MAKALAH IMUNOLOGI&SEROLOGI

“REAKSI ANTIGEN DAN ANTIBODY”

DISUSUN OLEH:
ERNISYA DWI MAHARANI
(2248201159)

DOSEN PENGAMPU:
WAHYU RAMADHAN, S.Si., M.Sc

PRODI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI DAN ILMU
KESEHATAN
UNIVERSITAS ABDURRAB
2023
 REAKSI ANTIGEN DAN ANTIBODI

1. Reaksi Antigen Antibody

Reaksi antibodi antigen dan reaksi antibodi digit adalah reaksi spesifik non-manusia
yang dapat dibalik antara antigen dan antibody, jika kita melihat antibodi antigen, antibodi
lebih kecil dan selalu larut. Sedangkan antigen dapat larut semua, lebih kecil atau tidak larut.
Jika antigen larut dan bergabung dengan antibodi maka disebut sebagai reaksi presipitasi.
Selanjutnya Jika ketika antigen larut bereaksi dengan antibodi larut reaksi ini disebut sebagai
reaksi aglutinasi. Reaksi antibodi antigen dan reaksi antibodi ini, dapat berupa reaksi in vivo
atau in vitro pada manusia. Reaksi terjadi di dalam organisme hidup dan ini adalah reaksi
yang mengarah pada eliminasi penghancuran dan penghilangan antigen di mana reaksi in
vivo dilakukan di laboratorium dan reaksi ini dapat kita dapat mendeteksi antibodi atau
antigen secara in vitro sekarang dengan mudah. Reaksi antigen-antibodi terbagi 2, yaitu :

1. Reaksi in vivo

Merupakan reaksi yang terjadi di dalam organisme hidup yang mengarah pada eliminasi,
penghancuran, dan penghilangan antigen. Reaksi in vivo terdiri dari :

a. Reaksi aglutinasi

Melalui proses ini sel-sel asing seperti bakteri atau sel darah merah yang berbeda
golongan menyatu membentuk gumpalan.

b. Reaksi presipitasi

Gambar 1. Reaksi presipitasi

Proses ini melibatkan antigen terlarut, misalnya toksin tetanus. Antigen asing yang
masuk akan diendapkan oleh antibodi dalam suatu larutan.
2
c. Fiksasi komplemen

Sel-sel bakteri yang masuk akan ditempeli oleh antibodi kemudia terbentuk lubang.
Lubang-lubang tersebut memudahkan enzim lisozim masuk untuk memecahkan sel
bakteri tersebut

d. Netralisasi

Antibodi berikatan dengan bakteri atau antigen virus. Antibodi dapat menetralkan
beberapa virus dengan berikatan dengan antigen permukaannya dan mencegah virus
masuk ke dalam sel.

e. Ab Dependent Cell Mediated Cytotoxicity (ADCC) Mekanisme pertahanan kekebalan

yang dimediasi sel di mana sel efektor dari sistem kekebalan secara aktif melisiskan
sel target, yang antigen permukaan membrannya memiliki telah diikat oleh antibodi
spesifik

f. Immobilazation

Tahap reaksi in vivo :

a. Tahap primer

Terjadi pembentukan kompleks antigen-antibodi oleh gaya intramolekul seperti

ikatan van ser waal, ikan ionik, dan ikatan hidrogen. Dalam reaksi ini
membutuhkan NaCl dan elektrolit lainnya sehingga terjadi pembentukan
kompleks antigen-antibodi.

b. Tahap sekunder

Terjadi setelah kompleks antigen-antibodi terbentuk. Terjadinya presipitasi

(pengendapan), aglutinasi (pengenalan) atau sel lisis.

c. Tahap tersier

Terjadi penghancuran antigen netralisasi dan bahkan mengirim kerusakan

jaringan.

2. Reaksi in vitro

a. Reaksi aglutinasi

Terjadi ketika antigen tak terlarut bergabung dengan antibodi terlarut

menghasilkan terjadinya penggumpalan atau aglutinasi. Aglutinasi lebih

3
 sensitif daripada presipitasi. Hal ini dikarenakan molekul dari antigen besar
dan tidak larut sehingga jumlah antibodi yang sangat sedikit dapat membuat
terjadinya reaksi aglutinasi.

b. Reaksi presipitasi

Terjadi ketika antigen terlarut bergabung dengan antibodi terlarut

menghasilkan kompleks antigen-antibodi tidak terlarut. Reaksi ini sensitif
terhadap deteksi antigen, tetapi kurang sensitif terhadap deteksi antibodi.

c. Fiksasi komplemen

d. Netralisasi

e. ELISA

f. Radioimmunoassay

g. Immunochromatography (ICT)

h. Florescent Antigen – Antibodi Technique

Contoh reaksi antigen antibodi in vitro, di pasien, oksigen yang melebihi area
maka nontoksigenik diffteria. Garis kesehatan ini adalah garis tegak lurus yang
terbentuk setelah pembentukan tubuh antigen, dan digit mucul dari garis ini,
antibodi akan datang dan kemudian pada garis tegak lurus mereka akan bertemu
jadi ini adalah contoh positif terhadap gerakan melawan arus listrik. Antigen
antibodi bergerak menuju satu sama lain dan zona ekivalen mereka akan
membentuk garis-garis ini sehingga dapat mendeteksi beberapa antigen antibodi
berdasarkan elektroforesis imuno.

Reaksi Ab dan Ag pada sel darah merah dimulai ketika Ab dan Ag berada pada suatu
medium. Ketika Ab dan Ag pada medium tersebut sesuai, maka Ag mendekat di fragment
antigen binding site (Fab) Ab dan Ab mulai tersensitisasi. Tahapan ini tidak dapat diamati.
Reaksi ini berlangsung cukup cepat dan dipengaruhi oleh beberapa faktor yang akan dibahas
selanjutnya. Tahap berikutnya adalah, perlekatan Ag dan Ab sehingga membentuk ikatan
yang stabil yang terlihat sebagai aglutinasi. Tahapan ini membutuhkan waktu cukup lama
untuk dapat diamati secara visual jika dibandingkan tahapan pertama. Untuk memperkuat
reaksi Ag dan Ab yaitu aglutinasi, maka dapat dilakukan sentifugasi. Jika Ag dan Ab tidak
sesuai, maka setelah perlakuan, tidak akan terjadi reaksi , seperti aglutinasi (Aldi et al.,
2023).
4
 Gambar 2. Tahapan aglutinasi, tahap pertama (kiri) dan tahap kedua (kanan)

Terdapat beberapa jenis reaksi Ag dan Ab yang digunakan pada pemeriksaan

imunohematologi. Reaksi yang dihasilkan tergantung jenis Ag dan Ab, pereaksi serta jenis
medium yang digunakan. Berikut adalah jenis reaksi yang digunakan pada pemeriksaan
imunohematologi.

g. Reaksi hemaglutinasi
Reaksi hemaglutinasi yaitu reaksi aglutinasi yang terjadi pada sel darah merah. Contoh reaksi
hemaglutinasi adalah reaksi pada sistem golongan darah ABO. Adanya Ab pada
serum/plasma (contoh : anti A) yang direaksikan dengan sel darah merah yang sesuai (yaitu
Ag A) akan membentuk aglutinasi/gumpalan pada sel darah merah, seperti terlihat pada
Gambar 3. Gumpalan tersebut dapat berupa gumpalan besar sampai dengan kecil.
Reaksi ini dapat dilakukan dan diamati di tabung reaksi, mikroplate, mikrowell.

Gambar 3. Reaksi aglutinasi pada golongan darah A, Ag A direaksikan dengan anti A

(kiri) aglutinasi. Ag A direaksikan dengan anti B (kanan) tidak terjadi aglutinasi

h. Hemolisis Reaksi Ag dan Ab dapat menghasilkan hemolisis.

Hemolisis adalah kondisi pecahnya membran eritrosit, sehingga melepaskan
molekul hemoglobin (Hb). Reaksi ini dapat terjadi karena adanya pengaktifan
komplemen. Komplemen adalah suatu jenis protein serum yang dapat teraktifkan jika
suatu jenis Ab yang sesuai melekat ke Ag atau mensensitisasi sel darah merah.
Kondisi tersebut dapat memunculkan reaksi berantai pengaktifan komplemen dengan

5
 titik akhirnya adalah hemolisis sel darah merah.

Gambar 4. Reaksi hemolisis

i. Netralisasi (Inhibisi aglutinasi)

Reaksi netralisasi biasanya diaplikasikan pada Ag terlarut di cairan tubuh seperti
saliva. Saliva yang mengandung Ag A terlarut direaksikan dengan reagensia anti A
akan mengalami reaksi netralisasi, yaitu anti A tidak dapat bereaksi dengan Ag A
pada sel darah merah yang ditambah sesudahnya, karena Fab pada anti A diinhibisi
oleh Ag A terlarut. Ilustrasi reaksi netralisasi dapat dilihat pada Gambar 5.

Gambar 5. Reaksi netralisasi

2. Reaksi Primer, Sekunder dan Tersier

 Reaksi Primer
Fase pertama ini dapat terjadi secara in vivo dan in vitro, pada fase ini antibodi
tersusun atas rantai polipeptida yang termodifikasi memiliki situs-situs aktif
(paratop/Fab) yang dapat mengenali bagian antigen (epitop). Epitop dan paratop yang
bertemu kemudian akan saling berikatan.Pembentukan reaksi ini mengikuti hukum
kesetimbangan kimia. Interaksi primer antara antigen dengan antibodi bukan ikatan
kovalen tetapi kekuatan van der waals, kekuatan elektrostatik dan kekuatan
hidrofobik. Diperlukan untuk menutup rapat antara epitop dan antibodi yang kadang-
kadang berbeda antara kunci dengan gembok. Karena energi rendah pada interaksi
antigen antibodi maka, komplek antigen antibodi dapat dipecah oleh tinggi atau
rendah dari pH, tinggi konsentrasi garam atau oleh ion khaotropic seperti sianat,
dimana interfere ikatan hidrogen pada molekul air. Afinitas adalah konstanta
6
hubungan intrinsik terhadap karakteristik ikatan antara antibodi dengan epitop.
Aviditas adalah semua energi ikatan antara antibodi dengan multivalen antigen.
Secara umum antibodi Ig M aviditas lebih besar daripada antibodi Ig G, walaupun
afinitasnya sama. Interaksi antigen- antibodi primer adalah permulaan reaksi dan
merupakan pengikatan antigen dengan antibodi tingkat molekular. Biasanya reaksi ini
tidak terlihat dengan mata belaka tetapi memerlukan suatu indikator, misalnya
dengan 106 melabel antigen atau antibodi dengan berbagai zat seperti radioisotop,
enzim atau zat warna fluoresin dan lain-lain. Sesuai dengan label yang dipakai, maka
teknik penetapan interaksi antigen- antibodi dengan label radioisotop disebut teknik
RIA, dan teknik yang menggunakan label enzim disebut ELISA, sedangkan teknik
yang menggunakan indikator fluoresin disebut teknik imunofluoresensi. Teknik-
teknik itu bermanfaat untuk penetapan antigen atau antibodi yang kadarnya rendah
(Aldi et al., 2023).

 Reaksi Sekunder

Interaksi antigen-antibodi sekunder dapat mengakibatkan presipitasi atau

aglutinasi. Reaksi antigen-antibodi dapat terjadi langsung, tetapi kadang-kadang
reaksi baru terjadi apabila ada komplemen. Apabila antigen yang ada dalam larutan
direaksikan dengan antibodi spesifik, akan terbentuk kompleks antigen-antibodi yang
besar sehingga kompleks mengendap dan terjadi presipitasi. Bila antigen itu terikat
pada suatu partikel, misalnya partikel lateks, kuman, eritrosit maupun partikel lain,
maka interaksi antigen-antibodi tersebut menyebabkan terjadinya gumpalan atau
aglutinasi. Interaksi antigen-antibodi sekunder merupakan dasar berbagai jenis teknik
uji in vitro, misalnya teknik imunodifusi, aglutinasi lateks, hemaglutinasi, uji fiksasi
komplemen, turbidimetri, nefelometri dan lain-lain. Reaksi aglutinasi adalah reaksi
antara antibodi dengan antigen multivalen (partikulat) sehingga menghasilkan ikatan
silang pada variasi partikel antigen oleh antibodi (Aldi et al., 2023).
a. Titer adalah pengenceran serum tertinggi yang masih menyebabkan aglutinasi. Pro
zone effect adalah serum dengan konsentrasi antibodi tinggi dimana tidak terjadi
aglutinasi (antibodi ekses = kelebihan antibodi).
b. Post zone effect adalah suatu keadaan dimana terjadi kelebihan antigen sehingga
tidak terjadi aglutinasi (antigen ekses).
c. Pro zone adalah suatu keadaan daerah dimana konsentrasi antigen sangat rendah,

7
 sedangkan konsentrasi antibody banyak yang akan membentuk formasi kompleks
akan tetapi endapan antigen antibodi tetap berada di supernatan dan presipitasi
mulai meningkat.
d. Zona equivalence adalah suatu daerah dimana terjadi keseimbangan antara
antigen- antibodi sehingga terjadi aglutinasi.

Gambar 6. Zona Equivalence

Macam reaksi aglutinasi

a. Aglutinasi direk Ag harus berupa partikel atau sel mis pada Widal menggunakan
kuman S.typhi dan S.paratyphi sebagai ag. Ab dalam serum dapat ditentukan
titernya dengan cara pengenceran. Penentuan golongan darah juga menggunakan
teknik ini.
b. Aglutinasi indirek (pasif) Pada teknik ini sering dipakai partikel dari lateks atau
eritrosit yang dipakai sebagai carrier. Eritrosit domba dilapisi ag kemudian
direaksikan dengan ab yang terdapat dalam serum dimana ab ini sebelumnya
diabsorben dulu untuk menghindari reaksi non-spesifik. Contoh :
- Pemeriksaan TPHA, ag berasal dari Treponema pallidum yang dipakai melapisi
eritrosit domba.
- Uji faktor rheumatoid menggunakan lateks.
c. Aglutinasi pasif terbalik (reversed passive hemagglutination assay = RPHA)
Teknik ini digunakan untuk mendeteksi ag yang larut dalam serum atau cairan
tubuh lain. Ab spesifik dilekatkan pada permukaan carrier baik eritrosit atau
partikel lain. Ag yang terdapat dalam serum di absorpsi dalam larutan absorben.
d. Uji hambatan aglutinasi Teknik ini digunakan untuk deteksi ag yang larut,
pengujian ini dinyatakan positif bila tidak terjadi aglutinasi.

Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

8
• Teknik ELISA mereaksikan ag dalam sampel dengan ab yang di label enzim.
• Kompleks ag-ab yang terbentuk kemudian dipisahkan dari ag dan ab yang bebas
(dicuci), lalu diinkubasi dengan kromogen yang semula tak berwarna, tapi kemudian
menjadi berwarna apabila dihidrolisis oleh enzim.
• Intensitas warna yang terbentuk dapat diukur.
• ELISA adalah asai yang biasanya menggunakan ab yang diimobilisasi pada fase
solid dan menggunakan ag yang berlabel enzim.
• Enzim yang sering digunakan adalah :
a. ALP
b. GOD
c. G-6PD
d. Peroksidase
• Ada dua jenis pemeriksaan ELISA :
a. Langsung (direk) Untuk penentuan antigen atau antibody.
b. Tidak langsung (indirek) Untuk penentuan antibody.
• Penentuan Ag-Ab dengan ELISA, dapat secara :
a. Kompetitif (persaingan)
b. Teknik Sandwich langsung
c. Teknik Sandwich tidak langsung
d. Teknik Inhibisi
e. Teknik Inhibisi tidak langsung

9
 Gambar 7. Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA)

Contoh Metode Reaksi Antigen-Antibodi

Ring Test (Tes cincin)
• Streptococcal lancefield grouping
• Ascoli’s thermoprecipitin test Terbentuk pengendapan di zona ekuivalen

Gambar 8. Ring Test (Tes cincin)

10
Slide Test

Gambar 9. Slide Test

VDRL tes di Syphillis

VDRL adalah Venereal Disease Research Laboratory. Tes tersebut bertujuan untuk
diagnosis sifilis dengan menggunakan antigen heterophile yang merupakan gabungan
antara antigen spirochete sifilis dengan antigen hati sapi. Nonreaktif → tidak
terbentuk gumpalan Reaktif lemah →terbentuk gumpalan sedikit. Reaktif kuat :
terbentuk gumpalan besar yang cukup jelas

Tube test Kahn

Tube Test (Syphillis)

Gambar 10. Tube Test (Syphillis)

Imunodifusi

Gambar 11. Imunodifusi

11
 Uji imunodifusi didasarkan pada kemampuan antigen dan antibodi
membentuk Imunodifusi digunakan untuk memisahkan antigen dengan menggunakan
presipitasi, sehingga memebentuk seperti lapisan cincin.endapan (presipitat).

Counter current immunoelectroforesis

Antigen dan antibodi ditaruh pada well dan elektris telah dipersiapkan. Pada
buffer yang cocok, maka antigen yang bermuatan negatif akan bergerak mengarah ke
anoda, sedangkan antibodi tanpa muatan akan ggj ke arah yang berlawanan. Diisi
dengan antibodi kemudian antibodi akan menuju ke antigen bergerak satu sama lain.
Pada zona ekuivalennya mereka akan membentuk Ag-Ab optimal

Rocket Immunoelectrophoresis
Ukuran roketnya menujukkan seberapa banyak antigen yang ada. Dalam
Rocket immunoelectrophoresis, agar-agar dituang yang dihomogenisasi dengan
antiserum. Kemudian sebuah sumur dibuat di mana antigen ditambahkan. Setelah
elektroforesis, antigen yang bermuatan negatif akan bermigrasi ke arah antibodi yang
bermuatan positif. Migrasi antigen ini pada interaksi dengan antibodi akan
membentuk sebuah kompleks muncul sebagai garis precipitin yang terlihat dalam
bentuk roket. Ketinggian pergerakan roket berbanding lurus dengan jumlah antigen
yang dimuat ke dalam sumur

 Reaksi Tersier
Interaksi tingkat tersier adalah munculnya tanda-tanda biologic dari interaksi antigen-
antibodi yang dapat berguna atau merusak bagi penderitanya. Pengaruh menguntungkan
antara lain: aglutinasi bakteri, lisis bakteri, immnunitas mikroba,dan lain-lain. Sedangkan
pengaruh merusak antara lain: edema, reaksi sitolitik berat, dan defisiensi yang menyebabkan
kerentanan terhadap infeksi.

Kebalikan dari reaksi fase sekunder, reaksi fase tersier hanya terjadi secara in vivo
dan itu pun hanya terjadi dalam kondisi abnormal dan bersifat patologis. Reaksi fase tersier
merupakan kelanjutan dari reaksi fase sekunder, jika secara in vivo terjadi pembentukan
kompleks antigen- antibodi maka kompleks ini akan mengundang sejumlah mediator
imunitas, seperti komplemen, enzim proteolitik, termasuk sitokin pro-inflamasi dan sejumlah
sel-sel fagosit.
Reaksi yang terjadi akan menyebabkan kerusakan jaringan yang diakibatkan inflamasi
12
oleh faktor humoral dan seluler imunitas. Kompleks imun dapat mengendap dimana saja bisa
di kulit, di ginjal, bahkan di dalam persendian. Manifestasi dari reaksi ini seperti reaksi
Arthus, serum sickness, dan penyakit terkait kompleks imun.
Pada reaksi Arthus terjadi ketika antigen disuntikan secara intravena bertemu dengan
antibodi yang sudah terdapat di dalam darah. Seketika antibodi dan antigen akan bereaksi
membentuk kompleks imun, jika kompleks ini terus membesar maka akan semakin
meningkatkan aktivasi sistem komplemen. Sebagaimana diketahui komplemen bekerja untuk
menghancurkan antigen namun jika reaksi ini tidak terkendali komponen komplemen C3a
dan C5a menyebabkan peningkatan permeabilitas pembuluh darah yang dapat memicu
kebocoran yang berlanjut pad udema (pembengkakan jaringan akibat cairan). Sistem
komplemen juga bersifat kemotaktik terhadap sel-sel fagosit termasuk trombosit.
Reaksi ini akan memicu terjadinya thrombosis atau sumbatan, yang pada akhirnya
akan berujung pada pendarahan dan nekrosis jaringan setempat. Dari mekanisme ini menjadi
alasan kenapa vaksinasi aktif tidak diberikan secara intravena, karena dapat memicu reaksi
Arthus jika antobodi yang bersangkutan telah ada sebelumnya selain karena bukan rute
imunogenik.
Beberapa penyakit juga terkaitan dengan reaksi fase tersier ini, seperti kasus
Rheumatik Jnatung yang ditimbulkan Streptococcus A, komponen bakteri atau bakteri itu
sendiri dapat masuk ke peredaran darah (bakteriemia) secara khusus komponen ini memiliki
afinitas yang baik terhadap sel-sel jantung. Penempenlan komponen asing ini menyebabkan
sel dikenali sebagai sesuatu yang asing bagi sistem imun dan menyebabkan daerah ini
mengalami reaksi antigen-antibodi, terbentuk laj kompleks imun yang selanjutnya memicu
reaksi inflamasi yang merusak jaringan. Contoh lain ialah pada sindrom Goodpasture (yang
ditandai pendarahan di jaringan paru-paru), dan Glomeronefritis (adanya pembentukan
kompleks antigen-antibodi di membran basalis epitel ginjal).
Dalam praktik laboratorium reaksi fase tersier ini dikembangkan menjadi beberapa tes
yang terkait dengan uji hipersensitivitas, seperti tes Mantoux, dan tes reaksi alergi obat
dengan cara menyuntikan obat yang dianggap sebagai antigen secara subkutan.
Kulit diketahui juga sebagai salah satu organ yang terkain sistem imunitas karena
pada kulit terdapat sistem SALT (Skin Association Lympoid Tissue). Dalam kulit terdapat
sel-sel imunokompeten (APC) yang dikenal dengan sel Langerhans, sejumlah seri sel
limfosit, serta ada sel-sel efektor seperti sel mastosit atau sel mast. Sel-sel ini lah terutama sel
mast yang digunakan untuk pengujian reaksi alergi obat yang terkait hipersensitivitas tipe I
atau umum dikenal dengan alergi dengan mediator utama pelepasan histamin.

13
 KESIMPULAN

Reaksi antibodi antigen dan reaksi antibodi digit adalah reaksi spesifik non-manusia yang
dapat dibalik antara antigen dan antibody, jika kita melihat antibodi antigen, antibodi lebih kecil
dan selalu larut. Sedangkan antigen dapat larut semua, lebih kecil atau tidak larut. Jika antigen
larut dan bergabung dengan antibodi maka disebut sebagai reaksi presipitasi. Selanjutnya Jika
ketika antigen larut bereaksi dengan antibodi larut reaksi ini disebut sebagai reaksi aglutinasi.
Reaksi antibodi antigen dan reaksi antibodi ini, dapat berupa reaksi in vivo atau in vitro pada
manusia. Reaksi terjadi di dalam organisme hidup dan ini adalah reaksi yang mengarah pada
eliminasi penghancuran dan penghilangan antigen di mana reaksi in vivo dilakukan di
laboratorium dan reaksi ini dapat kita dapat mendeteksi antibodi atau antigen secara in vitro
sekarang dengan mudah. Reaksi antigen-antibodi terbagi 2, yaitu in vivo dan in vitro, kemudian
terbagi lagi menjadi reaksi primer, sekunder dan tersier.

DAFTAR PUSTAKA

Aldi, Y., Badriyya, F. S. W. D. D. E., & Srangenge, Y. (2023). SEROLOGI IMUNOLOGI.

In
Andalas University Press (1st ed.).
Aris Kurniawan. 2023. Pengertian Antibodi. Diakses melalui link website berikut
https://www.gurupendidikan.co.id/pengertian-antibodi/ pada tanggal 25 November 2023.

Darwin, E., Elvira, D., & Elfi, E. F. (2021). Imunologi dan Infeksi. In andalas University
Press (1st ed., Vol. 5, Issue 3).

14