Cairan otak :
Teteskan 2-3
Fungsi : pelindung dari trauma, lubrikasi n.
sentralis, bantu transport nutrisi, pelepasan hasil
metabolisme.
Jumlah normal 120-150 ml, jernih, sedikit leukosit,
glukosa protein. tes paling lambat 1 jam setelah
sample diambil.
Indikasi diagnostic adalah untuk :
1. Mendiagnosis meningitis
2. Mengetahui adanya perdarahan subarahnoid
3. Mengetahui adanya tumor atau keganasan
4. Memasukkan bahan kontras
Indikasi terapi adalah :
1. Mengeluarkan darah dari ruang subarahnoid
2. Memasukkan obat atau anastesi spina
Kontraindikasi :
1. Bila ada infeksi epidural
2. Infeksi kulit sekitar tempat punksi
3. Kelainan anatomi tempat punksi misalnya
scoliosis
METODE Punksi lumbal :
dilakukan pada inveretebra L3 – L4 atau L4 – L5.
Jumlah cairan otak yang diambil sebanyak 10 – 20
ml, ditampung ke dalam 3 tabung kaca yang
transparan dan steril :
- Tabung I : untuk tes kimia
- Tabung II : untuk tes mikroskopi
- Tabung III : untuk tes mikrobiologi
Penambahan natrium sitrat 20% dapat dilakukan
bila cairan otak keruh atau bercampur darah dengan
perbandingan 0.01 ml natrium sitrat 20% dan 1 ml
cairan otak.
 Makroskopi
prinsip : bandingkan cairan otak dengan larutan
jernih di depan kertas putih. cek kekeruhan dan
bekuan otak.
 Mikroskopi
1. Hitung jumlah sel lekosit
prinsip : hitung jumlah sel lekosit cairan otak
menggunakan kamar hitung
alat : pipet pasteur, improve neubauer, kaca
penutup, mikroskop. Untuk cairan otak keruh,
tambah pipet mikro 200 ul dan 20 ul dan larutan
turk pekat.
Cara kerja :
cairan otak jernih : langsung tetesin 2 tetes ke
improve naubauer, cek dgn pembesaran 40x.
Cairan otak tdk jernih : ambil sample menggunakan
pengencer sampai angka 0.5 + larutan turk sampai
angka 11. Homogenkan 2-3 menit.
tetes ke tissue. Teteskan campuran ke improve
naubauer yg sudah diletakkan di mikroskop dengan
perbesaran 10x di kamar 1,3,7,9.
cara menghitung : 50 x jumlah leukosit yang
ditemukan
Normalnya : 0-5 sel/mm3 pd dewasa, 0-20 pd
anak.
Peningkatan sedang (100-200/0 bisa poliomielitis,
ensefalitis, neurosifilis. Ningkat banyak pd
meningitis supuratif.
2. Hitung jenis leukosit :
Prinsip : Menghitung persentase morfologi lekosit
dalam cairan otak
Cara kerja : sample dimasukkan ke tabung untuk
disentrifugasi 2000rpm 10mnt. Ambil bagian paling
bawahnya (endapan) lalu teteskan pada ujung objek
glass dan buat sediaan apus lalu tunggu sampai
kering. Setelah kering fiksasi dengan alcohol lalu
dicampur reagen wright diamkan 3-5mnt. Setelah
itu tambahkan buffer (tidak dicuci) lalu tunggu 5-
10mnt. Bilas dengan aquades di bagian pinggirnya
sampai tdk ada sisa pewarna. Tiriskan lalu tunggu
kering. Amati dengan mikroskop sampai ketemu
100 sel lalu bedakan jumlah PMN dan MN.
Rujukan : Normal 60 – 70 % MN atau PMN<25%
MN meningkat pd infeksi kronik dan meningitis tb.
PMN meningkat pada infeksi akut, abses serebral.
3. Tinta cina/india
Berfungsi unutk melihat adanya kriptokokus dalam
cairan otak.
Cara kerja :
Teteskan sampel ke objek glass, buat 2 di kanan
kiri. Lalu berikan 1 tetes tinta cina dan diratakan.
Tutup dengan cover glass. Cek di bawah mikroskop
dengan pengaturan slide basah.
Kimia :
4. Protein kualitatif (pandy & nonne)
Prinsip :
- Tes Pandy : Albumin dan globulin dipresipitasi
oleh larutan fenol jenuh
- Tes Nonne Apelt: Globulin dipresipitasi oleh
ammonium sulfat jenuh. Amati timbulnya keruhan
Cara kerja :
A. Pandy : 1ml fenol jenuh + 1 tetes cairan otak
B. Nonne : 1 ml ammonium sulfat jenuh + 1ml
cairan otak . amati presipitasi/cincin putih antara
sampel dan reagen.
Rujukan : normalnya tdk keruh (protein tinggi)
atau presipitasi (globulin tinggi)
5. Glukosa dan total protein
Cara kerja :
Siapkan tabung blanko (1) , tabung standar (2),
tabung serum (3), dan tabung sample (4).
Glukosa dan protein :
Tabung 1 : 1000mcl reagen + 10mcl aquades
Tabung 2 : 1000mcl reagen + 10mcl standar
Tabung 3 : 1000mcl reagen + 10mcl serum
Tabung 4 : 1000mcl reagen + 10mcl sample
Note : protein tambahinnya 20mcl
Homogenkan lalu inkubasi 10 menit (protein 5mnt
aja) suhu 37°C baru setelah itu ukur di
spektrofotometer
Perbedaan serum dan sample >25 = inflamasi

6. LDH :
Prinsip : Pyruvate + NADH + H+ LLaktat +
NAD+ NADH akan mengoksidasi secara langsung
dengan bantuan aktivasi LDH dan diukur dengan
fotometer
Cara kerja :
1. Tabung serum : 20ul serum + 1000ul reagen
1 homogenkan dan inkubasi 1 menit 30°C
2. Tabung sampel : 20u sample + 1000u reagen 1
3. homogenkan dan inkubasi 1 menit 30°C
4. Setelah inkubasi tambahin 250ul reagen 2 pada
setiap tabung, homogenkan , lalu cek di
spektrofotometer