhadap Keberhasilan Produksi Semen Beku Domba
Garut. Prosiding Konferensi Internasional ke-5 tentang Peternakan
Berkelanjutan untuk Negara Berkembang (SAADC 2015)
Thailand:507-510.
Ogbuewu, IP, NO Aladi, IF Etuk, MN Opara, MC Uchegbu, IC Okoli, and MU
Iloeje. 2010. Relevansi radikal bebas oksigen dan antioksidan dalam
produksi dan fungsi sperma. J.
Hal-hal. Dokter hewan. Tahu 3(3):138-164.
Rehman, FU, MS Quresi, SU Rehman, I. Khan, HA Majid, and M. Aftab. 2013.
Teknik Pengolahan Semen Konvensional dan Tingkat Kesehatan
Pembibitan Berbagai Jenis Sapi Pejantan Digunakan di Kondisi Sub
Tropis. Sains. Membiarkan. 1(1):9-12.
Rizal, M., MR Toelihere, TL Yusuf, B. Purwantara, dan P.
Situmorang. 2003. Kriopreservasi semen domba garut dalam pengencer
Tris dengan konsentrasi laktosa yang berbeda. Media Ked. Hewan.
19:79-83.
Saenz, JR 2007. Kriopreservasi Sperma Epididimis Rusa Ekor Putih untuk
Inseminasi Buatan. Tesis. Universitas Negeri New Mexico. Meksiko.
Sorenson, Jr. AM 1979. Manual Laboratorium Reproduksi Hewan. edisi ke-4
American Press, Boston.
Steel, R.G.D. and J.H. Torrie. 1994. Prinsip dan Prosedur Statistika. Suatu
Pendekatan Biometrik. (Diterjemahkan Sumantri, B). Gramedia Pustaka
Utama, Jakarta.
Tambing, S.N., I-K. Sutama, and M. Sariubang. 2004. Efektivitas konsentrasi
kuning telur di dalam pengencer Tris dengan dan tanpa plasma semen
terhadap kualitas semen beku kambing Saanen. JITV. 13(4):315-322.
Yildiz, C., A. Kaya, M. Aksoy, and T. Tekeli. 2000. Pengaruh suplementasi gula
ekstender terhadap motilitas, viabilitas dan integritas akrosom spermatozoa
anjing selama pembekuan.
Teriogenologi. 54:579-585.
49